五日生化需氧量的测定(仪器法)
五日生化需氧量的测定(仪器法)
操作步骤
3. 用量筒量取水样或标准溶液于样品瓶中，并在每
个样品瓶放入一粒搅拌子（若是废水样时还应加 入一粒营养粉包）。用刮勺往密封杯内添加2粒 氢氧化锂，然后将密封杯插入样品瓶口。 将样 品瓶放在BODTrak™II仪上，连接好样品瓶与仪器 的压力传感器并拧紧瓶盖。
操作步骤
4. 将仪器放入恒温培养箱中(20±1℃)，设臵正确
2. 曲线②表示样品出现了硝化作用，由于样品中硝化
细菌大量繁殖，耗氧量迅速升高。可通过加入硝化
抑制剂（丙烯基硫脲）控制硝化问题。这种情况多
数发生在生活污水经生化处理的出水，在化工直排
废水中比较少见。
影响因素
3. 曲线③表示样品培养初期时滞过长，开始测试时样
品中的细菌数量不够或是细菌适应性较差,可以加入 更多的菌种或选择不同的菌种源来避免这种情况的 出现。
谢谢！
水环境监测的重要方法。
生化需氧量的定义
生化需氧量（biochemical oxygen
demand ）简称BOD。它说明水中有机物由于微
生物的生化作用进行氧化分解，使之无机化或
气体化时所消耗水中溶解氧的总数量，其单位
以mg/L表示。是表示水中有机物等需氧污染物
质含量的一项综合指标。
反应原理
根据参加反应的物质和最终生成的物质，可
原理
在密闭的培养瓶中，水样中的微生物分解瓶中有 机物的同时，消耗水样中的溶解氧。在测试时间段内， 利用搅拌子不断混合培养瓶内的水样，将培养瓶上方 空气中的氧气带到样品中，模拟自然条件，对微生物 消耗的氧气进行补给。水样中溶解氧被消耗，而且由
呼吸作用而产生与耗氧量相当的CO2被LiOH颗粒吸收
后，使密闭系统的压力降低，用电传感器感测压力， 从而求出水样的BOD值。
HJ505-2009 水质 五日生化需氧量(BOD5)的测定 稀释与接种法2023简版
HJ505-2009 水质五日生化需氧量(BOD5)的测定稀释与接种法HJ505-2009 水质五日生化需氧量(BOD5)的测定稀释与接种法引言水质是评价水体健康和污染程度的重要指标之一。
五日生化需氧量（BOD5）是评价水体中有机物污染程度的常用指标之一。
本文将介绍HJ505-2009标准中关于BOD5测定的稀释与接种法。
方法概述BOD5测定的稀释与接种法是一种通过稀释样品来提高测定的灵敏度和减小误差的方法。
该方法首先对待测样品进行适当的稀释，然后接种具有较高BOD5值的种子菌群，使其在一定的时间内进行生物分解。
最后通过测定生物分解过程中产生的需氧量来估计原始样品中有机物的含量。
1. 样品的稀释首先，取待测水样，根据样品的特性和测定要求，选择合适的稀释倍数。
常见的稀释倍数有1：10、1：100等。
将待测样品和稀释液按照一定比例混合，并充分均匀搅拌。
2. 种子菌群的接种从具有较高BOD5值的稀释液中提取种子菌群。
将种子菌群均匀地接种到已稀释的样品中，使得接种液和样品充分均匀混合。
3. 反应时间接种完成后，将混合液倒入已经校准过的BOD5测定瓶中，并封闭好。
将封闭的瓶置于恒温槽中，在恒温条件下进行反应。
根据不同的要求，常见的反应时间为5天。
4. 需氧量的测定反应结束后，使用溶解氧计或BOD5测定仪器对样品中的溶解氧进行测定。
根据溶解氧的消耗量，即可计算出BOD5的含量。
结论本文介绍了HJ505-2009标准中关于BOD5测定的稀释与接种法。
该方法通过稀释待测样品和接种种子菌群，从而提高了测量的灵敏度和减小了误差。
通过测定反应过程中的需氧量，我们可以估计水样中有机物的含量。
这一方法在水质监测和污染物溯源中具有重要的应用价值。
参考文献- HJ505-2009 《水质五日生化需氧量（BOD5）的测定》。
HJ505-2022 水质 五日生化需氧量(BOD5)的测定 稀释与接种法
HJ505-2022 水质五日生化需氧量(BOD5)的测定稀释与接种法文档模板：HJ505-2022 水质五日生化需氧量(BOD5)的测定稀释与接种法1. 引言旨在描述水质五日生化需氧量(BOD5)的测定方法，采用稀释与接种法。
该方法合用于对水体中的有机污染物进行定量分析，用于水质监测、环境评估以及污染排放指标的测定。
2. 合用范围本方法合用于各类水体样品，包括但不限于河流、湖泊、水库、地下水、海水等。
3. 原理首先，将待测样品进行适当稀释，以保证对待测有机物的浓度进行合理测定。
然后，通过接种适量的活动污泥，将样品中的有机物利用微生物进行降解，产生的需氧量则可用于测定。
4. 试剂与仪器设备4.1 试剂所需的试剂及其规格。
4.2 仪器设备所需的仪器设备及其规格。
5. 样品处理5.1 样品的采集描述样品采集的注意事项，包括采样点的选择、采样容器的准备等。
5.2 样品的保存与保存时间描述样品的保存条件和保存时间要求。
5.3 样品的稀释描述样品稀释的方法和比例。
6. 实验步骤6.1 样品预处理描述样品预处理的步骤，包括过滤、背景测定等。
6.2 接种活性污泥描述接种活性污泥的步骤和接种量的确定。
6.3 孵育条件及时间描述孵育条件和孵育时间的确定。
6.4 样品的BOD5测定描述样品的BOD5测定步骤，包括样品的取样、添加试剂、反应条件控制等。
7. 结果计算与分析7.1 数据处理描述BOD5测定结果的计算方法和数据处理的步骤。
7.2 结果表达描述结果的表达方式，如单位、精度等。
8. 质量控制描述质量控制的要求，包括质控样品的使用和分析结果评价等。
9. 安全注意事项描述实验过程中的安全注意事项，包括使用试剂的注意事项、操作仪器的注意事项等。
10. 附件所涉及的附件如下：1. 附件1: 实验记录表格2. 附件2: 数据处理表格11. 相关法律名词及注释如下所涉及的法律名词及注释：1. 法律名词1：注释12. 法律名词2：注释212. 实际执行中可能遇到的艰难及解决办法如下在实际执行过程中可能遇到的艰难及解决办法：1. 艰难1：解决办法12. 艰难2：解决办法2注：仅供参考，具体实施过程中应根据实际情况进行调整和修改。
水质-五日生化需氧量(BOD5)的测定
中华人民共和国国家环境保护标准HJ 505—2009代替GB/T 7488-1987水质五日生化需氧量（BOD5）的测定稀释与接种法警告：丙烯基硫脲属于有毒化合物，操作时应按规定要求佩带防护器具，避免接触皮肤和衣服；标准溶液的配制应在通风柜内进行操作；检测后的残渣残液应做妥善的安全处理。
1 适用范围本标准规定了测定水中五日生化需氧量（BOD5）的稀释与接种的方法。
本标准适用于地表水、工业废水和生活污水中五日生化需氧量（BOD5）的测定。
方法的检出限为0.5mg/L，方法的测定下限为2mg/L，非稀释法和非稀释接种法的测定上限为6mg/L，稀释与稀释接种法的测定上限为6000mg/L。
2 规范性引用文件本标准内容引用了下列文件中的条款。
凡是不注日期的引用文件，其有效版本适用于本标准。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法GB/T 7489 水质溶解氧的测定碘量法GB/T 11913 水质溶解氧的测定电化学探头法HJ/T 91 地表水和污水监测技术规范3 方法原理生化需氧量是指在规定的条件下，微生物分解水中的某些可氧化的物质，特别是分解有机物的生物化学过程消耗的溶解氧。
通常情况下是指水样充满完全密闭的溶解氧瓶中，在（20±1）℃的暗处培养5d±4h 或(2+5)d±4h(先在0～4℃的暗处培养2d，接着在(20±1)℃的暗处培养5d，即培养(2+5)d)，分别测定培养前后水样中溶解氧的质量浓度，由培养前后溶解氧的质量浓度之差，计算每升样品消耗的溶解氧量，以BOD5 形式表示。
若样品中的有机物含量较多，BOD5 的质量浓度大于6mg/L，样品需适当稀释后测定；对不含或含微生物少的工业废水，如酸性废水、碱性废水、高温废水、冷冻保存的废水或经过氯化处理等的废水，在测定BOD5 时应进行接种，以引进能分解废水中有机物的微生物。
当废水中存在难以被一般生活污水中的微生物以正常的速度降解的有机物或含有剧毒物质时，应将驯化后的微1生物引入水样中进行接种。
分析化验 分析规程 五日生化需氧量(BOD5)的测定 压差法
五日生化需氧量(BOD5)的测定压差法1 适用范围本方法适用于天然水、地表水、生活污水及工业污水中BOD5的测定，其测定范围是0～1000mg/L。
2 分析原理将仪器放入培养箱中，并按预先选择的量程范围，量好一定体积的水样倒入培养瓶中，并将培养瓶放在培养箱内仪器上连续搅拌。
培养箱内温度控制在20±1℃，水样恒温后进行五日培养。
培养瓶中必须保证足够的溶解氧。
样品中的有机物经过生物氧化作用，转变为氮、碳和硫的氧化物，在这一过程中，从水样中跑出来的为唯一气体二氧化碳被氢氧化钠(或氢氧化钾)吸收。
因此，瓶中空气压力减少量，相当于微生物所消耗的溶解氧量，这样，样品BOD5值与瓶中空气压力减少的程度成正比，通过测量空气压力的变化可以得到BOD5值。
增加或减少所取样品的量可以增加或降低压力减少值。
这样操作者无须繁杂的稀释步骤就能准确测量很宽范围的BOD5值。
3 试剂和仪器试剂40g/L的NaOH溶液。
称取40g氢氧化钠(AR)，溶于水后，稀释至1000mL。
(有效期六个月)3. C(1/2H2SO4) = 1mol/L。
量取30 mL 浓硫酸，将它用玻棒慢慢加入到耐热玻璃烧杯盛装的水中，注意：边加入边充分搅拌均匀。
待冷却后，稀释至1000mL。
(有效期六个月) 四种无机盐的制备取四只1升清洗干净后的容量瓶，按以下方法配制：.1 缓冲液用三级水溶解下列试剂并稀释至1升。
(有效期三个月).1.1 磷酸氢二钾(K2HPO4)。
.1.2 磷酸二氢钾(KH2PO4)。
.1.3 磷酸氢二钠(Na2HPO4•7H2O湿度在61.07%~80.51%稳定)。
.1.4 氯化铵(NH4Cl)。
.2 硫酸镁溶液在三级水中溶解硫酸镁(MgSO4•7H2O)并稀释至1升。
(有效期六个月).3 氯化钙溶液称取氯化钙(CaCl2)溶解在三级水中并稀释至1升。
(有效期六个月).4 三氯化铁溶液称取三氯化铁(FeCl3•6H2O)溶解在三级水中并稀释至1升。
水质-五日生化需氧量(BOD5)的测定
中华人民共和国国家环境保护标准HJ 505—2009代替GB/T 7488-1987水质五日生化需氧量（BOD5）的测定稀释与接种法警告：丙烯基硫脲属于有毒化合物，操作时应按规定要求佩带防护器具，避免接触皮肤和衣服；标准溶液的配制应在通风柜内进行操作；检测后的残渣残液应做妥善的安全处理。
1 适用范围本标准规定了测定水中五日生化需氧量（BOD5）的稀释与接种的方法。
本标准适用于地表水、工业废水和生活污水中五日生化需氧量（BOD5）的测定。
方法的检出限为0.5mg/L，方法的测定下限为2mg/L，非稀释法和非稀释接种法的测定上限为6mg/L，稀释与稀释接种法的测定上限为6000mg/L。
2 规范性引用文件本标准内容引用了下列文件中的条款。
凡是不注日期的引用文件，其有效版本适用于本标准。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法GB/T 7489 水质溶解氧的测定碘量法GB/T 11913 水质溶解氧的测定电化学探头法HJ/T 91 地表水和污水监测技术规范3 方法原理生化需氧量是指在规定的条件下，微生物分解水中的某些可氧化的物质，特别是分解有机物的生物化学过程消耗的溶解氧。
通常情况下是指水样充满完全密闭的溶解氧瓶中，在（20±1）℃的暗处培养5d±4h 或(2+5)d±4h(先在0～4℃的暗处培养2d，接着在(20±1)℃的暗处培养5d，即培养(2+5)d)，分别测定培养前后水样中溶解氧的质量浓度，由培养前后溶解氧的质量浓度之差，计算每升样品消耗的溶解氧量，以BOD5 形式表示。
若样品中的有机物含量较多，BOD5 的质量浓度大于6mg/L，样品需适当稀释后测定；对不含或含微生物少的工业废水，如酸性废水、碱性废水、高温废水、冷冻保存的废水或经过氯化处理等的废水，在测定BOD5 时应进行接种，以引进能分解废水中有机物的微生物。
当废水中存在难以被一般生活污水中的微生物以正常的速度降解的有机物或含有剧毒物质时，应将驯化后的微1生物引入水样中进行接种。
水质五日生化需氧量(bod5)的测定
中华人民共和国国家环境保护标准HJ 505—2009代替GB/T 7488-1987水质五日生化需氧量（BOD5）的测定稀释与接种法警告：丙烯基硫脲属于有毒化合物，操作时应按规定要求佩带防护器具，避免接触皮肤和衣服；标准溶液的配制应在通风柜内进行操作；检测后的残渣残液应做妥善的安全处理。
1 适用范围本标准规定了测定水中五日生化需氧量（BOD）的稀释与接种的方法。
本标准适用于地表水、工业废水和生活污水中五日生化需氧量（BOD）的测定。
方法的检出限为L，方法的测定下限为2mg/L，非稀释法和非稀释接种法的测定上限为6mg/L，稀释与稀释接种法的测定上限为6000mg/L。
2 规范性引用文件本标准内容引用了下列文件中的条款。
凡是不注日期的引用文件，其有效版本适用于本标准。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法GB/T 7489 水质溶解氧的测定碘量法GB/T 11913 水质溶解氧的测定电化学探头法HJ/T 91 地表水和污水监测技术规范3 方法原理生化需氧量是指在规定的条件下，微生物分解水中的某些可氧化的物质，特别是分解有机物的生物化学过程消耗的溶解氧。
通常情况下是指水样充满完全密闭的溶解氧瓶中，在（20±1）℃的暗处培养5d±4h 或(2+5)d±4h(先在0～4℃的暗处培养2d，接着在(20±1)℃的暗处培养5d，即培养(2+5)d)，分别测定培养前后水样中溶解氧的质量浓度，由培养前后溶解氧的质量浓度之差，计算每升样品消耗的溶解氧量，以BOD形式表示。
若样品中的有机物含量较多，BOD的质量浓度大于6mg/L，样品需适当稀释后测定；对不含或含微生物少的工业废水，如酸性废水、碱性废水、高温废水、冷冻保存的废水或经过氯化处理等的废水，在测定BOD时应进行接种，以引进能分解废水中有机物的微生物。
当废水中存在难以被一般生活污水中的微生物以正常的速度降解的有机物或含有剧毒物质时，应将驯化后的微1生物引入水样中进行接种。
五日生化需氧量(BOD5)的测定
配制方法及浓度
称取480gMnSO4·4H2O溶于水中,过滤 后稀释至1L。该溶液在酸性条件下， 加入碘化钾后遇到淀粉，不得变色。
盐酸 将40mL(ρ=1.18g/mL)盐酸溶于水，稀 溶液 释至1000 mL，浓度为0.5mol/L。
碘化钾 称取10g固体碘化钾，用水溶解后稀释 溶液 至100mL，配制成10%碘化钾溶液。
稀释倍数的确定
①地面水：由测得的高锰酸盐指数与一定的 系数的乘积，即求得稀释倍数。
高锰酸盐指数
<5 5-10 10-20 >20
系数
一 0.2, 0.3 0.4, 0.6 0.5, 0.7, 1.0
②工业废水： 由CODCr值分别乘以系数0.075, 0.15, 0.25即获 得三个稀释倍数。
②直接稀释法：（本实验采用 ）
将移液管插 入液面下加 1.5~2.0ml 浓硫酸
待棕色絮状 沉淀降到瓶 的一半时， 再颠倒几次
盖好瓶塞，勿 使瓶内有气泡， 颠倒混合15次， 静置
稀释倍数的确定 水样稀释方法
水样预处理
1.水样的pH值若超出6.5-7.5范围时，可用盐酸 或氢氧化钠溶液调节pH近于7，但用量不要超 过水样体积的0.5%。若水样酸度或碱度很高， 可改用高浓度的碱或酸液进行中和。
2.水样中含有铜，铅，锌，镉，铬，砷，氰等 有毒物质时，可使用经驯化的微生物接种液的 稀释水进行稀释，或提高稀释倍数以减少毒物 的浓度。
试剂
名称 碱性碘化 钾溶液
0.5%淀粉 溶液
配制方法及浓度
称取500g氢氧化钠溶解于300400mL水中，另称取150g碘化钾溶 于200mL水中，待氢氧化钠溶液冷 却后，将两种溶液合并后混合，用 水稀释至1L。若有沉淀则放置过夜 取上清液，贮于塑料瓶中，存放时 避光。
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氧过饱和，在测试阶段的初期出现源自负值，可将样品加热到20℃，并均衡至规定的饱和度。
影响因素
5. 曲线⑤表示在测试的过程中出现了样品瓶的泄漏，
可检查密封套和样品瓶盖是否被污染或损坏。
6. 有毒物质和重金属离子对BOD检测的影响也较大。由
于我厂纺丝、醋酸乙烯等装臵大量使用含锌物质，
法，称为五日生化需氧量，以BOD5表示。
BOD5的测定方法
标准稀释法 压差法 生物传感器法 活性污泥曝气降解法
除此之外，还有高温法、检压式库仑计法、
坪台值法、相关估算法等，但已不常用。
下面针对美国哈希公司生产
的BODTrak™ II仪（压差法）在废
水BOD5监测中的应用进行详细讲 解。
水环境监测的重要方法。
生化需氧量的定义
生化需氧量（biochemical oxygen
demand ）简称BOD。它说明水中有机物由于微
生物的生化作用进行氧化分解，使之无机化或
气体化时所消耗水中溶解氧的总数量，其单位
以mg/L表示。是表示水中有机物等需氧污染物
质含量的一项综合指标。
反应原理
根据参加反应的物质和最终生成的物质，可
原理
在密闭的培养瓶中，水样中的微生物分解瓶中有 机物的同时，消耗水样中的溶解氧。在测试时间段内， 利用搅拌子不断混合培养瓶内的水样，将培养瓶上方 空气中的氧气带到样品中，模拟自然条件，对微生物 消耗的氧气进行补给。水样中溶解氧被消耗，而且由
呼吸作用而产生与耗氧量相当的CO2被LiOH颗粒吸收
后，使密闭系统的压力降低，用电传感器感测压力， 从而求出水样的BOD值。
2. 曲线②表示样品出现了硝化作用，由于样品中硝化
细菌大量繁殖，耗氧量迅速升高。可通过加入硝化
抑制剂（丙烯基硫脲）控制硝化问题。这种情况多
数发生在生活污水经生化处理的出水，在化工直排
废水中比较少见。
影响因素
3. 曲线③表示样品培养初期时滞过长，开始测试时样
品中的细菌数量不够或是细菌适应性较差,可以加入 更多的菌种或选择不同的菌种源来避免这种情况的 出现。
锌离子会使微生物发生毒副作用，所以在BOD检测中，
有毒物质会导致测定结果偏低。通常的做法是稀释
样品降低浓度来减少这些物质的影响。
结束语
BODTrak™ II仪测试BOD5操作简便，测定直
接、快速，在测试过程中可以每天观察BOD
值的变化。
在实验的过程中，应严格控制实验条件和
操作规程进行操作，使测定误差最小化。
的测定条件，开始测定。如果样品需要接种的， 同时需测定接种液的BOD5值。
5. 仪器运行5天后，自动停止并记录样品的BOD5 值。
影响因素
正常的BOD培养曲线
影响因素
各种非正常的BOD培养曲线
影响因素
1. 曲线①表示样品出现了高需氧的情况，原因是样品
的BOD值超过了当前选择的量程范围。采用更高的 BOD量程或稀释样品，即可得到正确的BOD值。
谢谢！
为什么是BOD5，而不是7、10、 20？
微生物分解有机物的速度、程度受温度、时 间等因素影响，如在20℃时，污水中的有机物需 要20d左右才能基本完成第一阶段的生化氧化，但
在5d第一阶段的转化就已经进行了70%左右。为缩
短测定时间，同时使BOD值有可比性，因而采用在
20℃条件下，培养5d测定生化需氧量作为标准方
BOD5的测定及影响因素
--测压法
主讲人：谭宁
中国石化集团四川维尼纶厂分检车间监测组
前 言
在水环境的各类污染物中，耗氧污染物仍是当前影响
水体水质的重要因素，其主要危害是消耗水中溶解氧，导
致水质恶化。在我国，各主要河流、湖泊中有机污染物 （主要的耗氧污染物）超标的情况非常严重，由于水中有 机物的成分十分复杂，在现有技术下，很难定量分析各种 有机物的含量。因此，在未来相当长的时间，采用生化需 氧量(BOD)、化学需氧量(COD)、总有机碳(TOC)、总需氧 量(TOD)等指标综合反映有机污染物的污染程度，仍将是
主要仪器
BODTrak™ II仪
恒温培养箱(20℃±1℃) 无油充氧泵
BODTrak™ II仪
主要化学试剂
营养盐溶液
氢氧化锂或氢氧化钠 稀释水
BOD5标准溶液
操作步骤
1. 样品的预处理。调节水样pH至7.5左右，加热或
冷却样品到20±1℃，并充分搅拌。如样品含有 大量沉淀或漂浮固体物，则更应搅拌均匀。
操作步骤
3. 用量筒量取水样或标准溶液于样品瓶中，并在每
个样品瓶放入一粒搅拌子（若是废水样时还应加 入一粒营养粉包）。用刮勺往密封杯内添加2粒 氢氧化锂，然后将密封杯插入样品瓶口。 将样 品瓶放在BODTrak™II仪上，连接好样品瓶与仪器 的压力传感器并拧紧瓶盖。
操作步骤
4. 将仪器放入恒温培养箱中(20±1℃)，设臵正确
2. 确定取样体积。测试之前要预估一下样品的BOD5
值，根据经验，化工废水的BOD5值约为（5.0～ 6.0）乘以COD值，然后根据估算值，从下表中查 出所需样品的体积。
操作步骤
测定范围与水样体积
BOD浓度范围（mg/L）
0-35
样品体积（ml）
420
0-70 0-350 0-700
355 160 95
用下列的反应式来概括生物化学反应过程：
微生物
有机污染物
O2
CO2+H2O+NH3
生化反应的两个阶段
水中有机物的生物氧化过程，分为两个阶段：第一阶
段为有机物中的碳和氢氧化生成二氧化碳和水，此阶段称
为碳化阶段；第二阶段为含氮物质及部分氨氧化为亚硝酸 盐及硝酸盐，称为硝化阶段，一般测定水样BOD时，硝化 作用不是很显著。由于硝化阶段只有存在硝化细菌时才会 发生，所以生化需氧量一般是指第一阶段有机物经微生物 氧化分解所需的氧量。