选修1.1第一章微生物的利用
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2018高中生物浙江专用浙科版选修一 课件 第一部分 微生物的利用1-1
答案 (1)无菌水 10 (2)a.酒精灯火焰 b．平行 连续
c.
第一次灼烧
每次划线之前灼烧 划线结束时灼烧
目的
杀死接种环上原 有的微生物
杀死上次划线后接种环 上残留的菌种，使下次 划线的菌种直接来源于 上次划线的末端，使每 次划线后菌种数目减少
杀死接种环上残 存的菌种，避免 细菌污染环境和
感染操作者
将菌液进行一系列的梯度稀释， 然后将不同稀释度的菌液分别涂 布到琼脂固体培养基的表面，进 行培养。在稀释度足够高的菌液 里，聚集在一起的微生物将被分 散成单个细胞，从而能在培养皿 表面形成单个菌落
(2)大肠杆菌的培养和分离应注意的几个问题 ①在倒平板过程中，不能将培养基溅在皿壁与皿盖上，防止杂 菌污染。 ②本实验需设置空白培养基在相同条件下一起培养，以确定是 否有杂菌污染。 ③培养皿倒置的目的是防止皿盖上的水珠落入培养基中难以形 成单菌落。
第1课时 大肠杆菌的培养和分离
【学考报告】
知识内容 考试属性
考情解读
大肠杆菌 的培养和 分离
加试
1.进行大肠杆菌的扩增，利用液体培养基进 行细菌培养的操作。 2.进行大肠杆菌的分离，用固体平面培养基 进行细菌的划线培养。 3.说明大肠杆菌培养的条件和实验原理。
一、微生物培养的微生物对营养物质的不同需求，配制出供 其生长繁殖的营养基质。 (2)种类
根据微生物的代谢特点， 鉴别不同种类的
鉴别 培养基 在培养基中加入某种指示 微生物
剂或化学药品
(3)成分：一般都含有水、 碳源 、氮源和无机盐等最基本的
物质，有时还需要加入特殊的营养物质。
2．无菌技术 (1)含义：无菌技术不仅能防止实验室的培养物被其他外来微 生物污染，保持微生物的纯培养，而且在分离、转接时亦能 防止其他微生物污染。 (2)无菌操作 ①对实验空间、操作台可用 紫外线 或酒精消毒，操作者的 手用 酒精 消毒。 ②实验用的培养器皿和培养基一般用高压蒸汽灭菌 法灭菌， 接种环用灼烧方法灭菌。 ③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在 酒精灯火焰 附近进行。 ④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品 相接触。
2017-2018学年高中生物 第一部分 微生物的利用课件 浙科版选修1
选修 1
第一部分 微生物的利用
考点 一
培养基及无菌技术
1.培养基
(1)概念:由适于微生物生长繁殖需要的各种营养物质人工配制 而成的基质。
(2)类型:
划分标准
种类
固体培 养基
特点
用途
加入凝固剂，如 常用于微生物分离、
琼脂、明胶、硅 鉴定、计数和菌种 胶等 保存等方面
按物理 性质分
半固体
培养基 液体培
能
【高考警示】 不同器具选用的灭菌方法不同 (1)接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法。 (2) 培养基、无菌水、玻璃器皿等使用高压蒸汽灭菌法，所用
器械是高压蒸汽灭菌锅。
(3) 表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法，所用器械是紫 外灯。
考点 二
大肠杆菌的培养和分离
1. 培养和分离实验步骤
步骤
具 体 操 作
③涂布器的灭菌:玻璃刮刀用70%酒精消毒，取出时，多余酒精
在烧杯中滴尽，沾有少量酒精的玻璃刮刀在酒精灯火焰上引燃。
(3)设置对照:可排除实验中非测试因素对实验结果的影响,提 高实验结果的可信度。
【思维拓展】 常见选择培养基的用途不同 (1)加高浓度食盐:用于筛选获得金黄色葡萄球菌。 (2)加青霉素:用于筛选获得真菌(酵母菌和霉菌)，原理是青霉 素能破坏原核生物的细胞壁，杀死原核生物。
在液体培养基中 可用于观察细菌的 加入少量凝固剂 运动、鉴定菌种等 而呈半固体状态 方面 不加任何凝固剂 常用于发酵工业和
养基
微生物扩大培养
划分标准
种类
特点 根据某一种或某一类
用途
微生物的特殊营养要 培养、分离 选择培养基 求或对一些物理、化 特定的微生
学抗性而设计的培养 物
第一部分 微生物的利用
考点 一
培养基及无菌技术
1.培养基
(1)概念:由适于微生物生长繁殖需要的各种营养物质人工配制 而成的基质。
(2)类型:
划分标准
种类
固体培 养基
特点
用途
加入凝固剂，如 常用于微生物分离、
琼脂、明胶、硅 鉴定、计数和菌种 胶等 保存等方面
按物理 性质分
半固体
培养基 液体培
能
【高考警示】 不同器具选用的灭菌方法不同 (1)接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法。 (2) 培养基、无菌水、玻璃器皿等使用高压蒸汽灭菌法，所用
器械是高压蒸汽灭菌锅。
(3) 表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法，所用器械是紫 外灯。
考点 二
大肠杆菌的培养和分离
1. 培养和分离实验步骤
步骤
具 体 操 作
③涂布器的灭菌:玻璃刮刀用70%酒精消毒，取出时，多余酒精
在烧杯中滴尽，沾有少量酒精的玻璃刮刀在酒精灯火焰上引燃。
(3)设置对照:可排除实验中非测试因素对实验结果的影响,提 高实验结果的可信度。
【思维拓展】 常见选择培养基的用途不同 (1)加高浓度食盐:用于筛选获得金黄色葡萄球菌。 (2)加青霉素:用于筛选获得真菌(酵母菌和霉菌)，原理是青霉 素能破坏原核生物的细胞壁，杀死原核生物。
在液体培养基中 可用于观察细菌的 加入少量凝固剂 运动、鉴定菌种等 而呈半固体状态 方面 不加任何凝固剂 常用于发酵工业和
养基
微生物扩大培养
划分标准
种类
特点 根据某一种或某一类
用途
微生物的特殊营养要 培养、分离 选择培养基 求或对一些物理、化 特定的微生
学抗性而设计的培养 物
2012届高考生物全套解析一轮复习课件选修1第一单元微生物的利用
（1）概念：对照实验是指除被测条件（自变量）外，其他条件（无关变量）都
（2）目的：排除实验组中非测试因素对实验结果的影响，提高实验结果的可信 （3）常用的对照方式有：空白对照、阳性对照、标准对照、自身对照和相互对
①空白对照：空白对照是不给对照组任何处理因素。例如，用小白鼠进行抗癌 药物的实验，给甲组小白鼠注射溶于棉籽油的抗癌药物，乙组小白鼠只注射等 量的棉籽油，在相同条件下饲养，并观察。这个实验中，甲组为实验组，乙组
两种培养基的不同表现在成分和种类上，选择培养基是液体培养基，而鉴别培养 基是固体培养基；选择培养基中有纤维素，来选择产生纤维素酶的微生物，而不 能产生纤维素酶的微生物被淘汰，以此选择作用，鉴别培养基中无纤维素，但加 入了CMC—Na，是可溶性纤维素的衍生物，可被Cx酶分解为纤维二糖，然后在
2．实验设计与操作步骤 （1）实验流程设计：是实验总体思路的设计，与分解尿素的细菌的分离和计数
（包括营养、温度、pH
（2）选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制
3． 稀释度 足够高时， 常用稀释涂布平板法来统计样品中活菌的数目。当样品的_________ 活菌 。通过统计平板 培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个 ______ 上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。为了保证结果准确，一般 30～300 的平板进行计数。此外，测定微生物数量的常用方法 选择菌落数在 __________ 显微镜 直接计数法。 还有_______ 4． 对照实验：是指除了被测试的条件外，其他条件都相同的实验。设置对照的主
将涂布好的培养皿放在37℃恒温箱中培养，及时观察和记录。挑选选择培养基中
4
当菌落数目稳定时，选取菌落数在 30～300 的平板进行计数。在同一稀释度下， 平均值 至少对3个平板进行重复计数，然后求出 ，并根据平板所对应的稀释度
高考生物总复习拔高精讲课件选修1 专题1 微生物的利用
概念：指使用强烈的理化因素杀死物体内外 灭菌包括 芽孢和孢子 高压蒸汽灭菌 常用方法： 灼烧 灭菌、干热灭菌、
概念：使用较温和的物理或化学方法仅杀死物体表面 消毒或内部的一部分对 人体有害 的微生物 常用方法：煮沸消毒法、 巴氏消毒法 、化学药剂消毒法
二、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数(填空) 1．菌种筛选。 (1)选择培养基，允许特定种类 ________的微生物生长，同时 ___________其他种类微生物生长的培养基。 抑制或阻止 (2)分离土壤中分解尿素的细菌，所选用的选择培养基中 尿素 。 含有的氮源是______ 2．统计菌落数目。 (1)稀释涂布平板法：
述中，正确的是(
)
A．果醋制作所需要的适宜温度最高
B．果醋发酵包括无氧发酵和有氧发酵
C．使用的菌种分别是酵母菌、醋酸菌、乳酸菌
D．使用的菌种都具有细胞壁、核糖体、DNA和RNA
解析：本题考查传统发酵技术的应用，意在考查学生的
辨别比较能力。果醋制作所需要的适宜温度最高，为30～35
℃；果醋制作所用的菌种(醋酸菌)为好氧细菌，只进行有氧 呼吸；腐乳制作所用的菌种是毛霉；酵母菌、醋酸菌、毛霉 等菌种都具有细胞壁，都既有DNA又有RNA，细胞中都有 核糖体。
所有微生物，
3．基本操作技术。 (1)配制培养基： 计算→称量→_____→______→_________ 溶化 灭菌 倒平板 。 (2)接种：
续划线的操作，将聚集的菌种 逐步稀释分散 到培养基的表面 稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的 梯度稀释 ， 再将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养 基的表面进行培养，从而形成单个的菌落
答案：AD
1．(2013· 广州二模)下列有关传统发酵技术应用的叙述， 不合理的是( )
高中生物浙科版选修一知识点归纳
高中生物浙科版选修一知识点归纳选修一生物技术实践知识点总结第一部分微生物的利用一、微生物实验室培养的基本操作程序1、器具的灭菌：P20-21，灭菌前，试管加棉花塞或塑料盖、三角瓶用封口膜或6层纱布封口……最后各种用品均需用牛皮纸或报纸包好，用高压蒸汽灭菌法（121C，1kg/cm2压力）灭菌15min。
值得注意的是，实验中所需的棉花不能用脱脂棉，因脱脂棉易吸水，吸水后容易引起污染。
灭菌后，通常将实验用具放入60～80℃的烘箱中烘干，以除去灭菌时的水分。
在进行实验操作前，将需要使用的用具从烘箱中取出，放到超净台上。
在超净台工作之前，应先打开超净台的紫外灯和过滤风，工作时关闭紫外灯。
塞子制作的好坏是控制污染发生的关键。
2、培养基的配制：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。
①培养基种类尺度培养基类型固体培养基液体培养基合成培养基天然培养基鉴别培养基配制特点加入琼脂不加入琼脂由已知成分配制而成由天然身分派制而成添加某种唆使剂或化学药剂主要应用菌种分离,鉴定,计数、保存菌种的扩大培养菌种的鉴别菌种的分离按物理性质分按化学组身分按用途分②微生物培养的培养基：LB培养基。
配制培养基时需考虑营养物质的配比外，还需要考虑微生物生长对pH、氧气、渗透压等的要求。
“细菌喜荤，霉菌喜素”，通常细菌培养基要用卵白胨和酵母提取物来配制，还要加入一定量的氯化钠，以维持一定的渗透压；霉菌培养基一般用无机物配制或添加蔗糖的豆芽汁即可。
此外．细菌通常要求在中性偏碱的环境中生长，霉菌要求在中性偏酸的环境中生长。
选择培养基添加（或短少）某种化学身分3、培养基的灭菌：通常用高压蒸汽灭菌法灭菌。
但假如培养基中有葡萄糖，为防止葡萄糖分解碳化，要用500g/cm压力（90C以上）灭菌30min。
有些不能加热灭菌的化合物，如尿素（加热会分解）等，只能用G6玻璃砂漏斗过滤，但玻璃砂漏斗使用前也要在121℃下用纸包好灭菌。
《微生物的利用》课件
《微生物的利用》 ppt课件
• 微生物简介 • 微生物的利用方式 • 微生物的利用实例 • 微生物的未来利用展望
目录
Part
01
微生物简介
微生物的定义与分类
微生物的定义
微生物是微小生物的统称，包括 细菌、病毒、真菌、原生动物等 。它们具有体积小、数量大、分 布广、繁殖快等特点。
微生物的分类
根据其形态、遗传、生态等特点 ，微生物可以分为细菌、病毒、 真菌等多个门类。
Part
02
微生物的利用方式
微生物在农业上的应用
微生物肥料
利用有益微生物改善土壤 1
理化性质，提高土壤肥力 ，促进植物生长。
微生物食品
4
利用微生物生产食品，如 酸奶、面包、酒类等。
生物农药
2
利用微生物及其代谢产物
防治植物病虫害，减少化
学农药的使用。
微生物饲料
3 利用微生物发酵产物作为
饲料添加剂，提高动物生 产性能。
病。
疫苗
利用微生物制备疫苗，预防疾 病的发生。
生物治疗
利用微生物作为载体或表达系 统，治疗遗传性疾病和癌症等
疾病。
基因工程菌
利用基因工程技术改良微生物 ，生产具有特定功能的药物或
酶。
微生物在环保领域的应用
生物修复
利用微生物降解有机污染 物，净化土壤和水体。
生物监测
利用微生物监测环境中有 毒有害物质的含量和变化 情况。
微生物的发现
最早发现微生物的是荷兰科学家 列文虎克，他通过自制的显微镜
观察到了细菌等微生物。
微生物学的发展
随着显微镜技术的不断发展，人们 对微生物的认识也不断深入，形成 了专门的学科——微生物学。
• 微生物简介 • 微生物的利用方式 • 微生物的利用实例 • 微生物的未来利用展望
目录
Part
01
微生物简介
微生物的定义与分类
微生物的定义
微生物是微小生物的统称，包括 细菌、病毒、真菌、原生动物等 。它们具有体积小、数量大、分 布广、繁殖快等特点。
微生物的分类
根据其形态、遗传、生态等特点 ，微生物可以分为细菌、病毒、 真菌等多个门类。
Part
02
微生物的利用方式
微生物在农业上的应用
微生物肥料
利用有益微生物改善土壤 1
理化性质，提高土壤肥力 ，促进植物生长。
微生物食品
4
利用微生物生产食品，如 酸奶、面包、酒类等。
生物农药
2
利用微生物及其代谢产物
防治植物病虫害，减少化
学农药的使用。
微生物饲料
3 利用微生物发酵产物作为
饲料添加剂，提高动物生 产性能。
病。
疫苗
利用微生物制备疫苗，预防疾 病的发生。
生物治疗
利用微生物作为载体或表达系 统，治疗遗传性疾病和癌症等
疾病。
基因工程菌
利用基因工程技术改良微生物 ，生产具有特定功能的药物或
酶。
微生物在环保领域的应用
生物修复
利用微生物降解有机污染 物，净化土壤和水体。
生物监测
利用微生物监测环境中有 毒有害物质的含量和变化 情况。
微生物的发现
最早发现微生物的是荷兰科学家 列文虎克，他通过自制的显微镜
观察到了细菌等微生物。
微生物学的发展
随着显微镜技术的不断发展，人们 对微生物的认识也不断深入，形成 了专门的学科——微生物学。
【优化方案】2012高考生物总复习 第一部分微生物的利用课件 浙科版选修1
【尝试解答】 (1)温度 酸碱度 易培养 生活 周期短 (2)灭菌 消毒 损伤DNA的结构 (3)比例合适 (4)鉴定(或分类) (5)将未接种的培养基在适宜的温度下放置适宜的 时间，观察培养基上是否有菌落产生 (6)灭菌
【解析】 (1)影响微生物培养的因素除了营养条件 外，外界条件主要包括温度、酸碱度和渗透压等。 由于大肠杆菌具有体积小、结构简单、变异类型容 易选择、易培养、生活周期短等优点，所以常作为 遗传学研究的实验材料。 (2)灭菌是指用强烈的物理或化学的方法，杀死物体 内外的一切微生物，包括芽孢和孢子。消毒指使用 较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部 一部分对人体有害的微生物。对于培养基和培养器 皿要进行灭菌，对操作者的双手需要进行清洗和用 酒精消毒，静止空气中的细菌在用紫外线照射能够 使蛋白质变性，并损伤DNA结构，使细菌死亡。
培养基中的营养成分的改变也可达到分离微生物 的目的。如培养基中缺乏氮源时，可以分离固氮 微生物，因为非固氮微生物不能在此培养基上生 存。当培养基的某种营养成分为特定化学成分时, 也具有分离效果。如石油是唯一碳源时，可以抑 制不能利用石油的微生物的生长，使能够利用石 油的微生物生存，达到分离能消除石油污染的微 生物的目的。改变微生物的培养条件， 也可以 达到分离微生物的目的，如将培养基放在高温环 境中培养只能得到耐高温的微生物。
(2)无菌操作 ①对实验空间、操作台可用紫外线或酒精消 毒，操作者的手用酒精消毒。 ②将实验用的培养器皿和培养基一般用高压 蒸汽灭菌法灭菌，接种环用灼烧方法灭菌。 ③为避免周围环境中微生物的污染，实验操 作应在酒精灯火焰附近进行。
大肠杆菌的培养和分离
1．大肠杆菌 (1)特性：革兰氏阴性、兼性厌氧的肠道杆菌。 (2)用途：是基因工程技术中被广泛采用的工具。 2．培养：实验中用LB液体培养基扩大培养大肠 杆菌。 3．分离(实验部分)
2016届高考生物大一轮复习课件：选修1 专题1微生物的利用
选修1
生物技术实践
高三一轮总复习 · 生物
(2)成分：尽管培养基的配方各不相同，但其基本成分都包 水 碳源 氮源 括③ ____________ 、④ ____________ 、⑤ ____________ 和⑥ 无机盐 。还需满足不同微生物对⑦________ pH __________ 、特殊营养物
33 2． 分离原理： 土壤中能够分解纤维素的微生物体内具有○
纤维素酶 ，能够把纤维素分解成○ 葡萄糖 34 ____________ ____________ ，供微生
物生长繁殖。
刚果红染色法 35 ____________________ 3．鉴别方法： ○ ，即通过是否产 透明圈 36 ____________ 生○ 来筛选纤维素分解菌。
仅杀死物体表面 较为⑩ 内部一部分 或⑪__________ 温和 ______的物 消毒 对人体有害的微 理或化学方 生物(不包括芽孢 法 和孢子)
杀死物体⑮ ⑭ 强烈 内外所有 的 ____________ 灭菌 ________的 微生物，包括芽 理化因素 孢和孢子
选修1
生物技术实践
高三一轮总复习 · 生物
用途 培养、分离出特定微生 物(如培养酵母菌和霉 菌，可在培养基中加入 青霉素；培养金黄色葡 萄球菌，可在培养基中 加入高浓度食盐) 鉴别不同种类的微生 物，如用伊红—美蓝培 养基鉴别饮用水或乳制 品中是否有大肠杆菌 (若有，菌落呈深蓝 色，并带有金属光泽)
选修1 生物技术实践
选择培 养基 用途
鉴别培 养基
3．微生物培养的基本技术
(1)纯化大肠杆菌的原理：在培养基上将稀释的细菌分散成 一定形态结构 的 单个菌落，会形成一个肉眼可见的、具有⑱______________
2019-2020学年高中生物浙科版选修一文档：第1部分 微生物的利用 第1课时 Word版含答案
姓名，年级：时间：第1课时大肠杆菌的培养和分离[学习目标］ 1.进行大肠杆菌的扩增，利用液体培养基进行细菌培养的操作。
2。
进行大肠杆菌的分离，用固体平面培养基进行细菌的划线培养。
3。
说明大肠杆菌培养的条件和实验原理。
一、微生物培养的基本条件1.微生物（1）概念:结构简单、形体微小的单细胞、多细胞或没有细胞结构的低等生物.（2）用途：许多种抗生素来源于放线菌和霉菌;酒由酵母发酵产生；腐乳由红曲霉和毛霉发酵制成；微生物能用于治理环境污染，在新能源领域也将发挥巨大作用。
2。
培养基（1)概念：培养基是微生物生存的环境和营养物质.（2)分类：培养基按物理性质常可分为固体培养基和液体培养基，一般都含有水、碳源、氮源和无机盐四类营养物质，另外还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质和氧气的要求。
通常细菌培养基要用蛋白胨和酵母提取物来配制,还要加入一定量的氯化钠以维持一定的渗透压；霉菌培养基一般用无机物配制或添加蔗糖的豆芽汁即可。
（3）酸碱性:细菌通常要求在中性偏碱的环境中生长,霉菌要求在中性偏酸的环境中生长;因此，在制备培养基时需调节培养基的酸碱度。
特别提醒有关培养微生物所需营养的三点提醒（1)不同微生物对营养的需求不同，所以培养不同的微生物所需要的营养可能不同.(2）对异养微生物来说，含C、H、O、N的有机物既是碳源又是氮源、能源。
（3)培养微生物时营养物质要协调。
营养物质过少不能满足微生物的营养需要，过多对微生物的生长有抑制作用。
3。
灭菌操作（1)常见灭菌方法①对于培养皿、试管、三角瓶、镊子等常采用高压蒸汽灭菌法灭菌。
②对于不能加热灭菌的化合物，如尿素等,只能用G6玻璃砂漏斗过滤，但玻璃砂漏斗使用前也要在121 ℃下用纸包好灭菌。
③实验操作过程中,一般采用灼烧的方法对接种环进行灭菌。
（2)高压蒸汽灭菌操作的要求①灭菌前各种用品均需用牛皮纸或报纸包好，在121 ℃下灭菌15 min,实验过程中所需的棉花不能用脱脂棉,因为其易吸水，吸水后容易引起污染。
选修1.1微生物的利用课件
1～2 h
高压蒸 汽灭菌
15～30 min
菜 单
隐 藏
2013 ·新课标高考总复习 ·配浙科生物
主干梳理 自测感悟 核心考点 精讲精析 经典例题 考向导航 典题演练 知能提升
4.避免被杂菌污染的方法 (1)注意灭菌操作原则,灭菌彻底,降低环境污染几率,手和实验 服要清洁,减少操作时间,对污染源的改善考虑周到。 (2)注意微生物生长条件,如pH、渗透压、温度等。细菌喜中 性偏碱的环境,喜蛋白质丰富的营养物质,喜37 ℃的温度;而霉 菌喜中性偏酸的环境,喜糖类丰富的营养物质,喜25～30 ℃的 温度。因此,可以根据不同微生物的“喜好”来减少污染。
3.三种常用灭菌方法的比较 灭菌方法 适用材料或 用具 灭菌条件 灭菌时间
灼烧灭菌
接种环、接 种针或其他 金属用具
酒精灯火焰的 充分燃烧层灼 烧
直至烧红
山 东 金 太 阳 书 业 有 限 公 司
干热灭菌
玻璃器皿(吸 管、培养皿) 干热灭菌,160 和金属用具 ～170 ℃ 等
培养基等 100 kPa, 121 ℃
选修1 生物技术实践(IB部分)
2013 ·新课标高考总复习 ·配浙科生物
主干梳理 自测感悟 核心考点 精讲精析
考 纲 展 示
经典例题 考向导航 典题演练 知能提升
考 情 分 析
微生物培养所需要的营养物质;微生 物的培养过程;细胞的扩增,利用液 大肠杆菌的培养和分 体培养进行细菌培养的操作;细菌的 离 (实验与探究) 分离,用固体平面培养进行细菌的划 线培养;细菌培养的条件和操作要求 果汁中的果胶和果胶 酶在食品制造方面的应用:探究制作 酶 (实验与探究) 果汁的最佳条件;检测果胶酶活性 酶在洗涤方面的应用:观察加酶洗衣 加酶洗衣粉的使用条 粉在洗涤中的效果;探究加酶洗衣粉 件和效果(实验与探究) 的最佳使用条件
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⑤菌种保存:在无菌条件下将单菌落用接种环取出,再用划线法接种 在斜面上,37 ℃培养24 h后,放于冰箱内保存,温度控制在4 ℃。 ⑥实验结束后,为防止细菌污染,需要对培养物进行灭菌处理。 (3)实验结果及相应结论 若观察到在划线的末端出现不连续的单个菌落,表明菌已被分离了。
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(2)各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐和生长因子五类 营养物质。 (3)制作牛肉膏蛋白胨固体培养基 制作牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法步骤:计算→称量→溶化、调 pH→灭菌→倒平板。 3.无菌技术 (1)获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。应根据情况进行 消毒和灭菌。
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②自三角瓶向培养皿中转移并分装固体培养基:待冷却至60 ℃左右 时,将三角瓶中的培养基在超净台上分装至几个培养皿中,制成固体 培养基。 ③将大肠杆菌自斜面转移到三角瓶中的液体培养基中培养:将大肠杆 菌用接种环在无菌操作下接种至三角瓶中的液体培养基中,在37 ℃ 摇床振荡培养12 h,完成大肠杆菌培养。 ④将菌液在固体平面培养基上划线分离。从前一步培养得到的菌液 中获取菌种,用接种环以划线法接种至第二步制得的固体平面培养基 中,在37 ℃恒温箱中培养12~24 h后观察菌落。
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(2)细菌分离 ①平板划线法:用接种环在琼脂固体培养基表面连续划线操作,将聚 集的菌种逐步分散到培养基表面。培养10~20小时后,可以分离到由 一个细胞繁殖而来的肉眼可见的细胞群,即菌落。 ②稀释涂布分离法:将菌液先进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀 释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,然后进行培养。 ③两种方法比较:划线分离,方法简单;涂布分离,单菌落更易分开,但 操作复杂些。两种方法都能将混杂在一起的微生物分离成单个细胞, 并能在培养基表面形成单个菌落,以便分离和纯化菌种。
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以上灭菌原理是使细菌体内蛋白质变性而达到杀灭细菌的目的。 (5)消毒方法 ①煮沸消毒法:100 ℃煮沸5~6 min可以杀死微生物的营养细胞和一 部分芽孢,可用于培养器皿的消毒。 ②巴氏消毒法:80 ℃中15 min或70~75 ℃中30 min,实际生产中常用于 鲜奶的消毒。 ③70%乙醇消毒法:70%乙醇杀毒能力最强,常用于实验时操作者手臂 的消毒。 (6)含抗生素的牛奶不能发酵为酸奶的原因:牛奶发酵成酸奶是利用
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(2)消毒与灭菌的区别 ①消毒指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一 部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。消毒方法常用煮沸 消毒法,还有化学药剂(如酒精、氯气、石炭酸等)消毒、红外线消毒 等。
②灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括 芽孢和孢子。灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌等。
(2)一同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值
为23.4,那么每毫升样品中的菌落数量为(涂布平板时所用稀释液的
体积为0.2 mL)
。
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(3)用这种方法测定密度,实际活菌数量要比测得的数量
,因
为
。
选修1 生物技术实践专题
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第一章 微生物的利用
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核心理解突破 ◎迁移升华思维的加油站◎
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考点一 大肠杆菌的培养和分离 1.大肠杆菌:是革兰氏阴性、兼性厌氧的肠道杆菌,在肠道中一般对人 无害,是原核生物,是基因工程中广泛采用的工具。 2.培养基 (1)培养基按照物理性质可分为液体培养基和固体培养基。在液体培 养基中加入凝固剂琼脂后,制成琼脂固体培养基。微生物在固体培养 基表面生长,可以形成肉眼可见的菌落。
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乳酸菌来完成的。乳酸菌属于细菌,抗生素有抑制甚至杀死细菌的作 用。 4.细菌的培养与分离 (1)细菌的培养 ①用LB液体培养基扩大培养大肠杆菌,细菌以分裂方式繁殖,分裂速 度很快,条件适宜时,20分钟可分裂一次。 ②如要将已有细菌培养物转移到新的培养基时,一般用接种环转移带 菌的培养物。
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5.大肠杆菌的培养和分离实验 (1)实验目的 ①进行大肠杆菌的扩增,利用LB液体培养基进行细菌培养的操作。 ②进行大肠杆菌的分离,用LB固体培养基进行细菌的划线培养。 ③说明大肠杆菌培养的条件和操作要求的原理。 (2)实验步骤 ①灭菌:用高压锅在1 kg压力下对LB液体培养基、LB固体培养基和 培养皿灭菌15 min。
(3)无菌操作要求 ①首要条件是各种器皿必须是无菌的。
②各种培养基必须是无菌的。
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③菌转移操作的过程必须是无菌的。 (4)灭菌方法 ①常用高压蒸汽灭菌法。即用高压蒸汽灭菌锅在 121 ℃(1 kg·cm-2压 力)下灭菌15 min。 ②干热灭菌,用干热灭菌箱对耐热器具在160 ℃维持 2 h 或170 ℃维 持1 h灭菌。 ③酒精灯灼烧法:如接种环在酒精灯火焰上灼烧灭菌。酒精灯火焰上 方无菌区,可使菌转移过程在无菌条件下完成。 ④利用紫外灯照射灭菌。用紫外灯照射灭菌30 min。
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(1)测定的大肠杆菌数,在对应稀释倍数为106的培养基中,得到以下几
种统计结果,正确可信的是
。
A.一个平板,统计的菌落数是23
B.两个平板,统计的菌落数是22和26,取平均值24
C.三个平板,统计的菌落数分别是21、5和52,取平均值26
D.四个平板,统计的菌落数分别是21、30、24和25,取平均值25
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【例1】 自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物 时一般要将它们分离提纯,然后进行数量的测定。下面是对大肠杆 菌进行数量测定的实验,请回答有关问题。 步骤: ①制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液。 ②用稀释涂布平板法接种样品。 ③适宜温度下培养。 结果分析:
⑤菌种保存:在无菌条件下将单菌落用接种环取出,再用划线法接种 在斜面上,37 ℃培养24 h后,放于冰箱内保存,温度控制在4 ℃。 ⑥实验结束后,为防止细菌污染,需要对培养物进行灭菌处理。 (3)实验结果及相应结论 若观察到在划线的末端出现不连续的单个菌落,表明菌已被分离了。
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(2)各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐和生长因子五类 营养物质。 (3)制作牛肉膏蛋白胨固体培养基 制作牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法步骤:计算→称量→溶化、调 pH→灭菌→倒平板。 3.无菌技术 (1)获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。应根据情况进行 消毒和灭菌。
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②自三角瓶向培养皿中转移并分装固体培养基:待冷却至60 ℃左右 时,将三角瓶中的培养基在超净台上分装至几个培养皿中,制成固体 培养基。 ③将大肠杆菌自斜面转移到三角瓶中的液体培养基中培养:将大肠杆 菌用接种环在无菌操作下接种至三角瓶中的液体培养基中,在37 ℃ 摇床振荡培养12 h,完成大肠杆菌培养。 ④将菌液在固体平面培养基上划线分离。从前一步培养得到的菌液 中获取菌种,用接种环以划线法接种至第二步制得的固体平面培养基 中,在37 ℃恒温箱中培养12~24 h后观察菌落。
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(2)细菌分离 ①平板划线法:用接种环在琼脂固体培养基表面连续划线操作,将聚 集的菌种逐步分散到培养基表面。培养10~20小时后,可以分离到由 一个细胞繁殖而来的肉眼可见的细胞群,即菌落。 ②稀释涂布分离法:将菌液先进行一系列的梯度稀释,然后将不同稀 释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,然后进行培养。 ③两种方法比较:划线分离,方法简单;涂布分离,单菌落更易分开,但 操作复杂些。两种方法都能将混杂在一起的微生物分离成单个细胞, 并能在培养基表面形成单个菌落,以便分离和纯化菌种。
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以上灭菌原理是使细菌体内蛋白质变性而达到杀灭细菌的目的。 (5)消毒方法 ①煮沸消毒法:100 ℃煮沸5~6 min可以杀死微生物的营养细胞和一 部分芽孢,可用于培养器皿的消毒。 ②巴氏消毒法:80 ℃中15 min或70~75 ℃中30 min,实际生产中常用于 鲜奶的消毒。 ③70%乙醇消毒法:70%乙醇杀毒能力最强,常用于实验时操作者手臂 的消毒。 (6)含抗生素的牛奶不能发酵为酸奶的原因:牛奶发酵成酸奶是利用
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(2)消毒与灭菌的区别 ①消毒指使用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一 部分对人体有害的微生物(不包括芽孢和孢子)。消毒方法常用煮沸 消毒法,还有化学药剂(如酒精、氯气、石炭酸等)消毒、红外线消毒 等。
②灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物,包括 芽孢和孢子。灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌等。
(2)一同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值
为23.4,那么每毫升样品中的菌落数量为(涂布平板时所用稀释液的
体积为0.2 mL)
。
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(3)用这种方法测定密度,实际活菌数量要比测得的数量
,因
为
。
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第一章 微生物的利用
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考点一 大肠杆菌的培养和分离 1.大肠杆菌:是革兰氏阴性、兼性厌氧的肠道杆菌,在肠道中一般对人 无害,是原核生物,是基因工程中广泛采用的工具。 2.培养基 (1)培养基按照物理性质可分为液体培养基和固体培养基。在液体培 养基中加入凝固剂琼脂后,制成琼脂固体培养基。微生物在固体培养 基表面生长,可以形成肉眼可见的菌落。
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乳酸菌来完成的。乳酸菌属于细菌,抗生素有抑制甚至杀死细菌的作 用。 4.细菌的培养与分离 (1)细菌的培养 ①用LB液体培养基扩大培养大肠杆菌,细菌以分裂方式繁殖,分裂速 度很快,条件适宜时,20分钟可分裂一次。 ②如要将已有细菌培养物转移到新的培养基时,一般用接种环转移带 菌的培养物。
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5.大肠杆菌的培养和分离实验 (1)实验目的 ①进行大肠杆菌的扩增,利用LB液体培养基进行细菌培养的操作。 ②进行大肠杆菌的分离,用LB固体培养基进行细菌的划线培养。 ③说明大肠杆菌培养的条件和操作要求的原理。 (2)实验步骤 ①灭菌:用高压锅在1 kg压力下对LB液体培养基、LB固体培养基和 培养皿灭菌15 min。
(3)无菌操作要求 ①首要条件是各种器皿必须是无菌的。
②各种培养基必须是无菌的。
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③菌转移操作的过程必须是无菌的。 (4)灭菌方法 ①常用高压蒸汽灭菌法。即用高压蒸汽灭菌锅在 121 ℃(1 kg·cm-2压 力)下灭菌15 min。 ②干热灭菌,用干热灭菌箱对耐热器具在160 ℃维持 2 h 或170 ℃维 持1 h灭菌。 ③酒精灯灼烧法:如接种环在酒精灯火焰上灼烧灭菌。酒精灯火焰上 方无菌区,可使菌转移过程在无菌条件下完成。 ④利用紫外灯照射灭菌。用紫外灯照射灭菌30 min。
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(1)测定的大肠杆菌数,在对应稀释倍数为106的培养基中,得到以下几
种统计结果,正确可信的是
。
A.一个平板,统计的菌落数是23
B.两个平板,统计的菌落数是22和26,取平均值24
C.三个平板,统计的菌落数分别是21、5和52,取平均值26
D.四个平板,统计的菌落数分别是21、30、24和25,取平均值25
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【例1】 自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物 时一般要将它们分离提纯,然后进行数量的测定。下面是对大肠杆 菌进行数量测定的实验,请回答有关问题。 步骤: ①制备稀释倍数为102、103、104、105、106的系列稀释液。 ②用稀释涂布平板法接种样品。 ③适宜温度下培养。 结果分析: