酶工程的原理及发展
酶工程技术的研究及其在医药领域的应用

酶工程技术的研究及其在医药领域的应用一、本文概述随着生物技术的飞速发展,酶工程技术作为其中的重要组成部分,已经在医药领域展现出广阔的应用前景。
酶,作为生物体内的一类特殊蛋白质,具有高效、专一和温和的催化特性,因此被广泛用于医药、化工、食品等多个领域。
本文旨在探讨酶工程技术的最新研究进展,并重点分析其在医药领域的应用现状和发展趋势。
本文将对酶工程技术的基本原理和方法进行简要介绍,包括酶的来源、分离纯化、固定化以及酶反应器的设计等。
在此基础上,文章将重点论述酶工程技术在医药领域的多个应用方面,如药物合成、药物转化、药物分析和疾病诊断等。
通过具体案例和数据分析,展示酶工程技术在提高药物生产效率、降低药物成本、改善药物质量和提高疾病诊疗准确性等方面的积极作用。
本文还将对酶工程技术在医药领域面临的挑战和未来发展方向进行深入探讨。
随着生物技术的不断进步,酶工程技术的研究和应用将更加深入和广泛。
例如,新型酶的发现与改造、酶固定化技术的创新、酶反应器的优化以及酶工程技术在基因治疗和细胞治疗等新兴领域的应用等,都将成为未来研究的热点和方向。
酶工程技术在医药领域的应用已经取得了显著成果,并展现出广阔的发展前景。
本文将从多个角度全面分析酶工程技术在医药领域的应用现状和发展趋势,以期为相关领域的研究和实践提供有益的参考和借鉴。
二、酶工程技术的基础理论酶工程技术,作为一门应用生物技术的分支,其基础理论主要涵盖酶学基本原理、酶反应动力学、酶分子设计和改造以及酶固定化技术等方面。
酶学基本原理是酶工程技术的基石。
酶是生物体内具有催化功能的蛋白质,具有高度专一性和高效性。
酶通过降低反应的活化能来加速生物化学反应,使得原本难以进行的反应在温和条件下也能迅速进行。
了解酶的结构、催化机制以及影响因素,对于酶工程技术的应用至关重要。
酶反应动力学是研究酶催化反应速率与反应物浓度关系的科学。
通过对酶反应动力学的研究,可以了解酶催化反应的速度控制步骤、反应速率常数以及反应机制等,为酶工程技术的优化提供理论依据。
生物催化与酶工程

生物催化与酶工程生物催化,即利用生物催化剂(酶)对底物进行特异性催化转化的过程,是一种绿色环保、高效可持续的化学合成方法。
酶工程作为生物催化的关键领域,研究了酶的选择和设计,以提高催化效率和底物特异性。
本文将重点讨论生物催化与酶工程的原理、应用和发展前景。
一、生物催化的原理生物催化是利用酶的特异性催化底物的化学反应。
酶是一种生物大分子,由氨基酸组成,具有复杂的三维结构。
其活性位点与底物结构互补配对,通过形成酶底物复合物,使底物发生催化反应,生成产物。
生物催化具有高效选择性、温和条件、可逆性和不产生污染等优点。
二、酶工程的应用1. 医药工业:酶工程在药物的合成、转化和纯化过程中发挥着重要作用。
通过对酶的改造和优化,可以生产出具有更好活性和稳定性的药物。
例如,利用酶催化合成酶抑制剂,可以有效治疗多种疾病。
2. 食品工业:酶工程在食品加工中广泛应用。
例如,利用改造的淀粉酶可以提高面包的质量和口感,利用改造的蛋白酶可以提高奶酪的风味和质量。
3. 生物燃料工业:酶工程在生物质转化为生物燃料的过程中发挥着重要作用。
通过改造酶的底物特异性和催化活性,可以提高生物质的转化率和产物选择性。
4. 环境保护工业:酶工程在废水处理、废弃物降解等环保领域有广泛应用。
通过利用酶的催化特性,可以高效降解废水中的有机污染物,实现废水的净化和资源化利用。
三、酶工程的发展前景酶工程作为一门新兴的交叉学科,具有广阔的发展前景。
随着基因工程和蛋白工程等技术的不断进步,酶工程的研究和应用将会得到进一步的提升和拓展。
未来,可以通过对酶的高通量筛选和智能设计,开发出更高效、更稳定的酶催化剂。
同时,酶工程还可以与其他领域相结合,如纳米技术、材料科学等,开创出更多新的研究和应用领域。
总结:生物催化与酶工程作为一种绿色可持续的催化方法,在医药工业、食品工业、能源工业和环境保护等领域有广泛的应用前景。
随着酶工程技术的不断发展和创新,我们可以更好地利用酶的催化特性,解决许多现实中面临的难题,并推动工业生产和科学研究的发展。
酶工程与生物催化

酶工程与生物催化酶工程是一门利用生物催化技术对酶进行研究、应用和开发的科学。
生物催化是利用酶作为催化剂来促进和加速化学反应的过程。
在现代生物技术的推动下,酶工程和生物催化已经成为生物制药、食品加工、环境保护等领域中重要的研究和应用方向。
一、酶工程的基本概念与原理酶是生物催化过程中起关键作用的大分子催化剂,能够在温和的条件下加速化学反应的速率,提高反应的选择性和效率。
酶工程的基本概念是指通过改变酶的结构和性质,使其在特定条件下具有更高的催化活性和稳定性。
酶工程主要包括两个方面的内容:一是通过基因工程技术改变酶的基因序列,使其具有更好的性能;二是对酶进行物理化学性质的调控,提高酶的稳定性和催化效率。
酶工程的原理是通过对酶进行定向进化和有针对性的改造,提高酶的催化活性和选择性。
定向进化是利用自然选择的原理,在实验室中对酶进行多次重复的遗传突变和筛选过程,筛选出表现出更高活性和稳定性的突变酶。
有针对性改造是通过改变酶的结构和特性,使其适应特定反应条件,提高催化效率和产物选择性。
二、酶工程在生物制药中的应用1. 酶在药物合成中的应用酶催化合成药物的方法相对传统化学合成方法更加温和、高效和环保。
通过酶工程技术可以改变酶的催化性能,使其适应特定反应条件,提高反应产物的选择性和纯度。
同时,酶工程还可以提高酶的稳定性和催化活性,延长酶的使用寿命,降低生产成本。
2. 酶在生物催化合成药物中的应用利用酶催化合成药物可以降低合成工艺的复杂性和成本,提高产物的纯度和选择性。
在生物催化合成药物中,酶通过催化底物的转化,生成所需的目标产物。
酶工程技术可以有效提高酶的催化效率和选择性,降低反应副产物的生成,从而提高合成药物的产量和质量。
三、酶工程在食品加工中的应用1. 酶在食品加工过程中的应用酶在食品加工过程中有广泛的应用,例如面包、啤酒、乳制品、果汁等的生产中都涉及到酶的应用。
酶可以促进面团发酵、提高啤酒的醇味、改善乳质口感和提高果汁的澄清度。
酶工程的应用原理

酶工程的应用原理1. 什么是酶工程酶工程是指利用基因重组技术和生物化学手段,对特定酶的结构和性能进行改造和改良的一门技术。
通过对酶的结构进行修饰和扩充,可以使酶具备更广泛的应用领域和更高的催化效率,从而解决工业和生物医学领域中的一系列问题。
2. 酶工程的应用领域酶工程在许多领域有着广泛的应用,包括以下几个方面:•工业生产:酶工程可以用于制备食品、药品、化学品和生物燃料等。
通过改造酶的结构,可以提高反应速率和产量,并降低生产成本。
•环境保护:酶工程可以应用于处理污水、废气和固体废物等环境污染物。
通过利用酶的降解能力,可以高效地降解有害物质,减少环境污染。
•医学检测:酶工程可以用于开发新型的医学诊断方法和检测试剂。
通过改造酶的特性,可以实现高灵敏度、高选择性的生物传感器,用于检测疾病相关的生物标志物。
•食品加工:酶工程可以用于改善食品的质量和口感。
例如,通过添加淀粉酶,可以防止食品的凝胶化和老化,提高食品的口感和储存稳定性。
•农业生产:酶工程可以用于提高农作物的耐逆性和产量。
例如,通过改造酶的活性和稳定性,可以开发出新型的农药和植物抗病基因。
3. 酶工程的原理酶工程的原理可以概括为以下几个步骤:1.酶的筛选:首先需要从自然界、细胞提取或通过基因克隆获得目标酶的编码序列。
然后,利用分子生物学技术将该编码序列插入到合适的载体中,构建表达载体。
2.酶的表达:将表达载体导入到宿主细胞中,通过培养和诱导等方法让细胞表达目标酶。
利用适当的培养条件和诱导剂,可以实现高效表达目标酶,并获得足够的酶量。
3.酶的纯化:利用分离技术,将目标酶从宿主细胞和其他杂质中纯化出来。
通常采用离心、层析、过滤等技术,可以获得高纯度的目标酶。
4.酶的改造:通过基因重组技术和蛋白工程手段,对目标酶的结构进行改造和改良。
可以通过点突变、插入或删除基因片段等方法,改变酶的催化活性、热稳定性、pH稳定性等性能。
5.酶活性的检测:对改造后的酶进行活性检测,评估酶的催化效率和稳定性。
酶工程技术在中药提取中的应用

酶工程技术在中药提取中的实践案例
酶解法在中药提取中的应用:酶解法能够选择性降解植物细胞壁,提 高有效成分的提取率。
酶转化技术在中药提取中的应用:酶转化技术能够通过酶促反应将 无效或低效成分转化为有效成分,提高提取物的药效。
酶固定化技术在中药提取中的应用:酶固定化技术能够将酶固定在载 体上,实现连续化提取,提高提取效率。
酶工程技术未来的研究方向和发展趋势
研究方向:深入 研究酶的特性和 作用机制,发现 新的酶品种和用 途。
发展趋势:开发 高效、环保的酶 提取和纯化技术, 提高中药提取的 效率和纯度。
技术创新:探索 酶工程技术与其 他生物技术的结 合,如基因工程、 蛋白质工程等, 以实现更广泛的 应用。
产业应用:加强 酶工程技术在中 药提取和制药领 域的应用研究, 推动相关产业的 发展和升级。
促进中药现代化:酶工程技术的引入可以推动中药生产工艺的现代化升级,提高中药产业的科技 含量和竞争力,促进中药现代化进程。
酶工程技术对中药产业发展的影响
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提高中药提取效率:酶工 程技术能够通过酶的催化 作用,加速中药有效成分 的提取过程,提高提取效
率,降低生产成本。
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优化中药品质:酶工程技 术可以通过定向修饰和改 造酶,提高酶的稳定性和 活性,从而提高中药有效 成分的提取率和纯度,优
酶工程技术对中药现代化的推动作用
提高中药提取效率:酶工程技术能够高效地分解和转化植物细胞壁,释放出更多的有效成分,从 而提高中药提取效率。
降低生产成本:酶工程技术可以降低中药生产过程中的能耗和物耗,从而降低生产成本,提高经 济效益。
优化中药品质:酶工程技术可以通过控制酶的活性和浓度等参数,实现对中药有效成分的定向提 取和纯化,从而提高中药品质。
第四章__酶工程原理及其在食品工业中的应用详解

(2)离子吸附法。通过离子效应,将酶分子固定到 含有离子交换基团的固相载体上。 常见的载体:DEAE-纤维素、 DEAE-葡聚糖凝胶、 CM-纤维素、DOWEX-50等。 优点:操作简单,处理条件温和,能得到酶活回收 率较高的固定化酶。 缺点:酶与载体的结合力较弱,当离子强度高、缓 冲液种类或pH值发生变化时,酶容易脱落。
酶工程一般工艺流程示意图
胞外酶
胞内酶 菌种→基因改造→发酵→发酵酶液→预处理→细胞分离→细 胞破壁→碎片分离→提取→精制→酶制剂及其改造 酶制剂 ↓ 原料→前处理→杀菌→酶反应器→反应液→产品提取→成品
(二)酶工程的发展历程 1.20世纪50~60年代早期的酶工程技术,主要是从 动物、植物和微生物原料中提取、分离、纯化制造各种 酶制剂,并将其应用于化工、食品和医药等工业领域。 2.20世纪70年代后期,酶的固定化技术取得了突破, 使固定化酶、固定化细胞、生物反应器与生物传感器等 酶工程技术迅速获得应用。 3.目前,各种酶工程技术已用于制造多种精细化工 产品和医药产品,并且在食品工业、化学检测和环境保 护等各个领域中得到了有效的应用。
(二)非机械破碎法 1.酶溶法 加酶法:常用的有溶菌酶、蛋白酶、糖苷酶等,它们 对细胞壁或细胞膜进行酶解,使细胞破碎。 自溶法:在微生物生长代谢过程中,控制一定条件, 诱发微生物产生少量的溶胞酶或激发自身溶胞酶的活力, 以达到细胞自溶的目的。 2.化学渗透法 用有机溶剂、变性剂、表面活性剂、抗生素或金属 螯合物等处理,使细胞壁或膜的通透性(渗透性)改变, 从而使胞内物质有选择地渗透出来。
(三)根据酶分子电荷性质的方法 1.离子交换层析 根据被分离物质与分离介质(离子交换剂)间异种电 荷的静电引力的不同来进行物质分离的。不同离子交换剂 上的可解离基团对各种离子的亲和力不同,而使不同物质 分离。 离子交换剂根据活性基团的性质分为阳离子交换剂和 阴离子交换剂。酶具有两性性质,可用阳离子交换剂,也 可用阴离子交换剂进行酶的分离纯化。
酶工程实验报告一

酶工程实验报告一一、实验目的本次酶工程实验的主要目的是通过实际操作,深入了解酶的性质、作用机制以及酶的分离纯化和活性测定方法。
同时,培养我们的实验操作技能、观察分析能力和科学思维方法,为今后从事相关领域的研究和工作打下坚实的基础。
二、实验原理酶是一种具有生物催化功能的蛋白质或 RNA 分子。
它们能够在温和的条件下高效地催化各种化学反应,具有高度的特异性和催化效率。
本实验中所涉及的酶主要是蛋白酶和淀粉酶。
蛋白酶能够水解蛋白质中的肽键,将蛋白质分解为小分子肽和氨基酸。
其活性可以通过测定水解产物的生成量或底物的消耗量来进行评估。
淀粉酶能够水解淀粉分子中的α-1,4 糖苷键,将淀粉分解为麦芽糖和葡萄糖等小分子物质。
其活性通常通过测定淀粉的水解程度来确定,常用的方法是碘量法。
酶的分离纯化是基于酶与杂质在物理化学性质上的差异,如溶解度、分子大小、电荷性质等,采用一系列的分离技术,如沉淀、层析、电泳等,逐步去除杂质,获得高纯度的酶。
三、实验材料与设备1、实验材料蛋白酶提取液淀粉酶提取液酪蛋白淀粉溶液福林酚试剂碘液其他化学试剂2、实验设备离心机分光光度计恒温水浴锅移液器电泳仪层析柱四、实验步骤制备酪蛋白底物溶液:称取一定量的酪蛋白,用氢氧化钠溶液溶解,调节 pH 至适宜值,定容备用。
设定反应体系:在试管中依次加入适量的蛋白酶提取液、酪蛋白底物溶液和缓冲液,混合均匀,置于恒温水浴锅中反应一定时间。
终止反应:反应结束后,加入三氯乙酸溶液终止反应。
测定吸光度:离心去除沉淀,取上清液,加入福林酚试剂显色,在分光光度计上测定吸光度。
计算蛋白酶活性:根据标准曲线计算出反应生成的酪氨酸量,从而计算出蛋白酶的活性。
2、淀粉酶活性的测定制备淀粉溶液:称取一定量的淀粉,用缓冲液溶解,加热糊化,冷却后定容备用。
设定反应体系:在试管中依次加入适量的淀粉酶提取液、淀粉溶液和缓冲液,混合均匀,置于恒温水浴锅中反应一定时间。
终止反应:反应结束后,加入碘液终止反应。
酶工程的设计原理

酶工程的设计原理
酶工程的设计原理是根据酶的结构和功能特点,通过改变酶的基因序列或者进行蛋白工程,使得酶的活性、稳定性、特异性和抗性等性质得到改良和提高。
酶工程的设计原理主要包括以下几个方面:
1. 底物结合位点的改变:通过改变酶的基因序列,可以在底物结合位点引入改变酶的底物特异性,使其能够与新的底物结合并催化反应。
2. 催化活性的提高:酶的催化活性可以通过点突变、插入、删除等方式进行改变。
这些改变可以使酶的活性得到提高,提高催化效率。
3. 热稳定性的提高:一些酶在高温和其他极端条件下容易失活。
通过改变酶的结构或者引入保护性蛋白质,可以提高酶的热稳定性,使其在恶劣条件下能够保持活性。
4. pH稳定性的提高:酶在不同pH条件下的活性也有差异。
通过改变酶的氨基酸序列,可以改变其在不同pH条件下的活性和稳定性。
5. 抗抑制性的提高:一些酶容易受到底物和产物的抑制作用。
通过改变酶的结构和活性位点,可以降低酶受到抑制的程度,提高酶的抗抑制能力。
总的来说,酶工程的设计原理是通过对酶的结构和功能进行改变,以达到提高酶的活性、稳定性和特异性的目的。
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酶工程的原理及发展概述:在生命活动中,构成新陈代谢以及生物体内的一切化学变化都是在酶的催化作用下进行的,可以说没有酶生命就不能进行下去。
没有两个主要的特点:1,强大的催化能力;2,高度的专一性。
酶的催化反应速率比其他相似的非酶催化反应速率高1010~1014倍,换句话说,5秒内能完成的反应,若无酶时则需要1500年才能完成。
酶的高度转一性催化机制可以用“锁和钥匙模型”来解释。
由于酶分子的空间结构,可以使酶分子形成特定形状的空穴,成为活性中心,犹如钥匙和锁一样发生催化反应。
关键字:蛋白质维生素氨基酸脂肪酸固醇脂类半乳聚糖矿物质生物催化剂荷尔蒙内切酶○酶工程的介绍:酶既可以催化一个反应的正反应,也可以催化其逆反应,但用上述内容就无法解释,而可以用“诱导契合模型”说明之。
所谓的酶工程就是指酶制剂在工业上的大规模生产及利用。
由于美不但广泛存在于动植物组织细胞中,而且也存在于微生物细胞中和他的培养基中,可通过各种理化反应方法把它提取出来,制成纯净的酶制剂,这种酶制剂保存了他的生物催化特性。
不同种类的酶制剂可以借不同种类的微生物来制取。
某些不同种类的微生物热可以生产出同一种酶制剂。
酶工程的主要研究内容有:酶的制备,酶和细胞的固定化,酶反应器的设计和放大,反应条件的设计和优化等。
酶工程的主要任务是:通过预先设计,经过人工操作加以控制,从而大量获得生产实践所需要的酶,并通过各种方法保持酶的稳定性,发挥其最大的催化功能。
酶催化反应的基本步骤:酶制剂得到后,应用酶的固定化技术将酶制剂精制成固态酶(固态),然后将其组装在特殊设计的器件当中(叫做生物反应器)中,利用这种反应器将原料(底物)转化为人类所需要的产品。
例如,将天冬酰胺酶提纯,做成反应器,以富马酸为底物,则可以将富马酸转变成天冬氨酸,转化率达到百分之九十五以上,反应产物几乎是纯品。
酶工程的实质:把酶或细胞直接应用于生物工程和化学工业的反应系统,其特点是转化率高,产品回收和提纯工艺简单,节约能源。
酶工程的应用前景非常广阔。
酶工程就是将酶或者微生物细胞,动植物细胞,细胞器等在一定的生物反应装置中,利用酶所具有的生物催化功能,借助工程手段将相应的原料转化成有用物质并应用于社会生活的一门科学技术。
它包括酶制剂的制备,酶的固定化,酶的修饰与改造及酶反应器等方面内容。
酶工程的应用,主要集中于食品工业,轻工业以及医药工业中。
酶是一种在生物体内具有新陈代谢摧化剂作用的蛋白质,酶工程就是利用酶摧化的作用。
是指利用酶或者微生物细胞,动植物细胞,细胞器等,借助酶所具有推动功能,通过工程学的手段向人类提供产品或向社会提供服务的一门科学技术。
酶工程的应用,主要集中于食品工业,轻工业以及医药工业中。
酶的特性及机理:1、酶与无机催化剂比较:⑴相同点:①、改变化学反应速率,本身几乎不被消耗;②、只催化已存在的化学反应;③、加快化学反应速率,缩短达到平衡时间,但不改变平衡点;④、降低活化能,使化学反应速率加快。
5)都会出现中毒现象。
⑵、不同点:①、高效性:酶的催化效率比无机催化剂更高,使得反应速率更快;②、专一性:一种酶只能催化一种或一类底物,如蛋白酶只能催化蛋白质水解成多肽;③、多样性:酶的种类很多,大约有4000多种;④、温和性:是指酶所催化的化学反应一般是在较温和的条件下进行的。
⑤、活性可调节性:包括抑制剂和激活剂调节、反馈抑制调节、共价修饰调节和变构调节等。
一般来说,动物体内的酶最适温度在35到40摄氏度之间,植物体内的酶最适温度在40-50摄氏度之间;细菌和真菌体内的酶最适温度差别较大,有得酶最适温度可高达70摄氏度。
动物体内的酶最适PH大多在6.5-8.0之间,但也有例外,如胃蛋白酶的最适PH为1.5,植物体内的酶最适PH大多在4.5-6.5之间。
酶的这些性质使细胞内错综复杂的物质代谢过程能有条不紊地进行,使物质代谢与正常的生理机能互相适应.若因遗传缺陷造成某个酶缺损,或其它原因造成酶的活性减弱,均可导致该酶催化的反应异常,使物质代谢紊乱,甚至发生疾病.因此酶与医学的关系十分密切。
2、酶的发现1773年,意大利科学家斯帕兰扎尼(1729—1799)设计了一个巧妙的实验:将肉块放入小巧的金属笼中,然后让鹰吞下去。
过一段时间他将小笼取出,发现肉块消失了。
于是,他推断胃液中一定含有消化肉块的物质。
但是什么,他不清楚。
1836年,德国科学家施旺(1810—1882)从胃液中提取出了消化蛋白质的物质。
解开胃的消化之谜。
1926年,美国科学家萨姆钠(1887—1955)从刀豆种子中提取出脲酶的结晶,并通过化学实验证实脲酶是一种蛋白质。
20世纪30年代,科学家们相继提取出多种酶的蛋白质结晶,并指出酶是一类具有生物催化作用的蛋白质。
20世纪80年代,美国科学家切赫(1947—)和奥特曼(1939—)发现少数RNA也具有生物催化作用。
3、酶的活力酶活力单位:酶活力单位的量度。
1961年国际酶学会议规定:1个酶活力单位是指在特定条件(25摄氏度,其它为最适条件)下,在1min 内能转化1μmol底物的酶量,或是转化底物中1μmol的有关基团的酶量。
比活:每分钟每毫克酶蛋白在25摄氏度下转化的底物的微摩尔数。
比活是酶纯度的测量。
活化能:将1mol反应底物中所有分子由基态转化为过度态所需要的能量。
活性部位:酶中含有底物结合部位和参与催化底物转化为产物的氨基酸残基部分。
活性部位通常位于蛋白质的结构域或亚基之间的裂隙或是蛋白质表面的凹陷部位,通常都是由在三维空间上靠得很进的一些氨基酸残基组成。
5、酶活调节竞争性抑制作用:通过增加底物浓度可以逆转的一种酶抑制类型。
竞争性抑制剂通常与正常的底物或配体竞争同一个蛋白质的结合部位。
这种抑制使Km增大而υmax不变。
非竞争性抑制作用: 抑制剂不仅与游离酶结合,也可以与酶-底物复合物结合的一种酶促反应抑制作用。
这种抑制使Km不变而υmax变小。
反竞争性抑制作用: 抑制剂只与酶-底物复合物结合而不与游离的酶结合的一种酶促反应抑制作用。
这种抑制使Km和υmax都变小但υmax/Km不变。
很大一类复杂的蛋白质物质,在促进可逆反应(如水解和氧化)方面起着像催化剂一样的作用。
在许多工业过程中是有用的(如发酵、皮革鞣制及干酪生产)酶是一种有机的胶状物质,由蛋白质组成,对于生物的化学变化起催化作用,发酵就是靠它的作用:~原。
三、几种特殊酶的介绍1、同工酶同工酶的概念:即同工酶是一类催化相同的化学反应,但酶蛋白的分子结构、理化性质和免疫原性各不相同的一类酶。
它们存在于生物的同一种族或同一个体的不同组织,甚至在同一组织、同一细胞的不同细胞器中。
至今已知的同工酶已不下几十种,如己糖激酶,乳酸脱氢酶等,其中以乳酸脱氢酶研究得最为清楚。
人和脊柱动物组织中,有五种分子形式,它们催化下列相同的化学反应:五种同工酶均由四个亚基组成。
LDH的亚基有骨骼肌型(M型)和心肌型(H型)之分,两型亚基的氨基酸组成不同,由两种亚基以不同比例组成的四聚体,存在五种LDH形式.M、H亚基的氨基酸组成不同,这是由基因不同所决定。
五种LDH中的M、H亚基比例各异,决定了它们理化性质的差别.通常用电冰法可把五种LDH分开,LDH1向正极泳动速度最快,而LDH5泳动最慢,其它几种介于两者之间,依次为LDH2、LDH3和LDH4,不同组织中各种LDH所含的量不同,心肌中以LDHl及LDH2的量较多,而骨骼肌及肝中LDH5和LDH4为主.不同组织中LDH同工酶谱的差异与组织利用乳酸的生理过程有关.LDH1和LDH2对乳酸的亲和力大,使乳酸脱氢氧化成丙酮酸,有利于心肌从乳酸氧化中取得能量。
LDH5和LDH4对丙酮酸的亲和力大,有使丙酮酸还原为乳酸的作用,这与肌肉在无氧酵解中取得能量的生理过程相适应.在组织病变时这些同工酶释放入血,由于同工酶在组织器官中分布差异,因此血清同工酶谱就有了变化。
故临床常用血清同工酶谱分析来诊断疾病。
2、别构酶别构酶往往是具有四级结构的多亚基的寡聚酶,酶分子中除有催化作用的活性中心也称催化位点外;还有别构位点.后者是结合别构剂的位置,当它与别构剂结合时,酶的分子构象就会发生轻微变化,影响到催化位点对底物的亲和力和催化效率。
若别构剂结合使酶与底物亲和力或催化效率增高的称为别构激活剂,反之使酶底物的r亲和力或催化效率降低的称为别构抑制剂。
酶活性受别构剂调节的作用称为别构调节作用.别构酶的催化位点与别构位点可共处一个亚基的不同部位,但更多的是分别处于不同亚基上.在后一种情况下具催化位点的亚基称催化亚基,而具别构位点的称调节亚基。
多数别构酶处于代谢途径的开端,而别构酶的别构剂往往是一些生理性小分子及该酶作用的底物或该代谢途径的中间产物或终产物。
故别构酶的催化活性受细胞内底物浓度、代谢中间物或终产物浓度的调节。
终产物抑制该途径中的别构酶称反馈抑制.说明一旦细胞内终产物增多,它作为别构抑制剂抑制处于代谢途径起始的酶,及时调整该代谢途径的速度,以适应细胞生理机能的需要。
别构酶在细胞物质代谢上的调节中发挥重要作用。
故别构酶又称调节酶。
3、修饰酶体内有些酶需在其它酶作用下,对酶分子结构进行修饰后才具催化活性,这类酶称为修饰酶。
其中以共价修饰为多见,如酶蛋白的丝氨酸,苏氨酸残基的功能基团-OH可被磷酸化,这时伴有共价键的修饰变化生成,故称共价修饰。
由于这种修饰导致酶活力改变称为酶的共价修饰调节。
体内最常见的共价修饰是酶的磷酸化与去磷酸化,此外还有酶的乙酰化与去乙酰化、尿苷酸化与去尿苷酸化、甲基化与去甲基化。
由于共价修饰反应迅速,具有级联式放大效应所以亦是体内调节物质代谢的重要方式。
如催化糖原分解第一步反应的糖原磷酸化酶存在有活性和无活性两种形式,有活性的称为磷酸化酶a,无活性的称为磷酸化酶b,这两种形式的互变就是通过酶分子的磷酸化与去磷酸化的过程4、多酶复合体与多酶体系体内有些酶彼此聚合在一起,组成一个物理的结合体,此结合体称为多酶复合体。
若把多酶复合体解体,则各酶的催化活性消失。
参与组成多酶复合体的酶有多有少,如催化丙酮酸氧化脱羧反应的丙酮酸脱氢酶多酶复合体由三种酶组成,而在线粒体中催化脂肪酸β-氧化的多酶复合体由四种酶组成。
多酶复合体第一个酶催化反应的产物成为第二个酶作用的底物,如此连续进行,直至终产物生成.多酶复合体由于有物理结合,在空间构象上有利于这种流水作业的快速进行,是生物体提高酶催化效率的一种有效措施。
体内物质代谢的各条途径往往有许多酶共同参与,依次完成反应过程,这些酶不同于多酶复合体,在结构上无彼此关联。
故称为多种酶靠非共价键相互嵌合催化连续反应的体系,称为多酶复合体(multienzyme complex)。
如参与糖酵解的11个酶均存在于胞液,组成一个多酶体系。