2016CLSI更新解读

Doripenem
多立培南
广谱、对绝大多数β-内酰胺酶稳定的碳青霉烯类 商品名：Doribax 仅有静脉制剂 抗菌谱和抗菌活性
对肠杆菌科、铜绿假单胞菌、不动杆菌属等革兰阴性菌 MSSA、肺炎链球菌粪肠球菌等多数革兰阳性菌与亚胺培南相仿，优于美罗培南 MRSA、VRE 抗菌作用差 对艰难梭菌、厌氧革兰阳性球菌的抗菌活性与美罗培南相仿
替代试验：一种抗菌药对耐药性的检测较靶位药物的检测更具可靠、稳定！
等价试验—举例
等价试验：一类抗菌药对受试菌的作用机制、抗菌活性是相仿的，只 需测定其中一种抗菌药的敏感性，就可预测受试菌对其他该类抗生素 的敏感性。
主要更新内容
• 1.“test”含义 – supplemental, 补充试验 – screening, 筛选试验 – surrogate, 替换试验 – equivalent agents 等价试验 • 2.假中间葡萄球菌 • 3.福氏宋内痢疾志贺菌的ECV折点 • 4.关于碳青霉烯酶的检测 • 5.新增抗菌药物的介绍 • 6.肉汤稀释法药敏试验拖尾现象判断终点方法 • 7.天然耐药的增加和删除 • 8. 其他
Carba NP试验
Carba NP试验是一种肠杆菌科、铜绿假单胞菌和不动菌属细菌中碳青霉
烯酶的表型检测方法。该试验采用比色法，目前主要用于流行病学研究 或感染控制，尚不推荐作为临床常规使用。
研究表明，Carba NP试验在检测KPC、NDM、VIM、IMP、SPM和SME
型碳青霉烯酶方面具有较好的敏感性（>90%）和特异性（>90%）。但 检测OXA-48型碳青霉烯酶敏感性很低仅为11%，部分MIC较低的产酶株 可能不能被检出。
4.关于碳青霉烯酶检测的规定
• 耐碳青霉烯类药物的肠杆菌（CRE）的耐药机制是有碳青霉烯酶存在或其 它β-内酰胺酶联合膜孔蛋白的突变造成的。由于碳青霉烯酶容易通过质粒传 播，因此对碳青霉烯酶的检测在流行病学调查上具有重要意义。出于治疗
病人的目的，常规试验不用检测；但如果出于感染控制 的目的则应对碳青霉烯酶进行检测是有用的。在美国肺炎
1.Test 的含义
常规试验：纸片扩散法，肉汤或琼脂稀释法的常规临床测试。 补充试验：用来测定一种药物或一类药物的敏感性或耐药性试验，非 常规实验，也不需要用其他试验来确证。一些补充试验为鉴定一个特 殊的耐药机制，必需或选择性的报告临床。 筛选试验：提供推测性结果，需要进一步的附加试验来确证药物的敏 感及耐药性。 替代试验 一种抗菌药对耐药性的检测较靶位药物的检测更具可靠、 稳定！ 等价试验 一类抗菌药对受试菌的作用机制、抗菌活性是相仿的，只 需测定其中一种抗菌药的敏感性，就可预测受试菌对其他该类抗生素 的敏感性。
• ECV值不是临床折点 • 纸片扩散法和MIC结果不以“敏感、中介和耐药”报告 • 获得的数据仅作为建立适用于福氏志贺菌和宋氏志贺菌的 ECVs值 • 抑菌圈值仅对福氏志贺菌适用 • 阿奇霉素对宋氏志贺菌的抑菌圈和MIC非常模糊，判断困难
举例：
• • • • 标本 粪便 诊断 腹泻（男性 细菌 宋氏志贺菌 药敏报告
克雷伯菌以 KPC 为主，而在欧洲流行的基因型主要为 oxa-48-like ， NDM 。目 前没有一种表型试验方法（MHT，Carba NP或CIM）能有效地检测出所有种
类的碳青霉烯酶。 CLSI M100-S26中介绍Carba NP试验结果判断图片的更新。
MHT实验对于非克雷伯菌常产生假阳性结果。PCR方法只能检测已有的特异 性碳青霉烯酶基因。新一代测序技术是碳青霉烯酶检测发展的方向。
2.假中间葡萄球菌—苯唑西林
头孢西丁的K-B法和MIC 对检测假中间型葡萄球 菌的mecA基因介导的耐 药性是不可靠的
假中间葡萄球菌
主要更新内容
• 1.“test”含义 – supplemental, 补充试验 – screening, 筛选试验 – surrogate, 替换试验 – equivalent agents 等价试验 • 2.假中间葡萄球菌 • 3.沙门菌对喹诺酮的药敏规则，福氏宋内痢疾志贺菌的ECV折点 • 4.关于碳青霉烯酶的检测 • 5.新增抗菌药物的介绍 • 6.肉汤稀释法药敏试验拖尾现象判断终点方法 • 7.天然耐药的增加和删除 • 8. 其他
替代试验—举例
用头孢西丁检测mecA 基因 介导对苯唑西林的耐药性 用头孢唑林检测大肠埃希菌 等引起的非复杂性尿路感染 的药敏结果可以指导口服头 孢菌素类的敏感性 培氟沙星的药敏结果可以检 测沙门菌属细菌对氟喹诺酮 类敏感性的降低 萘啶酸的药敏结果可以检测 沙门菌属细菌对氟喹诺酮类 敏感性的降低
1μg/片苯唑西林的肺炎链球菌的药敏 结果可以指示肺炎链球菌对青霉素的 敏感
>=32 <=0.5 >=2
HIV 阳性）
氨苄西林 头孢曲松 环丙沙星
R S R
因XX医生需要报告阿奇霉素药敏试验结果。根据 阿奇霉素对宋氏志贺菌的MIC值可以考虑该菌没 有获得性或突变耐药性
复方磺胺 阿奇霉素
>=4/76 8
R 8
沙门氏菌属——氟喹诺酮类/喹诺酮
喹诺酮类对沙门菌的折点从肠 杆菌细菌中分离开
>=23 >==19 >=18 >=16
22-22 16-18 15-17
<=19 <=15 <=14
<=1 <=2 <=2 <=1 <=1 <=0.12 <=0.12
2 2 4 4
>=4 >=8 >=8
CLSI M100-S26
Ceftaroline 头孢洛林
广谱的、具有抗MRSA活性的头孢菌素 仅有静脉制剂 抗菌谱和抗菌活性
3.Epidemiological Cutoff Values (ECVs)
• • • • ECVs 是一个流行病学的折点 一个可以将细菌分成具有或不具有获得性或突变性耐药机制的MIC值 其建立基于体外药敏试验数据 有助于发现非野生型菌株的出现
野生型 无耐药机制
非野生型 有耐药机制
ECVs：福氏志贺菌和宋氏志贺菌
假中间葡萄球菌
• 假中间葡萄球菌属于中间葡萄球菌组（Staphylococcus intermedius Group，SIG），该组还包括中间葡萄球菌、 Staphylococcus delphini等。假中间葡萄球菌多定植于健康猫和狗 的鼻孔及肛门粘膜上，常引起的犬脓皮病，有时会导致狗和猫 的尿路和关节感染。近年来，越来越多地从人体标本：伤口 （咬），鼻窦，和血液等中分离出来，它属于人兽共患病原体。 由于其菌落在血平板上有双溶血环，试管法凝固酶阳性，常误 鉴定为金黄色葡萄球菌。与金黄色葡萄球菌的主要鉴别实验： 该菌玻片凝固酶实验阴性，PYR(吡咯氨基肽酶) 阳性。用商业 化AST设备常鉴定为中间葡萄球菌，但用MALDI TOF（质谱仪） 鉴定通常是正确的。一些假中间葡萄球菌菌株的MecA基因为阳 性。用原有的头孢西丁的折点不能准确检测出带有MecA基因的 假中间葡萄球菌，需使用新的CLSI苯唑西林的MIC值和纸片法 折点
假阴性结果的原因：1、OXA-48-like，SME-1，GES-5等水解能力较弱
的酶；2、黏液型细菌菌落；3、分离培养基的影响
阳性结果出现时间各异，KPC酶较快，OXA酶最慢
质控菌株：肺炎克雷伯菌 ATCC
BAA-1705 （+） BAA-1706 （-）
ATCC
主要更新内容
• 1.“test”含义 – supplemental, 补充试验 – screening, 筛选试验 – surrogate, 替换试验 – equivalent agents 等价试验 • 2.假中间葡萄球菌 • 3.福氏宋内痢疾志贺菌的ECV折点 • 4.关于碳青霉烯酶的检测 • 5.新增抗菌药物的介绍 • 6.肉汤稀释法药敏试验拖尾现象判断终点方法 • 7.天然耐药的增加和删除 • 8. 其他
由于其对MRSA的PBP2以及对PNSP的PBP2x具有亲和性。故对其有杀菌作用 对葡萄球菌、肺炎链球菌、β溶血链球菌、以及肠杆菌科细菌、嗜血杆菌属、卡他莫 拉菌均有良好抗菌作用 对产ESBLs,AmpC (C 组) 及碳青霉烯酶(如KPC酶)的肠杆菌科细菌没有抗菌活性 对铜绿假单胞菌、不动杆菌属细菌等抗菌作用差 对厌氧菌有部分抗菌活性(但对脆弱拟杆菌没有抗菌活性)
•细菌
对碳青霉烯类不敏感 的肠杆菌科细菌 :
优势:易于操作；无 需特殊的试剂或培养 基
快速
局限性:假阳性：膜 需要特殊试剂； 需要特殊试剂和仪 孔蛋白缺失ESBL或高 对某些菌检测无 器；仅对靶基因有 产AmpC；假阴性： 效；对染色体介 特异性； 导的OXA酶无法 对特殊的碳青霉烯 NDM;仅用于肠杆菌 检测 基因可能出现假阴 用于流行病学研究和院感控制 M100性 S25P112 3B 3C表
M100-S26 P58
主要更新内容
• 1.“test”含义 – supplemental, 补充试验 – screening, 筛选试验 – surrogate, 替换试验 – equivalent agents 等价试验 • 2.假中间葡萄球菌 • 3.福氏宋内痢疾志贺菌的ECV折点 • 4.关于碳青霉烯酶的检测 • 5.新增抗菌药物的介绍 • 6.肉汤稀释法药敏试验拖尾现象判断终点方法 • 7.天然耐药的增加和删除 • 8. 其他Fra bibliotek补充试验
要求做：
红霉素诱导克林霉素耐药试验 葡萄球菌属β内酰胺酶 实验
选择做：
ESBL MHT
Carba NP
MRSA Agar
筛选试验
万古霉素平板筛查:如果筛查阳性，需测万古霉素的MIC值。 高水平氨基糖苷类耐药筛选试验：如果纸片扩散法筛选实验不 确定（ 7-9 mm ），则需要做琼脂稀释法或微量肉汤稀释法试 验来确认。