锦橙皮中提取PMFs及总酚、总黄酮含量的测定
研究脐橙皮中黄酮提炼工艺
英文文献
Johnson RK. Flavonoids and their potential for prevention of chronic diseases[J]. Nutrition Research Reviews, 2018, 31(1): 121.
Tomás-Barberán FA, Espín JC. Flavonoids as antioxidants[J]. Journal of Nutritional Biochemistry, 2016, 27(5): 595603.
。
研究内容和方法
研究内容
研究脐橙皮中黄酮的提取工艺，包括提取 剂的选择、提取温度、提取时间等因素对 黄酮提取量的影响。
VS
研究方法
采用单因素实验和正交实验相结合的方法 ，对提取工艺进行优化，得出最佳工艺条 件。
研究目的和任务
研究目的
通过本研究，旨在优化脐橙皮中黄酮的提取工艺，为工业化生产提供技术支持。
脐橙皮黄酮的提取和应用可创造就业机会，促进 地方经济发展。
对未来研究的建议和展望
进一步研究脐橙皮黄酮类化合物的组成和结构，探讨其 在人体内的药理作用和生物活性。
研究脐橙皮黄酮的工业化生产工艺和技术，提高生产效 率和产品质量。
探索脐橙皮黄酮在其他领域的应用，如生物医学、化妆 品和环境保护等方面。
Hale Waihona Puke 6提供高效液相色谱法测定黄酮含量的详细方法，包括标准曲线的制作、样品的前处理和测定等。
数据分析
利用统计软件对实验数据进行处理和分析，如单因素方差分析、回归分析等，得出黄酮含量与提取条 件之间的关系。
实验结论
实验结果总结
总结实验得出脐橙皮中黄酮的最佳提取工艺条件，并阐述实验结果对脐橙皮的开 发利用具有重要意义。
锦橙皮膳食纤维的提取、抗氧化活性及毒理学研究的开题报告
锦橙皮膳食纤维的提取、抗氧化活性及毒理学研究
的开题报告
研究背景：
随着现代生活节奏的加快和人们饮食结构的改变，许多人的肠道健
康出现了问题。
膳食纤维作为一种重要的保健物质，能够维持肠道健康
并对人体健康有着重要的作用。
锦橙皮中含有丰富的膳食纤维，并且还
具有很好的抗氧化活性，因此锦橙皮膳食纤维的提取、抗氧化活性及毒
理学研究具有重要的理论和实践意义。
研究内容：
1.锦橙皮膳食纤维的提取：采用高效液相色谱(HPLC)和气相色谱(GC)等方法，对锦橙皮的膳食纤维进行提取，探究其最佳提取工艺，并进行
质量分析。
2.锦橙皮膳食纤维抗氧化活性的研究：通过各种化学方法(如DPPH
自由基清除法、还原力法等)，对锦橙皮膳食纤维的抗氧化活性进行测定，并与其他膳食纤维进行比较分析。
3.锦橙皮膳食纤维毒理学研究：采用小鼠模型，研究锦橙皮膳食纤
维的急性毒性、慢性毒性及长期食用对小鼠肠道的影响。
研究意义：
通过对锦橙皮膳食纤维的提取、抗氧化活性研究及毒理学研究，可
以为锦橙皮膳食纤维在食品、医药等领域应用提供理论和实践基础，同
时也对人们的饮食健康有重要的意义。
紫外可见分光光度法测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量
紫外可见分光光度法测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量紫外可见分光光度法是一种常用的分析方法，可以用于测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量。
黄酮类化合物是一类具有植物抗氧化、抗炎症、抗肿瘤等生物活性的化合物，对人体健康具有重要意义。
柑橘是一种常见的水果，其皮中富含黄酮类化合物，具有很高的营养价值。
测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量对于评价柑橘品质、挖掘植物资源具有重要意义。
我们需要准备实验所需材料和设备。
实验材料包括不同品种柑橘的果皮样品、乙醇、甲醇、乙酸乙酯等化学试剂。
实验设备包括紫外可见分光光度计、离心机、玻璃研钵、移液管等。
对实验材料和设备进行充分的准备工作，是保证实验顺利进行的前提。
接着，我们需要进行样品的提取和预处理。
首先将柑橘皮样品进行粉碎，然后取适量的样品加入甲醇进行浸提，用搅拌器搅拌均匀，再加入乙醇进行提取。
提取完成后，使用离心机将提取液离心，得到澄清的上清液。
将上清液转移到新的离心管中，加入乙酸乙酯进行萃取。
将萃取液蒸干，得到黄酮类化合物的纯化提取物。
接下来是测定提取物的总黄酮含量。
使用紫外可见分光光度计测定提取物的吸光度，建立标准曲线，通过测定吸光度与浓度之间的关系，计算出总黄酮含量。
总黄酮含量的测定可以根据不同品种柑橘的果皮样品分别进行，最终得到不同品种柑橘皮中总黄酮含量的结果。
分析实验结果并进行数据处理。
将得到的数据进行统计分析，比较不同品种柑橘皮中总黄酮含量的差异，评价柑橘品质。
通过对实验结果的分析，可以为不同品种柑橘的栽培和利用提供科学依据，为挖掘植物资源和改良柑橘品种提供参考。
利用紫外可见分光光度法测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量，可以为柑橘品质评价和植物资源开发提供重要依据。
这一分析方法简单、快速、准确，具有较好的应用前景，对于推动柑橘产业的发展具有重要的意义。
希望未来能够进一步深入研究，提高分析方法的灵敏度和准确性，为柑橘品质评价和资源开发提供更可靠的技术支撑。
紫外可见分光光度法测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量
紫外可见分光光度法测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量【摘要】紫外可见分光光度法是一种常用的分析方法，本研究旨在通过该方法测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量。
首先介绍了紫外可见分光光度法的原理，并说明了柑橘皮中总黄酮的提取方法。
随后详细描述了不同品种柑橘皮中总黄酮含量的测定方法，并对实验结果进行了分析。
结果表明不同品种柑橘皮中总黄酮含量存在明显差异。
在讨论部分，对实验结果进行了深入分析，并探讨了可能的影响因素。
总结指出本研究的意义，并展望了未来的研究方向，强调了该研究对于柑橘皮总黄酮含量测定的重要性。
本研究为进一步探讨柑橘皮中总黄酮含量提供了重要参考。
【关键词】紫外可见分光光度法、柑橘皮、总黄酮含量、提取方法、测定方法、实验结果分析、讨论、总结、展望、研究意义。
1. 引言1.1 研究背景柑橘是一类常见的水果，富含丰富的维生素和抗氧化物质。
黄酮类化合物被广泛认为是对人体健康有益的活性成分之一。
黄酮类化合物具有抗氧化、抗炎和抗癌等多种生理活性，对预防心血管疾病、抗菌、抗病毒等方面也具有一定的作用。
随着人们对健康意识的提高，关于柑橘中黄酮类化合物的研究也日益受到关注。
总黄酮含量是评价柑橘中黄酮类化合物含量的重要指标之一。
目前，常用的方法包括高效液相色谱法、光谱法等。
紫外可见分光光度法是一种简便快捷的方法，被广泛应用于分析总黄酮含量。
本研究旨在利用紫外可见分光光度法，比较不同品种柑橘皮中总黄酮含量的差异，为人们进一步了解柑橘中黄酮类化合物的含量提供参考数据。
通过本研究，可以为柑橘的种质改良、产品开发以及食品安全等方面提供科学依据和参考。
1.2 目的目的：本研究旨在比较不同品种柑橘皮中总黄酮含量的差异，探讨各品种柑橘皮中总黄酮的含量及分布规律，为进一步研究柑橘的保健功效和品质提供科学依据。
通过紫外可见分光光度法测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量，可以为选择适宜柑橘品种生产黄酮类化合物丰富的产品提供参考，为柑橘皮的综合利用提供科学依据和经济价值，推动柑橘产业的发展。
杭白菊不同溶剂提取物中总酚和总黄酮的含量及抗氧化活性比较
杭白菊不同溶剂提取物中总酚和总黄酮的含量及抗氧化活性比较周玉波;马铭研;曹雯;严爱娟【期刊名称】《中国民族民间医药》【年(卷),期】2024(33)2【摘要】分别采用水、70%乙醇、70%甲醇三种提取溶剂对杭白菊进行超声波提取,测定各种溶剂提取物中总酚和总黄酮的含量,比较提取物的体外抗氧化活性。
结果发现,不同溶剂提取物中总酚和总黄酮含量存在显著性差异(P<0.05)。
其中,70%乙醇作为提取溶剂提取的总酚和总黄酮含量最高,分别为6.66 mg GAE/g和15.64 mg RE/g,70%甲醇次之,而水作为溶剂提取效率是最低的。
抗氧化活性结果表明,70%乙醇提取物的DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力和FRAP铁离子还原能力均为最高,分别为30.93μmol TE/g、113.30μmol TE/g和120.23μmol TE/g,水提物的最低,三种提取物总酚和总黄酮的含量与ABTS自由基清除能力和FRAP铁离子还原能力之间存在显著正相关性(P<0.05)。
杭白菊具有很高的营养价值和药用价值,本研究将为进一步开发利用杭白菊提供一定的理论基础和科学依据。
【总页数】6页(P18-23)【作者】周玉波;马铭研;曹雯;严爱娟【作者单位】浙江药科职业大学药学院【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.向日葵茎髓醇提物中不同溶剂萃取部位总酚、总黄酮含量与抗氧化活性的相关性2.白花菜子不同溶剂提取物总多酚、总黄酮含量及抗氧化活性测定3.窝儿七不同提取物中总黄酮总酚含量及其抗氧化活性的研究4.黄色洋葱皮不同溶剂多酚提取物的总酚、总黄酮含量及抗氧化活性5.乌天麻不同溶剂提取物的总多酚、总黄酮含量及其抗氧化能力因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
葡萄皮中多酚物质的提取及总酚含量的测定——实验方案
实验方案1材料和方法1.1原料与试剂葡萄皮、甲醇、乙醇、KH2 PO4 、Na2HPO4 、FeSO4 、酒石酸钾钠、没食子酸等均为国产分析纯试剂。
1.2主要仪器722型分光光度计,电子天平，恒温水浴锅、粉碎机、减压抽滤机1.3 试验方法1.3.1 提取工艺原料预处理→溶剂浸泡→回流浸提→精密滤纸过滤→分离过滤液→旋转蒸发脱除溶剂→烘干1.3.2 操作要点(1) 原料的预处理:将葡萄皮自然晾干,粉碎过40目筛,避光保存。
(2) 浸提溶剂的选择: 称取葡萄皮粉末1g(准确至01000 1g) ,分别加入蒸馏水、体积分数60%乙醇、体积分数60%甲醇、体积分数95%乙醇、体积分数95%甲醇,在30℃水浴浸提1h ,趁热减压抽滤，定容至25 mL。
吸取1 mL 显色测定吸光度,平行测定3次,计算总酚含量。
(3) 浸提单因素试验:对可能影响葡萄皮多酚得率的几个因素(浸提剂浓度、料液比、浸提时间、浸提温度)分别作单因素试验,测定提取液的吸光度,平行测定3次,计算总酚含量。
(4) 最佳浸提条件的选择: 以浸提剂浓度、料液比、浸提时间、浸提温度为因素, 选择L9 (34) 正交表进行四因素三水平试验,各处理重复3 次,并进行方差分析。
1.3.3 总酚含量的测定1.3.3.1 样品吸光度的测定准确吸取1mL 试液,转移至25mL 容量瓶中,加蒸馏水4mL 和酒石酸亚铁溶液5mL ,充分混合,再加pH715 的缓冲溶液至刻度,用10mm 比色杯,在波长540nm 处,以试剂空白溶液作参比,测吸光度A 。
1.3.3.2 标准曲线的制作准确称取没食子酸标准样品0.15 g ,加蒸馏水溶解并移入100mL 容量瓶中定容,在6只100 mL 容量瓶中分别加入510 g/ L 没食子酸标准样品0、1、2、3、5、10 mL ,加入蒸馏水定容至100 mL ,各吸取1mL ,同1.3.3.1方法测定,绘制标准曲线。
1.3.3.3 结果计算葡萄皮总酚含量： w = CV/m式中:w ：多酚含量(mg/ g);C：,葡萄皮多酚质量浓度(mg/mL);V ：提取液的体积(mL);m：,葡萄皮质量(g)。
橘皮中总黄酮的提取及抗氧化性研究
橘皮中总黄酮的提取及抗氧化性研究张洪杰;李文凯;刘娜【摘要】In this paper , the total flavonoids in orange peel extract and antioxidant was researched with ultra-sound-assisted ethanol extraction method .Response surface analysis methodology ( RSM) was applied to optimize the ultrasonic -assisted extraction conditions of general flavonoids from orange peel .Base on the single-factor experiments , three-factors-three-levels Box-Behnken central component experiments design was applied .The concentrations of ethanol in solvent , extraction time and ratio of liquid to solid were chosen as casual factors .The results show that the optimum conditions were 72%ethanol, extracting time 50 min, ratio of liquid to solid 50∶1 mL/g.Validation experiments were carried out under these optimum conditions , the average yield of general flavonoids is 1.5 %.The antioxidant flavonoids experimental results showed that orange peel extract flavonoids have some antioxidant , its hydroxyl radical scavenging effect is greater than Vc .%采用超声辅助乙醇浸取的方法，对橘皮中总黄酮的提取及其抗氧化性进行研究．在单因素实验基础上，选择提取过程中的乙醇浓度、提取时间和液料比为提取因子，进行三因素三水平Box-Behnken 中心组合设计，采用响应面法（ RSM ）分析3个因素对橘皮总黄酮提取率的影响；确定橘皮总黄酮提取得率的最佳工艺为：乙醇浓度为72％、提取时间为50 min、液料比为50∶1 mL/g，实际提取率平均值为1.50％．并对提取液中的黄酮类化合物进行抗氧化性实验，结果表明：橘皮提取液中黄酮类化合物具有一定的抗氧化性，其对羟基自由基的清除作用大于Vc．【期刊名称】《江苏科技大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2014(000)001【总页数】6页(P87-92)【关键词】橘皮;超声波;响应面优化;抗氧化性【作者】张洪杰;李文凯;刘娜【作者单位】江苏科技大学生物与化学工程学院，江苏镇江212003;江苏科技大学生物与化学工程学院，江苏镇江212003;江苏科技大学生物与化学工程学院，江苏镇江212003【正文语种】中文【中图分类】S666我国是世界柑桔大国，橘皮中富含橙皮甙、桔皮素、果胶以及色素、黄酮类和纤维素等多种生物活性成分，采用高科技手段将其“吃光用尽”是可能的，预期的经济效益也是显而易见的.目前对橘柑皮渣的利用主要有两个途径:一是从中提取精油、色素、果胶、橙皮苷等;另一个是利用微生物技术发酵，果醋、乳酸饮料等食品添加剂主要就是利用微生物技术发酵果皮生产出来的.植物中黄酮类化合物的提取是近年来具有研究意义的课题，常见的提取黄酮类化合物的方法有溶剂萃取法、酶法、超临界流体萃取法［1］、超声波提取法、微波提取法等［2］.由于其具有较好的抗氧化性及自由基的清除作用，黄酮类化合物越来越受到人们的重视［3］.本实验以橘皮为原料，超声辅助乙醇浸取的方法提取橘皮中的黄酮类物质，讨论超声波功率、乙醇浓度、提取时间、液料比等4个因素对总黄酮提取率的影响;通过Design－Expert V8.0.6软件设计橘皮中总黄酮提取率工艺实验，并通过响应面法优化法确定最佳提取工艺;采用Fenton反应的方法建立反应体系模型［4］，在相同条件下，比较橘皮提取液和VC对羟基自由基的清除效果.1 实验1.1 材料和试剂橘皮(超市购买，产地广州)、芦丁(生化试剂，国药集团化学试剂有限公司)、亚硝酸钠、无水乙醇、氢氧化钠、硝酸铝、氯化铝、邻二氮菲、氯化铁、双氧水、氯化亚铁、浓盐酸、抗坏血酸(Vc)(均为分析纯).1.2 实验仪器设备紫外可见光分光光度计UV－3010(上海精宏实验设备有限公司)、电子天平FA2004(上海精密仪器制造厂)、电热恒温鼓风干燥箱101A－2(上海市实验仪器总厂)、超声波清CQ－250DB(上海第三分析仪器厂)、离心沉淀机80－2B(上海市实验仪器总厂)等.1.3 实验方法1.3.1 总黄酮提取的工艺路线橘皮干燥→粉碎→超声辅助乙醇浸取→抽滤得滤液→硝酸铝显色法测定吸光度→计算总黄酮量.称取一定量的橘皮粉于锥形瓶中，加入乙醇溶液超声浸取，精确移取适量的提取液置于25.00 mL的比色管中，用60%的乙醇稀释到10.00mL，加入5%的亚硝酸钠溶液1.00mL，摇匀，静置6 min;加入10%硝酸铝溶液1.00mL，摇匀，静置6 min;加入4%氢氧化钠10.00mL，蒸馏水定容至刻度，摇匀，静置15min后在510 nm处测定其吸光度［5］.1.3.2 橘皮总黄酮的提取及测定将芦丁置于干燥箱内120℃条件下恒重1.5h，然后精确称取芦丁标准品20mg，用60%乙醇溶解，配成100mL的溶液，备用，此时芦丁标准溶液浓度为0.2mg/mL.精确移取芦丁标准溶液 0.00，1.00，2.00， 3.00，4.00，5.00，6.00mL于7支25mL的比色管中，其他条件参照1.3.1进行实验，以0.00mL为空白溶液，以吸光度和芦丁溶液浓度作图，绘制标准曲线，得C=0.0977A+0.000 6(R2=0.9996，在0.008～0.048 mg/mL范围内呈良好的线性关系).1.3.3 总黄酮质量与提取率的计算根据标准曲线计算总黄酮的质量式中:m为总黄酮质量(g);A为样品溶液吸光度;V为过滤后的体积(mL);w为稀释倍数.式中:y为总黄酮提取得率(%);m为总黄酮质量(g);M为原料质量(g).1.4 橘皮中提取物的抗氧化性研究参考文献［6］的方法，在10.00mL具塞试管中加入1mL 0.75moL/L邻二氮菲溶液，2.00mL 0.2 moL/L、pH7.4磷酸盐缓冲溶液和蒸馏水1.00mL，充分摇匀，再加入0.75moL/LFeSO4溶液，摇匀后加入1.00mL3%双氧水启动反应，37℃水浴1 h后在510 nm处测量吸光度A1值，用1.00mL提取液代替1.00 mL双氧水测定吸光度 A2，用提取液1.00mL代替1mL蒸馏水测定吸光度A3值.黄酮类化合物可与Fenton系统中自由基反应，从而阻断其反应链，导致样品吸光度降低，按照实验方法测定吸光度，并计算清除率.式中:S为清除率(%)，A1为不加样液时的吸光度，A2为不加H2O2时的吸光度，A3为加入H2O2和样液的吸光度.2 结果与分析2.1 单因素实验2.1.1 提取时间对橘皮总黄酮提取得率的影响准确称取1.00 g橘皮粉置于锥形瓶，固定乙醇浓度为60%，液料比为20∶1，超声波功率为125 W，浸取20，30，40，50，60，70min后，分别吸取提取液1.00mL，其他条件参照1.3.1进行实验，以不加入提取液为空白溶液，结果见图1.图1 提取时间对橘皮总黄酮提取得率的影响Fig.1 Effect time on extraction of total flavonoid from orange peel由图1可知在20～50min内，随着提取时间的延长，提取得率随时间的延长增大，20～40min黄酮提取得率增加显著.50min之后总黄酮提取得率随时间变化下降，可能是因为橘皮中所含黄酮类物质已基本溶出，所以增加提取时间不能使提取得率升高.另外超声时间长，使得环境温度升高，部分溶剂乙醇挥发从而影响提取效果;温度升高，蛋白质及杂质沉淀下来，影响黄酮类物质的溶出，另一方面温度升高也导致提取液中有效成分破坏，黄酮分解.所以选择最佳提取时间为50min.2.1.2 液料比对橘皮总黄酮提取得率的影响准确提取处理好的橘皮粉1.00 g，在60%的乙醇，超声波功率为125W，提取时间为50min的条件下，选取液料比分别为10∶1，20∶1，30∶1，40∶1，50∶1，60∶1ml/g，研究液料比对橘皮粉总黄酮提取得率的影响，分别吸取提取液1.00mL，其他条件参照1.3.1进行实验，以不加入提取液为空白溶液，结果见图2.图2 液料比对橘皮总黄酮提取率的影响Fig.2 Effect of liquid-solid ratio on extraction of total flavonoid from orange peel由图2可以看出，液料比不断增大，总黄酮提取得率呈现逐渐增大趋势，其原因可能是液料比增大，系统稀释度就增大，有利于黄酮的溶出，液料比的提高主要是增加了物料体系与提取剂体系间有效成分的浓度差，也减少了物料内部有效成分的残余量，从而提高提取得率.在液料比为50∶1后继续增加液料比，得率有下降的趋势.所以选择50∶1为最佳液料比.2.1.3 乙醇浓度对橘皮总黄酮提取得率的影响准确称取1.00 g橘皮粉，在超声波功率为125 W、提取时间为50min、液料比为50∶1的条件下，选择乙醇浓度分别为40%，50%，60%，70%，80%，90%，研究乙醇浓度对橘皮粉黄酮提取率的影响.分别吸取提取液1.00 mL，其他条件参照1.3.1进行实验，以不加入提取液为空白溶液，结果见图3.由图3可知，随着乙醇浓度的增加，橘皮中总黄酮提取得率出现先增高后基本处于稳定，变化不明显.因为乙醇浓度提高，增加了提取剂对物料的渗透性，并提高了黄酮类化合物的溶解度，从而提高黄酮提取得率.下降的原因可能是由于乙醇浓度过高时，挥发严重，同时一些醇溶性杂质、色素、脂溶性强的成分溶出量增加，与黄酮类化合物竞争与乙醇结合，因而导致提取得率略有下降.所以乙醇最佳浓度为70%.图3 乙醇浓度对橘皮总黄酮提取得率的影响Fig.3 Effect of concentration of alcoholon extraction of total flavonoid from orange peel2.1.4 超声功率对橘皮总黄酮提取得率的影响准确称取1.00g橘皮粉，在提取时间为50min、液料比为50∶1、乙醇浓度为70%的条件下，选择超声波功率分别为125，150，175，200，225，250W，研究超声波功率对橘皮粉黄酮提取得率的影响.分别吸取提取液1.00mL，其他条件参照1.3.1进行实验，以不加入提取液为空白溶液，结果见图4.图4 超声功率对橘皮总黄酮提取率的影响Fig.4 Effect of ultrasonic power of total flavonoid from orange peel由图4可知，随着超声功率的增加，总黄酮提取得率逐渐增大，慢慢趋于平衡.由于实验设备最大超声功率为250W，实验选250W为超声功率，并且在后面的响应面法优化提取工艺不予考虑.2.2 响应面优化分析在单因素实验基础上，固定超声波功率为250 W，以乙醇体积分数、提取时间和液料比为自变量，橘皮中总黄酮提取得率为响应值(Y)，响应面实验因素与水平见表1，实验分析结果见表2.表1 响应面实验因素与水平Table1 Factors and levels of responsesurface(RS)test代码/min 40 50 60 B:液料比/(mL/g)40∶1 50∶1 60∶1 C:乙醇浓度－1 0 1 A:提取时间实验因素/% 60 70 80实验随机次序进行，利用 Design－ExpertV8.0.6软件对数据进行多元回归拟合，得到总黄酮提取得率Y为目标函数:表2 响应面及实验分析结果Table2 Program and results of RS test序号 A:提取时间 B:液料比 C:乙醇浓度黄酮提取得率Y/% 1－1 0 1 1.41 2 0 0 0 1.51 3－1 1.36 4－1 －1 0 1.37 5－1 0 －1 1.39 6 0－1 －1 1.32 1 0 7 1.50 8 1 1 0 1.320 0 0 1.32 10 0 －1 1 1.34 11 1 0 1 1.41 12 0 0 0 1.51 13 1 －1 0 1.37 14 －11 0 1.33 15 0 0 0 1.51 16 0 1 －1 1.29 9 0 1 1 17 0 0 0 1.50表3 回归分析结果Table3 Statistical results of regression analysis值影响程度参数自由度平方和均方 F值 P总模型 9 0.099 0.011 183.86 ＜0.0001显著A 1 0.0002 0.0002 3.33 0.1106 B 1 0.00245 0.00245 40.83 0.0004 显著C 10.0018 0.0018 30 0.0009 显著AB 1 0.000025 0.000025 0.42 0.5392 AC 1 0.000225 0.000225 3.75 0.0940 BC 1 0.000025 0.000025 0.42 0.5392 A2 1 0.007339 0.007339 122.32 ＜0.0001 显著B2 1 0.057 0.057 956.53 ＜0.0001显著C2 1 0.022 0.022 361.27 ＜0.0001 显著失拟性 3 0.0003 0.0001 3.330.1376不显著表4 模型可信度分析表Table4 Fit statistics for Y可信度参数参数值样品标准偏差Adeq Precision 37.621 Std Dev 0.007Std746平均值M 1.40决定系数R0.9958调整后的决定系数R Adj 0.9904变异系数C.V./% 0.55信噪比回归方程中各变量对响应值影响的显著性用F检验来判定，概率P(F＞Fα)值越小，则相应变量的显著程度越高，P(F＞Fα)＜0.01时影响为高度显著.表3中模型的F值为183.86，P值为小于0.0001，说明模型回归高度显著.失拟性P值为0.1376，大于0.05，表示失拟性不显著，说明该模型是合理的.B，C，A2，B2，C2的P值均小于0.05，对总黄酮的提取率影响显著.模型调整后决定系数R=0.9904，说明模型能解释99.04的响应值变化，仅有总变异的0.96%不能用此模型解释;信噪比(Adeq-Precision)=37.621＞4，说明方程的拟合度和可信度均较高，可用于预测反应的分离度.C.V./%(Y的变异系数)表示试验的精确度，C.V./%值越高，说明试验的可靠性越低.该试验中C.V.=0.55%，说明试验操作可信.综合分析该模型拟合程度良好，可以用来分析和预测橘皮总黄酮提取的最佳操作条件.图5～7是通过多元回归方程所做的响应曲面图及其等高线图，所拟合的响应曲面和等高线能比较直观地反应各因素间的互交作用.图5 Y=f(A，B)的响应面和等高线Fig.5 Responsive surfaces and contours ofY=f(A，B)图6 Y=f(B，C)的响应面和等高线Fig.6 Responsive surfaces and contours ofY=f(B，C)图7 Y=f(A，C)的响应面和等高线Fig.7 Responsive surfaces and contours ofY=f(A，C)由图5～7直观地反映了各因素对响应值的影响，等高线均在－1～1范围内，3个响应曲面均为开口向下并有最高点，说明响应值(橘皮总黄酮提取得率)最大值在设计的范围之内.由Design－ExpertV8.0.6软件分析得到最佳提取条件为乙醇体积分数为71.78%，液料比为48.92∶1，提取时间为50.2min，理论总黄酮提取率为1.51%.为实验操作方便，总黄酮提取优化工艺参数选为乙醇体积分数72%，液料比为50∶1，提取时间为50min.在此条件下进行6次平行试验，橘皮中总黄酮平均提取得率是1.50%，与理论值相差0.01%，由此可知，响应面优化橘皮总黄酮提取工艺参数准确，具有实际可操作性.2.3 橘皮中总黄酮的抗氧化性橘皮总黄酮对羟基自由基的清除效果如图8.不同浓度的橘皮黄酮对该体系中产生的·OH均有一定的清除作用，并且随着总黄酮浓度的增加，对羟基自由基的清除能力增强;浓度相同时，总黄酮清除羟基自由基活性能力略高于Vc.图8 橘皮总黄酮对·OH自由基的清除作用Fig.8 ·OH scavenging effects of total flavonoid from orange peel3 结论本实验在单因素实验的基础上，采用响应面试验设计方法对超声波辅助乙醇提取橘皮总黄酮的工艺进行优化.实验得到的模型回归显著，失拟误差不显著，说明通过本实验所建立的二次回归方程能较好地描述各因素和响应值之间的关系.应用Design－Expert软件分析得到橘皮总黄酮提取的最佳提取工艺条件为:乙醇浓度72%、液料比50∶1 mL/g、超声时间50min，在此条件下，实际提取得率最高达1.50%，跟预测值基本一致，说明该模型可很好地预测试验结果.橘皮中总黄酮具有一定的抗氧化作用，其在Fenton体系中对羟基自由基的清除率大于同浓度的Vc.参考文献(References)［1］ Tirkey N，PiLkhwaL S，Kuhad A，et al.Hesperidin，acitrusbiofLavinoid，decreases the oxidative stress produced by carbon tetrachLoride in rat Liver and kidney［J］.BMC PharmacoL，2005，5(1):56－58.［2］张年凤，黄阿根，宋秀梅，等.超声波辅助乙醇浸提橘皮黄酮的工艺研究［J］.中国酿造，2009，29(2):26－27.Zhang Nianfeng，Huang Agen，Song Xiumei，et al.Ultrasound-assisted extraction of orange peel flavonoids technology［J］.China Brewing，2009，29(2):26－27.(in Chinese)［3］宣以巍，刘英，江萍，等.柑橘类黄酮的生理活性及其研究现状［J］.科技通报，2008，24(4):494－497.Xuan Yiwei，Liu Ying，Jiang Ping，et al.Literature review of biological activity and research rospects of citrus flavonoid［J］.Bulletin of Science and Technology，2008，24(4):494－497.(in Chinese)［4］索金玲，彭秧，张纵圆，等.石榴叶总黄酮提取工艺及体外抗氧化性研究［J］.生物技术，2009，19(1):63－65.Sou Jinling，Peng Yang，Zhang Zongyuan，et al.Studies on the optimum extraction and antioxidative activity of total flavonoids from punica granaturn leave［J］.Biotechnology，2009，19(1):63－65.(in Chinese) ［5］苏雅静，孙爱东，高雪娟.竹笋壳总黄酮提取工艺的响应面设计优化［J］.食品工业科技，2010，31(1): 233－235.Su Yajing，Sun Aidong，Gao Xuejuan.Optimization of extracting conditions of flavonoids from bamboo shoot shellwith response surface analysis［J］.Science and Technology of Food Industry，2010，31(1):233－235.(in Chinese)［6］盛玮，薛建平，谢笔钧.怀山药零余子提取物抗氧化活性的研究［J］.食品科学，2009，30(3):92－94.ShengWei，Xue Jianping，Xie Bijun.Study on antioxidant activity of extracts from bulbil of dioscorea opposita［J］.Food Science，2009，30(3):92－94.(in Chinese)。
紫外可见分光光度法测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量
紫外可见分光光度法测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量【摘要】本研究采用紫外可见分光光度法测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量。
在实验中，我们首先介绍了紫外可见分光光度法测定总黄酮含量的原理，然后详细描述了实验方法和结果分析。
通过比较不同品种柑橘皮中总黄酮含量的数据，我们发现存在明显差异，且不同品种之间的差异可能受到影响因素的影响。
我们对实验结果进行总结，并展望未来可能的研究方向。
本研究为进一步探讨柑橘皮中总黄酮含量的相关问题提供了重要参考。
【关键词】柑橘皮、总黄酮、紫外可见分光光度法、测定、不同品种、含量比较、影响因素、实验方法、实验结果、结论、展望、研究背景、研究目的1. 引言1.1 研究背景柑橘是一种广泛栽培的水果，其具有丰富的营养价值和药用价值。
黄酮类化合物是柑橘皮中的主要活性成分之一。
黄酮类化合物具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性，对人体健康具有重要意义。
随着人们对健康的关注日益增加，柑橘皮中黄酮类化合物的研究备受关注。
紫外可见分光光度法是一种常用的检测方法，具有简便、快速、准确的特点。
通过该方法可以测定柑橘皮中总黄酮含量，为进一步研究柑橘皮中黄酮类物质及其健康功能提供可靠数据支持。
本研究旨在通过紫外可见分光光度法测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量，探讨不同品种柑橘皮中黄酮含量的差异及影响因素，为深入挖掘柑橘皮中黄酮类物质的功能和应用提供科学依据。
通过本研究，有望为柑橘产品的开发利用和推广提供重要参考依据，对提升柑橘产业竞争力和推动健康产业发展具有一定的指导意义。
1.2 研究目的本研究旨在利用紫外可见分光光度法测定不同品种柑橘皮中总黄酮含量，通过对比分析不同品种柑橘皮中总黄酮含量的差异，探讨柑橘皮中总黄酮含量的分布规律和影响因素，为进一步研究柑橘皮中总黄酮的功能和应用提供依据。
通过本研究，可以为柑橘皮中总黄酮的有效提取及利用提供科学依据，为柑橘产品的加工开发提供技术支持，同时也有助于推动柑橘产业的发展和提升柑橘产品的附加值。
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酚 的含量 ， 再测定 乙醚萃取物 中总 酚的含量 。浓 缩样稀释 ２ ０
倍， 过滤后测定 。精密吸取 样 品 ０ １ Ｌ置 于 ４支 １ｍ ．ｍ ０ Ｌ刻度 管 中 ， 入 ２ ５ Ｌ Ｆｌ 加 ． ｍ ｏ ｎ—Ｃｏａｅ ｉ ｉ ｈ ｕ试 剂 ， 匀 后静 置 ３至 ｃ 摇 ８ｉ ｍｎ后再加入 ２ ５ Ｌ １％ 碳酸钠 混合 后反应 １ ， ． ｍ ０ ｈ 用蒸 馏水 定容至刻度 ， 同时 以不加 样 品溶液 为空 白， ７Ｏ ｔ 处 比色 在 ６ｎ ｏ 测定样品的吸光值 ， 由标曲回归方程换算其含量 。 ２２ 总黄酮含量的测定 ． 黄 酮类 物质是 以 ２一苯基 一吡喃
锦 橙 皮 中提 取 Ｐ ＭＦ ｓ及 总酚 黄酮 含 量 的测 定 、 总
何 耀 纲
（ 广西桂林市卫生学校 ， 广西 ， 桂林 ， １０ ） ５ ０ ２ ４
【 摘要 】 采用浸提的方法从锦橙皮提取出多甲氧基黄酮（ Ｍ ｓ， Ｐ Ｆ）测定其 总黄酮和总酚的含量 ， 通过 Ｈ Ｌ ＰＣ分析 其租提 物
１２ ＩＰ ｓ的提取 制 备 ． ． ＭＦ
锦橙 皮 在 ７ ℃ 烘 箱 中烘 干 （ ５ 约
４ｈ ， ８ ）粉粹并过 ４ ０目筛 （ 径 为 ０ ４５ ｍ） 称 取 ｌＯ 孔 ．２ ｍ ， Ｏ ｇ的锦 橙皮粉 ， 加入 １０ ｍ ９ ％ 乙醇 ， ４ ℃， ＝ ８ ｒｍ ｎ的摇床 ５０ Ｌ５ 在 ｏ ｒ ２ ０／ ｉ
１ １ １ 原料与主要试剂 ．．
锦 橙皮 （ｉｃｅｇｏａｇ ｅ１ ， ｊ ｈｎ ｒｎｅｐ ｅ） 湖 ｎ
提物 ， 无水 乙醇复溶 ， 加活性炭 （ ： ｍ ｍ） １７， ／ 脱色处理 得 Ｐ Ｆ Ｍｓ 粉末 。
２ Ｐ ｓ中 总 酚 、 黄 酮 含 量 的 测 定 ＭＦ 总
北松滋望春花柑 橘 园提供 ； 鲜 肉（ ｈｌｄ ｐｒ） 中百 超市 冷 ｃ ｉｅ ｏｋ ， ｌ
西慧科植物开发有 限公 司 ； 芦丁 （ ｕ ｓ ｅ Ｓ ｎ ａ ｉ ａ公 Ｒ ｔ ｉ ） ｔ ｄｒ ｓ ｍ ｏｄ ａ ｄ ｇ 司 ；５ ９ ％乙醇 ， Ｒ， Ａ 国药集 团化学试剂有限公 司； 乙醚 ， Ｒ 国 Ａ ，
２ １ 总酚含量 的测 定 ．
精 密称 取 ２ ｍ ５ ｇ没食 子酸 ， 定容 于
试剂产 ； 氯化钠 ， Ｒ， Ａ 国药集 团化 学试 剂有 限公 司 ； 氧化 镁 ， Ａ 中国上海华东师 范大学化 工厂 ； Ｒ， 甲基红 ， Ｒ， Ａ 湖南省娄 底 市湘中地质实验研究所 ； 甲基蓝 ， Ｒ， 次 Ａ 天津市广成化学试剂 有限公 司 ； 营养 琼脂 ， Ｒ， 岛高 科 园海博 生 物技 术有 限公 Ｂ 青 司； 假单胞 分离琼 脂 ， Ｒ， 岛高 科 园海博 生物 技术 有 限公 Ｂ 青
药集 团化学试剂有 限公 司； 乙酸乙酯 ， Ｒ， Ａ 国药集 团化 学试剂
有 限公司 ； 氢氧化钠 ， Ｒ， Ａ 天津 市化学试 剂工厂 ； 甲醇 ， Ｒ， Ａ 国 药集 团化学试剂有 限公司。碳酸钠 ， Ｒ， Ａ 天津市化学试剂 工
厂； 盐酸 ，Ｒ 信阳市化学试剂 产 ； 酸， Ｒ 武汉市 中南 化学 Ａ， 硼 Ａ ，
中国中医药咨讯
・
２ １ ２月 ０ ０年
第 ２卷
第 ２期
１ ・ ２
Ｊａ ｌｏ ｈｎ ａ ｉｉｎ ｌＣｈｎ ｓ ｄｃｎ ｎｏｍａｉｎ ｏ ｍａ ｆＣ ｉａＴｒｄｔ ａ ｉｅ ｅＭｅ ｉｉｅ Ｉｆｒ ｔ ｏ ｏ
Ｆ ｂ ｕ ｒ ２ ０ Ｖｏ ． Ｎｏ ２ ｅ ｒ ａｙ ０１ １２ ．
（ 华中农业大学梧桐路 ） 提供川陈皮 素 （ ｏｉ ｔ ） Ｓａｄｒ ； Ｎ ｂｌｉ ｅｎ ｔ ａｄ ｎ 陕西慧科植物开发有限公 司． 桔皮素 （ ａｇｒｔ ） ｔｎａｄ 陕 Ｔｎ ｅ ｉ Ｓａｄ ， ｅｎ ｒ 西慧科植物开发有限公司； 甜橙 黄酮（ ｉｅｓｔ ）Ｓａｄｒ ， Ｓｎｎｅ ｎ ｔｎａｄ 陕 ｉ
１ １ 实 验 材 料 ．
中浸提 １ｈ 真空抽滤 ， ２， 滤液经旋转蒸发（ 真空度 ６ ， ｏ 水浴温度 ４℃ ） ｜ 进行浓缩至无醇制得水悬 液。将水悬液 倒人 分液漏斗 Ｄ
中， 加人大约两倍水悬液体积 的乙醚 ， 振摇混匀静置分层 。乙
醚层用稀 Ｎ Ｏ ａ Ｈ溶液 （ ．５ ｏ Ｌ 洗涤 ， Ｏ０ｍ ｌ ） Ｙ 直至水层为透明无色 为止 ， 收集有机层 。按上述 步骤萃取 三次 ， 将有 机层收集 ， 旋 转浓缩 （ 真空度 ９ ， ０ 水浴温度 ３ ｏ 去 除乙醚 ， ０Ｃ） 冷冻 干燥得粗
２ ０ Ｌ 摇 匀即得每 毫升 含没食子 酸 ０ １ ｇ的标准溶 液。精 ５ｍ ， ．ｍ
密吸取上述对照 品溶液 ０ ５ １０ １５ ２ ０ ２ ５ Ｌ于 ２ ｍ ． 、． 、． 、． 、． ｍ ５ Ｌ容 量瓶中 ， 加入 ２ ５ Ｌ Ｆ ｌ ． ｍ ｏ ｎ—Ｃｏａ ｅ ｉ ｉ ｌｕ试剂 ， 匀后 静 置 ３— ｃｔ 摇 ８ ｉ 后再加入 ２５ ０ ｍｎ ．ｍＬ１ ％碳 酸钠混 合后 反应 １ ， 蒸馏水 ｈ用 定容至刻度 ， 同时 以不加对 照 品溶液 为空 白， ７ ０ ｍ处 比 在 ６ｎ 色测定对照 品溶液的吸光值 ， 以对照品的含量为横坐标 ， 吸光 值 为纵坐标 ， 制标 准曲线 。实验 中先测定 乙醇浸 提物 中总 绘
中的主要成分 ， 为柑橘橙类资源的药用提供更好的途径。
【 关键词 】 多甲氧基黄酮 ； 主要成分 ； 提取； 测定
多甲氧基黄酮是一类其它蔬菜水果中至今尚未发现而 只
１２ 实 验 方 法 ．
有柑桔类才具有的柑桔黄酮化合物 ， 作为一种特征成分 ， 它在
柑桔果皮部位含量 丰富 ， 并且 具有很强 的抗 氧化活性 和消除 自由基能力 ， 尤其在抗癌 、 抑制肿瘤 、 抗炎症 、 突变、 抗 抗血 小
板凝集 、 降胆 固醇水平及抗 菌活性等方 面效果突 出。笔者 所 在实验室的相关研究 已证实 Ｐ Ｆ 对金 黄色葡 萄球 菌 、 贺 Ｍｓ 志 氏菌 、 假单胞菌 、 大肠杆菌等具有抗 菌效果 。本研究主要是 从
锦橙皮中提取 Ｐ Ｆ ， Ｍ ｓ并进行总酚 、 总黄酮含量测量 。 １ 材料与方法