非特异性免疫实验
黑灵芝对小鼠非特异性免疫功能调节作用的实验研究
３结 果
灵芝属担子菌纲多孔菌科植物 ， 《 神农本 草经》就将其列 为上品 ， 并对其补益强壮作用进行 了论述 。《 本草纲 目》 对灵芝 的种类 、 产地、 药性 、 功用等进行了详细的记 载。将灵芝 分为青 芝、 赤芝 、 黄芝 、 白芝 、 黑芝 、 紫芝 等六种 ， 年来 ， 近 许多学者对 灵芝子实体 、 菌丝体 、 孢子粉和发酵液及不 同方法提取 的有效
２试 验 方 法
下注 射 环磷 酰胺 ４ｍ ／ ／，连 续 ３ 。末次 给 药 １ ， ０ ｇｇ ｋｄ ｄ ｈ后 按 ０１ Ｆ Ｏ 体 积于小 鼠尾静 脉注人 ５ ％中华 墨 汁生理盐 水溶 ．ｍ ｌｇ ０ 液， 在注入 墨汁后 ３ ｓ ６ ｎ从小 鼠眼 眶取血 ， ０ 及 ｍｉ 用微 量取样
公司产品）Ｊ１０Ｎ型电子天平 （ ； ２３ Ａ 上海精密仪器有限公司产 品） ；环磷 酰胺 （ 江苏 恒瑞 医药股 份有 限公 司生产 ，批号 ：
０ ０ ０ ２ ）氯化钠 （ ８ １５ １ ； 天津市 富宇精 细化工试 剂厂生产 ， 号 ： 批 ０ １０ ） 中华墨汁 （ ８２８ ； 北京一 得 阁墨业有 限公 司生 产 ）碳酸钠 ； （ 天津市福晨化学试剂厂 ， 批号 ：０ ０６ ７ 。 ２ １０ ２ ） 注 ：▲▲示与正常组相比Ｐ Ｏ １ ＜． ， Ｏ 示与模型组 比较 Ｐ Ｏ ５ ＜． ， ０ 料 示 与模型 组相 比 Ｐ Ｏ １ ＜． 。 ｏ ２１ ． 黑灵芝提取液对小 鼠免疫器官重量 的影响刚 ． ２黑灵 芝提取液对小 鼠单核一 巨噬细胞吞噬功能 的影响 取 Ｓ Ｆ级 Ｋ 小 鼠 ， Ｐ Ｍ 雌雄 各半 ， 体重 １— ２ ， ８ ２ ｇ 随机分为正 ３ 实验结果显示 ， 与正常对照组相 比， 模型对照组小 鼠的吞 常对照组 ， 模型对照组 ， 黑灵 芝低剂量 、 中剂量 、 高剂量组 ， 阳 ＰＯ５， ０ 性对照组 ， 胃给药 ， 灌 每天 １ 连续 １ ， 次， ０天 对照组给予等容积 噬指数 和吞噬系数显著低 于正常对照组 （ ＜ ． ）说明小 鼠免 疫抑制模 型成功建立 。与模型对照组相 比， 黑灵芝提取液高剂 蒸馏水。除正常对照组外 ， 其余各 组从 给药第 ５天开始同时皮 下注射环磷酰胺 ４ ｍｇ ｇ ， ０ ／ ／ 连续 ３ 。于末次给药后 １ ， ｋｄ ｄ ｈ 脱颈 量组可 显著 提高免 疫抑制 小 鼠的吞 噬指 数和吞 噬系数 （ ＜ 尸 ００ ，＜ ．１ ； ． Ｐ ００ ）绞股蓝总苷片可显著增加免疫抑制小 鼠的吞噬 ５ 椎处死小鼠， 取胸腺和脾脏精密称重 ， 计算脏器系数。 指数和吞噬系数（ ＜ ． ，＜ ． ） Ｐ ０ ５ Ｐ ０ 。提示黑灵芝提取液对免疫 ０ 叭 脏器系数＝ 抑制小 鼠巨噬细胞吞噬功能有增强 的作用 。 ２２黑灵芝提取液对小 鼠单核～ ． 巨噬细胞吞噬功能的影响Ｂ１ 表 ２ 黑灵芝提取 液对单核一 巨噬细胞 功能的影响（￣ ） ｘ ｓ 取 Ｓ Ｆ级 Ｋ Ｐ Ｍ小 鼠 ， 雌雄 各半 ， 体重 １ ～ ２ ， ８ ２ ｇ随机分 为正 常对 照组 ， 型对照组 ， 模 黑灵芝低 剂量 、 中剂量 、 剂量组 ， 高 阳 性对照组 ， 胃给药 ， 灌 每天 １ 连续 １ ， 次， Ｏ天 对照组给予等容积 蒸馏水 。除正常对照组外 ， 其余各组从给药第 ５天开始 同时皮
免疫荧光非特异性染色的消除方法
免疫荧光非特异性染色的消除方法免疫荧光非特异性染色是在进行免疫荧光染色实验时常常出现的一种问题。
它指的是在一些情况下，由于实验操作不当或试剂配制不当等原因，导致荧光信号出现在与目标分子无关的细胞或组织区域上。
这种非特异性染色会严重影响实验结果的准确性和可解释性。
因此，为了得到可靠和准确的免疫荧光染色结果，研究人员需要采取措施来消除免疫荧光非特异性染色。
以下是一些常用的消除免疫荧光非特异性染色的方法：1.优化抗体浓度和孵育时间：非特异性染色常常与抗体过多或过长的孵育时间有关。
因此，在进行免疫染色实验前，应该对抗体的浓度和孵育时间进行严格的优化。
一般来说，应该根据厂家提供的建议，进行初步的实验，然后根据实验结果调整抗体浓度和孵育时间。
2.阻断非特异性结合位点：有些细胞或组织可能存在一定程度的非特异性结合位点，导致非特异性染色。
在这种情况下，可以使用特异性抗体前处理样本，以阻断非特异性结合位点。
常用的前处理方法包括用1%牛血清白蛋白（BSA）或非特异性抗血清预处理样本等。
3.优化固定条件：样本处理过程中的不恰当固定条件也可能导致非特异性染色。
所以，在固定样本的时候，应该选择适当的固定剂和固定时间，并避免过度固定。
4.混合多种报告物质：对于存在非特异性染色的样本，可以尝试混合多种报告物质来进行染色，以提高特异性。
常用的报告物质包括荧光标记的二抗、荧光标记的标记物等。
5.设置适当的阴性对照：在进行免疫染色实验时，应该设置适当的阴性对照来排除非特异性染色的可能性。
阴性对照是使用与目标分子无关的抗体或未激光的样品，可以通过对比阴性对照和实验样品的染色结果来判断是否存在非特异性染色。
总之，在进行免疫荧光染色实验时，消除非特异性染色是至关重要的。
通过优化抗体浓度和孵育时间、阻断非特异性结合位点、优化固定条件、混合多种报告物质和设置适当的阴性对照等方法，可以有效地消除免疫荧光非特异性染色，从而获得准确、可靠的实验结果。
连翘苷对小鼠非特异性免疫及应激作用的实验研究
１０ ： ０ 注入墨汁 １ｒｉ ｇ ０ ｎ的吸光度值 ａ
＝３ Ｋ×体重 ÷（ 肝重 ＋脾 重） １３ ２ 对 Ｄ Ｃ （ ．． Ｎ Ｂ 对二硝基氯苯） 所致迟发 型皮肤过敏反应 的影响 【 ６ Ｊ ５ Ｎ Ｂ乙醇液 ２ ｌ ％Ｄ Ｃ ｍ 于小 鼠腹部皮肤致敏 ， 致敏前 ３ ｄ开始给药 ， ｌｄ 致敏 ７ 共 ｌ， ｄ后用 １ Ｎ Ｂ涂右耳 ２ ｈ处死小鼠 ， ％Ｄ Ｃ ４ 以 左 右两耳重量之差 为迟发 型超敏反应值 。
重， 注入后 １ ｉ ， Ｏ ｉ 从 小 鼠眶后静脉丛取血 ０ ０ ｍｌ ａ ｒ ｎ ｌｍｎ ．５ 立刻 吹入 ４ ． ％ＮａＣ ３ ｍｌ １ ０ ２ Ｏ 溶液中 ， 吸数次后测定 ６ ０ ｍ 处的吸光 吹 ８ｎ
度（ 以正常小 鼠血溶于 ４ ｌ ． ％ Ｎ ２ 溶液为对照 ） ｍ １ ０ ａ￣ （ 。按下式 计算廓清指数 Ｋ和校正廓清指数 ａ 。
取１ 月龄 的 ＩＲ小 鼠 １０只 ， Ｃ ２ 体重 ２ ±２ ， ０ ｇ 分为正常对照组 、 剂量组 、 小 中剂 量组 、 大剂量组 ， 每组 ３ ０只雌雄 各半 ， 按下表 剂量灌 胃， 给药 ７ ， ｄ后 分别从各组 中取出 １ ０只（ 雌雄各半 ）进行应激反应 实验 。继 续给药 ， ， 剩余小 鼠进行免疫 功能实验。
—Байду номын сангаас
《非特异性免疫特异性免疫》教学设计
《非特异性免疫特异性免疫》教学设计教学设计：非特异性免疫与特异性免疫（120分钟）一、教学目标：1.了解非特异性免疫和特异性免疫的基本概念；2.了解非特异性免疫和特异性免疫的机制和作用；3.掌握非特异性免疫和特异性免疫的相互关系；4.培养学生批判性思维和科学研究能力。
二、教学内容和方法：1.非特异性免疫的概念和机制（40分钟）a.非特异性免疫的定义和分类；b.非特异性免疫的主要机制：天然免疫和炎症反应；c.天然免疫的特点和机制；d.炎症反应的特点和机制；e.在非特异性免疫中的重要细胞：巨噬细胞和树突状细胞；f.实验：巨噬细胞对细菌的吞噬实验。
2.特异性免疫的概念和机制（40分钟）a.特异性免疫的定义和分类；b.特异性免疫的主要机制：细胞免疫和体液免疫；c.细胞免疫的特点和机制；d.体液免疫的特点和机制；e.在特异性免疫中的重要细胞：T细胞和B细胞。
3.非特异性免疫与特异性免疫的相互关系（40分钟）b.非特异性免疫与特异性免疫的协同作用；c.实验：非特异性免疫对特异性免疫的调节作用。
4.实验设计和结果分析（40分钟）a.实验目的和方法设计；b.实验结果分析和讨论；c.实验结论和意义；d.学生讨论和提问。
三、教学流程：1.引入（5分钟）教师简单介绍非特异性免疫和特异性免疫的基本概念，并引发学生对此话题的思考。
2.非特异性免疫的概念和机制（40分钟）a.教师讲解非特异性免疫的定义和分类；b.教师详细讲解天然免疫和炎症反应的特点和机制；c.教师介绍巨噬细胞和树突状细胞在非特异性免疫中的作用；d.学生观察巨噬细胞对细菌的吞噬实验。
3.特异性免疫的概念和机制（40分钟）a.教师讲解特异性免疫的定义和分类；b.教师详细讲解细胞免疫和体液免疫的特点和机制；c.教师介绍T细胞和B细胞在特异性免疫中的作用。
4.非特异性免疫与特异性免疫的相互关系（40分钟）b.教师介绍非特异性免疫与特异性免疫的协同作用；c.学生参与实验，探究非特异性免疫对特异性免疫的调节作用。
非特异性免疫应答
定义与特点
定义
非特异性免疫应答是机体在长期 进化过程中形成的天然防御功能 ，针对多种病原体的入侵具有普 适性。
特点
非特异性免疫应答具有快速、非 特异性的特点，能够在病原体入 侵初期迅速启动防御机制，防止 感染扩散。
非特异性免疫应答的重要性
01
02
03
防止感染扩散
非特异性免疫应答能够在 病原体入侵初期快速反应 ，有效遏制感染扩散，降 低疾病严重程度。
负向调节
负向调节机制能够抑制过度激活的非特异性免疫应答，防止对正 常组织造成损伤。
信号转导
炎症信号转导
炎症信号转导通路能够将病原体的刺激转化为细胞内的信号，触发 非特异性免疫应答的激活。
细胞因子信号转导
细胞因子信号转导通路能够调控固有免疫细胞的活化、增殖和分化 ，影响非特异性免疫应答的强度和方向。
自身免疫性疾病治疗
深入探讨非特异性免疫应答在自身免疫性疾病中的作用，为开发新型治疗方法和药物提供 理论支持。
THANKS
感谢观看
基因敲除与转基因技术
基因敲除
通过基因敲除技术，可以构建特定基因敲除的动物模型，用于研究特定基因在非 特异性免疫应答中的作用。基因敲除技术包括同源重组、胚胎干细胞技术等。
转基因技术
通过转基因技术，可以将特定基因转入动物体内，以研究其在非特异性免疫应答 中的功能。转基因技术包括显微注射、病毒载体转染等。
细胞培养与分离技术
细胞培养
通过将免疫细胞在体外培养，可以模拟体内环境，研究非特异性免疫细胞的生 长、分化、功能等。细胞培养技术可用于分离和鉴定不同类型的非特异性免疫 细胞，并研究其在不同刺激条件下的反应。
细胞分离
通过特定的分离技术，如密度梯度离心、流式细胞术等，可以从组织或血液中 分离出非特异性免疫细胞，如巨噬细胞、树突状细胞等，用于后续的实验研究 。
11-非特异免疫
免疫-11
辽阳职业技术学院化工系制药微生物
免疫学实验研究阶段
免疫-11
（19世纪末—20世纪中）
实验室发明人工培育疫苗 Pasteur（法） 微生物学、免疫学创始人 1880年 鸡霍乱（巴氏杆菌）弱毒菌苗 1882年 狂犬病病毒弱毒疫苗
辽阳职业技术学院化工系制药微生物
Louis Pasteur 巴 斯 德 (1822-1895年)是一位法国化学家、 微生物学家和免疫学家。1880年 他发现鸡霍乱杆菌的陈旧培养物 能预防鸡霍乱的感染，首先创造 了减毒疫苗。为了纪念一个世纪 前Jenner的功勋，他将这种方法 称之为预防接种（vaccination）， 并将这种制剂称之为疫苗 （ vaccine）, 相 继 他 又 创 造 了 炭 疽杆菌减毒疫苗，狂犬病的减毒 疫苗，兴起了主动免疫的方法 （ active immunization）。
免疫-11
第三篇 免疫学基础
非特异性免疫 特异性免疫 变态反应 免疫学的实际应用
辽阳职业技术学院化工系制药微生物
免疫-11
免疫学发展简史
（一）免疫学的诞生
免疫学是在人类与传染病斗争的过程中 发展起来的。人们在长期实践中看到有很多 流行性疾病，如麻疹、天花等，患病康复后 很少第二次感染。
免疫学于18世纪末开始，至今经历了三 个发展阶段：
辽阳职业技术学院化工系制药微生物
2 吞噬过程
免疫-11
当病原微生物或异物进入体内时，吞噬细胞受趋化
因子作用，向抗原处聚集，并通过吞噬或吞饮方式将 病原微生物或异物摄入细胞内（对细菌等较大异物， 直接伸出伪足将其吞入细胞内，形成吞噬体。对病毒
等较小的异物，则胞膜内陷，闭合形成吞饮小体）。 然后吞噬体或吞饮小体向胞浆内的溶酶体靠近，形成 吞噬溶酶体。溶酶体内的溶菌酶、过氧化氢酶等能直
番茄红素对非特异性免疫功能的体外实验研究
番茄红素对非特异性免疫功能的体外实验研究
袁暾;魏大鹏;廖林川;王霞;蔡美英
【期刊名称】《食品科学》
【年(卷),期】2003(024)004
【摘要】在细胞培养条件下,观察了番茄红素对机体非特异性免疫的影响.结果发现适宜浓度番茄红素乙醇溶液对T淋巴细胞转化有促进作用(p<001).适当浓度的番茄红素对NK细胞杀伤功能也有一定的促进作用(p<005).说明番茄红素对非特异性细胞免疫的主要指标有明确的促进.其原因可能是保护了T淋巴细胞的DNA,避免了增殖过程中DNA复制时可能发生的损伤.番茄红素可以促进细胞胞间通信最终也表现为T淋巴细胞功能的促进.
【总页数】4页(P133-136)
【作者】袁暾;魏大鹏;廖林川;王霞;蔡美英
【作者单位】四川大学基础和法医学院免疫教研室,成都,610041;四川大学基础和法医学院免疫教研室,成都,610041;四川大学基础和法医学院免疫教研室,成
都,610041;四川大学基础和法医学院免疫教研室,成都,610041;四川大学基础和法医学院免疫教研室,成都,610041
【正文语种】中文
【中图分类】R151
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3.黑灵芝对小鼠非特异性免疫功能调节作用的实验研究 [J], 柳璐
4.番茄红素体外抗肿瘤作用实验研究 [J], 张亚楼;陈晓;张月明;温浩;王颢;于亚鹭
5.蒙药清肺汤的抗菌作用及对小鼠非特异性免疫功能影响的实验研究 [J], 巴图德力根;布图雅;闫春景
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韭子增强非特异性免疫和体液免疫作用的实验研究
的 免 疫 低 下 模 型 小 鼠， Ｐ Ｃ 数 较 正 常 组 显 著 减 少 其 Ｆ （ Ｐ＜ ０ ０ ）。韭 子 和 黄 芪 的 Ｐ Ｃ数 比 低 下 组 明 显 升 高 ．１ Ｆ
（ ＜ ０ ０ ）， 达 了 到 正 常 组 水 平 ， 者 无 显 著 差 异 Ｐ ．１ 已 两
火煎煮 ２ ， ｈ 去渣浓缩 为 ５ｍｉ ０ 备用 ， 体外实验时需将制剂经 浓
缩 灭 菌 处 理 。环 磷 酰 胺 （ Ｙ） 上 海 华 联 制 药 公 司 产 品 ； Ｃ 为 Ｐ ＭＩ １４ Ｒ 一 ０为 Ｇｉｃ ６ ｂ ｏ公 司 产 品 ； 代 乙醇 酸 钠 肉汤 为 Ｓｇ 硫 ｉｍａ 公 司产 品 。 置 显 微 镜 （ ｙ ｕ 倒 Ｏｌｍｐ ｓ日本 ） 二 氧化 碳 培 养 箱 （ ； 美 国Ｓ ｅａ ｈ ｌ ｂ公 司） 酶 标 仪 （ ＡＳ美 国 ）超 净 工 作 台 （ 州 净化 ｌ ； Ｄ ； 苏
摘 要 ：目的 ： 究 中 药韭 子 对 机 体 非 特 异 性 免 疫作 用 和 体 液 免 疫 作 用 的 影 响 。 法 ： 立 环磷 酰 胺所 致 免 疫低 下 动 物 模 研 方 建 型 ， 用 中性 红 法 检 测 小 鼠腹 腔 巨噬 细胞 的 吞 噬 功 能 。 而研 究 对 非 特 异 性 免 疫 功 能 的 影 响 ； 溶 血 空 斑 形 成 细 胞 测 定 法 研 采 从 用 究对 体 液 免 疫 功 能 的 影 响 。 结 果 ：韭子 可有 效 地 纠 正 免 疫 功 能 低 下 。 著提 高 巨噬 细 胞 的 吞 噬 功 能 以 厦 使 抗 体 生成 细 胞 数 增 显 多， 两者 恢 复至 正 常 水平 。 结论 ：韭 子 可 有效 地 恢 复 和 增 强免 疫 功 能低 下 小 鼠 的 非 特 异 性 免 疫 和 体 液 免 疫 功 能 。 使 关键词 ： 子 ； 疫功能低下 ； 韭 免 非特 异性 免 疫 ； 液 免 疫 体 中图 分 类 号 ： ９ ． 文 献 标 识 码 ： 文 章 编 号 ：ｏ ８ ０ ０ （０ ６ ０ — ０ Ｉ —０ Ｒ３ ２ １ Ａ １ｏ — １４ ２ ０ ） １ ０ ９ １ 韭子 为百 合科植物 韭（ ｌ ｍ ｔｂ ｒｓｍ Ｒｏｔ ｒ） Ａｌｕ ｕ ｅｏ ｕ ｔ ｅ 的种 ｉ ｌ 内充分混 匀 ， ７ 注入用两 张载 玻片制成 的小室 中， 取 Ｏ１ 熔化 子， 含有 生物 碱、 发油 、 甙、 挥 皂 硫化 物 、 白质 、 蛋 氨基 酸 、 油 石蜡将小室 封闭 ， 置于 ３ ７ Ｃ温箱培养 １ ， 显微镜 下观察并 ｈ在 脂、 维生索ｃ 等成分 ｍ。 国医学认为 ： 祖 韭子 味辛 、 性温 。 甘、 具 记数每个小 室的空斑数 。 汁算 出每百万 个脾 细胞内所古空斑
金灵口服液保肝作用及非特异性免疫功能的药效学实验研究
提 供 。西 洋 参 蜂 王 浆 ｌ ／ ． 国 医学 科 学 院 药 用 植 物 资 Ｏｍｌ支 中
源 开 发 研 究 所 实 验 药 厂 生 产 。联 苯 双 酯 滴 丸 ．． ／ ． １５ｍｇ 丸 北
表 ２ 金 灵 口服 液 对 小 鼠 网 状 内皮 系 统 吞 噬 功 能 的 影 响
腹 腔 注 射 １ Ｃ Ｉ花 生 油 ０ １ｍｌ１ Ｏ Ｃ ． ／ ０ｇ造 模 ． 继 续 给 药 ５ 并
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注 ： 生 理 盐 水 组 比较 ，）Ｐ＜ Ｏ Ｏ 与 １ ．１
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２ ２ ２ 金 灵 口服 液 对 环 磷 酰 胺 性 小 鼠外 周 白细 胞 减 少 和 脾 、 ．．
维普资讯
福 建 中 医 药 ２０ 年 １ ０２ ０月 第 ３ 卷 第 ５ ３ 期
Ｆ ｊ ｎ Ｊ ｕ ｎ ｌ ｆ Ｔ Ｍ ｃｏ ｅ ０ ２ ３ ５ ｕ ｉ ｏ ｒ ａ ｏ Ｃ ａ Ｏ ｔ ｂ ｒ ２ ０ ・３ （ ） ４ ３
・
实验 研 究 ・
金 灵 口服液 保 肝 作 用及 非 特异 性 免 疫 功能 的 药效 学 实 验 研 究
林 玉 贞 ， 符 火 吴
（ 建 中 医学 院 ． 建 福 州 ３０ ０ ） 福 福 ５ ０ ３ 金 灵 口服 液 由金 菇 、 菇 、 苓 、 瓜 、 杞 子 等 中药 经 提 香 茯 南 枸 取 加 工 ． 合 现 代 微 生 物 工 程 技 术 精 制 而 成 。临 床 对 急 、 性 结 慢 肝 炎 患 者 能 明 显 改 善症 状 ， 进 康 复 和 提 高 机 体抗 病 能 力 。 促 为 验 证 其 保 肝 作 用 和 非 特 异 性 免 疫 功 能 ． 们 进 行 了 动 物 药 效 我 学 实 验 研 究 。现 将 实验 结 果 报 道 如 下 。 １ 实 验 材 料
级 免疫学 实验 固有 细胞免疫
三、T淋巴细胞转化实验
• T细胞受到特异性抗原或非特异性丝裂 原刺激时，可发生转化。
–特异性抗原 –非特异性丝裂原：PHA、ConA等。
• 正常人淋巴细胞受到PHA刺激后，其转 化率为60-80%。
大小：增大 –染色质：疏松 –核仁：清晰 –有丝分裂：+/-
[实验步骤] 4. 剪开皮肤，暴露腹腔，找到脾脏
[实验步骤]
5. 分离，摘除脾脏
[实验步骤 ]
6-1. 冲洗脾脏
[实验步骤]
6-2. 冲洗脾脏
[实验步骤 7-1. 用注射器芯研磨脾脏，获得细胞悬液
]
[实验步骤] 7-2. 用注射器芯研磨脾脏，获得细胞悬 液
[实验步骤 8. 低速离心（2000转/分钟，10min）
清水漱口 将唾液涂于空平板中 用吸管吸出，按下图滴入孔内
37℃过夜 明天上午测量溶菌环的直径，记录分析
PBS
1
2
阴性对照
4
3
鸡蛋清 阳性对照
1，4加入唾液标本
二、E玫瑰花环形成实验
实验原理
• T细胞表面标志CD2，即绵羊红细胞受体 • 绵羊红细胞表面CD58可与CD2结合 • 可用于T细胞的计数与分离
10-2 将沉淀细胞重悬于2ml培养液中，进行 细胞形态观察和计数。
级 免疫学 实验 固有 细 胞免疫
2020年4月30日星期四
一、非特异性免疫功能的测定 （一）、天然免疫的组成
• 屏障结构 （1）体表屏障:
物理屏障 化学屏障 生物学屏障 （2）体内屏障结构 全身淋巴结屏障 血-脑屏障 血-胎屏障
• 参与天然免疫的效应分子
–防御素 –补体系统 –细胞因子 –溶菌酶 –其他效应分子
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细胞因子
溶菌酶
其他效应分子
3
3. 参与天然免疫的效应细胞
吞噬细胞 NK细胞
T细胞
B1细胞（CD5+） 肥大细胞 NK
T细胞 上皮细胞及其附属成分
4
一、吞噬细胞及吞噬作用
吞噬作用是指白细胞游出到炎症灶，吞噬 病原体以及组织碎片的过程。 完成此功能的吞噬细胞主要有两种，其吞 噬异物的过程基本相同，但其结构和化学 成分则有所不同。
8
1、实验室准备： （1） 带菌平板的准备：处理好溶壁微 球菌加入琼脂内,到平板,冷凝备用。 （2）每平板打4个小孔，如图。
4
1
3
2
9
2、同学们操作步骤：
清水漱口 将唾液涂于空平板中 用吸管吸出，按下图滴入孔内 37℃过夜
明天上午测量溶菌环的直径，记录分析
10
4
1
PBS 阴性对照
3
2
鸡蛋清 阳性对照
中性粒细胞 巨噬细胞
5
实验方法：中性粒细胞的吞噬作用
金黄色葡萄球菌1-2ml，注入小白鼠腹腔内
5小时后，解剖，腹腔液涂片，染色
观察小吞噬细胞吞噬金黄色葡萄球菌的现象
6
实验方法：巨噬细胞的吞噬作用
10%鸡红细胞悬液注入小白鼠腹腔内
分别于6小时抽取腹腔液涂片，染色
观察巨噬细胞吞噬鸡红细胞的现象
实验三 机体天然免疫功能测定
实验内容
吞噬作用（玻片示教） 溶菌酶实验（1个平板/
组） 补体经典途径激活实验——溶血反应
（1份/组）
1
二、天然免疫的组成
1、屏障结构
（1）体表屏障: 物理屏障 化学屏障 生物学屏障 （2）体内屏障结构 全身淋巴结屏障 血-脑屏障 血-胎屏障
2
2. 参与天然免疫的效应分子
7
二、溶菌酶试验
溶菌酶是正常体液与分泌液中所含的一种低分子量的 碱性蛋白质，主要来源于巨噬细胞，是天然免疫中一 种重要的体液杀菌成分。 肽聚糖是细菌细胞壁中的重要成分，溶菌酶能够水解 肽聚糖从而使细菌溶解。 细 革兰氏阳性：溶解 菌 革兰氏阴性：肽聚糖外面有一层脂多糖和脂蛋 白，一般情况下不受溶菌酶的影响。
细胞浆
着色 空泡或伪足
22
23
24
3，4加入唾液标本
11
三、补体溶血反应
原理：补体经 过经典途径激 活后产生溶解 细胞等作用。 RBC（Ag）+ 溶血素（Ab） +补体 红细胞 溶解
12
方法：
管号
1
2%红细 胞 0.25
溶血素 0.25
补体 0.25
生理盐 水 0.25
0.25 0.25
0.25
-------
18
19
20
（二） T淋巴细胞转化实验
T细胞受到特异性抗原或非特异性刺激
时,可发生转化。 特异性抗原 非特异性抗原刺激：PHA、ConA等。 正常人淋巴细胞受到PHA刺激后，其转 化率为60-80%。
21
转化细胞形态特征
细胞体积：增大
细胞核
大小：增大
染色质：疏松
核仁：清晰 有丝分裂：+/-
检测免疫细胞的数量和功能，是判断集体
免疫功能的状态的重要指标。
临床上各种类型免疫免疫缺陷症、自身免
疫性疾病、肿瘤等疾病均可出现淋巴细胞 数量或功能的变化。
16
淋巴细胞分离
17
（一）E玫瑰花环形成实验
实验原理 T细胞表面有CD2分子(绵羊红细胞受
体) 绵羊红细胞表面有CD58分子 可用于T细胞的计数与分离
---0.25 ----
0.5
0.5 0.75
13
室温15-30min后看结果
结果与判断
红细胞溶解，液体变为红色透明（+） 不溶解，液体均匀浑浊或有少量红细胞沉 于管底（-）
14
细胞免疫功能测定
E玫瑰花环花环形成实验(玻片示教) T淋巴细胞转化实验(玻片示教)
15
一、细胞免疫功能测定