犬猫流感病毒的研究进展

犬猫流感病毒的研究进展宋士凯;孙怡朋【摘要】能感染犬和猫的流感病毒主要包括H3N8、H3N2、H5N1和H1N1等亚型.虽然目前尚未有关于犬猫流感病毒感染人的报道,但由于犬猫是人类重要的伴侣动物,与人亲密接触,犬猫流感病毒对危害公共卫生健康具有潜在威胁.本文围绕犬、猫流感病毒的流行情况及生物学特性进行综述,旨在为犬猫流感病毒的防控工作提供参考.%Influenza viruses that infect dogs and cats include subtypes H3N8, H3N2, H5N1, H1N1, etc. There has been no incidence of human infection with canine and feline influenza viruses till now. However, cats and dogs are common companion animals thus their close contacts with people provide the potential threat to public health. In this article, the epidemic situation and biological characteristics of canine and feline influenza viruses in recent years are summarized in order to provide the latest information on prevention and control of influenza infections.【期刊名称】《中国动物传染病学报》【年(卷),期】2018(026)002【总页数】8页(P1-8)【关键词】流感病毒;犬;猫;流行情况;生物学特性【作者】宋士凯;孙怡朋【作者单位】中国农业大学,北京 100193;中国农业大学,北京 100193【正文语种】中文【中图分类】S852.659.5A型流感病毒可以引起禽、人和猪等多种宿主的急性呼吸系统疾病，是一种世界范围的重要病原微生物。

A型流感病毒具有广泛的宿主特异性，能导致多种宿主感染，根据感染宿主类型的不同，可将流感分为禽流感、猪流感、人流感、犬流感和猫流感等。

早期人们认为A型流感病毒不能在自然条件下感染犬、猫，但后来各亚型流感病毒被相继从具有呼吸道症状的病犬、猫中分离出来。

1 犬流感病毒虽然早在20世纪60年代，犬肾细胞（madindarby canine kidney，MDCK）就被用来培养各种流感病毒[1]，但还未发现犬可作为流感病毒宿主。

1972年，Nikitin等[2]首次证明，在实验室条件下人H3N2病毒可以感染犬，并通过血清学调查证明犬在自然状态下也能感染人H3N2病毒，但未能分离出病毒。

直至2004年，人们才第一次从具有呼吸道症状的病犬中分离出H3N8亚型犬流感病毒（Canine influenza virus，CIV），之后又相继分离出多种亚型流感病毒。

犬成为继猪、马、禽之后的又一重要流感病毒宿主，其宿主作用及在流感病毒跨宿主传播中的作用越来越受到关注。

1.1 马源H3N8亚型犬流感病毒1.1.1 H3N8亚型犬流感病毒的流行情况 2004年1月，在美国佛罗里达州的一个赛犬场里22只赛犬爆发严重呼吸系统疾病，导致8只赛犬死亡。

对其中6只病死赛犬进行病理剖检，发现呼吸系统发生严重病变，表现为出血性支气管炎、支气管肺炎和胸膜炎。

将这些病死犬的肺脏匀浆接种各系细胞，最终通过犬肾细胞（MDCK）中分离到1株犬流感病毒。

经实验室诊断发现，分离到的病毒为H3N8 CIV，且其8个片段与马源H3N8流感病毒亲缘性最高，达96%以上[3]。

在实验室条件下，用H3N8流感病毒感染健康犬，同样能引起犬的急性呼吸道症状，这表明H3N8亚型流感病毒是引起22只赛犬爆发呼吸系统疾病的“幕后真凶”。

H3N8 CIV成为从犬上分离得到的第1株流感病毒，暗示H3N8流感病毒由马向犬跨物种传播。

Anderson等[4]对1984～2004年储存的血清进行了回溯性调查发现，H3N8 CIV在1999年便开始在美国的赛犬中流行，但直到2004年才在收容犬和宠物犬中出现，之后广泛流行于美国德克萨斯[3]、佛罗里达、纽约、加利福尼亚等多个州[5]，呈现明显的地方流行性特征。

2005年以后，美国分离到的H3N8 CIV与H3N8马流感病毒（Equine influenza viruses，EIV）都有很高的亲缘性，但与2004年首次分离株相比，已形成新的独立分支[6]。

目前，流行于美国的H3N8 CIV在进化树上已形成科罗拉多、宾夕法尼亚和纽约三大地域分支[7]，表明H3N8 CIV在不同地域发生了相对独立的适应进化。

总之，H3N8亚型流感病毒是从犬中分离到的第1种流感病毒，它是由H3N8 EIV 传播到犬后不断进化而来。

目前，该病毒主要在美国犬群中持续流行，并且已形成稳定谱系。

虽然，在英国[8]、澳大利亚[9]也曾有关于H3N8亚型流感病毒被分离到的报道，但未能持续流行。

Zhou等[10]通过HI和微量中和实验，对2015年5月～2015年11月期间在中国广州、深圳、北京和上海收集的宠物犬血清进行血清学调查，结果发现H3N8亚型流感病毒的血清学阳性率为0.83%，这是中国地区犬感染H3N8亚型流感病毒的首次报道。

然而，目前为止中国犬群中并未分离到H3N8亚型流感病毒，表明该病毒在中国地区未能形成流行趋势。

1.1.2 H3N8犬流感病毒的生物学特性虽然早期的研究表明，H3N8 EIV不能造成除马以外的其他物种（包括人）的呼吸系统疾病[11]，但2004年马源H3N8 CIV 在美国引起赛犬急性呼吸系统疾病的爆发[3]。

犬呼吸道中的鼻粘膜、气管和支气管纤毛上皮细胞上存在大量α-2,3唾液酸受体[12]，H3N8 CIV主要感染犬的呼吸系统，引起一系列的呼吸系统疾病。

犬感染H3N8亚型流感病毒后，轻者发热、咳嗽，持续数十天后恢复健康；重症者表现出出血性支气管炎、支气管肺炎、胸膜炎，甚至急性死亡。

通常在病犬支气管、气管上皮细胞和肺泡巨噬细胞中可检测到病毒抗原，许多自然感染犬会继发细菌性肺炎，死亡犬还会出现严重的肺出血并导致血胸[13]。

H3N8 EIV可以引起马的自然感染，并能从马跨物种传播给犬，但目前没有证据表明H3N8 CIV能回传给马[14]。

尽管H3N8 CIV起源于H3N8 EIV，但两者之间的生物学特性具有很大差异。

它们的HA蛋白都具有α-2,3唾液酸受体结合特性，但两者HA基因并非完全相同，与 H3N8 EIV相比，H3N8 CIV的HA序列主要发生了两处变异，分别是位于受体结合区域的 W222L 和对于膜融合活性至关重要的 T30S。

尽管 W222L 并未彻底改变其受体结合特性，但这两个突变可能促进了H3N8 CIV对犬的感染[15]。

早期的研究表明H3N8 EIV不能引起小鼠感染[16]，但Castleman等[14]发现，H3N8 CIV能有效感染小鼠，可见犬在H3N8亚型流感病毒的跨物种传播中具有重要的中间宿主作用。

尽管目前为止，没有任何关于人感染H3N8 CIV的报道，血清学调查也未在人血清中发现抗H3N8 CIV的抗体，但并不能排除该病毒可能会通过犬与人的密切接触而感染人，因此有必要对犬流感病毒进行持续监测。

1.2 禽源H3N2亚型犬流感病毒1.2.1 H3N2亚型犬流感病毒的流行情况 2007年5～9月，在韩国南部Kyunggi 省和Jeolla省的几个宠物诊所和犬舍里多个品种的犬相继爆发严重呼吸系统疾病，临床表现为厌食、发烧、咳嗽和流涕等症状，部分病例后期病情加重导致死亡。

Song等[17]将病犬鼻分泌物接种11日龄鸡胚进行病毒分离，接种后3～4 d收集尿囊液，进行RT-PCR扩增和序列测定，最终测序结果显示，分离到的病毒为H3N2 亚型流感病毒，其8个片段与禽源 H3N2 流感病毒进化关系最近，达95.5%～98.9%。

在实验室条件下，将分离到的H3N2 CIV通过鼻腔接种方式感染健康比格犬，同样能引起犬的急性呼吸道症状，这表明H3N2 CIV是引起韩国犬呼吸系统疾病爆发的元凶。

H3N2 CIV成为从犬上分离得到的第2种流感病毒，是H3N2亚型流感病毒由禽向犬的跨物种传播。

2007年7月～12月，Lee等[18]对H3N2 CIV在韩国犬群中的流行情况进行了血清学调查，共采集了829份血清样本，结果发现犬群中H3N2犬流感病毒的血清阳性率高达19%，其中一犬场的血清阳性率更是达到了100%，表明H3N2 CIV在韩国犬群中已经广泛流行。

Lee等[19]通过ELISA、HI和微量中和实验，对2004～2009年间韩国保存的犬血清进行了回溯性研究发现，其实早在2005年H3N2 CIV就已经出现在韩国犬群中。

2006年5月～2007年10月，我国南方地区（广东省）出现4例患严重呼吸系统疾病的病例，发病犬的临床症状均表现为咳嗽、喷嚏、流涕和低烧（39.6～39.9℃）。

Li等[20]采集发病犬的鼻拭子，处理后接种SPF鸡胚，结果分离出4株H3N2 CIV，经遗传进化分析表明，这4株病毒的8个基因片段与2007年韩国首次分离的禽源H3N2 CIV的亲缘关系最近。

此后，在我国辽宁省[21]、北京市、黑龙江省[22]、广东省[23]、浙江省[24]和江苏省[25]等地区多次分离到H3N2 CIV。

同时，大量的血清学调查表明，H3N2 CIV在中国犬群（包括宠物犬、流浪犬和养殖犬）中已经广泛流行[24,26]。

2012年1月，泰国曼谷地区一家宠物医院出现1例患呼吸道症状的病例，不久从该病犬中分离到1株H3N2 CIV，序列比对表明，该株病毒与韩国、中国地区分离到的H3N2 CIV的同源性最高[27]。

但此后，泰国地区未再出现H3N2 CIV感染犬的相关报道。

2015年2～3月，禽源H3N2 CIV在美国芝加哥地区爆发，随后的5个月内，美国中西部地区超过1000只犬受到感染，其他23个州也相继出现H3N2 CIV感染犬的病例。

全基因组测序结果显示，2015年美国分离到的H3N2 CIV与韩国2015年分离到的H3N2 CIV亲缘性最高，各基因片段核苷酸同源性达98%以上[28]。

序列分析表明，2015年流行于韩国的H3N2 CIV引入到美国，造成了本次H3N2 CIV疫情的爆发，这标志着H3N2 CIV的流行区域已经由亚洲扩大到北美地区。

最近的研究表明，美国不同州的H3N2 CIV在遗传进化树中呈现地域性差异[29]。