植物组织培养的一些注意事项
组培成功必备的几大要素
组培成功必备的几大要素组织培养（tissue culture）是一种在实验室或生物技术设施中，通过控制环境条件来培养植物组织或细胞的技术。
以下是组织培养成功必备的几大要素：1.无菌环境：无菌环境是组织培养成功的首要条件。
所有用于组织培养的材料，包括外植体、培养基、接种工具等，都必须进行严格的消毒处理，以防止细菌、真菌等微生物的污染。
实验室应配备超净工作台、紫外灯、高压蒸汽灭菌器等设备，确保无菌操作。
2.合适的培养基：植物组织培养的成功与否，很大程度上取决于所使用的培养基。
培养基应含有植物生长所需的营养成分，如糖、氨基酸、微量元素、维生素等，以及适量的植物生长调节剂，如生长素和细胞分裂素。
根据不同的植物种类和培养目的，可以选择不同的培养基。
3.适宜的温度和光照：在组织培养过程中，温度和光照也是影响成功的关键因素。
每种植物都有其最适的生长温度和光照条件。
一般来说，大多数植物在25-30℃的温度下和16-24小时的光照条件下生长良好。
4.外植体选择与处理：选择健康、无病虫害的植物材料作为外植体，并对材料进行适当的预处理，如清洗、消毒等，是组织培养成功的关键步骤。
此外，选择适合的外植体类型也对培养成功至关重要。
5.接种技术：接种是将外植体接入培养基的过程。
熟练的接种技术能够减少对植物组织的损伤，避免污染，并提高组织的存活率。
6.细胞分裂与增殖：在适宜的培养条件下，植物细胞会分裂并增殖形成愈伤组织。
这个过程需要定期观察和记录细胞的生长情况，及时调整培养条件以促进细胞的分裂和增殖。
7.生根与移植：当愈伤组织形成后，可以将其转移到生根培养基中，促使组织产生根系。
当根系形成后，可以将其移植到土壤中或进行其他后续实验。
8.遗传稳定性：为了确保组织培养后得到的植株是纯合的，并保持其遗传稳定性，需要采用适当的遗传检测方法。
这可以通过分子生物学方法，如DNA 指纹分析或基因表达分析来实现。
9.法规与伦理：在进行组织培养实验时，必须遵守相关的法规和伦理准则。
植物组织培养流程图及注意事项
5.培养：放在合适的环境里，温度、光照、湿度都得控制好哇！
6.观察和记录：要时刻盯着，看看有没有啥异常情况，及时做好记录哟！
接下来讲讲注意事项哈！
1.无菌操作：这可是重中之重呢！任何一个环节都不能让细菌病毒钻空子呀！
2.培养基配方：哎呀呀，配方得合适，营养不均衡可不行！
9.仪器设备清洁：用完的仪器得洗干净消毒好，为ห้องสมุดไป่ตู้一次使用做好准备哦！
10.人员培训：操作人员得经过专业培训，不然容易出错哟！
怎么样，这些流程图和注意事项是不是很重要呀？希望能对您有所帮助哇！
3.外植体来源：得保证来源可靠，质量过关呀！
4.培养条件控制：温度不能高也不能低，光照时间和强度都得恰到好处，你说难不难？
5.防止污染：哇，一旦污染了，那可就前功尽弃啦！
6.定期观察：可别偷懒，要经常看看植物的生长情况，及时调整条件呢！
7.操作规范：每个步骤都得按照标准来，不能随心所欲哟！
8.材料处理：处理外植体的时候，手法要熟练，不能损伤了它们呀！
植物组织培养流程图及注意事项
嘿呀！以下就是植物组织培养的流程图及注意事项啦！
首先咱们来说说流程图哈！
1.准备阶段：哎呀呀，这可得把各种器具都准备齐全呢！像培养皿、培养基、消毒工具等等，一个都不能少呀！
2.外植体选取：哇，这可重要啦！得挑那些健康、无病害的部位，你说是不是？
3.消毒处理：这一步可不能马虎哟！要用合适的消毒剂，把外植体好好消消毒，不然细菌病毒啥的可就捣乱啦！
植物组织培养的一些注意事项
植物组织培养的一些注意事项一、常用培养基要紧特性1、高盐成分培养基包括MS、LS、BL、BM、ER 等培养基。
其中MS 培养基应用最广泛,其钾盐、铵盐及硝酸盐含量均较高, 微量元素种类齐全, 其养分数量及比例均比较合适, 广泛用于植物的器官、花药、细胞及原生质体的培养。
LS、BM、ER 培养基由MS 培养基演变而来。
2 、硝酸钾含量较高的培养基包括B5 、N6 、LH、GS 等培养基。
①B5 培养基B5 培养基除含有较高的钾盐外, 还含有较低的铵态氮和较高的盐酸硫胺素, 较适合南洋杉、葡萄及豆科与十字花科植物等的培养。
②N6 培养基N6 培养基( 朱至清等1975 ) 系我国学者制造, 获国家发明二等奖, 适用于单子叶植物花药培养, 柑橘花药培养也适合, 在楸树、针叶树等的组织培养中使用成效也好。
③SH 培养基是矿盐浓度较高的一种培养基, 其中铵与磷酸是由磷酸二氢铵( NH4 H2 PO4 ) 提供的, 这种培养基适合于某些单子叶及双子叶植物的培养。
3 、中等无机盐含量的培养基①H 培养差不多培养基大量元素约为MS 培养基的一半, 仅磷酸二氢钾及氯化钙稍低, 微量元素种类减少, 而含量较MS 为高, 维生素种类比MS 多。
适于花药培养。
②尼奇培养基(Niotsch 1969 ) 此培养基与H 培养基成分差不多相同, 仅生物素比H 培养基高10 倍。
也适合于花药培养。
③米勒培养基(Miller 1963 ) 此培养基和Blaydes(1966) 培养基二者成分完全相同。
适合大豆愈伤组织培养和花药等培养用。
4 、低无机盐培养基大多情形下用于生根培养基。
有以下几种:①改良怀特培养基(White 1963 )②WS 培养基(Wolter & Skoog 1966)③克诺普液( Knop 1965 ) 花卉培养上用得多。
④贝尔什劳特液(Berthelot 1934)⑤HB 培养基( Holley & Baker 1963) 此培养基在花卉脱毒培养和木本植物的茎尖培养中成效良好。
植物组织培养的七大步骤
植物组织培养的七大步骤植物组织培养是一种通过体外条件、培养基和植物激素等手段，从植物的细胞或组织片段中培养出完整植株或其它的植物器官的生物技术方法。
它在现代生物技术和农业生产中有着广泛的应用。
下面将详细介绍植物组织培养的七大步骤。
步骤一：组织材料的选择与处理植物组织培养的第一步是选择合适的组织材料。
组织材料可以是从植物的各个部位（如根、茎、叶）中获得的发育中组织片段或细胞。
在选择组织材料时，需要考虑到植物的种类、性别、生长期等因素。
同时，在取材时要注意保持材料的活性和无菌状态，以避免外部微生物的污染。
步骤二：材料的消毒和无菌处理在进行植物组织培养之前，必须对组织材料进行消毒和无菌处理。
常用的消毒方法有热处理和化学消毒法。
热处理是将组织材料放入含有消毒剂的培养基中，在适当的温度下进行反复处理，以达到杀灭细菌和真菌孢子的目的。
化学消毒法是使用一些消毒剂如过氧化氢、酒精等对组织材料进行处理，以达到无菌状态。
步骤三：培养基的配制与过滤培养基是植物组织培养的基础，它提供了植物生长所需的营养和生长因子。
培养基的配制需要根据组织材料的特性和需求来确定。
一般来说，培养基包括有机营养物、无机盐、糖类、维生素、植物激素等成分。
配制好的培养基需要进行过滤，以去除其中的颗粒物和微生物，保证培养基的无菌状态。
步骤四：培养体外的组织将经过消毒和无菌处理的组织材料，放在含有适当培养基的培养容器中。
培养容器可以是培养皿、瓶子或装载体。
然后，将培养容器放在恒温恒湿的光照条件下进行培养。
在培养过程中，需要定期检查培养容器的状态，确保培养基和气氛的正常。
步骤五：选择培养因子和激素在组织培养过程中，可以根据需要添加不同的培养因子和激素，以促进组织的生长和发育。
常见的培养因子包括生长素、细胞分裂素、维生素等，它们可以提供植物生长所需的营养物和调节植物生长的信号。
激素包括植物生长素、植物激素、生长激素等，它们可以调节植物的生长和发育，促进组织的分化和再生。
培育技术在植物组织培养中的操作流程与注意事项
培育技术在植物组织培养中的操作流程与注意事项植物组织培养是一种利用培养基和适当的环境条件，通过外植体组织的再生和分化，培养出完整的植株的技术。
这项技术被广泛应用于植物育种、生物工程和植物病理学等领域。
在植物组织培养过程中，正确的操作流程和注意事项对于成功培养健壮的植株至关重要。
首先，在进行植物组织培养之前，我们需要准备适当的实验材料和设备。
实验材料包括外植体（通常是幼嫩的茎尖、根尖或叶片）、无菌培养基和生长调节剂。
实验设备包括培养箱、显微镜、无菌操作台等。
其次，将外植体取出并进行消毒处理。
外植体的消毒是为了去除表面的细菌和真菌，保证培养的无菌性。
一般来说，外植体在漂洗时需要用含有盐酸或漂白粉的消毒液中浸泡一段时间，然后经过多次漂洗，直到完全去除消毒液。
然后，将消毒后的外植体转移到含有培养基和生长调节剂的培养瓶中。
培养基是植物组织培养中不可或缺的一部分，它提供了植物生长所需的营养物质和生长因子。
生长调节剂可以调控植物的增殖和分化。
在将外植体转移到培养瓶中时，需要注意操作的无菌性，以避免污染。
接下来，将培养瓶放置在恒温培养箱中，在适当的温度和光照条件下进行培养。
温度和光照是植物正常生长所必需的因素，不同植物有不同的最适生长温度和光照要求。
因此，在进行植物组织培养时，我们需要根据植物的生态习性和生长要求来设置合适的培养条件。
在培养的过程中，我们还需要经常观察外植体的生长情况，并及时调整培养条件。
如果发现外植体出现生长不良、污染或异常现象，需要及时采取相应的措施。
例如，可以更换培养基或生长调节剂，调整培养温度和光照条件，或进行二次消毒处理。
最后，在外植体生长并形成植株后，我们需要将其移栽到含有适量营养物质的土壤或介质中。
移栽过程需要注意保持植株的无菌性和避免损伤，以确保其顺利生长和发育。
植物组织培养作为一种重要的生物技术手段，在植物繁育和生物工程中具有广阔的应用前景。
然而，由于培养环境的复杂性和培养过程中的各种不确定因素，植物组织培养也存在一些局限性。
生根培养的注意事项
生根培养的注意事
项
生根培养是植物
组织培养中的重要步骤，以下是进行生根培养时需要注意的6个方面：
1.温度：温度是影响
植物生根的重要因素
之一。
在生根过程中，需要保持温度的稳定，
以促进根系的正常生长。
2.光照：光照也是影响植物生根的重要因素之一。
在生根过程中，需要提供适宜的光照条件，以满足植物生长所需的能量和光照需求。
3.湿度：湿度是影响植物生根的重要因素之一。
在生根过程中，
需要保持适宜的湿度条件，以防止过度干燥或过度湿润对植物生长造成不利影响。
4.营养：营养是影响植物生根的重要因素之一。
在生根过程中，需要提供适宜的营养条件，以满足植物生长所需的营养需求。
5.激素：激素也是影响植物生根的重要因
素之一。
在生根过程中，需要使用适宜的
激素浓度和比例，以
促进根系的正常生长。
6.容器和基质：容器
和基质的选择也是影
响植物生根的重要因
素之一。
在选择容器
和基质时，需要考虑
其透气性、排水性和
营养性等因素，以确
保植物根系正常生长所需的良好环境。
植物组织培养的基本条件—组培室设计原则及注意事项
墙壁交界 处呈弧形
四、经济实惠
洗手池、下水道的位置要适宜，不得对培养环境造成污染。 接种室、培养室的装修材料经得起消毒、清洁和冲洗，并设置能确保与 其清洁度相应的控温控湿和通风的设施。 组培室应有备用电源，确保停电时组培室的正常运转。
五、环境调控
植物组培需要一定的温度、 湿度、光照、通风等气候条件， 组培室建设时要充分考虑到气 候调控问题，力求便于调节、 节省能源。墙壁、顶棚用材保 温性能要好，达到一定厚度。
二、设施完备
1、整个植物组织培养过程要用到多种仪器设备，需要不同环境条 件，需要设施完备、功能齐全。
二、设施完备
2、组培室内仪器设备齐全，水路、电路安全畅通，器皿器械配备 充足，环境达标，场地够用，保证植物组培工作顺利进行。
三、布局合理
1、 根据组培生产流程将组培室按照使用 功能分成多个功能区。
任务三 组培室设计原则
目录
01
选址科学
02
设施完备
03
布局合理
04
经济实惠
05
环境调控
06
环境调控
一、选址科学
1、选址要求避开各种污染源， 周围环境清洁，空气清新，光 线充足，通风良好，水电供应 充足，交通运输便利，地下水 位不太高，有排灌水设施。
一、选址科学
2、选址也可以因地制宜利用现有房舍，按照植物组培技术要求改 造成组培室，做到因陋就简，既能开展研究和生
窗子要大，以便采光，节省能源，同时又要达到保温要求； 房间大小要合适，这样既便于操作，又便于独立调节气候； 加热、制冷、通风、光照、增湿、除湿、定时等设备布局要合理。
六、生物安全
1·、组培室产生的和未来可能产生的有害物质不能外流，不能对周 围环境造成可预见污染。 2、组培室最好远离生活区，必须具有污染物处理系统和处理能力。
植物组织培养的六大步骤
植物组织培养的六大步骤植物组织培养是指通过体外不断培养植物细胞、组织和器官，以研究其发育过程和生物学特性，也包括人工繁殖植物和生产植物次生代谢产物。
在植物组织培养的过程中，需要进行一系列的步骤，下面将详细介绍植物组织培养的六大步骤。
第一步：选择适宜的材料植物组织培养需要选取适宜的材料作为起始材料，这通常是从植物体中选择健康、无病虫害并具有较高再生能力的组织部分，如茎、叶片、种子等。
同时，还应注意选择具有较高再生能力的植物品种或种质资源，以提高培养成功率。
第二步：消毒处理为了减少外界微生物的污染，必须对选取的材料进行消毒处理。
常用的消毒方法有酒精消毒、双氧水消毒、高温高压消毒等。
消毒后的材料在无菌操作下移到无菌培养室，准备进行下一步的操作。
第三步：组织分离和培养经过消毒处理的材料，可以通过组织分离的方法来获得组织的单个细胞或小块组织。
常用的组织分离方法有切割法、振荡法、酶解法等。
分离得到的组织或细胞可以直接进行培养，也可以在培养基中添加适当的生长调节剂，以促进组织的增殖和分化。
第四步：培养基的选择和配置培养基是植物组织培养中重要的因素之一，它为植物细胞提供养分和生长因子，同时调控其生长和分化。
培养基通常由无机盐、有机物质、糖类、维生素、生长调节剂等组成。
根据需要，培养基可以分为基础培养基和不同类型的专用培养基。
基础培养基通常为MS培养基或白培养基，而专用培养基则针对不同的组织和目的进行调配。
第五步：培养条件的调控和优化在植物组织培养的过程中，培养条件的调控和优化对细胞和组织的生长和分化起着至关重要的作用。
光照、温度、湿度、pH值以及培养物的搅拌等因素都需要合理控制和调节。
此外，根据不同类型的组织和目的，还需要添加适量的生长调节剂、抗生素和其他辅助因子。
第六步：再生植株的分离和繁殖最后一步是将培养的组织或细胞分离出来，得到再生植株。
这需要将培养物转移到含有较稀释生长因子的培养基上，以便干扰物的去除和适度延长培养时间。
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植物组织培养的一些注意事项一、常用培养基主要特性1、高盐成分培养基包括MS、LS、BL、BM、ER 等培养基。
其中MS 培养基应用最广泛,其钾盐、铵盐及硝酸盐含量均较高, 微量元素种类齐全, 其养分数量及比例均比较合适, 广泛用于植物的器官、花药、细胞及原生质体的培养。
LS、BM、ER 培养基由MS 培养基演变而来。
2 、硝酸钾含量较高的培养基包括B5 、N6 、LH、GS 等培养基。
,4 、低无机盐培养基大多情况下用于生根培养基。
有以下几种:①改良怀特培养基(White 1963 )②WS 培养基(Wolter & Skoog 1966)③克诺普液( Knop 1965 ) 花卉培养上用得多。
④贝尔什劳特液(Berthelot 1934)⑤HB 培养基( Holley & Baker 1963) 此培养基在花卉脱毒培养和木本植物的茎尖培养中效果良好。
其成分是大量元素比1/ 2 克诺普( Knop ) 液稍多, 微量元素用贝尔什劳特液, 每升培养基中加0 . 5ml。
二、与培养基有关的一些细节问题1、培养基所用药品应采用等级较高的化学纯CP(三级) 及分极纯AR(二级) , 以免杂质对培养物造成不利影响。
2、调节PH也可用精密pH试纸(应在干燥器中保存, 以免吸湿而失效)。
培养基过酸的可用1mol/ L 氢氧化钠( NaOH) 来调节; 培养基过碱的可用1mol/ L 盐酸( HCl ) 来调节( 1mol/ L NaOH 的配制方法是称40gNaOH, 溶解后加入蒸馏水,加)因,1、取材季节的影响：大多数植物应在其生长开始的季节采样, 生长末期或已进入休眠期, 则外植体对诱导反应迟钝或无反应。
2、器官的生理状态和发育年龄：沿植物的主轴, 越向上的部分所形成的器官其生长的时间越短, 其生理年龄也越老, 越接近发育上的成熟, 越易形成花器官。
反之, 越向下, 其生理年龄越小。
木本植物的组织培养中, 以幼龄树的春梢嫩枝段或基部的萌条较好, 下胚轴与具有3 对～4 对真叶的嫩茎段, 生长效果也较好。
一般情况下, 幼年组织比老年组织具有较高的形态发生能力。
3、材料大小的影响：材料越小成活率越低, 茎尖培养存活的临界大小应为一个茎尖分生组织带1 个～2 个叶原基, 约0 .2mm～0 .3mm 大小。
叶片、花瓣等约为5mm2 , 茎段则长约0 .5mm。
因此, 除非用于去除病毒否则不宜将外植体切的过小。
但并不是说外植体越大越好, 外植体过大易造成污染, 有实验证明外植体越大污染率越高。
4、材料的灭菌：一般是组织越大越易污染, 夏季比冬季带菌多，甚至不同年份,做因,2、无菌操作要求：工作人员使用的工作服、帽子、口罩等, 要经常保持干净, 并定期进行消毒, 即将洗净、晾干的衣帽、口罩等用纸包好后与培养基一起进行高压灭菌。
工作人员的头发、衣服、手指中都带有许多杂菌, 为此要穿上工作服, 戴上帽子, 也必须剪除指甲, 并用肥皂擦洗, 最好再在新洁尔灭溶液中浸泡10 min , 接种操作前则用70%酒精擦洗。
工作人员的呼吸所产生的污染, 主要是在接种时谈话或咳嗽所引起的, 因此, 在操作时应禁止谈话并应戴上口罩。
3、材料的分离、切取和接种切割动作要快, 防止挤压使材料受损伤而招致培养失败, 也要避免使用生锈的刀片, 以防止氧化现象产生。
接种时要防止交叉污染的发生,刀和镊子等接种工具使用一次应放入70% ( 或95%)酒精中浸泡, 然后灼烧放凉备用。
接种时轻轻取下封口纸, 动作要慢以免气流冲入瓶中造成污染。
将瓶口靠近酒精灯火焰, 瓶口倾斜, 以免空气中的微生物落入瓶中,将瓶口外部在灯焰上燎数秒钟, 将灰尘杂物等固定在原处, 然后用镊子将外植体送入瓶中, 材料在培养容器内的分布要均匀, 以保证必要的营养面积和光照条件。
茎尖、茎段等基部插入887察的因素只要求两个水平。
在进行实验前可根据要测试因素的多少及每种因素所考察的水平, 选择适合的正交表, 然后按表进行实验。
现举一个例子来说明, 设影响某种植物试管苗生长的因素有光照时间、光照强度、pH 值、温度、蔗糖浓度、BA浓度、NAA 浓度7 个因素, 每个因素选择两个水平, 即, 光照时间( 10h , 14h )、光照强度(1000lx , 2000lx )、pH 值( 5 . 5 , 5 . 8 )、温度( 20℃ , 25℃) 、BA 浓度( 0 . 5 , 2 . 0 )、NAA 浓度( 0 . 5 ,1 . 0)、蔗糖浓度(2% ,4%)。
现根据因素和水平的多少选择一个适合本实验的正交表, 选L(27)最理想,8填表时, 因素水平对号入座, 见表( 2 - 13 )。
第一号实验是光照时间10h/ d、光照强度1000lx、pH 值5 . 5、BA 浓度2 . 0、NAA 浓度0 . 5、蔗糖浓度4% , 其他实验依次类推。
根据8 个实验结果, 如出苗数量、苗高、生根数、移栽成活率等, 综合考虑, 根据需要选取各最适培养条件。
也可通过一定的计算方法(参考统计学书) , 算出极差( R) , 极差(R) 表示每个因素在实验中所起作用的大小, R 越大表示该因素的不同水平对实验结果的影响越大, 但若没有可计算的指标,干净后插入无糖的营养液或自来水中, 使其发枝, 然后以这种新抽的嫩枝条作为外植体, 便可大大减少材料的污染。
或在无菌条件下对采自田间的枝条进行暗培养, 待抽出徒长的黄化枝条时取材, 也可明显地减少污染。
对木本植物等难以消毒的材料可采用多次灭菌法。
如将切好的外植体放入1 . 3%次氯酸盐溶液中(商品漂白粉25%的溶液)消毒30min , 然后用无菌水冲洗3 次, 再放在无菌条件下,次日用2 . 6%次氯酸钠灭菌30min , 然后用无菌水冲洗3 次。
也可采用多种药液多次浸泡法,以加强灭菌效果。
材料内部易感染病菌, 在这种情况下, 必须在培养基中加入抗生素类, 防止初代培养物污染。
2）、人为污染的防止接种前应用肥皂将手仔细洗净后, 再用70%酒精擦洗双手, 并需及时剪除指甲。
在工作中特别要注意避免交叉感染, 双手必须清洁, 工具则用一次即需消毒一次。
工作人员呼吸所产生的污染, 主要是接种时说话或咳嗽所引起的, 因此, 操作时严禁谈话, 并应戴上口罩, 也应穿工作服, 戴工作帽。
用发生严重。
在第一至第四个芽的生长期单宁类物质合成多, 因此, 接种后褐变也严重。
油棕用幼嫩外植体( 如胚)培养较少褐变, 而用高度分化的叶片接种后则容易褐变。
总之, 分生部位接种后形成的醌类物质少, 而分化的部位则形成的醌类物质较多。
培养基成分过高的无机盐浓度会引起棕榈科植物外植体酚的氧化。
例如油棕用MS 无机盐培养基容易引起外植体的褐变, 而用降低了无机盐浓度的改良MS 培养基时则可减轻褐变, 而且可获得愈伤组织和胚状体。
激素使用不当时, 材料也容易褐变。
细胞分裂素6 - 苄基氨基嘌呤或激动素有刺激多酚氧化酶活性提高的作用, 这在甘蔗的组织培养中表现十分明显。
在外植体最适宜的脱分化条件下, 分生能力强的细胞大量增殖, 酚类的氧化会受到抑制。
在芽旺盛增殖时, 褐变也被抑制。
此外, 培养条件不适宜, 如温度过高或光照过强, 均可使多酚氧化酶的活性提高, 从而加速被培养组织的褐变。
培养时间过长接种后材料培养时间过长, 未及时转移, 也会引起材料的褐变,2、试管繁殖速率及计算统计试管苗增殖速度, 有以苗为单位, 也有以芽或未生根的小茎作单位的, 以原球茎球状体或胚状体因难以统计, 则以瓶为单位。
大多数以芽和苗作单位。
试管苗理论上一年能繁殖多少, 可用下面的简单公式计算:Y = mX nY = 年繁殖数m = 无菌母株苗数X = 每个培养周期增殖的倍数n = 全年可增殖的周期次数例如月季每5 周转接一次, 甲品种每次增殖3 倍, 乙品种每次增殖5 倍, 丙品种每次增殖7 倍, 假定一开始都是一个芽, 那么这三个品种一年能繁殖多少呢? 根据公式可知:n =365d/35d= 10 .4 , 即每年可转接10 次, 那么这三个品种年繁殖率分别计算5基。
培养基中的维生素绝大部分为B族维生素，它们一各种辅酶的形式参与植物代谢活动，影响形态发生、分化及试管苗的生长，为防植物缺乏，一般均加入。
③、植物生长调节物质在试管苗增殖中期决定性作用A、促进叶芽形成和生长的激素：细胞分裂素抑制了植物的顶端优势，使得叶芽不断分化和生长，逐渐形成芽丛，并促进芽丛生长。
大多植物最适用量为1.0~2.0，一般用量0.1~10.0。
应用最多的是6-BA,其次KT和2ip，ZT用的较少，因它的价格太贵。
对于微型扦插型繁殖可不加细胞分裂素或加0.1以下也可。
除了细胞分裂素以外，还可加入低浓度的生长素，以促进叶芽的生长，但要防止愈伤组织化。
常用的有NAA,IBA,IAA，浓度在0.1~1.0。
在实际操作中高浓度细胞分裂素和低浓度生长素的配比，既能提高腋芽的增殖速度，也能保证腋芽健壮生长。
如果细胞分裂素浓度过高生长素浓度过低，会形成过于细密的嫩芽，虽然提高了增殖速度，但苗多而弱，降低了芽的质量。
但如果细胞分裂素过低，生长素过高，影响芽的增殖速度，甚至有时没有侧芽产生。
,,～～养基的pH值密切相关, 需要进行控制, 以促进繁殖。
七、保持试管苗的继代培养1、试管苗的继代方法1）、液体培养2）、固体培养2、影响试管苗继代培养的因素及解决措施1）、驯化现象：有些植物在开始的继代培养中需要添加生长调节物质, 其后加入少量或不必加入生长调节物质就可以生长, 此现象就叫做“驯化”。
2）、在长期的继代培养中, 材料自身内部要发生一系列的生理变化, 除了前面讲的“驯化”现象外, 还会出现形态发生能力的丧失。
年故常改变培养基和培养条件来保持继代培养。
3）、继代培养时间长短关于继代培养次数对繁殖率的影响的报道不一。
有的材料长期继代可保持原来的再生能力；有的经过一定时间继代后才有分化再生能力；而有的随继代时间加长而分化再生能力降低。
4）、季节的影响植物材料能否继代与季节有关。
一般能达到每月继代3~10倍，即可用于大量繁殖，盲目追求过高增殖倍数一是所产小苗小而弱，给生根、移栽带来很大困难，二是会引起遗传性不稳定，造成灾难性后果。
八、试管苗的生根与移栽（一）试管苗的生根（2）、基本培养基大多数使用低浓度的MS培养基，其中不少使用1/2MS或1/3MS+多可能不利于发根，生根需要P和K元素，但不培养基。
大量元素中有人认为NH4宜太多；而Ca2+多数报道有利于根的形成于生长。
微量元素对生根有利的是B和Fe。
生根通常用1%~3%的蔗糖。
（3）植物生长调节剂据报道单用一种生长素的占51..5%，生长素加激动素占20.1%。