人心房肌小电导钙激活钾通道在HEK293细胞上的表达与电生理学特性

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ｏｖｅｒｌａｐｐｉｎｇＰＣＲａｎｄｓｉｔｅ－ｄｉｒｅｃｔｅｄｃｌｏｎｉｎｇ．ＴｈｅｐｌａｓｍｉｄｗａｓｔｒａｎｓｆｅｅｔｅｄｂｙＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ２０００ａｎｄｓｔａｂｌｅｃｅｌｌｌｉｎｅｓｅｘｐｒｅｓｓｅｄＳＫ２ｗｅｒｅｓｅｌｅｃｔｅｄ．ｒｈｅｂａｓｉｃｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｏｆＳＫ２ｗｅｒｅｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄｂｙｕｓｉｎｇｐａｔｃｈｃｌａｍｐｔｅｃｈｎｉｑｕｅ．
谭晓秋，陈桂兰，李畅，李妙龄，李涛，杨艳，井上勋，曾晓荣
（泸州１医学院心血管医学研究所，医学电生理实验室，四川泸州６４６０００）
摘要目的：克隆人心房肌小电导钙激活钾通道亚型２（ＳＫ２），构建稳定表达ＳＫ通道的ＨＥＫ２９３细胞系并研究其基本电生理学特性。方法：以人心房肌为标本，通过逆转录，重叠ＰＣＲ法和定向克隆构建真核表达载体ｐＩＫＥＳ — ｈｒＧＦＰ — ＳＫ２，采用脂质体法转染至ＨＥＫ２９３细胞并筛选稳定表达的细胞系；使用全细胞和单通道膜片钳技术进行电流记录，研究其基本电生理学特性。结果：全细胞和单通道膜片钳均能在表达的ＨＥＫ２９３细胞上记录到ＳＫ２通道电流，其电流具有明显的胞内钙离子依赖性。结
ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＥｌｅｅｔｒｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｙ，ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｆｏＣａｒｄｉｏｖａｓｏｌｏｇｙ，ＬｕｚｈｏｕＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅＡｂｓｔｒａｃｔＯｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｃｌｏｎｅｔｈｅｓｍａｌｌｃｏｎｄｕｃｔａｎｃｅｃａｌｃｉｕｍａｃｔｉｖａｔｅｄｐｏｔａｓｓｉｕｍｃｈａｎｎｅｌｓｔｙｐｅ２ｆＳＫ２）ｏｆ
ｄｏｉ：１０．３９６９￣．ｉｓｓｎ．１０００ — ２６６９．２０１３．０３．００１
ＢａｓｉｃｅｌｅｃｔｒｏｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓｏｆＳＫ２ｃｈａｎｎｅｌｓｏｆｈｕｍａｎａｔｒｉａｌｔｉｓｓｕｅｓｅｘｐｒｅｓｓｅｄｉｎＨＥＫ２９３ｃｅｌｌｓ
泸州医学院学报
２０１３年
第３６卷
第３期
２０３
ＪｏｕｒｎａｌｏｆＬｕｚｈｏｕＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅＶｏ１．３６Ｎｏ．３２０１３
wk.baidu.com
人心房肌小电导钙激活钾通道在ＨＥＫ２９３细胞上的表达与电生理学特性术
ＴａｎＸｉａｏｑｉｕ，ＣｈｅｎＧｕｉｌａｎ，ＬｉＣｈａｎｇ，ＬｉＭｉａｏｌｉｎｇ，ＬｉＴａｏ，ＹａｎｇＹａｎ，ＩｎｏｕｅＩｓａｏ，ＺｅｎｇＸｉａｏｒｏｎｇ
论：成功构建稳定表达人心房肌ＳＫ２通道的ＨＥＫ２９３细胞系，为以后研究通道功能活动奠定了基础。
关键词小电导钙激活钾通道：基因转染；心房颤动
中图分类号Ｒ３３１．３＋８
文献标识码Ａ
ｈｕｍａｎａｔｒｉａｌｔｉｓｓｕｅ，ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｓｔａｂｌｅＨＥＫ２９３ｃｅｌｌｓｅｘｐｒｅｓｓｅｄＳＫ２ａｎｄｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｂａｓｉｃｅｌｅｃｔｒ０ｐｈｙｓｉｏｌｏｃａｌｐｒｏｐｅｒｔｉｅｓ．Ｍｅｔｈｏｄｓ：ＴｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｐｌａｓｍｉｄｏｆｐＩＲＥＳ－ｈｒＧＦＰ－ＳＫ２ｗａｓｃｏｎｓｔｕｃｒｔｅｄｂｙｒｅｖｅｒｓｅｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎ，