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分子生物学 复习提纲
分子生物学复习提纲免责声明：本资料仅供临床医学10级学习交流使用，基本覆盖上课重点。
由于课程的特殊性，特列成专题形式，个专题中重复部分在相应专题中都会覆盖。
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第一讲基因表达调控（转录水平的调节是基因表达调控的关键）分子生物学：是以生物大分子为研究对象，从分子水平去研究并解释一切生物学现象并在分子水平上改造和利用生物的一门新兴科学。
基因：编码RNA或蛋白质的全部核苷酸序列，包括结构基因和调控基因。
基因组：细胞或生物体中一套完整单倍体的遗传物质的总和，包括所有的基因和基因间区。
结构基因：编码RNA或蛋白质的核苷酸序列。
（原核：多顺反子、无内含子；真核：单顺反子、有内含子）转录单位：从启动子到转录终止子之间的DNA节段。
基因表达：是指DNA携带的遗传信息通过转录传递给RNA，mRNA通过翻译将基因的遗传信息在细胞内得以表达，合成具有生物功能的各种蛋白质的过程。
基因表达调控：是指对基因组中某一基因或一些功能相近的基因表达开启、关闭和表达强度的直接调节。
遗传密码：mRNA上按5’到3’方向排列的每三个核苷酸称遗传密码。
内含子：DNA或RNA中的非编码序列。
外显子：DNA或RNA中的编码序列。
多顺反子：一个结构基因转录产生一条mRNA ,编码几条功能相关的多肽链。
单顺反子：一个结构基因转录产生一条mRNA ,编码一条多肽链的生成。
启动子：是转录开始时RNA聚合酶识别、结合并开始转录起始所需的一段DNA序列。
终止子：提供转录终止信号的一段DNA序列。
增强子：能加强其上游或下游基因转录的DNA序列。
SD序列：mRNA5’端在起始密码子AUG 上游3～11bP处，含A-G 短序列，容易与16S r RNA3’-端含U-C 序列互补配对，称为SD 序列，它对mRNA与核糖体的有效结合并翻译至关重要。
开放阅读框ORF：始于起始密码子并终于终止密码子的一串密码子所组成的核苷酸序列。
《临床分子生物学检验》复习题
《临床分子生物学检验》练习题及答案一, 名词解释1、基因能够表达和产生蛋白质和RNA的DNA序列,是决定遗传性状的功能单位. 2、端粒:以线性染色体形式存在的真核基因组DNA末端都有一种特殊的结构叫端粒.该结构<br>是一段DNA序列和蛋白质形成的一种复合体,仅在真核细胞染色体末端存在.3、启动子:是RNA聚合酶特异性识别和结合的DNA序列.4、增强子:位于真核基因中远离转录起始点,能明显增强启动子转录效率的特殊DNA序列.它可位于被增强的转录基因的上游或下游,也可相距靶基因较远.5、基因表达:是指生物基因组中结构基因所携带的遗传信息经过转录,翻译等一系列过程,合成特定的蛋白质,进而发挥其特定的生物学功能和生物学效应的全过程. 6、信息分子:调节细胞生命活动的化学物质.其中由细胞分泌的调节靶细胞生命活动的化学物质称为细胞间信息分子;而在细胞内传递信息调控信号的化学物质称为细胞内信息分子.7、受体:是存在于靶细胞膜上或细胞内能特异识别生物活性分子并与之结合,进而发生生物学效应的的特殊蛋白质.8、分子克隆:在体外对DNA分子按照即定目的和方案进行人工重组,将重组分子导入合适宿主,使其在宿主中扩增和繁殖,以获得该DNA分子的大量拷贝.9、载体:能在连接酶的作用下和外源DN**段连接并运送DNA分子进入受体细胞的DNA分子.10、转化:指质粒DNA或以它为载体构建的重组DNA导入细菌的过程.11、感染:以噬菌体,粘性质粒和真核细胞病毒为载体的重组DNA分子,在体外经过包装成具有感染能力的病毒或噬菌体颗粒,才能感染适当的细胞,并在细胞内扩增.12、转导:指以噬菌体为载体,在细菌之间转移DNA的过程,有时也指在真核细胞之间通过逆转录病毒转移和获得细胞DNA的过程.13、转染:指病毒或以它为载体构建的重组子导入真核细胞的过程.14、DNA变性:在物理或化学因素的作用下,导致两条DNA链之间的氢键断裂,而核酸分子中的所有共价键则不受影响.15、DNA复性:当促使变性的因素解除后,两条DNA链又可以通过碱基互补配对结合形成16、癌基因:是细胞内控制细胞生长的基因,具有潜在的诱导细胞恶性转化的特性.当癌基因17、核酶:是一种可以催化RNA切割和RNA剪接反应的由RNA组成的酶,可以作为基因表达和病毒复制的抑制剂.18、DNA变性:在物理或化学因素的作用下,导致两条DNA链之间的氢键断裂,而核酸分子中的所有共价键则不受影响.19、反义RNA:碱基序列正好与有意义的mRNA互补的RNA称为反义RNA.可以作为一种调控特定基因表达的手段20、DNA复性:当促使变性的因素解除后,两条DNA链又可以通过碱基互补配对结合形成DNA双螺旋结构.21、退火:指将温度降至引物的TM值左右或以下,引物与DNA摸板互补区域结合形成杂交链.22、定量PCR:基因表达涉及的转录水平的研究常需要对mRNA进行定量测定,对此采用的PCR技术就叫定量PCR.23、基因表达:是指生物基因组中结构基因所携带的遗传信息经过转录,翻译等一系列过程,合成特定的蛋白质,进而发挥其特定的生物学功能和生物学效应的全过程. 24、基因治疗:一般是指将限定的遗传物质转入患者特定的靶细胞,以最终达到预防或改变特殊疾病状态为目的治疗方法.25、管家基因:在生物体生命的全过程都是必须的,且在一个生物个体的几乎所有细胞中持续表达的基因.26、SD序列:转录出的mRNA要进入核糖体上进行翻译,需要一段富含嘌呤的核苷酸序列与大肠杆菌16S rRNA3,末端富含嘧啶的序列互补,是核糖体的识别位点. 27、核酸探针:探针是指能与某种大分子发生特异性相互作用,并在相互作用之后可以检测出来的生物大分子.核酸探针是指能识别特异碱基顺序的带有标记的一段DNA或RNA分子.28、周期蛋白:是一类呈细胞周期特异性或时相性表达,累积与分解的蛋白质,它与周期素依赖性激酶共同影响细胞周期的运行.二, 问答题1、影响DNA稳定性的因素有哪些氢键，磷酸酯键，碱基堆积力，疏水作用力2、受体的特点有哪些？1,高度专一性;2,高度亲和性;3,可逆性;4,可饱和性;5,特定的作用模式3、什么是基因组？细胞或生物体的一套完整单倍体的遗传物质的总和.4、基因工程的定义是什么？有目的的通过分子克隆技术,人为的操作改造基因,改变生物遗传性状的系列过程.5、请问哪些条件可促使DNA复性(退火)降低温度.pH值和增加盐浓度可以促进DNA复性(退火)6、原核基因组的特点有哪些？①为一条环状双链DNA;②只有一个复制起点;③具有操纵子结构;④绝大部分为单拷贝;⑤基因一般是连续的,无内含子;⑥重复序列很少.7、病毒基因组的特点有哪些①种类单一;②单倍体基因组:每个基因组在病毒中只出现一次;③形式多样;④大小不一;⑤基因重叠;⑥动物/细菌病毒与真核/原核基因相似:内含子;⑦具有不规则的结构基因;⑧基因编码区无间隔:通过宿主及病毒本身酶切;⑨无帽状结构;⑩结构基因没有翻译起始序列.8、真核基因组的特点有哪些①真核生物基因组远大于原核生物基因组,结构复杂,基因数庞大,具有多个复制起点;②基因组DNA与蛋白质结合成染色体,储存于细胞核内;③真核基因为单顺反子,而细菌和病毒的结构基因多为多顺反子;④基因组中非编码区多于编码区;⑤真核基因多为不连续的断裂基因,由外显子和内含子镶嵌而成;⑥存在大量的重复序列;⑦功能相关的基因构成各种基因家族;⑧存在可移动的遗传因素;⑨体细胞为双倍体,而精子和卵子为单倍体.9、乳糖操纵子的组成有哪些？大肠杆菌乳糖操纵子含Z,Y,A三个结构基因,分别编码半乳糖苷酶,透酶和半乳糖苷乙酰转移酶,此外还有一个操纵序列O,一个启动子P和一个调节基因I.10、什么是转基因动物？是指用人工方法将外源基因导入或整合到基因组内,并能稳定传代的一类动物11、什么是限制性核酸内切酶是细菌产生的一类能识别和切割双链DNA分子内特定的碱基顺序的核酸水解酶.12、基因突变的类型有哪些？①点突变:DNA大分子上一个碱基的变异.分为转换和颠换.②缺失:一个碱基或一段核苷酸链从DNA大分子上消失.③插入:一个原来没有的碱基或一段原来没有的核苷酸链插入到DNA大分子中间.④倒位:DNA链内重组,使其中一段方向倒置.12、简述转基因动物的主要应用有哪些（1）建立用于研究外源基因表达调控体系;（2）建立医学中常用的疾病模型;（3）培育动物新品种;13、什么是细胞癌基因？存在于正常的细胞基因组中,与病毒癌基因有同源序列,具有促进正常细胞生长,增殖,分化和发育等生理功能.在正常细胞内未激活的细胞癌基因叫原癌基因,当其受到某些条件激活时,结构和表达发生异常,能使细胞发生恶性转化.14、什么是病毒癌基因？存在于病毒(大多是逆转录病毒)基因组中能使靶细胞发生恶性转化的基因.它不编码病毒结构成分,对病毒无复制作用,但是当受到外界的条件激活时可产生诱导肿瘤发生的作用.15、RFLP的定义是什么?RFLP即限制性片段长度多态性,个体之间DNA的核苷酸序列存在差异,称为DNA多态性.若因此而改变了限制性内切酶的酶切位点则可导致相应的限制性片段的长度和数量发生变化,称为RFLP.三、综合题1、实时PCR中两种荧光检测方法各有什么优缺点？（1）染料技术优点：成本较低，无须对引物或探针进行特殊的荧光标记，操作亦比较简单。
临床分子生物学检验复习提纲
临床分子生物学检验复习提纲临床分子生物学是现代医学中非常重要的一个领域，它涉及到了分子生物学和临床医学的结合，以及各种分子生物学技术在临床诊断和治疗中的应用。
以下是一个临床分子生物学检验的复习提纲，希望能够帮助你更好地准备考试。
一、分子生物学基础知识复习1.DNA结构和功能-核苷酸的组成和结构-DNA链的方向性-DNA的雙螺旋结构-DNA复制的过程2.RNA结构和功能-mRNA、tRNA和rRNA的结构和功能-转录和翻译的过程3.基因组和染色体-基因组的组成和结构-染色体结构和功能-遗传密码子表4.基因表达调控-转录调控的机制-翻译调控的机制-转录后调控的机制5.基因突变和遗传变异-突变的类型和机制-染色体缺失、重复和易位等遗传变异二、临床分子生物学技术复习1.PCR技术-PCR的原理和步骤-PCR引物设计和优化-PCR产物的检测和分析2.DNA测序技术- Sanger测序法的原理和步骤-高通量测序技术的原理和应用3.基因组学研究技术-基因芯片技术的原理和应用-下一代测序技术在基因组学研究中的应用4.基因突变检测技术-PCR-RFLP分析-聚合酶链反应单链构象多态性分析-测序检测技术在基因突变检测中的应用5.基因表达分析技术-实时荧光定量PCR- Northern blotting-基因芯片技术在基因表达分析中的应用三、临床分子诊断和治疗复习1.临床遗传病的分子诊断-基因突变检测在临床遗传病诊断中的应用-基因芯片技术在临床遗传病诊断中的应用-高通量测序技术在临床遗传病诊断中的应用2.分子病理学的应用-分子病理学技术在肿瘤诊断中的应用-微卫星不稳定性的检测和分析-液体活检技术在肿瘤诊断中的应用3.分子靶向治疗技术-靶向药物的分子设计原理-靶向药物的应用和限制-基因突变检测在靶向治疗中的应用4.群体遗传学和个体化医疗-群体遗传学研究的意义和方法-个体化医疗的概念和发展-药物基因组学在个体化医疗中的应用。
《临床分子生物学检验》课程教学大纲详解
临床分子生物学检验课程教学大纲详解一、课程简介临床分子生物学检验是一项高科技检测方法，通过基因分析和生物物质的检测，帮助诊断、预防和治疗人类疾病。
本课程将对分子生物学检验从基础理论到实践操作进行全面讲解，帮助学生深刻理解分子生物学检验的意义、目的、方法和应用。
二、教学目标1.了解分子生物学检验的基本原理和方法；2.掌握分子生物学检验的实验操作技能；3.掌握分子生物学检验的数据分析和结果解释技能；4.培养学生分析和解决实际临床问题的能力。
三、教学内容1. 分子生物学基础知识介绍遗传基础知识、DNA与RNA的结构和功能、遗传密码、基因表达调控等基本概念。
2. 分子生物学检验方法（1） DNA、RNA的提取与纯化介绍从样本中提取和纯化DNA和RNA的方法，以及如何保证提取和纯化的质量。
（2） PCR技术介绍聚合酶链式反应（PCR）的基本原理、反应条件、PCR应用等内容，还需介绍扩增条件的设计、引物的设计和合成、扩增产物的检测等相关技术。
（3）四分子检测技术介绍四分子检测技术的基本原理、反应条件、应用范围等内容，并介绍四分子检测中的引物设计、反应条件的优化等相关技术。
（4）基因测序技术介绍基因测序的原理、流程和分析方法等内容，掌握基因测序技术的实验条件和实验方法。
3. 分子生物学检验应用介绍分子生物学检验在生物医学领域中的应用，如病毒检测、肿瘤诊断、遗传性疾病诊断等。
4. 临床分子生物学检验实验对PCR、基因测序等实验操作进行介绍和演示，让学生掌握实验操作技能和规范操作流程，同时注重实验数据处理和结果解释的技巧。
四、教学方法本课程使用的教学方法包括授课、讲解、小组讨论、实验操作练习等多种形式，注重理论联系实际，强调实验操作细节和规范操作流程。
五、教学评价方法采用综合性评价、实验考核等方式进行教学评价，期望通过教学活动，让学生体验到科学研究和实验探究的魅力，锻炼严密的思维和严谨的安全实验习惯。
六、参考书目1.David M. Clark and Nanette J. Pazdernik. Molecular Biology, 2ndedition.2.T. A. Brown. Gene Cloning and DNA Analysis: An Introduction, 5thedition.3.Sanchez-Ruiz and Kremsner. Molecular Diagnosis of InfectiousDiseases.4.Wolfram Ostertag and Navid Zohourian. Molecular Diagnosis ofGenetic Diseases.。
分子生物学复习大纲
分子生物学复习大纲第一章绪论1、分子生物学＊: 是研究核酸、蛋白质等所有生物大分子的形态、结构特征及其重要性、规律性和相互关系的科学。
2、分子生物学研究内容＊:DNA重组技术(又称基因工程)基因表达调控研究生物大分子的结构功能研究(又称结构分子生物学)第二章生物大分子蛋白质；蛋白质是由若干个聚氨基酸(多肽)组成的多聚体。
核酸；核苷酸由三部分组成：戊糖(pentose)，硷基(base)和磷酸根(phosphate group)。
1、决定蛋白质和核酸三维结构的几种非共价相互作用有?：无规则线团(random co):线状多肽链和核酸链含有几种键，这些键中，有的可以自由旋转，在不存在任何链内互相作用的情况下，每个氨基酸或核苷酸将是自由旋转的。
这种自由旋转只受到原子不能占据同一空间的限制。
像这样一种链的三维构象叫无规则线团(random co)。
氢键；生物系统中常见的氢键如下：①C==O…H—N ②—C—OH…O==C ③N—H …N. 核酸中的氢键是由两条链之间的两个配对的核苷酸碱基之间形成的。
疏水相互作用：是指两个微溶于水的分子或分子的某些部分之间的相互作用。
难溶于水的两个分子(可能是两个不同的分子)趋向于缔合。
离子键：是不同的电荷之间相互吸引的结果。
范德华引力：存在于所有分子之间，它们是长期偶极子和电子环流的结果第三章核酸1、DNA的物理化学结构● DNA的一级结构: 是指4种核苷酸的连接及其排列顺序，表明DNA分子的化学构成。
● DNA的二级结构: 是指两条多核苷酸链反向平行盘绕所形成的双螺旋结构。
● DNA的二级结构分两大类：右手螺旋：A—DNA、B—DNA、C—DNA。
根据X射线衍射照片，设想的DNA分子是两条反相平行的多核苷酸链围绕同一中心轴构成的右手螺旋结构（即B-DNA）。
左手螺旋DNA: 即Z-DNA每螺圈12个碱基对，而且Z-DNA双螺旋只有一个槽沟。
2、决定DNA结构的因素?⑴变性和熔解曲线●增色效应：双链DNA缓慢加热，其溶液对紫外光的吸收值增加，叫增色效应(hyperchromic)。
临床分子生物学检验复习提纲定稿版
临床分子生物学检验复习提纲精编W O R D版 IBM system office room 【A0816H-A0912AAAHH-GX8Q8-GNTHHJ8】临床分子生物学检验1.DVA的一级结构是由哪种化学键连接？两条单链间：碱基氢键；相邻碱基间：范德华力；脱氧核苷酸间：3’-5’磷酸二酯键2.可以出现在人体循环系统中的游离核苷酸是？脱氧核苷酸，核糖核酸3.原核生物DNA的复制方式是？θ型半保留复制4.核小体结构中的组蛋白是哪些蛋白各自的作用有5.H2A、H2B、H3、H4：核心颗粒，形成核小体。
H1：连接线上，锁定核小体、参与包装6.PCR体系中抑制Taq酶活性的物质有哪些过量加入什么会减少Mg2+浓度导致Taq酶活性降低7.游离的Mg2+浓度；dNTP、引物和模板DNA等中的磷酸基团，螯合剂如EDTA均可与镁离子结合减少Mg2+浓度。
8.PCR扩增时，链的延伸从什么地方开始对于引物是哪一端模板链呢从引物的3’端开始，方向5’到3’；模板DNA序列的3’端；3’端9.在波长260nm的紫外线下，A值=1时双链DNA的浓度大约相当于？50ug/ml的双链DNA。
（40ug/ml的单链DNA或单链RNA ，33ug/ml的单链寡聚核苷酸）（紫外分光光度法，核酸浓度的鉴定）计算公式：双链DNA ＝ 50×A260样本×稀释倍数÷1000（ug/ul）单链DNA／RNA ＝ 40×A260样本×稀释倍数÷ 1000（ug/ul）单链寡聚核苷酸DNA ＝ 33×A260样本×稀释倍数／1000（ug/ul）10.关于基因的定义正确的是？能编码有功能的蛋白质多肽链或合成RNA所必需的全部核酸序列，是核酸分子的功能单位。
是遗传的结构和功能单位。
一个基因大都包括编码蛋白质多肽链或RNA的编码序列，保证转录和加工所必须的调控序列（启动子，增强子），5’端、3’端非编码序列。
生物分子学复习提纲
分子生物学复习提纲（附考试原题）一、了解基因工程的主要研究成就。
（一）植物基因工程当前已鉴定和克隆化的植物基因有数百种，重组植物的野外试验已达千余宗。
与农业中的除草剂、抗昆虫、抗病（抗真菌、抗病毒）、抗不良环境因素、提高产量的光合作用、以及提高蛋白质有关。
（二）动物基因工程最突出——转基因动物及其发展。
1983年美国将生长激素基因注入小鼠受精卵——超级鼠。
缺点在于其盲目性。
外源性DNA引入受体细胞后可随机地插入受体细胞基因组中的任意位置，容易导致内源性有利基因的破坏和识货或激活有害基因。
表达水平难以预料。
目标：提高基因正常转化的效率，实现基因的定位整合。
（三）基因工程多肽药物与疫苗多肽药物：人胰岛素、人生长激素、干扰素、白细胞介素、组织血纤维蛋白溶酶原激活剂、肿瘤坏死因子、集落刺激因子……疫苗：细菌疫苗：麻风杆菌、百日咳杆菌、淋球菌……病毒疫苗：乙肝、甲肝、带疱、巨细胞病毒……寄生虫疫苗：疟原虫、利什曼虫、血吸虫……（四）基因诊断与基因治疗原指遗传性疾病的诊断，主要利用DNA探针（单链DNA小片段用核素、酶、荧光分子或化学催化剂等标记，之后同被检测的DNA中的同源互补杂交，从而检出所要查明的DNA）技术。
如诊断镰贫、地贫，也可诊断传染性疾病如结核。
多聚酶链反应PCR是一种体外扩增特异性DNA片段的技术。
基因治疗一般指将正常外源基因导入生物体靶细胞内以弥补所缺失的基因、关闭或降低异常表达的基因，以达到治疗遗传性疾病的目的。
方法普片采用逆转录病毒作为载体的基因导入法。
作为载体的逆转录病毒已缺失功能蛋白基因。
目前研究多属于单基因缺陷引起的遗传疾病基因治疗，如血友病，贫血等。
肿瘤和传染病也在研究。
（五）环境检测与净化环境监测：可用基因探针或PCR技术检测水中微生物。
环境净化：重组质粒导入细菌，降解有机物、农药等——超级菌；促进酶工业进步，提升经济效益等。
*二、掌握分子生物学的中心法则。
*三、掌握核酸的基本组成成分、基本性质。
分子生物学复习提要(精)
分子生物学复习提要一、名词解释：1、分子生物学（Molecular Biology）:从分子水平研究生命现象的科学，通过生物的物质基础—核酸、蛋白质、酶等生物大分子的结构、功能及其相互作用等运动规律的研究来阐明生命分子基础，从而探索生命的奥秘。
2、核酸（nucleic acid）:是以核苷酸为基本组成单位的生物大分子，携带和传递遗传信息。
3、DNA的一级结构：DNA中核苷酸的排列顺序称作DNA的一级结构。
4、DNA的二级结构：即双螺旋结构，是指两条脱氧多核苷酸链反向平行盘绕所形成的双螺旋结构。
5、DNA的变性：在某些理化因素的作用下，DNA双链解开成单链的过程。
6、DNA的复性：在适当条件下，变性DNA的两条互补链恢复天然的双螺旋构象，这一现象称为复性。
7、核酸分子杂交：序列互补单链的RNA和DNA，或DNA和DNA，或RNA 和RNA，根据碱基配对原则，借助氢键相连而形成双链杂交分子的过程。
8、基因（gene）：是核酸中贮存遗传信息的遗传单位，是贮存有功能的蛋白质多肽链或RNA序列信息及表达这些信息所必需的全部核苷酸序列9：基因组（genome）:细胞或生物中，一套完整单倍体遗传特质的总和（包括一种生物所需的全套基因及间隔序列）称为基因组10.质粒（plasmid）:是独立于许多细菌及某些真核细胞染色体外共价闭合环状的DNA分子（covalant closed circnlar,cccDNA），能独立复制的最小遗传单位11.质粒的不相容性：当某种质粒在宿主细胞内存在时，将阻止其他质粒进入细胞寄宿，这种细菌质粒不能在相同细胞中同时存在的现象称为质粒的不相容性。
12、假基因：不能转录或转录后生成无功能蛋白质的基因称为假基因。
13、结构基因（structural gene）指能转录成为mRNA、rRNA或tRNA的DNA 顺序。
14、外显子（extron）：真核生物的结构基因是不连续的，其中的编码序列称为外显子。
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(3)比值为1.8的DNA溶液不一定是纯DNA溶液，可能兼有蛋白质、酚、RNA的污染。
(4)2.0是高质量的RNA的标志，但由于RNA二级结构的不同，其读数可能会在1.8〜2.1之间波动。
（5）RNA溶液的pH值会影响A260/A280的读数，在水溶液中A260/A280的比值比在Tris缓冲液（pH7.5）的读数低0.2〜0.3。因此，精确测定RNA的浓度应使用水溶液，精确 测定RNA的纯度应使用TrislOmmol/L （pH7.5）溶液。】
15•原核生物RNA聚合酶的特性有？
原核生物细胞屮只有1种RNA聚合酶，可参与合成mRNA、IRNA和rRNAo
RNA聚合酶催化聚合反应吋需要Mg”或Mn2\该酶无校正功能。
16.PCR反应的特异性取决于？
引物
17.DNA的变性是指？
在某些理化因索作用下，DNA双链解开成两条单链的过程。
变性后其它理化性质变化：
临床分子生物学检验
1.DVA的一级结构是由哪种化学键连接？
两条单链间：碱基氢键；相邻碱基间：范德华力；脱氧核背酸间：3,・亍磷酸二酯键
2•可以岀现在人体循环系统中的游离核昔酸是？
脱氧核昔酸，核糖核酸
3•原核生物DNA的复制方式是？0型半保留复制
4•核小体结构中的组蛋白是哪些蛋白？各自的作用有？
H2A、H2B、H3、H4：核心颗粒，形成核小体。H1：连接线上，锁定核小体、参与包装5.PCR体系中抑制Taq酶活性的物质有哪些？过量加入什么会减少Mg2+浓度导致Taq酶
11・实时荧光定量PCR技术中非特异性荧光染色技术？
SYBR GreenI
12•人类基因组DNA多态性的形式？
限制性片段长度多态性(RFLP)；短序列重复序列(STR);单核昔酸多态性(SNP)
13•常用于菌种鉴定的分子标志物是？
16sRNA14•真核生物染色体的DNA三级结构不是闭环双链超螺旋结构的是？
9. B—地中海贫血患者的基因缺陷主要是？
基因突变中的点突变
10・Taq酶的特性有？
有很高的耐热稳定性
酶量增加使反应特异性下降，酶量过少影响反应产量；
Taq DNA聚合酶无3’一5’外切酶活性，因而无校正功能，在复制新链的过程中会发生碱基 错配；
Taq DNA聚合酶在每次循环中产生的移码突变率为1/30000,碱基替换率为1/8000,因此扩 增的片段越长，错配的机率越高。
50ug/ml的双链DNAo（40ug/ml的单链DNA或单链RNA,33ug/ml的单链寡聚核昔酸） （紫外分光光度法，核酸浓度的鉴定）
计算公式:双链DNA= 50 XA260样本X稀释倍数
4- 1000 (ug/ul)
单链DNA/RNA= 40 XA260样本 X
稀释倍数十1000(ug/ul)
24•限制性内切酶的（通常指II类）特点是？（II类限制性核酸内切酶识别序列特点）
回文结构
GGTACC
CCTAGG
切口：
平端切口一平末端
粘端切口 -粘性末端
【同功异源酶：
來源不同的限制酶，能识别和切割同一位点。
同尾酶：
有些限制性内切酶虽然识别序列不完全相同，但切割DNA后产生相同的粘性末端】 例如：
(5)引物酶和引发体：启动RNA引物链的合成。
(6)DNA连接酶
19•第一个分离到的抑癌基因是？
视网膜母细胞瘤基因(Rb基因)
20.1978年简悦威采用Southen分子杂交技术检测出了什么疾病？
镰状细胞贫血症
21•核酸的分离和纯化中，沉淀DNA的常用试剂是?
常用的有机溶剂有：
乙醇、异丙醇、聚乙二醇 常用的盐类有：
淀粉液化芽胞杆菌
（Bacillus amyloliguefaciens） H株
第1种限制性内切酶，命名为Bam HI
25以mRNA为模板合成cDNA的酶是（RT—PCR内容）？
逆转录酶
26.Sanger法DNA测序时ddNTP（双脱氧核昔酸，少一个轻基）的作用是？
ddNTPs是反应终止剂，可以当作正常碱基参与复制，一旦链入DNA中，其后就不能再继 续连接。
23•对于等位基因突变位点已被阐明的一些遗传病，可以采用基因诊断的方法是？
直接诊断：
Southern印迹技术
多重PCR技术
PCR•限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）
等位基因特异性寡核昔酸（ASO）
DNA芯片技术（DNAchip）
单链构彖多态性（SSCP）
变性梯度凝胶电泳（DGGE）
DNA序列分析（DNAsequencing）
活性降低?
游离的Mg?+浓度；dNTP、引物和模板DNA等中的磷酸基团，螯合剂如EDTA均可与镁离 子结合减少浓度。
6.PCR扩增时，链的延伸从什么地方开始？对于引物是哪一端？模板链呢？
从引物的3,端开始,方向5倒3'；模板DNA序列的3,端;3,端
7•在波长260nm的紫外线下，A值=1时双链DNA的浓度大约相当于?
单链寡聚核昔酸DNA= 33 XA260样本
X稀释倍数 /1000(ug/ul)
&关于基因的定义正确的是？
能编码有功能的蛋白质多肽链或合成RNA所必需的全部核酸序列，是核酸分子的功能单位。 是遗传的结构和功能单位。
一个基因大都包插编码蛋白质多肽链或RNA的编码序列，保证转录和加工所必须的调控序 列（启动子，增强子），5,端、3,端非编码序列。
27Southern印迹法的步骤有？
1待测核酸样品的制备②琼脂糖凝胶电泳分离待测DNA样品③电泳凝胶预处理④转膜⑤ 探针标记⑥预杂交⑦Southern杂交⑧洗膜⑨放射性自显影检测
增色效应粘度下降
比旋度下降浮力密度升制的酶有哪些？
(1)DNA聚合酶
(2)拓扑异构酶：：兼具内切酶和连接酶活力，能迅速将DNA超螺旋或双螺旋紧张状态变 成松驰状态，便于解链。
(3)DNA解链酶
(4)单链结合蛋白(SSB)：结合在解开的DNA单链上，防止重新形成双螺旋。
酷酸钠、醋酸钾、醋酸钱、氯化钠、氯化钾、氯化镁等。
22•通过紫外分光光度法可对核酸纯度进行鉴定，怎么鉴定？反过来是否成立？否 通过A260与A280的比值來判断有无蛋白质的污染。
在TE缓冲液中：
纯DNA的A260/A280比值为1.8；
纯RNA的A260/A280比值为2.0
【注意事项:
(1)蛋白质及酚的污染均可使比值下降，可通过蛋白质在280nm的高吸收峰与酚在270nm的髙吸收峰来鉴别。