微生物学检查
临床微生物学检查
无菌体液
脑脊液标本 立即保温送检或床边接种（引起脑膜炎的病原体脑 膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌等抵抗力弱） 建议：同时送血培养 胸水、腹水和心包液 含菌量少宜采集较大量标本或注入血培养瓶送检。 注意：厌氧菌感染常见
化脓及创伤感染标本
先用无菌生理盐水清洗伤口及病灶表面的杂菌； 采取伤口及病灶基底部或边缘部（接近肉芽组织）的 分泌物； 脓肿标本以无菌注射器抽取为好，注意排尽注射器内 空气。 注意：请务必注明采集部位
血培养
1.采血指征：发热(≥38℃)或低温(≤36℃)，寒战，
白细胞增多，c反应蛋白升高，严重的局部感染如脑膜 炎、心内膜炎、肺炎、肾盂肾炎、腹部术后感染等， 导管介入或血液透析患者； 2.采血时间：使用抗菌药之前，对间歇性寒战或发热应 在寒战或体温高峰到来之前0.5～1h采集血液，或于 寒战或发烧后1h内进行； 3.采血部位：推荐肘静脉，疑似细菌性心内膜炎时以肘 动脉或股动脉为好，避免从导管采集；多次采血时， 应在不同部位进行。
临床微生物学检查
引言
微生物的分类？
原核细胞型：细菌、放线菌、螺旋体、支原体、衣原 体、立克次氏体。 真核细胞型：真菌 、原虫。 非细胞型：病毒和亚病毒。
“一虫二毒三菌四体”
临床微生物学检查
利用微生物学相关检验技术，快速、准确检验 和鉴定临床标本中的病原微生物，并对引起感 染的微生物进行药物敏感性试验，指导临床合 理使用抗菌药物，为临床对感染性疾病诊断、 治疗、流行病学调查研究以及医院感染控制等 提供科学依据。
2015年世界艾滋病日主题： “行动起来，向‘零’艾滋迈进——合力抗艾，共担责任，共享 未来”。
1 初 筛 检测方法：酶联免疫试验（ELISA） 免疫胶体金快速试验 报告方式： 筛查试验（-）“HIV抗体阴性” 筛查试验（&# 复 检
病原微生物的检验项目及结果解释
病原微生物的检验项目及结果解释病原微生物的检验项目及结果解释微生物检查包括：细菌、真菌、衣原体、支原体及病毒等。
这对于查明致病原因和选择用药十分重要。
但除细菌和真菌外，直接查找方法比较复杂。
细菌培养，采集血、痰、咽试子、大便、小便、创面分泌物等标本进行培养，看有无致病菌生长，正常应为阴性或少量非致病菌；真菌检查，标本涂片或培养，检出真菌为不正常。
病原微生物的检验主要是检测与l临床患者致病性有关的病原性微生物，对感染性疾病进行快速、准确地诊断，密切结合临床提出及时有效的治疗方案，防止微生物产生耐药性和医院内感染的发生。
基础知识1.什么是微生物?什么是病原微生物?微生物是需借助光学显微镜或电-y：显微镜放大观察到的结构简单，个体微小的生物的总称。
微生物的种类很多，医学微生物尤其是临床微生物主要有细菌、病毒、真菌、支原体、衣原体等。
微生物在自然界中广泛存在，与人类和自然界其他生物共生共存，绝大多数对人类和自然界是有益的，只有少部分可以引起人类和动植物发生疾病，这部分微生物才称为病原微生物，比如结核分枝杆菌可引起结核病，痢疾杆菌可以引起痢疾等。
2.什么是细菌?细菌分哪几种?细菌是在自然界分布最广、个体数量最多的有机体，是大自然物质循环的主要参与者。
其体积微小，以微米作为测量单位，无色半透明，只有经过染色才能观察到细菌的轮廓及其结构。
经革兰染色，可将细菌分为两大类，即革兰阳性菌和革兰阴性菌。
细菌主要由细胞壁、细胞膜、细胞质、核质体等部分构成，有的细菌还有夹膜、鞭毛、菌毛等特殊结构。
根据形状则可分为三类，即：球菌、杆菌和螺旋菌(包括弧形菌)。
3.什么是病毒?病毒分哪几种?病毒是结构最简单、体积最微小(纳米)的一类非细胞型微生物，介于生命和非生命之间的一种物质形式，其必须严格寄生在活细胞内，含有单一种核酸即脱氧核糖核酸(DNA)或核糖核酸(RNA)的基因组和蛋白质外壳，没有细胞结构，对抗生素不敏感，但对于干扰素敏感。
现代微生物学检验基本技术
现代微生物学检验基本技术随着现代医学及相关科学技术的发展，各学科相互交叉和渗透，医学微生物学检验技术已深入到细胞、分子和基因水平，许多新技术、新方法已在临床微生物实验室得到广泛应用。
医学微生物学实验室的基本任务之一是利用微生物学检验技术，准确、快速检验和鉴定临床标本中的微生物，并对引起感染的微生物进行耐药性监测，为临床对感染性疾病诊断、治疗、流行病学调查及研究等提供科学依据。
第一节微生物形态学检查细菌形态学检查是细菌检验的重要方法之一，它是细菌分类和鉴定的基础，可根据其形态、结构和染色反应性等，为进一步鉴定提供参考依据。
一、显微镜检查由于细菌个体微小，肉眼不能看到，必须借助显微镜的放大才能看到。
一般形态和结构可用光学显微镜观察，其内部的超微结构则需用电子显微镜才能看清楚。
常用显微镜有如下几种。
1．普通光学显微镜采用自然光或灯光为光源，其波长约为0.4μm。
显微镜的分辨率为波长的二分之一，即0.2μm，而肉眼可见的最小形象为0.2mm。
故用油（浸）镜放大1 000倍，能将0.2μm的微粒放大成肉眼可见的0.2mm。
普通光学显微镜可用于细菌、放线菌和真菌等的观察。
2．暗视野显微镜常用于观察不染色微生物形态和运动。
在普通显微镜安装暗视野聚光器后，光线不能从中间直接透入，视野呈暗色，当标本接受从聚光器边缘斜射光后可发生散射，因此可在暗视野背景下观察到光亮的微生物如细菌或螺旋体等。
3．相差显微镜相差显微镜利用相差板的光珊作用，改变直射光的光位相和振幅，将光相的差异转换为光强度差。
在相差显微镜下，当光线透过不染色标本时，由于标本不同部位的密度不一致而引起光相的差异，可观察到微生物形态、内部结构和运动方式等。
4．荧光显微镜荧光显微镜与普通光学显微镜基本相同，主要区别在于光源、滤光片和聚光器。
目前大多数使用的是落射光装置，常用高压汞灯作为光源，可发出紫外光或蓝紫光。
滤光片有激发滤光片和吸收滤光片二种。
用蓝光的荧光显微镜除可用一般明视野聚光器外，也可用暗视野聚光器，以加强荧光与背景的对比。
《医学微生物学》三大常规的微生物学检查
《医学微生物学》三大常规的微生物学检查从临床标本中分离细菌的目的是为疾病的病原学做诊断，或查找与疾病相关的微生物，以及对抗生素的敏感性，这对于临床诊断、治疗、预后和进行流行病学调查是很有价值的。
因此，对临床标本的处理和检测应掌握以下原则。
1．临床标本的正确采集和处理对于疾病的正确诊断关系很大。
病人标本一般应在应用抗菌药物前采集。
对血液、脑脊液或穿刺液等标本，应严格按照无菌技术进行采集；对鼻咽拭子、肛拭子、粪便等标本，虽无须严格无菌操作，但也应尽量避免杂菌混入。
2．采集容器上应贴好送检号及病人姓名的标签，连同检验单一起尽早送检验室。
若路途较远，应冷藏保存送检；对脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌等特殊标本，送检时应35℃～37℃保温。
3．人体很多部位与外界相通，存在有正常菌群，但不致病，故在涂片检查或分离培养时，应区别标本中是常居菌群的污染还是致病菌。
另外，对某些无菌的部位，如血液、骨髓、脑脊液等，如检查出细菌应视为致病菌，但必须要排除采样及操作中的污染。
4．根据标本来源和可能存在的病原菌，选定各种分离培养基和孵育环境。
如痰标本一般选用血平板，用于化脓性链球菌、无乳链球菌、肺炎链球菌、白喉棒状杆菌等的分离。
【血液标本检查】正常人的血液是无菌的。
当细菌侵入血流并在其中生长繁殖，产生毒素等，可引起菌血症或败血症。
细菌学检验对其诊断和治疗具有极其重要的意义。
一、标本采集l．标本采集必须严格遵守无菌操作，即应去除皮肤上的细菌，又应注意空气中的细菌。
穿刺部位以碘酒、酒精棉球消毒，用干燥的灭菌注射器抽取血液，立即注入选定的液体培养基瓶内，充分混匀以防凝固。
2．采血一般应在治疗前，并在高热、寒战时作培养。
伤寒在发病一周内即菌血症期间采血；化脓性脑膜炎，鼠疫应在发热1～2d内采血；亚急性细菌性心内膜炎也宜于发热高峰采血或多次采血，且每隔1～2h采血一次，连续3～4次，可获较高的阳性率。
3．采血量应相当于培养液的1／10，通常是50ml培养液采血5ml，这样可使存在于血液中的补体、抗体、调理素、溶菌酶等抑制因子被稀释，使之减弱或失去抑制作用。
药物制剂微生物学检查
药物制剂微生物学检查
药物制剂微生物学检查是通过对药物制剂中的微生物进行检测和分析，以确定其微生物污染的程度和类型。
这个检查的目的是确保药物制剂的质量和安全性。
药物制剂微生物学检查通常包括以下内容：
1. 细菌检查：使用培养基和相关的培养技术，检测药物制剂中是否存在细菌污染。
常见的方法包括菌落计数、肉汤稀释法、滤膜法等。
2. 真菌检查：使用培养基和相关的培养技术，检测药物制剂中是否存在真菌污染。
常见的方法包括菌落计数、真菌培养、荧光显微镜检查等。
3. 真空法检查：使用真空吸引药物制剂样品到微孔滤膜上，然后将滤膜移植到培养基上进行菌落计数和分析。
4. 内毒素检查：使用内毒素试剂盒，检测药物制剂中是否
存在内毒素污染。
常见的方法包括内毒素抑制试验、内毒
素检测试纸法等。
5. 孢子检查：使用染色方法，检测药物制剂中是否存在孢
子污染。
常见的方法包括热耐受试验、营养条件筛选法等。
药物制剂微生物学检查是药品质量控制的重要环节，可以
有效预防和控制微生物污染对药物制剂的影响，确保药物
制剂的质量和安全性。
微生物学检查方法
微生物学检查方法
微生物学是研究微生物的生物学科学，其检查方法主要包括以下几种：
1. 复数染色法：利用染色方法将微生物标记出来，常用的染色方法有革兰氏染色法、抗酸染色法等。
2. 培养法：将微生物样本放入适当的培养基中，提供适合其生长的营养物质和环境条件，以培养和分离微生物。
3. 普通显微镜观察法：通过普通显微镜观察微生物的形态、结构和运动情况，常用于初步识别微生物。
4. 分子生物学方法：利用PCR、酶联免疫吸附试验（ELISA）等技术检测微生物的基因或蛋白质，以确定其种属和性质。
5. 直接读数法：通过显微镜观察、流式细胞术等方法直接计数微生物数量和活性，用于研究微生物的数量和生理状态。
6. 分子识别方法：利用16S rRNA和18S rRNA等基因序列进行分子鉴定，快速准确地识别微生物。
7. 免疫学方法：通过免疫反应检测微生物中的抗原或抗体，以确定其存在和性
质。
除了以上常用的方法外，还有一些特殊的检测方法，如荧光显微镜观察、蛋白质鉴定、质谱分析等，用于特定的微生物检测需求。
微生物学检查意义最大的标本
微生物学检查意义最大的标本
摘要：
一、微生物学检查的重要性
二、微生物标本的类型
三、不同类型标本的检查方法
四、微生物学检查在医学和科研中的应用
五、标本的保存和处理
正文：
微生物学检查是医学和科研中不可或缺的一部分，它能够帮助人们了解微生物的种类、分布和数量，进而为疾病的诊断、治疗和预防提供重要的依据。
微生物标本是进行微生物学检查的基础，其类型包括血液、尿液、呼吸道分泌物、粪便、组织切片等。
不同类型的标本需要采用不同的检查方法，例如涂片、培养、染色、分离等。
在医学领域，微生物学检查主要用于诊断感染性疾病，如细菌性肺炎、结核病、尿路感染等。
通过对患者的微生物标本进行检查，医生可以了解病原体的种类和数量，选择合适的抗生素进行治疗，提高治疗的成功率。
此外，微生物学检查还可以用于疾病的预防，如通过检测食品中的微生物，预防食物中毒。
在科研领域，微生物学检查被广泛应用于微生物资源的开发和利用，如筛选具有特定功能的微生物菌株，研究微生物的代谢产物等。
此外，微生物学检查还可以用于环境微生物的研究，如水体、土壤中的微生物群落结构分析，为
环境保护提供科学依据。
为了确保微生物学检查的准确性和可靠性，标本的保存和处理至关重要。
一般来说，标本应尽快送检，避免长时间保存导致微生物死亡或变异。
不同类型的标本需要采用不同的保存方法，如冷藏、冷冻或干燥处理。
此外，标本在检查前应进行处理，如清洗、消毒、研磨等，以提高微生物的检出率。
总之，微生物学检查在医学和科研中具有重要意义，标本的类型、检查方法和保存处理都影响着检查结果的准确性和可靠性。
实验室微生物学检查结果：
实验室微生物学检查结果：
在实验室微生物学检查中，我们通过检查样本中的微生物种类、数量和分布情况来对实验室的环境进行评估。
实验室微生物学检查结果对于确保实验室环境的干净和无菌非常重要，这有助于防止污染和交叉感染的发生。
首先，我们利用显微镜检查样本中的微生物。
通过观察，我们能够确定样本中的主要微生物种类，如细菌、真菌和某些原生生物。
这些微生物可能对实验室的环境产生影响，因此我们需要确保实验室的环境能够支持这些微生物的生长。
其次，我们测量了样本中的微生物数量。
通过对样本中的微生物进行计数，我们能够了解到样本中的微生物种类数量，进而确定实验室中是否存在过度污染的情况。
如果样本中的微生物数量超出安全标准，那么我们需要采取相应的措施来降低微生物数量，以确保实验室的环境符合标准。
最后，我们分析了样本中微生物的分布情况。
我们注意到一些微生物在特定区域出现的频率较高，而另一些微生物则分散在样本中的不同区域。
这可能意味着某些区域可能更容易受到污染，因此我们需要特别关注这些区域，并采取相应的措施来防止污染的发生。
根据实验室微生物学检查的结果，我们得出结论：实验室的环境需要定期检查和清洁，以确保实验室的环境干净无菌。
此外，我们还需要对实验室中的工作人员进行定期的培训，以提高其对实验室环境的认识和责任感，进而减少因为操作不当而产生的微生物污染。
总之，实验室微生物学检查结果对于我们来说非常重要。
通过检查样本中的微生物种类、数量和分布情况，我们可以确保实验室的环境干净无菌，从而为实验室的研究工作提供一个安全、可靠的工作环境。
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气体灭菌
各种 导管 输血输 液袋 一次性 注射器
残留的环氧 乙烷与其他产物 结合，生成乙烯氯 乙醇和乙二醇，均有 毒。
眼、牙、 泌尿器 械
环氧乙烷 使用
人工 心脏 各种 内窥镜 缝线
外科手 术器械 麻醉 用具
第二部分
• 培养基和方法
培养基
培养基、缓冲液及指示剂等试剂的配制是开展微生 物实验的重要基础工作 微生物实验成功与否的要素： • 用于微生物生长、分离、鉴别、保存的培养基 • 实验中保护微生物细胞的缓冲液、稀释样品或淋 洗器具及滤膜用的淋洗液 • 在菌种鉴别中用于生化反应的各种指示剂等试剂。
风机 高效过滤器 挡板玻璃 正面工作区 污染 空气
•工作台内不放置闲置物品。 •风机运行正常后使用。 •操作员穿无菌衣、佩戴手 套操作。 •试验前，用70%酒精棉球擦 拭手部、试验台面。
层流 空气
生物安全柜工作原理
• 保护操作人员免遭柜内 污染物的危害。 • II级生物安全柜从前开 口吸入具有一定表面速 度的气流，保护操作者， 垂直的、无颗粒的层流 气体保护工作区内的样 品不会受到交叉感染。 • 排出气体经HEPA过滤器 过滤以保护环境。一些 类型的生物安全柜将气 体全部排出，而另一些 生物安全柜会将一部分 气体过滤后，重新回到 实验室。
菌落 颜色
菌落 边缘
外观 形态
小而 突起 或大 而平 坦 大而 突起 大而 疏松 或大 而致 敏
相互 关系
分散 或规 律排 列 丝状 交织 丝状 交织
形态 特征
小而 均一 或有 芽孢 细而 均一 粗面 分化
菌落 正反 面颜 色差
相同
细胞 生长 速度
一般 很快
气味
菌落与培 养基结合 程度
不结合
多样
可见 膜状 或不 规则 边缘
检测方法
直接接 种法
薄膜 过滤法
平皿菌落 计数法
MPN法
无菌检查
微生物限度检查
无菌检查-直接接种法
敷料
1cm×3cm
培养基
人工晶体
检测方法-薄膜过滤法
• 适用于液体制剂及水溶性固体制剂及带有有抑菌作 用的产品。 • 供试液通过滤膜，将微生物留集在滤膜上，将滤膜 放置于有营养的基质上，经培养，微生物从滤膜孔 隙中吸收营养，在滤膜上增生，形成菌落。
一般 有臭 味
酵母菌
较湿
单调 球状、 相同 （乳、 卵圆 脂） 状 多样 有霉 菌
不结合易挑 起 较牢固结合
霉菌
干燥
一般 较快
微生物学检测
微生物学检测
非无菌产品微生 物限度检查
抗菌性能检测 无菌检查
净化工作台工作原理
室内 空气
•人员较少且离门较远的位 置。
制作斜面
菌和酵母菌保藏。 • 缺点 传代多，易变异和污染。
菌种传代与保藏-液体石蜡、 液氮低温
•石蜡将培养物与空气隔绝，降 低需氧菌种的生理生化水平， 防止水分蒸发。 •穿刺、灭菌石蜡、试管直立、 低温4℃。 •适用于霉菌、酵母菌，细菌较 差。 •冰箱4℃，时间过长，菌 种保存不宜过长。 •-70 ℃，菌体的原生质 形成稳定“玻璃态”，能 长时间保存菌种。代谢活 动停止，但不死亡。
液体石蜡 高1cm
菌种传代与保藏-冻存管
• 培养液培养3代～5代菌 种。 • -24℃冰箱冻存。 • -80℃低温冻存。 • 室温融化，一次一只。 • 适合大部分无菌试验用 菌，保存至少1年。
菌种传代、管理
•保藏的菌种应有详细的记录：溯源、传代次 数、保藏方法。 •保存的菌种应有两套，一套供试验用，一套 供保存传代用。 •使用记录和销毁记录。
气体灭菌
浓度 温度 相对湿度 使用
•气体穿透力较强，能穿过各种纺织 品、纸、薄的塑料制品。不能穿透 金属、玻璃、搪瓷等无空隙材料。 •易燃易爆且有毒性。 •机理 烷基化菌体内蛋白质DNA和 RNA，并与蛋白质上的羧基、氨基、 巯基等活性集团发生反应，使酶代 谢过程发生障碍。
环氧乙烷
Source : Roland Berger & Partners
排气高效过 滤器 玻璃保护 挡板 正面工作 区 送风高效 过滤器 送风通道
风机 层流空气 污染空气 室内空气
国内菌种保藏机构
•农业微生物菌种保藏中心（ACCC）：农科院 土肥所 •普通微生物菌种保藏中心（CCGMC）：中科院 微生物所，真菌、细菌。 •工业微生物菌种保藏中心（CICC） •中国食品药品检定研究院（CMCC） •中国预防医学科学院病毒研究所 •林业微生物菌种保藏中心（CFCC） •兽医微生物菌种保藏中心（CVCC）
培养基的储存
• 制备好的培养基应保存在2～25 ℃、避光的环 境，若保存于非密闭容器中，一般在3周内使 用，若保存于密闭容器中，一般可在一年内使 用。
培养基-培养基和培养温度的修订
2010年版 1.硫乙醇酸盐液体培养基 30～35℃；20～25℃（三部）； 2.改良马丁培养基 20～25℃。 3.选择性培养基 4. 0.5%葡萄糖肉汤培养基 5.营养肉汤培养基 6.营养琼脂培养基 7.改良马丁琼脂培养基 2015年版 1. 硫乙醇酸盐液体培养基 30～35℃ 2. 胰酪大豆胨肉汤培养基（TSB） 20～25℃。 3. 选择性培养基 4. 0.5%葡萄糖肉汤培养基 5. 胰酪大豆胨琼脂培养基（TSA） 6. 沙氏葡萄糖肉汤培养基 7. 沙氏葡萄糖琼脂培养基
High Priority Medium to High Priority
Beijing
ShijiaZhuang (Hebei) Zhengzhou (Henan)
Tianjin
Qingdao
Jinan Nanjing
Hefei (Anhui)
Suzhou
Xi’an (Shaanxi)
革兰氏染色
革兰氏染色
革兰阳 性球菌
革兰阴 性杆菌
革兰氏染色
• 染色原理 革兰阳性：厚肽聚糖 层+磷壁酸。 革兰阴性：肽聚糖含 量低，而脂类物质 含量高，当用乙醇 处理时，脂类物质 溶解，细胞壁的通 透性增加，使结晶 紫-碘复合物易被乙 醇抽出而脱色，然 后又被染上了复染 液（番红）的颜色， 因此呈现红色。
热力灭菌： 高温杀死 微生物
湿热 灭菌
流通蒸汽灭菌 高压蒸汽灭菌☆
辐射灭菌
紫外线
•紫外线是光谱中对生物危害最大 的部分，波长260nm时对微生物的 生物学效应最大。 •使DNA嘧啶基之间产生交联，抑 制DNA复制，导致突变或死亡。 •穿透力弱，不能穿透正常的包装 材料（普通玻璃、塑料薄膜、纸 等）。 •车间、净化台等安装的紫外线灯， 仅能杀灭空气中一部分微生物。 •照射剂量=紫外线强度×照射时 间
菌种保藏的原理
营养物 浓度 温度 水分 氧气 氮源、碳源、能源、无机物、水和生长因子。 生长温度三基点：最低生长温度、最适生长温 度、最高生长温度。 微生物生长的必要条件。 需氧微生物、兼性需氧微生物、厌氧微生物。
菌种传代与保藏-斜面保存
• 斜面保存 1-6个月。 • 每隔1～3个月移种一次。 • 使用范围 经常使用的细菌、霉 低温4℃，细菌、霉菌
培养基-培养基性能的修订
2010年版 1.硫乙醇酸盐培养基 需气菌、厌气菌培养 2.改良马丁培养基 真菌、需气菌培养 2015年版 1.硫乙醇酸盐培养基 主要用于厌气菌培养，也可以用于需 气菌 2. 胰酪大豆胨肉汤培养基 真菌和需气菌的培养
稀释剂
1.0.9%氯化钠溶液：常用的 等渗溶液。 2. pH7.0氯化钠-蛋白胨缓 冲液：调解pH至近中性， 其中蛋白胨对菌细胞有保 护作用，有利于菌数及控 制菌测定。 3.0.1%蛋白胨水溶液。
培养基-培养基的种类
根据不同用途,培养基可分为：
培养基-培养基的种类
• 基础培养基 常用的是肉浸液加蛋白胨和氯化钠，
除对营养要求苛刻的菌外，大多数细菌都能再此类培 养基中生长。多用于细菌计数和纯培养。
• 增菌培养基 根据待检菌的特征与营养要求配制培
养基，专一性较强，有时为防止其他菌生长，加入选 择性抑菌剂，使目的菌优势生长。 • 选择培养基和鉴别培养基 根据各种细菌的生化特征 鉴别属种的培养基。如分离用培养基、生化培养基。 可根据细菌在培养基上的生长情况、菌落特征、动力、 产硫化氢、产酸、产气及生化反应等，进行细菌分类 及鉴别属种。
热力 灭菌 辐射 灭菌
气体 灭菌 杀灭活的微 生物
1): Economist Intelligence Unit
过滤 灭菌
热力灭菌
干热灭菌
•灼烧与火焰灭菌 •干烤灭菌：利用热辐射和干热 灭菌。160℃，2h。过高，纸浆 织物等焦化。 煮沸灭菌
巴氏消毒：杀死液体 中不需要的细菌、酵 母菌和霉菌。对耐热 均无效
菌种传代与保藏
• 迅速将沾有菌种的接种环伸入另一支待接斜面试管的底部， 轻轻向上划线（直线或曲线）。 • 接好种的斜面试管口再次过火焰，棉塞底部过火焰后立即塞 入试管内。 • 将沾有菌苔的接种环在火焰上烧红灭菌。先在内焰中烧灼， 使其干燥后，再在外焰中烧红，以免菌苔骤热，使菌体爆溅， 造成污染。 • 放下环后，再将棉塞旋紧，在试管斜面上距试管口2～3cm处 贴上标签。 • 28～370C恒温培养。
微生物形态学检查-真菌
• 酵母菌和霉菌。有细胞壁 和典型细胞核。 • 霉菌 丝状真菌，绒毛状、 棉絮状或蜘蛛网状。 • 酵母菌 单细胞通常出芽 繁殖，少数分裂繁殖。
微生物菌落和细胞形态特征比较
微生物类别 主要特征 菌落 含水 特征
细菌 较湿 或很 湿
参考特征 细胞 细菌 透明 度
透明 或透 明较 差 透明 较差 不透 明。 初生 菌落 透明
•专利微生物菌种保藏中心Kunming Guiyang •普通微生物菌种保藏中心（CCGMC）:病毒