微生物菌种保藏方法
微生物菌种保藏的原理和方法

微生物菌种保藏的原理和方法一、原理:1.休眠状态:微生物菌种在低温下可进入休眠状态,减缓代谢活动,延长存活时间。
2.冷冻保存:通过降低温度到零下或较低的温度,减慢微生物体内化学反应速率,延缓其代谢活动和死亡过程。
3.干燥保存:通过去除菌种周围的水分,降低微生物体内化学反应速率,延缓其代谢活动和死亡过程。
4.冻干保存:先冷冻再干燥保存,通过冷冻降低微生物体内的水分活性,再通过干燥去除冻结水,使菌种能在实验室条件下保存较长时间。
二、方法:1.冷冻保存:(1)使用离心管或培养管制备菌种的蛋白质保护液,可以是细胞培养基、缓冲液等。
(2)将培养物转移到保护液中,使其悬浮均匀。
(3)加入保护剂,如甘油或DMSO(二甲亚砜),提高菌种的冷冻抵抗力。
(4)将混合物分装到小容器或冻存管中。
(5)使用特定的冷冻方案,将菌种快速冷冻,并存储在低温下,通常为零下80℃或更低的温度。
2.干燥保存:(1)用无菌技术转移到无菌条件下的试管中。
(2)将菌种培养在无菌的固体培养基上。
(3)收集培养物,将其平均分布在无菌试管或培养皿中。
(4)将试管或培养皿放在无菌的通风柜中,使培养物在无菌环境下干燥。
(5)将干燥的培养物贮存在干燥无菌容器中。
3.冻干保存:(1)将培养物转移到无菌离心管或培养皿中。
(2)使用细菌培养基将菌种制备为细菌悬浮液。
(3)在细菌悬浮液中加入保护剂,如蔗糖或甘露醇。
(4)将混合物分装到冻干瓶中。
(5)使用低温冷冻机将菌种冷冻为固体,再将其放入冻结干燥机中进行冻干。
(6)将冻干的菌种贮存在密封的冻干瓶中。
4.长期保存:通常,冷冻保存和冻干保存可以实现长期保存,但仍需定期检测和维护保存条件。
在微生物菌种保藏过程中,还需注意以下几点:1.选择合适的保存条件:根据菌种的特性和要求,选择适宜的保存方法和温度。
2.制备合适的保存液:保存液的配方和pH值应与菌种相适应,以保证菌种的存活和精确性。
3.保持无菌操作:在菌种保藏过程中,需保持无菌操作,以防止细菌污染。
菌种保藏方法

菌种保藏方法
菌种保藏方法,如下:
1、传代保藏,传代保藏菌种是微生物保存中最常用的方法之一。
很多微生物在低温或者干燥处理时,会很快死亡,为了保存菌种的活性,就要定期不断的进行菌种转接、培养后再保存。
2、斜面低温保藏,将待保藏的菌种接种在合适的斜面培养基上,在相应的条件下培养至得到充足的菌体或者孢子,随后密封试管置于4℃左右保存,具体保存温度按照保存菌种设定。
保藏时间依微生物的种类从1个月到4个月不等。
3、冷冻干燥保藏,冷冻干燥保藏法为菌种保藏方法中最有效的方法之一,对一般生活力强的微生物及其孢子以及无芽胞菌都适用,这种方法适用于菌种长期保存,一般可保存数年至十余年。
我国大多数生物制品菌种都是采用该法保藏。
4、半固体穿刺保藏,配制半固体培养基,高压湿热灭菌后倒于无菌试管中至约1/3,待培养基凝固,用接种环从平面培养基上挑取单菌落,穿入培养基若干次。
在合适的条件下进行培养至菌体旺盛生长,之后密封试管,根据菌种特点在4 ℃左右或者凉爽干燥处保存。
保存时间至少可以达到
1 年,对于有些菌种甚至能达到20 年之久。
5、液氮超低温保藏,液氮超低温保藏法是菌种长期保藏的最有效最可靠的方法。
液超低温保藏法是把菌种装在含有冷冻保护剂的安瓶瓶内,将该安瓶瓶放人液氮(-196℃)中保藏。
微生物菌种保藏方法

微生物菌种保藏方法微生物菌种保藏是指将微生物菌种保存在适宜的条件下,使其保持活力和遗传稳定性的方法。
随着微生物资源的日益减少,菌种保藏对于微生物研究和应用具有重要意义。
现今常见的微生物菌种保藏方法主要包括冷冻保存、冷冻干燥和液氮保存等。
I.冷冻保存法冷冻保存法是将微生物菌种在低温下保存,通常是在-80℃或更低的温度下。
冷冻保存的优点是简单易行,保存效果较好。
其步骤如下:1.选择合适的培养基和条件进行培养,确保菌种处于活跃状态;2.菌种分装,常用的分装方式有管内冻存和板块冻存两种。
管内冻存是将菌种转移到小试管中,加入一定的保护剂,如甘油,然后在-80℃下冷冻。
板块冻存是在无菌平板上涂布菌种,用无菌的干胶涂布,然后在-80℃下冷冻;3.将分装好的菌种保存在冷冻机或液氮罐中。
II.冷冻干燥法冷冻干燥法是将微生物菌种先进行冷冻,然后在真空条件下除去水分,最后进行密封保存。
冷冻干燥法的优点是菌种保存稳定性较好,不易失去活力。
其步骤如下:1.选择合适的培养基和条件进行培养,确保菌种处于活跃状态;2.将菌种在低温下冷冻,例如在-80℃冷冻24小时;3.将冷冻的样品放入真空干燥机中,通过极低的压力和温度,使水分从固态直接转变为气态,并在防止湿气生成的条件下除去水分;4.将干燥后的菌种用无菌胶瓶进行密封保存。
III.液氮保存法液氮保存法是将微生物菌种保存在液氮中,保证其温度处于极低的状态。
液氮保存法的优点是保存时间长,保存效果好。
其步骤如下:1.选择合适的培养基和条件进行培养;2.将菌种在低温下冷冻,例如在-80℃冷冻24小时;3.将冷冻的菌种转移到液氮罐中,确保菌种完全浸泡在液氮中;4.密封液氮罐保持其内部温度稳定。
总结起来,微生物菌种保存方法包括冷冻保存、冷冻干燥和液氮保存等多种方法。
科学选用适合的保存方法以及正确操作步骤,可以有效地保护微生物菌种的活力和遗传稳定性,为微生物研究和应用提供有力支持。
微生物菌种的保存方法

微生物菌种的保存方法微生物菌种如何保存呢?下面是小编收集整理的微生物菌种的保存方法,希望对您有所帮助!一、传代保存法:有些微生物当遇到冷冻或干燥等处理时,会很快死亡,因此在这种情况下,只能求助于传代培养保存法。
传代培养就是要定期地进行菌种转接、培养后再保存,它是最基本的微生物保存法,例如*奶等常用生产菌种的保存。
传代保存时,培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。
培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。
若为产*菌种,则应在培养基中添加少量碳*钙。
一般地,大多数菌种的保藏温度以5℃为好,像厌氧菌、霍乱弧菌及部分病原真菌等微生物菌种则可以使用37℃进行保存,而蕈类等大型食用菌的菌种则可以室温直接保存。
传代培养保存法虽然简便,但其缺点也很明显,如:①菌种管棉塞经常容易发霉;②菌株的遗传*状容易发生变异;③反复传代时,菌株的病原*、形成生理活*物质的能力以及形成孢子的能力等均有降低;④需要定期转种,工作量大;⑤杂菌的污染机会较多。
二、液体石蜡覆盖保存法:该法较前一种方法保存菌种的时间更长,适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。
此法可防止干燥,并通过限制氧的供给而达到削弱微生物代谢作用的目的。
其具有方法简便的优点,同时也适用于不宜冷冻干燥的微生物(如产孢能力低的丝状菌)的保存,而某些细菌如固氮菌、乳*杆菌、明串珠菌、分枝杆菌、红螺菌及沙门氏菌等和一些真菌如卷霉菌、小克银汉霉、毛霉、根霉等不宜采用此法进行保存。
即将微生物吸附在适当载体上进行干燥保存的方法。
常用的有方法包括以下几种,如:①土壤保存法:主要用于能形成孢子或孢囊的微生物菌种的保藏。
方法是在灭菌的土壤中加入菌液,立即在室温下进行干燥或使菌体繁殖后再干燥,然后冷藏或在室温下密封保存。
保存用的土壤原则上以肥沃的耕土为宜,土壤需风干、粉碎、过筛和灭菌。
使微生物在土壤中繁殖后进行干燥保存的方法是:取适量土壤(5克),置于塞有棉塞的试管中,加水或加入充分稀释的液体培养基(以含水量为土壤最大持水量的60%为宜),然后高压灭菌。
微生物菌种保藏方法及关键技术

目录
01 一、微生物菌种保藏 方法
02
二、微生物菌种保藏 关键技术
03
三、应用实践及注意 问题
04 四、结论
05 参考内容
微生物菌种是生物科学领域中的重要资源,它们具有广泛的工业和医学应用价 值。然而,微生物菌种的保存和保藏是一项充满挑战性的任务,因为微生物细 胞的生命周期短暂,且对环境条件极为敏感。为了更好地利用和保护这些珍贵 的资源,本次演示将详细介绍微生物菌种保藏方法及关键技术。
2、需要根据菌种的特性和应用需求,选择合适的培养基和培养条件,以保证 菌种的活性和稳定性。
3、在使用液氮保藏方法时,需要注意液氮的纯度和保存容器的密封性等问题, 以免影响菌种的存活率和保藏效果。
4、在菌种保藏过程中,需要注意防止杂菌污染和交叉感染等问题,以保证菌 种的纯度和质量。
5、需要注意菌种的定期检测和维护,及时发现并处理衰退和失活的菌种,以 保持菌种种群的健康和稳定。
三、应用实践及注意问题
在实际应用中,不同微生物菌种的保藏方法具有各自的优势和适用范围。一般 来说,对于一些常见的微生物种类,如细菌、酵母和霉菌等,冷冻保藏和液氮 保藏是常用的保藏方法。在实际操作中,需要根据具体情况选择合适的保藏方 法和操作条件。此外,还需要注意以下问题:
1、在菌种保藏过程中,需要注意菌种的来源和背景信息的记录和整理,以便 更好地了解菌种的特性和进行相应的管理。
2、种子管理
种子管理是微生物菌种保藏的关键环节之一。良好的种子管理包括对菌种的纯 度、质量、稳定性和活性的监控和维护。在菌种保藏过程中,需要定期对菌种 进行纯度检测,确保菌种的纯度和质量。同时,需要根据菌种的生长特性和环 境条件,制定相应的管理措施,包括培养基的选择、培养温度和湿度的控制等, 以维持菌种的稳定性和活性。
微生物菌种保藏方法

微生物菌种保藏方法微生物菌种保藏方法主要包括冷冻保存、冷冻干燥保存和鉴定保存等多种方式。
以下将逐一介绍这些方法。
冷冻保存是一种常用的微生物菌种保藏方法,它的原理是通过将菌种置于低温环境中,减缓细胞新陈代谢和繁殖,使菌株处于休眠状态,从而达到长期保藏的目的。
冷冻保存的步骤包括:培养优良菌株、制备菌种冻存液、冻存及复苏。
制备冻存液时,通常使用亲水性保护剂如甘油、乳糖等,以及抗冻剂如酪蛋白、卵黄等,混合菌株培养物与冻存液,并移液到冻存管中,放置于低温冷冻器中迅速冷冻。
复苏时,将冻存液迅速复苏并接种于适宜的培养基上,培养条件要注意逐步恢复菌株的新陈代谢活力,以避免菌株死亡。
冷冻干燥保存是一种将菌种置于低温和低压条件下脱水处理的保存方法。
冷冻干燥保存的原理是通过脱水将菌株处于休眠状态,并使用适当的干燥保护剂,如蛋白质、糖类等,保护菌株的细胞结构和功能。
制备冷冻干燥菌种的步骤包括:菌株预处理、菌株悬浮液制备、脱水处理、真空干燥、密封保存等。
制备菌株悬浮液时,通常使用含有保护剂的培养基,将菌株培养到对数期,制备含有菌株的悬浮液。
脱水处理时,将菌株悬浮液置于脱水试剂中,使其渐渐减少,最终减至约1%的含水量。
真空干燥时,将脱水后的菌株置于真空干燥器中,利用低温低压的条件下,使菌株中的水分转化为气态水分,实现菌株的干燥。
最后,将干燥的菌株装入密封容器中保存。
鉴定保存是一种将微生物菌株保藏在鉴定标本库中的方法。
该方法适用于那些已经得到准确鉴定和分类的菌株。
鉴定保存的步骤包括:菌株鉴定、鉴定数据记录、鉴定标本制备及识别、存储方法选择和管理等。
菌株鉴定时,通常使用形态学观察、生理生化特性分析以及16S rRNA序列分析等方法,确保菌株的准确性和可重复性。
鉴定数据记录时,要详细记录菌株的相关数据,如菌株来源、鉴定结果、鉴定依据等。
鉴定标本制备及识别时,可以通过制备菌株培养物、制备冻存液等方式保存菌株,并制备鉴定标本。
存储方法选择和管理时,要根据菌株类型和特性选择适当的保存方法,同时要做好菌株信息的管理和查询。
微生物菌种的保藏方法

微生物菌种的保藏方法1微生物菌种的保藏微生物菌种的保藏是生物学研究的重要环节,它也是生物资源的基础。
微生物的保藏需要充分的考虑长期保藏的要求,能有效防止细菌的腐败,缩短菌株检疫和检测所需的时间,还可以提高细菌新特征的研究成果。
但是,由于不同物种之间的差异性,微生物菌种的保藏可能涉及各种复杂的方法,需要更加正确和有效的保藏来保护和维护菌株。
1.1定期替换培养基微生物菌种的保藏通常使用加入防腐剂的培养基进行贮藏,但是由于长时间的贮藏,培养基的成分会逐渐减少,菌株也会逐渐衰老,这可能会影响到菌株的存活率和活跃度。
所以,贮藏前应加入新鲜的培养基和抗生素,定期替换新鲜培养基,以保证菌株的流动性。
1.2贮存条件的控制正确控制贮存条件,如温度、湿度、控制空气的酸碱度等,可以使菌株的活跃性或存活率保持最佳状态。
一般来说,细菌能够在室温(25度)下长期贮存,但是会减慢其增殖和繁殖的速度,同时还要注意湿度,太过潮湿会使细菌存活率降低,尤其是嗜水性细菌;而太过干燥则会造成菌株衰老,影响菌株的存活率并降低其活力。
1.3贮藏容器的选择贮藏容器也是微生物菌种保藏的重要组成部分,不同种类的细菌需要不同种类的容器来保存。
一般来说,普通细菌能够在塑料袋或瓶中长期贮存,只需每隔一段时间就更换新的瓶或袋,但对于致病细菌则必须使用带有封闭口的易破袋。
1.4贮藏环境的更新贮藏环境的更新也是保藏细菌的重要环节。
定期更换菌种本身的培养环境,例如移动菌瓶到新的室温,或将菌瓶置于新的室温环境中,可以有效提高菌种的活跃性,同时也可以更换新的培养基和抗生素,定期更新贮藏环境,有效规避细菌衰老的问题,确保细菌的存活率和增殖率。
以上就是微生物菌种的保藏方法,主要涉及到定期替换培养基、贮存条件的控制、贮藏容器的选择以及环境的更新等,只有正确地运用它们,才能确保菌株的存活率和活动性。
菌种的保藏方法

菌种的保藏方法菌种保藏是微生物学研究中必不可少的一环。
菌种保藏的目的是保存菌种的遗传信息、保持菌种的稳定性和纯度,为后续的研究提供保障。
本文将介绍几种常见的菌种保藏方法。
1. 冻干法冻干法是一种常用的菌种保藏方法。
将菌株培养在适宜的培养基上,生长到适当的密度后,用无菌的冻干管吸取菌液。
将冻干管放入液氮中,冷冻至-80℃,待冻干后,将管子密封,保存在-80℃的冰箱中。
冻干菌株可以保存多年,但是需要注意菌株的密封性和保存温度。
2. 静态液氮法静态液氮法是一种高效、长期保存菌株的方法。
将菌株培养在适宜的培养基上,生长到适当的密度后,用无菌的冻存管吸取菌液。
将菌液加入等量的甘油(最终甘油浓度为20%),混合均匀后分装到冻存管中。
将冻存管放入液氮中,冷冻至-196℃,保存在液氮罐中。
静态液氮保存的菌株可以保存数十年,但是需要注意菌株的密封性和保存温度。
3. 冷藏法冷藏法是一种简单、易行的菌株保存方法。
将菌株培养在适宜的培养基上,生长到适当的密度后,用无菌的冻存管吸取菌液。
将冻存管放入4℃的冰箱中保存。
冷藏法保存的菌株可以保存数个月,但是需要注意菌株的密封性和保存温度。
4. 活体保存法活体保存法是一种将菌株保存在活体状态下的方法。
将菌株培养在适宜的培养基上,生长到适当的密度后,用无菌的冻存管吸取菌液。
将菌液加入等量的甘油(最终甘油浓度为20%),混合均匀后分装到冻存管中。
将冻存管放入冰箱中,温度为4℃-8℃。
活体保存法可以保存数个月,但是需要注意菌株的密封性和保存温度。
5. 长期培养法长期培养法是一种将菌株保存在活体状态下的方法。
将菌株培养在适宜的培养基上,生长到适当的密度后,用无菌的冻存管吸取菌液。
将菌液加入等量的甘油(最终甘油浓度为20%),混合均匀后分装到冻存管中。
将冻存管放入冰箱中,温度为4℃-8℃。
每隔一段时间,将菌株转移到新的培养基上进行培养,以保持菌株的纯度和稳定性。
总之,菌种保藏是微生物学研究中必不可少的一环。
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实验十 微生物菌种保藏方法
[日期:2009-
5-30]来源: 作者:孔庆学
[字体:大
中 小]
实验十微生物菌种保藏方法
菌种是一种重要的生物资源,菌种保藏是重要的微生物基础工作。
菌种保藏就是利用一切条件使菌种不死、不衰、不变,以便于研究与应用。
(一)常规保藏方法
1 目的
1.1 了解菌种保藏的基本原理
1.2 掌握几种常用的菌种保藏方法。
2 原理
菌种保藏的方法很多。
其原理却大同小异,不外乎为优良菌株创造一个适合长期休眠的环境,即干燥、低温、缺乏氧气和养料等。
使微生物的代谢活动处于最低的状态,但又不至于死亡,从而达到保藏的目的。
依据不同的菌种或不同的需求,应该选用不同的保藏方法。
一般情况下,斜面保藏、半固体穿刺,石蜡油封存和砂土管保藏法较为常用,也比较容易制作。
3 材料
3.1菌株
待保藏的适龄菌株斜面
3.2培养基
肉汤蛋白胨斜面,半固体及液体培养基。
3.3 试剂
10%HCl无水氯化钙、石蜡油、五氧化二磷。
3.4 器具
用于菌种保藏的小试管(10*100毫米)数支、5毫升无菌吸管、l毫升无菌吸管等、灭菌锅、真空泵、干燥器、冰箱无菌水、筛子(40目、120目)、标签、接种针、接种环、棉花、牛角匙等等。
4 流程
斜面保藏→半固体穿刺保藏→石蜡油封存→砂土管保藏
5 步骤
5.1斜面保藏
5.1.1流程
标记试管→接种→培养→保藏
5.1.2步骤
5.1.2.1贴标签
取无菌的肉汤蛋白胨斜面数支。
在斜面的正上方距离试管口2-3厘米处贴上标签。
在标签纸上写明接种的细菌菌名、培养基名称和接种日期。
5.1.2.2斜面接种
将待保藏的细菌用接种环以无菌操作在斜面上作划线接种。
5.1.2.3培养
置37恒温箱中培养48小时。
5.1.2.4保藏
斜面长好后,直接放入4℃的冰箱中保藏。
这种方法一船可保藏三个月至半年。
5.2半固体穿刺保藏
5.2.1流程
标记试管→穿刺接种→培养→保藏
5.2.2 步骤
5.2.2.1贴标签
取无菌的半固体肉汤蛋白等直立柱数支,贴上标签,注明细菌菌名、培养基名称和接种日期。
5.2.2.2穿刺接种
用接种针以无菌方式从待保藏的细菌斜面上挑取菌种,朝直立柱中央直刺至试管底部,然后又沿原线拉出。
5.2.2.3培养
置37恒温箱中培养48小时。
5.2.4保藏
半固体直立柱长好以后,放入4℃的冰箱中保藏。
这种方法一般可保藏半年至一年。
5.3石蜡油封存
5.3.1流程
标记试管→接种→培养→加石蜡油→保藏
5.3.2 步骤
5.3.1标记
同5.1.2.1
5.3.2接种
同5.1.2.2
5.3.3培养
同5.1.2.3
5.3.4加石蜡油
无菌操作下将5毫升石蜡油到培养好的菌种上面,加入的量以超过斜面或直立柱1厘米高为宜。
5.3.5保藏:石蜡油封存以后,同样放入4℃冰箱中保存。
也可直接放在低温干燥处保藏。
这种方法保藏期一般为一至二年。
5.4砂土管保藏
5.4.1 流程
制沙土管→灭菌→制菌液→加样→干燥→保藏
5.4.2 步骤
5.4.2.1制作沙土管
选取过40目筛的黄砂,酸洗,再水洗至中性,烘干备用;过120目筛子的黄土备用;按1份土加4份砂的比例均匀混合后,装入小试管,装量1厘米左右。
5.4.2.2灭菌
加压蒸汽灭菌,直至检测无菌为止。
5.4.2.3制备菌液
取3毫升无菌水至待保藏的菌种斜面中,用接种环轻轻刮下菌苔。
震荡制成菌悬液。
5.4.2.4加样
用1毫升吸管吸取上述悬液0.1毫升至砂土管,再用接种环拌匀。
5.4.2.5干燥
把装好菌液的砂土管放入干燥器或同时用真空泵连续抽气,使之干燥。
5.4.2.6保藏
干燥后的砂土管可直接放入冰箱中保藏;也可以用石蜡封住棉花塞后放冰箱中保藏。
(二)冷冻干燥保藏法
1目的
1.1理解冷冻干燥保藏菌种的原理
1.2掌握冷冻干燥保藏菌种的方法。
2 原理
冷冻干燥保藏菌种法可克服简单保藏方法的不足。
利用有利于菌种保藏的—切因素,使微生物始终处于低温、干燥、缺氧的条件下,因而它是迄今为止最有效的菌种保藏法之一。
3 材料
3.1 菌株
待保藏的各种菌种。
3.2试剂
2% HCl;牛奶。
3.3器具
安瓿管、标签、长滴管、脱脂棉、干冰、离心机、冷冻真空装置、高频电火花器。
4 流程
备安瓿管→备脱脂乳→制菌悬液→分装→预冻→真空干燥→保藏→活化5步骤
5.1准备安瓿管
安瓿管先用2%HCl浸泡,再水洗多次,烘干。
将标签放入安培管内,管口塞上棉花,灭菌备用。
5.2制备脱脂乳
用鲜奶经处理或使用脱脂奶粉配兑脱脂牛奶,灭菌,并做无菌试验后备用。
5.3制菌悬液
将无菌牛奶直接加到待保藏的菌种斜面内,用接种环将菌种刮下,轻轻搅乱使其均匀地悬浮在牛奶内成悬浮液。
5.4分装
用无菌长滴管将悬浮液分装入安瓿管底部,每支安培管的装量约为0.9毫升。
(一般装入量为安瓿管球部体积的1/3)
5.5预冻
将分装好的安瓿管在-25至-40之间的干冰酒精中进行预冻1小时;或在冰箱冷冻室进行预东。
5.6真空干燥
预冻以后,将安瓿管放入真空器中,开动真空泵进行干燥。
5.7封管
封管前将安瓿管装入歧管;真空度抽至0.01毫米汞拄后,再用火焰熔封,封好后,要用高频火花器检查各安瓿管的真空情况。
如果管内呈现灰蓝色光,证明保持着真空。
检查时高频电火花器应射向安瓿管的上半部。
5.8保藏
做好的安瓿管应放置在低温避光处保藏。
5.9活化
如果要从中取出菌种恢复培养,可先用75%酒精将管的外壁消毒,然后将安瓿管上部在火焰上烧热,再滴几滴无菌水,使管子破裂。
在用接种针直接挑取松散的干燥样品,在斜面接种。
6结果
6.1简述真空冷冻干燥保藏菌种的原理。
6.2 记录大肠杆菌斜面作液体石蜡封藏和枯草杆菌作沙土管保藏的要点。
7思考
7.1菌种保藏中,石蜡油的作用是什么?
7.2经常使用的细菌菌株,使用那种保藏方法比较好?
7.3沙土管法适合保藏那一类微生物?。