细菌菌株,微生物菌剂及其应用的制作方法
生物菌剂的制作方法
生物菌剂的制作方法
生物菌剂制作方法：
1. 选择适合菌株：根据需要选择适合的细菌菌种，如双歧杆菌、乳酸菌等。
2. 培养接种：采用无菌技术，在适宜的培养基中接种细菌，进行初步培养。
3. 大规模培养：将培养好的细菌菌种接种到培养量大的发酵罐中，在适宜的温度和条件下进行大规模培养。
4. 分离纯化：将大规模培养好的细菌进行离心分离和纯化，得到纯净的菌种。
5. 干燥：将纯净的菌种进行干燥处理，常用方法为冻干法。
6. 包装：将干燥后的生物菌剂进行包装，常用的包装方式有铝箔袋、塑料瓶等。
7. 贮存：生物菌剂应存放在干燥、阴凉、无异味的环境中，以避免受潮、变质等情况。
生物菌剂是一种有效的微生物制剂，可以用于改良土壤、提高作物产量等方面。
制作过程中需要严格控制每个环节，以确保最终产品的质量。
土壤微生物发酵方法
土壤微生物发酵方法一、自制微生物菌剂所需要准备的物料（一）制作菌剂时用来繁殖菌种的非透明且能够密封的容器一个：可以塑料桶（白色的不行）、水缸等容器内部不透明不透光的都行，要提前完全清刷干净，以防我们繁殖菌种时容器内带有大量有害微生物菌。
（二）自制微生物菌剂时用来给菌种繁殖扩散做基质的糖类物质：①自己繁殖菌剂时使用比较便宜易购买的红糖就行（也可以从网上购买糖蜜使用），一般按照每自制10-15公斤微生物菌剂使用2-3斤红糖（多点少点都行，但不能少于1-2斤）的用量准备就行。
自己发酵繁殖菌剂之所以要加足量红糖，是因为红糖可以为菌种提供充足营养而加快繁殖扩散速度。
（三）自制微生物菌剂时所用的清水：这里说的清水，可以使用烧开后的温凉白开水（温白开水最好，水温降到35度以内就可以直接使用），有条件的还可以购买或自制蒸馏水使用，但一定不要直接使用不干净的河水、井水、自来水等，因为这些水中要么带有杂菌，要么添加有杀菌物质（自来水需要提前放置1-2天才可使用）。
温凉白开水的具体准备量，根据你用来繁殖菌种自制微生物菌剂的容器大小而定。
（四）自制微生物菌剂时必须要用到的微生物菌种：制作菌剂时所用的菌种一般按照每制作10-15公斤菌剂准备10-15克菌种的用量准备即可。
这个菌种需要大家自己购买（网上买或者到农资店里买都行），一般用来制作微生物菌剂常用的微生物菌种主要是EM复合菌（也叫EM益生菌，含有很多种有益菌种）、发酵菌等几种，也可以根据自己实际种植需求购买其他菌种（如护根的枯草芽孢杆菌、杀菌的哈茨木霉菌、杀虫的白/绿僵菌等）。
大家要注意：你购买时一定要问清楚必须是菌种、一定不能是菌肥和菌剂（这两样不能用来制作菌剂），大多数微生物菌种一般都是粉剂的（也有一些是液体状的，购买前一定要问是菌种还是菌剂），一般液体状是菌剂、颗粒固体状是菌肥。
二、自制微生物菌剂所需要的操作步骤与操作技术要求下面北京傲禾测土就以使用10-15克EM复合菌种+2-3斤红糖为原料（这里面含有很多种对土壤作物有益的微生物菌种）用白开水自己动手繁殖制作10-15公斤微生物菌剂为例，给大家简单说一下菌剂的自制方法。
菌生源微生物菌剂
菌生源微生物菌剂菌生源微生物菌剂是一种利用菌株作为原料培养的微生物制剂，具有多种应用领域和广泛的潜力。
本文将从菌生源微生物菌剂的定义、制备方法、应用领域以及未来发展方向等方面展开论述。
一、菌生源微生物菌剂的定义菌生源微生物菌剂是指以菌株为原料，经过分离、筛选、培养、提取和加工等一系列工艺制备而成的微生物制剂。
其特点是菌株来源单一，具有较高的菌株纯度和活性，可以应用于农业、环境、医药等多个领域。
菌生源微生物菌剂的制备方法主要包括以下几个步骤：1. 菌株筛选：从自然环境或已有菌株中筛选出具有特定功能或优良性状的菌株，如抗病菌株、促生菌株等。
2. 菌株培养：将筛选出的菌株进行培养，提供适宜的营养物质和环境条件，使菌株能够快速繁殖和生长。
3. 菌株提取：采用适当的方法，如离心、过滤、超声波破碎等，将培养得到的菌体或菌液分离提取出来。
4. 菌株加工：对提取得到的菌体或菌液进行加工处理，如冻干、制成粉末、制成片剂等，以增加保存稳定性和使用便利性。
三、菌生源微生物菌剂的应用领域菌生源微生物菌剂在农业、环境和医药等领域有着广泛的应用。
1. 农业领域：菌生源微生物菌剂可以用于农作物的种植和养殖过程中，具有促生增产、提高抗病抗逆性能等功能。
例如，可以应用于农作物的根际处理，促进植物的根系生长和营养吸收，提高农作物的产量和品质。
2. 环境领域：菌生源微生物菌剂可以用于环境修复和污染治理。
例如，可以应用于土壤修复中，通过菌株的代谢活动，降解有机污染物，减少土壤污染。
3. 医药领域：菌生源微生物菌剂在医药领域有着广泛的应用前景。
例如，可以应用于药物的生产过程中，用于合成特定的药物成分或提高药物的纯度。
四、菌生源微生物菌剂的未来发展方向菌生源微生物菌剂作为一种新型的微生物制剂，具有巨大的潜力和发展空间。
未来的发展方向主要包括以下几个方面：1. 菌株筛选和改良：通过基因工程和遗传改造等手段，对菌株进行筛选和改良，提高其功能性和适应性。
高效微生物菌剂的研发与应用
高效微生物菌剂的研发与应用一、引言随着科学技术的不断发展，微生物菌剂作为一种生物农药，在农业生产中的应用越来越广泛。
本文将探讨高效微生物菌剂的研发与应用，旨在提高农作物产量和质量，保护农田生态环境。
二、微生物菌剂的定义与分类微生物菌剂是由一种或多种有益微生物经发酵、鉴定、培养、加工制成的农药产品。
目前常见的微生物菌剂可分为农业生物肥料菌剂、农业生物防治菌剂和微生物制剂三类。
三、高效微生物菌剂的研发高效微生物菌剂的研发是提高农业生产效益和农田环境质量关键的一环。
包括以下几个方面的内容：1. 菌种筛选：通过对潜在菌种的选择和鉴定，找到具备高效特性的微生物菌种。
常见的菌种包括固氮菌、磷溶解菌、有机物降解菌等。
2. 发酵工艺优化：通过调控菌种的发酵条件，如温度、pH值、营养成分等，最大程度地提高菌种活力和产菌量。
3. 菌种混合应用：将多种具有互补性的菌种进行配比混合使用，形成菌种联合作用，提高益菌产生的效果。
4. 菌剂稳定性提升：针对菌剂易受环境条件影响、储存稳定性差等问题，进行配方改进和添加保护剂等措施，提升菌剂的稳定性和寿命。
四、高效微生物菌剂的应用高效微生物菌剂的应用范围广泛，涉及到农田土壤改良、病虫害防治和环保等多个方面。
1. 农田土壤改良：利用固氮菌和磷溶解菌等微生物菌剂，能够促进农作物吸收养分，提高土壤肥力，增加产量。
2. 病虫害防治：利用具有抑菌、拮抗作用的微生物菌剂，可以有效防治农作物的病害和虫害，降低农药使用量，减少农残。
3. 环保应用：微生物菌剂在农业生产中的应用，可减少化学农药对环境的污染，保护生态平衡，维护农田生态安全。
五、高效微生物菌剂的前景与挑战高效微生物菌剂在农业生产中的应用前景广阔，但也面临一些挑战。
1. 菌剂的稳定性：目前菌剂在储存和运输过程中易受到温度、湿度等环境条件的影响，需要进一步提升菌剂的稳定性和寿命。
2. 经济效益：由于微生物菌剂的成本较高，需要通过进一步降低生产成本和提高菌剂效益，增加农民的使用积极性。
微生物菌剂制作方法
微生物菌剂的制作是一个涉及微生物培养、扩增和制剂化的过程。
具体步骤如下：
1. 菌种选择：根据应用需求，选择合适的微生物菌株，这些菌株可以是细菌、真菌、酵母等。
2. 培养基准备：配制适合所选菌种生长的培养基，该培养基通常包含碳源、氮源、无机盐、生长因子等成分。
3. 无菌操作：在无菌条件下，将保存的菌种接种到已准备好的无菌培养基中，以防止杂菌污染。
4. 发酵培养：将接种好的培养基放入恒温摇床或发酵罐中进行培养。
培养条件（如温度、pH、氧气供应等）需根据菌种特性进行优化。
5. 生长监测：定期取样监测微生物的生长情况，包括菌体密度、代谢产物浓度等指标。
6. 收获菌体：当菌体生长达到一定密度后，停止培养，通过离心、过滤等方法收集菌体。
7. 制剂制备：将收获的菌体制成所需的剂型，例如液体菌剂、粉剂、颗粒剂等。
这可能涉及到与载体材料的混合、干燥、造粒等步骤。
8. 添加保护剂：为了提高菌剂的稳定性和存活率，常需添加适量的保护剂，如糖类、油脂、胶体物质等。
9. 质量检测：对成品菌剂的有效活菌数、杂菌数、安全性等进行检测，确保产品质量。
10. 包装储存：合格的微生物菌剂进行适当的包装，并在适宜的条件下储存以保持其活性。
注意，微生物菌剂的制备过程需要在符合安全标准和法规要求的环境中进行，同时还需要具备一定的微生物学知识和实验技能。
微生物抗菌剂的研发及应用研究
新型农用微生物杀菌剂的研制及应用一、立项依据和研究基础植物真菌病害导致的农作物减产和采后损失一直以来都是阻碍农业生产的关键问题之一。
化学农药作为作物病害防控的重要措施，有效保障了农产品的高产和稳产，同时也带来了食品安全和环境安全的隐患。
因此，创制安全高效的微生物农药成为当今国际研发的热点。
生物防治植物真菌病害因为在应用中具有对环境安全、无污染、特异性强、不产生抗药性并且能够提高农田生态系统的生物多样性等优点而受到越来越多的关注。
其中微生物菌剂资源的匮乏是目前制约我国生物菌剂健康发展的4大瓶颈之一。
目前，越老越多的研究将资源的开发瞄中了植物内生菌的开发方面。
内生菌可以被用来防治植物真菌病害，并且部分菌株已经被研发成生物农药用于农业生产当中。
为了给生物防治植物真菌病害提供新的菌种资源，我们近年来开展了生防菌资源的开发研究工作，积累了丰富的经验，同时获得了几株对植物病原真菌抗性强，广谱性高的生防菌，并发表了相关研究论文和申报了国家发明专利。
在对中药内生菌的研究中，我们从独角莲块茎（Typhonium giganteum Engl.）中获得了2株广谱性植物病原真菌拮抗芽孢杆菌，并命名为TG-116和TG119。
通过实验室拮抗实验和盆栽试验发现，对辣椒疫霉病菌（Phytophthora capsici）、辣椒炭疽病菌（Colletotrichum capsici）、马铃薯立枯丝核菌（Rhizoctonia solani）、小麦赤霉病菌（Fusarium graminearum）、黄瓜枯萎病菌（Fusarium oxysporum）、黄瓜灰霉病菌（Botrytis cinerea）及番瓜绵疫病菌（Pythium aphanidermatum）等7种供试植物病原菌均有良好拮抗作用（图1-2.表1-2）。
图1 TG116菌株对植物病原真菌的抑制作用表1. TG116菌株对植物病原真菌的抑菌活性植物病原真菌Pathogenic fungi 抑菌率Inhibition rate（%）辣椒疫霉病菌P. capsici 81.98辣椒炭疽病菌C. capsici 74.42马铃薯立枯丝核菌R. solani74.88小麦赤霉病菌F. graminearum84.83黄瓜枯萎病菌F. oxysporum75.78黄瓜灰霉病菌B. cinerea72.85番瓜绵疫病菌P. aphanidermatum78.69表2 TG119菌株对植物病原真菌的抑菌活性植物病原真菌发酵液抑菌率（%）菌液抑菌率（%）小麦赤霉病菌（F. graminearum）76.85 89.23辣椒疫霉病菌（P. capsici）81.68 86.62黄瓜枯萎病菌（F. oxysporum）71.61 74.55辣椒炭疽病菌（C. capsici）70.61 74.02黄瓜灰霉病菌（B. cinerea）70.98 82.98番瓜绵疫病菌（P. aphanidermatum）79.75 81.44马铃薯立枯丝核菌（R. solani）74.66 76.59图2 TG116菌株对植物病原真菌菌丝的拮抗形态通过盆栽试验表明，经地衣芽孢杆菌TG116灌根处理后，黄瓜叶部组织中的POD、PPO、PAL等防御酶类活性升高；尤其在同时接种TG116和黄瓜枯萎病病原菌后，3种防御酶类活性上升的幅度比单独接种要高；同时黄瓜叶片中MDA含量降低，减轻植株细胞膜脂过氧化损伤。
微生物菌剂车间操作流程
微生物菌剂车间操作流程一、引言微生物菌剂是一种生物制剂，用于改善土壤生态环境和促进植物生长。
为了确保微生物菌剂的质量和效果，需要严格遵循操作流程进行生产。
本文将详细介绍微生物菌剂车间的操作流程，包括原料准备、发酵过程、菌剂提取和包装等环节。
二、原料准备1. 原料采购：根据生产计划，采购所需的菌种、培养基、辅料等原料，并确保其质量符合要求。
2. 原料检验：对采购的原料进行检验，包括菌种活力检测、培养基成份检测等，确保原料的质量可靠。
3. 原料配制：按照配方比例，将菌种、培养基、辅料等原料进行准确的称量和混合，制备出菌剂发酵所需的培养基。
三、发酵过程1. 发酵罐准备：对发酵罐进行清洁和消毒，确保无菌状态。
检查发酵罐的温度、压力等参数是否正常。
2. 接种菌种：将经过活力检测的菌种按照一定的比例接种到发酵罐中，注意无菌操作，避免外界污染。
3. 发酵条件控制：根据菌种的特性和生长要求，控制发酵罐内的温度、湿度、pH值、通气速率等参数，提供适宜的生长环境。
4. 发酵过程监测：定期对发酵罐内的菌液进行取样，检测菌种的生长情况和代谢产物的积累情况，及时调整发酵条件。
四、菌剂提取1. 发酵结束判断：根据菌种生长曲线和代谢产物积累情况，判断发酵是否结束。
通常以特定的指标值或者时间为依据。
2. 菌液分离：将发酵罐内的菌液通过离心等分离技术，分离出菌体和发酵液。
注意操作过程中的无菌操作，避免污染。
3. 菌体处理：对分离得到的菌体进行处理，如洗涤、浓缩等，以获得高活力的菌体。
4. 发酵液处理：对分离得到的发酵液进行处理，如过滤、浓缩等，以获得高浓度的发酵液。
五、包装与质检1. 包装准备：准备好符合卫生要求的包装容器、标签等，并对其进行清洁和消毒。
2. 包装操作：将提取好的菌体或者发酵液按照规定的容量进行包装，注意无菌操作，避免污染。
3. 包装密封：对包装容器进行密封，确保菌剂的长期保存和质量稳定。
4. 质检过程：对包装好的菌剂进行质量检测，包括菌种活力检测、菌剂浓度检测、杂质检测等，确保菌剂符合质量标准。
菌剂制备方法
菌剂制备方法一、引言菌剂是一种含有大量有益微生物的制剂，具有促进植物生长、提高产量、改善品质、增强植物抗逆性等多种功能。
随着生态农业和可持续农业的发展，菌剂在农业生产中的应用越来越广泛。
本文将详细介绍菌剂的制备方法，包括原料准备、容器选择、制作过程、使用技巧等方面，以期为菌剂的制备和应用提供参考。
二、原料准备制备菌剂的主要原料包括生物菌种、凉开水或温水、红糖和容器。
其中，生物菌种是菌剂的核心，可以选择市场上常见的EM复合菌、发酵菌等，也可以根据自己实际种植需求购买其他菌种。
凉开水或温水是菌剂制作的主要溶剂，要求水质清洁无污染。
红糖作为菌剂的营养源，可以提供菌种生长所需的碳源和能量。
容器则需要选择不透明、非白色的，以避免阳光直射导致菌种失活。
三、容器选择容器的选择对于菌剂的制备至关重要。
首先，容器必须是不透明的，以防止阳光直射导致菌种失活。
其次，容器应该是非白色的，因为白色容器会反射阳光，同样可能导致菌种失活。
此外，容器还需要具有良好的密封性，以防止杂菌污染。
在选择容器时，可以考虑使用塑料桶、水桶、水缸等容器，如果是白色或透明的容器，可以在外面包裹一层黑布或黑纸，以达到避光的效果。
四、制作过程清洗容器：在制作菌剂前，需要将容器彻底冲洗干净，以防止杂菌污染。
可以使用清水冲洗，也可以使用酒精或其他消毒剂进行消毒。
需要注意的是，消毒剂使用后需要充分冲洗干净，以免残留物对菌种产生不利影响。
配制溶液：按照一定比例将凉开水或温水、红糖和生物菌种混合在一起，搅拌均匀。
一般来说，每10-15公斤水中加入2-3斤红糖和100克菌种。
具体比例可以根据实际情况进行调整。
红糖的加入量不宜过少或过多，过少会影响菌种的繁殖速度，过多则可能导致溶液过于黏稠，不利于菌种生长。
发酵繁殖：将配制好的溶液放置在避光、通风、温度适宜的地方进行发酵繁殖。
一般来说，温度在25-35℃之间为宜。
在发酵过程中，需要每天搅拌1次，连续搅拌2天，以促进菌种的繁殖和扩散。
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本技术涉及微生物应用技术领域，具体而言，涉及一种细菌菌株，微生物菌剂及其应用。
所述菌株为弯曲芽孢杆菌D3，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCCNO.14091；保藏时间为：2017年5月4日。
含有该菌株的菌剂尤其适合北方玉米秸秆的快速降解，在作物秸秆田间原位还田中具有重要作用，同时具有能够增加土壤腐殖质、提高土壤肥力的作用。
技术要求1.细菌菌株，其特征在于，所述菌株为弯曲芽孢杆菌（Bacillus flexus）D3，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC NO.14091；保藏时间为：2017年5月4日。
2.含有权利要求1所述菌株的微生物菌剂。
3.根据权利要求2所述的微生物菌剂，其特征在于，在所述微生物菌剂为液体菌剂，且在该液体菌剂中，菌株的活菌的数量≥1×107 CFU /ml。
4.根据权利要求2所述的微生物菌剂，其特征在于，所述微生物菌剂为固体菌剂，所述固体菌剂由所述的菌株附加固态载体和/或助剂制备而成。
5.如权利要求4所述的微生物菌剂，其特征在于，所述固态载体包括草炭、糠粉、麦麸、高岭土、轻质碳酸钙、硅藻土、白炭黑、滑石粉、细沙以及粘土中的一种或多种；所述助剂选自蔗糖、葡萄糖、蛋白胨、豆粕、十二烷基苯磺酸钠、木质素磺酸钠、烷基萘磺酸钠缩聚物中的一种或多种。
6.权利要求3所述的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将所述菌株接种于液体培养基中进行培养，得到液体菌剂；将所述液体菌剂过滤和/或浓缩。
7.权利要求4或5所述的微生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将经过纯化后得到的所述菌株混于固态载体和/或助剂中即得。
8.权利要求1所述的菌株或权利要求2~5任一项所述的微生物菌剂在秸秆消纳中的应用。
技术说明书细菌菌株，微生物菌剂及其应用技术领域本技术涉及微生物应用技术领域，具体而言，涉及一种细菌菌株，微生物菌剂及其应用。
背景技术我国作物秸秆资源丰富，数量巨大，种类多样，每年的作物秸秆产出量7～8亿吨。
由于秸秆在短期内不易腐解，利用效率低，绝大部分秸秆废弃或被焚烧，在种植业为主的地区，作物秸秆已经成为生产中的障碍。
所以，焚烧秸秆遍及广大乡村，由此引起环境污染与有机资源的严重浪费。
据统计，全国用作还田和有机肥料的作物秸秆仅占总量的20％左右，焚烧占17％，尚有50％未被利用。
我国北方地区的诸多省份都是农业大省，对秸秆处理的需求更为迫切。
北方地区秋冬季节气候冷凉，不利于玉米秸秆木质素、纤维素的降解。
所以突破北方地区不良气候的条件下，秸秆大规模、快速腐熟还田技术瓶颈是实现我国北方地区秸秆利用亟待解决的问题。
选育和利用作物秸秆高效耐低温的降解微生物菌株，研发高效降解菌剂，建立作物秸秆田间原位生物转化还田技术，是解决我国北方秸秆降解问题的重要发展趋势之一。
利用秸秆降解微生物进行玉米、小麦、水稻秸秆的降解与原位还田具有巨大的应用潜力。
复合菌系的筛选研究也有一些报道，有关秸秆发酵菌剂的产品非常少，尚未形成体系，更没有稳定高效秸秆快速降解菌群的生产使用。
秸秆快速腐解技术尚未得到有效地解决，限制了秸秆资源的高效利用。
有鉴于此，特提出本技术。
技术内容本技术的一方面目的在于提供具有纤维素降解功能的细菌菌株，该菌株耐低温能力强，且具有非常好的纤维素降解功能。
本技术的另一目的在于提供包含如上所述细菌菌株的微生物菌剂，该混合菌剂分解纤维素的能力明显强于其中任何一个单一菌株，可很好地应用于秸秆降解之中。
为了实现本技术的上述目的，特采用以下技术方案：根据本技术的一方面，涉及一种细菌菌株，所述菌株为弯曲芽孢杆菌D3，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC NO.14091；保藏时间为：2017年5月4日。
该菌种的拉丁学名为Bacillus flexus，中文学名为弯曲芽孢杆菌，菌株名为D3。
该菌株具有高效的秸秆降解功能，且对低温耐受性较强。
上述的经过分离纯化的弯曲芽孢杆菌，其菌落为圆形、扁平、灰白色、不透明、黏稠、大小中等、表面不光滑、边缘不规则。
含有所述弯曲芽孢杆菌D3的微生物菌剂也属于本申请要求保护的范围。
对于该菌株而言，考虑到应用时的秸秆降解效率及其可能需要运输等原因，有必要将其扩大培养制成微生物菌剂的形式以扩大其应用范围。
优选的，上述微生物菌剂还包括以下菌株中的一种、两种或全部：弯曲芽孢杆菌A1，保藏编号为CGMCC NO.14088；苏云金芽孢杆菌A2，保藏编号为CGMCC NO.14089；以及香草芽孢杆菌B2，保藏编号为CGMCC NO.14090；上述噬菌体均保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏时间为：2017年5月4日。
在一些实施方式中，所述微生物菌剂中含有所述弯曲芽孢杆菌D3及所述弯曲芽孢杆菌A1；在一些实施方式中，所述微生物菌剂中含有所述弯曲芽孢杆菌D3及所述苏云金芽孢杆菌A2；在一些实施方式中，所述微生物菌剂中含有所述弯曲芽孢杆菌D3及所述香草芽孢杆菌B2；在一些实施方式中，所述微生物菌剂中含有所述弯曲芽孢杆菌D3、所述弯曲芽孢杆菌A1及所述苏云金芽孢杆菌A2；在一些实施方式中，所述微生物菌剂中含有所述弯曲芽孢杆菌D3、所述弯曲芽孢杆菌A1及所述香草芽孢杆菌B2；在一些实施方式中，所述微生物菌剂中含有所述弯曲芽孢杆菌D3、所述苏云金芽孢杆菌A2及所述香草芽孢杆菌B2；优选的，如上所述的微生物菌剂，以活菌数计，所述菌剂中弯曲芽孢杆菌A1、苏云金芽孢杆菌A2、香草芽孢杆菌B2以及弯曲芽孢杆菌D3的混合比例为(1～5):(1～5):(1～5)：(1～5)。
更优选的，所述菌剂中弯曲芽孢杆菌A1、苏云金芽孢杆菌A2、香草芽孢杆菌B2以及弯曲芽孢杆菌D3等比混合。
上述的微生物菌菌剂，优选为液体菌剂，该液体菌剂中，培养液可优选为液体培养基，例如LB液体培养基，或者进一步添加葡萄糖、硫胺素、生物素和烟酸等营养物。
优选的，为了实现良好的纤维素降解效果，在该液体菌剂中，每种菌株的活菌的数量≥1×107CFU/ml，优选的，每种菌株的活菌的数量是1×107-16CFU/ml；更优选为1×108-15CFU/ml，也可以选择1×109CFU/ml，1×1010CFU/ml，1×1011CFU/ml，1×1012CFU/ml，1×1013CFU/ml，1×1014CFU/ml等。
优选的，如上所述的微生物菌剂的制备方法，包括以下步骤：本技术基于上述的液体微生物菌剂提供了一种制备方法，包括如下步骤：将如上所述的菌株接种于液体培养基中进行培养，得到液体菌剂；可选的，将所述液体菌剂过滤和/或浓缩。
整个微生物菌剂的制备方法简单，可以短时间保存和方便运输，使用的时候直接以一定的比例添加到土壤中即可，使用非常方便。
上述的微生物菌菌剂，优选为固体菌剂，所述固体菌剂由如上所述的菌株附加固态载体和/或助剂制备而成。
优选的，如上所述的微生物菌剂，所述固态载体包括草炭、糠粉、麦麸、高岭土、轻质碳酸钙、硅藻土、白炭黑、滑石粉、细沙以及粘土中的一种或多种。
优选的，如上所述的微生物菌剂，所述助剂选自蔗糖、葡萄糖、蛋白胨、豆粕、十二烷基苯磺酸钠、烷基萘磺酸钠缩聚物中的一种或两种以上的混合物。
本技术基于上述的固体微生物菌剂提供了一种制备方法，包括如下步骤：将经过纯化后得到的所述菌株混于固态载体和/或助剂中既得。
如上所述的菌株、或如上所述的菌剂在秸秆消纳中的应用。
该菌剂可用于玉米、小麦、水稻秸秆的降解与原位还田。
与现有技术相比，本技术提供一种高效降解秸秆的微生物菌株，以及包含该菌株的微生物菌剂，该菌剂的主要成分四种微生物菌株构成，尤其适合北方玉米秸秆的快速降解，在作物秸秆田间原位还田中具有重要作用。
同时，具有能够增加土壤腐殖质、提高土壤肥力的作用。
本技术提供的弯曲芽孢杆菌(Bacillus flexus)，菌株名为A1，保藏编号CGMCCNO.14088；本技术提供的苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringensis)，菌株名为A2，保藏编号CGMCC NO.14089；本技术提供的香草芽孢杆菌(Bacillus vanillea)，菌株名为B2，保藏编号CGMCCNO.14090；本技术提供的弯曲芽孢杆菌(Bacillus flexus)，菌株名为D3，保藏编号CGMCCNO.14091；上述菌株均保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所；保藏时间均为：2017年5月4日。
经保藏中心于2017年5月4日检测为存活菌株。
具体实施方式下面将结合实施例对本技术的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本技术，而不应视为限制本技术的范围。
实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。
所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购买获得的常规产品。
实施例1本实施例提供了个微生物菌株的筛选方法及菌剂的组合方法。
1、实验材料1.1菌株与土壤供试菌株：菌种库保藏纤维素降解细菌。
东北黑土：吉林公主岭田间0～20cm表土。
1.2培养基1.2.1细菌培养基：牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，琼脂16～18g，去离子水1L。
1.2.2细菌发酵培养基(YPD全营养培养基)：溶解酵母膏/酵母粉10g/L、蛋白胨20g/L于1L去离子水中，pH 7.0。
1.2.3纤维素降解菌培养基：KH2PO4 0.5g、MgSO4 0.25g、蛋白胨2g、羧甲基纤维素钠(CMC)1.88g、刚果红0.2g、琼脂16～18g，去离子水1L，pH 7.0。
1.2.4基础营养液(赫奇逊氏培养基)：磷酸二氢钾1.0g，NaCl 0.1g，NaNO3 2.5g，去离子水1L，pH自然。
单菌株低温活性筛选方法2.1菌株活化与复壮接种环挑取保藏斜面管内的菌落接种于不加琼脂的细菌液体培养基(1.2.1)内，在28℃温度下培养72h，制备单菌株供试菌液。
2.2菌株低温活性筛选250ml三角摇瓶内加入40克土壤，喷水润湿润至含水量为30～50％田间持水率，透气膜封口湿热灭菌3～5次，用细菌培养基(1.2.1)平板检验土壤无活菌后，接种2ml供试菌液，28℃培育3天，然后以-20℃保温24h；20℃保温24h为一个循环。
冻融循环9次后，在摇瓶内加入100ml无菌水，往复震荡(转速170r/min)30分钟制备土壤悬液，逐级稀释，平板计数法进行活菌计数测定。
当冻融循环后土壤中菌体数量>1011cfu/g土时，所接种的菌株判定为低温高活性。