8生物制药工艺学习题集-离子交换法

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生物制药工艺学复习总结

生物制药工艺学复习总结

《生物制药工艺学》第四章萃取分离法(答案)一、填空题1、常用的萃取方法有:单级萃取、多级错流萃取、多级逆流萃取。

2、影响溶剂萃取的因素:乳化和破乳化、PH的影响、温度和萃取时间的影响、盐析作用的影响、溶剂种类、用量及萃取方式的影响。

3、破乳方法有:加入表面活性剂、离心、加电解质、加热、吸附法破乳、高压电破乳、稀释法、超滤、反应萃取。

4、常用的破乳剂有:阳离子表面活性剂、阴离子表面活性剂。

二、名词解释1、液-液萃取:是指用一种溶剂将物质从另一种溶剂(如发酵液)中提取出来的方法,根据所用溶剂的性质不同或萃取机制不同,可将液-液萃取分为多种类型。

2、萃取:在溶剂萃取中,被提取的溶液称为料液,其中与提取的物质称溶质,而用以进行萃取的溶剂称为萃取剂。

料液与萃取剂接触后,料液中的溶质向萃取剂转移的过程称为萃取,达到萃取平衡后,大部分溶质转移到萃取剂中,这种含有溶质的萃取剂溶液称为萃取液,而被萃取出溶质以后的料液称为萃余液。

3、反萃取(stripping):是将萃取液与反萃取剂(含无机酸或碱的水溶液,有时也可以是水)相接触,使某种被萃入有机相的溶质转入水相,可把这种过程看作萃取的逆过程。

4、分配定律:即在一定温度,一定压力下,某一溶质在互不能相溶的两种溶剂间分配时,达到平衡后,在两相中的活度之比为一常数。

5、萃取因素:也称萃取比,其定义为被萃取溶质进入萃取相的总量与该溶质在萃余相中总量之比,通常以E表示。

6、萃取率(percentage extraction):生产上常用萃取率来表示一种萃取剂对某种溶质的萃取能力,计算萃取效果,其公式为:7、分离因素:在同一萃取体系内两种溶质在同样条件下分配系数的比值。

三、问答1、简述溶剂萃取法的优点。

答:①操作可连续化,反应速度快,生产周期短;②对热敏物质破坏少;③采用多级萃取时,溶质浓缩倍数大、纯化度高。

2、简述选择萃取溶剂应遵守的原则。

答:①分配系数愈大愈好,若分配系数未知,则可根据“相似相容”的原则,选择与药物结构相近的溶剂;②选择分离因数大于1的溶剂;③料液与萃取溶剂的互溶度愈小愈好;④尽量选择毒性低的溶剂;⑤溶剂的化学稳定性要高,腐蚀性低,沸点不宜太高,挥发性要小,价格便宜,来源方便,便于回收。

(生物制药工艺学)第八章离子交换法(ion-exchange

(生物制药工艺学)第八章离子交换法(ion-exchange

22
第三节 离子交换动力学
• 一、离子交换平衡
• • R代表离子交换树脂,Z1及Z2分别为离子A1和A2的
价电数。

表示溶液中与树脂表面的两种离子。
23
尼科尔斯基方程式
• 用m1、m2及C1、C2分别代表树脂上和溶液中的 两种离子的浓度。
• 数量关系可表示:

• 尼科尔斯基方程式
• K>1时 离子A1比离子A2对树脂有较大的吸引力
10
阳离子交换树脂分类
• 强酸型树脂:磺酸型树脂,功 能基团为磺酸根(—SO3H)及甲 基磺酸根(—CH2SO3H),有好 的解离能力。
• 中酸性树脂:磷酸型树脂(—
PO3H2 )
• 弱酸性树脂:羧酸型树脂和酚
型树脂(—COOH ,
),
在酸性环境中解离度受到抑制。
11
阴离子交换树脂
• 强碱型阴离子交换树脂: •
(生物制药工艺学)第八章离子交换法 (ion-exchange
第一节 基本原理
• 离子交换法:利用溶液中带电粒子与离 子交换剂之间结合力的差异进行物质分 离的操作方法。
• 带电粒子与离子交换剂间的作用力是静 电力。
• 电荷密度、电荷种类
2
离子交换剂
• 离子交换剂:由惰性的不溶性载体、功能基团 和平衡离子组成。
用“×”将树脂编号与交联度分开。 • 弱酸101 ×4其交联度为4%。 • 国内常用树脂命名:724;732;717
16
离子交换树脂的骨架
(一)苯乙烯型离子交换树脂
• 由苯乙烯与二 乙烯苯经过氧 苯甲酰催化聚 合而成。
• 交联度
17
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(二)丙烯酸型离子交换树脂

制药工艺学习题集答案

制药工艺学习题集答案

制药⼯艺学习题集答案制药⼯艺学⼀.名词解释1. 全合成:由结构较简单的化⼯原料经过⼀系列的化学合成过程制得化学合成药物,称为全合成2. 半合成:由具有⼀定基本结构的天然产物经过结构改造⽽制成化学合成药物,称为半合成。

3. 邻位效应:取代基与苯环结合时,若⼀取代基的分⼦很⼤时,可将其邻位掩蔽,因⽽在进⾏各种化学反应时,邻位处的反应较其他位置困难。

4. 药物的⼯艺路线:具有⼯业⽣产价值的合成路线,称为药物的合成路线。

7.相转移催化剂:相转移催化剂的作⽤是由⼀相转移到另⼀相中进⾏反应。

它实质上是促使⼀个可溶于有机溶剂的底物和⼀个不溶于此溶剂的离⼦型试剂两者之间发⽣反应。

常⽤的相转移催化剂可分为鎓盐类、冠醚类及⾮环多醚类等三⼤类。

8. 固定化酶:固定化酶⼜称⽔不溶性酶,它是将⽔溶性的酶或含酶细胞固定在某种载体上,成为不溶于⽔但仍具有酶活性的酶衍⽣物。

9.“⼀勺烩”或“⼀锅煮”:对于有些⽣产⼯艺路线长,⼯序繁杂,占⽤设备多的药物⽣产。

若⼀个反应所⽤的溶剂和产⽣的副产物对下⼀步反应影响不⼤时,往往可以将⼏步反应合并,在⼀个反应釜内完成,中间体⽆需纯化⽽合成复杂分⼦,⽣产上习称为“⼀勺烩”或“⼀锅煮”。

⼆.简答题1、化学制药⼯艺学研究的主要内容是什么答:⼀⽅⾯,为创新药物积极研究和开发易于组织⽣产、成本低廉、操作安全和环境友好的⽣产⼯艺;另⼀⽅⾯,要为已投产的药物不断改进⼯艺,特别是产量⼤、应⽤⾯⼴的品种。

研究和开发更先进的新技术路线和⽣产⼯艺。

3.简述鎓盐类相转移催化剂的反应机理。

N+Z—结构中含有阳离⼦部分,便于与阴离⼦形成有机离答:这类催化剂R4⼦对或者有与反应物形成复离⼦的能⼒,因⽽溶于有机相,其烃基部分的碳原⼦数⼀般⼤于12,使形成的离⼦对具有亲有机溶剂的能⼒,其作⽤⽅式为:4.简述冠醚催化固液两相的反应机理。

6.简述外消旋混合物,外消旋化合物,外消旋固体溶液的定义及其理化性质的差异。

如何区分以上三种外消旋体答:外消旋混合物:纯旋光体之间的亲和⼒更⼤,左旋体与右旋体分别形成晶体外消旋化合物:左旋体与右旋体分⼦之间有较⼤亲和⼒,两种分⼦在晶胞中配对,形成计量学上的化合物晶体外消旋固体溶液:纯旋光体之间,与对映体之间的亲和⼒⽐较接近,两种构型分⼦排列混乱三者的理化性质差异:熔点、溶解度不同区分:加⼊纯的对映体1)熔点上升,则为外消旋混合物2)熔点下降,则为外消旋化合物3)熔点没有变化,则为外消旋固体溶液7.⽤硝基苯甲酸为原料制备盐酸普鲁卡因,单元反应有两种排列⽅式。

生物制药工艺学试卷样本

生物制药工艺学试卷样本

一、 填空题(每空1分, 共24 分)1、 现在组整天然蛋白质20种氨基酸生产方法有 、 、 、 等四种。

2、 生化药品资源有 、 、 、 。

3、 到现在为止, 多肽合成最常见 法, 其中最常见氨基保护剂是 。

4、 重组DNA 技术制造人胰岛素有两条路径, 一是 法, 即以人工合成人胰岛素A 链和B 链基因分别表示A 链和B 链, 然后再组合起来; 二是 , 经过胰岛素原cDNA 合成, 表示产物是胰岛素原, 经工具酶切开, 除去C-肽得人胰岛素。

5、 写出下列离子交换剂类型: 732 , 724 , 717 , CM-C ,DEAE-C , PBE94 。

6、 依据酶临床效果能够将酶分类, 其中胃蛋白酶属于 酶; 天冬酰胺酶含有 作用; 链激酶含有 作用; 超氧化物歧化酶含有 作用。

7、 四环类抗生素是一类以 为母核一族抗生素; 8、 链霉素是 类抗生素。

单项选择题(每小题1 分, 共10 分)1、 青霉素属于 类抗生素, 它性质很不稳定, 用溶剂萃取法分离时, 整个提炼过程应在低温 , 快速 , 正确调整pH 值下 进行。

( ) A .氨基糖苷 B .四环素 C .β-内酰胺 D .大环内脂2、 蛋白质类物质分离纯化往往是多步骤, 其后期处理手段多采取下列哪类方法。

( ) A.分辨率高 B.负载量大 C.操作简便 D.价廉3、 病毒类疫苗通常制备过程有多个步骤, 其中第一步是( ) A.病毒灭活 B.冻干 C.毒种选择 D. 病毒培养增殖4、 凝胶层析中, 有时溶质Kd>1, 其原因是 ( ) A.凝胶排斥 B.凝胶吸附 C.柱床过长 D.流速过低5、 在酸性条件下用下列哪种树脂吸附氨基酸有较大交换容量 ( ) A.羟型阴 B.氯型阴 C.氢型阳 D.钠型阳6、 亲和层析洗脱过程中, 经过改变洗脱剂PH 以影响电性基团解离程度洗脱方法称作 ( )A. 阴性洗脱B. 非专一性洗脱C. 竞争洗脱D. 非竞争洗脱7、 当向蛋白质纯溶液中加入中性盐时, 蛋白质溶解度先增大, 后减小现象称为( ) A .盐解 B. 盐溶和盐析 C. 盐溶 D.盐洗脱8、 盐析法与有机溶剂沉淀法比较, 其优点是 ( ) A.分辨率高 B.变性作用小 C.杂质易除 D.沉淀易分离9、 被吸附物性质能显著影响吸附过程, 相关溶质在溶液中溶解度影响, 下列叙述那种正确?( )A.溶解度越小越易吸附B.溶解度越大越易吸附C.无影响D.都不对 10、 能够除去发酵液中杂蛋白方法是 ( )A. 透析B. 等电点沉淀法C. 冷冻干燥法D. 蒸馏三、判定题(每题1分, 共10分)1、渗透压冲击法是因为溶解细胞壁造成细胞破碎()2、用吸附法分离物质时, 极性吸附剂适宜从极性溶剂中吸附非极性物质。

生物制药工艺学第二版各章习题

生物制药工艺学第二版各章习题

生物制药工艺学第二版各章习题《现代生物制药工艺学》配套习题班级:姓名:学号:第1章绪论习题一、名词解释:1、生物药物:2、生化药物3、生物制品二、填空题:1、按照药物的化学本质,把生物药物分为()、()、()、()、()、()、()七类。

2、生物药物的原料来源分为()、()、()、()、()五大类。

3、肝素的化学成分属于一种(),其最常见的用途是()。

4、SOD的中文全称是(),能专一性清除()。

5、辅酶在人体内的酶促反应中起重要的递H、递e等作用,有药用价值,请任意列举4种人体生化反应中重要的辅酶:()、()、()和()。

6、前列腺素的成分是一大类含五元环的(),重要的天然前列腺素有()、()、()等。

三、选择题1、复方氨基酸注射液临床最主要的用途是()A,治疗肝脏疾病;B,为重症患者提供蛋白类原料;C,为病人提供能量;D,用做稀释抗生素类药物的载体。

2、某些氨基酸的衍生物具有特殊药效,例如()是治疗帕金森病的最有效药物。

A,N-乙酰-Cys;B,S-甲基-Cys;C,S-氨基甲酰-Cys;D,L-多巴(L-二羟-Phe)3、下列药物其本质不属于多肽的为()A,催产素;B,加压素;C,胰岛素;D,胰高血糖素4、细胞因子如EGF、EPO等对特定细胞有重要的调节作用,有重要医用价值,目前发现的细胞因子,其成分主要为()类。

A,蛋白或多肽;B,多糖;C,固醇;D,核酸5、下列()药品目前已主要使用基因工程方法制备。

(多选)A,乙肝疫苗;B,胰岛素;C,人生长素;D,抗蛇毒血清6、抗生素的成分大多为()A,多糖;B,多肽;C,脂类;D,小分子化学物质7、cty C (细胞色素C)参与代谢的机制是()A,参与细胞内的无氧酵解;B,参与细胞内的有氧呼吸,是呼吸链的组成部分;C,参与氨基酸的转氨基反应;D,参与核苷酸的合成8、胰岛组织中胰岛素的含量仅为()A,0.5%;B,0.2%;C,0.02%;D,0.002%四、简答题1、请说明酶类药物主要有哪几类,并分别举例。

生物制药习题库及参考答案

生物制药习题库及参考答案

生物制药习题库及参考答案一、单选题(共130题,每题1分,共130分)1.三氧化二砷属于()。

A、有机毒害品B、有机剧毒品C、无机剧毒品D、无机毒害品正确答案:C2.微生物发酵pH值范围为( )。

A、1~3B、5~8C、9~10D、4~5正确答案:B答案解析:微生物发酵pH值范围为5~8。

3.高空采风、两次冷却、两次分油水、适当加热流程的特点是(A)A 高空采风、两次冷却、两次分油水、适当加热。

()A、A高空采风、两次冷却、两次分油水、适当加热。

B、两次冷却、高空采风、两次分油水、适当加热。

C、两次冷却、两次分油水、高空采风、适当加热。

D、两次冷却、两次分油水、适当加热、高空采风。

正确答案:A4.为了提高培养的灵敏度,也可以将需要检查的样品先置于( )条件下培养6小时,使杂菌迅速增殖后再划线培养。

A、24℃B、37℃C、28℃D、42℃正确答案:B答案解析:为了提高培养的灵敏度,也可以将需要检查的样品先置37℃条件下培养6小时,使杂菌迅速增殖后再划线培养。

5.生产1Kg成品所消耗种原材料的公斤数称为()A、消耗定额B、原料成本C、操作工时D、生产周期正确答案:A6.( )指被介质层捕集的尘埃颗粒与空气中原有颗粒之比A、过滤效率B、穿透率C、相对湿度D、填充系数正确答案:A答案解析:过滤效率指被介质层捕集的尘埃颗粒与空气中原有颗粒之比7.以下哪项20世纪70年底发现的技术为基因工程发展提供有力的工具A、DNA双螺旋结构模型B、限制性内切酶C、遗传信息中心法则D、重组人胰岛素正确答案:B8.菌种选育的方法包括()A、自然选育和人工育种B、诱变育种和杂C、自然选育和基因工程育种正确答案:A9.溶氧浓度是( )。

A、DO值B、OD值C、COD值D、BOD值正确答案:A10.含有酯键但不易发生水解反应的药物是()A、毛果芸香碱B、对乙酰氨基酚C、盐酸哌替啶D、阿托品E、布比卡因正确答案:C11.下列不属于按照培养基的用途划分的是()。

制药工艺学简答题(有答案)

制药工艺学简答题(有答案)

名词解释1.药物:用于预防、治疗或诊断疾病或调节机体生理机能、促进机体康复保健的物质,有4大类:预防药、治疗药、诊断药和康复保健药。

2.药品:指用于预防、治疗、诊断人的疾病,有目的的调节人的生理机能,并规定有适应症、用法和用量的物质。

3.生物药物:是利用生物体、生物组织、细胞或其成分,综合应用生物学、物理化学和现代药学的原理与方法加工制造而成的一大类用于预防、诊断、治疗和康复保健的药物。

4.DNA重组药物:指应用基因工程和蛋白质工程技术制造的重组活性多肽、蛋白质及其修饰物。

5.基因药物:以遗传物质DNA、RNA为物质基础制造的药物,包括基因治疗用的重组目的DNA片段、基因疫苗、反义药物和核酶等。

6.生化药物:具体运用生物化学研究方法,从生物体中经提取、分离、纯化获得天然活性物质或结构改造创造出自然界没有的新活性物质,通称生化药物。

7.微生物药物:微生物在其生命活动过程中产生的生理活性物质及其衍生物,包括抗生素、酶抑制剂、免疫调节剂等一类化学物质的总称。

8.生物制品:生物制品是应用基因工程、细胞工程、蛋白质工程、发酵工程等技术获得的微生物、细胞及各种动物和人源的组织和液体等生物材料制备用于人类疾病预防、治疗和诊断的药品。

9.中试放大:中试放大是在实验室小规模生产工艺路线打通后,采用该工艺在模拟工业化生产的条件下所进行的工艺研究,以验证放大生产时原工艺的可行性,保证研发和生产时工艺的一致性。

10.超滤:一种流体切向流动和压力驱动的过滤过程,并按照分子量大小来分离水中颗粒。

11.切向流:指液体流动方向与过滤方向呈垂直方向的过滤形式。

12.干燥:使物质从固体或半固体状态经除去存在的水分或其他溶剂,从而获得干燥物品的过程,分为低温真空干燥、喷雾干燥、冷冻干燥。

13.冷冻干燥:(1)在低温、低压条件下,利用水的升华性能而进行的一种干燥方法。

(2)把含有大量水分物质,预先进行降温冻结成固体,然后在真空的条件下使水蒸气直接升华出来,而物质本身剩留在冻结的冰架中。

生物制药工艺学习题汇总

生物制药工艺学习题汇总

第三章填空题1. 反应溶剂直接影响化学反应的反应速度、反应方向、反应深度、产品构型等。

2.水、乙醇、乙酸、乙二胺等属于质子溶剂,乙醚、二氯甲烷、丙酮、吡啶等属于非质子溶剂,甲苯、正己烷、环己烷等属于惰性溶剂。

选择题1.可逆反应属于(A )A. 复杂反应B. 平行反应C. 基元反应D. 简单反应3.在溶剂的作用描述中,不正确的是( B )A.使反应分子能够分布均匀、增加分子间碰撞和接触的机会、有利于传热和散热。

B.溶剂必须是易挥发的C.溶剂必须是惰性的,不能与反应物或生成物反应D.溶剂直接影响化学反应的反应速度、反应方向、反应深度、产品构型等简答题单分子反应,双分子反应,一级反应,二级反应之间的关系?答:在某基元反应过程中若只有一分子参与反应则称为单分子反应。

多数的一级反应为单分子反应。

当相同或不同的两分子碰撞时相互作用而产生的反应称为双子反应,即为二级反应。

化学合成药物工艺研究的主要内容是什么?答:化学合成药物工艺研究的主要内容有7个:配料比、溶剂、温度和压力、催化剂、反应时间及其监控、后处理、产品的纯化和检验。

第四章1.简述天然提取法制备手性药物的一般步骤?答:①酶法分析②酶催化的还原反应③酶催化的氧化反映④酶催化的不对称合成反应⑤酶催化的转氨基化作用2.什么是手性药物,其构型与活性的特点是什么?答:具有药理活性的手性化合物就是手性药物。

①两个对映体具有相同的药理作用。

②两个对映体中的一个有药理活性,另一个则无明显作用。

③两个对映体的药理作用不同,上市后用于不同的适应症。

④在消旋体中增加一种对映体的比例可调整临床疗效。

⑤两个对映体中的一个有治疗价值,另一个则有不良作用。

第五章选择题1、氯霉素抗菌谱广,而最主要的不良反应是(D)A、二重感染B、胃肠道反应C、对肝脏严重损害D、对造血系统的毒性E、影响骨、牙生长2、与氯霉素特点不符的是(A)A、口服难吸收B、易透过血脑屏障C、适用于伤寒的治疗D、骨髓毒性明显E、对早产儿、新生儿可引起灰婴综合症3、氯霉素的下述不良反应中,哪项是与剂量和疗程无关的严重反应?(A)A、不可逆的再生障碍性贫血B、灰婴综合征C、可逆的各类血细胞减少D、溶血性贫血E、出血现象4、可能拮抗氯霉素抗菌作用的药物是(C)A、磺胺类B、庆大霉素C、红霉素D、四环素E、多黏菌素填空题1、氯霉素有2 个手性中心,4 个光学异构体.2、利用氯霉素生产工艺中副产物可以生产除草剂-杀草铵.邻硝基乙苯简答题1、对硝其-α-溴代苯乙酮的制备中水含量有何影响?为什么?答:水分存在时与溴化氢反应,诱导其延长或基本不起反应,因此对硝基苯乙酮溴代反应时,水分存在不利于反应,必段严格控制溶剂的水份第六章选择题:1.具有明显抗癌作用的紫杉醇来源于。

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8生物制药工艺学习题集-离子交换法
第八章离子交换法
一、填空题
1、离子交换剂由、和组成。

平衡离子带
为阳离子交换树脂,平衡离子带称阴离子交换树脂。

2、常见的离子交换剂有,,等。

3、离子交换树脂的基本要求
有、


和。

4、影响离子交换选择性的因素主要有、、
、、等。

5、请写出下列离子交换剂的名称和类型:CM-C 的名称是,属于交换纤维素; DEAE-C的名称是,属于
交换纤维素;。

6、色谱聚焦(chromatofocusing)是一种高分辨
的新型的蛋白质纯化技术。

它是根
据,结合,能
分离几百毫克蛋白质样品,洗脱峰被聚焦效应浓
缩,分辨率很高,操作简单。

7、写出下列离子交换剂类型:
732 ,
724 ,
717 ,
CM-C ,DEAE-C ,PBE94 。

8、在采用多缓冲阴离子交换剂作固定相的离子
交换聚焦色谱过程中,当柱中某位点之pH值下
降到蛋白质组分值以下时,它因带
电荷而,如果柱中有两种蛋白组分,
pI值较者会超过另一组分,移动至柱下
部pH较的位点进行。

9、影响离子交换选择性的因素
有、、

、。

二、选择题
1、用钠型阳离子交换树脂处理氨基酸时,吸附量很低,这是因为()A.偶极排斥B.离子竞争C.解离低D.其它
2、在酸性条件下用下列哪种树脂吸附氨基酸有较大的交换容量()
A.羟型阴
B.氯型阴
C.氢型阳
D.钠型阳
3、在尼柯尔斯基方程式中,K值为离子交换常
A.小于平衡离子
B.大于平衡离子
C.等于平衡离子
D.其它
三、名词解释
1、蛇笼树脂:
2、尼柯尔斯基方程式:
3、偶极离子排斥作用:
四、问答题
1、简述离子交换纤维素的特点有哪些?
2、请以CM-C为例说明离子交换纤维素分离纯化蛋白质时的洗脱方法有哪些?并说出各种方法的洗脱原理。

3、请以DEAE-C为例说明离子交换纤维素分离纯化蛋白质时的洗脱方法有哪些?并说出各种方法的洗脱原理。

4、由下图,利用给出的两种离子交换剂(E
1

E
2)分离3种蛋白质(P
1
、P
2
、P
3
),用箭头流程
图表示(并指出E
1,E
2
的类型)。

5、下图为离子交换法应用实例,请填写生产工艺流程中的空格(可选因素:阴离子交换树脂,阳离子交换树脂, 0.05mol/L氨水,0.1mol/L 氨水,2mol/L氨水)。

简述从“滤液”开始,以后步骤的分离原理?
第八章离子交换法(答案)
一、填空题
1、离子交换剂由惰性的不溶性载体、功能基团和平衡离子组成。

平衡离子带正电荷为阳离子交换树脂,平衡离子带负电荷称阴离子交换树脂。

2、常见的离子交换剂有离子交换树脂,离子交换纤维素,葡聚糖凝胶离子交换剂等。

3、离子交换树脂的基本要求有有尽可能大的
交换容量、有良好的交换选择性、化学性质稳定、化学动力学性能好和物理性能好。

4、影响离子交换选择性的因素主要有离子价与离子水合半径、离子价与离子浓度、交换环境、树脂结构、偶极离子排斥等。

5、请写出下列离子交换剂的名称和类型:CM-C 的名称是羧甲基纤维素,属于弱酸型阳离子交换纤维素; DEAE-C的名称是二乙基氨基乙基纤维素,属于强碱型阴离子交换纤维素;。

6、色谱聚焦(chromatofocusing)是一种高分辨
的新型的蛋白质纯化技术。

它是根据蛋白质的等电点,结合离子交换技术的大容量色谱,能分离几百毫克蛋白质样品,洗脱峰被聚焦效应浓缩,分辨率很高,操作简单。

7、写出下列离子交换剂类型:732 强酸型阳离子交换树脂,724 弱酸型阳离子交换树脂,717 强碱型阴离子交换树脂,CM-C 阳离子交换纤维素 ,DEAE-C 阴离子交换纤维素,PBE94 阴离子交换剂。

8、在采用多缓冲阴离子交换剂作固定相的离子交换聚焦色谱过程中,当柱中某位点之pH值下降到蛋白质组分 PI(等电点) 值以下时,它因带正电荷而下移,如果柱中有两种蛋白组分,pI值较大(高)者会超过另一组分,移动至柱下部pH较高的位点进行聚焦(交换)。

9、影响离子交换选择性的因素有离子水合半径、离子价与离子浓度、交换环境、树脂结构、偶极离子排斥。

二、选择题
1、用钠型阳离子交换树脂处理氨基酸时,吸附量很低,这是因为(C)
A.偶极排斥
B.离子竞争
C.解离低
D.其它
2、在酸性条件下用下列哪种树脂吸附氨基酸有较大的交换容量( C )
A.羟型阴
B.氯型阴
C.氢型阳
D.钠型阳
3、在尼柯尔斯基方程式中,K值为离子交换常
A . 小于平衡离子
B .大于平衡离子
C . 等于平衡离子
D . 其它
三、名词解释
1、蛇笼树脂:由丙烯酸或甲基丙烯酸在季胺型阴离子交换树脂(如Dowex )中聚合而成的一类树脂称蛇笼树脂。

它是一种两性树脂,它适宜于从有机物质(如甘油)水溶液中吸附盐类,再生时用水洗,就可将吸着的离子洗下来。

2、尼柯尔斯基方程式:,1221111
2121
1
K C m C m Z Z Z Z =⋅⋅ 即212112111211Z
Z Z Z C C K m m = 其中m 1、m 2及C 1、C 2分别代表树脂上和溶液中
的两种离子的浓度。

K值的大小取决于树脂和交换离子的性质,以及交换条件。

K>1时说明离子A1比离子A2对树脂有较大的吸引力;反之,K<1时树脂对A2的吸引力大于A1。

3、偶极离子排斥作用:许多生化物质都是两性物质。

其中有些是偶极离子。

因为它们即使净电荷为零时,正电中心和负电中心并不重叠,遂成偶极。

偶极离子在离子交换过程中的行为是很特殊的。

现以氨基酸的离子交换为例。

-
+
+
-+NRCCO
H
Na
S O3
3
+
-
+
-+Na
NRCOO
H
S O3
3
式中由于使用了钠型树脂,被吸附氨基酸的羧基所带的负电荷与树脂磺酸基之负电荷产生排斥力。

这就是所谓偶极离子的排斥作用。

因此使树脂对氨基酸的吸附量大大降低。

四、问答题
1、简述离子交换纤维素的特点有哪些?
答:离子交换纤维素的特点是:离子交换纤维素为开放的长链骨架,大分子物质能自由地在其中扩散和交换,亲水性强,表面积大,吸易附大分子;交换基团稀疏,对大分子的实际交换容量大;吸附力弱,交换和洗脱条件缓和,不易引起变性;
分辨力强,能分离复杂的生物大分子混合物。

2、请以CM-C为例说明离子交换纤维素分离纯化蛋白质时的洗脱方法有哪些?并说出各种方法的洗脱原理。

答:无论是升高环境的pH还是降低pH或是增加离子强度都能将被吸附物质洗脱下来。

现以羧甲基纤维素为例加以说明,图中H2N-P表示蛋白质,C表示纤维素。

C OCH2COO- H3+P OH-
H+
NaCl
C OCH2COO- H2N P H2O
+
+
C2COOH H3+N P
+
C OCH2COO-Na+ H3+N P Cl-
++
(1)、升高环境的pH,使蛋白质在此pH下失去电荷,从而丧失与CM-C结合力而被洗脱下来。

(2)、降低环境的pH,使CM-C在此pH下不解离,从而不能吸附蛋白质而被洗脱下来。

(3)、用高浓度的同性离子根据质量作用定律将目的物离子取代下来。

3、请以DEAE-C为例说明离子交换纤维素分离纯化蛋白质时的洗脱方法有哪些?并说出各种方法的洗脱原理。

答:无论是升高环境的pH还是降低pH或是增
加离子强度都能将被吸附物质洗脱下来。

(1)、升高环境的pH,使DEAE-C在此pH 下不解离,从而不能吸附蛋白质而被洗脱下来。

(2)、降低环境的pH,使蛋白质在此pH下失去电荷,从而丧失与DEAE-C结合力而被洗脱下来。

(3)、用高浓度的同性离子根据质量作用定律将目的物离子取代下来。

4、由下图,利用给出的两种离子交换剂(E
1

E
2)分离3种蛋白质(P
1
、P
2
、P
3
),用箭头流程
图表示(并指出E
1,E
2
的类型)。

E1为阴离子交换剂E
2
为阳离子交换剂
5、下图为离子交换法应用实例,请填写生产工艺流程中的空格(可选因素:阴离子交换树脂,阳离子交换树脂, 0.05mol/L氨水,0.1mol/L 氨水,2mol/L氨水)。

简述从“滤液”开始,以后步骤的分离原理?
答:阳离子交换树脂,0.05mol/L氨水,0.1mol/L 氨水,2mol/L氨水
滤液调节到pH2.5时,氨基酸带正电荷,因此选用阳离子交换树脂,之后根据氨基酸等电点的不同,依次用0.05mol/L氨水,0.1mol/L氨水,2mol/L氨水洗脱。

酸性氨基酸等电点低,因此
用0.05mol/L氨水就可洗脱下来,而碱性氨基酸等电点高,因此需用2mol/L氨水才能将之洗脱下来。

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