10生物技术蛋白质与酶工程复习题与答案.

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蛋白质与酶工程选择与解答

蛋白质与酶工程选择与解答

蛋白质与酶工程选择与解答一、选择题1.下列不属于Prion蛋白特点的是(C)A.没有核酸B.没有病毒形态C.在120℃高温及2h高压下可灭活D.病毒潜伏期长2.蛋白质工程研究的核心内容是(A)A.蛋白质结构分析B.蛋白质结构预测C.改造蛋白质D.创造新蛋白质3.蛋白质工程的最终目的是(C)A.研究蛋白质的结构组成B.创造新理论C.生产具有新性能的蛋白质D.研究蛋白质的氨基酸组成4.蛋白质分子设计中“小改”是指(B)A.对来源于不同蛋白的结构域进行拼接组装B.对已知结构的蛋白质进行少数几个残基的替换C.完全从头设计全新的蛋白质D.对蛋白质中的一个肽段进行替换5.可用于蛋白质功能分析的方法是(D)A.X射线晶体衍射技术B.圆二色谱法C.显微技术D.蛋白质芯片技术6.以下那种方法,可以方便地在溶液中研究分子结构,并且是唯一可以使试样不经受任何破坏的结构分析方法?(B)A. X射线晶体衍射技术B.核磁共振技术C.圆二色谱法D.电镜三维重构法7.以下不属于根据分子大小不同进行蛋白质纯化的方法的是(D)A.超滤B.透析C.密度梯度离心D.盐析8.Western-Blotting是对(B)进行印迹分析的方法。

A.RNAB.单向电泳后的蛋白质分子C.DNAD.双向电泳后的蛋白质分子9.以下不属于酶的固定化方法中非化学结合法的是(A)A.交联法B.结晶法C.吸附法D.离子结合法10.最常用的交联剂是(A)A.戊二醛B.聚乙二醇C.异氰酸酯D.双重氮联苯胺11.世界上生产规模最大,应用最成功的固定化酶是(C)A.氨基酰酶B.天冬酰胺酶C.葡萄糖异构酶D.胆固醇氧化酶12.抗体酶是( A )A、具有催化活性的抗体分子B、具有催化活性的RNA分子C、催化抗体水解的酶D、催化抗体生成的酶13.以天然蛋白质或酶为母体,用化学或生物学方法引进适当的活性部位或催化基团,或改变其结构而形成一种新的人工酶是(C)A.胶束酶B.肽酶C.半合成酶D.抗体酶14.制备游离酶可选用的酶反应器是(B)A.填充床反应器B.喷射式反应器C.连续搅拌罐反应器D.流化床反应器15.金属离子置换修饰是将(D)中的金属离子用另一种金属离子置。

酶工程期末试题及答案

酶工程期末试题及答案

酶工程期末试题及答案一、选择题(每题2分,共20分)1. 酶工程中常用的酶固定化方法不包括以下哪种?A. 吸附法B. 共价结合法C. 包埋法D. 离心法答案:D2. 下列哪项不是酶的催化特性?A. 高效性B. 专一性C. 可逆性D. 需要高温答案:D3. 酶工程中,酶的来源不包括以下哪种?A. 植物B. 动物C. 微生物D. 无机物答案:D4. 酶的活性中心通常包含哪些元素?A. 金属离子B. 氨基酸残基C. 核酸D. 糖类答案:B5. 下列关于酶工程的描述,错误的是?A. 酶工程是生物技术的一部分B. 酶工程可以提高酶的稳定性C. 酶工程可以提高酶的催化效率D. 酶工程不能改变酶的催化特性答案:D6. 酶工程中,酶的固定化技术主要用于什么目的?A. 提高酶的稳定性B. 增加酶的催化效率C. 便于酶的回收和重复使用D. 以上都是答案:D7. 下列哪种酶在工业生产中应用最广泛?A. 淀粉酶B. 蛋白酶C. 纤维素酶D. 脂肪酶答案:A8. 酶的催化效率通常比无机催化剂高多少倍?A. 10倍B. 100倍C. 1000倍D. 10000倍答案:D9. 酶的专一性是由什么决定的?A. 酶的活性中心B. 酶的氨基酸序列C. 酶的三维结构D. 酶的浓度答案:A10. 酶工程中,酶的催化反应通常在什么条件下进行?A. 高温B. 高压C. 常温常压D. 真空答案:C二、填空题(每题2分,共20分)1. 酶工程是通过___________和___________技术,对酶进行改造和应用的一门学科。

答案:基因工程、蛋白质工程2. 酶的活性中心通常由___________和___________组成。

答案:氨基酸残基、金属离子3. 酶的催化作用是通过___________和___________来实现的。

答案:降低反应活化能、提供反应途径4. 酶工程中,酶的固定化方法主要有吸附法、___________和___________。

10生物技术蛋白质与酶工程复习题与答案

10生物技术蛋白质与酶工程复习题与答案

一. 名词解释1.生物酶工程又称高级酶工程它是酶学与现代分子生物学技术相结合的产物。

2.蛋白质工程蛋白质工程就是运用蛋白质结构功能和分子遗传学知识,从改变或合成基因入手,定向地改造天然蛋白质或设计制造新的蛋白质。

3.多核糖体把细胞放在极其温和的条件下处理,就能得到几个到几十个核糖体在一条mRNA上结合起来的形态4.固定化酶水溶性酶经物理或化学方法处理后,成为不溶于水的但仍具有酶活性的一种酶的衍生物。

在催化反应中以固相状态作用于底物5.酶反应器以酶或固定化酶为催化剂进行酶促反应的装置。

6.酶工程又叫酶技术,是酶制剂的大规模生产和应用的技术7.生物传感器对生物物质敏感并将其浓度转换为电信号进行检测的仪器。

8. motif (模体)指的是蛋白质分子结构中介于二级结构与三级结构之间的一个结构层次,又称超二级结构9. domain功能域生物大分子中具有特异结构和独立功能的区域,特别指蛋白质中这样的区域10.PDB蛋白质数据库(Protein Data Bank,PDB)是一个生物大分子,11. DNA shuffling体外同源重组技术。

通过改变单个基因原有的核苷酸序列创造新基因,并赋予产物以新功能。

12.生物催化剂是指生物反指应过程中起催化作用的游离或固定化细胞各游离或固定化酶的总称13.必需基团有的基团既在结合中起作用,又在催化中起作用,所以常将活性部位的功能基团统称为必需基团(essential group)14.活性中心。

酶的活性中心是酶与底物结合并发挥其催化作用的部位。

15.有性PCR dna改组16.DNA改组通过改变单个基因原有的核苷酸序列创造新基因,并赋予产物以新功能。

17.免疫传感器偶联抗原/抗体分子的生物敏感膜与信号转换器组成的,基于抗原抗体特异性免疫反应的一种生物传感器。

18.易错PCR是从酶的单一基因出发,在改变反应条件的情况下进行聚合酶链反应,使扩增得到的基因出现碱基配对错误,从而引起基因突变的技术过程。

蛋白质与酶工程复习题

蛋白质与酶工程复习题

蛋⽩质与酶⼯程复习题1. 名词解释1.⽣物酶⼯程:在化学酶⼯程基础上发展起来的、酶学与现代分⼦⽣物学技术相结合的产物。

其主要研究内容为⽤基因⼯程技术⼤量⽣产酶、⽤蛋⽩质⼯程技术定点改变酶的结构基因、设计新的酶结构基因⽣产新酶。

2.蛋⽩质⼯程:是以蛋⽩质空间结构及其与⽣物学功能的关系为基础,通过分⼦设计和由设计结果所指导的特定的基因修饰,⽽实现的对天然蛋⽩质的定向改造。

3.多核糖体:在蛋⽩质合成过程中,同⼀条mRNA分⼦能够同多个核糖体结合,同时合成若⼲条蛋⽩质多肽链,结合在同⼀条mRNA上的核糖体就称为多聚核糖体4.固定化酶:固定在载体上并在⼀定的空间范围内进⾏催化反应的酶。

5.酶反应器:以酶或固定化酶作为催化剂进⾏酶促反应的装置称为酶反应器。

以尽可能低的成本,按⼀定的速度由规定的反应物制备特定的产物。

6.酶⼯程:将酶学理论与化⼯技术相结合,研究酶的⽣产和应⽤的⼀门新的技术性学科。

包括酶制剂的制备,酶的固定化,酶的修饰与改造及酶反应器等⽅⾯内容。

7.⽣物传感器:是⼀类由⽣物学、医学、电化学、光学、热学及电⼦技术等多学科相互渗透⽽成长起来的分析检测装置。

具有选择性⾼、分析速度快、操作简单、价格低廉等特点。

8. motifs(超⼆级结构):相邻的⼆级结构单元组合在⼀起,彼此相邻相互作⽤,排列形成规则的、在空间上能够辨认的⼆级结构组合体,并充当三级结构的构件,成为超⼆级结构,介于⼆级结构与结构域之间的结构层次。

10. domains(结构域):多肽链在超⼆级结构的基础上进⼀步折叠成紧密的近乎球状的结构,这种结构称为结构域12.PDB:蛋⽩质数据库:汇集已知蛋⽩质各种参数的集合。

13. DNA shuffling:(⼜叫有性PCR):将DNA拆散后重排,它是模仿⾃然进化的⼀种DNA体外随机突变⽅法。

15.⽣物催化剂:游离或活细胞的总称。

包括从⽣物体,主要是微⽣物细胞中提取出来的游离酶或经固定化技术加⼯后的酶。

生物工程—蛋白质与酶工程复习题

生物工程—蛋白质与酶工程复习题

生工13级蛋白质与酶工程复习题二、分析与应用题1.酶在制造业、食品工业、制药、实验等众多领域有许多用处,但游离酶因生产成本高、不易回收、稳定性差,有时与产物混杂难以分离,用何种具体方法可以解决这些问题。

固定化酶:用物理或化学手段定位在限定的空间区域,并使其保持催化活性,可重复利用的酶。

固定化细胞:将具有一定生理功能的生物细胞(如微生物细胞、植物细胞或动物细胞等),用一定的方法将其固定,作为固体生物催化剂而加以利用的一门技术。

2.目前固定化酶技术常用吸附法、包埋法、共价偶联法、交联法等多种方法,分析比较各自的优缺点。

1).吸附法:依据带电的酶或细胞和载体之间的静电作用,使酶吸附于惰性固体的表面或离子交换剂上。

优点:条件温和,操作简便,酶活力损失少。

缺点:结合力弱,易解吸附。

(2)共价偶联法:借助共价键将酶的活性非必需侧链基团和载体的功能基团进行偶联。

优点:酶与载体结合牢固,不会轻易脱落,可连续使用。

缺点:反应条件较激烈,易影响酶的空间构象而影响酶的催化活性(3).交联法:借助双功能试剂使酶分子之间发生交联的固定化方法。

优点:反应条件激烈,酶分子多个基团被交联,酶活力损失大。

缺点:制备的固定化酶颗粒较小,使用不便(4)包埋法(entrapment):将酶用物理的方法包埋在各种载体(高聚物)内。

优点:不与酶蛋白氨基酸残基反应,很少改变酶的高级结构,酶活回收率高。

缺点:只适合作用于小分子底物和产物的酶3.分析模拟酶与天然酶的不同之处及优点,分析说明模拟酶为什么可以进行一些催化反应?天然酶的特点:优点:温和条件下,高效、专一地催化某些化学反应;应用于糖生物工业、能源工业、饮料产业以及医药行业。

不足:对热敏感、稳定性差、分离回收不易、来源有限,限制了天然酶的规模开发和利用。

模拟酶:是用有机化学方法设计和合成一些较天然酶更简单的非蛋白质分子,以这些分子作为模型来模拟酶对其作用底物的结合和催化过程。

优点:既有酶催化的高效性,又能克服酶的不稳定性。

蛋白质与酶工程题目

蛋白质与酶工程题目

蛋白质与酶工程试题---生工2班1.名词说明(每题3分,共30分)1.蛋白质工程:以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系为基础,通过有操纵的修饰和合成,对现有蛋白质加以定向改造,设计、构建并最终生产出性能比自然界存在的蛋白质加倍优良、加倍符合人类社会需要的新型蛋白质。

Engineering(酶工程):工业上有目的地设计必然的反映器和反映条件,利用酶的催化功能,在常温常压下催化化学反映,生产人类需要的产品或效劳于其它目的地一门应用技术。

3.固定化酶:固定化酶(immobilized enzyme),是用物理或化学方式处置水溶性的酶使之变成不溶于水或固定于固相载体的但仍具有酶活性的酶衍生物。

4.分子伴娘:是一类彼此之间有关系的蛋白,它们的功能是帮忙其他含多肽结构的物质在体内进行正确的非共价的组装,而且不是组装完成的结构在发挥其正常的生物功能是的组成部份。

5.凝胶过滤:又叫分子排阻层析,分子筛层析,在层析柱中填充分子筛,加入待纯化样品再用适当缓冲液淋洗,样品中的分子通过必然距离的层析柱后,按分子大小前后顺序流出的,彼此分开的层析方式。

6.离子互换层析:利用离子互换剂作为载体这些载体在必然条件下带有必然的电荷,当带相反电荷的分子通过时,由于静电引力就会被载体吸附,这种分离方式叫离子互换层析。

7.酶的分子修饰:通过各类方式使酶分子的结构发生某些改变,从而改变酶的某些特性和功能的技术进程称为酶分子修饰。

即:在体外将酶分子通过人工的方式与一些化学基团(物质),专门是具有生物相容性的物质,进行共价连接,从而改变酶的结构和性质。

8.半抗原:具有抗原性,但只有与载体结合才能引发机体产生免疫反映的抗原物质。

9.易错 PCR(error-prone PCR):通过改变PCR反映条件,使扩增的基因显现少量碱基错配,从而致使目的基因的随机突变。

10.酶反映器:是利用生物化学原理使酶完成催化作用的装置,他为酶促反映提供适合的场所和最正确的反映条件,使底物最大限度的转化为物。

蛋白质与酶工程_西北工业大学中国大学mooc课后章节答案期末考试题库2023年

蛋白质与酶工程_西北工业大学中国大学mooc课后章节答案期末考试题库2023年

蛋白质与酶工程_西北工业大学中国大学mooc课后章节答案期末考试题库2023年1.在蛋白质分子设计中,为了提高蛋白质的热稳定性,可以采用下列哪种措施()?答案:2.下列为常用的真核蛋白质表达载体的是()。

答案:3.当溶液的pH值小于蛋白质的等电点时,应该用阳离子交换层析技术来纯化蛋白。

答案:正确4.水解酶在有机溶剂中不能催化其逆反应。

答案:错误5.包埋法不适用于底物或产物分子很大的酶答案:正确6.膜反应器,是()的酶反应器。

答案:将酶催化反应与半透膜分离组合在一起7.若高浓度底物对酶有抑制作用,在选择搅拌式反应器时,不应该选用哪种操作方式?答案:分批式8.下列哪种反应器不适合游离酶的催化反应()。

答案:填床式反应器9.DNA重排技术将2种以上同源基因中的正突变结合在一起,通过DNA的碱基序列的____,形成新的突变基因。

答案:重新排布10.酶定向进化是在体外进行酶基因的_______,然后在人工控制条件的特殊环境下进行_______,而得到具有优良催化特性的酶的突变体。

答案:随机突变、定向选择11.有机介质中酶催化的最适水含量是()。

答案:酶催化反应速度达到最大时的含水量12.有机溶剂极性的强弱可以用极性系数lgP表示,极性系数越大,表明其()。

答案:极性越弱,对酶活性的影响就越小13.当载体带正电时,固定化酶的最适pH()。

答案:比游离酶的最适pH低一些14.酶传感器是由()与能量转换器结合的传感装置。

答案:固定化酶15.关于结合固定化技术,对酶分子中可反应的基团有特殊要求的是()。

答案:共价键结合法16.荧光共振能量转移技术可提供活细胞内的特定蛋白间相互作用的时空信息,可实时动态观测蛋白质之间的相互作用。

答案:正确17.绿色荧光蛋白一种可发光的蛋白质,其发光的前提是体系中存在一定浓度的钙离子。

答案:错误18.体外定向进化技术又称分子进化,有望创造出自然界所没有的而且具有优良性质的新蛋白质。

答案:正确19.蛋白质侧链基团化学修饰的主要功能基团是氨基、羧基、胍基。

酶工程考试复习题及答案

酶工程考试复习题及答案

酶工程考试复习题及答案一、选择题1. 酶工程是指对酶进行改造和利用的科学,其主要目的不包括以下哪一项?A. 提高酶的稳定性B. 增强酶的催化效率C. 改变酶的底物专一性D. 降低酶的生产成本答案:D2. 在酶工程中,下列哪一项技术不属于酶的改造方法?A. 基因工程B. 蛋白质工程C. 酶的固定化D. 酶的纯化答案:D3. 固定化酶技术的优点不包括以下哪一项?A. 可重复使用B. 提高酶的稳定性C. 便于酶的分离和纯化D. 增加酶的底物专一性答案:D二、填空题4. 酶工程中常用的酶固定化方法包括_______、_______和_______。

答案:吸附法、包埋法、共价结合法5. 酶的催化效率通常用_______来表示,它是酶催化反应速率与_______的比值。

答案:kcat、底物浓度三、简答题6. 简述酶工程在工业生产中的应用。

答案:酶工程在工业生产中的应用主要包括食品加工、制药、生物燃料生产、环境保护等领域。

通过酶的改造和固定化技术,可以提高生产效率,降低成本,实现绿色生产。

7. 描述酶的改造方法之一——蛋白质工程的基本过程。

答案:蛋白质工程的基本过程包括:(1) 确定目标酶的氨基酸序列;(2) 设计预期的氨基酸序列变化;(3) 通过基因突变或基因合成技术实现氨基酸序列的改变;(4) 表达改造后的酶蛋白;(5) 评估改造酶的性能,如稳定性、催化效率等。

四、论述题8. 论述固定化酶在生物反应器中的应用及其优势。

答案:固定化酶在生物反应器中的应用主要包括连续流反应器和批式反应器。

固定化酶的优势包括:(1) 酶的稳定性提高,延长使用寿命;(2) 易于从反应体系中分离,便于回收和再利用;(3) 可以提高底物转化率,减少副反应;(4) 有助于实现工业化大规模生产。

五、案例分析题9. 某制药公司希望通过酶工程提高一种药物前体的合成效率。

请分析可能采取的策略,并讨论这些策略的潜在优势和局限性。

答案:可能采取的策略包括:(1) 利用基因工程技术改造酶的基因,提高酶的催化效率;(2) 通过蛋白质工程技术改变酶的结构,提高其稳定性和底物专一性;(3) 采用固定化技术,使酶在反应过程中易于分离和重复使用。

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一. 名词解释1.生物酶工程又称高级酶工程它是酶学与现代分子生物学技术相结合的产物。

2.蛋白质工程蛋白质工程就是运用蛋白质结构功能和分子遗传学知识,从改变或合成基因入手,定向地改造天然蛋白质或设计制造新的蛋白质。

3.多核糖体把细胞放在极其温和的条件下处理,就能得到几个到几十个核糖体在一条mRNA上结合起来的形态4.固定化酶水溶性酶经物理或化学方法处理后,成为不溶于水的但仍具有酶活性的一种酶的衍生物。

在催化反应中以固相状态作用于底物5.酶反应器以酶或固定化酶为催化剂进行酶促反应的装置。

6.酶工程又叫酶技术,是酶制剂的大规模生产和应用的技术7.生物传感器对生物物质敏感并将其浓度转换为电信号进行检测的仪器。

8. motif(模体指的是蛋白质分子结构中介于二级结构与三级结构之间的一个结构层次,又称超二级结构9. domain功能域生物大分子中具有特异结构和独立功能的区域,特别指蛋白质中这样的区域10.PDB蛋白质数据库(Protein Data Bank,PDB)是一个生物大分子,11. DNA shuffling体外同源重组技术。

通过改变单个基因原有的核苷酸序列创造新基因,并赋予产物以新功能。

12.生物催化剂是指生物反指应过程中起催化作用的游离或固定化细胞各游离或固定化酶的总称13.必需基团有的基团既在结合中起作用,又在催化中起作用,所以常将活性部位的功能基团统称为必需基团(essential group14.活性中心。

酶的活性中心是酶与底物结合并发挥其催化作用的部位。

15.有性PCR dna改组16.DNA改组通过改变单个基因原有的核苷酸序列创造新基因,并赋予产物以新功能。

17.免疫传感器偶联抗原/抗体分子的生物敏感膜与信号转换器组成的,基于抗原抗体特异性免疫反应的一种生物传感器。

18.易错PCR是从酶的单一基因出发,在改变反应条件的情况下进行聚合酶链反应,使扩增得到的基因出现碱基配对错误,从而引起基因突变的技术过程。

19.酶化学修饰通过对酶蛋白分子的主链进行“切割”、“剪切”以及在侧链上进行化学修饰来达到改造酶分子的目的。

20.抗体酶通过改变抗体中与抗原结合的微环境,并在适当的部位引入相应的催化基团,所产生的具有催化活性的抗体。

二.简答1.细胞固定化方法有哪些细胞固定化:吸附法、包埋法。

2.酶的分子修饰方法主要有哪些金属离子置换修饰、大分子结合修饰、侧链基团修饰、肽链有限水解修饰、核苷酸链剪切修饰、氨基置换修饰、核苷酸置换修饰、物理修饰。

3.遗传密码的特点有哪些。

1连续性 2不重叠性 3通用性 4简并性 5有起始密码子和终止密码子4. 酶的系统命名法根据酶所催化反应的类型将酶分为哪些类型。

按照酶促反应的性质,酶可为分6大类,其排序如下:(1)氧化还原酶类:催化底物进行氧化还原反应的酶类。

(2)转移酶类:催化底物之间进行某些基团的转移或交换的酶类。

(3)水解酶类:催化底物发生水解的酶类。

(4)裂解酶类(或裂合酶类):催化从底物移去一个基团并留下双键的反应或其逆反应的酶类。

(5)异构酶类:催化各种同分异构体之间相互转化的酶类。

(6)合成酶类:催化两分子底物合成为一分子化合物,同时偶联有ATP的磷酸键断裂释能的酶类。

5.分子伴娘有哪些特点?对靶蛋白不具有高度的专一性、催化效率很低、阻止肽链错误折叠6.蛋白质工程的类型有哪几种?从头设计:完全按照人的意志设计合成蛋白质;定点突变与局部修饰:在已有的蛋白质基础上,只进行局部的修饰7.酶的生产方法有哪些?提取分离法、生物合成法、化学合成法8.图示蛋白质工程的基本程序。

预期蛋白质功能设计预期蛋白质的结构->推测应有的氨基酸序列找到应有的脱氧核苷酸序列(合成基因)9.改造天然蛋白质的必要性有哪些?生产发展的需要(1人类饮食需要必需氨基酸含量高全的的蛋白质、2预防疾病需要大量人体本身就有的酶,激素抗体,调节因子、3发酵工程需要耐热,耐酸碱高活性的酶制剂4农业需要高蛋白抗虫病,耐盐碱耐干旱的新品种5材料工业需要高贮存信息能力高强度无污染的生物材料。

)基础研究(1、蛋白质合成机理,蛋白质折叠机理蛋白质序列语言的语法研究2、生命起源与蛋白质分子起源的进化,生物的寿命与蛋白质代谢的研究)。

10.酶的生物合成模式有哪些?酶生物合成的模式分为4种类型。

即同步合成型,延续合成型,中期合成型和滞后合成型11.分子伴娘的主要功能有哪些。

主要功能:(1)蛋白质的生物合成:蛋白质N端在C端之前合成,如果合成的速度比折叠速度慢,N端在C端合成之前会与其本身或其它分子发生相互作用,在分子伴娘的作用下,可避免错误的快速折叠发生。

(2)蛋白质的转运:新合成蛋白质出入各种细胞器的跨膜转运,通常以非折叠状态运输,定位后再折叠,在膜两侧必须有介导折叠和非折叠的分子伴娘协助。

(3)蛋白质功能的发挥:各种多聚体蛋白复合物正常功能发挥,涉及亚基与亚基的相互作用变化,亚基接触区常会短暂暴露,在分子伴娘帮助下才能形成正常功能的多聚体结构。

(4)细胞器的发生:有些多肽由胞浆核糖体合成后再进入细胞器,再与细胞器内合成的其它多肽相互作用形成有活性的多聚体结构。

新合成的蛋白亚基定位于某一细胞器之前,它们的结合倾向必须依靠分子伴娘的调节。

(5)应激反应:环境的压力常导致细胞内蛋白质变性形成失活的不溶性凝聚物。

分子伴娘在动物细胞中防止凝聚物的出现或促进凝聚物解离12.蛋白质空间结构的测定目前主要有哪两种物理的方法.x射线衍射、二维核磁共振13.易错PCR的基本原理。

通过改变pcr的条件,通常降低一种DNTP的量(降至5%-10%使PCR易于出错,达到随机突变的目的。

14.交错延伸的主要原理。

在PCR反应中把常规的退火和延伸合并为一步,并大大缩短其反应时间(55C,5S)从而只能合成出非常短的新生链,经变性的新生链再作为引物与体系内同时存在的不同模板退火而继续延伸。

此过程反复进行,直到产生完整的基因长度,结果产生间隔的含不同模板序列的新生DNA分子。

15.抗体的人源化的主要原理由于抗体同抗原结合的功能决定于抗体分子的可变区(v)同种性免疫原性决定于抗体分子的稳定区(c)如果在基因水平上把鼠源性的单克隆抗体的重链(h)和轻链(L)可变区分离出来,分别与人Ig的重链和轻链的稳定区(C)基因连接成人——鼠嵌合体的和链基因,再共转染骨髓瘤细胞,就能表达出人——鼠的嵌合抗体16.酶合成的调节机制1、酶合成的诱导2、末端产物的阻遏3、分解代谢物阻遏17.酶的必需基团与酶的活性中心的关系。

酶的活性部位的集团都是必需基团,必需基团还包括活性基团以外的对维持空间构象必需的基团。

18.结合所学知识,谈谈蛋白质工程与酶工程之间的区别与联系。

酶工程是用工程菌生产酶制剂,而没有经过由酶的功能来设计酶的分子结构,然后由酶的分子结构来确定相应基因的碱基序列等步骤。

因此,酶工程的重点在于对已存酶的合理充分利用,而蛋白质工程的重点则在于对已存在的蛋白质分子的改造。

当然,随着蛋白质工程的发展,其成果也会应用到酶工程中,使酶工程成为蛋白质工程的一部分。

19. 酶分子内部修饰有哪些方法?1、非催化活性基团的修饰2、酶蛋白主链修饰3、催化活性基团的修饰4、肽链伸展后的修饰20.蛋白质折叠假说Anfinsen的“自组装热力学假说” 多肽链的氨基酸序列包含了形成其热力学上稳定的天然构象所必需的全部信息”的“自组装学说,Ellis 于1987年提出了蛋白质折叠的“辅助性组装学说21.酶的特点有哪些高效性:催化效率比无机催化剂高许多。

专一性:每种酶只能催化一种或一类化合物的化学反应。

酶需要适宜的温度和pH值等条件:在最适宜的温度和pH下,酶的活性最高。

温度和pH偏高和偏低,酶的活性都会明显降低。

原因是过酸、过碱和高温,都能使酶分子结构遭到破坏而失去活性。

22.蛋白质的定向进化的概念及其特点属于蛋白质的非理性设计,它不需要事先理解酶的空间结构与催化机制,认为的创造特殊的进化条件,模拟自然进化机制在体外改造酶基因并定向选择出所需性质的酶。

特点:23.蛋白质二级结构有哪些类型?主要有α-螺旋、β-折叠、β-转角等几种形式,它们是构成蛋白质高级结构的基本要素24.酶反应器有哪些类型?并简要说明他们的特点.酶反应器主要有1、搅拌罐型反应器(结构简单、操作容易、传质阻力较小、反应条件容易控制)2、填充床式反应器(设备简单、操作方便、单位体积反应床的固定化酶密度大可以提高速度)3、流化床型反应器(混合均匀、传质传热效果好、温度和PH控制容易、不易堵塞、对粘度较大的反应液也可进行催化反应)4、膜式反应器(又分平板式、螺旋式、转盘式、空心酶管式和中空纤维膜式反应器特点是集反应与分离于一体利于连续化生产,但清洗比较困难,酶可以循环使用,降低了产物对酶的抑制作用)。

5、鼓泡式酶反应器(结构简单,操作容易,剪切力小,物质与热的传递效率高)6、喷射式酶反应器(结构简单,体积小混合均匀催化反应速度快,效率高)25.何为固定化酶,简要说明固定化酶的基本方法?水溶性酶经物理或化学方法处理后,成为不溶于水的但仍具有酶活性的一种酶的衍生物。

在催化反应中以固相状态作用于底物。

大致可分为载体结合法载体结合法(将酶结合到非水溶性的载体上)、交联法(利用双官能团或多官能团试剂与酶之间发生分子交联来把酶固定化的方法)和包埋法(将酶包裹于凝胶网格或聚合物的半透膜微中,使酶固定化)。

26.结合所学知识谈谈酶目前在各个行业中的应用.1、医学上(削血栓、人工肾、疾病诊断,治疗预防疾病)2、食品方面(食品保鲜、食品生产、食品添加剂、改善食品的品质与风味)3、轻工业化工方面(原料处理,用酶处理原料可以缩短原料处理的时间,增加处理效果,提高产量,改善劳动条件,减轻劳动强度。

利用酶的催化作用可以将各种原料转变为所需的轻工化工产品,也可除去某些不需要的物质而得到所需的产品,在某些轻工业产品中添加一定量的酶,可以显著地增强产品的使用效果)4、环境保护方面(环境监测,利用酶的催化作用合成可生物降解的材料,)5、生物技术方面的应用(酶可用于除去细胞壁,大分子切割分子拼接)27.何为生物传感器,并简要说明各种传感器的特点.传感器(biosensor对生物物质敏感并将其浓度转换为电信号进行检测的仪器。

特点⑴采用固定化生物活性物质作催化剂,价值昂贵的试剂可以重复多次使用,克服了过去酶法分析试剂费用高和化学分析繁琐复杂的缺点。

⑵专一性强,只对特定的底物起反应,而且不受颜色、浊度的影响。

⑶分析速度快,可以在一分钟得到结果。

⑷准确度高,一般相对误差可以达到1%⑸操作系统比较简单,容易实现自动分析⑹成本低,在连续使用时,每例测定仅需要几分钱人民币。

⑺有的生物传感器能够可靠地指示微生物培养系统内的供氧状况和副产物的产生。

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