良好的液相实验室管理规范

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液相色谱柱温箱色谱柱温箱安全操作规定

液相色谱柱温箱色谱柱温箱安全操作规定

液相色谱柱温箱色谱柱温箱安全操作规定前言液相色谱柱温箱和色谱柱温箱是化学实验室中常用的装置,可以用于控制温度、维持环境稳定等功能。

本文旨在为液相色谱柱温箱和色谱柱温箱的使用者制定安全操作规定,以确保使用安全、高效。

安全注意事项1.液相色谱柱温箱和色谱柱温箱设备必须放置在通风良好的地方,不得堵塞通风口。

2.液相色谱柱温箱和色谱柱温箱设备不得接在同一电源插座上,应使用不同的电源,以防止电压过大引起火灾等事故。

3.液相色谱柱温箱和色谱柱温箱设备使用前一定要检查仪器是否完好无损,如有故障应立即停止使用并及时维修。

4.在使用液相色谱柱温箱和色谱柱温箱设备时,应严格按照操作规程进行,不得贪图方便或省略环节,以防止事故发生。

5.液相色谱柱温箱和色谱柱温箱设备运行时,应有专人监控,离开实验室时应及时关闭设备电源。

操作规程1.液相色谱柱温箱和色谱柱温箱设备使用前,应预热20-30分钟,使温度稳定在设定温度,并检查温控仪显示的温度是否与设定温度一致。

2.液相色谱柱温箱和色谱柱温箱设备在使用过程中,应遵守以下操作规程:–每次使用前应清洗液相色谱柱或色谱柱,保持柱子干燥。

–将柱子放入温箱后,应调整进样室或分离室的压力,以使流速稳定。

–调整好流速后,应将进样室或分离室的压力游标固定,以免意外变动。

–液相色谱柱和色谱柱的温度应根据实验需求设定,但不得超出仪器规定的最高温度。

–在操作完毕后应将柱子取出并彻底清洗。

3.液相色谱柱温箱和色谱柱温箱设备在使用过程中,应特别注意以下事项:–液体进样必须使用足够的压力,以避免流量的变化导致数据的漂移。

–操作完毕后,应先关闭气体流动、混沌度、荧光检测等参数,再关闭柱子温箱。

–在操作中如果出现不正常情况,应立即关掉柱子的相关参数,并进行排查,如发现不可控制因素应及时联系维修人员解决。

维护保养1.液相色谱柱温箱和色谱柱温箱设备贴有使用完后的清洗标识,必须按照标识上的清洗程序进行,以保持设备整洁。

液相色谱室管理制度范文

液相色谱室管理制度范文

液相色谱室管理制度范文液相色谱室管理制度范文第一章总则第一条为了规范液相色谱室的管理,提高实验室的工作效率和实验结果的准确性,特制定本管理制度。

第二条液相色谱室是本单位的重要实验室,主要用于分析和测试各种化合物的组成和含量,并提供相关的技术支持和咨询服务。

第三条本管理制度适用于液相色谱室的日常管理和使用,凡在液相色谱室从事工作的人员都应严格遵守。

第四条液相色谱室的管理应遵循科学、规范、安全和高效的原则,保证实验室的正常运行和科研工作的顺利进行。

第五条液相色谱室应具备完善的实验设备和仪器,保证实验室的正常运转和分析测试的准确性。

第二章实验室管理第六条液相色谱室的日常管理工作由实验室管理员负责,负责人应具备相关的技术和管理能力。

第七条液相色谱室的实验室管理员职责包括:(一)制定和完善实验室的管理制度和流程,保证实验室的正常运行;(二)协助配备实验设备和仪器,并负责设备的维修和保养;(三)负责实验室的安全管理工作,制定并执行安全操作规程;(四)协调实验室内外部资源,保证实验室的物资供应和样品的测试工作;(五)负责实验室的日常巡视和检查,及时发现和解决问题;(六)组织实验室人员进行培训和技术交流,提高实验室的整体技术水平;(七)完成上级交办的其他工作。

第八条实验室管理员应具备以下的基本素质:(一)具备相关的专业知识和技能,熟悉液相色谱的原理和方法;(二)掌握实验室管理的基本理论和方法,具备一定的管理能力;(三)具备一定的沟通和协调能力,能够有效地和其他人员合作;(四)具备较高的责任心和敬业精神,能够承担工作压力和工作量;(五)具备良好的团队合作意识和团队精神,能够有效地协调和管理团队;(六)具备较强的学习能力和适应能力,能够及时学习和掌握新的知识和技能。

第三章操作规范第九条液相色谱室的操作规范是保证实验结果准确性和工作安全的重要保障,实验人员应严格遵守操作规范进行实验工作。

第十条液相色谱室的实验人员应具备相关的技术知识和实验经验,且经过相关的培训和考核后方可操作液相色谱仪。

实验室管理规范及标准

实验室管理规范及标准

实验室管理规范及标准1. 引言实验室管理对于保障实验室的正常运行、提高实验室工作效率及保护实验室人员的生命安全具有重要意义。

为了加强实验室管理,确保实验室工作的顺利进行,制定实验室管理规范是必要的。

本文档旨在为实验室管理者和实验室工作人员提供一套实验室管理规范及标准,以确保实验室的安全、高效运行。

2. 实验室管理责任2.1 实验室管理者应对实验室的运行负责,并组织编制实验室管理规范及标准,制定实验室管理方针和目标,并将其贯彻执行。

2.2 实验室管理者应保障实验室的设备设施、工作环境和操作规程符合相关标准要求,并对实验室安全进行定期评估和检查,确保实验室的安全性。

2.3 实验室管理者应制定并执行实验室人员的培训与交流计划,提高实验室人员的专业素质和安全意识。

2.4 实验室工作人员应严格遵守实验室管理规范及标准,正确使用实验设备,规范操作程序,保持实验室的整洁与安全。

3. 实验室设备设施管理3.1 实验室设备设施应进行定期维护和保养,确保设备设施的正常运行。

3.2 实验室设备设施的运行记录应及时作出,记录设备的维修情况、维护保养情况和异常情况等,以便进行追溯和分析。

3.3 对于使用过的实验器材,应及时进行清洗和消毒,确保下次使用前的卫生安全。

3.4 严禁私自更改、拆卸实验室设备设施,如需更改或维修,应及时向实验室管理者申请并经批准。

4. 实验室工作环境管理4.1 实验室工作环境要保持整洁有序,经常清理工作区域,防止杂物堆积。

4.2 实验室应保持适宜的温度和湿度,确保实验操作的顺利进行。

4.3 对于有害、易燃、易爆等物质,应做好储存管理工作,确保安全使用,并设置明显的标识,以提醒工作人员注意防护。

4.4 实验室应定期检查实验室安全装置,如消防设施、安全出口等,并制定相应的维护计划及记录。

5. 实验室操作规程5.1 实验操作前,应仔细阅读并熟悉实验操作规程,了解实验过程中的潜在危险和注意事项。

5.2 实验操作时应佩戴符合标准的个人防护装备,如实验手套、实验眼镜等,并正确使用相关安全设备。

实验室管理规范

实验室管理规范

1 目的为规范实验室的使用、维护、检查管理等相关工作,实现实验室的共管、共用、共享,从而营造一个安全有效、秩序良好的实验室环境,特制定本管理规范。

2 适用范围本规定适用于进入实验室内的所有人员。

3 职责3.1 质量管理部负责组织制定、修订该文件的内容及格式。

负责监督、检查各关联部门的执行情况。

3.2 实验人员及经批准进入实验室的其他人员。

严格按照本规范执行。

3.3人力资源部:负责对新入职人员进行岗前培训。

3.4行政部:保洁管理要求:1.日常保证实验区地面光洁明亮、无污渍、无脚印2.指示牌清洁明亮3.内窗、踢脚线清洁无灰尘、无污渍4.及时收走空置纸箱、垃圾桶垃圾不超过2/35.下班前实验台无灰尘、无水渍、水槽无残余垃圾6.未经允许不得私自挪动实验仪器、不得私自清洁实验器具等7.工具使用完毕后,应清理干净,及时放回工具间,不可随意放置或丢弃8. 日常工作热情、有礼貌,不扎堆聊天,保证随叫随到2.涉及到保洁、清洁工具的管理、地板的维护、凳子、试剂柜维修、更衣柜及维修、水电气门窗、空调。

3.5 IT部:门禁、打印机、实验室电脑、网络、监控。

3.6安全部:负责对新入职人员进行公司级安全培训;包括实验室危险废物处置管理(废液、利器、试剂空瓶)、消防安全和应急处置等内容;监督公司实验室危险化学品使用、危险废物分类收集、纠正“三违”等不安全行为。

代为管理公司的值夜保安。

3.7 值夜保安:3.7.1 维持实验室内治安秩序,在管理区域内发现打架、滋事等违法乱纪情况,应立即制止,维护管理区域内正常的治安秩序,详细记录事件处理过程和结果。

3.7.2每天公司人员下班后检查各楼层门窗关闭情况,发现没有关的门窗负责关好锁好,并做好记录。

3.7.3每天公司人员下班后检查各楼层用电安全,发现没有关的电器、设备,负责关闭或者通知公司主管人员,并做好记录。

3.7.4按公司规定的时间对各楼层进行巡逻,每小时巡检管理区一次,关注实验人员上报的过夜设备的使用情况,发现问题及时通知公司主管人员,并填写《巡视记录表》。

液相色谱管理

液相色谱管理

高效液相色谱仪使用管理制度一、高效液相色谱使用管理准则1、仪器使用者必须经过专门的技术培训,掌握仪器的性能,操作方法和使用注意事项,方可独立完成实验。

2、使用仪器务必登记开始和结束时间,若仪器出现异常,及时停机找管理人员说明并在登记本上记录详情。

3、根据实验需要若要晚间时段、节假日使用必须提前提出要求,管理人员给予安排,但要遵守实验室安全守则。

4、使用手动进样器进样时,在进样前和进样后都需用洗针液洗净进样针筒,洗针液一般选择与样品液一致的溶剂,进样前必须用样品液清洗进样针筒3遍以上,并排除针筒中的气泡;5、使用过程中要经常观察仪器工作状态,及时正确处理各种突发事件。

6、关机前,先关灯,用相应的溶剂充分冲洗系统,退出化学工作站,依提示关泵,及其它窗口,关闭计算机,关闭Agilent 1200各模块电源开关。

7、实验数据要妥善保存,整理,不可复制,泄露实验数据。

8、实验之后的材料、溶液必须及时清理,保证实验室的清洁和安全。

9、未经培训、考核人员不得上机操作,否则对仪器设备损坏或性能下降等将追究相应的责任。

10、未经管理人员许可不得擅自改变仪器的运行参数,不得用控制仪器的电脑操作、打印任何与实验无关的材料。

11、外来人员(非本公司实验室特定实验员)借用液相色谱仪时,应首先向部门经理和实验室管理人员申请,批准后认真填写《实验仪器借用登记表》方可按规范进行操作使用。

12、允许晚间、节假日加班的人员,登记领取钥匙,钥匙要保管好,不得转让他人且及时归还。

注意要及时锁门,并保证实验室的水电安全。

13、实验室内严禁吸烟,进食,听音乐等可能对实验研究及仪器性能造成影响或与实验无关的一切活动。

14、使用者须认真履行仪器使用登记制度,认真填写《液相色谱仪使用登记薄》以《及大型精密仪器使用登记表》,借用仪器者应认真填写《实验仪器借用登记表》二、流动相,溶剂的使用管理1、所选用的流动相溶剂要有一定的化学稳定性,不与固定相和样品组分起反应,其纯度和化学特性必须满足色谱过程的稳定性和重复性的要求。

实验室日常管理规范

实验室日常管理规范

实验室日常管理规范实验室是科研和教学工作中不可或者缺的重要场所,实验室日常管理规范对保障实验室工作的顺利进行和实验室人员的安全具有重要意义。

本文将从实验室日常管理的几个方面进行详细介绍,以匡助大家更好地规范实验室管理。

一、实验室环境管理1.1 实验室卫生实验室卫生是保障实验室工作顺利进行的基本要求。

实验室工作人员应定期清洁实验室,保持实验室环境整洁干净,避免实验室杂物堆积和灰尘积累。

1.2 实验室通风实验室通风是保障实验室人员健康的重要措施。

实验室应保持良好的通风状态,及时更换空气,避免实验室内空气污染。

1.3 实验室安全实验室安全是实验室管理的首要任务。

实验室工作人员应遵守实验室安全规定,正确使用实验室设备,做好实验室安全防护措施,确保实验室工作的安全进行。

二、实验室设备管理2.1 设备维护实验室设备是实验室工作的重要工具,应定期进行设备维护和保养,确保设备正常运转。

如有设备故障应及时维修或者更换。

2.2 设备使用实验室工作人员应熟悉实验室设备的使用方法,正确操作设备,避免因操作不当导致设备损坏或者事故发生。

2.3 设备存储实验室设备应按照规定的存储要求进行存放,避免设备受潮、受热、受损等情况发生。

定期检查设备存储情况,确保设备安全存放。

三、实验室物品管理3.1 实验室耗材实验室耗材是实验室工作中必不可少的物品,应合理使用实验室耗材,避免浪费。

使用完毕的实验室耗材应及时清理和处理。

3.2 实验室试剂实验室试剂是实验室工作中的重要物品,应按照规定的方法储存和使用试剂,避免试剂泄漏或者污染。

使用过期试剂应及时处理。

3.3 实验室文献实验室文献是实验室工作的重要参考资料,应妥善保存实验室文献,避免遗失或者损坏。

实验室文献的借阅和归还应按照规定进行。

四、实验室人员管理4.1 实验室人员培训实验室工作人员应接受相关实验室管理和安全培训,了解实验室规章制度和安全操作规程,提高实验室工作人员的安全意识和管理水平。

液相色谱室规章制度管理

液相色谱室规章制度管理

液相色谱室规章制度管理一、液相色谱室概述液相色谱是一种用于分离和检测化合物的技术,主要通过液相进行样品的分离。

液相色谱室是进行液相色谱分析的地方,通常设备齐全,环境控制好,以确保分析过程的准确性和稳定性。

二、液相色谱室管理制度1. 安全管理(1)所有人员进入液相色谱室前,必须穿戴实验服和手套,并接受有关安全操作培训。

(2)禁止在液相色谱室内吸烟、喝饮料和吃东西。

(3)使用化学药品时,要戴好口罩和护目镜,避免接触眼睛和皮肤。

(4)实验结束后,要及时清理工作台和设备,并做好安全措施。

2. 实验设备管理(1)液相色谱仪的使用必须由经过培训并获得资质的人员进行操作。

(2)使用完毕后,要及时关闭设备、清理仪器,并做好日常维护。

(3)发现设备出现故障或异常情况时,要及时报告实验室主管人员,并进行及时修理或更换。

3. 实验样品管理(1)所有实验样品必须经过标记和记录,包括样品名称、样品号、样品来源等信息。

(2)不同样品间要做好隔离,避免交叉污染。

(3)实验过程中,要注意样品的保存和处理,避免样品被污染或损坏。

4. 废弃物管理(1)所有实验产生的废弃物必须经过分类处理,并投放到指定的垃圾桶内。

(2)化学废弃物要经过专业机构处理,避免对环境造成污染。

(3)废弃物处理过程中,要做好安全措施,避免造成伤害。

5. 实验室纪律管理(1)禁止私自带人进入液相色谱室,严禁未经许可擅自使用实验设备。

(2)禁止实验室内大声喧哗,避免干扰他人工作。

(3)实验室内禁止打闹和玩耍,保持工作环境整洁和安静。

6. 紧急情况处理(1)发生火灾、泄漏等紧急情况时,要立即采取适当措施,保护好自己和他人的安全。

(2)及时报告实验室主管人员,并按照应急预案进行处置。

7. 违规处理(1)对于严重违反规章制度的人员,将按照实验室管理规定进行处理,包括警告、记过、处罚等。

(2)如情况严重,将取消其在实验室的资格,并报告相关部门进行处理。

三、液相色谱室管理的意义液相色谱室规章制度管理的严格执行,不仅可以保证实验过程的安全和准确性,还能提高实验效率和成果的可靠性。

学校化学实验室管理规则范本

学校化学实验室管理规则范本

学校化学实验室管理规则范本一、实验室使用规范1. 实验室使用的目的是进行教学和科研实验,任何非法或无关的活动都是不被允许的。

2. 在使用实验室前,必须接受相关安全培训,并通过考试合格,才能独立进行实验操作。

3. 进入实验室时,应该佩戴适当的个人防护装备,包括实验室服、手套、护目镜等,并严禁穿着短裤、拖鞋等不符合安全规定的服装。

4. 在实验室内禁止食品和饮料,禁止吸烟,禁止使用手机和其他电子设备。

5. 实验室内的化学药品和试剂必须妥善保存,遵守相关的储存和处理规定,不得私自使用、调试或移动。

二、实验室安全操作规范1. 在进行任何实验之前,必须对实验器材、试剂和药品进行检查,确保其完好无损,并获得教师或实验室管理员的指导和批准。

2. 实验操作过程中要认真阅读实验指导书,了解实验原理和步骤,并按照要求进行操作。

3. 实验过程中应注意个人实验区域的整洁,及时清除实验台上的废弃物和小样品,保持实验环境的整洁和安全。

4. 使用实验室设备和仪器时,要遵守正确的操作步骤,并按照教师或实验室管理员的指导进行调试和操作。

5. 实验结束后,要及时清洗实验器材和仪器,将实验室恢复到初始状态,并妥善保存和归还实验器材。

三、应急处理规范1. 在实验过程中,如出现火灾、泄漏、爆炸等紧急情况,应立即拉响警报,并按照教师或实验室管理员的指导进行应急处理。

2. 在火灾发生时,应立即关闭所有气源和电源,并使用灭火器或毛巾等进行灭火。

3. 在泄漏或溢出液体时,应立即采取相应的措施进行封堵和吸附,避免扩散和污染环境。

4. 在发生爆炸时,应迅速撤离实验室,并确保所有人员安全,及时报告给校园安全人员。

5. 实验室发生事故时,应配合相关人员进行调查和事故分析,积极配合提供相关信息。

四、实验室管理责任1. 教师和实验室管理员应对实验室进行定期检查和维护,确保实验室设备和仪器的正常运行,并修复或更换损坏的设备和仪器。

2. 实验室管理员应负责实验室的管理和维护,保持实验室的清洁、整齐和安全。

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螺纹引起渗漏。拧螺丝时使用的扳手应短些,
不宜太长。
pH值

15、 使用硅胶为基质的柱子,流动相的pH值
一般不应>8或<2,pH>8会使硅胶骨架溶解;
pH<2则键合相化学键易剥离。主要看柱子的 说明书。
气泡

16、 尽量避免气泡进入检测器,如果有气泡 连续不断的通过检测池,将会使基线的噪声增 大。如有较大气泡,则会在基线上出现许多线 状峰。如果检测池有停留的气泡,可采用突然


反相色谱柱没有使用缓冲溶液,请使用以下 溶剂系列再生 100%甲醇---100%乙腈---75%乙腈---25%异丙 醇---100%异丙醇---100%二氯甲烷---100%正 己烷---100%二氯甲烷---100%异丙醇---100% 乙腈各三十分钟。注意用异丙醇时的流速


反相色谱柱使用缓冲盐溶液,请使用以下溶剂 系列再生: 水---75%乙腈---100%乙腈---氯仿-异丙醇(1: 1)---100%乙腈各30分钟。
纯乙腈

3、 不能用纯乙腈作为流动相,这样会使单向
阀粘住而导致泵不进液。针对岛津的液相。有
耐乙腈的进口阀除外。
挥发性的流动相

4、 不要使用挥发性很大的溶剂(如戊烷乙醚 等)。这类溶剂在运行过程中易挥发而使系统 产生气泡。流动相在使用前要脱气,以免产生 气泡。气泡的存在会造成色谱图上出现尖锐的 噪声峰,严重时会造成分析灵敏度下降;气泡 变大进入流路或色谱柱时会使流动相得流速变 慢或不稳定,使基线起伏。
色谱柱污染后如何清洗和再生?

一般来说,所有的清洗方法都是类似的形式。所有的 溶剂都是随溶剂的强度增加,经常最后一个容剂是非 常疏水的(如醋酸乙酯甚至烃),可以用来溶解非极 性物质如脂类和油类。我们必须保证一系列溶剂中每 个溶剂都能与下一个溶剂互溶。清洗过程结束时,必 须借助一个中间步骤的溶剂,因为它能与正己烷或二 氯甲烷互溶又能与水相溶剂互溶。但是异丙醇的粘度 非常大,必须确保较低的流速以免使泵压过高。冲洗 色谱柱时,冲洗液由色谱柱出液端直接流入废液,不 要经检测池,以免检测池被污染。
色谱柱污染可能出现的情况

滞留在色谱柱中被吸附的样品积累到一定程度 足以使他们形成的固定相,有时候这些分析物 能与这些杂质作用形成一定的分离机理,这些 非目标产物的干扰能被检测器测到而且形成色 谱峰,气泡,基线扰动及基线漂移等现象,在 色谱图上出现“怪峰”,表现为负峰、宽峰、 馒头峰、双头峰及前吐舌后拖尾峰和保留时间 会波动。
空走泵

5、泵工作时要注意流动相不要被用完。否则 空泵运转会加快磨损柱塞杆和密封圈。输液泵 的压力不要太高,否则会使密封圈变形,降低 密封圈使用寿命。
双泵


6、 在使用双泵过程中,如果不是梯度洗脱, 尽量先混合。如果一个是有机溶剂,一个是含 盐溶液,在使用双泵的时候,有可能会析出晶 体。如果走梯度,如何检查流动相会不会析出 了? 双泵的基线噪音较单泵大。


在摸流动相条件时,尽量少配溶剂,可先用双 泵摸条件。 要注意观察水相和有机相能不能互溶。
流动相的特性



不要使用强酸或强碱溶液,因为pH过高或过 低会影响密封圈和柱塞杆。溶液的pH值要在 柱子适合的范围内 水含量较高的流动相中容易生长微生物。需一 天过滤一次。(90%以上的水相),水含量大 于95%以上,柱子碳链断裂,因此要考虑使用 合适类型色谱柱(AQ柱) 不要长时间将色谱柱或和HPLC系统充满水或 缓冲液,要经常用至少含20% 的有机溶剂冲 洗系统。
工作站使用


考虑工作站安装时间是否在建文件夹之前 当建好文夹以后不准有试验在建文夹时间之前, 要考虑合成的检样时间,所以最好建文件夹就 在起始原料购买的时间后。 修改电脑时间时应关闭工作站。 最好当天设计好试验,不要半路插图 对于失败的试验写明原因即可
高效液相的使用和维护

1. 流动相应用HPLC级的试剂,使用前过滤除 去其中的颗粒性杂质和其他物质(使0.45µm 或更细的膜过滤),防止固体微粒进入泵内。 因为尘埃或其它任何杂质微粒都会磨损柱塞杆、
流动相的过滤

过滤器的清洗 过滤溶剂的时候要润洗,少量多次, 滤膜的选择,除了纯水用水系膜以外,其它的 溶剂过滤都要用有机系的膜 走梯度时用屈臣氏的水 配流动相进详细记录试剂的的来源,如试剂同 前一天一样,可写同前
仪器使用



开机,将流速逐步的调到所要流速,目的,不 适柱压突然升高。 需要停机时,逐步降低流速,若需要更换色谱 柱应待柱压基本为零时轻开前端PK管 注意每天清洗泵头(清洗泵头的目的)、进样 阀、进样针(进样针应无黑色污垢) 自动进样器的清洗液应每天更换。
系统管路和连接

连接管的裁切 连接接头 管路的堵塞

理想的HPLC系统应死体积最小、不漏液。 不要用剪刀或剪钳切割HPLC连接管,因为它 们会导致管口变形,并形成锐角切口,这是液 体泄露和死体积增加的最主要原因。要用切线 钳。
连接接头

制作连接接头的材料主要有不锈钢和各种聚合物材料, 一般情况下不锈钢管用不锈钢连接接头,PEEK管用 PEEK接头。最好不要混合使用不同厂家的接头和刃 环,因为它们的尺寸可能不同,混用容易导致漏液、 损坏螺纹、破坏色谱柱进出口及检测器进液口螺母等 问题的发生。不同厂家的连接管伸入刃环的长度也可 能不同,连接管在螺母中没有良好的密封会导致漏液、 死体积增加等
密封环、缸体和单向阀。输液泵的滤器经常清
洗或更换。
腐蚀性的流动相

2、 流动相不应含任何腐蚀性的物质。例如氯 仿、丙酮、二氯甲烷等,这些溶剂将会使pk树 脂部件变脆;还有含有卤离子的流动相或能产 生卤离子的流动相,如果使用了,分析结束后, 应立即用去离子水清洗整个管路。因卤离子会 腐蚀不锈钢部件或管路。流动相含有缓冲盐, 不应停泵保留在泵内时间过长,由于蒸发甚至 由于溶液的静置就可能析出晶体。

7、 经常检查压力限制开关,检查流速。
压力

8、 HPLC输液泵的工作压力不要超过规定的 最高压力,否则会使高压密封环变形,产生漏 液。岛津设置30MPa
开机


9、 每次开机时,流速和柱压要逐渐加强,突 然增压会使柱压受到冲击引起絮乱,产生空隙, 使柱头塌陷。 同样关机时逐渐减小流速。
样品配制
旧接头和漏接头的更换

高压或手拧接头都有一定的使用寿命,到期必 须更换。
色谱柱的保护

使用保护柱 在线过滤器 柱温
柱温

温度波动会引起色谱峰漂移并产生多种影响。 使用色谱柱时,保持柱温恒定非常重要。建议 使用柱温控制单元

色谱柱的使用温度在很大程度上还依赖于分析 条件和填料类型。典型的石墨化碳基质和聚合 物基质填料可以使用温度要远远高于硅胶基质 填料。温度升高会增加溶剂对键合相和硅胶基 质化学侵害的程度。例如在60℃ ,pH 2的缓 冲溶液中,键合氨基硅胶填料已经开始水解, 这一点从相关的谱图变化可以明显看出。公司 规定柱温不得超过40度,除标准明确规定外
纯水冲洗,因纯水会对柱子造成损坏。进样阀 要用适宜的溶剂进行清洗。
平衡色谱柱

13、 在注射样品前要使色谱系统平衡,通常 平衡10~20个柱体积的流动相。但如果在流动 相中加入少量添加剂则需要相当长的时间来平 衡HPLC色谱柱。需要柱子的充分平衡,然后
才能进行鉴定。
连接色谱

14、 不要把柱头拧得太紧,过紧易损坏接头
流动相的配制
配制有特殊气味的溶剂,去合成的通风橱操作。 如三乙胺、二乙胺等

替换流动相

互溶 正相反相:最好正相和反相分离系统,要将正相系统 转为反相系统或色谱柱的正相条件转变为反相条件, 需要用一种与常用正相溶剂和反相溶剂均互溶的中间 溶剂置换。反相系统中含有缓冲溶液时,要用50% 的 甲醇水溶液替换100% 的甲醇进行冲洗。例如:正相 时使用的溶剂为正己烷/乙酸乙酯,就要先用异丙醇 然后用甲醇,最后用50% 的甲醇水溶液冲洗,然后转 为使用甲醇一缓冲溶液,使系统由正相转为反相。
样品的准备

HPLC分析中,样品的准备不仅仅是将固体溶 于液体中,还可能包括过滤、萃取、衍生以及 准确的称量和稀释等操作过程。样品中含有悬 浮固体杂质时需要过滤,也可以用上面介绍的 过滤器在线过滤或过滤到样品瓶中。注意:使 用膜过滤时要确保膜适合使用的所有溶剂。

溶解样品的溶剂与流动相应尽可能互溶,以避 免样品通过检测器时引起基线漂移和鬼峰出现。
色谱柱柱效测定

流动相:甲醇-水(65:35) 溶剂:取苯与甲苯各5滴,用乙醇稀释至10ml。 流速:1ml/min 检测波长:254nm 以上均为普通C18和C8柱的使用与维护,对于 特殊的色谱柱必须经负责人领取,使用,按照 要求维护。



有些色谱柱既能做正相色谱,又能做反相色谱, 因此在使用和改变溶剂之前,一定要检查色谱 柱和流动相是否匹配。如氨基柱、氰基柱购买 此类色谱一定要看说明书,先看柱子溶剂是什 么,根据保存的溶剂确定柱子的流动相。 反相变正相 在尝试替换溶剂时,应确保系统和色谱柱中的 溶剂与新溶剂互溶。如果两种溶剂互溶性和物 理性质未知,可以把两种溶剂倒在烧杯中观察, 以避免直接进入HPLC系统可能出现不互溶问 题。
增大流量的方法排除气体(不连接色谱柱),
或用纯乙醇等表面张力小的溶剂冲洗。
检测器

17、 防止检测池被污染。检测池被污染了可 能产生噪音,或基线漂移,可使用适当有机溶 剂(例:异丙醇等)清洗,如果污染严重,就 可以用1mol/L稀硝酸溶液,水和甲醇等进行清 洗。
注意事项

1、流动相使用前必须经脱气和过滤处理。 2、避免流动相组成及极性的剧烈变化。 3、大多数反相色谱柱的PH稳定范围2-7.5, 尽量不超过该色谱柱的PH范围
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