血液实验实验报告汇总
血液系统实验报告

一、实验目的1. 了解血液的基本组成和功能;2. 掌握血液凝固的基本原理和影响因素;3. 学会使用血细胞计数板进行血细胞计数;4. 培养实验操作能力和观察能力。
二、实验原理血液是人体内循环系统的重要组成部分,具有运输氧气、营养物质和代谢废物,维持内环境稳定等功能。
血液凝固是血液由流动状态转变为凝胶状态的过程,对于防止出血、修复损伤具有重要意义。
血液凝固过程大致分为三个阶段:凝血酶原激活物形成、凝血酶原激活成凝血酶、纤维蛋白原转变为纤维蛋白。
影响血液凝固的因素有:温度、pH值、凝血因子、抗凝血物质等。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜血液、生理盐水、肝素钠、钙离子、pH试纸、血细胞计数板、显微镜等;2. 实验仪器:恒温箱、试管、移液器、滴定管、pH计等。
四、实验步骤1. 观察血液凝固过程取两支试管,分别加入新鲜血液和肝素钠溶液。
观察两支试管中血液凝固的时间,记录数据。
2. 测定血液pH值用pH试纸测定新鲜血液的pH值,记录数据。
3. 测定血液凝固时间取三支试管,分别加入新鲜血液、生理盐水和钙离子溶液。
观察三支试管中血液凝固的时间,记录数据。
4. 血细胞计数取血细胞计数板,将新鲜血液稀释后滴入计数板,在显微镜下观察红细胞、白细胞和血小板的数量,记录数据。
5. 影响血液凝固因素的实验分别设置不同温度、pH值、凝血因子和抗凝血物质的实验组,观察血液凝固情况,记录数据。
五、实验结果与分析1. 观察血液凝固过程新鲜血液凝固时间为X秒,肝素钠溶液凝固时间为Y秒。
2. 测定血液pH值新鲜血液pH值为Z。
3. 测定血液凝固时间新鲜血液凝固时间为A秒,生理盐水凝固时间为B秒,钙离子溶液凝固时间为C秒。
4. 血细胞计数红细胞数量为D个/μl,白细胞数量为E个/μl,血小板数量为F个/μl。
5. 影响血液凝固因素的实验在不同温度、pH值、凝血因子和抗凝血物质的实验组中,观察血液凝固情况,记录数据。
六、实验讨论1. 通过观察血液凝固过程,了解血液凝固的基本原理和影响因素;2. 通过测定血液凝固时间,掌握不同条件对血液凝固的影响;3. 通过血细胞计数,了解血液中红细胞、白细胞和血小板的数量;4. 通过影响血液凝固因素的实验,了解温度、pH值、凝血因子和抗凝血物质对血液凝固的影响。
医学检验血液实习报告总结范文示例

医学检验血液实习报告总结范文示例在医学检验血液科室的实习生活已经告一段落,这段时间里,我收获了许多宝贵的经验和知识,也对医学检验这个专业有了更深入的理解和认识。
刚进入血液科室时,我内心充满了期待和紧张。
期待是因为能够接触到真实的临床样本和先进的检验设备,紧张则是担心自己无法胜任工作。
但在带教老师的耐心指导和同事们的热情帮助下,我很快适应了实习生活。
实习期间,我主要参与了血常规、凝血功能、血型鉴定等常见血液检验项目。
在血常规检验中,我学会了如何正确操作血细胞分析仪,准确分析白细胞、红细胞、血小板等各项指标,并能对异常结果进行初步判断。
通过观察血涂片,我能够识别各种血细胞的形态和异常变化,这对于诊断贫血、感染等疾病具有重要意义。
凝血功能检测是一项较为复杂的检验项目。
在实习过程中,我掌握了凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)等指标的检测方法和临床意义。
同时,我也了解到,凝血功能异常可能与多种疾病相关,如肝病、血友病、弥散性血管内凝血等,准确的检测结果对于临床治疗方案的制定起着关键作用。
血型鉴定是输血前必不可少的检验项目。
我熟悉了 ABO 血型和 Rh 血型的鉴定方法,包括正定型和反定型。
在这个过程中,我深刻体会到血型鉴定的准确性对于保障输血安全的重要性,任何一点疏忽都可能导致严重的后果。
除了实际操作技能的提升,我在实习中还学到了许多关于质量控制和生物安全的知识。
在血液检验中,质量控制至关重要。
我们需要定期对仪器进行校准和维护,确保检测结果的准确性和可靠性。
同时,要严格按照标准操作规程进行样本采集、处理和检测,避免因操作不当导致的误差。
在生物安全方面,血液样本可能携带各种病原体,因此必须严格遵守防护措施和操作规范,防止感染的发生。
我们要正确穿戴个人防护用品,如手套、口罩、护目镜等,对废弃物进行分类处理,做好实验室的清洁和消毒工作。
在与临床医生的沟通交流中,我也学到了很多。
血液分层分析实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 了解血液的组成和功能;2. 掌握血液分层实验的操作步骤;3. 通过观察血液分层现象,分析各层成分的特点。
二、实验原理血液是由血浆和血细胞组成的。
血浆占血液总体积的55%,主要由水、蛋白质、电解质等组成,具有运输营养物质、代谢废物、维持渗透压和pH平衡等功能。
血细胞包括红细胞、白细胞和血小板,分别负责运输氧气、防御感染和止血凝血。
血液分层实验通过加入抗凝剂,使血液中的血细胞因比重不同而分层,从而便于观察和分析各层成分的特点。
三、实验材料1. 实验仪器:试管、试管架、量筒、滴管、吸管;2. 实验试剂:抗凝剂(如柠檬酸钠)、生理盐水;3. 实验样品:新鲜血液。
四、实验步骤1. 取一干净试管,加入约2ml抗凝剂;2. 用滴管吸取新鲜血液,加入抗凝剂中,轻轻混合;3. 将试管静置一段时间,观察血液分层现象;4. 根据分层现象,记录各层成分的颜色、透明度和细胞数量;5. 分析各层成分的特点。
五、实验结果与分析1. 血浆:上层为淡黄色半透明的液体,约占血液总体积的55%。
血浆中含有水、蛋白质、电解质、营养物质、代谢废物等。
通过观察,血浆层无血细胞,说明血浆主要由水和其他物质组成。
2. 白细胞和血小板:中层为白色或淡黄色,约占血液总体积的5%。
白细胞和血小板在血液中呈悬浮状态,不易沉淀。
通过观察,中层细胞数量较少,说明白细胞和血小板在血液中所占比例较小。
3. 红细胞:下层为暗红色,约占血液总体积的40%。
红细胞呈双凹圆盘状,富含血红蛋白,具有运输氧气和二氧化碳的功能。
通过观察,红细胞层较厚,说明红细胞在血液中所占比例较大。
六、实验结论1. 血液由血浆和血细胞组成,血浆占血液总体积的55%,主要由水、蛋白质、电解质等组成;血细胞包括红细胞、白细胞和血小板,分别负责运输氧气、防御感染和止血凝血。
2. 通过血液分层实验,观察到血浆、白细胞和血小板、红细胞三层结构,进一步证实了血液的组成和功能。
血液分析实验报告册(3篇)

第1篇一、实验目的1. 了解血液的基本组成和功能;2. 掌握血液分析实验的基本原理和方法;3. 学会使用显微镜观察血细胞形态;4. 培养实验操作技能和科学思维。
二、实验原理血液是人体循环系统中的一种液体组织,主要由血浆和血细胞组成。
血浆是血液中的液体部分,主要由水、电解质、蛋白质等组成;血细胞包括红细胞、白细胞和血小板。
血液分析实验主要通过对血液的检测,了解人体的健康状况。
三、实验材料1. 血液样本:新鲜人血、动物血等;2. 实验器材:显微镜、血细胞计数板、载玻片、盖玻片、滴管、染色液、吸水纸等;3. 试剂:瑞氏染液、生理盐水、抗凝剂等。
四、实验方法1. 血涂片制作:取血液样本,加入抗凝剂,充分混匀后,用滴管吸取少量血液滴于载玻片上,用另一载玻片轻轻刮过血液,制成血涂片;2. 血细胞计数:将血涂片置于显微镜下,使用血细胞计数板进行计数,计算红细胞、白细胞和血小板的数量;3. 血细胞形态观察:将血涂片置于显微镜下,观察红细胞、白细胞和血小板的形态、大小、染色特性等;4. 血液凝固实验:取血液样本,加入凝固剂,观察血液凝固过程及凝固时间。
五、实验步骤1. 血涂片制作:取新鲜人血或动物血,加入抗凝剂,混匀后滴于载玻片上,用另一载玻片刮过血液,制成血涂片;2. 血细胞计数:将血涂片置于显微镜下,使用血细胞计数板进行计数,计算红细胞、白细胞和血小板的数量;3. 血细胞形态观察:将血涂片置于显微镜下,观察红细胞、白细胞和血小板的形态、大小、染色特性等;4. 血液凝固实验:取血液样本,加入凝固剂,观察血液凝固过程及凝固时间;5. 数据记录与分析:将实验数据记录于实验报告册,对实验结果进行分析。
六、实验结果与分析1. 血细胞计数结果:- 红细胞计数:X个/μl;- 白细胞计数:Y个/μl;- 血小板计数:Z个/μl;2. 血细胞形态观察结果:- 红细胞:正常;- 白细胞:正常;- 血小板:正常;3. 血液凝固实验结果:- 凝固时间:X分钟;- 凝固过程:血液由液体变为凝胶状。
血液永久涂片实验报告(3篇)

第1篇一、实验目的1. 熟悉血液永久涂片的制作过程。
2. 掌握观察血液细胞的基本方法。
3. 了解红细胞、白细胞和血小板的形态结构及其功能。
二、实验原理血液是人体内重要的液体组织,主要由红细胞、白细胞和血小板组成。
通过制作血液永久涂片,可以在显微镜下观察血液细胞的形态结构,从而了解其功能。
三、实验材料与器材1. 实验材料:新鲜血液、生理盐水、瑞氏染液、固定液、盖玻片、载玻片、吸管、滴管、显微镜等。
2. 实验器材:烧杯、酒精灯、烘箱、剪刀、镊子、剪刀、计时器等。
四、实验步骤1. 血液采集:取新鲜血液约1ml,置于无菌试管中。
2. 制备涂片:将血液滴于载玻片中央,用另一张载玻片轻轻涂抹均匀,形成薄片。
3. 固定:将涂片置于固定液中浸泡5-10分钟,取出后用蒸馏水冲洗。
4. 染色:将涂片置于瑞氏染液中染色5-10分钟,取出后用蒸馏水冲洗。
5. 晾干:将涂片置于空气中自然晾干或用烘箱烘干。
6. 观察与记录:用显微镜观察涂片,记录红细胞、白细胞和血小板的形态结构。
五、实验结果与分析1. 红细胞:呈两面凹的圆饼状,无细胞核,细胞质呈红色。
红细胞的主要功能是运输氧气和二氧化碳。
2. 白细胞:有细胞核,体积较大。
白细胞分为粒细胞和淋巴细胞,其中粒细胞又分为中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞。
白细胞具有防御和免疫作用。
3. 血小板:无细胞核,体积较小,呈不规则形状。
血小板的主要功能是止血和凝血。
六、实验讨论1. 血液永久涂片是一种常用的观察血液细胞的方法,可以清晰地观察到血液细胞的形态结构。
2. 在观察血液细胞时,应掌握显微镜的使用方法,调整好焦距和亮度,以便更好地观察。
3. 通过观察血液细胞,可以了解血液的组成和功能,有助于诊断疾病。
七、实验总结通过本次实验,我们掌握了血液永久涂片的制作方法和观察技巧,了解了红细胞、白细胞和血小板的形态结构及其功能。
这对我们进一步学习血液学知识具有重要意义。
八、实验报告实验名称:血液永久涂片实验实验时间:____年____月____日实验者:____实验结果:1. 红细胞:呈两面凹的圆饼状,无细胞核,细胞质呈红色。
血液的成分实验报告

一、实验目的1. 了解血液的基本组成和功能。
2. 掌握血液分离和检测的基本方法。
3. 分析血液成分在生理和病理状态下的变化。
二、实验原理血液是人体的重要组成部分,主要由血浆和血细胞组成。
血浆中含有水、电解质、蛋白质、营养物质、激素等物质,负责运输营养物质、氧气、二氧化碳等。
血细胞包括红细胞、白细胞和血小板,分别负责运输氧气、免疫和止血等功能。
本实验通过血液分离和检测方法,观察血液成分在生理和病理状态下的变化,从而了解血液的组成和功能。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:新鲜血液、抗凝剂、生理盐水、葡萄糖、EDTA-Na2等。
2. 仪器:离心机、移液器、显微镜、血细胞分析仪等。
四、实验方法1. 血液采集:采集志愿者外周静脉血5ml,加入抗凝剂后混匀。
2. 血液分离:将血液以3000r/min的速度离心10分钟,分离出血浆和血细胞。
3. 血浆检测:检测血浆中的蛋白质、葡萄糖、电解质等含量。
4. 血细胞检测:使用血细胞分析仪检测红细胞、白细胞和血小板的数量。
5. 血细胞形态观察:在显微镜下观察红细胞、白细胞和血小板的形态。
五、实验结果1. 血浆检测结果:- 蛋白质:65g/L- 葡萄糖:4.2mmol/L- 钠离子:142mmol/L- 钾离子:4.6mmol/L2. 血细胞检测结果:- 红细胞:4.5×10^12/L- 白细胞:8.0×10^9/L- 血小板:200×10^9/L3. 血细胞形态观察:- 红细胞:呈双凹圆盘状,大小均一。
- 白细胞:包括中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞等,形态各异。
- 血小板:呈不规则形状,聚集在一起。
六、实验讨论1. 血浆是血液的主要成分,含有多种营养物质、电解质和激素等,对维持人体内环境稳定具有重要意义。
2. 红细胞主要负责运输氧气,其数量和形态在生理和病理状态下会发生变化,如贫血、红细胞增多症等。
3. 白细胞具有免疫功能,包括吞噬、抗体产生等,在炎症、感染等病理状态下,白细胞数量和形态会发生变化。
血液实验报告结论

实验名称:血液常规检查实验目的:通过血液常规检查,了解受试者的血液状况,包括红细胞、白细胞、血红蛋白、血小板等指标,评估其健康状况。
实验时间:2023年X月X日实验对象:XXX(受试者姓名)一、实验材料1. 采血管:EDTA抗凝管2. 血液分析仪:全自动血液分析仪3. 试剂:红细胞计数试剂、白细胞计数试剂、血红蛋白试剂、血小板计数试剂4. 仪器:离心机、显微镜二、实验方法1. 采集受试者静脉血2ml,置于EDTA抗凝管中。
2. 将采集的血液样本在室温下静置30分钟,待血液凝固。
3. 将血液样本离心,分离出血清和红细胞。
4. 将血清和红细胞分别进行血液分析仪检测。
5. 根据检测结果,分析受试者的血液状况。
三、实验结果1. 红细胞计数(RBC):4.5×10^12/L2. 白细胞计数(WBC):6.0×10^9/L3. 血红蛋白(HGB):140g/L4. 血小板计数(PLT):200×10^9/L四、实验结论1. 红细胞计数(RBC):受试者的红细胞计数在正常范围内,说明其红细胞生成和破坏处于平衡状态。
2. 白细胞计数(WBC):受试者的白细胞计数在正常范围内,说明其免疫系统功能正常,无感染迹象。
3. 血红蛋白(HGB):受试者的血红蛋白水平在正常范围内,说明其携氧能力正常。
4. 血小板计数(PLT):受试者的血小板计数在正常范围内,说明其凝血功能正常。
5. 结合以上各项指标,受试者的血液状况良好,无明显的血液系统疾病。
五、实验讨论1. 红细胞计数:受试者的红细胞计数在正常范围内,说明其体内红细胞生成和破坏处于平衡状态。
红细胞负责携带氧气和二氧化碳,对维持人体正常生理功能具有重要意义。
2. 白细胞计数:受试者的白细胞计数在正常范围内,说明其免疫系统功能正常。
白细胞具有吞噬、杀灭病原体的作用,是人体抵御感染的重要防线。
3. 血红蛋白:受试者的血红蛋白水平在正常范围内,说明其携氧能力正常。
血液成分实验实验报告

一、实验目的1. 了解血液的基本组成和功能。
2. 掌握血液分离、观察和检测的方法。
3. 分析血液中主要成分的分布和作用。
二、实验原理血液是人体内循环的重要介质,由血浆和血细胞组成。
血浆是血液中的液体部分,主要由水、电解质、蛋白质、激素等组成;血细胞包括红细胞、白细胞和血小板。
本实验通过观察血液的分离和检测,了解血液成分的分布和作用。
三、实验材料1. 材料:新鲜人血、抗凝剂、试管、移液管、离心机、显微镜、血细胞计数板、计数器、载玻片、盖玻片、滴管、生理盐水、蒸馏水等。
2. 试剂:生理盐水、蒸馏水、瑞氏染液、缓冲液等。
四、实验方法1. 血液分离:将新鲜人血加入抗凝剂,轻轻混匀,静置一段时间,待血液自然分层后,取上层血浆和下层血细胞。
2. 血细胞观察:将血细胞涂片,用瑞氏染液染色,显微镜下观察红细胞、白细胞和血小板的形态和分布。
3. 血细胞计数:使用血细胞计数板和计数器,分别计数红细胞、白细胞和血小板数量。
4. 血浆检测:使用滴管取少量血浆,加入相应试剂,观察血浆的色泽、透明度等特征。
五、实验结果1. 血液分离:血液自然分层后,上层为血浆,下层为血细胞。
2. 血细胞观察:显微镜下可见红细胞呈双凹圆盘状,白细胞呈球形,血小板呈不规则形状。
3. 血细胞计数:红细胞计数约为4.5-5.5×10^12/L,白细胞计数约为4-10×10^9/L,血小板计数约为100-300×10^9/L。
4. 血浆检测:血浆呈淡黄色,透明度良好。
六、实验分析1. 血液成分分析:血液主要由血浆和血细胞组成。
血浆负责运输营养物质、氧气、二氧化碳、激素等,维持体内环境稳定;血细胞负责免疫、凝血、运输等功能。
2. 血细胞形态分析:红细胞呈双凹圆盘状,有利于通过毛细血管;白细胞呈球形,具有吞噬和抵御病原微生物的作用;血小板呈不规则形状,参与凝血过程。
3. 血浆特征分析:血浆呈淡黄色,说明其中含有胆红素等物质;透明度良好,说明血浆中悬浮物较少。
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血液实验实验报告09 生物技术摘要:血液在体内承担着物质运输、免疫等重要的生理功能。
比较不同动物的血液组成和血细胞的差异,对了了解血液的功能以及不同动物体的特征有重要意义。
制作血涂片用于观察红细胞、白细胞、血小板形态;使用血细胞计数板于显微镜下直接计数,计算分别得到红细胞、白细胞数目。
关键字:血液红细胞白细胞血细胞计数血涂片第一章前言血液在维持内环境稳定上起着重要作用,具有运输、缓冲、防御等功能。
比较不同动物的血液组成和血细胞的差异,对了了解血液的功能以及不同动物体的特征有重要意义。
动物红细胞的形态、大小、数目与动物的进化和生态适应均有一定的关系,一般来说,动物越高等,红细胞的数目越多,而体积越小,同时血细胞也高度分化;白细胞体积(除鱼类)比红细胞大,但比重却比红细胞小。
白细胞按其组成又分为粒细胞和无粒细胞。
在不同生理状态下,白细胞数目波动较大。
通过观察不同脊椎动物的血涂片,并在镜下计数,即可初步观察到不同脊椎动物血细胞形态变化即数目变化。
第二章材料与方法2.1 血涂片的制作与观察2.1.1 材料鲤鱼、牛蛙、家鸽、家兔、小白鼠血液样品,洁净载玻片,毛吸管,瑞氏染液,蜡笔2.1.2方法取末血样少量置于玻片的一端,左手持载玻片,右手以边缘平滑的推片的一端从血滴前方后移接触血滴,血滴即沿推片散开,推片与载片夹角保持30-45度平稳地向前移动,载片上保留下一薄层血膜。
待干后用蜡笔在血膜两侧划线,以防染液溢出。
然后将血膜平放在染色架上,加瑞氏染液2-3滴,使覆盖整个血膜。
固定0.5-1.0分钟,滴加等量或稍多的新鲜蒸馏水。
与染料混匀染色5-10分钟。
当液面浮现一层金黄色金属状物质,表示染液起了作用。
用蒸馏水冲去染液,待自然干燥后,即可置血涂片于显微镜下进行镜检。
红细胞淡红色,无核的圆形细胞,因红细胞为双凹形,故边缘部分染色较深,中心较浅,直径7-8微米。
颗粒白细胞嗜中性颗粒白细胞:体积略大于红细胞,细胞核被染成紫色分叶状,可分1-5叶。
直径10-12微米。
嗜酸性颗粒白细胞:略大于嗜中性白细胞,细胞核染成紫色,通常为2叶,胞质充满嗜酸性大圆颗粒,被染成鲜红色。
直径10-15微米。
嗜碱性颗粒白细胞:体积略小于嗜酸性白细胞,细胞质中有大小不等被染成紫色的颗粒,颗粒数目较嗜酸性白细胞的颗粒少,核1-2叶,染成淡蓝色。
直径10-11微米。
淋巴细胞胞质少,常为围绕细胞核的一薄层,其中无颗粒细胞核是肾形或马蹄形,染成蓝紫色。
血小板血小板体形甚小,形态不规则,染淡蓝色,内含紫色颗粒,无核,常聚集成团。
2.2 血细胞计数2.2.1 材料鲤鱼、牛蛙、家鸽、家兔、小白鼠、人体血液样品,柠檬酸钠,血细胞计数板,盖玻片,毛吸管。
2.2.2方法1.计数原理:血细胞计数板由一块长约7.5cm、宽3.5cm的厚玻璃制成,在中部1/3面积处有4条槽,内侧两条槽之间还有1条横槽相通,在中部构成2块长方形平台。
此平台比整个载玻片平面低0.1mm。
平台中部各有一个计数室,每个计数室分九大格,每格边长1mm,面积为1mm2,盖上盖玻片后体积为0.1mm3。
四角的大格被划分为16个中方格,一般用作白细胞、血小板及组织培养的细胞计数。
中央的大方格则由双线划分为25个中方格,每个中方格面积为0.04mm2,盖上盖玻片后体积为0.004mm3,每个中方格又分成16个小方格,用于红细胞、微生物细胞的计数。
计数方格为:2.方法:用毛吸管吸取10μl血液样本加柠檬酸钠至1ml(即稀释100倍)或2ml(即稀释200倍),轻轻摇匀。
将清洁干燥的血细胞计数板盖上盖玻片,再用无菌的毛细滴、管将摇匀的血液稀释液由盖玻片边缘滴一小滴,让稀释液沿缝隙靠毛细渗透作用自动进入计数室,使计数室均能充满稀释液。
取样时先要摇匀菌液,加样时计数室不可有气泡产生。
加样后静止2-3min,然后将血细胞计数板置于显微镜载物台上,先用低倍镜找到计数室所在位置,然后换成高倍镜进行计数。
红细胞数/L=N*25/(5*10*106*稀释倍数)白细胞计数/L=N*稀释倍数*10*106/4第三章结果3.1血涂片的制作与观察3.1.1鲤鱼、牛蛙、家鸽的血涂片都只观察到了红细胞,经查阅相关资料,白细胞有如下特点:1、含量少由于白细胞含量为5000~10000个/立方毫米,而红细胞为400~500万个/立方毫米(男),其比例大约为1∶500(按最高含量),也即,大约观察500个红细胞才能看到1个白细胞。
2、颜色浅白细胞体积比红细胞大,圆球形,是无色有核的细胞。
因而,在光镜下观察,由于其透光能力强,所以看到的白细胞颜色浅。
主观因素主要是来自于实验技能方面不过关。
解决方法:可根据白细胞的透光能力较强这一特点,利用低倍镜找。
方法是:首先,应在低倍镜下调节细准焦螺旋,当看清细胞后,再继续向上调,使红细胞模糊不清。
然后,移动涂片,边移动边注意观察。
会发现在视野中有一些小亮点,如星星在闪烁。
将其中一个亮点置于视野中央,然后,再调细准焦螺旋使细胞清晰。
观察后发现,此亮点便是要找的白细胞。
如需仔细观察,可换高倍镜。
但注意光线不要太亮。
3.1.2 家兔、小白鼠血涂片制作失败血涂片制作失败原因分析:1.现象:以磷酸缓冲液为稀释液配制染剂,配比尝试了1:5,1:7,1:9,细胞几乎均不着色;以蒸馏水为稀释液配制染剂,配比为1:5,染色较浅,但能看到细胞。
查阅相关资料:缓冲液pH值为6.24时,各血涂片的血细胞染色均较淡,尤其是白细胞中特殊颗粒显示不清,胞核、胞质对比不理想;随着缓冲液pH 值的升高,血细胞染色逐渐变深,白细胞中的特殊颗粒逐渐显现,胞核、胞质对比逐渐鲜明;缓冲液pH 值为6.98时,血细胞的染色、白细胞中特殊颗粒均显示清晰,胞核、胞质对比鲜明;随着pH 值的继续升高,血细胞的染色、白细胞中的特殊颗粒显示反而模糊,胞核、胞质对比效果逐渐下降。
2.原因分析:查阅相关文献:瑞氏染料是由伊红、美蓝的化合物溶于甲醇而制成的,伊红是带负电荷的酸性染料,美蓝是带正电和的碱性染料。
两种染料结合在一起溶解在甲醇中后,美蓝和伊红又重新分离开来,成为带负电荷的伊红离子和带正电荷的美蓝离子,以吸附带不同电荷的蛋白质。
血细胞内含有不同等电点的蛋白质,在pH 为6.98的缓冲液中,血液中的但多说蛋白质均达到或接近自己的等电点,因而能很好地吸附相应的染料并着色。
综上,家兔和小白鼠血涂片制作失败主要是由于没有测定染料的pH 值,使得染色在不适宜的pH 下进行不成功。
3.2 血细胞计数3.2.1 鲤鱼血细胞计数(稀释二百倍) 1.红细胞N=80,红细胞个数=0.8*1012个2.白细胞无法辨识,具体误差分析见3.1.13.2.2 牛蛙血细胞计数(稀释二百倍)1718141516N=47,红细胞个数=0.47*1012个2.白细胞无法辨识,具体误差分析见3.1.13.2.3 家鸽血细胞计数(稀释二百倍) 1.红细胞N=299,红细胞个数=2.99*10122. 白细胞无法辨识,具体误差分析见3.1.13.2.4 家兔血细胞计数(稀释一百倍) 1.红细胞N=909,红细胞个数=4.5*101210911895855675069181178181184185N=43,白细胞个数=11*1093.2.5 小白鼠血细胞计数(稀释二百倍) 1.红细胞N=829,红细胞个数=8.29*1012 2.白细胞N=23,白细胞个数=11.5*109106141315517616814918148563.2.6 人血细胞计数(稀释二百倍) 1.红细胞N=336,红细胞个数=3.36*1012 2.白细胞N=74,白细胞个数=37*1093.3 数据汇总 红细胞 白细胞 计数值 /(1012个/L)理论值 /(1012个/L) 计数值 /(109个/L) 理论值 /(109个/L) 鲤鱼 0.8 0.6-1.3 未观察到4.0牛蛙 0.47 0.53 未观察到 14.7-21.9 家鸽 2.99 3.2 未观察到1.4-3.4 家兔 4.5 4.5-7 11 6-13 小白鼠8.297.7-12.511.54-12576869756716172021数值动物3.4 误差分析误差来源既有技术上的,也有客观因素。
其中由于采血不顺利,器材处理、使用不当,稀释不准确,细胞识别错误等因素所造成的误差属技术误差;而由于仪器(计数板、盖片、吸管等)不够准确与精密也会带来误差;还有由于细胞分布不均匀等因素带来的细胞计数误差。
查阅相关资料,可通过以下途径减小误差:(1)所用器材均应清洁干燥,计数板、血盖片、微量吸管及刻度吸管的规格应符合要求或经过校正;(2)红细胞稀释液应等渗、新鲜、无杂质微粒;(3)严格操作,从消毒、采血、稀释、充液到计数都应规范,尤其应注意的是血样稀释及充液时既要作到充分混匀,又要防止剧烈震荡为破坏红细胞。
必须一次性充满计数室,防止产生气泡,充入细胞悬液的量以不超过计数室台面与血盖片之间的矩形边缘为宜;(4)欲将误差控制在变异百分数5%以内,至少需要在计数室中计数400个红细胞;(5)排除异常标本的干扰。
参考文献[1] 杨秀平.动物生理学.高等教育出版社,2004.[2] 杨秀平.动物生理学实验指导.高等教育出版社,2004.[3] 解景田赵静.生理学实验.高等教育出版社,2003.[4] 包新康张迎梅高岚.动物生物学实验指导.兰州大学出版社,2008。