轮虫的培养

生活史
（夏卵）
诱发两性生殖的因子
（1）外源性因素
①生育酚：维生素E直接作用于胚胎发育后期而诱 发混交雌 体的形成； ②种群密度：种群密度的控制； ③食物：食物的组成、丰度和成分对混交雌体的形 成具有诱发作用；
④温度：温度高（＞30℃）或低（＜25℃）混交 雌体的比例增大； ⑤盐度：在褶皱臂尾轮虫培养中，盐度＞35，无 产生混交生殖，盐度为2和30，有低水 平的混交生殖，盐度4-20，有高的混交 生殖； ⑥pH：较高的pH（＞8.5）产生的混交生殖越多。
第二节 轮虫生物学
一、分类
欧美国家：袋形动物门，轮虫纲、真轮毛虫 亚纲、 单生殖巢上目、臂尾 轮虫 目、臂尾轮虫科，臂尾轮虫属。
我国分为：轮虫门，单生殖巢纲，游泳目，臂 尾 轮虫科，臂尾轮虫属。
培养种类：
褶皱臂尾轮虫（Brachionus plicatilis)—L型 圆型臂尾轮虫（Brachionus rotundiformis）-S型 壶状臂尾轮虫（B. benห้องสมุดไป่ตู้ini） 萼花臂尾轮虫（B. calyciflorus） 钩状狭甲轮虫（ Colurella uncinata）：小型。
龟甲轮虫 Keratella
水轮虫Epiphanes
疣毛轮虫 Synchaeta
旋轮虫 Philodina
晶囊轮虫 Asplanchna
三、轮虫的变异
水温变化、饵料质量和培养密度等是引起 轮虫形态和大小变化的主要原因。
S型轮虫（ B. rotundiformis ）：100-190um，适合 较高水温下培养；有两个亚种，SS型（高盐）、 SM型（低盐）。
轮虫三级培养
三、大量培养
1、培养容器
一次性培养：≤10m3，玻璃钢槽、小型水泥池等。 半连续培养：40-50m3，大型水泥池。
2、培养用水
砂滤加300目网过滤水，刚接种用水一定要消毒（漂 白粉浓度要低：20-30ppm，曝气时间要长：2天）。
3、接种 一次性培养：先培养微藻，接种密度为0.1-0.5
有性生殖 即混交生殖，不混交雌体产生混交雌体，混交雌 体经过减数分裂产生单倍体混交卵（需精卵）。 若混交雌体在年轻时不与雄体交配，不论以后有 无交配混交卵均不受精，发育为单倍体的雄体； 若混交雌体交配了，混交卵受精，精和卵结合为 双倍体的受精卵，再形成壳厚的休眠卵。
在不良环境下，如饥饿、缺氧、密度过高、种
被甲前端 被甲后端 棘刺 （对） 棘刺 （对）
被甲后 端开口
被甲形状
被甲长（ µ ）
园钝形
宽钝形
腹面三角形 背面正方形
椭圆形
褶皱臂尾轮虫 Brachionus plicatilis
萼花臂尾轮虫 B. calyciflorus
壶状臂尾轮虫 Brachionus urceus
矩形龟甲轮虫 螺形龟甲轮虫
糠虾、颤蚓、黄粉虫、沙蚕。 个体大小：
颤蚓、沙蚕、糠虾＞黄粉虫＞卤虫成体＞桡足类＞ 枝角类＞卤虫幼体＞轮虫＞牡蛎担轮幼虫和 藤壶无节幼虫Ⅰ、Ⅱ期。
四、轮虫的概况 （一）轮虫特点
生命力强，繁殖快，营养丰富，大小适宜， 易培养。
（二）简史 1960年日本伊藤发现褶皱臂尾轮虫作为仔鱼饵料的
价值，并进行大量培养技术的探索；1964年日本开 始大量培养褶皱臂尾轮虫； 1965年Hirata and Mori发现面包酵母是轮虫的合适饵 料；70年代广泛使用面包酵母；随后发现酵母轮虫 缺乏鱼类必需的高度不饱和脂肪酸，造成仔鱼大量 死亡。因此研究轮虫的营养强化技术；
成虫（生物学最小型 ）——产卵期 ———— 死亡。
个体发育（席贻龙、黄祥飞） 胚胎发育期：卵产出---幼体孵出。 生殖前期：幼体孵出---产出第一个卵。 生殖期：产卵期间（第一个---最后一个）。 生殖后期：最后一个卵产出---死亡。
4-5d
生殖量 几-10多个/次，一般为2-4个/次，周期4-5天， 雌性一生平均产卵21个。 寿命 7-10天。①与水温成反比；②环境好时，寿 命长。
1、外部结构
被甲：透明、前缘有片状棘（背面6个、腹面4个）； 轮盘部：由棒状突、纤毛环（打动水流）和触毛（感觉 作用）组成； 足部：足趾、足腺；与头部均能缩进。
2、内部结构 消化系统：口（漏斗状） 口腔 咀嚼器 食道（短） 胃（大，消化腺1对） 肠 泄殖腔
肛门 排泄系统：原肾管（焰细胞） 膀胱 泄殖腔
生物饵料，在世界范围内广泛培养和应用。
（三）应用情况
在60种海洋有鳍鱼类和18种甲壳动物幼体的培育 中应用。
（四）存在问题
探明轮虫两性繁殖的机制； 开发轮虫高密度培养系统； 选育、引进优良的轮虫品系；
如：100um小轮虫和500-1000um大轮虫；
探讨室外土池稳定生产轮虫的技术措施； 进一步探讨轮虫培养过程中增殖率突然 下降的原因和机制。
种群密度：（1）密度大：怀卵量少，繁殖慢；
（2）密度小：怀卵量多，繁殖快。
间疏采收：轮虫达到一定密度时（≥200个/ml），繁
殖力下降，必需稀疏密度，才能正常生长。
悬浊物：主要由细菌、粪便、残饵构成；量多时 影响收获作业，并可能把病源性细菌带入饲育池； 可用过滤网垂放于培养槽去除悬浊物。 细菌 细菌相：弧菌属（ Vibrio ）、不动杆菌属 （ Acinetobacter）、假单胞菌属（Pseudomonas） 占 优势时，增殖快。色素生产菌，如黄杆菌属 （Flavobacterium）和解藻朊酸弧菌（Vibrio alginolyticus ）占优势时，增殖受阻碍。可添加有益 菌保持轮虫培养的稳定性。 维生素V12生产菌：对轮虫增殖有明显的促进作用。
要进行24小时驯化（20
40）
光照：间接影响。对藻类和光合细菌有利，且抑制原生 动物生长。研究认为：适宜4400~10000lx。 pH： 6-9范围内无不良影响，适宜7.5~8.1。 溶解氧：保持1.5mg/l以上，耐低氧能力强。L型轮虫缺 氧状态下，经6h有半数存活。0.9mg/L时，生殖率开始下降。
个/ml；7-10天采收；如投喂酵母， 接种密度为14-70个/ml；
群本身产生化学物质累积和生态环境（水温、盐 度、PH等)突变等，非需精卵→混交雌体→混交卵 → 休眠卵（冬卵）。
夏卵 非需精卵，壳薄而 光滑，卵形，个体小；长 56-130µ ，宽48-96 µ ，挂在 母体上，2-14个。 冬卵（休眠卵） 需精卵 受精 冬卵。 壳厚，个体大，弓形，卵 一端有较大空隙，卵黄呈 橘红色长约130µ ，宽88µ ， 不挂卵。
我国60年代初，傅素宝等（1962）研究壶状臂
尾轮虫；70-80年代，解承林、郑严、王育、何 进金、何连金、张道南、陈世杰等研究褶皱臂 尾轮虫；
90年代，研究轮虫品系的选育，如大轮虫品系、
小轮虫品系（中国科学院海洋研究所）和低温 轮虫品系（15℃，张学武）；
至今，褶皱臂尾轮虫已经成为一种极为重要的
轮虫的培养
轮虫的培养
第一节 生物饵料的应用概述
一、动物性生物饵料必须具备的条件
必需小型：作为鱼类的开口饵料； 形状简单，容易被破碎； 富有营养，容易消化； 不使水质恶化； 容易制备（培养）； 能适应养殖幼体的摄食生态条件。
常见种类 牡蛎担轮幼虫：受精卵 担轮幼虫:大约饵用13-14小时； 藤壶无节幼虫Ⅰ、Ⅱ期：大约饵用3-4小时； 轮虫：S、L、M型，有鳍鱼类开口饵料； 卤虫：幼体和成体，商品化； 枝角类：大部分淡水种； 桡足类：海水种；
一次性培养（batch culture）：水体在10m3以 内，先培养藻类→接种→投喂→达到一定密度 一次性收集，需4-7天。S型轮虫（高水温、高密 度、高给饵率）
半连续培养（semi- continuous culture ） 间收培养，水体10-40m3，藻类培养→接种→投喂 →间疏采收（虹吸法）→注入藻液。每天采收， 15-30天移池。L型轮虫（低水温、低密度、低给 饵率）
连续培养（continuous culture）：室内 封闭性高密度培养系统；主要进行残饵、 粪便、尸体等有机物的处理 。
连续培养装置的特点
持续注水、持续收获、持续给饵。 注水量=收获量 防止有害生物的侵入，防止水质恶化。
生产量（日本）
S型轮虫：30-40亿/m3/日。
轮虫一级培养
轮虫二级培养
L型轮虫（ B. plicatilis ）：140-290um，适合较低 水温下培养的，广盐性种类。
四、生殖习性
单性生殖 即孤雌生殖，某些水生动物在适宜的环境条件下， 雌性个体产生的卵无需受精直接发育成雌性小个 体，如轮虫、枝角类，卤虫等。
在良好环境下：冬卵
（非混交）雌性→夏卵 （无需受精，挂在足 基部）→雌性小个体。 褶皱臂尾轮虫大约4h产卵1次，21个卵/雌，持 续时间6.7d。
二、形态特点
轮虫的三大特征 轮 盘：摄食、运动； 咀嚼器：磨碎食物； 原肾管：肾的雏形，内有焰细胞。 雌雄异体、异形 雌性：常见，大小196-250×150-202um，结构完整； 雄性：少见，个体小：80-130um，结构简单，只 有轮盘、精巢和阴茎，不摄食；只在不良 环境下看见出现，游泳快，只为了交配。
（2）外源性因素
①遗传因子：与不同的品系有关； ②母体的年龄：年龄与混交雌体的比例成负相关； ③孤雌生殖的累积时代数：时代数的积累对混交雌 体的产生具有诱导作用。
影响休眠卵形成效率的因素
遗传因素、温度、食物种类和浓度、培养液的盐 度、 pH值等。
五、培养环境
温度：适宜25~35℃，低于5℃不能存活，高于40℃死亡，
呼吸：靠纤毛打动的水流通过体壁进行气体交换。 神经：脑（咽上N节）和咽下N节
各器官。
另外：眼点（红色）、背触手和侧触手（刺毛为 应激反应）。
生殖系统：
雌体：卵巢（卵黄腺） 输卵管 泄殖腔 雄体：发达的精巢和阴茎，遇到雌性就交配。 肛门。