高效液相色谱法测定邻苯二甲酸酯实验报告
高效液相色谱法测定邻苯二甲酸酯实验报告
高效液相色谱法测定邻苯二甲酸酯实验报告实验目的：1.学习掌握高效液相色谱法（HPLC）的基本原理和操作方法；2.通过测定邻苯二甲酸酯的含量，了解其在环境中的污染状况。
实验原理：高效液相色谱法是一种常用的分析技术，具有高分辨率、高灵敏度和高重复性的特点。
此实验中使用的HPLC仪器由进样系统、流动相系统、色谱柱和检测器组成。
样品进样后，通过流动相在色谱柱中分离，不同组分按照特定的时间顺序通过，再通过检测器检测并计算得到定量结果。
实验步骤：1.仪器和色谱柱的准备：打开和保持HPLC仪器的电源，并预热至工作温度。
选择合适的色谱柱，并平衡至稳定状态。
2.样品的制备和进样：取一定质量的待测样品，加入适量的提取液，并充分混合。
用适当的过滤器进行过滤，将过滤后的样品进样到色谱柱中。
3.进样和流动相参数的设置：根据样品的性质和分析要求，设置进样量和流动相组成。
常用的流动相为二氯甲烷和甲醇的混合物。
4.色谱柱运行：开启HPLC仪器，并调整流动相的流速和温度。
根据不同的物质特性，选择合适的梯度程序进行分离。
在分离过程中，对流动相温度和流速进行实时监测和调整。
5.检测器的设置和数据处理：选择合适的检测器，并设置检测参数。
在检测过程中，记录不同时间点的信号强度，并输入到计算机软件中进行峰面积和浓度的计算。
实验结果：根据上述实验步骤，测定了待测样品中邻苯二甲酸酯的含量。
根据HPLC测定结果，经过数据处理和计算，得到待测样品中邻苯二甲酸酯的浓度为x mg/L。
结论：通过本实验，成功地应用高效液相色谱法测定了待测样品中邻苯二甲酸酯的含量，得到了可信的分析结果。
该方法操作简便、准确可靠，可用于环境监测和化学分析中对邻苯二甲酸酯的定量测定。
反相高效液相色谱法测定水体中邻苯二甲酸酯
关键词：邻苯二甲酸酯； 液萃取； 液． 反相高效液相色谱； 水体
中图分类号： ６ ７ ０ ５． ７
ｄ ｉ １．９ ９ ．ｓ．０ ３２ ８ ． １． ．５ ｏ： ０３ ６０ｉ ｎ１０ －４ ３２ ０ ２ ｓ ０１９
文 献标识ｔ ：Ａ ｉ ￣ －
用洗净的玻璃瓶采样， 采集后立即密封样品， 采集的水样用 ０ ５ｍ微孔滤膜过滤后置于冰箱 ４ 条件保存． ．￣ ４ｔ ＂ Ｃ ２ ． 水样的预处理 ．２ ３
取 ５ ０ Ｌ水样于 ｌ０ｍ ０ｍ Ｏ０ Ｌ分液漏斗中， １０ Ｌ二氯 甲烷分三次萃取 （０ Ｌ ０ Ｌ ０ Ｌ 分别震荡 用 ０ｍ ４ｍ ＋３ ｍ ＋３ ｍ ）， 萃取 １ ０分钟， 萃取液过无水硫酸钠， 收集于浓缩瓶中， 用少量二氯 甲烷洗涤漏斗并将其转移至浓缩瓶 中． 将浓 缩 瓶置 于 旋转 蒸 发浓 缩仪 中浓 缩至 约 １ｍＬ ０ ，待 净化 ． 将 浓缩 的萃取液通过氧化铝层析柱 净化， 以正 己烷为淋洗液， 将收集的淋洗液浓缩至干， 最后用甲醇定容 至 １． ，待测 ． ００ ｍＬ ２ ． 水样的色谱测定条件 ．３ ３ 色谱柱 ：ｐ ｅｏ ｅｅＯ Ｓ （５ ｘ ４ ｍ ｈｎ ｍ ｎｘ Ｄ 柱 ２ ０ ４ ． ｍ）； ６ 检测器 ：二极管矩阵检测器； 流动相 ：甲醇一 （５５ 柱 水 ９ ：）； 温 ：３ ℃；进 样体 积 ：２ ；压力 范 围 ：１０ ｐｉ ６０ｓ ５ ０ ３０ ｓ １０ｐｉ ．
旋 转 蒸 发仪试剂 ．１ ２ 邻苯二 甲酸二 甲酯 邻苯二 甲酸二丁酯 邻苯二甲酸二正辛酯 ＡＲ 成都市科龙化工试剂厂；甲醇 Ａ． ． Ｒ Ｄｉｍａ ｅｈ ｏｏ ｉ ；二氯 甲烷 正 己烷 中性 氧化 铝 （０ －０ ｋ ｃｎ ｌｇｅ Ｔ ｓ １０２ ０目） 无水 硫 酸钠 Ａ． Ｒ ２２２ 标 准储 备 液 ．． 以甲醇作溶剂分别配制浓度 １０ ｇＬ的 Ｄ 、Ｄ Ｐ Ｏ ００ ／ ｍ ＭＰ Ｂ 、Ｄ Ｐ单标液． 再用甲醇稀释至浓度均为 １０ ／ ０ ．ｍｇ ０ Ｌ 的标准储备液．
高效液相色谱-二级管阵列检测器法测定化妆品中邻苯二甲酸酯
保持 １ ｎ； 样 口温度 ：８ ￣ 色 谱 一质谱 接 口 ０ｍｉ 进 ２ ０Ｃ；
超 纯水 仪 ： ｌ． Ｍｉｉ ｌＱ型 ， 国密理博 公 司 ； 美
有 机性 样 品滤 膜 ： ． ｍ ； ０ ５ｕ ４
甲醇 、 乙腈 ： 色谱纯 ； Ｂ Ｐ Ｄ Ｐ、 Ｈ Ｂ 、 Ｂ ＤＥ Ｐ标 准品 ： 纯度 为 ９ ． 上 海 ９８ ％，
ＭＳ 型 ， 国安捷 伦公 司 ； Ｄ 美
（） ２ 气相色谱 一 质谱条件
色谱柱 ： ｍＬ５ ＭＳ柱 （０ｍ × ． ｕ ，． ｍ） ３ ０２ ｒ ｎ ０ ５ｕ ， ５／ ２
高效液相色谱_串联质谱法测定食品中邻苯二甲酸酯_刘红河
ＩＳ 电压： ５ ０００ Ｖ； 离子源温度 ： ５００℃； 雾 化 气 压 力 ： １１ ｐｓｉ； 气 帘 气 压 力 ： １１ ｐｓｉ； ＣＡＤ＝５ Ｌ／ｍｉｎ； Ｇａｓ１ ＝１１ Ｌ／ｍｉｎ；
Ｇａｓ２＝７０ Ｌ／ｍｉｎ； ＥＰ＝１０； ＭＲＭ 参数见表 １。
１．３ 样品来源 样品来自于深圳市各大超市和商场抽样或送检产品。
高效液相色谱 － 串联质谱法测定食品中邻苯二甲酸酯
刘红河 １， 黄晓群 ２， 王晖 ３， 黎源倩 ４， 张克荣 ４
摘要： ［ 目的 ］ 建立液相色谱－ 串联质谱联用同时测定食品中 ５ 种邻苯二甲酸酯类 （ ＰＡＥｓ） 残留的方法， 调查这 ５ 种物质在食品中的污染情况。 ［ 方法 ］ 用正己烷浸泡， 超声振荡对样品中 ＰＡＥｓ 进行提取并净化， 采用高效液相色谱－ 串联质谱联用法测定其中邻苯二甲酸二甲酯 （ ＤＭＰ） 、邻苯二甲酸二乙酯 （ ＤＥＰ） 、邻苯二甲酸二丁酯 （ ＤＢＰ） 、邻苯二甲 酸 二 异 辛 酯 （ ＤＥＨＰ） 、 邻 苯 二 甲 酸 二 正 辛 酯 （ ＤＯＰ） ， 离 子 源 为 ＥＳＩ （ ＋） ， 定 量 检 测 方 式 为 多 反 应 监 测 （ ＭＲＭ） 方 式 ， 利 用 保 留 时 间 和 碎 片 信 号 比 值 判 断 定 性 结 果 。 并 用 建 立 的 方 法 分 析 实 际 样 品 。 ［ 结 果 ］ ５ 种 ＰＡＥｓ 线 性 相 关 系 数 ｒ﹥ ０．９９７， 变 异 系 数 在 １．２％～９．３％之 间 ， 高 、 中 、 低 不 同 水 平 的 加 标 回 收 率 在 ８０．９％～１１９．８％之 间 。 测 定 ２５６ 种 食 品 样 品 ， ＰＡＥｓ 的检出率为 ３２．６％。 ［ 结论 ］ 该方法简便快速， 精密度较高， 重现性较好， 可应用于食品中 ５ 种邻苯二甲酸酯类 的同时测定。调查结果显示， 食品中邻苯二甲酸酯类环境激素的污染比较严重， 应引起有关部门的重视。
QuEChERS-高效液相色谱法测定土壤中邻苯二甲酸酯
h FQ E AQ e L !高效液相色谱法测定土壤中邻苯二甲酸酯!魏丽琼$呼世斌$刘书慧$王娇娇$柴琴琴$刘晋波!西北农林科技大学"陕西杨凌*"#"’’$摘要!邻苯二甲酸酯&6B Q 4’类物质是一种人工合成的环境激素类化合物"建立了一种h FQ E AQ e L !高效液相色谱法联合测定土壤中,种6B Q 4"土壤样品经h FQ E AQ e L 法提取后进行了高效液相色谱分析测定"选取乙腈#乙酸乙酯#甲醇作为萃取剂!对萃取剂进行选择!对影响萃取效率的萃取剂体积#超纯水体积#盐量等条件进行优化"方法的加标回收率为)&%*+b "’#%3+!检出限为’%&)b "%#)"01Z0!相对标准偏差&/p *’为"%(+b &%;+"该方法前处理简单!萃取剂用量少!分析时间短!适用于土壤中6B Q 4的大批量测定分析"关键词!土壤%邻苯二甲酸酯%hFQ E AQ e L %高效液相色谱法<=>%"’%";#’,1?@A?0:@#’"(’,’;#2"&"%,’)$&’()(*#V &V $+’0$0’2"!&"%!’)!(’+./_L "0Q "%!5V ’W V#"%*(%,$)0"+’_3’20V %(,$&(W %$#V /-Q >28G f8M 90"J VLA8G [89"2>VLAFG AF8"-B C Dd 87M G ?87M "E J B >h 89G f89"2>Vd 89G [M!C M R U AY P 4U B 0R 8:FN U FR P 79.]M R P 4U R H V 98W P R 48U H "a 790N 890*"#"’’"E A897$$6789:;8%6AU A7N 8:7:8.P 4U P R 4!6B Q 4$Y P R P4H 9U AP U 8:P 9W 8R M 9/P 9U 7N P 9.M :R 89P.84R FXU M R 4@B h FQ E AQ e LG A80A XP R O M R /79:P N 8fF8.:AR M /7U M 0R 7XAH !J 62E $/P U AM .Y P R P P 4U 7[N 84AP .O M R .P U P R /897U 8M 9M O O 8W P 6B Q 4894M 8N @S AP 47/XN P 4Y P R P P \U R 7:U P .[H h FQ E AQ e L /P U AM ."79.U AP 9.P U P R /89P .[H J 62E @B :P U M 98U R 8N P "P U AH N 7:P U 7U P79./P U A79M N Y P R P4P N P :U P .74U APP \U R 7:U 8M 94M N W P 9U "79.U AP P \XP R 8/P 9U 7N :M 9.8U 8M 94Y P R PM XU 8/8K P ."4F:A 74P \U R 7:U 8M 94M N W P 9U "W M N F/PM O FN U R 7XFR PY 7U P R "79.47N U @S AP 7W P R 70P R P :M W P R H Y P R P 89U APR 790PM O )&%*+b "’#%3+"U APN 8/8U 4M O .P U P :U 8M 9R 790P .O R M /’%&)U M"%#)"01Z0"79.U AP R P N 7U 8W P 4U 79.7R .R 790P .O R M /"%(+U M &%;+!/p *$@S AP /P U AM .XR M W 8.P .U AP 7.W 79U 70P 4M O 48/XN P M XP R 7U 8M 9"A80A P O O 8:8P 9:H O M R 47/XN P 4XR P U R P 7U /P 9U "4AM R U U 8/PO M R 797N H 484"79.Y 744F8U 7[N PO M R U AP.P U P R /897U 8M 9M O XAU A7N 8:7:8.P 4U P R 4897N 7R 0P 9F/[P R M O 4M 8N 4@<=>?@9A 7%4M 8N #XAU A7N 8:7:8.P 4U P R 4#h FQ E AQ e L #A80A XP R O M R /79:P N 8fF8.:AR M /7U M 0R 7XAH$$$$$$$$!科技部,3(;-子课题,污灌区重金属!有机物复合污染土壤修复技术研究-!#’"#BB "’"&’&$&收稿日期%#’",!’)!"*BC 引C 言邻苯二甲酸酯!又名酞酸酯"简称6B Q 4$是一种能够起到软化作用的人工合成的有机化合物"多用作塑料增塑剂"以增大塑料产品的可塑性和柔韧度"在塑料中的含量达#’+b ,’+(")&由于6B Q 4在塑料中呈游离态"与塑料基质之间以范德华力和氢键联结(#)"极易进入周围的环境介质中"随着时间的推移富集下来&目前"在大气’水体’土壤和植物体等环境介质中都已检测到6B Q 4的存在&6B Q 4作为一种普遍存在的环境污染物"在环境中性质较稳定"可持久存在"有较强的生物蓄积效应"可通过食物链进入人体"危及人体健康(;G &)&国内外大量研究表明"6B Q 4是一种环境激素类物质"部分具有致癌’致畸’致突变的危害"多数还具有内分泌干扰性"可改变人体血液中雌激素的正常水平"产生慢性危害(,G *)&美国环保局已将邻苯二甲酸二甲酯!<56$’邻苯二甲酸二乙酯!<Q 6$’邻苯二甲酸二丁酯!<_6$’邻苯二甲酸丁基苄基酯!__6$’邻苯二甲酸二!#G 乙基己基$酯!<Q J 6$’邻苯二甲酸二辛酯!<=6$(种3&"环$境$工$程Q 9W 8R M 9/P 9U 7N Q 9089P P R 890酞酸酯列为优先控制污染物"我国也将<Q6’<=6’<56;种列入优控有毒污染物黑名单&目前"对土壤中6B Q4的提取有加速溶剂萃取(3)’索式提取())’超声提取("’)’微波辅助萃取("")等方法"这些方法虽能取得较好的提取效果"但存在耗时长"萃取剂用量大"需要专用仪器等缺点& h FQ E AQ e L法读作,:7U:AP R4-"为快速!fF8:Z$’简便!P74H$’经济!:AP7X$’高效!P O O P:U8W P$’耐用!R F00P.$和安全!47O P$的英文缩写"于#’’;年诞生于美国"广泛用于检测水果和蔬菜中的药物残留("#)&它的基本过程是基于盐析辅助水溶性有机溶剂!如乙腈’丙酮’乙酸乙酯等$的液液萃取(";)"萃取后加入6LB等吸附剂除杂"上清液进行D E G5L或J62E检测&由于土壤样品基体复杂"污染物较多"土样中6B Q4的前处理技术在其监测中起重要作用& h FQ E AQ e L法提取土壤中的6B Q4目前还没有研究涉及"本研究采用改进的h FQ E AQ e L联合高效液相色谱法测定土壤中,种6B Q4"建立了一种前处理简便"溶剂用量少"分析时间短的检测方法&DC实验部分DE DC主要仪器和试剂-7U P R4(’’高效液相色谱仪"带紫外检测器!美国-7U P R4公司$#_8M O F0P LU R7U M4台式高速冷冻离心机!德国J P R7P F4公司$#B V a##’分析天平!日本LA8/7.K F公司$##,’"2平头微量注射器!上海高鸽$#‘M R U P\G D P98P#涡旋振荡器!美国L:8P9U8O8: >9.F4U R8P4公司$#"’/2玻璃离心管&为降低6B Q4的污染"实验中避免使用任何塑料制品"所有玻璃仪器使用前用超纯水’丙酮多次清洗"置于马弗炉中&,’c烘烤#b&A&乙腈!J62E级$"乙酸乙酯!分析纯$"甲醇!优级纯$"丙酮!J62E级$均购自国药化学试剂有限公司"纯度均在))%,+以上&无水50L=&和C7E N于&,’c烘烤#b&A"放在玻璃器皿中冷却后置于干燥器中备用&邻苯二甲酸二甲酯!<56$’邻苯二甲酸二乙酯!<Q6$’邻苯二甲酸二丁酯!<_6$’邻苯二甲酸丁基苄基酯!__6$’邻苯二甲酸二!#G乙基己基$酯!<Q J6$标准溶液!溶解于甲醇溶剂$"质量浓度均为#’’’"01/2"购自美国L80/7G B N.R8:A公司&用甲醇稀释"’倍为#’’"01/2作储备液"存放于&c的冰箱中备用&DE FC样品前处理DE FE D$土样制备将采集的土壤样品自然风干"磨碎后过(’目!’%;//$筛"放在玻璃容器中保存&选择不含6B Q4的空白土样!经高效液相色谱仪扫描未发现6B Q4物质$进行回收率试验&准确称取#%’’’’0空白土样于"’/2玻璃离心管中"加入所需添加量的邻苯二甲酸酯混合标准溶液"加标后"再加入足量的萃取剂完全浸没土样"使6B Q4在土样中彻底混匀&将加标土样置于通风厨内晾干"备用&DE FE F$实验方法称取#%’’’’0土样于"’/2玻璃离心管中"先加入#/2的超纯水"涡旋"/89!为了避免接触离心管的塑料盖子"用铝箔纸将盖子与样品分离开来$"然后加入,/2的萃取剂"涡旋振荡器大力涡旋"/89"之后再加入#0无水50L=&和’%,0C7E N"立即涡旋"/89!立即涡旋是为了避免无水50L=&吸水时形成结块$&随后离心管在&’’’R1/89离心,/89"最后取上清液过’%##"/的滤膜"J62E待测& DE GC色谱条件色谱分离柱%-7U P R4LH//P U R HEN3柱!#,’//^ &@(//","/$&流动相%甲醇!B$***水!_$&柱温% #,c#进样量%#’"2#检测波长%##,9/#流速% "%’/21/89&梯度洗脱程序%’b;/89"3,+B"",+ _#;b*/89"3,+B线性变化至"’’+B#*b"’/89" "’’+B&FC结果与讨论FE DC空白实验由于邻苯二甲酸酯是一种塑料增塑剂"实验操作中很难完全避免塑料制品的使用"整个实验过程较容易受到外界6B Q4的干扰"因此对溶剂’器皿’操作过程中的6B Q4污染要进行严格的控制&FE DE D$试剂空白对于实验中所使用的试剂进行高效液相色谱测定",种6B Q4均未检出&FE DE F$全过程空白取空白土样作全过程空白实验"依据上述实验方法进行样品处理"经高效液相色谱检测"结果表明" ,种6B Q4均未检出"低于最低检测的浓度"满足分析要求&FE FC不同萃取剂对回收率的影响通常"由于乙腈和乙酸乙酯在h FQ E AQ e L法萃)&"监$测$与$评$价Q9W8R M9/P9U7N5M98U M R890l B44P44/P9U取水果和蔬菜中农药残留的高效率("#)而被作为该方法的萃取剂#另外"6B Q4在甲醇和乙腈中有较好的溶解性"这两种溶剂都与水互溶"加盐离心后均可以与水相分离"皆可作为h FQ E AQ e L前处理的萃取溶剂&因此实验选择了乙腈’乙酸乙酯和甲醇作为萃取剂"考察了不同萃取剂对6B Q4回收率的影响"每组做;个平行实验且做空白对照&结果如表"所示&表DC萃取剂对回收率的影响&:6J=DC"P P=;8@P=O89:;8M@N7@J Z=N8@N9=;@Z=9>9:8=7@P:N:J>8=7+化合物回收率乙腈乙酸乙酯甲醇<563#%"3’%,,(%;<Q6*)%;*&%)("%*__63’%&*3%;*&%#<_63&%)3"%#**%,<Q J6)*%3);%;*)%"由表"可以看出%;种萃取剂相比"乙腈作为萃取剂对,种6B Q4都有较好的回收率&乙腈是h FQ E AQ e L法中常用的萃取剂"它能在盐!无水硫酸镁和氯化钠$加入时较好地从水相中分离开来"实现了较高的回收率&而萃取过程中发现乙酸乙酯较易黏在器壁上"不利于6B Q4与土样的分离"导致萃取效率低于乙腈&甲醇对6B Q4的萃取回收率较低"因此本实验选用乙腈作为萃取剂&FE GC h FQ E AQ e L萃取6B Q4的条件优化FE GE D$超纯水体积h FQ E AQ e L方法最初是用于检测水果和蔬菜等含水率较高的环境基质"对于土壤等含水率较低的基质来说"通常要在萃取剂萃取之前加水润湿样品"可使样品的气孔增大"萃取剂更易进入样品&研究了土样中加入不同体积的水对目标分析物的回收率的影响%在#0加标土样中分别加入#/2和;/2超纯水"混合物涡旋"/89"随后进行萃取过程"加入一定数量和成比例的乙腈及盐"按h FQ E AQ e L步骤实验&结果表明%<56的加标回收率分别为*)+和3"+" <Q6的加标回收率分别为(*+和(,+"__6的加标回收率分别为*#+和*’+"<_6的加标回收率分别为3#+和3&+"<Q J6的加标回收率分别为3)+和)"+"通过比较"不同体积的水对回收率影响差别不大"因此选择加入#/2超纯水"足以完全浸透土样"为涡旋部分适当的提供了土样适合的均质化&FE GE F$萃取剂体积通常理想的分析方法就是用最小的量以求达到统计上可靠的结果&实验中使用较多的样本量就要使用大量的萃取剂"导致更多的浪费和较大的安全隐患&由于玻璃离心管容积的限制"萃取剂体积也受到限制"因此土样量选择#0"萃取剂体积分别为;", /2"水的体积和盐的质量根据萃取剂体积成比例加入&结果表明%萃取剂为,/2时对土样中,种6B Q4的回收率较高"均可达3*+以上&FE GE G$加盐量土样经萃取溶剂萃取后"盐的加入是为了实现有机相与水相的分离"在它们的分离过程中目标分析物将从样品中分离出来进入萃取溶剂中"完成目标分析物的提取过程&C7E N的加入引起的盐析效应通常会导致极性化合物回收率的增加"能够控制有机相中水的百分比&加入过饱和的无水50L=&是因为它可以大量吸水"从而显著地减少水相"促进分析物从有机相中分离&表#中给出了不同组合的无水50L=&和C7E N及其相应的结果"可以看出%,/2的萃取剂提取后加入#0无水50L=&和’%,0C7E N时"回收率最高"该组合在其他文献中也有体现&表FC不同组合的盐对目标分析物回收率的影响&:6J=FC’N P J L=N;=@P A M P P=9=N8;@R6M N:8M@N7@P7:J87@N8Q= 9=;@Z=9>9:8=7@P8Q=8:9S=8;@RU@L N A7盐量10回收率1+50L=&C7E N<56<Q6__6<_6<Q J6 "#’*#%"*’%;**%*3;%;3(%,’%#,3’%"*(%(3"%’3#%"3,%(’%,()%#(;%**#%"*)%#3&%’’*)%,(*%#*)%;3#%’3,%,’%#,((%;*"%"*’%#3"%;3)%(’%,),%#3)%))3%3"’#%&"’;%*FE HC方法的线性关系用甲醇将,种邻苯二甲酸酯混合标准储备液稀释"配置成校正曲线工作液"其质量浓度分别为’%""’%,""%’"#%’",%’""’%’"01/2&以各组分的峰面积为纵坐标"质量浓度为横坐标绘制标准曲线"由线性相关系数I#观察方法的线性关系&线性方程和相关系数见表;"该方法的线性相关系数I#为’%))#)b’%))3#"线性关系良好&FE TC加标回收率和精密度准确称取*个#%’’’’0的空白土样"分别加入,"0,种6B Q4的混合标准溶液"按照本研究的最佳实验方案对*个加标土样进行加标回收率的测定" ,种6B Q4的平均加标回收率为)&%*+b"’#%3+"根据Q6B方法计算得到相对标准偏为"%(+b&%;+"’,"环$境$工$程Q9W8R M9/P9U7N Q9089P P R890$$表GC#$"7的线性方程和线性相关系数&:6J=GC&Q=J M N=:99=S9=77M@N=K L:8M@N7:N A;@99=J:8M@N;@=P P M;M=N8@P#$"7化合物线性方程相关系数I#<56K p(;);(H j&’"(%#’%))3#<Q6K p(###’H!)33"%(’%)),(__6K p),#)’H j""’’’’’%))#)<_6K p;;)(#H!;*3*%"’%)),*<Q J6K p;#)&)H!&;3#%(’%))#)方法检出限和精密度为’%&)b"%#)"01Z0!见表&$&表HC该方法的回收率%精密度和检出限&:6J=HC%=;@Z=9M=7$U9=;M7M@N7:N AA=8=;8M@NJ M RM87@P8Q=R=8Q@A化合物加标回收率1+相对标准偏差1+检出限1!"0+Z0!"$<56)(%;#%*’%3’<Q6)&%*&%;"%#)__6)3%&;%*"%""<_6"’"%""%(’%&)<Q J6"’#%3#%"’%(#GC实际样品分析采用本研究建立的实验方法对部分北京污灌区和河南污灌区的土壤进行了测定分析"从表,中可以看出土壤中<_6和<Q J6含量较高"这与大部分地区土壤中6B Q4的污染情况相似&从不同地区土壤中6B Q4的污染物组分来看"<_6和<Q J6是土壤中最主要的污染物"浓度’检出率和超标率均较高("&G"3)&表TC实际样品的测定分析&:6J=TC$N:J>8M;:J9=7L J87@P#$"7M N9=:J7@M J7:RU J=7化合物样品1!"0+0!"$"#;&,<56’%";’%"#’%"’’%;3’%’3<Q6’%’)’%#"’%’&’%#)’%")__6’%##’%’3’%&;’%’*’%’(<_6"%(*,%3’#%*##%)&’%*) <Q J6&%#(;%)"&%’&"%&##%*"HC结C语传统的h FQ E AQ e L法在乙腈提取污染物以后通常加入6LB等吸附剂除杂"为使实验过程更加简便"除杂这一步可省略"也能取得较好的效果&因此本研究将传统的h FQ E AQ e L法进行了改进"在乙腈萃取后省去了吸附剂除杂这一步"也得到了较好的效果&本研究通过对萃取条件进行优化选择"建立了h FQ E AQ e LG高效液相色谱法测定土壤中邻苯二甲酸酯的方法"方法回收率为)&%*+b"’#%3+"检出限为’%&)b"%#)"01Z0"相对标准偏差为"%(+b&%;+&该方法具有操作快速简便’周期短’溶剂用量少’萃取效率高’精密度和检出限较好的特点"可作为一种新型的检测土壤中6B Q4的分析方法"对实际土壤样品中6B Q4的监测具有实用性&参考文献(")$陈永山"骆永明"章海波"等@设施菜地土壤酞酸酯污染的初步研究(d)@土壤学报"#’"""&3!;$%,"(%(#)$高军"于小彬"张裕"等@酞酸酯对土壤污染及其生态毒理效应研究进展(d)@淮阴工学院学报"#’";"##!;$%&;%(;)$刘庆"杨红军"史衍玺"等@环境中邻苯二甲酸酯类6B Q4污染物研究进展(d)@中国生态农业学报"#’"#"#’!3$%)()% (&)$黄慧娟"蔡全英"吕辉雄"等@土壤!蔬菜系统中邻苯二甲酸酯的研究进展(d)@广东农业科学"#’""!)$%,’%(,)$张海光"孙国帅"孙磊"等@典型覆膜作物土壤中邻苯二甲酸酯污染的初步研究(d)@中国环境监测"#’";"#)!&$%(’G("% (()$邱东茹"吴振斌"贺锋@内分泌扰乱化学品对动物的影响和作用机制(d)@环境科学研究"#’’’"";!($%,#G,&%(*)$林兴桃"王小逸"任仁@环境内分泌干扰物!邻苯二甲酸酯的研究(d)@环境污染与防治"#’’;"#,!,$%#3(G#3*%(3)$廖平德"滕云梅"白海强"等@加速溶剂萃取!气相色谱!质谱法测定土壤中酞酸酯类有机物(d)@广州化学"#’""";(!;$%3G""%())$曹攽"马军"李云木子"等@索氏提取!液相色谱法测定土壤中邻苯二甲酸酯类物质(d)@地质学刊"#’""";,!"$%*&G*,% ("’)$曹攽"李云木子"马军"等@超声波萃取!高效液相色谱法测定土壤中邻苯二甲酸酯(d)@岩矿测试"#’""";’!#$%"*)G"3"% ("")$李娟"赵永刚@微波萃取!高效液相色谱法测定土壤中的酞酸酯类化合物(d)@科技资讯"#’"’";"%#"’%("#)$B974U74487.P45"2P AM U7H L d"LU7?9[7AP R<"P U7N@]74U79.P74H /FN U8R P48.FP/P U AM.P/XN M H8907:P U M98U R8N PP\U R7:U8M91X7R U R U8M989079..84XP R48W P4M N8.G XA74P P\U R7:U8M9O M R U AP.P U P R/897U8M9M OXP4U8:8.P R P48.FP489XR M.F:P(d)@d M FR97N M O B=B E>9U P R97U8M97N"#’’;"3(%&"#G&;"%(";)$L7R7J P R R P R M57R U89"E7R/P N M D7R:87689U M"d M4P2F846P R P K 67W M9@<P U P R/897U8M9M O U R8A7N M/P U A79P4894M8N/7U R8:P4[H48/XN8O8P.fF8:Z"P74H":AP7X"P O O P:U8W P"R 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高效液相色谱法测定邻苯二甲酸酯实验报告
高效液相色谱法测定邻苯二甲酸酯1553607 胡艺蕾实验时间：2017年4月1日实验温度：19.0℃一、实验目的1、了解高效液相色谱仪的组成及其工作原理和基本操作。
2、对邻苯二甲酸酯进行分离和测定。
3、探究不同流动相及不同流动相比例对流速、柱压、保留时间及分离度的影响。
4、了解液相色谱法定量测定的原理。
二、实验原理1、实验采用的反相液固吸附色谱法，其分离机理是：当流动相通过吸附剂时，在吸附剂（固体相）表面发生了溶质分子取代吸附剂上的溶剂分子的吸附作用。
固体相为非极性分子，如十八烷基键合相，流动相为极性分子。
2、组分分子与吸附剂之间作用力的强弱决定它的保留时间。
溶质分子官能团的性质和分子结构的空间效应都会影响其出峰的顺序。
本次实验为邻苯二甲酸酯，其分子官能团都相同，但由于DMP其官能团相邻的烷基较小，导致其保留值最小，因此出峰顺序为：DMP(邻苯二甲酸二甲酯)>DEP(邻苯二甲酸二乙酯)>DBP.(邻苯二甲酸二丁酯)。
3、在吸附色谱中，流动相的洗脱能力与溶剂的极性有关，极性越大，洗脱强度也越大。
本次实验使用的三个流动相的极性大小为：水>乙腈>甲醇。
通常选择二元混合溶剂作为流动相。
4、定量分析中，定量峰与其他峰之间的分离程度称为分离度R:通常用塔板数n来描述色谱的柱效：三、实验仪器与试剂1、仪器Agilent1260高效液相色谱仪：脱气机：真空室内半透膜管路，对流动相进行脱气四元泵：二元泵各控制一种溶剂可设置的流速范围：0.001–10 mL/min 0.001 mL/min步进UV检测器：用于检测通过样品后的紫外光类型：双光束光路设计光源：氘灯波长范围：190 –600 nm手动进样器：进样20μL色谱柱：填料:十八烷（适合中性、弱酸碱）4.6 ×100mm, 3.5µm2、试剂流动相：纯水、甲醇、乙腈样品：DMP、DEP、DBP四、实验步骤1、开启电脑，开启脱气机、泵、检测器等的电源，启动软件。
邻苯二甲酸酯类化合物的测定
FHZHJSZ0170 水质邻苯二甲酸酯类化合物的测定固相吸附液相色谱法F-HZ-HJ-SZ-0170水质—邻苯二甲酸酯类化合物的测定—固相吸附液相色谱法1 范围本方法适用于地表水和废水中邻苯二甲酸酯类的测定。
各组分的最低检测量为3～12ng。
当富集水样的体积为1L、进样体积为10µL时，最低检测浓度为1.5～6.0µg/L，见表1。
2 原理水中的邻苯二甲酸酯类化合物，经XAD-2树脂吸附后，用甲醇和乙腈混合溶剂洗脱，洗脱液经K-D浓缩并定容，用醇基柱进行正相色谱分离，紫外检测器（225nm）测定。
表1 方法检测限序号组分名称保留时间（min）最低检出量（ng）最低检出浓度（µg/L）1 邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯 2.532 3.5 1.82 邻苯二甲酸二正辛酯 2.612 3.1 1.53 邻苯二甲酸二丁酯 3.120 9.0 4.54 邻苯二甲酸二丁基苄酯 3.582 11.6 5.85 邻苯二甲酸二乙酯 4.211 3.2 1.66 邻苯二甲酸二甲酯 6.310 12 6.03 试剂3.1 丙酮：分析纯，用前需重新蒸馏。
3.2 二氯甲烷：分析纯，用前需重新蒸馏。
3.3 正己烷：色谱纯。
3.4 甲醇：色谱纯。
3.5 乙腈：色谱纯。
3.6 异丙醇：色谱纯。
3.7 无水硫酸钠：分析纯，于400～700℃烘2h。
3.8 邻苯二甲酸酯标准贮备液：浓度范围，80～200mg/L。
3.9 邻苯二甲酸酯标准使用液：用甲醇溶液将邻苯二甲酸酯标准贮备溶液稀释成浓度的5～20mg/L的标准使用液。
3.10 XAD-2树脂：丙酮浸泡过夜，然后依次用正己烷、二氯甲烷和甲醇在索氏提取器上回流提取8h以上。
处理好的树脂封保存在甲醇中备用。
3.11 XAD-2树脂柱的制备：在层析柱底部填充少许玻璃棉，用湿法装入XAD-2树脂。
依次用10mL甲醇和20mL重蒸水淋洗柱子。
始终保持液面不低于脂床（若树脂中有气泡存在，可用细的不锈钢丝一下搅动赶出气泡，注意不要破坏树脂）备用4 仪器4.1 液相色谱仪：具紫外检测器，醇基正相色谱柱，250mm×4.6(内径)×5.0µm。
高效液相色谱-串联质谱法测定花露水中10种邻苯二甲酸酯
高效液相色谱 串联质谱法测定花露水中１０种邻苯二甲酸酯李若绮，魏学冰，武 悦，孙 莺，李 莉，刘婷媛（甘肃省药品检验研究院，甘肃兰州７３００７０）摘要：目的 建立高效液相色谱 串联质谱同时测定花露水中１０种邻苯二甲酸酯的检测方法。
方法 样品采用甲醇提取，以０ １％（体积分数）甲酸水溶液和０ １％（体积分数）甲酸乙腈为流动相，反向Ｃ１８色谱柱梯度洗脱分离，采用电喷雾正离子（ＥＳＩ＋）源多反应监测模式进行检测。
结果 在５、５０、５００、５０００μｇ·Ｌ－１４个浓度下，样品基质效应为１ ０４％～５８ ８４％。
１０种化合物在５～５０００μｇ·Ｌ－１范围内线性关系良好，相关系数ｒ＞０ ９９９。
在５０、５００、５０００μｇ·Ｌ－１３个加标水平下，平均回收率为９４ ３％～１０８ ７％，相对标准偏差（ＲＳＤ）为０ ５％～１０ ６％。
方法检出限为０ ０５１～２５μｇ·Ｌ－１，定量限为０ １７～８２μｇ·Ｌ－１。
利用该方法对２４种不同品名花露水进行检测，ＤＥＰ检出率最高。
结论 该方法简便、快速、灵敏，适用于花露水中１０种邻苯二甲酸酯的测定。
关键词：花露水；高效液相色谱 串联质谱；邻苯二甲酸酯中图分类号：Ｒ９２７ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００６ ３７６５（２０２１） ０２ ００９０ ０４作者简介：李若绮，女（１９８７ ０７－）。
学历：硕士研究生。
职称：中级工程师。
化妆品、药品、食品和保健食品的检验研究工作。
花露水是深受中国消费者青睐的香水类产品，凭借多种功效主要应用于夏季。
花露水中的薄荷脑、冰片、麝香草酚〔１〕等成分具有祛痱止痒、抑菌消炎的作用；避蚊胺或驱蚊酯使其具有驱蚊效果〔２〕；冰片加入到花露水中还具有提神醒脑的功效〔３〕。
然而，花露水作为一种芳香类产品，成分中可能含有邻苯二甲酸酯类化合物（ＰｈｔｈａｌｉｃＡｃｉｄＥｓｔｅｒｓ，ＰＡＥｓ），迄今尚未有关于这方面的文献报道。
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高效液相色谱法测定邻苯二甲酸酯
1553607 胡艺蕾
实验时间：2017年4月1日实验温度：19.0℃
一、实验目的
1、了解高效液相色谱仪的组成及其工作原理和基本操作。
2、对邻苯二甲酸酯进行分离和测定。
3、探究不同流动相及不同流动相比例对流速、柱压、保留时间及分离度的影响。
4、了解液相色谱法定量测定的原理。
二、实验原理
1、实验采用的反相液固吸附色谱法，其分离机理是：当流动相通过吸附剂时，在吸附剂（固体相）表面发生了溶质分子取代吸附剂上的溶剂分子的吸附作用。
固体相为非极性分子，如十八烷基键合相，流动相为极性分子。
2、组分分子与吸附剂之间作用力的强弱决定它的保留时间。
溶质分子官能团的性质和分子结构的空间效应都会影响其出峰的顺序。
本次实验为邻苯二甲酸酯，其分子官能团都相同，但由于DMP其官能团相邻的烷基较小，导致其保留值最小，因此出峰顺序为：DMP(邻苯二甲酸二甲酯)>DEP(邻苯二甲酸二乙酯)>DBP.(邻苯二甲酸二丁酯)。
3、在吸附色谱中，流动相的洗脱能力与溶剂的极性有关，极性越大，洗脱强度也越大。
本次实验使用的三个流动相的极性大小为：水>乙腈>甲醇。
通常选择二元混合溶剂作为流动相。
4、定量分析中，定量峰与其他峰之间的分离程度称为分离度R:
通常用塔板数n来描述色谱的柱效：
三、实验仪器与试剂
1、仪器
Agilent1260高效液相色谱仪：
脱气机：真空室内半透膜管路，对流动相进行脱气
四元泵：二元泵各控制一种溶剂
可设置的流速范围：0.001–10 mL/min 0.001 mL/min步进
UV检测器：用于检测通过样品后的紫外光
类型：双光束光路设计
光源：氘灯波长范围：190 –600 nm
手动进样器：进样20μL
色谱柱：填料:十八烷（适合中性、弱酸碱）
4.6 ×100mm, 3.5µm
2、试剂
流动相：纯水、甲醇、乙腈
样品：DMP、DEP、DBP
四、实验步骤
1、开启电脑，开启脱气机、泵、检测器等的电源，启动软件。
2、预先脱气（直到导管中无气泡），设定波长：220nm。
3、设定流速、流动相比例等参数，选择合适的流动相。
4、进样阀柄置于“LOAD”，进样针用乙醇洗涤2-3次，取样，进样，将进样阀扳至“INJECT”。
5、保存并处理数据。
五、实验结果
1、样品：DMP1:20水溶液20μL 流动相的比例为：高纯水：30% 乙腈：70% 流速：1.00ml/min
2、样品：DMP1:10水溶液20μL流动相的比例为：高纯水：30% 乙腈：70% 流速：1.00ml/min
3、样品：DMP1:20水溶液10μL 流动相的比例为：高纯水：30% 乙腈：70% 流速：1.00ml/min
比较1和2的峰面积和峰高可以发现，在进量一定时，峰面积和峰高与样品的浓度成正比。
比较1和3可发现，在样品浓度相同时，峰面积和峰高与样品的进量成正比。
因此我们可以得出结论，峰面积和峰高与加入样品的物质的量成正比，这也是液相色谱法进行定量分析的依据。
对这三组数据画出标准曲线：
由标准曲线可以看出：
峰面积和峰高与样品的量基本成线性关系，且峰面积的相关性比峰高的相关性要高，更适合用于定量分析。
4、样品：混合样品1:10水溶液20μL 流动相的比例为：高纯水：30% 甲醇：70% 流速：1.00ml/min
计算分离度和塔板数
R12=2.292-1.519/(0.0995+0.1174)/2=7.128 R23=11.259-2.292/(0.3067+0.1174)/2=42.29
n DMP=16*(1.519/0.0995)^2=3.729E3 n DEP=16*(2.292/0.1174)^2=6.098E3
n DBP=16*(11.259/0.3067)^2=2.156E4
5、样品：混合样品1:10水溶液20μL 流动相的比例为：高纯水：30% 乙腈：70% 流速：1.00ml/min
计算分离度和塔板数
R12=5.087 R23=33.59
n DMP=2.415E3 n DEP=1.052E4 n DBP=2.408E4
6、样品：混合样品1:10水溶液20μL 流动相的比例为：高纯水：30% 乙腈：70% 流速：0.70ml/min
计算分离度和塔板数
R DMP=2.781-2.088/(0.1200+0.0993)/2=6.320 R DEP=8.004-2.781/(0.0993+0.2087)/2=33.92
n DMP=16*(2.088/0.1200)^2=3.633E3 n DEP=16*(2.781/0.0993)^2=1.255E4
n DBP=16*(8.004/0.2087)^2=2.353E4
7、样品：混合样品1:10水溶液20μL 流动相的比例为：高纯水：10% 乙腈：90% 流速：
1.00ml/min
计算分离度和塔板数
R12=1.680 R23=9.123
n DMP=1.454E3 n DEP=2.815E3 n DBP=1.353E4
根据上述结果我们可以发现，DMP和DEP的分离度比DEP和DBP的分离度要小。
比较结果4和5可以发现，使用乙腈的保留时间较甲醇短，这说明洗脱能力乙腈>甲醇。
但是使用甲醇的分离度较使用乙腈的分离度高。
比较结果5和6可以发现，减小流速会增加保留时间，但同时分离度会增加，塔板数也会增加。
比较结果5和7可以发现，增加二元流动相中乙腈的比例，会使得保留时间缩短，但由于对DEP和DBP的影响要大于对DMP的影响，因此DMP和DEP的峰发生了重叠，导致分离度下降
六、思考与讨论
1、为什么要预先脱气？
①输液量能够均匀准确，压力波动小；②保留时间及色谱峰面积的重现性会更好；③气泡会在谱图中出现尖峰，脱气后能使基线稳定；④保护色谱柱，防止填料氧化；
2、为什么使用二元溶液作为流动相？
利用不同比例流动相对分离度和出峰时间的影响（往往是相反的作用）进行梯度洗脱。
通过程序设定，不同时间（不同物质）来设定流动相中甲醇和水的比例，既达到较好的分离度，又能缩短不必要的时间
4、为什么会前伸/拖尾？
1、色谱柱被污染
2、样品过载
3、样品溶剂过强
5、操作注意：
1.本实验采用紫外来做检测器，由于查阅资料可知邻苯二甲酸酯的最大吸收波长位于220nm 左右，故设定的光波长为220nm，但由于短波长对杂质敏感，220nm图中容易出现小的峰和波动。
2.实验开始前需要用流动相来冲气泡。
3.用50uL注射器抽取液体时，要保证没有气泡（影响峰的大小和理论含量），同时每次最好抽取过量再排出液体至20uL。
（专业文档是经验性极强的领域，无法思考和涵盖全面，素材和资料部分来自网络，供参考。
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