分子生物学期末复习试题及答案

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分子生物学复习题(含答案)

分子生物学复习题(含答案)

分子生物学复习题(含答案)一、单选题(共100题,每题1分,共100分)1、有关 SNP 位点的描述,不正确的是A、生物芯片技术可提高 SNP 位点的检测准确性B、单个 SNP 位点信息量大,具广泛的应用前景C、在整个基因组中大概有 300 万个 SNP 位点D、被称为第三代 DNA 遗传标志E、SNP 位点是单个核苷酸的变异正确答案:A2、硝酸纤维素膜最大的优点是( )A、高结合力B、非共价键结合C、本底低D、脆性大E、共价键结合正确答案:C3、关于核酸探针的种类下列不正确的是A、cDNA 探针B、寡核苷酸探针C、基因组 DNA 探针D、RNA 探针E、双链 DNA 探针正确答案:E4、目前白血病的发病机制的研究主要集中的领域不包括A、融合基因与白血病B、白血病复发的后天因素C、白血病发病的先天因素D、遗传学疾病及白血病发病的后天因素E、基因多态性与白血病正确答案:B5、下列属于抑癌基因的是( )A、c-erb-2B、mycC、sisD、p53E、ras正确答案:D6、下列有关 cDNA 探针的描述不正确的为A、利用 mRNA 通过 RT-PCR 在体外反转录可制备大量的 cDNA 探针B、cDNA 探针不包含内含子C、cDNA 探针不包含大量的高度重复序列D、由于 cDNA 探针自身所携带的 poly(dT),有可能产生非特异性杂交的问题E、cDNA 探针合成方便,成为探针的重要来源正确答案:E7、一种标记核酸与另一种核酸单链进行配对形成异源核酸分子的双链,这一过程称A、探针B、杂交C、变性D、复杂性E、复性正确答案:B8、SYBR Green Ⅰ技术常要求扩增片段不大于A、50bpB、100bpC、200bpD、300bpE、400bp正确答案:D9、DNA 指纹分子的遗传性基础是A、连锁不平衡B、MHC 的多样性C、DNA 的多态性D、反向重复序列E、MHC 的限制性正确答案:C10、以等位基因特异的寡核苷酸探针杂交法诊断某常染色体隐性遗传病时,若能与突变探针及正常探针接合,则该样本为A、正常人B、不能确定C、纯合体患者D、杂合体患者E、携带者正确答案:E11、目前细菌表型分型的方法不包括A、血清学分型B、分子分型C、噬菌体分型D、生化分型E、抗生素敏感性分型正确答案:B12、不适宜于直接作为第一代测序技术测序的 DNA 模板( )A、双链 DNA 片段和 PCR 产物B、单链 DNA 片段C、克隆于质粒载体的 DNA 片段D、克隆于真核载体的 DNA 片段E、提取的染色质 DNA正确答案:E13、定点诱发突变可以通过以下哪个过程获得:A、PCRB、LCRC、RT-PCRD、SSCPE、ASO正确答案:A14、基因诊断对下列哪些疾病最具有确切的临床诊断意义A、肿瘤B、染色体疾病C、畸形D、单基因遗传病E、多基因遗传病正确答案:D15、下列关于细菌感染性疾病的分子生物学检验说法错误的是A、可以检测不能或不易培养、生长缓慢的病原菌B、可以实现对感染细菌的广谱快速检测C、可以对细菌进行基因分型D、可以检测病原菌耐药基因E、其检验技术都是 PCR 及其衍生技术正确答案:E16、操纵子结构不存在于:A、原核生物基因组中B、细菌基因组中C、大肠杆菌基因组中D、真核生物基因组中E、病毒基因组中正确答案:D17、分离纯化核酸的原则是( )A、保证一定浓度B、保持一级结构完整并保证纯度C、保持二级结构完整并保证纯度D、保持空间结构完整E、保证纯度与浓度正确答案:B18、关于切口平移法下述不正确的是A、可标记线性 DNAB、可标记松散螺旋 DNAC、可标记超螺旋 DNAD、可标记存在缺口的双链 DNAE、可标记随机引物正确答案:E19、未知突变的检测,下列最准确的方法是A、PCRB、RFLPC、核酸杂交D、序列测定E、ASO正确答案:D20、用于病毒基因突变检测的技术是A、荧光定量 PCR 技术B、PCR-RFLP 技术C、PCR 微卫星检测技术D、原位杂交技术E、cDNA 表达芯片技术正确答案:B21、有关微卫星的描述正确的是A、散在重复序列的一种B、10~100bp 组成的重复单位C、主要存在于着丝粒区域,通常不被转录D、形式为(CA)n/(TG)n、(AG)n、(CAG)n 等E、又称为可变数目串联重复序列(VNTR)正确答案:D22、关于抑癌基因的说法正确的是A、呈隐性作用方式B、可以使细胞丧失生长控制和正性调控功能C、是一类可编码对肿瘤形成起促进作用的蛋白质的基因D、抑癌基因又称为肿瘤分化抑制基因E、正常情况下促进细胞增殖、抑制细胞分化正确答案:A23、决定 PCR 反应特异性的是A、模板B、dNTPC、引物D、缓冲液E、Taq DNA 聚合酶正确答案:C24、关于 DNA 芯片原位合成法的描述错误的是:A、也称在片合成B、直接在芯片上用四种核苷酸合成所需探针C、包括光导原位合成法D、包括原位喷印合成法E、包括直接点样法正确答案:E25、可作为分子遗传标记的是A、HLAB、单拷贝序列C、高表达蛋白D、RFLPE、染色体正确答案:D26、为了避免反复冻融对核酸样品产生的破坏作用,最好( )A、将核酸溶解保存B、将核酸小量分装保存C、将核酸冻干保存D、将核酸沉淀保存E、将核酸大量保存正确答案:B27、GeneXpert 全自动结核检测平台不具有的优势是( )A、检测高度自动化B、单标本单试剂检测,避免浪费C、检测快速准确D、同时检测 TB 与利福平耐药E、检测费用低廉正确答案:E28、Sanger 双脱氧链终止法使用的链终止物是A、α-32P-dNTPB、dNTPC、ddNTPD、α-35S-dNTPE、NTP正确答案:C29、导致世界范围内性传播疾病的最为普遍的因素是A、肺炎衣原体B、豚鼠衣原体C、沙眼衣原体D、鹦鹉热衣原体E、鼠衣原体正确答案:C30、实时荧光 PCR 中,GC 含量在 20%~80%(45%~55%最佳),单链引物的最适长度为A、35~50bpB、15~20bpC、5~70bpD、5~20bpE、70~90bp正确答案:B31、Southern 杂交通常是指( )A、DNA 与 RNA 杂交B、DNA 与 DNA 杂交C、RNA 与 RNA 杂交D、蛋白质与蛋白质杂交E、DNA 与蛋白质杂交正确答案:B32、具有碱基互补区域的单链又可以重新结合形成双链,这一过程称A、杂交B、变性C、复杂性D、复性E、探针正确答案:D33、第二代测序技术不能应用于A、从头测序、重测序B、转录组及表达谱分析C、小分子 RNA 研究D、个体基因组测序和 SNP 研究E、直接测甲基化的 DNA 序列正确答案:E34、目前已知感染人类最小的 DNA 病毒( )A、HIVB、HPVC、HBVD、HAVE、HCV正确答案:C35、下列方法中不属于 RNA 诊断的是A、Northern blotB、RNA 斑点杂交C、基因芯片D、mRNA 差异显示 PCR 技术E、逆转录 PCR正确答案:C36、RNA/RNA 杂交体的 Tm 值一般应增加A、1-5℃B、5~10℃C、10~15℃D、15~20℃E、20~25℃正确答案:E37、下列属于核苷酸三联体重复序列发生高度重复所致的是A、珠蛋白生成障碍性贫血B、脆性 X 综合症C、迪谢内肌营养不良D、血友病E、镰状细胞贫血正确答案:B38、逆转录 PCR 扩增最终产物的特异性由A、随机引物决定B、oligo-d(T)决定C、PCR 扩增的特异引物决定D、扩增效率决定E、逆转录酶决定正确答案:C39、检测融合基因、确定染色体易位的首选方法是A、FISHB、RT-PCRC、实时定量 PCRD、PCRE、DNA 芯片正确答案:D40、单基因遗传病分子诊断的主要应用是A、产前诊断B、携带者筛查C、症状前诊断D、携带者诊断E、耐药基因检测正确答案:A41、乳腺癌分子生物学检测的意义不包括A、预测早期乳腺癌复发、转移的风险B、筛选易感人群C、帮助减轻化疗的不良反应D、反映肿瘤的生物学行为E、筛选适合内分泌、化疗及靶向治疗的患者正确答案:C42、线粒体基因组与核基因组之间,下面描述不正确的是A、线粒体基因组与核基因组分别在不同的位置进行自主复制和转录,之间互不影响B、mtDNA 突变可引起编码蛋白功能障碍,影响细胞呼吸、氧化功能,进而影响核 DNA 的表达C、mtDNA 自主性复制,但复制所需的酶、调控因子等由核基因编码D、二者虽在地理位置上独立,但二者之间关系十分密切E、线粒体基因组与核基因组之间存在“交叉对话”,相互影响,相互协调正确答案:A43、STR 法医鉴定的基础是A、孟德尔遗传定律B、蛋白质空间结构C、基因扩增技术D、碱基配对原则E、基因多态性正确答案:A44、以下哪种酶可用于 PCR 反应( )A、KlenowB、HindⅢC、Taq DNA 聚合酶D、RNaseE、Dnase正确答案:C45、下列不能用于核酸转移作固相支持物的是A、NC 膜B、尼龙膜C、化学活性膜D、滤纸E、PVC 膜正确答案:E46、Southern 印迹杂交的描述正确的是A、不仅可以检测 DNA 样品中是否存在某一特定的基因,而且还可以获得基因片段的大小及酶切位点分布的信息B、检测靶分子是 RNAC、用于基因定位分析D、用于阳性菌落的筛选E、用于蛋白水平的检测正确答案:A47、在下列何种情况下可考虑进行基因连锁检测方法进行基因诊断A、表达异常B、基因结构变化未知C、点突变D、基因片段缺失E、基因片段插入正确答案:B48、关于 mtDNA 非编码序列,描述正确的是A、不参与 mtDNA 的复制、转录等,属于“无用”信息B、是高度重复序列C、占整个 mtDNA 的 15%,比例较大D、mtDNA 中有两段非编码区E、位于 mtDNA 的轻链正确答案:D49、变性梯度凝胶电泳的描述中错误的是A、使 DNA 双链分子局部变性B、采用梯度变性凝胶C、变性难易由核苷酸组成决定D、突变检测率高E、可确定突变位置正确答案:E50、以下对镰刀状红细胞贫血症叙述正确的是( )A、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成苯丙氨酸残基B、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成甘氨酸残基C、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成丝氨酸残基D、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成缬氨酸残基E、血红蛋白的β链第 6 位由谷氨酸残基变成异亮氨酸残基正确答案:D51、关于测序策略的叙述正确的是A、应该具有最大重叠、最小数量的测序反应B、最小的目的 DNA 片段(如<1kb),可以使用引物步移法C、最小的目的 DNA 片段(如<1kb),可以使用随机克隆法D、大片段未知序列 DNA 测序,可以直接测序E、大规模基因组计划,可以使用多个测序策略正确答案:E52、组织 DNA 提取中,EDTA 的作用是A、抑制 DNaseB、沉淀 DNAC、减少液体表面张力D、抑制 RNaseE、去除蛋白质正确答案:A53、寡核苷酸探针的 Tm 简单计算公式为A、Tm=4(G+C)+2(A+T)B、Tm=2(G+C)+4(A+T)C、Tm=6(G+C)+4(A+T)D、Tm=2(G+C)+6(A+T)E、Tm=6(G+C)+2(A+T)正确答案:A54、对于 BRCA 基因突变的检测,以下最常用的方法是A、变性高效液相色谱法B、单链构象多态性分析C、变性梯度凝胶电泳D、异源双链分析E、直接 DNA 序列分析正确答案:E55、下列关于人类遗传病的叙述不正确的是A、人类遗传病是指由于遗传物质改变而引起的疾病B、遗传性疾病既可以直接诊断,也可以间接诊断C、人类遗传病包括单基因遗传病、多基因遗传病和染色体异常遗传病D、21-三体综合症患者体细胞中染色体数目为 47 条E、单基因病是指受一个基因控制的疾病正确答案:E56、第一个被发现可以预测晚期转移性结直肠癌患者是否能从靶向治疗药物西妥昔单抗中获益的生物标志物是A、K-rasB、EGFR 基因C、TTF-1D、CEAE、bcl-2 基因正确答案:A57、下列方法中能同时检测几种疟原虫混合感染的是A、竞争 PCRB、巢式 PCRC、多重 PCRD、普通 PCRE、PCR-RFLP正确答案:C58、关于 PCR-RFLP 错误的是A、采用特定的限制性内切酶对 PCR 产物进行处理B、对酶切后的片段长度进行分析C、判断有无点突变D、突变位点不必在限制酶识别序列中E、需先进行 PCR 扩增正确答案:D59、下列哪些技术不适用于鉴定菌种亲缘性:A、随机扩增 DNA 多态性分析B、连接酶链反应C、PCR-RFLPD、多位点测序分型E、DNA 测序技术正确答案:B60、点/狭缝杂交可以用于A、快速确定是否存在目的基因B、不仅可以检测 DNA 样品中是否存在某一特定的基因,而且还可以获得基因片段的大小及酶切位点分布的信息C、用于基因定位分析D、阳性菌落的筛选E、蛋白水平的检测正确答案:A61、DNA 提取中不能有效去除蛋白质的是A、酚/氯仿抽提B、SDSC、高盐洗涤D、蛋白酶 KE、RNase正确答案:E62、宫颈癌与 HPV 病毒感染密切相关,宫颈癌细胞产生的机制是A、HPV DNA 大量复制B、原癌基因被激活C、病毒增殖导致细胞破裂D、HPV 导致细胞凋亡E、病毒蛋白在细胞内堆积正确答案:B63、纯 DNA 的 A260/A280 比值为 1.8,可使比值升高的是:A、蛋白质B、酚C、RNAD、氯仿E、Mg2+正确答案:C64、关于 TaqMan 探针技术的描述,不正确的是A、R 基团与 Q 基团相距较远,淬灭不彻底,本底较高B、易受到 Taq DNA 聚合酶5’→3’核酸外切酶活性的影响C、操作亦比较简单D、不需要进行寡核苷酸熔解曲线分析,减少了实验时间E、解决了荧光染料技术非特异性的缺点正确答案:C65、基因芯片技术的本质是( ):A、核酸分子杂交B、蛋白质分子杂交技术C、连接酶链反应D、DNA 重组技术E、酶切技术正确答案:A66、编码 HIV 衣壳蛋白的是A、env 基因B、gag 基因C、vif 基因D、tat 基因E、pol 基因正确答案:B67、HIV 核酸类型是A、单链 DNAB、双链 DNAC、单正链 RNAD、单正链 RNA 双聚体E、单负链 RNA正确答案:D68、检测靶序列是 DNA 的技术是:A、Southern 杂交B、Western 杂交C、Northern 杂交D、Eastern 杂交E、杂交淋巴瘤正确答案:A69、HCV 的核酸是A、+ssRNAB、dsRNAC、dsDNAD、ssDNAE、-ssRNA正确答案:A70、关于 Sanger 双脱氧链终止法叙述错误的是A、每个 DNA 模板需进行一个独立的测序反应B、需引入双脱氧核苷三磷酸(ddNTP)作为链终止物C、链终止物缺少3’-OH,使链终止D、测序反应结果是产生 4 组不同长度的核苷酸链E、高分辨率变性聚丙烯酰胺凝胶电泳可分离仅差一个核苷酸的单链 DNA 正确答案:A71、PCR 中的脱氧核苷三磷酸不包括A、dATPB、dTTPC、dCTPD、dGTPE、dUTP正确答案:E72、以 mRNA 为模板合成 cDNA 的酶是A、DNA 酶B、Taq DNA 聚合酶C、限制性内切酶D、RNA 酶E、逆转录酶正确答案:E73、结核杆菌的分子生物学检验临床意义中不包括A、早期诊断B、耐药检测C、鉴别诊断D、疗效评价E、快速诊断正确答案:A74、目前被 DNA 自动化测序技术广泛采用的酶是A、大肠杆菌 DNA 聚合酶ⅠB、Klenow 片段C、测序酶D、耐热 DNA 聚合酶E、限制性内切核酸酶正确答案:D75、结构基因突变不包括A、基因表达异常B、基因点突变C、基因扩增D、基因缺失E、基因重排正确答案:A76、点突变引起的血友病 A 的分子诊断方法不包括A、PCR-SSCPB、PCR-RFLPC、PCR-VNTRD、PCR-STRE、长距离 PCR正确答案:E77、大肠杆菌类核结构的组成是A、双链 DNAB、RNAC、蛋白质+DNAD、支架蛋白E、RNA+支架蛋白+双链 DNA正确答案:E78、作为芯片固相载体的材料描述正确的是A、主要有玻片、硅片等实性材料B、不使用硝酸纤维素膜、尼龙膜及聚丙烯膜等膜性材料C、这些载体材料不需要处理,其表面存在活性基团(如羟基或者氨基)D、可以直接固定已经合成的寡核苷酸探针E、不需要对介质表面进行化学预处理--活化正确答案:A79、不属于脆性 X 综合征分子诊断人群的是A、已明确母亲为携带者的婴儿B、没有 FraX 家族史C、发育迟缓或自闭症的患者D、未诊断的 MR 家族史E、有 FraX 体格或性格阳性征象者正确答案:B80、关于人工合成的寡核苷酸探针,下列描述不正确的是A、特异性高B、可依赖氨基酸序列推测其序列C、分子量小D、可用于相似基因顺序差异性分析E、可用末端转移酶进行5’端标记正确答案:E81、下列哪一种病毒的遗传物质为 RNA( )A、乙肝病毒B、乳头瘤状病毒C、疱疹病毒D、人类免疫缺陷病毒E、腺病毒正确答案:D82、下列几种 DNA 分子的碱基组成比例,哪一种的 Tm 值最高( )A、A+T=15%B、G+C=25%C、G+C=40%D、A+T=80%E、G+C=60%正确答案:A83、关于逆转录 PCR 的描述,不正确的是A、首先应将 RNA 转化为 cDNA 才能进行 PCRB、除了使用 DNA 聚合酶外,还应使用逆转录酶C、模板为 RNAD、oligo-d(T)理论上可以将所有的 mRNA 进行逆转录反应E、逆转录酶不需要引物进行逆转录反应正确答案:E84、一个完整的生物芯片配套软件不包括A、统计分析软件B、生物芯片的图像处理软件C、画图软件D、生物芯片扫描仪的硬件控制软件E、数据提取软件正确答案:C85、线粒体疾病的遗传特征是A、女患者的子女约 1/2 发病B、母系遗传C、发病率有明显的性别差异D、交叉遗传E、近亲婚配的子女发病率增高正确答案:B86、在人类基因组中,编码序列占的比例为A、23%B、1.5%C、3%D、21%E、5%正确答案:B87、乙型肝炎病毒的核酸类型是( )A、双股 DNAB、负股 DNAC、正股 DNAD、单股 DNAE、DNA-RNA 二聚体正确答案:A88、对于相同大小的核酸片段,最快的转移方法是A、电转移B、真空转移C、毛细管电泳D、向下虹吸转移E、虹吸转移正确答案:B89、延伸的温度通常为A、95℃B、55℃C、37℃D、72℃E、25℃正确答案:D90、在 pH 为下述何种范围时,Tm 值变化不明显A、pH 为 5~9B、pH 为 3~5C、pH 为 5~6D、pH 为 8~11E、pH 为 4~5正确答案:A91、标记的参与杂交反应的核酸分子称为A、复性B、复杂性C、杂交D、变性E、探针正确答案:E92、对于镰刀状红细胞贫血的基因诊断不可以采用( ):A、PCR-RFLPB、DNA 测序C、核酸分子杂交D、设计等位基因特异性引物进行 PCRE、Western blot正确答案:E93、与耳聋有关的最主要的 mtDNA 突变是A、点突变B、插入或缺失C、大片段重组D、拷贝数变异E、异质性突变正确答案:A94、荧光原位杂交的描述正确的是A、快速确定是否存在目的基因B、检测靶分子是 RNAC、用于基因定位分析D、用于阳性菌落的筛选E、用于蛋白水平的检测正确答案:C95、第三代测序技术的最主要特征:A、对单分子 DNA 进行非 PCR 的测序B、对 SNP 进行非 PCR 的测序C、高通量和并行 PCR 测序D、直接分析 SNPE、直接进行个体基因组测序和 SNP 研究正确答案:A96、关于 DNA 变性的描述不正确的是A、二级结构破坏B、一级结构破坏C、黏度降低D、生物活性丧失E、浮力密度增加正确答案:B97、下列不能被列入可移动基因范畴的是A、插入序列B、质粒C、染色体 DNAD、转座子E、可转座噬菌体正确答案:C98、生物芯片根据芯片上固定的探针种类不同可分为几种,不包括:A、DNA 芯片B、蛋白质芯片C、细胞芯片D、组织芯片E、测序芯片正确答案:E99、DNA 芯片的固相载体不可以用A、半导体硅片B、玻璃片C、滤纸D、硝酸纤维素膜E、尼龙膜正确答案:C100、DNA 自动化测序技术一般用不到的技术是A、Sanger 的双脱氧链终止法B、Maxam 和 Gilbert 的化学降解法C、荧光标记技术D、PCR 技术E、电泳技术正确答案:B。

分子生物期末试题及答案

分子生物期末试题及答案

分子生物期末试题及答案分子生物学期末试题及答案一、选择题(每题2分,共20分)1. DNA双螺旋结构的发现者是()。

A. 罗莎琳·富兰克林B. 詹姆斯·沃森C. 弗朗西斯·克里克D. B和C答案:D2. 以下哪种酶在DNA复制过程中不起作用?()A. DNA聚合酶B. 解旋酶C. 核糖核酸酶D. 连接酶答案:C3. 真核生物的基因表达调控主要发生在哪个阶段?()A. 转录B. 翻译C. 复制D. 翻译后修饰答案:A4. 下列哪一项不是RNA的主要功能?()A. 作为某些酶的催化中心B. 作为mRNA携带遗传信息C. 作为tRNA携带氨基酸D. 作为DNA的储存形式答案:D5. 基因突变是指()。

A. 基因序列中的单个核苷酸的改变B. 染色体结构的改变C. 染色体数量的改变D. 基因表达的改变答案:A6. 以下哪种技术用于检测特定DNA序列的存在?()A. PCRB. Northern blotC. Western blotD. Southern blot答案:D7. 以下哪种物质不是蛋白质合成的原料?()A. 氨基酸B. 核苷酸C. tRNAD. mRNA答案:B8. 以下哪种细胞器与蛋白质合成直接相关?()A. 线粒体B. 内质网C. 高尔基体D. 核糖体答案:D9. 以下哪种物质是DNA复制的引物?()A. RNA聚合酶B. 引物酶C. DNA聚合酶D. 引物RNA答案:D10. 以下哪种技术用于基因编辑?()A. CRISPR-Cas9B. RT-PCRC. DNA指纹图谱D. 基因枪答案:A二、填空题(每空1分,共20分)1. DNA的四种碱基分别是腺嘌呤(A)、胸腺嘧啶(T)、鸟嘌呤(G)和______(C)。

答案:胞嘧啶2. 真核生物的mRNA帽子结构是______,它有助于mRNA的稳定性和翻译效率。

答案:7-甲基鸟嘌呤3. 在DNA复制过程中,______酶负责解开双链DNA。

分子生物学期末考试题目及答案

分子生物学期末考试题目及答案

分子生物学复习提纲之杨若古兰创作一.名词解释(1)Ori:原核生物基因质粒的复制起始位点,是四个高度守旧的19bp构成的正向反复序列,只要ori能被宿主细胞复制蛋白质识此外质粒才干在该种细胞中复制.ARS:自立复制序列,是真核生物DNA复制的起点,包含数个复制起始必须的守旧区.分歧的ARS序列的共同特征是一个被称为A区的11bp的守旧序列.(2)Promoter:启动子,与基因表达启动有关的顺式感化元件,是结构基因的次要成分,它是位于转录起始位点5’端上游区大约100~200bp之内的具有独立功能的DNA序列,能活化RNA 聚合酶,使之与模板DNA精确地相结合并具有转录起始的特异性.(3)r-independent termination不依附r因子的终止,指在不依附r因子的终止反应中,没有任何其他因子的介入,核心酶也能在某些位点终止转录.(强终止子)(4)SD sequence:SD序列(核糖体小亚基识别位点),存在于原核生物起始密码AUG上游7~12个核苷酸处的一种4~7个核苷酸的守旧片段,它与16SrRNA3’端反向互补,所以可以将mRNA的AUG起始密码子置于核糖体的适当地位以便起始翻译感化.Kozak sequence:存在于真核生物mRNA的一段序列,核糖体能够识别mRNA上的这段序列,并把它作为翻译起始位点.(5)Operator:把持基因,与一个或者一组结构基因相邻近,而且能够与一些特异的隔绝蛋白彼此感化,从而控制邻近的结构基因表达的基因.Operon:把持子,是指原核生物中由一个或多个相干基因和转录翻译调控元件构成的基因表达单元.包含把持基因、结构基因、启动基因.(6)Enhancer:加强子,能强化转录起始的序列的为加强子或强化子Silencer:沉默子,可降低基因启动子转录活性的一段DNA顺式元件.与加强子感化相反.(7)cis-acting element:顺式感化元件,存在于基因旁侧序列中能影响基因表达的序列,包含启动子、加强子、调控序列和可引诱元件,本人不编码任何蛋白质,仅仅提供一个感化位点,与反式感化因子彼此感化介入基因表达调控.trans-acting factor:反式感化因子,是指直接或间接地识别或结合在各类顺式感化元件核心序列上介入调控靶基因转录效力的蛋白质.具有三个功能结构域,即DNA结合域、转录结合域、结合其他结合蛋白的结构域.(8)Open reading frame (ORF):开放式浏览框架,是指一组连续的含有三联密码子的能够被翻译成为多肽链的DNA序列.它由起始密码子开始,到终止密码子结束.(9)Gene:基因,发生一条多肽链或功能RNA所需的全部核苷酸序列.(能转录且具有生物学功能的DNA/RNA的序列.)(10)DNA denaturation:DNA变性,DNA双链的氢键断裂,最初完整酿成单链的过程.Hyperchromatic effect:减色效应,在变性过程中,260nm紫外线接收值先缓慢上升,当达到某一温度时突然上升,称为减色效应.复性(Renaturation):热变性的DNA缓慢冷却,单链恢复成双链.DNA Melting temperature (Tm):DNA溶解温度,变性过程紫外线接收值添加的中点称为融解温度.生理条件下为85~95℃.(11) RNA splicing:RNA的剪接,SnRNA构成剪接体,剪接旌旗灯号为GU(供体)AG(受体)从mRNA前体分子中切除内含子,而使外显子拼接构成成熟mRNA的过程.intron:内含子,存在于原始转录产品或基因组DNA 中,但不包含在成熟mRNA、rRNA或tRNA中的那部分核苷酸序列.exon:外显子,基因组DNA中出此刻成熟RNA分子上的序列.(12) RNAi:RNA干涉,是利用双链小RNA的高效、特异性降解细胞内同源mRAN,从而阻断体内靶基因表达,使细胞出现靶基因缺失表型的方法.(13) polymerase chain reaction (PCR):聚合酶链式反应,是体外酶促合成特异DNA片段的一种方法,由高温变性(92~97℃)、低温退火(45~55℃复性)及适温耽误(72℃、Taq 酶)等几步反应构成一个周期,轮回进行,使目的DNA得以敏捷扩增.(14) Southern blot:DNA印迹杂交,指利器具有必定同源性的两条核酸单链在必定的条件下,可按碱基互补的准绳构成双链,此杂交过程是高度特异的.因为核酸分子的高度特异性及检测方法的灵敏性,综合凝胶电泳和核酸内切限制酶分析的结果,即可绘制出DNA分子的限制图谱,此即DNA印迹杂交.Northern blot:RNA印迹杂交,首先通过电泳的方法将分歧的RNA分子根据其分子量大小加以区分,然后通过与特定基因互补配对的探针杂交来检测目的片段.Western blot:蛋白质印迹.通过特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色.通过分析着色的地位和着色深度获得特定蛋白质在所分析的细胞或组织中的表达情况的信息.二.简答和问答题1.RNA的品种和功能答:mRNA、tRNA、rRNA、反义RNA、snRNA,gRNA等等.①mRNA,信使RNA,功能就是把DNA上的遗传信息精确无误地转录上去,决定蛋白质的氨基酸顺序,完成遗传信息传递过程.②tRNA,转运RNA,根据mRNA的遗传密码顺次精确地将它携带的氨基酸连结起来构成多肽链.③rRNA,核糖体RNA,普通与核糖体蛋白质结合在一路,构成核糖体.④反义RNA,与mRNA互补的RNA分子,从而按捺mRNA的翻译,介入基因表达的调控.⑤snRNA,小核RNA,是真核生物转录后加工过程中RNA 剪接体的次要成分.上述各种RNA分子均为转录的产品,mRNA最初翻译为蛋白质,而rRNA、tRNA及snRNA等其实不携带翻译为蛋白质的信息,其终产品就是RNA.⑥gRNA,引诱RNA,真核生物中介入RNA编辑的具有与mRNA互补序列的RNA.2.DNA半保存和半不连续复制答:①DNA 半保存复制是:DNA 在进行复制的时候链间氢键断裂,双链解旋分开,每条链作为模板在其上合成互补链,经过一系列酶的感化生成两个新的DNA分子.子代DNA分子其中的一条链来自亲代DNA ,另一条链是新合成的,这类方式称半保存复制.②半不连续复制是因为DNA双螺旋的两股单链是反向平行,一条链的走向为5'→3',另一条链为3'→5',DNA的两条链都能作为模板以边解链边复制方式,同时合成两条新的互补链.但是,所有已知DNA聚合酶的合成方向都是5’→3’,所以在复制是,一条链的合成方向和复制叉前进方向不异,可以连续复制,称为前导链;另一条链的合成方向与复制叉前进方向相反,不克不及顺着解链方向连续复制,必须待模板链解开至足够长度,然后从5‘→3’生成引物并复制子链.耽误过程中,构成冈崎片段,要等待下一段有足够长度的模板,再次生成引物而耽误,然后连接起来,这条链称滞后链.是以就把前导链连续复制,随从链不连续复制的复制方式称为半不连续复制.3.端粒酶的工作道理答:原核生物的染色体是环状的,其5'最末端岗崎片段的RNA引物被降解后可借助另半圈DNA链向前耽误来填补.但真核生物线性DNA在复制后,不克不及填补5'末端的空缺,从而会使5'末端序列是以而缩短.真核生物通过构成端粒结构来解决此成绩,复制使端粒5'末端缩短,而端粒酶可外加反复单位到5'末端上,结果即是保持端粒必定的长度.端粒酶是一种含有RNA链的逆转录酶,它以所含的RNA引物为模板来合成DNA端粒结构.端粒酶可结合到端粒的3'末端上,RNA引物的5'末端识别DNA的3'末端碱基并彼此配对,以RNA链为模板使DNA链耽误,合成一个反复单位(TTTAGGG)后,酶再向前挪动一个单位.合成结束后,端粒的3'单链末端折回作为引物,合成其互补链.4.原核DNA复制过程中遗传信息的保真机制答:①DNA聚合酶IIIε亚基具有3'到5'核酸外切酶的活性,在聚合过程中其有校订感化.(DNA聚合酶III的复杂亚基结构(由10种亚基构成)使其具有更高的忠诚性、协同性和持续性,如无校订功能,复制出错率仅为7×10-6,具有校订功能后降低至5×10-9.)②DNA聚合酶I在DNA复制中起着,识别甲基化母链,切除、修复错误复制的核苷对的感化.③DNA聚合酶II也在复制中起修复复制错误的能力.综上所述,所以DNA的复制有着高度的保真性.5*.原核和真核复制,mRNA转录,蛋白翻译,基因表达调控的异同答:⑴复制:原核生物与真核生物DNA复制共同的特点:①分为起始、耽误、终止三个过程;②必须有提供3’羟基末端的引物;③亲代DNA分子为模板,四种脱氧三磷酸核苷(dNTP)为底物,多种酶及蛋白质:DNA拓扑异构酶、DNA解链酶、单链结合蛋白、引物酶、DNA聚合酶、RNA酶和DNA连接酶等;④普通都为半保存复制、半不连续复制.原核生物与真核生物DNA复制分歧的特点:①真核生物为线性DNA,具有多个复制起始位点,构成多个复制叉,DNA聚合酶的挪动速度较原核生物慢.原核生物普通为环形DNA,具有单一复制起始位点.②真核生物DNA复制只发生在细胞周期的S期,一次复制开始后在完成前不再进行复制,原核生物多反复制同时进行.③真核生物有多个复制子ARS大小纷歧且其实分歧步.原核生物只要一个复制子Ori.④真核生物有五种DNA聚合酶,须要Mg+.次要复制酶为DNA聚合酶δ(ε),引物由DNA聚合酶α合成.原核生物只要三种,次要复制酶为DNA聚合酶III.⑤真核生物末端靠端粒酶(部分细胞)补齐,而原核生物以多联体的方式补齐.⑥真核生物冈崎片段间的RNA引物由核酸外切酶MF1去除,而原核生物引物由DNA聚合酶I去除.⑵mRNA转录:原核生物与真核生物mRNA转录共同的特点:①都分为分为起始、耽误、终止三个过程;②都有启动子、终止子或终止旌旗灯号、调控序列;③所需原料都有RNA聚合酶、NTP等.原核生物与真核生物mRNA转录分歧的特点:①真核生物转录起始,耽误, 终止都须要因子的帮忙②原核的启动子为-10box和-35box,真核为TATAbox.③真核生物要进行5′加帽 (转录初期进行30 nt) 、3′加尾 (前体mRNA加polyA) 、切除内含子、编辑和润色.④原核生物mRNA, tRNA, rRNA 都由同一种RNA聚合酶转录而真核是三种分歧的酶.⑤原核生物转录终止是依附终止子(发夹结构),真核生物是依附转录旌旗灯号(AAU、AAG)⑶蛋白质翻译:原核生物与真核生物蛋白质翻译的共同特点:①都分三步进行,即翻译的起始、肽链的耽误、肽链的终止及释放②遗传密码不异原核生物与真核生物蛋白质翻译分歧的特点:①翻译起始核糖体识别序列原核是SD序列且有多个,真核是先通过5‘’Cap序列上的帽结合蛋白,找到mRNA,再通过Kozak序列找到翻译起始AUG进入P 位.②原核是转录与翻译相耦联,故翻译也在细胞核内,而真核翻译在细胞核外.③原核翻译起始tRNA为fMet-tRNA fMet,真核为Met-tRNA Met.④真核翻译有复杂的后加工零碎,如糖基化、磷酸化-去磷酸化等,原核无.⑷基因表达调控:原核生物与真核生物基因表达调控不异的特点:表达为多条理原核生物与真核生物基因表达调控分歧的特点:①原核是以把持子进行转录的调控,真核是受单基因控制.②原核生物调控在2个水平(转录水平的调控、翻译水平的调控),真核在五个水平(DNA水平的调控、转录水平的调控、转录后水平的调控、翻译水平的调控、翻译后水平的调控)进行基因表达调控.③真核生物中有选择性剪接,原核没有.④原核的基因表达次要受环境等调控,真核是受激素等调控.6.PCR与细胞内DNA复制的异同不异点:原料都是四种脱氧核苷酸、模板、都须要引物、都是单链DNA,都遵守碱基互补配对准绳.分歧点:PCR技术 DNA生物复制环境体外复制,加热,90摄氏度摆布体内,暖和的环境酶主如果DNA聚合酶、 DNA解旋酶,DNA聚合酶,引物酶 DNA连接酶等各种酶引物须要人工合成的引物本人合成引物成分步调变性--退火--耽误解旋-起始-耽误-结束大小普通只复制引物及之内的片段全部基因组起点由引物决定原核Ori、真核ARS7.Southern blot, Northern blot, Western blot三种分子生物学技术差别⑴复制Ori:原核生物复制起点ARS:真核生物复制起点⑵转录启动子:决定转录方向及模板链、转录效力把持子(原核):将转录与翻译相耦联终止子:终止转录⑶翻译SD序列:原核生物翻译起始,SD序列的顺序及地位对翻译都有影响.Kozak序列:真核生物翻译起始⑷调控转录水平调控:加强子:感化于启动子,提高转录活性沉默子:感化于启动子,降低转录活性9.乳糖把持子和色氨酸把持子(包含的衰减子)的工作道理答:⑴乳糖把持子乳糖把持子是个弱启动子,包含3个结构基因:Z、Y和A,和启动子、控制子和隔绝子等.乳糖把持子负控引诱模式:无引诱物时,LacⅠ基因转录发生隔绝物单体,结合构成同源四体,Lac同源四体与把持区(O区)DNA相结合,隔绝基因转录.基因不表达.当有引诱物时,引诱物使LacⅠ酿成不克不及与O区相结合的非活化方式,RNA聚合酶就可以与Lac启动子区相结合,起始转录基因.mRNA被转录成三个蛋白质,即贝塔-半乳糖苷酶、贝塔-半乳糖苷透过酶、贝塔-半乳糖苷乙酰基转移酶.((图解)乳糖把持子是个弱启动子,在葡萄糖和乳糖都存在的情况下,大肠杆菌利用葡萄糖,是因为葡萄糖可降低cAMP浓度,障碍其与CAP结合,而cAMP-CAP是激活Lac的次要构成部分,Lac启动子表达受阻,就没有贝塔-半乳糖苷酶活性.不克不及利用乳糖.所以说lac把持子强的引诱感化既须要乳糖又需缺乏葡萄糖)⑵色氨酸把持子色氨酸把持子调控感化次要有三种方式:隔绝感化、弱化感化和终产品Trp 对合成酶的反馈按捺感化.①隔绝感化:trp把持子转录起始的调控是通过隔绝蛋白实现的.在有高浓度Trp存在时,隔绝蛋白- 色氨酸复合物构成一个同源二聚体,而且与色氨酸把持子紧密结合,是以可以禁止转录.当Trp 水平低时,隔绝蛋白以一种非活性方式存在,不克不及结合DNA.在如许的条件下, trp把持子被RNA聚合酶转录,同时Trp 生物合成途径被激活.②弱化感化: trp把持子转录终止的调控.在trp operon,前导区的衰减子有4段特殊的序列,可构成不依附ρ因子的转录终止旌旗灯号(衰减子的工作机理:碱基序列(即衰减子)包含4个分别以1、2、3和4暗示的片段,能以两种分歧的方式进行碱基配对, 1 - 2和3 -4配对,或2 - 3配对, 3 - 4配对区正好位于终止密码子的识别区.前导序列有相邻的两个色氨酸密码子,当培养基中Trp 浓度很低时,负载有Trp 的tR2NATrp也就少,如许翻译通过两个相邻色氨酸密码子的速度就会很慢,当4区被转录完成时,核糖体滞留1区,这时候的前导区结构是2 - 3配对,不构成3 - 4配对的终止结构,所以转录可继续进行.反之,核糖体可顺利通过两个相邻的色氨酸密码子,在4区被转录之前,核糖体就到达2区,如许使2 - 3不克不及配对, 3 - 4 区可以配对构成终止子结构, 转录停止.)③终产品Trp 对合成酶的反馈按捺感化因为基因表达必定耗费必定的能源和前体物,绝对于隔绝和弱化感化,反馈按捺感化更为经济和高效.三.分析题1.SDS-PAGE和双向电泳的道理①SDS-PAGE是利用SDS(带负电)和还原剂破坏蛋白的高级结构, 同时SDS与蛋白定量结合, 清除蛋白之间的电荷差别,使得蛋白的迁移率次要依附分子量 (分子小跑得快) .加上不连续电泳,即上层为浓缩胶,可将样品紧缩到同一路跑线, 基层为分离胶; 可获得更高的分辨率.再用考马斯亮蓝进行染色.即可进行蛋白分子量的测定、蛋白浓度的测定、蛋白的鉴定.②双向电泳是蛋白质组学中对蛋白质组进行研讨的次要分离方法,同时能分离成百上千种蛋白质.蛋白质在第一贯根据电荷的分歧(等电聚焦),第二向根据分子量的分歧进行分离(SDS-PAGE).分离后对蛋白质进行染色,根据实际分析情况,分别进行考马斯亮兰染色、银染或荧光染色.2.顺式感化元件工作的道理答:顺式感化元件,包含启动子、加强子、调控序列和可引诱元件.要与反式感化因子感化,才干促进基因表达,而反式感化因子在DNA水平和转录水平上感化,且具有组织特异性. 3.DNA序列与蛋白功能(表型)非线形关系答:①基因具有强大的容错机制②密码子的简并性,即使DNA错配发生在编码区也不会影响蛋白的表达.③真核生物存在不表达蛋白的内含子④基因间隔区、非编码区等变异,不惹起蛋白的变更.⑤变异发生在蛋白质的非功能区,不影响蛋白质的功能. 4.PCR的道理,包含它的特异性答:以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保存复制道理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保存复制链反复轮回变性--退火--耽误三过程,就可获得更多的“半保存复制链”.关于特异性是①引物设计的特异性,使引物能和模版上的特定片段配对,在最优条件下特异扩增.②退火温度的分歧适,也会出现非特异条带(假阳性). 5.Western blot的道理,包含二抗工作的道理答:利用抗原抗体特异性结合,再用二抗作为探针去检测蛋白.即先用SDS-PAGE得到蛋白1,通过转膜,再用蛋白1的Ab1(一抗)与之结合,再用带着HRP的Ab2(二抗)去识别一抗.再显色检测结果.6.DNA变性中的减色效应与OD值测DNA含量的关系因为DNA变性惹起的紫外光260nm接收的添加称减色效应, DNA变性后,双螺旋结构解体,两条链分开,其碱基就能够更充分的接收260nm处的紫外光.是以可将DNA变性后,测定DNA的在260nm时的OD值的高低来得到DNA 含量,DNA含量越高,OD值越大.7.衰减子工作的须要条件衰减感化发生的须要条件是:①翻译发生前导多肽;②转录和翻译偶联.如许,但RNA聚合酶转录前导序列的同时核糖体就紧接着结合到重生的mRNA上翻译前导肽.mRNA的前导序列包含两个类似的反向反复序列.序列2与序列1和3互补,如许序列1和2、2和3、3和4都能通过碱基配对构成径环结构.由序列3和4配对构成的径环结构与把持子的终止子基底细同.和终止子一样,在其径的一侧具有7个连续的U构成的尾巴.当构成这类衰减子结构时,它就能够像终止子一样使转录终止.反式感化因子结构域的模式DNA结合域:⑴锌指结构⑵螺旋-转角-螺旋(NTH)⑶亮氨酸拉链⑷螺旋-环-螺旋(NLH)⑸碱性α螺旋转录活化结构域:⑴酸性α-螺旋结构域⑵富含谷氨酰胺结构域⑶富含脯氨酸结构域。

分子生物学期末复习试题及答案(可编辑修改word版)

分子生物学期末复习试题及答案(可编辑修改word版)

一、名词解释分子生物学:包括对蛋白质和核酸等生物大分子的结构与功能,以及从分子水平研究生命活动RNA 组学:RNA 组学研究细胞中 snmRNAs 的种类、结构和功能。

同一生物体内不同种类的细胞、同一细胞在不同时间、不同状态下 snmRNAs 的表达具有时间和空间特异性。

增色效应: DNA 变性时其溶液 OD260增高的现象。

减色效应: DNA 复性时其溶液 OD260降低的现象。

T m:变性是在一个相当窄的温度范围内完成,在这一范围内,紫外光吸收值达到最大值的50%时的温度称为 DNA 的解链温度,又称融解温度(melting temperature, Tm)。

其大小与 G+C 含量成正比。

解链曲线:如果在连续加热 DNA 的过程中以温度对 A260 (absorbance,A,A260代表溶液在260nm 处的吸光率)值作图,所得的曲线称为解链曲线。

DNA 复性:在适当条件下,变性 DNA 的两条互补链可恢复天然的双螺旋构象,这一现象称为复性。

核酸分子杂交:在 DNA 变性后的复性过程中,如果将不同种类的 DNA 单链分子或 RNA 分子放在同一溶液中,只要两种单链分子之间存在着一定程度的碱基配对关系,在适宜的条件(温度及离子强度)下,就可以在不同的分子间形成杂化双链,这种现象称为核酸分子杂交。

基因:广义是指原核生物、真核生物以及病毒的 DNA 和RNA分子中具有遗传效应的核苷酸序列,是遗传的基本单位。

狭义指能产生一个特定蛋白质的 DNA 序列。

断裂基因:不连续的基因称为断裂基因,指基因的编码序列在 DNA 上不连续排列而被不编码的序列所隔开。

重叠基因:核苷酸序列彼此重叠的2个基因为重叠基因,或称嵌套基因。

致死基因:删除后可导致机体死亡的基因。

基因冗余:由于一基因在个体中有若干份拷贝,当删除其中一个时,个体的表型不发生明显变化。

DNA 重组:DNA 分子内或分子间发生遗传信息的重新组合,又称为遗传重组或基因重排。

分子生物学期末考试题目及答案

分子生物学期末考试题目及答案

分子生物学【2 】温习提纲一.名词说明(1)Ori:原核生物基因质粒的复制肇端位点,是四个高度保守的19bp构成的正向反复序列,只有ori能被宿主细胞复制蛋白质辨认的质粒才能在该种细胞中复制. ARS:自立复制序列,是真核生物DNA复制的起点,包括数个复制肇端必须的保守区.不同的ARS序列的配合特点是一个被称为A区的11bp的保守序列.(2)Promoter:启动子,与基因表达启动有关的顺式感化元件,是构造基因的重要成分,它是位于转录肇端位点5’端上游区大约100~200bp以内的具有自力功效的DNA序列,能活化RNA 聚合酶,使之与模板DNA精确地相结归并具有转录肇端的特异性.(3)ρ-independent termination不依附ρ因子的终止,指在不依附ρ因子的终止反响中,没有任何其他因子的参与,焦点酶也能在某些位点终止转录.(强终止子)(4)SD sequence:SD序列(核糖体小亚基辨认位点),消失于原核生物肇端暗码AUG上游7~12个核苷酸处的一种4~7个核苷酸的保守片断,它与16SrRNA3’端反向互补,所以可以将mRNA的AUG肇端暗码子置于核糖体的恰当地位以便肇端翻译感化.Kozak sequence:消失于真核生物mRNA的一段序列,核糖体可以或许辨认mRNA上的这段序列,并把它作为翻译肇端位点.(5)Operator:操纵基因,与一个或者一组构造基因相临近,并且可以或许与一些特异的隔绝蛋白互相感化,从而掌握临近的构造基因表达的基因.Operon:操纵子,是指原核生物中由一个或多个相干基因以及转录翻译调控元件构成的基因表达单元.包括操纵基因.构造基因.启动基因.(6)Enhancer:加强子,能强化转录肇端的序列的为加强子或强化子Silencer:沉默子,可下降基因启动子转录活性的一段DNA顺式元件.与加强子感化相反.(7)cis-acting element:顺式感化元件,消失于基因旁侧序列中能影响基因表达的序列,包括启动子.加强子.调控序列和可引诱元件,本身不编码任何蛋白质,仅仅供给一个感化位点,与反式感化因子互相感化参与基因表达调控.trans-acting factor:反式感化因子,是指直接或间接地辨认或联合在各类顺式感化元件焦点序列上参与调控靶基因转录效力的蛋白质.具有三个功效构造域,即DNA联合域.转录联合域.联合其他联合蛋白的构造域.(8)Open reading frame (ORF):凋谢式浏览框架,是指一组中断的含有三联暗码子的可以或许被翻译成为多肽链的DNA序列.它由肇端暗码子开端,到终止暗码子停滞.(9)Gene:基因,产生一条多肽链或功效RNA所需的全体核苷酸序列.(能转录且具有生物学功效的DNA/RNA的序列.)(10)DNA denaturation:DNA变性,DNA双链的氢键断裂,最后完整变成单链的进程.Hyperchromatic effect:增色效应,在变性进程中,260nm紫外线接收值先迟缓上升,当达到某一温度时骤然上升,称为增色效应.复性(Renaturation):热变性的DNA迟缓冷却,单链恢复成双链.DNA Melting temperature (Tm):DNA消融温度,变性进程紫外线接收值增长的中点称为融解温度.心理前提下为85~95℃.(11) RNA splicing:RNA的剪接,SnRNA形成剪接体,剪接旌旗灯号为GU(供体)AG(受体)从mRNA前体分子中切除内含子,而使外显子拼接形成成熟mRNA的进程.intron:内含子,消失于原始转录产物或基因组DNA中,但不包括在成熟mRNA.rRNA或tRNA中的那部分核苷酸序列.exon:外显子,基因组DNA中出如今成熟RNA分子上的序列.(12) RNAi:RNA干预,是应用双链小RNA的高效.特异性降解细胞内同源mRAN,从而阻断体内靶基因表达,使细胞消失靶基因缺掉表型的办法.(13) polymerase chain reaction (PCR):聚合酶链式反响,是体外酶促合成特异DNA片断的一种办法,由高温变性(92~97℃).低温退火(45~55℃复性)及适温延长(72℃.Taq酶)等几步反响构成一个周期,轮回进行,使目标DNA得以敏捷扩增. (14) Southern blot:DNA印迹杂交,指应器具有必定同源性的两条核酸单链在必定的前提下,可按碱基互补的原则形成双链,此杂交进程是高度特异的.因为核酸分子的高度特异性及检测办法的敏锐性,分解凝胶电泳和核酸内切限制酶剖析的成果,便可绘制出DNA分子的限制图谱,此即DNA印迹杂交.Northern blot:RNA印迹杂交,起首经由过程电泳的办法将不同的RNA分子根据其分子量大小加以区分,然后经由过程与特定基因互补配对的探针杂交来检测目标片断.Western blot:蛋白质印迹.经由过程特异性抗体对凝胶电泳处理过的细胞或生物组织样品进行着色.经由过程剖析着色的地位和着色深度获得特定蛋白质在所剖析的细胞或组织中的表达情形的信息.二.简答和问答题1.RNA的种类和功效答:mRNA.tRNA.rRNA.反义RNA.snRNA,gRNA等等.①mRNA,信使RNA,功效就是把DNA上的遗传信息精确无误地转录下来,决议蛋白质的氨基酸次序,完成遗传信息传递进程.②tRNA,转运RNA,根据mRNA的遗传暗码依次精确地将它携带的氨基酸贯穿连接起来形成多肽链.③rRNA,核糖体RNA,一般与核糖体蛋白质联合在一路,形成核糖体.④反义RNA,与mRNA互补的RNA分子,从而克制mRNA的翻译,参与基因表达的调控.⑤snRNA,小核RNA,是真核生物转录后加工进程中RNA剪接体的重要成分.上述各类RNA分子均为转录的产物,mRNA最后翻译为蛋白质,而rRNA.tRNA及snRNA等并不携带翻译为蛋白质的信息,其终产物就是RNA.⑥gRNA,引诱RNA,真核生物中参与RNA编辑的具有与mRNA互补序列的RNA.2.DNA半保留和半不中断复制答:①DNA 半保留复制是:DNA 在进行复制的时刻链间氢键断裂,双链解旋离开,每条链作为模板在其上合成互补链,经由一系列酶的感化生成两个新的DNA分子.子代DNA分子个中的一条链来自亲代DNA ,另一条链是新合成的,这种方法称半保留复制.②半不中断复制是因为DNA双螺旋的两股单链是反向平行,一条链的走向为5'→3',另一条链为3'→5',DNA的两条链都能作为模板以边解链边复制方法,同时合成两条新的互补链.但是,所有已知DNA聚合酶的合成偏向都是5’→3’,所以在复制是,一条链的合成偏向和复制叉进步偏向雷同,可以中断复制,称为前导链;另一条链的合成偏向与复制叉进步偏向相反,不能顺着解链偏向中断复制,必须待模板链解开至足够长度,然后从5‘→3’生成引物并复制子链.延长进程中,形成冈崎片断,要等待下一段有足够长度的模板,再次生成引物而延长,然后衔接起来,这条链称滞后链.是以就把前导链中断复制,侍从链不中断复制的复制方法称为半不中断复制.3.端粒酶的工作道理答:原核生物的染色体是环状的,其5'最末尾岗崎片断的RNA引物被降解后可借助另半圈DNA链向前延长来弥补.但真核生物线性DNA在复制后,不能弥补5'末尾的空白,从而会使5'末尾序列是以而缩短.真核生物经由过程形成端粒构造来解决此问题,复制使端粒5'末尾缩短,而端粒酶可外加反复单位到5'末尾上,成果便是保持端粒必定的长度.端粒酶是一种含有RNA链的逆转录酶,它以所含的RNA引物为模板来合成DNA端粒构造.端粒酶可联合到端粒的3'末尾上,RNA引物的5'末尾辨认DNA的3'末尾碱基并互相配对,以RNA链为模板使DNA链延长,合成一个反复单位(TTTAGGG)后,酶再向前移动一个单位.合成停滞后,端粒的3'单链末尾折回作为引物,合成其互补链.4.原核DNA复制进程中遗传信息的保真机制答:①DNA聚合酶IIIε亚基具有3'到5'核酸外切酶的活性,在聚合进程中其有校订感化.(DNA聚合酶III的庞杂亚基构造(由10种亚基构成)使其具有更高的忠诚性.协同性和中断性,如无校订功效,复制出错率仅为7×10-6,具有校订功效后下降至5×10-9.)②DNA聚合酶I在DNA复制中起着,辨认甲基化母链,切除.修复错误复制的核苷对的感化.③DNA聚合酶II也在复制中起修复复制错误的才能.综上所述,所以DNA的复制有着高度的保真性.5*.原核和真核复制,mRNA转录,蛋白翻译,基因表达调控的异同答:⑴复制:原核生物与真核生物DNA复制配合的特色:①分为肇端.延长.终止三个进程;②必须有供给3’羟基末尾的引物;③亲代DNA分子为模板,四种脱氧三磷酸核苷(dNTP)为底物,多种酶及蛋白质:DNA拓扑异构酶.DNA解链酶.单链联合蛋白.引物酶. DNA聚合酶.RNA酶以及DNA衔接酶等;④一般都为半保留复制.半不中断复制.原核生物与真核生物DNA复制不同的特色:①真核生物为线性DNA,具有多个复制肇端位点,形成多个复制叉,DNA聚合酶的移动速度较原核生物慢.原核生物一般为环形DNA,具有单一复制肇端位点.②真核生物DNA复制只产生在细胞周期的S期,一次复制开端后在完成前不再进行复制,原核生物多反复制同时进行.③真核生物有多个复制子ARS大小不一且并不同步.原核生物只有一个复制子Ori.④真核生物有五种DNA聚合酶,须要Mg+.重要复制酶为DNA聚合酶δ(ε),引物由DNA聚合酶α合成.原核生物只有三种,重要复制酶为DNA聚合酶III.⑤真核生物末尾靠端粒酶(部分细胞)补齐,而原核生物以多联体的情势补齐.⑥真核生物冈崎片断间的RNA引物由核酸外切酶MF1去除,而原核生物引物由DNA聚合酶I去除.⑵mRNA转录:原核生物与真核生物mRNA转录配合的特色:①都分为分为肇端.延长.终止三个进程;②都有启动子.终止子或终止旌旗灯号.调控序列;③所需原料都有RNA聚合酶.NTP等.原核生物与真核生物mRNA转录不同的特色:①真核生物转录肇端,延长, 终止都须要因子的关心②原核的启动子为-10box和-35box,真核为TATAbox.③真核生物要进行5′加帽 (转录早期进行30 nt) . 3′加尾 (前体mRNA加polyA) .切除内含子.编辑和润饰.④原核生物mRNA, tRNA, rRNA 都由统一种RNA聚合酶转录而真核是三种不同的酶.⑤原核生物转录终止是依附终止子(发夹构造),真核生物是依附转录旌旗灯号(AAU.AAG)⑶蛋白质翻译:原核生物与真核生物蛋白质翻译的配合特色:①都分三步进行,即翻译的肇端.肽链的延长.肽链的终止及释放②遗传暗码雷同原核生物与真核生物蛋白质翻译不同的特色:①翻译肇端核糖体辨认序列原核是SD序列且有多个,真核是先经由过程5‘’Cap序列上的帽联合蛋白,找到mRNA,再经由过程Kozak序列找到翻译肇端AUG进入P位.②原核是转录与翻译相耦联,故翻译也在细胞核内,而真核翻译在细胞核外.③原核翻译肇端tRNA为fMet-tRNA fMet,真核为Met-tRNA Met.④真核翻译有庞杂的后加工体系,如糖基化.磷酸化-去磷酸化等,原核无.⑷基因表达调控:原核生物与真核生物基因表达调控雷同的特色:表达为多层次原核生物与真核生物基因表达调控不同的特色:①原核是以操纵子进行转录的调控,真核是受单基因掌握.②原核生物调控在2个程度(转录程度的调控.翻译程度的调控),真核在五个程度(DNA程度的调控.转录程度的调控.转录后程度的调控.翻译程度的调控.翻译后程度的调控)进行基因表达调控.③真核生物中有选择性剪接,原核没有.④原核的基因表达重要受情形等调控,真核是受激素等调控.6.PCR与细胞内DNA复制的异同雷同点:原料都是四种脱氧核苷酸.模板.都须要引物.都是单链DNA,都遵守碱基互补配对原则.不同点:PCR技巧 DNA生物复制情形体外复制,加热,90摄氏度阁下体内,平和的情形酶主如果DNA聚合酶 . DNA解旋酶,DNA聚合酶,引物酶DNA衔接酶等各类酶引物须要人工合成的引物本身合成引物成分步骤变性--退火--延长解旋-肇端-延长-停滞大小一般只复制引物及以内的片断全部基因组起点由引物决议原核Ori.真核ARS7.Southern blot, Northern blot, Western blot三种分子生物学技巧差异答:8.复制,转录,翻译,调控中的各类保守序列及其功效⑴复制Ori:原核生物复制起点ARS:真核生物复制起点⑵转录启动子:决议转录偏向及模板链.转录效力操纵子(原核):将转录与翻译相耦联终止子:终止转录⑶翻译SD序列:原核生物翻译肇端,SD序列的次序及地位对翻译都有影响.Kozak序列:真核生物翻译肇端⑷调控转录程度调控:加强子:感化于启动子,进步转录活性沉默子:感化于启动子,下降转录活性9.乳糖操纵子和色氨酸操纵子(包括的衰减子)的工作道理答:⑴乳糖操纵子乳糖操纵子是个弱启动子,包括3个构造基因:Z.Y和A,以及启动子.掌握子和隔绝子等.乳糖操纵子负控引诱模式:无引诱物时,LacⅠ基因转录产生隔绝物单体,联合形成同源四体,Lac同源四体与操纵区(O区)DNA相联合,隔绝基因转录.基因不表达.当有引诱物时,引诱物使LacⅠ变成不能与O区相联合的非活化情势,RNA聚合酶就可以与Lac启动子区相联合,肇端转录基因.mRNA被转录成三个蛋白质,即贝塔-半乳糖苷酶.贝塔-半乳糖苷透过酶.贝塔-半乳糖苷乙酰基转移酶.((图解)乳糖操纵子是个弱启动子,在葡萄糖和乳糖都消失的情形下,大肠杆菌应用葡萄糖,是因为葡萄糖可下降cAMP浓度,阻碍其与CAP联合,而cAMP-CAP是激活Lac的重要构成部分,Lac启动子表达受阻,就没有贝塔-半乳糖苷酶活性.不能应用乳糖.所以说lac操纵子强的引诱感化既须要乳糖又需缺少葡萄糖)⑵色氨酸操纵子色氨酸操纵子调控感化重要有三种方法:隔绝感化.弱化感化以及终产物Trp 对合成酶的反馈克制造用.①隔绝感化:trp操纵子转录肇端的调控是经由过程隔绝蛋白实现的.在有高浓度Trp消失时,隔绝蛋白- 色氨酸复合物形成一个同源二聚体,并且与色氨酸操纵子慎密联合,是以可以阻拦转录.当Trp 程度低时,隔绝蛋白以一种非活性情势消失,不能联合DNA.在如许的前提下, trp操纵子被RNA聚合酶转录,同时Trp 生物合成门路被激活.②弱化感化: trp操纵子转录终止的调控.在trp operon,前导区的衰减子有4段特别的序列,可形成不依附ρ因子的转录终止旌旗灯号(衰减子的工作机理:碱基序列(即衰减子)包括4个分别以1.2.3和4表示的片断,能以两种不同的方法进行碱基配对, 1 - 2和3 -4配对,或2 - 3配对, 3 - 4配对区正好位于终止暗码子的辨认区.前导序列有相邻的两个色氨酸暗码子,当造就基中Trp 浓度很低时,负载有Trp 的tR2NATrp也就少,如许翻译经由过程两个相邻色氨酸暗码子的速度就会很慢,当4区被转录完成时,核糖体滞留1区,这时的前导区构造是2 - 3配对,不形成3 - 4配对的终止构造,所以转录可中断进行.反之,核糖体可顺遂经由过程两个相邻的色氨酸暗码子,在4区被转录之前,核糖体就到达2区,如许使2 - 3不能配对, 3 - 4 区可以配对形成终止子构造, 转录停滞.)③终产物Trp 对合成酶的反馈克制造用因为基因表达必然消费必定的能源和前体物,相对于隔绝和弱化感化,反馈克制造用更为经济和高效.三.剖析题1.SDS-PAGE和双向电泳的道理①SDS-PAGE是应用SDS(带负电)和还原剂损坏蛋白的高等构造, 同时SDS与蛋白定量联合, 清除蛋白之间的电荷差异,使得蛋白的迁徙率重要依附分子量 (分子小跑得快) .加上不中断电泳,即上层为浓缩胶,可将样品紧缩到统一路跑线, 基层为分别胶; 可获得更高的分辩率.再用考马斯亮蓝进行染色.即可进行蛋白分子量的测定.蛋白浓度的测定.蛋白的判定.②双向电泳是蛋白质组学中对蛋白质组进行研讨的重要分别办法,同时能分别成百上千种蛋白质.蛋白质在第一贯根据电荷的不同(等电聚焦),第二向根据分子量的不同进行分别(SDS-PAGE).分别后对蛋白质进行染色,根据现实剖析情形,分别进行考马斯亮兰染色.银染或荧光染色.2.顺式感化元件工作的道理答:顺式感化元件,包括启动子.加强子.调控序列和可引诱元件.要与反式感化因子感化,才能促进基因表达,而反式感化因子在DNA水平和转录程度上感化,且具有组织特异性.3.DNA序列与蛋白功效(表型)非线形关系答:①基因具有壮大的容错机制②暗码子的简并性,即使DNA错配产生在编码区也不会影响蛋白的表达.③真核生物消失不表达蛋白的内含子④基因距离区.非编码区等变异,不引起蛋白的变化.⑤变异产生在蛋白质的非功效区,不影响蛋白质的功效.4.PCR的道理,包括它的特异性答:以dNTP为反响原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制道理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链反复轮回变性--退火--延长三进程,就可获得更多的“半保留复制链”.关于特异性是①引物设计的特异性,使引物能和模版上的特定片断配对,在最优前提下特异扩增.②退火温度的不适合,也会消失非特异条带(假阳性).5.Western blot的道理,包括二抗工作的道理答:应用抗原抗体特异性联合,再用二抗作为探针去检测蛋白.即先用SDS-PAGE 得到蛋白1,经由过程转膜,再用蛋白1的Ab1(一抗)与之联合,再用带着HRP的Ab2(二抗)去辨认一抗.再显色检测成果.6.DNA变性中的增色效应与OD值测DNA含量的关系因为DNA变性引起的紫外光260nm接收的增长称增色效应, DNA变性后,双螺旋构造解体,两条链离开,其碱基就可以或许更充分的接收260nm处的紫外光.是以可将DNA变性后,测定DNA的在260nm时的OD值的高下来得到DNA含量,DNA含量越高,OD值越大.7.衰减子工作的必要前提衰减感化产生的必要前提是:①翻译产生前导多肽;②转录和翻译偶联.如许,但RNA聚合酶转录前导序列的同时核糖体就紧接着联合到新生的mRNA上翻译前导肽.mRNA的前导序列包括两个类似的反向反复序列.序列2与序列1和3互补,如许序列1和2.2和3.3和4都能经由过程碱基配对形成径环构造.由序列3和4配对形成的径环构造与操纵子的终止子根本雷同.和终止子一样,在其径的一侧具有7个中断的U形成的尾巴.当形成这种衰减子构造时,它就可以或许像终止子一样使转录终止.反式感化因子构造域的模式DNA联合域:⑴锌指构造⑵螺旋-转角-螺旋(NTH)⑶亮氨酸拉链⑷螺旋-环-螺旋(NLH)⑸碱性α螺旋转录活化构造域:⑴酸性α-螺旋构造域⑵富含谷氨酰胺构造域⑶富含脯氨酸构造域第11页,-共11页。

分子生物学期末考试题目及答案

分子生物学期末考试题目及答案

分子生物学期末考试题目及答案余敏老师的期末试题,题目对的,答案自己找下吧云南大学生命科学学院2022年生物科学分子生物学期末考试试题一、选择题〔每题1分,共15分〕二、填空题〔每空1分,共20分〕回忆意思对最稳定的G-C的Tm值DNA变性能产生效应RNA编辑方式,DNA检测方法,,原核生物RNA没有终止因子,通过来终止翻译聚合酶链式反响需要,三、名词解释〔每题2分,共20分〕1、ips:iPS细胞全称为诱导性多能干细胞,是由体细胞诱导而成的干细胞,具有和胚胎干细胞类似的发育多潜能性。

2、启动子:与基因表达启动有关的顺式作用元件,是结构基因的重要成分,它是位于转录起始位点5’端上游区大约100~200bp以内的具有独立功能的DNA 序列,能活化RNA 聚合酶,使之与模板DNA准确地相结合并具有转录起始的特异性。

3、Gene:基因,产生一条多肽链或功能RNA所需的全部核苷酸序列。

〔能转录且具有生物学功能的DNA/RNA的序列。

〕4、PCNA:增殖细胞核抗原,一种参与真核细胞DNA复制的蛋白质。

由三个相同亚基(约29 kDa)组成的环状三聚体。

能与DNA聚合酶δ、聚合酶ε、复制因子C结合,并使DNA在其形成的环中滑行,使前导链连续合成5、基因家族:真核细胞中,许多相关的基因常按功能成套组合,被称为基因家族6、cDNA :7、内含子:8、细胞凋亡:9、引物酶:10、免疫共沉淀技术:二.简答〔每题5分,共25分〕1、分子杂交方法及原理2、简述从低等生物到高等生物基因组的变化3、简述DNA损伤与修复4、为啥自然界选择DNA作为遗传物质5、研究基因的方法三.问答题〔每题10分,共20分,任选两题〕1.综述RNA的生理功能答:mRNA、tRNA、rRNA、反义RNA、snRNA,gRNA等等。

分子生物期末试题及答案

分子生物期末试题及答案

分子生物期末试题及答案(文章格式采用试题和答案的形式进行展示,每个试题后都有对应的答案)试题一:DNA 复制过程的基本步骤及相关酶类的作用是什么?答案:DNA 复制是细胞中一种关键的生物学过程,其基本步骤包括解旋、合成、连接和终止。

具体而言,DNA 复制的基本步骤如下:1. 解旋:DNA 双链被酶类解旋酶解开,形成两个单链模版。

2. 合成:DNA 合成酶(DNA polymerase)在单链模版上合成新的互补链,形成两个完全相同的 DNA 双链。

3. 连接:DNA 连接酶将新合成的 DNA 片段连接起来,形成连续的DNA 双链。

4. 终止:DNA 复制结束,并形成两个完全相同的 DNA 分子。

试题二:RNA 转录的过程以及转录因子的作用是什么?答案:RNA 转录是一种发生在细胞核中的过程,其主要步骤包括起始、合成和终止。

具体而言,RNA 转录的过程如下:1. 起始:RNA 聚合酶与转录因子结合于启动子上,形成转录复合物。

2. 合成:RNA 聚合酶在 DNA 模版链上合成 RNA,与 DNA 模版链互补。

3. 终止:RNA 聚合酶在遇到终止信号时停止合成,RNA 脱离 DNA 模版链。

转录因子是一类能够结合于 DNA 的特殊蛋白质,其主要作用是调控基因的转录。

转录因子可以增强或抑制RNA 聚合酶与DNA 的结合,从而影响基因的表达水平。

试题三:DNA 双链损伤修复的机制有哪些?答案:DNA 双链损伤修复是细胞中重要的保护机制,主要包括以下几种常见的修复机制:1. 直接反应性损伤修复:包括碱基切除修复和直接修复。

碱基切除修复通过酶类切除受损碱基,并由 DNA 聚合酶合成新的 DNA。

直接修复则是通过酶类将受损部分修复回到正常状态。

2. 非同源末端连接修复:当 DNA 双链发生断裂时,可以通过非同源末端连接修复将 DNA 两端连接起来,恢复 DNA 的完整性。

3. 同源重组修复:当 DNA 双链断裂比较严重时,细胞可以通过同源重组修复机制,利用同一染色体或姐妹染色单体作为模版进行修复。

分子生物学期末考试题目及答案

分子生物学期末考试题目及答案
AG(受体)从mRNA前体分子中切除内含子;而使外显子拼接形成成熟mRN
A的过程。
intron:内含子;存在于原始转录产物或基因组DNA中;但不包括在成
熟mRNA、rRNA或tRNA中的那部分核苷酸序列。
exon:外显子;基因组DNA中出现在成熟RNA分子上的序列。
(12)RNAi:RNA干涉;是利用双链小RNA的高效、特异性降解细胞内同源mRAN; 从而阻断体内靶基因表达;使细胞出现靶基因缺失表型的方法。
(13)polymerase chain reaction (PCR):聚合酶链式反应;是体外酶促合成特异
DNA片段的一种方法;由高温变性(92~97C)、低温退火(45~55°C复性)及适温 延伸(72C、Taq酶)等几步反应组成一个周期;循环进行;使目的DNA得以迅速 扩增。
(14)Southern blot:DNA印迹杂交;指利用具有一定同源性的两条核酸单链在一 定的条件下;可按碱基互补的原则形成双链;此杂交过程是高度特异的。由于核 酸分子的高度特异性及检测方法的灵敏性;综合凝胶电泳和核酸内切限制酶分析 的结果;便可绘制出DNA分子的限制图谱;此即DNA印迹杂交。
Kozak sequenee存在于真核生物mRNA的一段序列;核糖体能够识别mRNA上的这段序列;并把它作为翻译起始位点。
(5)Operator:操纵基因;与一个或者一组结构基因相邻近;并且能够与一些特 异的阻遏蛋白相互作用;从而控制邻近的结构基因表达的基因。
Operon:操纵子;是指原核生物中由一个或多个相关基因以及转录翻译调控 元件组成的基因表达单元。包括操纵基因、结构基因、启动基因。
分子生物学期末考试题目及答案
一.名词解释
(1)Ori:原核生物基因质粒的复制起始位点;是四个高度保守的19bp组成的
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一、名词解释分子生物学:包括对蛋白质和核酸等生物大分子的结构与功能,以及从分子水平研究生命活动RNA组学:RNA组学研究细胞中snmRNAs的种类、结构和功能。

同一生物体内不同种类的细胞、同一细胞在不同时间、不同状态下snmRNAs的表达具有时间和空间特异性。

增色效应: DNA变性时其溶液OD260增高的现象。

减色效应: DNA复性时其溶液OD260降低的现象。

Tm:变性是在一个相当窄的温度范围内完成,在这一范围内,紫外光吸收值达到最大值的50%时的温度称为DNA 的解链温度,又称融解温度(melting temperature, Tm)。

其大小与G+C含量成正比。

解链曲线:如果在连续加热DNA的过程中以温度对A260(absorbance,A,A260代表溶液在260nm处的吸光率)值作图,所得的曲线称为解链曲线。

DNA复性:在适当条件下,变性DNA的两条互补链可恢复天然的双螺旋构象,这一现象称为复性。

核酸分子杂交:在DNA变性后的复性过程中,如果将不同种类的DNA单链分子或RNA分子放在同一溶液中,只要两种单链分子之间存在着一定程度的碱基配对关系,在适宜的条件(温度及离子强度)下,就可以在不同的分子间形成杂化双链,这种现象称为核酸分子杂交。

基因:广义是指原核生物、真核生物以及病毒的DNA和RNA分子中具有遗传效应的核苷酸序列,是遗传的基本单位。

狭义指能产生一个特定蛋白质的DNA序列。

断裂基因:不连续的基因称为断裂基因,指基因的编码序列在DNA上不连续排列而被不编码的序列所隔开。

重叠基因:核苷酸序列彼此重叠的2个基因为重叠基因,或称嵌套基因。

致死基因:删除后可导致机体死亡的基因。

基因冗余:由于一基因在个体中有若干份拷贝,当删除其中一个时,个体的表型不发生明显变化。

DNA重组:DNA分子内或分子间发生遗传信息的重新组合,又称为遗传重组或基因重排。

同源重组:发生在同源序列间的重组称为同源重组,又称基本重组。

接合作用:当细胞与细胞、或细菌通过菌毛相互接触时,质粒DNA从一个细胞(细菌)转移至另一细胞(细菌)的DNA转移称为接合作用(conjugation)。

转化作用:通过自动获取或人为地供给外源DNA,使细胞或培养的受体细胞获得新的遗传表型,称为转化作用(transformation)。

转导作用:当病毒从被感染的(供体)细胞释放出来、再次感染另一(供体)细胞时,发生在供体细胞与受体细胞之间的DNA转移及基因重组即为转导作用位点特异重组:位点特异重组(site-specific recombination) 是由整合酶催化,在两个DNA序列的特异位点间发生的整合。

12-23规则:重组发生在间隔为12bp到23bp的不同信号序列之间,称为12-23规则。

转座子:(transposon)在基因中可以移动的一段DNA序列。

转座:由插入序列和转座子介导的基因移位或重排称为转座(transposition)。

克隆:来自同一始祖的相同副本或拷贝的集合。

DNA克隆:应用酶学的方法,在体外将各种来源的遗传物质(同源的或异源的、原核的或真核的、天然的或人工的DNA)与载体DNA接合成一具有自我复制能力的DNA分子——复制子(replicon),继而通过转化或转染宿主细胞,筛选出含有目的基因的转化子细胞,再进行扩增提取获得大量同一DNA分子,也称基因克隆或重组DNA (recombinant DNA)。

基因工程:(genetic engineering)实现基因克隆所用的方法及相关的工作称基因工程,又称重组DNA工艺学。

限制性核酸内切酶:(restriction endonuclease, RE)是识别DNA的特异序列, 并在识别位点或其周围切割双链DNA 的一类内切酶。

同功异源酶:来源不同的限制酶,但能识别和切割同一位点,这些酶称同功异源酶。

同尾酶:有些限制性内切酶虽然识别序列不完全相同,但切割DNA后,产生相同的粘性末端,称为同尾酶。

载体:为携带目的基因,实现其无性繁殖或表达有意义的蛋白质所采用的一些DNA分子。

复制:(replication)是指遗传物质的传代,以母链DNA为模板合成子链DNA的过程。

半保留复制:(semi-conservative replication)DNA生物合成时,母链DNA解开为两股单链,各自作为模板(template)按碱基配对规律,合成与模板互补的子链。

子代细胞的DNA,一股单链从亲代完整地接受过来,另一股单链则完全从新合成。

两个子细胞的DNA都和亲代DNA碱基序列一致。

这种复制方式称为半保留复制。

复制子:(replicon)DNA分子中能独立进行复制的单位称为复制子。

习惯上把两个相邻起始点之间的距离定为一个复制子。

复制眼:(replication eye)DAN正在复制的部分在电镜下观察起来犹如一只眼睛,称为复制眼。

复制叉:(replication fork)复制一开始,复制起始点要形成一个特殊的叉型结构,是复制有关的酶和蛋白质组装成复合物和新链合成的部位,这种结构称为复制叉。

端粒:(telomere)指真核生物染色体线性DNA分子末端的结构。

转录:(transcription) 生物体以DNA为模板合成RNA的过程。

不对称转录:(asymmetric transcription)在DNA分子双链上某一区段,一股链用作模板指引转录,另一股链不转录;模板链并非永远在同一条单链上。

模板链:DNA双链中按碱基配对规律能指引转录生成RNA的一股单链,称为模板链(template strand),也称作有意义链或Watson链。

编码链:相对的另一股单链是编码链(coding strand),也称为反义链或Crick链。

启动子:RNA聚合酶结合模板DNA的部位称为启动子(promoter)转录泡:(transcription bubble)在转录延长过程中,由局部打开的DNA双链、RNA聚合酶核心酶及新生成的RNA 三者结合在一起的复合体,为空泡状结构,又称转录复合物。

转录因子:能直接、间接辨认和结合转录上游区段DNA 的蛋白质,现已发现数百种,统称为反式作用因子(trans-acting factors)。

反式作用因子中,直接或间接结合RNA聚合酶的,则称为转录因子(transcriptional factors, TF)。

转录后加工(RNA的成熟):在细胞内,由RNA聚合酶合成的原初转录物(pre-RNA)经过链的裂解、5`端与3`端的切除和特殊结构的形成、核苷的修饰和糖苷键的改变、以及拼接和编辑等过程,转变为成熟的RNA分子的过程称为RNA的成熟或转录后加工(post-transcriptional processing)。

RNA编辑:改变RNA编码序列的方式称为RNA编辑。

密码子:(codon)代表一个氨基酸或蛋白合成、终止信号的核苷酸三联体。

开放阅读框:从mRNA 5¢端起始密码子AUG到3¢端终止密码子之间的核苷酸序列,各个三联体密码连续排列编码一个蛋白质多肽链,称为开放阅读框架(open reading frame, ORF)。

顺反子:遗传学将编码一个多肽的遗传单位称为顺反子(cistron)。

多顺反子:原核细胞中数个结构基因常串联为一个转录单位,转录生成的mRNA可编码几种功能相关的蛋白质,为多顺反子(polycistron) 。

单顺反子:真核mRNA只编码一种蛋白质,为单顺反子(single cistron) 。

翻译的跳跃现象:翻译中读码框发生位移或核糖体跳过一大段mRNA后继续翻译称为翻译的跳跃现象。

信号序列:(signal sequence)所有靶向输送的蛋白质结构中存在分选信号,主要为N末端特异氨基酸序列,可引导蛋白质转移到细胞的适当靶部位,这一序列称为信号序列。

信号肽:(signal peptide)各种新生分泌蛋白的N端有保守的氨基酸序列称信号肽。

线粒体定向肽:由核基因组编码的线粒体外膜蛋白的N 端具有的一段肽链。

由富含带正电的氨基酸和丝氨酸、苏氨酸等。

基因表达:(gene expression)基因经过转录、翻译,产生具有特异生物学功能的蛋白质分子的过程。

操纵子:(operon)是原核生物在分子水平上基因表达调控的单位,由结构基因、启动子、操纵基因和调节基因组成;通过调节基因编码的调节蛋白与诱导物、辅阻遏物协同作用,开启或关闭操纵基因,对操纵子结构基因的表达进行正、负控制。

转录衰减:(attenuation)是指转录可正常起动,但在转录进入第一个结构基因前即突然停止的过程。

由于这一终止作用并不能使正在进行的结构基因转录中途停止,而仅是部分中途停止转录,所以称为转录衰减。

二、填空题:1.分子生物学的发展分为三个阶段:人类对DNA和遗传信息传递的认识阶段,重组DNA技术的建立和发展阶段,重组DNA技术的应用和分子生物学的迅猛发展阶段。

2.对DNA双螺旋结构的提出贡献最大的三位科学家是J.Watson, F.Crick,O.Avery。

DNA序列测定法有两种,分别为G:lbert化学法,sanger酶法。

4.PCR 仪的发明者为Kary B.Mullis。

5.核酸分子由碱基,戊糖,磷酸三部分组成。

6.在DNA双螺旋结构中,氢键维持双链横向稳定性,碱基堆积力维持双链纵向稳定性。

7.OD260=1.0相当于50ug/ml双链DNA,40ug/ml单链DNA,20ug/ml寡核苷酸。

8.DNA的密度为1.7g/cm3,相当于8M CSCL溶液的密度。

9.质粒PSC101中的P代表构建该质粒的研究者或单位。

10.DNA重组的种类同源重组,接合作用,转化作用,转导作用,位点特异的重组,转座。

11.基因工程中常用载体可分为三类质粒DNA,噬菌体DNA,病毒DNA。

12.同一基因获取的方法有四种化学合成法,cDNA文库,基因组DNA文库,聚合酶链式反应(PCR)。

13.重组DNA导入受体菌时,对受体菌的要求为安全宿主菌,限制酶和重组酶缺陷,处于感受态;导入方式有转化,转染,感染三种。

14.重组DNA技术操作过程可形象归纳为分,切,接,转,筛。

15.1958年Meselson等氮的同位素试验证明了DNA复制为半保留复制的机制。

16.复制的方向有单向复制,相向复制,双向复制。

17.参与DNA复制的物质有底物,聚合酶,模板,引物,其他的酶和蛋白质分子。

18.细菌的RNA聚合酶全酶的五个功能位点为α,β,β’,ω,σ。

19.真核生物的转录过程可分为识别,起始,延伸,终止四个阶段。

20.逆转录酶是一类非常复杂的酶,在其简单的一条多肽链上具有多种酶活性DNA聚合酶活性,RNA酶活性,DNA内切酶活性,DNA旋转酶活性,螺旋酶活性,tRNA结合酶活性。

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