实验室常用溶液的配制

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实验室溶液配制

实验室溶液配制

实验室所需溶液配制1.费休氏试液,购买;2.氢氧化钠溶液,C=0.01mol/l;氢氧化钠分子量40.0,准确称取氢氧化钠固体0.4g溶于200ml蒸馏水中,并在1L容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;3.中性红溶液,C=1%;准确称取中性红固体1g溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;4.溴百里香酚蓝溶液,C=1%;准确称取溴百里香酚蓝固体1g溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;5.碘化钾溶液,C=10%;准确称取KI固体50g溶于50ml蒸馏水中,并在500ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;6.硫代硫酸钠溶液,C=0.1mol/l;硫代硫酸钠分子量158.11,准确称取硫代硫酸钠固体15.811g溶于200ml蒸馏水中,并在1000ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;7.硫酸溶液,C=2mol/l,硫酸分子量98.08,浓度98%时密度约1.84g/ml,准确量取硫酸液体108.78ml稀释与500ml蒸馏水中,向水中加入硫酸而非向硫酸中加水,冷却后在1000ml容量瓶中定容即可得到上述浓度溶液;8.淀粉溶液,C=0.5%;准确称取可溶性淀粉0.5g,溶于50ml水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;9.铬酸钾溶液,C=50g/L;准确称取铬酸钾固体50g,溶于500ml水中,并在1000ml容量瓶中定容,搅拌下逐滴加入10%的硝酸银溶液,直至溶液出现棕红的悬浮物为止.静置1昼夜,用干净的滤纸漏斗过滤即可,不一定用饱和硝酸银溶液,用10%硝酸银溶液即可.配制方法:1克硝酸银+10毫升纯水溶解,置于棕色瓶中;10.氯化钠基准试剂,C=0.1mol/l,氯化钠分子量58.5,准确称取氯化钠固,5.85g溶于500ml蒸馏水中,并在1000ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;11.硝酸银溶液,C=0.1mol/l,硝酸银分子量169.87,准确称取硝酸银固体8.49g溶于200ml蒸馏水中,并在500ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液,用前采用基准氯化钠试剂10标定,需保存于棕色试剂瓶中;12.酚酞指示剂,C=0.1%,准确称取酚酞固体0.1g溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;13.氯化钡溶液,C=10%,准确称取氯化钡固体10g溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;14.乙醇溶液,C=1%,准确移取乙醇AR1ml与100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液;15.盐酸标准溶液,C=1mol/l,分子量36.46,D154=1.2039.11%,1.1529.57%、1.1020%、1.0510.17%;准确量取39.11%盐酸77.68ml或称取93.216g,稀释与500ml蒸馏水中,向水中加入盐酸而非向盐酸中加水,冷却后在1000ml容量瓶中定容即可得到上述浓度溶液;16.甲基橙指示剂,C=0.1%,准确称取甲基橙固体0.1g溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;17.邻苯二甲基二辛酯DOP标准液C=100ppm配制:用1ml移液管移取1mlDOPAR加入250ml容量瓶中,并用二氯甲烷稀释至250ml定容,摇匀即可得DOP浓度为4000ppm溶液;用5ml移液管移取浓度为4000ppmDOP溶液2.5ml,加入100ml 容量瓶中,用二氯甲烷稀释至100ml,摇匀即可得浓度为100ppmDOP溶液;18.钼酸铵溶液的配制,C=5%,准确称取钼酸铵固体5g,溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液;19.硫酸溶液,C=10mol/l,硫酸分子量98.08,浓度98%时密度约1.84g/ml,准确量取硫酸液体543.9ml稀释与300ml蒸馏水中,向水中加入硫酸而非向硫酸中加水,冷却后在1000ml容量瓶中定容即可得到上述浓度溶液;20.氢氧化钠溶液,C=5%,准确称取氢氧化钠固体5g,溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液;21.氯化亚锡溶液,C=10%,准确称取氯化亚锡固体5g,溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液,溶液配置完成后向其中投入锡粒一颗并保存于大口瓶中;22.二氧化硅贮备液,1ml相当于1.0mg二氧化硅:准确称取分析纯硅酸钠4.730g分子式Na2SiO3·9H2O,分子量284.22溶于200ml蒸馏水中,并与1L容量瓶中定容,保存于塑料瓶中;23.二氧化硅工作液,C=20ppm,用移液管移取二氧化硅贮备液20ml与1L容量瓶中定容,即可得上述浓度溶液,保存于塑料瓶中;24.硫酸溶液,C=1mol/l,硫酸分子量98.08,浓度98%时密度约1.84g/ml,准确量取硫酸液体54.4ml或称取100.096g稀释与500ml蒸馏水中,向水中加入硫酸而非向硫酸中加水,冷却后在1000ml容量瓶中定容即可得到上述浓度溶液;25.硫代硫酸钠溶液,C=0.05mol/l,硫代硫酸钠分子量158.11,准确称取硫代硫酸钠固体7.9055g溶于200ml蒸馏水中,并在1000ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;26.硼酸溶液,C=2%,准确称取硼酸固体2g,溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液,保存于塑料大口瓶中;27.氢氧化钠溶液,C=40%,准确称取硼酸固体40g,溶于50ml蒸馏水中,冷却后在100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液,保存于塑料大口瓶中或胶塞玻璃瓶中;=1.2039.11%,1.1529.57%、28.盐酸溶液,C=0.05mol/l,分子量36.46,D1541.1020%、1.0510.17%;准确量取39.11%盐酸3.884ml或称取4.661g,稀释与500ml蒸馏水中,向水中加入盐酸而非向盐酸中加水,冷却后在1000ml容量瓶中定容即可得到上述浓度溶液;29.甲基红乙醇溶液,C=1%,准确称取甲基红固体1g,溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液;30.溴甲酚绿乙醇溶液,C=1%,准确称取溴甲酚绿固体1g,溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液;31.甘油水溶液,C=2%,准确移取甘油AR2ml与100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液;32.盐酸溶液,C=6mol/l,分子量36.46,D15=1.2039.11%,1.1529.57%、1.1020%、41.0510.17%;准确量取39.11%盐酸466.08ml或称取559.296g,稀释与300ml蒸馏水中,向水中加入盐酸而非向盐酸中加水,冷却后在1000ml容量瓶中定容即可得到上述浓度溶液;33.氢氧化钠溶液,C=6mol/l,氢氧化钠分子量40.0,准确称取氢氧化钠固体240g溶于500ml蒸馏水中,并在1L容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;34.氢氧化钠溶液,C=1mol/l,氢氧化钠分子量40.0,准确称取氢氧化钠固体40g溶于500ml蒸馏水中,并在1L容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;。

实验室常用溶液配制示例

实验室常用溶液配制示例

实验室常用溶液配制示例氢氧化钠滴定液(1、0.5或0.1mol/L) NaOH=40.00 40.00g→1000mL 20.00g→1000mL 4.000g→1000mL【配制】取氢氧化钠适量,加水振摇使溶解成饱和溶液,冷却后,置聚乙烯塑料瓶中,静置数日,澄清后备用。

氢氧化钠滴定液(1mol/L) 取澄清的氢氧化钠饱和溶液56mL,加新沸过的冷水使成1000mL,摇匀。

氢氧化钠滴定液(0.5mol/L) 取澄清的氢氧化钠饱和溶液28mL,加新沸过的冷水使成1000mL,摇匀。

氢氧化钠滴定液(0.1mol/L) 取澄清的氢氧化钠饱和溶液5.6mL,加新沸过的冷水使成1000mL,摇匀。

【标定】氢氧化钠滴定液(1mol/L) 取在105℃干燥至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾约6g,精密称定,加新沸过的冷水50mL,振摇,使其尽量溶解;加酚酞指示液2滴,用本液滴定;在接近终点时,应使邻苯二甲酸氢钾完全溶解,滴定至溶液显粉红色。

每1mL的氢氧化钠滴定液(1mol/L) 相当于204.2mg的邻苯二甲酸氢钾。

根据本液的消耗量与邻苯二甲酸氢钾的取用量,算出本液的浓度,即得。

氢氧化钠滴定液(0.5mol/L) 取在105℃干燥至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾约3g,照上法标定。

每1mL的氢氧化钠滴定液(0.5mol/L)相当于102.1mg 的邻苯二甲酸氢钾。

氢氧化钠滴定液(0.1mol/L),取在105℃干燥至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾约0.6g,照上法标定。

每1mL的氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)相当于20.42mg的邻苯二甲酸氢钾。

如需用氢氧化钠滴定液(0.05、0.02或0.01mol/L)时,可取氢氧化钠滴定液(0.1mol/L)加新沸过的冷水稀释制成。

必要时,可用盐酸滴定液(0.05、0.02或0.01mol/L)标定浓度。

【贮藏】置聚乙烯塑料瓶中,密封保存;塞中有2孔,孔内各插入玻璃管1支,1管与钠石灰管相连,1管供吸出本液使用。

溶液的配制知识点总结

溶液的配制知识点总结

溶液的配制知识点总结一、实验室常用的溶液配制方法1. 一般常用的溶液配制方法有称量法、容量法、稀释法和溶解法等。

2. 称量法是以称量原料或溶质的固体质量为基础进行的配制方法。

一般是先称取固体溶质,然后溶解在适量水中,最后通过加水至所需体积。

称量法适用于精确配制浓溶液,如标准溶液。

3. 容量法是将一定体积的液体容器作为固定标准,向其中加入一定的溶质质量,配制所需浓度溶液。

容量法适用于精确配制稀溶液和标准溶液。

4. 稀释法是将浓溶液通过加入适量的溶剂稀释至所需浓度的溶液。

稀释法适用于大容量的常用溶液的制备。

5. 溶解法是将一定物质溶解在一定量的溶剂中,调整浓度以得到所需的溶液。

溶解法适用于一些易溶于水的化合物,如盐酸、硫酸等。

二、溶液配制中的注意事项1. 必须使用准确的称量器具和标定过的量筒、瓶口样品瓶,避免实验操作中的误差,以获得准确的结果。

2. 在称量试样时,应使用分析天平,掌握其精确误差,保证称取样品的准确性。

3. 在配制溶液时,应按配制的要求逐步加入试剂,并用加热或者搅拌等方法辅助溶解(如需)。

4. 在溶解固体试样时,应用少量溶剂先将试样湿润,然后加入余量溶剂继续溶解,以达到均匀溶解的效果。

5. 配制标准溶液时,必须使用精密的电子天平和标定过的量筒,严格按照标准操作步骤进行。

6. 在配制酸碱溶液时,要注意操作安全,必须佩戴防护装备,避免酸碱飞溅伤人。

7. 配制有毒、易挥发、易揮发、强臭、强酸、强碱等有害试剂时,应准备好防护措施,如通风设施、防护服等。

三、常用的溶液计算方法1. 浓度的计算:溶液的浓度通常用摩尔浓度(M)或质量浓度(g/L)表示,计算公式为C=n/V或C=m/V。

2. 溶液的稀释计算:浓度为C1的溶液,向其中加入V1体积的溶剂后,溶液的浓度变为C2,按C1V1=C2V2进行稀释计算。

3. 溶质的质量计算:获得溶液质量m,浓度C,溶液体积V后,可以按m=C×V进行溶质质量的计算。

实验室溶液配制

实验室溶液配制

实验室所需溶液配制1.费休氏试液,购买;2.氢氧化钠溶液,C=0.01mol/l。

氢氧化钠分子量40.0,准确称取氢氧化钠固体0.4g溶于200ml蒸馏水中,并在1L容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;3.中性红溶液,C=1%。

准确称取中性红固体1g溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;4.溴百里香酚蓝溶液,C=1%。

准确称取溴百里香酚蓝固体1g溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;5.碘化钾溶液,C=10%。

准确称取KI固体50g溶于50ml蒸馏水中,并在500ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;6.硫代硫酸钠溶液,C=0.1mol/l。

硫代硫酸钠分子量158.11,准确称取硫代硫酸钠固体15.811g溶于200ml蒸馏水中,并在1000ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;7.硫酸溶液,C=2mol/l,硫酸分子量98.08,浓度98%时密度约1.84g/ml,准确量取硫酸液体108.78ml稀释与500ml蒸馏水中,向水中加入硫酸而非向硫酸中加水,冷却后在1000ml容量瓶中定容即可得到上述浓度溶液;8.淀粉溶液,C=0.5%。

准确称取可溶性淀粉0.5g,溶于50ml水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;9.铬酸钾溶液,C=50g/L。

准确称取铬酸钾固体50g,溶于500ml水中,并在1000ml容量瓶中定容,搅拌下逐滴加入10%的硝酸银溶液,直至溶液出现棕红的悬浮物为止.静置1昼夜,用干净的滤纸漏斗过滤即可,不一定用饱和硝酸银溶液,用10%硝酸银溶液即可.配制方法:1克硝酸银+10毫升纯水溶解,置于棕色瓶中;10.氯化钠基准试剂,C=0.1mol/l,氯化钠分子量58.5,准确称取氯化钠固,5.85g溶于500ml蒸馏水中,并在1000ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;11.硝酸银溶液,C=0.1mol/l,硝酸银分子量169.87,准确称取硝酸银固体8.49g溶于200ml蒸馏水中,并在500ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液,用前采用基准氯化钠试剂(10)标定,需保存于棕色试剂瓶中;12.酚酞指示剂,C=0.1%,准确称取酚酞固体0.1g溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;13.氯化钡溶液,C=10%,准确称取氯化钡固体10g溶于50ml蒸馏水中,并在100ml容量瓶中定容,即得到上述浓度溶液;14.乙醇溶液,C=1%,准确移取乙醇(AR)1ml与100ml容量瓶中定容,即可得到上述浓度溶液;15.盐酸标准溶液,C=1mol/l,分子量36.46,D154=1.20(39.11%),1.15(29.57%)、1.10(20%)、1.05(10.17%)。

实验室常用溶液的配制

实验室常用溶液的配制

实验室常用溶‎液的配制1.30%丙烯酰胺溶液‎【配制方法】将29g丙烯‎酰胺和1g N,N’-亚甲双丙烯酰‎胺溶于总体积‎为60ml的‎水中。

加热至37℃溶解之,补加水至终体‎积为100m‎l。

用Nalge‎n e滤器(0.45μm孔径‎)过滤除菌,查证该溶液的‎p H值应不大‎于7.0,置棕色瓶中保‎存于室温。

【注意】丙烯酰胺具有‎很强的神经毒‎性并可以通过‎皮肤吸收,其作用具累积‎性。

称量丙烯酰胺‎和亚甲双丙烯‎酰胺时应戴手‎套和面具。

可认为聚丙烯‎酰胺无毒,但也应谨慎操‎作,因为它还可能‎会含有少量未‎聚合材料。

一些价格较低‎的丙烯酰胺和‎双丙烯酰胺通‎常含有一些金‎属离子,在丙烯酰胺贮‎存液中加入大‎约0.2体积的单床‎混合树脂(MB-1Malli‎n ckrod‎t),搅拌过夜,然后用Wha‎t man 1号滤纸过滤‎以纯化之。

在贮存期间,丙烯酰胺和双‎丙烯酰胺会缓‎慢转化成丙烯‎酰和双丙烯酸‎。

2.40%丙烯酰胺【配制方法】把380g丙‎烯酰胺(DNA测序级‎)和20g N,N’-亚甲双丙烯酰‎胺溶于总体积‎为600ml‎的蒸馏水中。

继续按上述配‎制30%丙烯酰胺溶液‎的方法处理,但加热溶解后‎应以蒸馏水补‎足至终体积为‎1L。

【注意】见上述配制3‎0%丙烯酰胺的说‎明,40%丙烯酰胺溶液‎用于DNA序‎列测定。

3.放线菌素D溶‎液【配制方法】把20mg放‎线菌素D溶解‎于4ml 100%乙醇中,1:10稀释贮存‎液,用100%乙醇作空白对‎照读取OD4‎40值。

放线菌素D(分子量为12‎55)纯品在水溶液‎中的摩尔消化‎系数为21,900,故而1mg/ml的放线菌‎素D溶液在4‎40nm处的‎吸光值为0.182,放线菌素D的‎贮存液应放在‎包有箔片的试‎管中,保存于-20℃。

【注意】放线菌素D是‎致畸剂和致癌‎剂,配制该溶液时‎必须戴手套并‎在通风橱内操‎作,而不能在开放‎在实验桌面上‎进行,谨防吸入药粉‎或让其接触到‎眼睛或皮肤。

配制溶液的方法有

配制溶液的方法有

配制溶液的方法有
配制溶液的方法主要有以下几种:
1. 固体溶解法:将固体溶质加入到溶剂中,通过搅拌和加热使其溶解。

这是最常用的配制溶液的方法,比如将盐加入水中配制盐水。

2. 溶液稀释法:当需要调整溶液浓度时,可以通过溶液稀释的方法进行。

将已有的浓溶液取出一部分,加入适量的溶剂使其稀释,从而得到所需浓度的溶液。

3. 液体混合法:将两种或多种溶液混合在一起,通过计算混合前后的溶质浓度和容积,可以得到所需浓度的溶液。

这种方法常用于配制某些特定浓度的试剂液。

4. 稀酸稀碱稀化法:将浓度较高的酸、碱加入到大量的水中,通过稀化的方法得到所需浓度的酸碱溶液。

这种方法常用于配制实验室中的常用酸碱溶液。

5. 水合物溶解法:有些化合物具有结晶水,通过将结晶体加入到水中,可以得到溶解度较高的溶液。

这种方法常用于配制一些含水合物的溶液。

在配制溶液时,需要注意以下几点:
1. 需要准确称量溶质和溶剂,以保证溶液浓度的准确性。

2. 溶质的溶解度和溶剂的性质需要考虑,确保溶解度足够高,否则溶质不易溶解或溶液浓度无法满足需求。

3. 在溶质溶解过程中,可以适当加热或搅拌促进其溶解,但需注意加热时避免溶液溢出或溶质分解。

4. 配制过程中,需要注意实验室安全,避免对身体和环境造成伤害。

总之,配制溶液的方法多种多样,具体选择哪种方法要根据实际情况和需求确定。

在操作过程中,需要严格控制溶质和溶剂的量,充分考虑溶液的浓度和溶解度,以确保得到所需浓度的溶液。

同时还需注重实验室安全,遵守操作规范,保证人身安全和环境保护。

20种实验室常用溶液配制与标定方法

20种实验室常用溶液配制与标定方法

20种实验室常用溶液配制与标定方法乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)C10H14N2Na2O8•2H2O=372.2418.61g→1000mL 【配制】取乙二胺四醋酸二钠19g,加适量的水使溶解成1000mL,摇匀。

【标定】取于约800℃灼烧至恒重的基准氧化锌0.12g,精密称定,加稀盐酸3mL使溶解,加水25mL,加0.025%甲基红的乙醇溶液1滴,滴加氨试液至溶液显微黄色,加水25mL与氨-氯化铵缓冲液(pH10.0)10mL,再加铬黑T指示剂少量,用本液滴定至溶液由紫色变为纯蓝色,并将滴定的结果用空白试验校正。

每1mL乙二胺四醋酸二钠滴定液(0.05mol/L)相当于4.069mg的氧化锌。

根据本液的消耗量与氧化锌的取用量,算出本液的浓度,即得。

【贮藏】置玻璃塞瓶中,避免与橡皮塞、橡皮管等接触。

乙醇制氢氧化钾滴定液(0.5mol/L)KOH=56.1128.06g→1000mL【配制】取氢氧化钾35g,置锥形瓶中,加无醛乙醇适量使溶解并稀释成1000mL,用橡皮塞密塞,静置24小时后,迅速倾取上清液,置具橡皮塞的棕色玻瓶中。

【标定】精密量取盐酸滴定液(0.5mol/L)25mL,加水50mL稀释后,加酚酞指示液数滴,用本液滴定。

根据本液的消耗量,算出本液的浓度,即得。

本液临用前应标定浓度。

【贮藏】置橡皮塞的棕色玻瓶中,密闭保存。

四苯硼钠滴定液(0.02mol/L)(C6H5)4BNa=342.22 6.845g→1000mL【配制】取四苯硼钠7.0g,加水50ml振摇使溶解,加入新配制的氢氧化铝凝胶(取三氯化铝1.0g,溶于25mL水中,在不断搅拌下缓缓滴加氢氧化钠试液至pH8~9),加氯化钠16.6g,充分搅匀,加水250mL,振摇15分钟,静置10分钟,滤过,滤液中滴加氢氧化钠试液至pH8~9,再加水稀释至1000mL,摇匀。

【标定】精密量取本液10mL,加醋酸-醋酸钠缓冲液(pH3.7)10mL与溴酚蓝指示液0.5mL,用烃铵盐滴定液(0.01mol/L)滴定至蓝色,并将滴定的结果用空白试验校正。

实验室常用溶液配制

实验室常用溶液配制

实验室常用溶液的配置Amp+/Kan+:贮存液浓度为50mg/mL称取500mg于10mL超纯水中溶解,抽滤后1mL分装到离心管中,于-30℃冻存X-gal:贮存浓度为20mg/mL称取20mgX-gal溶于1mL二甲基甲酰胺中,-30℃中用锡箔纸包裹后避光保存,不需要过滤除菌IPTG:贮存浓度为0.84mol/L称取2gIPTG溶于8mL超纯水中,用水定容到10mL,用0.22um的一次性滤过器过滤除菌,1mL 分装到离心管中并于-30℃保存CaCl2:贮存浓度为1mol/L称取1.11gCaCl(或者CaCl:2H2O1.4698g)溶于8mL超纯水中,定容到10mL,用0,22um的一次性滤过器过滤除菌,1mL分装到离心管中,并于-30℃保存LB培养基:胰蛋白胨(Tyrtone)10g/L酵母提取物(YeastExtraction)5g/L氯化钠10/L根据经验用NaOH调节PH为7.2-7.6,然后高压蒸汽灭菌,注意及时从灭菌锅中取出无DNA酶的RNA酶:将胰RNA酶(RNA酶A)溶于10mmol/LTris-Cl(PH7.5)、15mmol/LNaCl中,配成10mg/mL 的浓度,于100℃加热15min,缓慢冷却至室温,分装成小份保存于-20℃Bradford贮存液95%乙醇100mL88%磷酸200mLG2500.35g室温下可储存,一般4℃Bradford工作液Bradford贮存液30mL双蒸水425mL95%乙醇15mL88%磷酸30mL储存于4℃超声破碎缓冲液KCl300mM22.37gKH2PO450mM6.81gEDTA1mM0.292g(EDTA-2Na-2H2O)0.372g定容至1L,调pH至8.0包涵体洗涤液KCl300mM22.37gKH2PO450mM6.81gEDTA5mM1.46g(EDTA-2Na-2H2O)1.86g尿素2M120gTritonX-1000.5%5ml脱氧胆酸钠盐0.1%1g定容到1L调pH至8.0匀浆缓冲液(pH=7.5)成分:20mMHEPES0.002mol=0.476g加入0.952g1.5mMMgCl20.00015mol=0.0036g加入0.0072g0.2mMEDTA0.00002mol=0.00584g加入0.01168g0.1MNaCl0.01mol=0.58g加入1.16g0.5mM钒酸钠0.00005mol=0.0092g加入0.0184g加100mL水进行溶解,NaOH调pH至7.50.2mMDTT总体积500μL加入0.1μL0.4mMPMSF总体积500μL加入20μL1%SDS加入50μL10%SDS其中DTT和PMSF匀浆之前加入,SDS匀浆之后离心之前加入DTT配成1M母液,溶于0.01M乙酸钠(pH=5.2)中,过滤除菌PMSF配成10mM母液,溶于异丙醇10*PBSNaCl80.0669gKCl2.0129gNa2HPO414.1960gKH2PO42.4496g水定容至1L,使用时稀释10倍,用NaOH调pH至7.43,137mMNaCl,and2.7mMKCl4转膜缓冲液(含有SDS)1L剂量甘氨酸2.9gTris5.8gSDS0.37g甲醇200mL水800mL10×蛋白电泳缓冲液1L剂量Tris碱(Mr121.14)30.2g甘氨酸(Mr75.07)188gSDS(Mr288.38)10g加水至1L用时稀释10倍即可30%丙稀酰胺1L剂量丙烯酰胺290gN,N’-亚甲基双丙稀酰胺10g溶于600ml蒸馏水中,加热至37℃溶解,补足体积至1L,过滤,且pH不大于7.01MTris-Cl(pH6.8)60.55gTris碱溶解于400ml蒸馏水,溶解后调pH值,总体积为500ml1.5MTris-Cl(pH8.8)90.83gTris碱溶解于400ml蒸馏水,溶解后调pH值,总体积为500ml。

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实验室常用溶液的配制1.30%丙烯酰胺溶液(100ml)【配制方法】将29g丙烯酰胺和1gN,N'-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为60ml的蒸馏水中。

加热至37℃溶解之,补加水至终体积为100ml。

用Nalgene滤器(0.45μm孔径)过滤除菌,查证该溶液的pH值应不大于7.0,置棕色瓶中保存于4℃温度。

【注意】丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可以通过皮肤吸收,其作用具累积性。

称量丙烯酰胺和亚甲双丙烯酰胺时应戴手套和面具。

可认为聚丙烯酰胺无毒,但也应谨慎操作,因为它还可能会含有少量未聚合材料。

一些价格较低的丙烯酰胺和双丙烯酰胺通常含有一些金属离子,在丙烯酰胺贮存液中加入大约0.2体积的单床混合树脂(MB-1Mallinckrodt),搅拌过夜,然后用Whatman1号滤纸过滤以纯化之。

在贮存期间,丙烯酰胺和双丙烯酰胺会缓慢转化成丙烯酰和双丙烯酸,因此大于1年的溶液应该被丢弃。

2.40%丙烯酰胺(用于DNA测序,1L)【配制方法】把380g丙烯酰胺(DNA测序级)和20gN,N'-亚甲双丙烯酰胺溶于总体积为600ml的蒸馏水中。

继续按上述配制30%丙烯酰胺溶液的方法处理,但加热溶解后应以蒸馏水补足至终体积为1L。

置棕色瓶中保存于室温。

【注意】见上述配制30%丙烯酰胺的说明,40%丙烯酰胺溶液用于DNA序列测定。

3.0.1mol/L腺苷三磷酸(ATP)溶液(1ml)【配制方法】在0.8ml蒸馏水中溶解60mgATP,用0.1mol/LNaOH 调至pH值至7.0,用蒸馏水稀释1ml【注意】分装成小份保存于-70℃4.10mol/L乙酸铵溶液(1L)【配制方法】把770g乙酸铵溶解于800ml蒸馏水中,加水稀释至1L后过滤除菌。

在4°C储存。

【注意】乙酸铵是热不稳定的。

不要高压灭菌。

5.10%过硫酸铵溶液(10ml)【配制方法】把1g过硫酸铵溶于8ml蒸馏水中,用蒸馏水补足体积至10ml。

该溶液可在4℃保存数周。

6.1mol/LCaCl2溶液(200ml)【配制方法】称取54gCaCl2·6H2O并溶解在170ml蒸馏水中,用蒸馏水补足体积至200ml。

用0.22μm滤器过滤除菌,分装成10ml 小份贮存于-20℃。

【用法】制备感受态细胞时,将等分试样解冻,用蒸馏水稀释至100ml。

通过Nalgene过滤器(0.45微米)过滤除菌,并在使用前冷却至0℃。

7.2.5mol/LCaCl2溶液(20ml)【配制方法】称取13.5gCaCl2·6H2O并溶于15ml蒸馏水中,用蒸馏水补足体积至20ml。

用0.22μm滤器过滤除菌,分装成1ml 小份贮存于-20℃。

8.脱氧核苷三磷酸(dNTPs)溶液【配制方法】把每一种dNTP溶解于水至浓度各为100mmol/L左右,用微量移液器吸取0.05mol/lTris碱分别调节每一dNTP溶液的pH值7.0(用pH试纸检测),把中和后的每种dNTP溶液各取一份作适当稀释,在给出的波长下读取光密度计算出每种dNTP的实际浓度。

计算每个dNTP的实际浓度。

对于路径长度为1cm的比色皿,吸光度等于消光系数和摩尔浓度的乘积。

然后用蒸馏水稀释成终浓度为50mmol/L的dNTP,分别分装成小份贮存于-70℃。

9.1mol/L二硫苏糖醇(DTT)溶液(20ml)【配制方法】称取3.09gDTT,溶于15ml蒸馏水中,用0.01mol/L 乙酸钠溶液(pH5.2)补足体积至20ml。

通过0.22微米过滤器过滤除菌后分装成1ml小份贮存于-20℃。

【注意】不要对DTT或含有DTT的溶液进行高压灭菌。

10.0.5mol/lEDTA(pH8.0)溶液(1L)【配制方法】在800ml蒸馏水中加入186.1gNa2EDTA·2H2O,在磁力搅拌器上剧烈搅拌,用NaOH调节溶液的pH值至8.0(约需20gNaOH颗粒),然后稀释至1L,分装后高压灭菌备用。

在室温下保存。

【注意】EDTA二钠盐不溶于水,需加入NaOH将溶液的pH值调至接近8.0,才能完全溶解。

分配适当的等分试样并通过高压灭菌消毒。

11.溴化乙锭(10mg/ml溶液)(100ml)【配制方法】在100ml水中加入1g溴化乙锭,磁力搅拌数小时以确保其完全溶解,然后用铝箔包裹容器或转移至棕色瓶中,保存于4°C。

【注意】小心:溴化乙锭是强诱变剂并有中度毒性,使用含有这种染料的溶液时务必戴上手套,称量染料时要戴面罩。

使用后,这些溶液应进行净化。

有关如何执行此操作的详细信息,请参阅机构指南。

12.2×HEPES缓冲盐溶液(100ml)【配制方法】用90ml的蒸馏水溶解 1.6gNaCl、0.074gKCl、0.027gNa2PO4·2H2O、0.2g葡萄糖和1gHEPES,用0.5mol/lNaOH 调节pH值至7.05,再用蒸馏水稀释至100ml。

用0.22μm滤器过滤除菌,分装成5ml小份,贮存于-20℃。

13.1mol/l异丙硫基-β-D-半乳糖苷IPTG溶液(10ml)【配制方法】IPTG(分子量为238.3),在8ml蒸馏水中溶解2gIPTG 后,用蒸馏水稀释至10ml,用0.22μm一次性滤器过滤除菌,分装成1ml小份贮存于-20℃。

14.1mol/L乙酸镁(MgOAc)溶液(1升)【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解214.46g四水乙酸镁,稀释至1L过滤除菌。

在室温下保存。

15.1mol/LMgCl2溶液(1升)【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解203.4gMgCl2·6H2O,用水稀释至1L,分装成小份并高压灭菌备用。

在室温下保存。

【注意】MgCl2极易潮解,应选购小瓶(如100g)试剂,启用新瓶后勿长期存放。

16.酚/氯仿溶液【配制方法】把酚和氯仿等体积混合后用0.1mol/LTris·HCl(pH7.6)萃取几次以平衡这一混合物,置棕色玻璃瓶中,上面覆盖等体积的0.01mol/lTris·HCl(pH7.6)液层,保存于4℃。

【注意】酚腐蚀性很强,并可引起严重灼伤,操作时应戴手套及防护镜,穿防护服。

所有操作均应在化学通风橱中进行。

与酚接触过的部位皮肤应用大量的水清洗,并用肥皂和水洗涤,忌用乙醇。

17.10mmol/L苯甲基磺酰氟(PMSF)溶液(10ml)【配制方法】用10ml异丙醇溶解PMSF成1.74mg,分装成小份贮存于-20℃。

如有必要可配成浓度高达17.4mg/ml的贮存液(100mmol/L)。

【注意】PMSF严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤,吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。

一旦眼睛或皮肤接触了PMSF,应立即用大量水冲洗之。

凡被PMSF污染的衣物应予丢弃。

PMSF 的水溶液在其已经变为碱性(pH>8.6)并在室温下储存几小时后可以安全地丢弃。

(PMSF在水溶液中的活性丧失速率随pH值的升高而加快,且25℃的失活速率高于4℃。

pH值为8.0时,20μmmol/lPMSF水溶液的半寿期大约为35min。

)18.1mol/L乙酸钾(pH7.5)溶液(100ml)【配制方法】将9.82g乙酸钾溶解于90ml蒸馏水中,用2mol/L 乙酸调节pH值至7.5后稀释到100ml,分装成小份后保存于-20℃。

19.3mol/L乙酸钠(pH7.0)溶液(1升)【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解408.1g三水乙酸钠,用冰乙酸调节pH值至5.2,稀释到1L,分装后高压灭菌。

在室温下保存。

20.3mol/L乙酸钠(pH5.2)溶液(1升)【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解408.1g三水乙酸钠,用冰乙酸调节pH值至7.0,稀释到1L,分装后高压灭菌。

在室温下保存。

21.5mol/LNaCl溶液(1升)【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解292.2gNaCl加水稀释至1L,分装后高压灭菌。

在室温下保存22.10%十二烷基硫酸钠(SDS)溶液(1升)【配制方法】在900ml蒸馏水中溶解100g电泳级SDS,加热至68℃溶溶,加入几滴浓盐酸调节溶液的pH值至7.2,加水稀释至1L,分装备用。

在室温下保存。

【注意】SDS的微细晶粒易扩散,因此称量时要戴面罩,称量完毕后要清除残留在称量工作区和天平上的SDS。

10%SDS溶液无须灭菌。

23.20×SSC(NaCl和柠檬酸钠)溶液(1升)【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解175.3gNaCl和88.2g柠檬酸钠,加入数滴10mol/lNaOH溶液调节pH值至7.0,加水稀释至1L,分装后高压灭菌。

在室温下保存。

24.20×SSPE溶液(盐,磷酸钠,EDTA)(1升)【配制方法】在800ml毫升水中溶解175.3gNaCl,31.2gNaH2PO4·2H2O和7.4gEDTA,用NaOH溶液调节pH值至7.4(约需6.5ml10ml/LNaOH),加水稀释至1L,分装后高压灭菌。

在室温下保存。

25.100%三氯乙酸(TCA)溶液(500gTCA)【配制方法】在装有500gTCA的瓶中加入227ml蒸馏水,形成的溶液含有100%(M/V)TCA。

在室温下保存。

26.1mol/LTris溶液(1升)【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解121.91gTris碱,加入浓HCl调节pH值至所需值。

对于pH7.4,加入70mlHCl;对于pH为7.6加入60mlHCl;对于8.0的pH,加入42mlHCl。

加水稀释至1L,分装后高压灭菌。

在室温下保存。

【注意】如1mol/L溶液呈现黄色,应予丢弃并置备质量更好的Tris。

尽管多种类型的电极均不能准确测量Tris溶液的pH值,但仍可向大多数厂商购得合适的电极。

Tris溶液的pH值因温度而异,温度每升高1℃,pH值大约降低0.03个单位,应使溶液冷至室温后方可最后调定pH值。

例如:0.05mol/L的溶液在5℃、25℃、和37℃时的pH值分别为9.5、8.9和8.6。

27.Tris缓冲盐溶液(TBS)(25mmol/lTris)(1升)【配制方法】在800ml蒸馏水中溶解8gNaCl、0.2gKCl和3gTris 碱,加入0.015g酚并用HCl调至pH值至7.4,用蒸馏水稀释至1L,分装后高压灭菌(15lbin-2液体循环中20min),于室温保存。

28.电泳用Tris-乙酸(TAE)(50X)(1升)【配制方法】称重242gTris碱,加入800毫升蒸馏水溶解。

加入57.1ml冰醋酸和100ml0.5mol/lEDTA(pH8.0),用蒸馏水补足体积至1升。

在室温下保存。

【用法】用蒸馏水稀释1:49。

TAE具有相当低的缓冲能力,并且在延伸电泳期间倾向于耗尽。

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