高中生物实验颜色反应与各种试剂作用总结

高中生物颜色反应

1．还原糖+斐林试剂→砖红色沉淀

2．苏丹Ⅲ+脂肪→橘黄色；苏丹Ⅳ+脂肪→红色

3．蛋白质+双缩脲试剂→紫色

4．淀粉+碘液→蓝色

5．DNA的染色与鉴定

染色原理：DNA+甲基绿→绿色应用：可以显示DNA在细胞中的分布。

鉴定原理：DNA+二苯胺→蓝色应用：用于DNA粗提取实验的鉴定试剂。

6．RNA的染色与鉴定

染色原理：RNA+吡罗红→红色应用：可以显示RNA在细胞中的分布。

注意：在观察DNA和RNA在细胞中的分布时用的是甲基绿和吡罗红混合染色剂，而不是单独染色，而且要现配现用。

7．健那绿专一性染线粒体的活细胞染料

原理：健那绿(Janus green B)染液，是专一性染线粒体的活细胞染料，可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色，而细胞质接近无色。线粒体能在健那绿染液中维持活性数小时，通过染色，可以在高倍显微镜下观察到生活状态的线粒体的形态和分布。（另:观察细胞中叶绿体不用染色）

8．酒精的检测原理：橙色的重铬酸钾溶液在酸性条件下与酒精发生化学反应，变成灰绿色。

9．CO2的检测

原理：CO2可以使澄清的石灰水变混浊，也可使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。

10．染色体（或染色质）的染色

原理：染色体容易被碱性染料（如龙胆紫溶液或醋酸洋红溶液或改良的苯酚品红）染成深色。

应用：用高倍镜观察细胞的有丝分裂。

11．亚硝酸盐的检测出现玫瑰红

原理：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料。

应用：将显色反应后的样品与已知浓度的标准液进行目测比较，可以大致估算出泡菜中亚硝酸盐的含量。

12．脲酶的检测

原理：细菌合成的脲酶可以将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，使PH升高，从而使酚红指示剂变红。

应用：在以尿素为唯一氮源的培养基加入酚红指示剂，培养某种细菌后，看指示剂变红与否可以鉴定这种细菌能否分解尿素。

13．伊红美蓝检测大肠杆菌

原理：在伊红美蓝培养基上，大肠杆菌的代谢产物（有机酸）与伊红美蓝结合使菌落呈现黑色。

应用：用滤膜法测定水中大肠杆菌的含量。

14．刚果红检测纤维素分解菌

原理：刚果红是一种染料，它可以与像纤维素这样

．．．．．．的多糖物质形成红色复合物，但并不和水解后的纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。当在含有纤维素的培养基中加入刚果红时，刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物。当纤维素被纤维素分解菌分解后，刚果红-纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈。

应用：筛选纤维素分解菌。

15. 直接观察类实验应选有颜色的材料；染色观察类实验应选取无色材料。

高中生物相关试剂的作用

1．盐酸[质量分数]

（1）8%的盐酸，“观察DNA和RNA在细胞中的分布”时用，作用①改变细胞膜的通透性，加速染色剂进入细胞；②使染色质中的DNA和蛋白质分离，有利于DNA与染色剂结合。

（2）15%的盐酸，“观察细胞的有丝分裂”和“低温诱导植物染色体数目的变化”两个实验中都组成解离液，作用相同：使细胞相互分离开。

（3）其它：配制相应pH的溶液，如探究pH对酶活性的影响（5%）、生物维持pH稳定的机制（0.1mol/L）2．酒精[体积分数]

（1）50%酒精：“检测生物组织中的脂肪”实验中洗去浮色。

（2）70%酒精：采集小动物；消毒

（3）95%酒精：①“观察细胞的有丝分裂”和“低温诱导植物染色体数目的变化”中与盐酸1：1组成解离液；②用于DNA的粗提；③用于“低温诱导植物染色体数目的变化”实验中两次冲洗卡诺氏液（卡诺氏液在“低温诱导植物染色体数目的变化”中起固定细胞的作用）。

（4）无水乙醇：绿叶中色素的提取（或用95%酒精加无水碳酸钠除去水分）

（5）其它作用：如燃烧加热

3．蒸馏水：

（1）配制溶液或培养基；

（2）稀释材料（如肝脏研磨液、鸡蛋清等的稀释）；

（3）使细胞吸水涨破或质壁分离复原；

（4）制备渗透装置；

（5）用于对照实验里的对照组（植物实验一般用等量蒸馏水做空白对照，其他如“土壤微生物的分解作用”实验中与土壤浸出液对照）

（6）冲洗涂片：在“观察DNA和RNA在细胞中的分布”实验中可冲洗涂片

（7）漂洗：“观察细胞的有丝分裂”和“低温诱导植物染色体数目的变化”两个实验中都可用于漂洗，防止解离过度

4．NaOH

（1）0.1g/ml的NaOH：斐林试剂的甲液、双缩脲试剂的A液

（2）10% NaOH：探究酵母菌细胞呼吸方式实验中用于除去空气中的CO2

（3）0.1% NaOH：用于“细胞大小与物质运输的关系”实验中

（4）其它：配制相应pH的溶液，如探究pH对酶活性的影响（5%）、生物维持pH稳定的机制（0.1mol/L），探究CO2浓度对光合作用的影响（1%）

5．NaHCO3：CO2缓冲液，不同浓度的NaHCO3可用于探究不同CO2浓度对植物光合作用的影响6．生理盐水（0.9%NaCl溶液）：①在“观察DNA和RNA在细胞中的分布”中维持细胞正常形态；

②配制健那绿染液；③不同浓度的NaCl溶液可以溶解和析出DNA；④动物实验一般用等量生理盐水做空白对照；⑤制备细胞膜时制备红细胞稀释液

7．0.3g/ml（或30%）的蔗糖溶液：用于观察植物细胞的质壁分离

8．3.5%的FeCl3溶液:作为过氧化氢的无机催化剂

9.马铃薯研磨液:含过氧化氢酶和富含淀粉

10.酚酞：遇NaOH呈紫红色，在“细胞大小与物质运输的关系”实验中，在制备不同大小的琼脂块时需添加该物质

11．CaCO3：防止研磨中色素被破坏

12．二氧化硅：使研磨充分

13．层析液（石油醚：丙酮：苯=20：2：1）或93号汽油：色素的分离

14．无水乙醇或丙酮：色素的提取

15．无菌水：将大肠杆菌培养液进行系列梯度稀释

16．自来水：“生物体维持PH机制”实验中做对照

17．浓硫酸：酸性重铬酸钾鉴定酒精

18．CuSO4：（1）0.05 g/mL：斐林试剂的乙液（2）0.01 g/mL：双缩脲试剂的B液