培养基模拟灌装试验进度计划表(无菌粉末分装粉针剂)
培养基模拟灌装无菌生产工艺验证规划方案
审批部门姓名签字日期起草人质量管理部起草人生产技术部起草人针剂车间审察人针剂车间审察人生产技术部审察人质检中心审察人质量管理部赞同人质量负责人发散部门：培养基模拟灌装（小容量注射剂）无菌生产工艺考据小组一、归纳厂区无菌操作生产线，按2010 版 GMP及其附录要求进行设计，是专用于小容量注射剂非最后灭菌产品生产使用。
某某产品因无法进行F0≥8 分钟湿热灭菌，以达到SAL≤ 10-6，但处方可以经过微生物滞留过滤器过滤，故采用除菌过滤和无菌工艺相结合的灭菌方法。
无菌生产工艺是制药领域中最难的工艺之一，保证产品无菌是该工艺最大的难点，减少无菌工艺药品污染风险的两项重要措施为：①人员的培训②无菌工艺考据。
按 SFDA化学药品注射剂基本技术要求：培养基灌装考据是对设施、环境以及人员操作的一种系统考据，是判断无菌保证水平的要点手段。
故在正式生产前必定按某某产品生产工艺进行培养基模拟灌装考据。
1 本次考据要点生产工艺流程图安瓿的冲刷称量配料工器具冲刷和灭菌除菌过滤干热灭菌灌封灯检D级背景 C 级背景 A 级背景一般区2考据原理将培养基裸露于设施、容器密封系统的表面和要点环境条件中，并模拟实质生产达成工艺操作。
对装有培养基的密闭容器进行培养以检查微生物的生长并议论结果，确定实质生产中产品污染的可能性。
对于失败的考据进行菌种解析并检查，确认并解决可能造成失败的原因后，重新进行考据。
3考据次数按 2010 版 GMP附录 1 要求因该生产线为新建厂区设施，为培养基模拟灌装试验的首次考据，故需进行连续三个批次的考据活动。
二、考据目的1经过该工艺考据活动证明新设计厂房采用既定的无菌生产工艺能保证产品的无菌要求；2经过该工艺考据活动证明无菌操作相关人员资格，降低人员带入无菌的风险；3经过该工艺考据活动保证生产吻合现行GMP法规要求。
三、考据范围和推行时间1 本考据方案适用于厂区小容量注射剂车间无菌生产线正式投入使用前某某品种小容量注射剂无菌生产工艺培养基模拟灌装考据活动；2 计划考据明行时间为2013 年 3 月 ~4 月连续三个批次。
综合制剂车间小容量注射剂生产线培养基验证时间计划表
QA
QC
干热开始灭菌
湿热第一柜开始灭菌（末次冲洗水）
湿热第二柜开始灭菌（末次冲洗水）
湿热第三柜开始灭菌（末次冲洗水）
铝盖清洗灭菌
工序起止时间
灭菌开始（末次精洗水）
胶塞清洗灭菌
工序起止时间
灭菌开始（末次精洗水）
生产第二步
配液
工序起止时间
配液时间
配液完到除菌过滤开始
除菌过滤时间
配液开始至过滤结束（沉降菌、游菌、尘埃粒子）
序号
文件名称
内容
计划时间
参与部门
1
202综合制剂车间小容量注射剂生产线培养基模拟无菌灌装验证方案（20ml）
验证前确认
培训确认、先决条件确认、文件确认、仪器仪表校验信息确认、生产用关键设备确认、物料确认
综合制剂车间
设备动力部
QA
QC
培养基无菌性试验、微生物生长性能试验
生产第一步
工器具清洗灭菌
工序起止时间
微生物负荷（滤前100ml）
阴性对照（滤后100ml）
管制瓶清洗
工序起止时间
开始洗瓶时间
灌装
工序起止时间
灌装开始时间（沉降菌、浮游菌、尘埃粒子、设备表面微生物、人员表面微生物）
管制瓶
前、中、后各取20支
胶塞
前、中、后各取20只
轧盖
轧盖开始时间（沉降菌）
灯检
灯检开始时间
灯检后产品（全取样）
备注：本次模拟灌装批量7000瓶/批。
培养基模拟灌装试验方案
培养基模拟灌装试验方案（无菌粉末分装粉针剂）目录1.目的 (3)2.范围 (3)3.验证组织及职责 (3)4.方案说明 (4)5.工艺概述 (4)6.验证前检查 (5)7.验证内容 (6)8.验证周期 (13)9.验证总结、评价与建议 (14)10.验证报告的审核批准 (14)11.验证合格证 (14)1.目的对于无菌生产来说，即使所有与产品无菌性有关的设备部件、容器以及原料都经过有效地灭菌处理，但当这些生产要素在实际工艺条件下组合在一起时，仍有可能因各种原因导致产品被污染。
对于非最终灭菌的无菌生产工艺必须进行培养基灌装来验证。
培养基灌装是用于评估整个无菌工艺过程，用于表明如果严格按照工艺要求生产，产品的无菌性有可靠保证。
2.范围本验证方案适用于无菌粉末分装粉针剂生产线的培养基模拟灌装试验。
3.验证组织及职责3.1验证职责3.2验证方案的培训验证实施前，QA部门对验证相关人员培训，填写《员工培训记录表》。
4.方案说明4.1验证过程中偏差处理的要求执行《偏差管理规程》4.2验证过程中变更的要求执行《变更管理规程》4.3验证过程中记录填写的要求执行《记录管理规程》4.4其他要求5.工艺概述5.1产品：5.1.1性状：白色结晶或结晶性粉末。
5.1.2规格：0.25g/瓶。
5.1.3包装：10ml西林瓶。
5.1.4批量：24000瓶。
5.2胶塞处理：纯化水清洗、硅化、注射用水清洗、灭菌。
（121℃，20分钟）5.3西林瓶处理：纯化水清洗、注射用水清洗、压缩空气吹干、隧道烘箱灭菌。
（灭菌段温度320℃≥5分钟，冷却温度﹤40℃）5.4铝盖干热灭菌。
（180℃，120分钟）5.5无菌药粉通过分装机充填到西林瓶中，盖胶塞、轧铝盖、灯检、贴签、包装。
5.6工艺流程图如下：6.验证前检查6.1人员的确认确认参与验证人员均接受过微生物知识、更无菌衣、无菌操作、培养基模拟灌装试验方案的培训，同时确认参与验证人员的健康体检情况，详见附件1《员工体检和培训确认表》。
冻干培养基灌装模拟试验1
××××××××粉针车间冻干粉针剂培养基无菌灌装模拟试验验证方案粉针车间冻干粉针剂培养基无菌灌装模拟试验是对粉针车间使用F2000/12/600型灌装机在局部百级工作环境中进行冻干粉针剂灌装过程中所采用的各种方法和各种规程防止微生物污染的水平可以达到可接受的合格标准的能力。
通过检查确认找出粉针车间进行冻干粉针剂灌装作业过程中的控制要求，为今后对粉针车间进行冻干粉针剂灌装作业管理确定依据。
一、该方案的实施由下述单位负责进行：二、方案实施单位责任人：三、验证小组成员：冻干粉针剂培养基无菌灌装模拟试验验证方案方案制订：制订日期：方案批准：批准日期：目录1.概括 (1)1.1目的 (1)1.2范围 (1)1.3责任 (1)2.确定可接受的合格标 (2)3.培养基性能测试 (2)3.1微生物生长性能试验 (2)3.2培养基无菌性试验 (2)4 模拟分装用无菌粉末 (2)4.1模拟分装用无菌粉末应具有的特性 (2)4.2 无菌性试验 (3)4.3 抑菌性试验 (3)4.4 溶解性试验 (3)5 模拟分装过程操作规程及操作人员控制 (3)6 操作过程及无菌环境控制与监测 (4)6.1 模拟分装使用西林瓶及胶塞无菌性检测 (4)6.2 微生物控制与监测 (4)6.3 尘埃粒子监测 (5)7 取样计划及取样点 (5)7.1 取样计划 (5)7.2 取样点 (6)8 模拟分装 (6)8.1 无菌粉针剂模拟分装方法 (6)8.2 液体培养基制备及进入无菌分装区方法 (6)8.3 液体培养基分装工具的选用及处理使用方法 (6)8.4 无菌粉针剂模拟分装试验 (7)8.5 液体培养基分装 (7)9 微生物培养 (7)9.1 阴性对照 (7)9.2 阳性对照 (7)9.3 试验样品培养 (7)10 试验结果评价 (8)11 验证制度及再验证时间安排 (8)12 确认方案执行日期 (9)1、概括冻干粉针剂培养基无菌灌装模拟试验是在其他各个系统（诸如灭菌系统、公用系统、无菌环境保持系统、设备验证、设备清洗过程验证等）验证工作完成的基础上进行的。
冻干粉针剂车间培养基模拟灌装验证方案
冻干粉针剂车间培养基模拟灌装验证编订人＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿编订日期＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿会签批准人＿＿＿＿＿＿＿＿批准日期＿＿＿＿＿＿＿＿＿目的：建立一个冻干粉针培养基模拟灌装工艺再验证方案，以规范冻干粉针车间培养基模拟灌装工艺验证工作，证明所生产的无菌产品可以在规定的环境、工艺和操作下能有效防止微生物污染，同时确定无菌灌装室内允许的最多人员数量，使生产的注射剂符合产品质量标准，尤其符合无菌标准要求。
范围：冻干粉针生产线无菌工艺的验证。
责任：设备工程管理部经理、质量管理部经理、质控主管、质保主管内容：1.概述培养基模拟灌装是在与实际生产相同的工艺条件和操作方法下，模拟灌装经除菌过滤的胰酪胨大豆胨肉汤培养基适量到抗生素瓶中，压塞后，在3~6℃条件下冻干，轧盖后，按规定条件进行培养，以确认无菌灌装工艺的可靠性。
在此验证之前,空气系统、水处理系统、灭菌系统等验证工作均已完成。
2.验证目的通过培养基模拟灌装试验证明，在无菌灌装过程中所采用的各种方法和规程，可使微生物污染的水平达到可接受的合格标准的能力，并提供保证所生产产品的无菌性的置信度达到可接受的合格标准的证据。
对整个无菌灌装过程进行验证试验，根据验证结果来评估生产线正常运转时对微生物控制的状况，判断生产过程的可靠性，利用培养基模拟灌装试验来证明，在正常状态下，生产过程是可靠的，满足当产品污染的概率为0.10%时，无菌性的可信限为95%的要求。
验证过程应严格按照本方案规定的内容进行，若因特殊原因确需变更时，应填写验证方案变更申请及批准书，报验证领导小组批准。
3. 验证分工3.1验证小组3.1.1负责验证方案的审批。
3.1.2负责验证的协调工作，以保证本验证方案规定项目的顺利实施。
3.1.3负责验证数据及结果的审核。
3.1.4负责验证报告的审批。
3.1.5负责发放验证证书。
3.1.6负责再验证周期的确认。
3.2设备工程部3.2.1负责组织验证所需厂房、设施、设备、仪器的验证。
冻干粉针无菌灌装方案
*****冻干粉针无菌灌装验证方案文件编号：执行前批准签字页部门起草人签字起草日期制造部质量保证部职责部门审核人签字审核日期制造部职责.部门批准人签字批准日期质量保证部职责1.目的本验证用胰蛋白胨大豆肉汤培养基溶液代替****冻干粉针的产品溶液，进行工艺模拟试验，检查和证明按照《注射用*****工艺规程》()所规定的生产工艺、设备及人员能够生产出符合《注射用****质量标准》()无菌试验项下要求的产品。
2.范围本次验证的范围适用于注射用*****生产的全过程，包括：人员更衣、各房间的清洁消毒、容器工具的处理、称量、调剂、除菌过滤、中控取样、动态下环境监测、无菌灌装、模拟冻干、轧盖过程，并在灌装过程中模拟的正常与非正常干扰活动。
3.责任者及职责3.1部门职责:工程部：保证所有动力系统的正常供应保证生产区域内的环境符合规定要求完成设备和设备上仪表的校验协助制造部完成验证程序制造部：起草、审核并批准验证方案和验证报告按照验证方案内容和生产操作规程进行操作完成验证记录质量保证部：审核并批准验证方案和报告监督验证实施过程质量控制部:样品无菌检查和培养基生长试验环境监测运营总监：审核并批准验证方案和验证报告3.2 验证小组成员：职责组长组织该验证工作，生产监督组员无菌灌装人员，负责按照方案实施无菌灌装过程及实施正常和非正常的干扰。
无菌灌装准备人员，负责无菌灌装物品的准备和灭菌冻干人员，负责操作冻干机维修人员，负责模拟设备维修状态QC检测人员，负责样品的无菌检查和培养基生长试验QC人员，负责环境监测QA人员，起草验证方案并负责工艺监督3.3 灌装过程中人员分工I项目人员安装灌装机组件注射用水灌装过程培养基灌装过程出箱轧盖4.验证简介本次验证考察按照工艺规程的要求进行的称量调剂、除菌过滤、湿热灭菌、西林瓶清洗灭菌、灌装和冻干过程是否可以满足无菌的要求，本次验证还考察人员的操作是否符合无菌要求,是否会对产品带来微生物方面的污染.在验证中还模拟了几种有可能发生的正常干扰和非正常故障，以考察在处理故障时，是否会对产品产生不良影响。
无菌模拟灌装试验报告
无菌模拟灌装试验报告甘肃大得利制药有限公司1.概述：本验证由质量部、生产部、质检科、粉针车间、设备部等部门按照《无菌模拟灌装试验方案》于2012年月日至年月日组织实施，并统计试验结果，分析试验结果并报告。
2.责任：参加本次试验的所有人员。
参加本次验证的人员签名：2.验证结果分类报告：2.1验证前生产系统确认：表1人员培训情况，现将其报告如下：表2 生产系统要素评价汇总2.2 培养基性能确认报告：选择了具有促生长能力的胰酪胨大豆肉汤培养基，作为本次试验的培养基。
质量部负责培养基性能的确认。
2.2.1 培养基配制：质量部派有微生物检验能力的人员负责性能试验用的培养基的配制，并将配制过程记录如下（备注：以下所指批号是配制好的培养基的批号，可以按照培养基配制的日期编批号）：表3需配制培养基名称：胰酪胨大豆肉汤培养基来源：灭菌后目视观察试管里的培养基，外观澄明。
表4表5表6结论：以上试验结果表明，胰酪胨大豆肉汤培养基符合验证使用要求，121℃灭菌30min可以达到灭菌效果，加入试验菌后有促微生物生长能力。
2.3无菌灌装试验用西林瓶无菌性试验报告：车间洗瓶岗位依据西林瓶清洗灭菌操作规程西林瓶清洗灭菌后，指定灌装岗位具体操作工在使用前，在无菌区打开烘箱箱门，在烘箱底层和最高层的四个角落处按无菌取样要求，分别取出5只（共20只）西林瓶放入无菌取样锥形瓶中,密封，作为1号样品；同法在灌装结束后，从生产线上剩余的西林瓶中随机取20只，放入无菌取样锥形瓶中,密封，作为2号样品。
将以上样品送质检科，分别加入100ml 氯化钠注射液，按《中国药典》2010年版二部附录“无菌检查法”—薄膜过滤法作无菌检查，现将检验情况汇总如下（备注：以下所指批号是指清洗灭菌后的西林瓶，可以按照清洗的日期编批号）：表7表8表9结论：依据以上试验结果表明，无菌灌装试验用西林瓶无菌检查符合要求。
2.4无菌灌装试验用胶塞无菌性试验报告：车间洗塞岗位操作工按照洗塞灭菌操作规程对胶塞清洗灭菌后，由指定的灌装岗位操作工在最初卸料时，取卸料口处的胶塞20只，放入无菌取样锥形瓶中,密封，作为1号样品；同法操作在无菌灌装结束后，从振荡器上的剩余胶塞中随机取20只，放入无菌取样锥形瓶中,密封，作为2号样品，将以上样品送质检科，，分别加入100ml氯化钠注射液，按《中国药典》2010年版二部附录“无菌检查法”—薄膜过滤法作无菌检查。
培养基模拟灌装试验
什么是无菌生产工艺？ 什么是无菌生产工艺？
Environment 原料 环境
Personnel 人员
工艺验证
无菌检验
作业环节与风险
作业环节 灭菌 房间设计 环境监测 消毒 更衣 物品转移 无菌技术（灌封） 无菌装配 验证难易度 人员依赖程度 易 N/A 中等 难 难 难 难 难 低 N/A 可变 高 很高 高 很高 很高 相关风险 低 中等 高 高 很高 高 很高 很高
非最终灭菌制剂 的风险大不大？
我们如何做到上述的无菌保障水平
无菌生产工艺
什么是无菌生产工艺？ 什么是无菌生产工艺？
无菌生产工艺
产品、容器和密封件分别进行灭菌，然后进行 灌封 在极高洁净环境下进行灌装和密封 产品在最终容器中不再做进一步的灭菌处理 对各个组成部分的灭菌工艺需要进行严格验证 和监控 在灌封前和灌封过程中的操作会带来污染风险
什么是无菌生产工艺？ 什么是无菌生产工艺？
– 生产环境 • 洁净区 • 人员 – 药液制备和过滤 – 药液除菌过滤前的微生物负荷 – 过滤器完整性测试和验证 – 生产设备和内包装材料的准备和灭菌 – 灌装过程 – 无菌工艺过程验证
L/O/G/O
培养基模拟 灌装试验
无菌的概念
什么是无菌? 什么是无菌? –理论上：无菌＝没有任何活的微生物 理论上：无菌＝ 理论上 –实际上：我们无法证明产品中没有活微 实际上： 实际上 生物存在
无菌的概念
“无菌”的实际定义: 无菌” 实际定义: • • 经生长和繁殖证明无生物 实际为概率上的无菌，普遍接受的标准是： 实际为概率上的无菌，普遍接受的标准是： 概率上的无菌
关键因素六: 灌装体积