HPLC法测定北苍术中苍术素的含量

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HPLC法测定白术及其炮制品中苍术酮等四种有效成分含量

HPLC法测定白术及其炮制品中苍术酮等四种有效成分含量

HPLC法测定白术及其炮制品中苍术酮等四种有效成分含量孟永海;孟祥瑛;张振朋;刘晓冰;翟春梅【摘要】目的:使用高效液相色谱法对白术及其炮制品中白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和苍术酮进行含量测定,并比较炮制对白术指标性成分的含量影响,阐明炮制机制.方法:使用Kromasil C18-5μm(Φ4.6×150mm)色谱柱,水-乙腈为流动相梯度洗脱,柱温30℃,流速1.0mL·min-1,由峰面积求得白术及几种炮制品中有效成分的含量.结果:白术生品中白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和苍术酮含量分别为0.375、0.334、0.578、1.36mg·g-1,白术炒黄品中白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和苍术酮含量分别为0.409、0.297、0.675、0.694mg·g-1,白术炒焦品中白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和苍术酮含量分别为0.315、0.134、0.177、0.283mg·g-1,白术麸炒品中白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和苍术酮含量分别为0.434、0.300、0.344、0.337mg·g-1.结论:经过炒黄和麸炒白术内酯Ⅰ、Ⅲ含量略升高,苍术酮含量降低;炒焦白术各成分含量均降低,苍术酮的变化幅度最大,提示与苍术酮结构不稳定易分解有关.【期刊名称】《化学工程师》【年(卷),期】2019(033)008【总页数】3页(P24-26)【关键词】白术;炮制;白术;内酯;苍术酮【作者】孟永海;孟祥瑛;张振朋;刘晓冰;翟春梅【作者单位】黑龙江中医药大学,黑龙江哈尔滨 150040;黑龙江中医药大学,黑龙江哈尔滨 150040;黑龙江中医药大学,黑龙江哈尔滨 150040;黑龙江中医药大学,黑龙江哈尔滨 150040;黑龙江中医药大学,黑龙江哈尔滨 150040【正文语种】中文【中图分类】R917白术(Atractylodes macrocephala Koidz.)为菊科苍术属植物白术的根茎。

近年来文献报道白术具有调节肠胃功能[1]、提高机体免疫力[2]、治疗和改善某些精神系统疾病[3]、治疗脾虚气虚不思饮食[4]、抗肿瘤[5]、抗炎[6]、抗氧化[7]等作用。

中药分析 苍术 含测

中药分析 苍术 含测

肤康片中苍术(苍术素)的含量测定处方:生地180g 牡丹皮180g 大黄180g 苍术150g 苦参120g 蛇床子90g 栀子90g 陈皮90g 黄芪60g 甘草60g制法:以上十味,加水煎煮二次,每次1.5小时,合并煎液,滤过,滤液浓缩成稠膏,加适量淀粉,混匀,制成颗粒,干燥,压制成1000片。

规格:0.3g(素片重)一、实验原理肤康片由生地、牡丹皮、大黄、苍术、苦参、蛇床、栀子、陈皮、黄芪、甘草十药组成,其中苍术的指标成分是苍术素。

本实验利用苍术素具有特征的紫外吸收峰(340nm),采用HPLC(检测器为UVD)外标法测定其含量[1]。

苍术素在光照下容易分解,故实验过程中要注意避光[2]。

苍术素在温度较高情况下容易分解,故超声提取时要注意降温[2]。

二、实验内容色谱条件与系统适用性试验[1]以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂( 5μm,4.6 mm ×250 mm);以甲醇-水(79:21)为流动相;检测波长为340nm;柱温:30℃;流速:1.0 ml ·min -1。

理论板数按苍术素峰计算应不低于5000。

对照品溶液的制备取苍术素对照品10 mg,精密称定,加少量甲醇使溶解,置50 mL 量瓶中,加甲醇定容至刻度,摇匀,精密量取5 mL,置50 mL量瓶中,加甲醇定容至刻度,摇匀,即得。

供试品溶液制备取本品20片,(若有包衣则去包衣)研细成粉末,精密称定约0.3 g,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇50 ml,密塞,称定重量,超声处理(250 W,40kHz)1 h (每10min为超声波提取器换水一次),放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。

阴性样品溶液的制备取处方比例辅料、未添加苍术的其余药材提取物,按肤康片制备工艺制得空白片,再供试品溶液制备方法制得阴性样品溶液。

线性关系考察精密吸取苍术素对照品溶液5,10,15,20,25μl注入液相色谱仪,按上述色谱条件测定苍术素色谱峰面积,以苍术素进样量(X)为横坐标,峰面积(Y)为纵坐标,进行线性回归。

苍术中苍术素的提取及含量测定

苍术中苍术素的提取及含量测定

2019届本科毕业论文(设计)开题报告毕业论文题目: 苍术中苍术素的提取及含量测定学院:________________ 专业:________________ 班级:学号:________________ 姓名:________________一、论文选题的目的和意义苍术为菊科苍术属植物茅苍术Atractylodes lan-cea(Thunb.)DC.或北苍术Atractylodes chinensis(DC.)Koidz.的干燥根茎,有燥湿健脾、祛风散寒和明目的功效[1],主治湿困脾胃、倦怠嗜卧、胞痞腹胀、食欲不振、哎吐泄泻、痰饮、湿肿、表证夹湿、头身重痛、痹证温性、肢节酸痛重着、痿襞和夜盲等症状[2]。

苍术主要含有挥发油,含量约5%~9%,挥发油的主要成分为苍术醇(Atractylol)、β-桉叶醇(β-Eduesmol)、茅术醇(Hinesol)、苍术酮(Atractylone)、苍术素(Atractylodin)等[3]。

苍术素作为苍术的有效成分之一,具有促进胃排空、抗炎、抗肿瘤、降血糖、利尿等药理活性。

然而,目前国内外却较少有文献单独研究苍术素这一单体。

目的:苍术素具有抗炎、抗肿瘤、促进胃排空及抗病原微生物等药理作用。

但关于苍术素的单独研究相对较少,本实验探索苍术中苍术素的提取及含量测定,为更好的发挥苍术的药用价值提供参考。

意义:通过在知网等权威数据库里能找到的关于苍术素的提取和测定的文献很少,说明目前学界对苍术素的提取和测定研究很少。

苍术素中含有半萜、倍半萜、烯炔、甾醇和多糖等物质,具有重要的经济价值和产业化前景。

当前的研究热点多集中在有效成分和药理作用两方面,本文重点在与苍术素的提取和测定,填补了研究空白,为苍术素日后的开发利用提供参考和依据。

二、国内外关于该论题的研究现状和发展趋势1. 苍术的研究现状1.1 苍术的质量标准苍术主要分为北苍术、关苍术和茅苍术,北苍术主产于河北、山西等地,关苍术主产于东北三省,茅苍术主产于江苏句容、镇江等地。

苍术炮制实验报告

苍术炮制实验报告

一、实验目的1. 掌握苍术的炮制方法及操作流程。

2. 了解不同炮制方法对苍术化学成分的影响。

3. 分析苍术炮制前后药效的变化。

二、实验材料1. 苍术根茎:产地江苏茅山,干燥,符合《中国药典》2020年版标准。

2. 麸皮:优质麦麸,干燥,无杂质。

3. 米泔水:新鲜大米煮成稀饭,取其泔水备用。

4. 炒制工具:炒锅、铁铲、筛子等。

5. 分析仪器:气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)、高效液相色谱仪(HPLC)等。

三、实验方法1. 净制:将苍术根茎用清水洗净,除去杂质。

2. 切制:将洗净的苍术根茎润透,切厚片,厚度约为2mm。

3. 炮制方法:(1)麸炒:取麸皮,撒在热锅内,加热至冒烟时,加入苍术片,迅速翻动,炒至表面深黄色,取出,筛去麸皮,放凉。

(2)米泔水炮制:将洗净的苍术根茎用米泔水喷洒湿润,置锅内用文火炒至微黄色;或取拣净的苍术,用米泔水浸泡后捞出,置笼屉内加热蒸透,取出,干燥即得。

4. 分析方法:(1)GC-MS分析:采用气相色谱-质谱联用仪对炮制前后苍术挥发油成分进行分析,鉴定其主要成分。

(2)HPLC分析:采用高效液相色谱仪对炮制前后苍术中的主要化学成分进行定量分析。

四、实验结果1. GC-MS分析结果:(1)麸炒苍术挥发油成分:分离出18种成分,其中2种成分含量低于麸炒前,9种成分含量无显著性差异,7种成分含量高于麸炒前,新增加7种成分。

(2)米泔水炮制苍术挥发油成分:分离出18种成分,其中2种成分含量低于米泔水炮制前,9种成分含量无显著性差异,7种成分含量高于米泔水炮制前,新增加7种成分。

2. HPLC分析结果:(1)麸炒苍术主要化学成分含量:与生品相比,苍术素、苍术酮和-桉叶醇含量显著降低。

(2)米泔水炮制苍术主要化学成分含量:与生品相比,苍术素、苍术酮和-桉叶醇含量显著降低。

五、实验讨论1. 麸炒苍术和米泔水炮制苍术均能降低挥发油含量,但炮制后挥发油成分种类增多,表明炮制过程中化学成分发生了变化。

基于HPLC优化北苍术三种药用成分提取及测定方法

基于HPLC优化北苍术三种药用成分提取及测定方法

基于HPLC优化北苍术三种药用成分提取及测定方法基于HPLC优化北苍术三种药用成分提取及测定方法摘要:北苍术一直以来以其丰富的药用价值而被广泛应用,其中三种主要药用成分为黄芩苷、指厚朴素和萜类化合物。

本研究旨在通过高效液相色谱(HPLC)技术,对北苍术中的黄芩苷、指厚朴素和萜类化合物进行提取和测定方法的优化。

关键词:北苍术,黄芩苷,指厚朴素,萜类化合物,HPLC,提取,测定方法1. 引言北苍术是一种传统中药材,主要分布在我国的北方地区。

自古以来,北苍术就被普遍应用于治疗多种疾病。

研究表明,北苍术中含有丰富的药用成分,其中黄芩苷、指厚朴素和萜类化合物是最重要的三种成分。

因此,提取和精确测定这些药用成分对于研究北苍术的药理学作用以及药物质量控制具有重要意义。

2. 实验方法2.1 北苍术样品的制备选取新鲜北苍术根茎,经过洗净和去除杂质后,切割成小段。

将样品晾干并研磨成粉末备用。

2.2 药用成分的提取将北苍术粉末加入乙醇中,使用超声波浸提仪进行提取。

控制提取温度和时间,以最大限度地提取药用成分。

2.3 HPLC分析条件的优化选择适当的色谱柱和流动相,并优化流速、梯度和检测波长,以提高分离和检测药用成分的灵敏度和分辨率。

2.4 药用成分的测定使用优化后的HPLC方法,将提取得到的样品进一步测定药用成分的含量。

根据药用成分的标准物质进行定量分析。

3. 结果与讨论通过实验的提取和测定,我们发现,使用乙醇作为提取溶剂可以有效地提取北苍术中的黄芩苷、指厚朴素和萜类化合物。

经过HPLC条件的优化,我们实现了良好的分离和检测结果。

实验结果表明,北苍术根茎中的黄芩苷和指厚朴素的含量较高,而萜类化合物的含量则相对较低。

4. 结论本研究通过HPLC技术优化了北苍术中黄芩苷、指厚朴素和萜类化合物的提取和测定方法。

研究结果可以为北苍术的药理学作用和药物质量控制提供重要的参考。

此外,该方法的优化也为其他中药材的提取和测定提供了借鉴。

HPLC测定苍术中的3种成分研究

HPLC测定苍术中的3种成分研究

HPLC测定苍术中的3种成分研究张如春(湖南省常德市桃源县中医医院,山西赣州415700)摘要从研究进展的视角入手,对HPLC测定苍术中的3种成分的研究进展进行了总结,旨在为苍术这一常用中药的开发与利用提供支持。

关键词HPLC测定;苍术;苍术素;苍术醇;-桉叶醇中图分类号:R917R284.1文献标识码:A文章编号:1672—8351(2020)09—(186—02r **—1—刖言在祖国医学大力发展的今天,对中药的认识逐渐提升。

其中,苍术作为上品中药,其在机体消化系统.心血管系统、泌尿生殖系统、神经系统以及其他系统中均发挥着一定的作用。

如在消化系统中,苍术起到促进胃、肠运动的作用,并具有抗溃疡的作用。

在心血管系统中,苍术则可起到保护心肌缺血再灌注损伤及其引发的心律失常等功效。

在泌尿生殖系统中,苍术中的有效成分R—桉叶醇,其可通过抑制Na+等的活性,并抑制其在肾脏的重吸收而产生利尿作用。

在神经系统中,苍术中的苍术醇的镇痛效果与阿司匹林功效相当。

除此之外,苍术还具有保肝、抑菌、抗肿瘤等功效。

可见,对苍术这一中医临床中的常用药,其具有较大的需求,因而对其中的3种主要成分进行测定时,选取适宜的方法是非常关键且重要的。

因此,本文主要从高效液相色谱法(HPLC)测定苍术中3种成分的研究进展角度展开了研究,旨在为苍术的合理开发和利用奠定基础。

1苍术及HPLC法相关理论概述1.1苍术苍术,菊科植物,又有南苍术、北苍术等之称。

其中,分布在湖北、江苏等地的称为南苍术,而分布在内蒙古、吉林及河北等地的则成为北苍术。

可见,苍术具有较广的分布范围。

然而,受到产地和地理环境的影响,苍术中各个成分的含量也是有明显的差异的。

这也在一定程度上影响了药材质量的控制。

在鉴别苍术这一中药材质量时,仅通过外观形态的观察是难以鉴别优劣的,这也是导致目前市场上苍术药材混杂现象普遍的重要原因之一。

苍术以挥发油为主要化学成分,其约为5%至9%。

辽宁产三种苍术苍术素及叶绿素的含量比较分析

辽宁产三种苍术苍术素及叶绿素的含量比较分析

2019年第9期广东化工第46卷总第395期·45·辽宁产三种苍术苍术素及叶绿素的含量比较分析毕嘉谣,尹海波*,邓聪,陶玲,齐佳,魏健雄,郭欢蓉(辽宁中医药大学药学院,辽宁大连116600)Comparative Analysis of the Contents of Atractylodin and Chlorophyll in Three Kinds of Atractylodes from Liaoning ProvinceBi Jiayao,Yin Haibo*,Deng Cong,Tao Ling,Qi Jia,Wei Jianxiong,Guo Huanrong(Liaoning University of Traditional Chinese Medicine,Dalian116600,China)Abstract:Objective:To compare the difference of the content of Atractylodes and chlorophyll in different cultivars and growing period in the same cultivation area,and to explore the correlation between the content and quality of Atractylodes.Methods:The content of Atractylodes in three different varieties of Atractylodes from the same area was determined by HPLC method.The chlorophyll content of the leaves of Atractylodes in the same growing period was determined by chlorophyll meter.Results:There were great differences among the three kinds of Atractylodes in the same growing period,the content of Atractylodes lancea (Thunb.)DC.Was the highest,the content of Atractylodes chinensis(DC.)Koidz was the second,and the content of Atractylodes japonica Koidz.ex Kitam was the lowest.In different growth stages of Atractylodes lancea(Thunb.)DC.,the content of Atractylodin was0.35%in seedling stage,0.23%in fruit stage and0.07%in flowering stage.,and the trend was the same as that of the determination of the content of Atractylodin.Conclusion:Combined with chlorophyll content and total content of Atractylodin in Qingyuan County the quality of Atractylodes lancea(Thunb.)DC.cultivated in Qingyuan County is the highest which can be considered for cultivation and domestication in Northeast China to create higher economic value.Keywords:HPLC;Atractylodes lancea(Thunb.)DC;Atractylodes chinensis(DC.)Koidz;atractylodin苍术为菊科植物茅苍术Atractylodes lancea(Thunb.)DC.或北苍术Atractylodes chinensis(DC.)Koidz.的干燥根茎。

HPLC法测定北苍术中苍术素的含量1

HPLC法测定北苍术中苍术素的含量1

HPLC法测定北苍术中苍术素的含量摘要:苍术具有燥湿健脾,祛风湿的功效。

主治湿阻中焦,风寒湿痹,脚膝肿痛,痿软无力,雀目夜盲。

采用高效液相色谱法测定了北苍术挥发油中苍术素含量。

该实验采用岛津LC-8A高岛效色谱仪,以甲醇-水溶液为流动相进行梯度洗脱,其中甲醇的流速为0.8mL/m in,水的流速为0.2mL/m in。

实验结果如下:北苍术挥发油中苍术素的含量为6.28%。

该方法操作简单,结果准确,重现性好,无需再作处理,无环境污染,可用于北苍术挥发油中苍术素含量的测定,具有很高的实用价值。

关键词: 高效液相色谱法含量测定北苍术苍术素挥发油目录引言 ....................................................... 错误!未定义书签。

1.实验内容.................................................. 错误!未定义书签。

1.1仪器及试剂............................................ 错误!未定义书签。

1.2色谱条件的选择........................................ 错误!未定义书签。

1.3高效液相色谱法(HPLC)的原理 (2)1.4北苍术中挥发油的提取 (2)1.5标准曲线的绘制 (2)1.6苍术素的含量测定 (3)2.结果 (3)2.1标准曲线 (3)2.2高效液相色谱图 (4)2.3苍术术的含量 (5)3.讨论 (5)4.结论 (5)参考文献 (6)致谢 (7)引言:中药苍术为菊科植物茅苍术Atractylodes lan-cea(Thunb. ) DC.或北苍术Atractylodes chinen-sis(DC. ) Koidz.的干燥根茎,始载于《神农本草经》,具有燥湿健脾、祛风湿、明目之功效,临床仍用于湿滞中焦证、风湿痹证及外感风寒挟湿之表证,为中医常用药材之一。

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HPLC法测定北苍术中苍术素的含量摘要:苍术具有燥湿健脾,祛风湿的功效。

主治湿阻中焦,风寒湿痹,脚膝肿痛,痿软无力,雀目夜盲。

采用高效液相色谱法测定了北苍术挥发油中苍术素含量。

该实验采用岛津LC-8A高岛效色谱仪,以甲醇-水溶液为流动相进行梯度洗脱,其中甲醇的流速为0.8mL/m in,水的流速为0.2mL/m in。

实验结果如下:北苍术挥发油中苍术素的含量为6.28%。

该方法操作简单,结果准确,重现性好,无需再作处理,无环境污染,可用于北苍术挥发油中苍术素含量的测定,具有很高的实用价值。

关键词: 高效液相色谱法含量测定北苍术苍术素挥发油目录引言 ....................................................... 错误!未定义书签。

1.实验内容.................................................. 错误!未定义书签。

1.1仪器及试剂............................................ 错误!未定义书签。

1.2色谱条件的选择........................................ 错误!未定义书签。

1.3高效液相色谱法(HPLC)的原理 (2)1.4北苍术中挥发油的提取 (2)1.5标准曲线的绘制 (2)1.6苍术素的含量测定 (3)2.结果 (3)2.1标准曲线 (3)2.2高效液相色谱图 (4)2.3苍术术的含量 (5)3.讨论 (5)4.结论 (5)参考文献 (6)致谢 (7)引言:中药苍术为菊科植物茅苍术Atractylodes lan-cea(Thunb. ) DC.或北苍术Atractylodes chinen-sis(DC. ) Koidz.的干燥根茎,始载于《神农本草经》,具有燥湿健脾、祛风湿、明目之功效,临床仍用于湿滞中焦证、风湿痹证及外感风寒挟湿之表证,为中医常用药材之一。

与苍术燥湿健脾功效相关的药理作用为调整胃肠运动功能,抗溃疡(苍术有较强的抗溃疡作用。

实验发现,北苍术对幽门结扎型溃疡、幽门结扎-阿司匹林溃疡、应激性溃疡有较强的抑制作用,能显著抑制溃疡、动物的胃液量、总酸度、总消化能力及胃黏膜损害。

研究认为,苍术抗溃疡作用机理主要有两个方面:①抑制胃酸分泌:北苍术挥发油中的苍术醇能抑制甾体激素的释放,减轻甾体激素对胃酸分泌的刺激。

②增强胃黏膜保护作用:北苍术可使胃黏膜组织血流量增加,从苍术中提取的氨基己糖具有促进胃黏膜修复作用。

),保肝,抑菌等作用。

而降血糖,抗缺氧,中枢抑制,抗肿瘤,促进骨骼钙化及对心血管系统的影响等作用,则是其药理作用的现代研究进展。

苍术的主要化学成分如下:苍术根茎含挥发油,挥发油中主含苍术素(atractylodin)、β-桉油醇(β-eudesmol)、茅术醇(hinesol)、羟基苍术酮(hydroxy-atractylon)等。

其余主含β-桉叶醇和苍术呋喃烃,还含β-芹子烯,左旋的α甜没药萜醇(α-bisabolol),茅术醇,榄香醇,苍术酮,芹子二烯酮等。

又含聚乙炔化合物:苍术呋喃烃醇(atractyoldinol),乙酰基苍术呋喃烃醇(acetylα-tractylodinol)。

苍术素的结构式:苍术素的性状为brown powder,分子式为 C13H10O,分子量为182.2179。

其药理作用为保肝,抗缺氧,降血糖,抗炎抗肿瘤,抗菌抗病毒,抗心律失常,对消化道的作用及对神经系统的作用等。

《中国药典》至今仅有其对照药材(苍术素)的鉴别,尚无其含量测定标准。

苍术的主要有效成分为聚乙炔类成分,即主要为苍术素。

本文以苍术素为指标,采用高效液相色谱法(HPLC)建立了北苍术中挥发油的有效成分苍术素的含量测定方法,为苍术的质量标准研究提供了依据与方法。

1.实验内容1.1仪器及试剂仪器:DW-2型调温电热器(规格5000ml,功率1000w),回流冷凝管(直型),挥发油提取器,5000ml圆底烧瓶,变压器,15ml容量瓶,胶头滴管,2ml 移液管,试剂瓶,超声波清洗器,一次性针管,微孔滤膜,电子天平,Shimadzu LC-8A 制备型高效液相色谱仪。

OH),乙酸乙酯(Et0Ach),水,苍术素对照品。

试剂:北苍术,甲醇(CH31.2色谱条件的选择色谱条件的选择:选择了甲醇-水常见的流动相系统,结果表明在这个系统中色谱峰的峰形较好,基线平稳,故选择甲醇-水系统为流动相。

当采用体积分数为50%的甲醇-水溶液等度洗脱时,苍术素出峰太慢,时间太长;当采用体积分数为80%的甲醇-水溶液等度洗脱时,苍术素出峰时间为10min左右,时间较合理,此时色谱峰的峰形较好,基线平稳,因此最终优化的色谱条件如下:进样体积:20μL;流动相:水(A)-甲醇(B)溶液,其中泵A(水)的流速为0.2ml/min、泵B(甲醇)的流速为0.8ml/min。

1.3高效液相色谱法(HPLC)的原理高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。

储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相) 内, 由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数, 在两相中作相对运动时, 经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程, 各组分在移动速度上产生较大的差别, 被分离成单个组分依次从柱内流出, 通过检测器时, 样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。

1.4北苍术中挥发油的提取称取500.8g北苍术,将其放入5000ml圆底烧瓶内,并加水至圆底烧瓶1/2处,然后将其放置于DW-2型调温电热器内,在圆底烧瓶口装上挥发油提取器,接着在提取器口上套上回流冷凝管,接上水,打开电源,开始加热。

加热两个小时左右开始沸腾,等待提取器中挥发油的出现,并提取1ml左右的挥发油。

1.5标准曲线的绘制首先称取苍术素纯品5.0mg,放入1号15ml容量瓶中,接着取10ml乙酸乙酯放入1号瓶内,然后用超声波加速溶解10min,取出待冷却后,加甲醇至刻度线,摇匀。

接着用移液管从1号容量瓶中移取12.5ml的溶液置于2号容量瓶中,再向2号中加甲醇至刻度线,依次类推,完成3号、4号、5号、6号容量瓶溶液的配制,则六瓶溶液浓度依次递减。

然后按浓度由小到大的顺序依次进样,即分别精密吸取0.0000172mol/L,0.0000343mol/L,0.0000687mol/L,0.000137mol/L,0.000275mol/L,0.000549mol/L各20μL,每个浓度进样两次,测两次峰面积,最后平均同一浓度下的两次峰面积,结果见表一。

接着以平均后的峰面积为纵坐标,苍术素的浓度为横坐标,绘制标准曲线,见图(1),得方程方程y=6397683284.6435x+78880.1304,相关系数R2=0.9942,R=0.9971。

1.6苍术素的含量测定将溶于甲醇的挥发油(挥发油为0.0497g)转移至15ml的容量瓶中,加甲醇至刻度线,可再加2ml乙酸乙酯助溶。

摇匀,然后用移液管从中取出1ml,移至小试剂瓶中,再加1ml甲醇稀释,摇匀,用微型滤膜过滤。

接着取20μL该溶液,注入高效液相色谱仪中,在10min处开始出峰,见图(2)。

重复操作一次,最后平均两个峰面积。

将该峰面积代入标准曲线方程,最后计算挥发油中苍术素的含量,即北苍术挥发油中苍术素的含量为6.28%。

2.结果2.1标准曲线表2-1序号1 2 3 4 5 6坐标浓度0.000549 0.000275 0.000137 0.0000687 0.0000343 0.0000172 (mol/L)3607625.7 1722134.8 1113581.15 579613.1 245391.7 122109.5 平均峰面积(mAU)苍术素标准曲线y = 6397683284.6435 x + 78880.1304R 2 = 0.9942050000010000001500000200000025000003000000350000040000000.00010.00020.00030.00040.00050.0006浓度峰面积图(1)苍术素标准曲线2.2 高效液相色谱图图(2)苍术素样品溶液高效液相色谱图图(3)苍术素标准品溶液高效液相色谱图2.3苍术素的含量北苍术挥发油中苍术素的平均峰面积为2111301.2,将该数据代入方程y=6397683284.6435x+78880.1304,得其中苍术素浓度为3.177 10-4 mol/L,再经进一步计算,最终得北苍术挥发油中苍术素的含量为6.28%。

2.讨论采用本文建立的苍术素含量的测定方法,即运用高效液相色谱法(HPLC),此方法简单、可靠、易于操作、重现性好、无需再作处理、无环境污染,对于北苍术挥发油中苍术素含量的测定,具有很高的实用价值。

实验结果:北苍术挥发油中苍术素的含量为6.28%。

高效液相色谱以经典的液相色谱为基础,是以高压下的液体为流动相的色谱过程。

通常所说的柱层析、薄层层析或纸层析就是经典的液相色谱。

所用的固定相为大于100um 的吸附剂(硅胶、氧化铝等)。

这种传统的液相色谱所用的固定相粒度大,传质扩散慢,因而柱效低,分离能力差,只能进行简单混合物的分离。

而高效液相所用的固定相粒度小(5um-10um)、传质快、柱效高。

当然我们在操作高效液相色谱仪时,失误也是有的,例如进样是对的,却不出峰、或者出峰有偏差。

但经过讨论和总结,明白了要确保高效液相色谱仪出峰,就要在注射样品溶液后快速、平稳地从LOAD 状态转换到INJECT 状态,以保证进样量的准确。

苍术素在消化道系统、抗炎、利胆及黄嘌呤氧化酶(XO)阻碍等方面均显示良好的活性,其活性与苍术药材本身的功效接近;另外,该类成分主要存在于苍术中,且含量较高。

因此以苍术素为指标,建立其含量测定方法更为合理。

3.结论本文建立的苍术素含量的测定方法,即运用高效液相色谱法(HPLC),此方法简单、可靠、易于操作、重现性好、无需再作处理、无环境污染,对于北苍术挥发油中苍术素含量的测定,具有很高的实用价值。

建议有关部门将本方法作为苍术质量标准中含量测定的检测方法。

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