蒸发光散射检测
蒸发光散射检测原理与操作要点
蒸发光散射检测器(ELSD)3300 原理与操作一.操作原理蒸发光散射检测器的独特检测原理包括以下三个步骤:首先将柱洗脱液雾化形成气溶胶,然后在加热的漂移管中将溶剂蒸发,最后余下的不挥发性溶质颗粒在光散射检测池中得到检测。
雾化(Nebulization)：雾化(Nebulization) 经HPLC 分离的柱洗脱液进入雾化器, 在此与稳定的雾化气体(一般为氮气)混合形成气溶胶。
气溶胶由均匀分布的液滴组成,液滴大小取决于分析中采用的气体流量.气体流量越低形成的液滴越大,液滴越大则散射的光越多,从而提高了分析灵敏度,但是越大的液滴在漂移管中越难蒸发。
每种方法均存在产生最佳信号噪音比率的最优化气体流量。
流动相流速越低要求适当雾化的气体流量也越低。
用内径为2.1mm 的微径柱代替内径为4.6mm 标准型分析柱,能大大降低流动相流速,因而提高分析的灵敏度。
蒸发(Evaporation)：蒸发(Evaporation) 气溶胶中挥发性成分在加热的不锈钢漂移管中蒸发.为特定应用设置适当的漂移管温度,取决于流动相组成和流速,以及样品的挥发性.高有机含量流动相比高含水量流动相要求蒸发的漂移管温度低。
流动相流速越低比流动相流速越高要求蒸发的漂移管温度越低。
半挥发性样品要求采用较低的漂移管温度,以获得最佳灵敏度.最佳温度需要通过观察各温度时的信号噪音比率来确定。
在ELSD 3300 漂移管中,距离雾化器3 英寸处有一个PTFE 涂层的不锈钢撞击器.气溶胶与撞击器相遇,大的液滴从废液管排出。
余下的液滴从撞击器周围通过并经过漂移管进入到光散射检测池被检测。
除去大的液滴就允许在低温模式下操作ELSD3300,适用于分析半挥发性样品。
流动相和雾化气体中的非挥发性杂质会导致噪音。
采用高品质的气体,溶剂和挥发性缓冲液(经过过滤的) ,会很大程度上降低基线噪音.若流动相没有完全挥发会导致基线噪音上升。
仔细选择设置检测器的参数保证流动相完全挥发。
蒸发光散射检测器原理
蒸发光散射检测器原理蒸发光散射检测器（Evaporative Light Scattering Detector，简称ELSD）是一种常用的色谱检测器，主要用于对非挥发性、非吸收性或难于检测的化合物进行定量分析。
ELSD的原理基于样品蒸发后所产生的散射光强度，通过测量样品中散射光的强度来实现对化合物的检测和定量。
ELSD的工作原理如下：1.环境气氛：ELSD中的样品通过蒸发器被转化为气态，然后进入和环境气氛相互作用的区域。
为了获得较强的光散射信号，通常使用较高的柱温和较低的环境压力。
2. 光散射：样品中的分析物在环境气氛中形成微小颗粒，当入射光通过这些颗粒时，会发生光散射。
根据Mie理论，散射光的强度与颗粒的大小、形状和折射率的相关性较强。
小的颗粒、高的折射率和大的折射率差异将导致更强的光散射信号。
3.探测器：ELSD中的探测器是一个光电器件，能够转换光散射光子到电子信号，并输出相应的电压信号。
输出信号的强度与入射光的强度成正比。
4.敏感度提高：为了提高ELSD的检测灵敏度，通常采用背景补偿方法。
通过同时测量背景散射和样品散射信号，并在信号处理中减去背景散射光，可以有效地消除背景噪声。
ELSD的优点和应用领域：1.高通量：ELSD适用于高通量的分析，因为它可以适应大量样品流量。
2.无需色谱柱：由于ELSD不基于化学反应或吸收现象，因此无需特定的分离柱，适用于各种色谱方法。
3.可用性：ELSD适用于各种化合物，包括有机化合物、大分子和生物分子等，具有广泛的应用领域。
4.无需标准品：ELSD不需要外部标准品来进行定量分析，可以减少标准品的使用和准备的成本。
5.定量精度：ELSD具有较高的定量精度和重现性，可用于定量分析和研究。
ELSD是一种常用的色谱检测器，其原理基于化合物在环境气氛中的蒸发和光散射。
ELSD具有高通量、适用于各种化合物和无需标准品进行定量分析的优点，因此在药物分析、天然产物分析、生物医学研究等领域得到广泛应用。
简述蒸发光散射检测器的特点及应用
简述蒸发光散射检测器的特点及应用蒸发光散射检测器（Evaporative Light Scattering Detector，ELSD）是一种常用于分析化学和生物化学领域的检测器。
它通过蒸发溶剂中的溶质，利用光散射的原理对样品进行检测和分析。
蒸发光散射检测器具有以下特点和应用：1. 特点：(1) 无需特定波长的光源：蒸发光散射检测器是一种全波长通用的检测器，不需要特定波长的光源。
这使得它可以适用于各种溶剂和样品类型，无需进行光源的更换和调整。
(2) 灵敏度高：蒸发光散射检测器对于非挥发性和热稳定性差的样品具有很高的灵敏度。
相比于传统的紫外-可见吸收检测器，ELSD 可以检测到低至纳克级的溶质浓度。
(3) 宽线性范围：蒸发光散射检测器具有宽广的线性响应范围，能够准确测量不同浓度范围内的溶质浓度。
这使得ELSD在溶质浓度变化范围大的样品分析中具有较好的适用性。
(4) 适用性强：蒸发光散射检测器适用于各种溶剂类型和化合物的检测，包括有机化合物、无机离子、脂质、多糖等。
同时，ELSD也适用于样品分离技术，如高效液相色谱（HPLC）、超临界流体色谱（SFC）等。
(5) 无需色谱柱：蒸发光散射检测器可以直接检测样品中的溶质，无需色谱柱进行分离。
这使得ELSD在色谱分析中可以避免色谱柱带来的分离效率、分离时间和样品损失等问题。
2. 应用：(1) 药物分析：蒸发光散射检测器在药物分析领域中得到广泛应用。
通过对样品中的药物成分进行测量，可以用于药物研发、药效学评价等方面。
ELSD可以检测到非极性和极性药物成分，具有很高的灵敏度和选择性。
(2) 食品安全：蒸发光散射检测器在食品安全领域中被广泛应用。
通过对食品中的添加剂、农药残留、重金属等进行分析，可以快速准确地判断食品的安全性和质量。
ELSD可以检测到低浓度的残留物，具有较好的检测效果。
(3) 环境分析：蒸发光散射检测器在环境分析领域中也具有重要的应用。
通过对环境样品中的污染物、有机物、无机离子等进行测量，可以评估环境质量和污染程度。
蒸发光散射检测器使用注意事项
蒸发光散射检测器使用注意事项蒸发光散射检测器是一种常用的实验室仪器，用于表征材料的表面形貌和薄膜的质量。
在使用蒸发光散射检测器时，需要注意以下几点。
一、仪器安装和校准1. 在使用蒸发光散射检测器前，需要将其正确安装在实验室的光学台上。
确保仪器的稳定性和水平度。
2. 在使用前，需要对仪器进行校准。
校准过程包括零点校准和灵敏度校准，确保仪器的准确性和可靠性。
二、样品制备1. 样品制备是蒸发光散射检测的关键步骤。
在制备样品时，应注意样品表面的光洁度和平整度。
避免表面存在杂质、颗粒或划痕。
2. 样品的尺寸和形状也需要符合仪器的要求。
通常情况下，样品的尺寸应小于仪器的探测范围。
三、实验操作1. 在进行蒸发光散射检测时，应保持实验环境的稳定。
避免有风、震动或其他干扰因素影响实验结果。
2. 在进行实验前，需要将仪器预热至稳定的工作温度。
同时，还需根据实验需求选择合适的检测波长。
3. 在实验过程中，需注意控制蒸发速率和压力。
过高的蒸发速率或压力会导致样品表面出现不均匀的薄膜。
4. 实验结束后，应及时清洁仪器，避免样品残留对下次实验的影响。
四、数据分析与结果解释1. 在进行数据分析时，需注意对实验数据进行适当的处理和修正。
通常情况下，需要进行背景减除和散射强度的归一化处理。
2. 在结果解释时，应结合样品的特性和实验条件进行综合分析。
避免仅凭散射强度大小得出片面的结论。
总结：在使用蒸发光散射检测器时，需要注意仪器的安装和校准，样品的制备，实验操作的准确性以及数据分析和结果解释的科学性。
只有在严格遵守这些注意事项的情况下，才能获得准确可靠的实验结果。
同时，还应不断学习和探索新的技术和方法，提高实验技能和数据分析能力，为科研工作提供有力支持。
蒸发光 散射检测法
蒸发光散射检测法
蒸发光散射检测法（evaporative（light（scattering（detection，简称蒸发光散射检测法（ evaporative（light（scattering（detection，简称ELSD）是一种常用的液相色谱检测器。
它基于溶质在热气流中挥发，产生气溶胶，进而被激光源照射后产生散射光的原理进行检测。
ELSD的工作原理是：当流动相通过检测器时，部分溶剂会在高温下挥发，形成气溶胶。
这些气溶胶颗粒在激光束的照射下会产生散射光，其强度与气溶胶颗粒的数量成正比。
因此，通过测量散射光的强度，就可以得到样品中溶质的含量。
ELSD具有灵敏度高、响应速度快、线性范围宽、重复性好等优点。
它可以用于没有紫外吸收或紫外吸收较弱的物质的检测，如糖类、氨基酸、生物碱等。
此外，由于ELSD不依赖于样品的光学性质，因此对样品的前处理要求较低，适用于复杂的样品基质。
然而，ELSD也有一些局限性。
例如，它不能用于检测挥发性物质，因为这些物质在热气流中会完全挥发掉。
此外，ELSD的灵敏度受到温度和流速的影响，需要严格控制实验条件。
如何使用低温蒸发光散射检测器？
如何使用低温蒸发光散射检测器？低温蒸发光散射检测器对色谱柱流出物雾化并加热蒸发流动相，溶质形成的细小颗粒遇到光束引起光散射，通过对散射光强度的测量实现对目标化合物的检测。
使用步骤：
1、开空气压缩机电源，阀门开一圈半，压力调为特定值。
2、接柱子：褐色管接柱子入口，透明管接检测器，内部干燥珠必须保持干燥状。
3、如果使用单泵，开A泵“power”键，仪器由红灯转换为绿灯，更换所需要的流动相，然后将排液阀旋钮逆时针旋转180°以打开排液阀。
4、按“purge”键运行，开始冲洗。
如果排液阀旋钮旋转的度数超过180°，任何排出的流动相都可能包含气泡。
这是正常现象。
5、清洗完成后，以顺时针方向尽量旋转排液阀旋钮，关闭排液阀。
按下“pump”键，开始泵的运行。
6、如果使用双泵，打开两个泵的电源开关，分别更换所需要的流动相、冲洗、运行。
7、设定泵的较高压力及流速，将流速调节至分析用流速，对色谱柱进行平衡，同时观察压力指示应稳定，用干燥滤纸片的边缘检查柱管各连接处应无渗漏，初始平衡时间一般需30分钟。
8、开蒸发光散射器检测电源，设置仪器参数。
蒸发光散射检测器原理
蒸发光散射检测器原理
蒸发光散射检测器是一种常用于大气颗粒物检测的仪器，它利用颗粒物对光的
散射特性来进行检测和分析。
蒸发光散射检测器的原理主要包括光源、颗粒物散射、检测器和数据处理四个方面。
首先，蒸发光散射检测器的光源通常采用激光器或LED等光源，这些光源能
够产生高强度、单色、方向性好的光束，为后续的颗粒物散射提供良好的光源条件。
其次，当光束穿过大气中的颗粒物时，会发生散射现象。
颗粒物的大小和形状
会影响散射光的强度和方向，通过测量散射光的强度和角度分布，可以得到颗粒物的信息，如大小、浓度等。
然后，检测器是蒸发光散射检测器中至关重要的部分，它能够接收并测量颗粒
物散射的光信号。
常用的检测器包括光电二极管、光电倍增管等，这些检测器能够将光信号转换为电信号，并进行放大和处理。
最后，数据处理是蒸发光散射检测器原理中的关键环节，通过对检测到的光信
号进行处理和分析，可以得到颗粒物的相关参数，如浓度、大小分布等。
常用的数据处理方法包括傅里叶变换、多普勒变换等，这些方法能够有效地提取颗粒物的特征信息。
综上所述，蒸发光散射检测器通过光源、颗粒物散射、检测器和数据处理四个
方面的原理，能够对大气颗粒物进行准确的检测和分析，为环境监测和大气污染防治提供了重要的技术手段。
希望本文能够对蒸发光散射检测器的原理有所帮助。
蒸发光散射检测器
国家“十五”项目，于2004年开始研发
以国际最先进仪器指标为参考，自主研发
2006年完成样机并提供给企业及高校试用
针对市场需要优化仪器性能和硬件设计
2007年5月正式通过国家科委验收 是唯一国产化蒸发光散射检测器
ELSD仪器特点
通用型检测器
样品无需具有光吸收特性，可解决HPLC的检测难题，如磷脂、糖 类、未衍生的脂肪酸和氨基酸等
C1 C2a
蒸发温度和雾化温度的温控处理 气路流量的闭环控制 外部命令和参数的实时接受、判别和解析处理 显示的实时性处理，键盘的响应实时性处理 温度、压力、流量、PMT信号的数据采集和数据处理
注意事项
只能使用可挥发流动相 样品挥发性要低于流动相
UM 5000 ELSD 性能指标
操作条件
温度 15C ～ 30C 相对湿度<90%
不受周围温度影响 通常为正向峰 可进行梯度洗脱 对流动相无响应 纳克级灵敏度
与紫外检测器比较
紫外检测器
检测有紫外可见光吸收的样品 对样品的检测受吸光系数影响 低波长基线随梯度变化产生漂移 流动相选择受紫外吸收限制
蒸发光散射检测器
检测挥发性低于流动相的样品 不同样品信号响应系数接近
梯度变化基本不影响基线 可使用所有挥发性流动相
卡那霉素
A
T
186759
4.225
188243
4.211
187439
4.219
182583
4.199
189022
4.223
186809.2 4.2154
2510.588 0.010621
卡那霉素B
A
T
126122
5.504
124418
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
中黄芪甲苷的含量
【摘要】
目的建立高效液相-蒸发光散射检测法测定龙生蛭胶囊中黄芪甲苷的含量。
方法色谱柱为Diamonsil C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）。
流动相为乙腈
-水(33∶67),流速1.0 ml/min。
ELSD参数：漂移管温度105℃，气体流量2.8 ml/min。
结果黄芪甲苷在2.45～10.64 μg的线性关系良好(r=0.999 2,n=5)。
结论方法简便准确，重现性好，灵敏度高。
【关键词】蒸发光散射检测高效液相色谱；龙生蛭胶囊；黄芪甲苷
Determination of Astragaloside in Longshengzhi Capsules by
，
(Xianyang Buchang Pharmaceutical Co., Ltd. 712000, China)
Abstract：ObjectiveTo establish an HPLC-ELSD method for determining the contents of astragaloside in Longshengzhi
capsules.MethodsThe chromatographic column was Diamosil C18(250
mn×4.6 mm,5 μm). The mobile phase was ace tonitrile-
water(33∶67)and the flow rate was 1.0 ml/min.The drift tube temperature was at 105℃.The gas flow rate was at 2.8
ml/min.ResultsWithin the range of 2.45～10.64 μg, the content of astragaloside had a good linear ratationship (r=0.999
2,n=5).ConclusionThe method is easy,reliable,sensitive and reproducibile.
Key words：HPLC-ELSD； Longshengzhi capsules； Astragaloaside
龙生蛭胶囊是由黄芪、地龙、水蛭、赤芍等药材组成，具有补气活血、逐
淤通络的功效。
黄芪为其君药，所含黄芪甲苷为其主要活性成分。
目前质量标
准多采用薄层扫描法，考虑到薄层扫描操作繁琐，引起误差环节比较多，本文
改用HPLC-ELSD法测定黄芪甲苷含量。
以期为有效控制黄芪甲苷含量提供有效依据。
1 仪器与试药
本岛津LC-10AT高效液相色谱仪。
Alltech 2000ES型检测器。
黄芪甲苷对照品由中国药品生物制品检定所提供，批号0781-200210，乙腈为色谱纯，水为高纯水，其它试剂均为分析纯。
龙生蛭胶囊由咸阳步长制药有限公司提供。
2 方法与结果
2.1 色谱条件色谱柱Diamonsil C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）流动相∶乙腈-水(33∶67),V=1.0 ml/min,ELSD参数：漂移管温度：105℃，气体流量:2.8 ml/min。
2.2 对照品溶液的制备精密称取黄芪甲苷对照品12.25 mg，置5 ml量瓶中，加甲醇溶解后稀释至刻度（2.45 mg/ml）,摇匀，精密量取1 ml，置5 ml量瓶加甲醇至刻度，作为对照品溶液（0.490 mg/ml）。
2.3 供试品溶液的制备精密称取
3.0 g本品，加70%甲醇回流提取1 h，滤过，滤渣用70%甲醇分次洗涤，合并滤液，水浴蒸干。
残渣用水10 ml溶解，移至分液漏斗中，用水饱和的正丁醇提取4次（20，20，15，15 ml），合并提取液，用1%NaOH液洗涤2次（15 ，15 ml），弃去洗涤液，再用正丁醇饱和水洗至中性，正丁醇液水浴蒸干，用甲醇定容至5 ml量瓶中，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液。
2.4 线性关系考察精密吸取黄芪甲苷对照品溶液（0.490 mg/ml）5，10，15，20，25μl，进样，按上述色谱条件测定，以峰面积的自然对数为纵坐标，以进样量的自然对数为横坐标，进行线性回归，得回归方程：Y=1.120
87X+5.912 53，r=0.999 2，线性范围为2.45～12.45μg，线性关系良好。
2.5 精密度实验对同一对照品溶液，连续测定5次，计算得黄芪甲苷峰面积积分值的RSD为1.02%。
2.6 稳定性实验取上述供试品30 μl，分别在0，2，4，6，8，12 h进样测定，其平均峰面积为4 719 00
3.500，RSD=1.68%，表明供试品溶液在12 h 内稳定。
2.7 重复性实验对同一批样品（050805）5份，分别测定，结果黄芪甲苷平均含量为100.26μg/粒，RSD为1.70%。
2.8 加样回收试验精密称取黄芪甲苷对照品5.25 mg，置50 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，得对照品溶液（0.105 mg/ml），取已知含量的样品5份，加入上述对照品1.0 ml，依法测定，并计算加样回收率。
结果见表1。
表1 加样回收率实验结果（略）
2.9 样品测定取样品3批，依法测定，得黄芪甲苷含量为111.32，108.33,109.68 μg/粒。
结果见图1。
图1 黄芪甲苷的HPLC色谱图（略）
3 讨论
含黄芪制剂中黄芪甲苷含量多采用薄层扫描法，但其操作繁琐，重现性差，而高效液相分离效果好，但黄芪甲苷最大吸收波长为200.8 nm，如用紫外检测试剂影响较大，分析很难进行。
ELSD检测器为质量型检测器，不受外部环境干扰，试剂在检测器中全部蒸发，不干扰测定，灵敏度、稳定性及重复性能够符合测定要求，故本实验采用HPLC-ELSD法测定，效果良好。
由于处方成分复杂，在样品处理过程中曾采用D101树脂过柱，用未过柱与过柱处理的样品进行了比较，结果表明两种方法色谱图基本一致，但过柱处理含量远低于未过柱样品，所以在处理样品时取消了过柱步骤，经考察，可操作性强。
流动相选择：将流动相按不同比例调节，经对比，乙腈水（33∶67）作为流动相，分离效果好。