显微技术复习题
第四章、生药的显微鉴定技术
当选择好材料后，实验的主要过程有以下 步骤： 材料的固定或软化——冲洗——脱水—— 透明——浸蜡——包埋——切片——贴 片——烘片——脱蜡—— 二重染色—— 封片。
⒉制片程序简介：
a.材料的固定或软化： 最好用新鲜的固定材料（新鲜材料可 迅速杀死植物细胞，并可最大程度保持组 织和细胞的自然状态，这就是所说的杀死 和固定）。 干材料可先行软化（常用温水 浸泡，勤换水，勿使材料腐烂）。
①观察组织构造：通常使用的切片方法有：徒手切
片法：通常将选择好的材料两端切齐，以左 手持材料，右手持刀片，从左前向右后水平 切割材料（切片时随时以水湿润刀口），将 切片以毛笔扫入盛水的平皿中，然后从切片 中挑选较好者制片，以备显微观察。
• 此法适合较幼嫩的地下器官、嫩茎、 较粗的叶柄、较幼嫩的果实、种子等 器官。也可用两片双面刀片并齐，在 桌面上或硬的支撑物上下切，可获得 薄厚理想的切片（适合薄的材料，如 叶片、花的各部等）。
真实性鉴定的手段性状鉴定macroscopicalidentification显微鉴定microscopicalidentification理化鉴定physicochemicalidentificationdna分子标记鉴定dnamolecularidentification生药性状鉴定是运用人体的感官看摸闻尝及水试火试等直观的方法对生药的性状包括形态大小色泽表面质地断面气味等特征作为依据而进行鉴别的方waterbasedtestfirebasedtest马蹄大黄味连鸡爪形马尾当归鸡骨常山云连钩状形如蝎尾剑骨乌梢蛇乌头马兜铃钩藤长短粗细宽窄薄厚玄参要黑茜草要红黄连要黄绵马贯众根茎叶柄基部断面变为棕黑色枸杞子牛膝变黑不可用生药鉴定常用方法
一般术语
油润：药材质地柔软，含油而润泽，谓之油润。 车轮纹：指根或茎类药材横切面上维管束与较宽的射线 相间排列成稀疏整齐的放射状纹理，状如木制车轮，如 广防己、关木通等。
细胞生物学复习资料
第二章细胞生物学实验技术一、名词解释1．显微分辨率（microscopic resolution）---在一定条件下利用显微镜所能看到的精细程度。
2．放射自显影技术（autoradiography）---用于整个细胞时，可以确定放射性标记物在细胞内的定位。
用于凝胶或琼脂平板时，能鉴定出放射性的条带或菌落。
3．双向凝胶电泳（two-dimensional electrophoresis）---根据分子质量及等电点的不同将复杂的蛋白质混合物分开。
这种高分辨率的技术能够分离同一混合物中的上千种蛋白质。
4．倒置显微镜（inverted microscope）---一种主要用于观察培养瓶或培养皿中的活细胞生长及分裂状态的特殊显微镜。
与普通光镜相比，其光源、聚光镜和物镜的位置是倒置的，即光源在上，物镜在载物台的下方。
另外，其聚光镜和物镜有较长的工作距离，以方便放置有一定厚度的培养瓶。
二、简答题1．电子显微镜为何不能观察活标本？因为电镜样品的观察室要求高度的真空条件。
2．简述冷冻蚀刻术的原理和方法。
冷冻蚀刻（freeze－etching）技术是在冷冻断裂技术的基础上发展起来的更复杂的复型技术。
如果将冷冻断裂的样品的温度稍微升高，让样品中的冰在真空中升华，而在表面上浮雕出细胞膜的超微结构。
当大量的冰升华之后，对浮雕表面进行铂一碳复型，并在腐蚀性溶液中除去生物材料，复型经重蒸水多次清洗后，捞在载网上作电镜观察。
3．比较投射电子显微镜和扫描电子显微镜。
答：都是用于放大与分辨微小结构，都是通过标本电子束的影响来探测标本结构。
TEM：电子束穿过标本，聚焦成像于屏幕或者显像屏上。
用于研究超薄切片标本，有极高的分辨率，可给出细微的胞内结构。
SEM：电子束在标本表面进行扫描，反射的电子聚焦成像于显像屏上。
可以反映未切片标本的的表面特征。
4．扫描隧道显微镜的工作原理及其优越性是什么？扫描隧道显微镜（scanning tunneling microscope，STM）由Binnig等1981年发明，是根据量子力学原理中的隧道效应而设计制造的。
显微分析习题[终稿]
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显微分析习题光学显微镜1.在使用高倍镜时，如果把标本片放反了，将会出观什么问题？为什么？2.在低倍镜调节焦距时。
当视野中出现了能随标本片移动而移动的颗粒或斑纹。
是否只要调节推进器将标本对准物镜中央，就一定能观察到标本的物像?为什么? 高倍镜呢？3.你如何分析判断视野中所见到的污物点是在目镜上?4.使用显微镜观察标本．为什么一定要从低倍镜到高倍镜再到油镜的顺序进行?5.在转动细调螺旋时，如已达极限转不动时，你应如何解决?6.在低倍镜下已看到物像。
在转换高倍镜时却直接转换不过来，试分析可能有哪些原因?7.光学显微镜的分辨率受哪些因素影响？8.光学显微镜的成像原理是什么？9.激光共聚焦显微镜与普通显微镜相比，其特点是什么？透射电子显微镜分析1．在电镜中，电子束的波长主要取决于什么？2．什么是电磁透镜？电子在电磁透镜中如何运动？与光在光学系统中的运动有何不同？3．为什么说电磁透镜与光学透镜具有相似的光学性质？4．电磁透镜具有哪几种像差？如何产生？是否可以消除？5．什么是电磁透镜的分辨本领？主要取决于什么？为什么电磁透镜要采用小孔径角成像？6．简述镜筒的基本构造和各部分的作用。
7．聚光镜光阑、物镜光阑和选区光阑各有什么作用？8．电子与固体样品表面相互作用会产生哪几种物理信号？9．什么是弹性散射和非弹性散射？其散射角取决于什么？它们对电子显微镜的成像有何作用？10．简述非晶样品的质厚成像原理。
11．复型图像的衬度主要取决于什么？通过什么方法可以提高复型图像的衬度？12．复型技术的主要用途和局限性是什么？13．请示意画出面心立方晶体的正空间晶胞和倒空间的晶胞，标明基矢。
并画出晶带轴为r=[100]的零层倒易面(100)0*，标出各阵点的指数。
14．请用Ewald球表明在满足布拉格条件下，入射电子束、衍射束和倒易矢量g之间关系。
15．是否所有满足布拉格条件的晶面都产生衍射束？为什么？16．为什么薄晶体的衍射机会大于大块晶体？17．什么是透射电镜的有效相机常数？它与什么有关？有什么用途？18．简述选区电子衍射的原理。
微生物学实验复习题及其答案
微生物学实验复习题一、选择题1.革兰氏染色的关键操作步骤是：A.结晶紫染色B.碘液固定C.酒精脱色D.复染2.放线菌印片染色的关键操作是：A.印片时不能移动B.染色C.染色后不能吸干D.A 和 C3.高氏培养基用来培养：A.细菌B.真菌C.放线菌4.肉汤培养基用来培养:A.酵母菌B.霉菌C.细菌5.无氮培养基用来培养:A.自生固氮菌。
B.硅酸盐细菌C.根瘤菌D.A、B均可培养E.A、B、C均可培养6.在使用显微镜油镜时，为了提高分辨力，通常在镜头和盖玻片之间滴加:A.二甲苯B.水C.香柏油7.常用的消毒酒精浓度为:A.75%B.50%C.90%8.用甲醛进行空气熏蒸消毒的用量是:A.20ml/M 3B.6ml/M 3C.1ml/M 39.实验室培养基高压蒸汽灭菌的工艺条件是:A.121 ℃ /30minB.115 ℃ /30minC.130 ℃ /30min110.巴氏消毒的工艺条件是:A.62-63 ℃ /30minB.71-72 ℃ /15minC.A.B. 均可11.半固体培养基的主要用途是:A.检查细菌的运动性B.检查细菌的好氧性C.A.B. 两项12.半固体培养基的琼脂加入量通常是:A.1%B.0.5%C.0.1%13.使用手提式灭菌锅灭菌的关键操作是:A.排冷气彻底B.保温时间适当C.灭菌完后排气不能太快D.A-C14.目镜头上的“K”字母表示:A.广视野目镜B.惠更斯目镜C.补偿目镜15.目镜头上的“P”字母表示:A.平场目镜B.广视野目镜C.平场补偿目镜16.物镜头上的“PL”字母表示:A.正低相差物镜B.正高相差物镜C.负高相差物镜17.物镜头上的“UVFL”字母表示。
A.无荧光物镜B.照相物镜C.相差物镜18.镜头上标有“TC”字母的镜头是:A.相差调整望远镜B.摄影目镜C.相差目镜19.“PA”表示:A.马铃薯培养基B.高氏培养基C.肉汤培养基20.无菌室空气灭菌常用方法是:A.甲醛熏蒸B.紫外灯照射2C.喷石炭酸D. A.B. 并用21.干热灭菌的关键操作是:A.灭菌物不能有水B.保温过程中不能开箱门C.降温不能太快22.霉菌水浸制片的关键操作是：A.菌丝要分散B.菌丝首先要用50%的乙醇浸润C.盖盖玻片不能有气泡D.A-C23.加热法染芽胞的染料通常是:A.孔雀绿B.结晶紫C.复红D.蕃红24.复红法染鞭毛的关键操作是:A.玻片干净B.染料新鲜C.菌体活化适当D.A 、B、C25.镀银法染鞭毛的关键操作是:A.玻片干净B.染料无沉淀C.加热适当D.菌体活化适当E.A-D26.进行简单染色使用的染色液通常是:A.复红B.蕃红C.结晶紫D.孔雀绿E.A-D 均可27.物镜头上的“APO”字母代表:A.消色差物镜B.复消色差物镜C.半消色差物镜28.物镜头上的“ Ach”字母表示:A.平场物镜B.超平场物镜C.消色差物镜29.物镜头上的“NH”字母表示：A.正相差物镜B.负相差物镜330.物镜头上的“0.17”表示：A.要求的盖玻片厚度B.要求的载玻片厚度C.镜头浸油的深度31.镜头上标有“NFK"字母的镜头是：A.照相目镜B.荧光目镜C.相差目镜32.目镜头上的“PK”字母表示：A.平场目镜B.补偿目镜C.平场补偿目镜33.物镜头上的 "Splan" 字母表示 :A.超平场物镜B.平场物镜C.消色差物镜。
微生物学实验复习提纲
微生物学实验复习提纲微生物学实验复习提纲1.研究微生物学的基本技术有哪些（显微镜技术、无菌技术、纯种分离技术和纯种培养技术）2.光学显微镜又称“复式显微镜”，由哪两部分组成？显微镜的什么最为关键？为什么？答：由机械装置和光学系统组成物镜的性能最为关键，因为它直接影响着显微镜的分辨率3.油镜的放大倍数为多少？与其他物镜相比，油镜的使用比较特殊，需在载玻片与镜头间滴加什么？其什么作用？答：10*100 需要滴加镜油增加照明亮度和增加显微镜的分辨率4.影响显微镜分辨率的因素有哪些？（光源的波长、物镜的镜口角和镜头间介质的折射率）5.油镜使用后应怎样处理？镜油擦拭的正确方法是怎样的？答：用擦镜纸拭去镜头上的镜油，然后用擦镜纸蘸少许二甲苯擦去镜头上残留的油迹，最后再用干净的擦镜纸擦去残留的二甲苯6.制造接种环、接种针的金属常用铂或镍,原因是软硬适度，能经受火焰反复灼烧，又易冷却.7.培养皿的包装一般以多少套作一包比较合适？5~8套。
8.灭菌吸管的包装的注意事项：（1）吸管必须干燥;(2)在距其粗头顶端约0.5cm处，塞一小段约1.5cm 长的棉花（不能用脱脂棉）。
作用是避免外界及口中杂菌吸入管内，并防止菌液等吸入口中。
9.空的玻璃器皿一般用干热灭菌，若用湿热灭菌。
则要多用几层报纸包扎，外面最好加一层牛皮纸或铝箔。
10.接种环在用前必须烧灼灭菌，用后也应立即烧灼。
11.简单染色的原理是什么？其主要操作步骤是什么？固定的作用是什么？染色过程中应注意哪些环节？答：原理及步骤健实验课本71页。
固定作用：使细胞质凝固，使细胞固定在载玻片上12. 革兰氏染的原理及步骤是什么？革兰氏染色后的正确结果是什么颜色？答：原理见实验课本82页步骤：初染、媒染、脱色、复染结果颜色：阳性：菌体保持原有的蓝紫色阴性：洗脱后菌体变为无色，用复染剂染色后又变为复染剂颜色13.你认为哪些环节会影响革兰氏染色结果的正确性？其中最关键的环节是什么？答：（1）涂片不宜过厚，以免脱色不完全造成假阳性；（2）脱色，此环节最关键。
微生物学作业题-复习题
“微生物学”作业题第一章绪论1、微生物有哪些特点？其中最基本的特点是什么？为什么？2、什么是微生物学？它的研究内容是什么？3、什么是微生物？它包括哪些类群？4、用具体事例说明人类与微生物的关系。
5、为什么微生物学比动物学、植物学起步晚，但却发展迅速？并成为生命科学研究的“明星”？6、简述微生物学在生命科学发展中的地位，并描述其前景。
7、为什么说巴斯德和科赫是微生物学的奠基人？8、简述下列科学家对微生物学发展的主要贡献：Lister, Grifith, Fleming, Avery, Waksman, Jacob & Monod, Ames, Woese, 汤飞凡，何大一。
第二章微生物的纯培养和显微技术1、名词解释：微生物的培养物，菌落，斜面，平板，二元培养物，分辨率，显微技术，冰冻蚀刻技术。
2、菌种保藏的原理是什么？举出三种常用的菌种保藏方法，并说明其操作过程。
3、使用普通光学显微镜观察物象时，如何增加图象和视野的反差？4、叙述用油镜观察细菌形态的操作过程。
5、暗视野显微镜、相差显微镜和荧光显微镜在生物学研究中有什么作用？6、扫描电子显微镜有什么特点？7、何为无菌技术？试列举属于无菌技术范围的具体实验操作环节及注意事项。
8、哪些固体培养基分离技术可以被用来获得目的微生物的纯培养？它们的适用范围及特点如何？9、在何种情况下你会选择使用液体分离法或单孢子（细胞）分离法来获得微生物的纯培养？10、为什么说菌种保藏技术对于微生物学的研究和应用都具有重要意义？你认为哪些菌种保藏技术可被用于保藏大肠杆菌和枯草芽孢杆菌菌株？11、使用油镜时为何要滴加香柏油？我们是否应该进一步寻找介质折射率更大的其他物质取替香柏油，以进一步提高显微镜的分辨率？12、试总结、比较普通光学显微镜、荧光显微镜、透射显微镜、扫描显微镜在成像原理方面的异同点。
13、培养条件对微生物个体的大小有哪些影响？你是否能很快地在显微镜下区分同为单细胞的细菌、酵母菌和原生动物？第三章微生物的结构与类群1、解词：原核微生物，原生质体，细菌、真菌，霉菌，酵母菌，蕈菌，放线菌，蓝细菌，粘细菌，蛭弧菌，菌丝，菌环、吸器，菌核，子座，伴孢晶体，糖被，鞭毛，菌毛，性毛，芽孢。
细胞生物学复习资料
细胞生物学复习资料一、小题1.细胞生物学：细胞生物学研究和揭示细胞基本生命活动规律的科学，它从显微、亚显微与分子水平上研究细胞的结构与功能，和细胞信号转导，细胞基因表达与调控，细胞起源与进化等重大生命活动。
2.最小最简单的细胞--支原体。
3.质粒：除核区DNA外，可进行自主复制的遗传因子，是裸露的环状DNA分子，能进行自我复制，有时能整合到核DNA中去。
4.分辨率：指能区分开两个质点间的最小距离。
D=0.61λ/N·sin(α/2)5.原位杂交：原位杂交是指以标记的核酸探针通过分子杂交确定特异核苷酸序列在染色体上或在细胞中位置的方法。
6.细胞融合：指两个或多个细胞融合成一个双核或多核细胞的现象。
7.荧光漂白恢复技术：使用亲脂性或亲水性的荧光分子，如荧光素、绿色荧光蛋白等与蛋白或脂质耦联，用于检测所标记分子在活体细胞表面或细胞内部的运动及其迁移速率。
8.膜脂主要包括甘油磷脂、鞘脂和固醇三种基本类型。
9.脂质体：是一种人工膜。
根据磷脂分子可以在水相中形成稳定的脂双层膜的趋势而制备的人工膜。
10.膜转运蛋白的分类：载体蛋白、通道蛋白。
11.胞吞作用：细胞通过质膜内陷形成囊泡，将胞外的生物大分子、颗粒性物质或液体等摄取到细胞内，以维持细胞正常的代谢活动。
细胞吞入液体或极小的颗粒物质，形成的囊泡较小，称为胞饮作用。
细胞内吞较大的固体颗粒物质，如细菌、细胞碎片等，形成的囊泡较大，称为吞噬作用。
12.氧化磷酸化：指在呼吸链上与电子传递相偶联的由ADP被磷酸化形成ATP的酶促过程。
13.ATP合酶。
状如蘑菇，属F型质子泵。
分为球形的F1（头部）和嵌入膜中的F0（基部）。
F1由5种多肽组成α3β3γδε复合体，具有三个ATP合成的催化位点（每个β亚基具有一个）。
F0由三种多肽组成ab2c12复合体，嵌入内膜，12个c亚基组成一个环形结构，具有质子通道。
14.光合磷酸化：由光照所引起的电子传递与磷酸化作用相偶联而生成ATP的过程。
电子显微学考试
第一章复习题：1.什么是轴对称场？为什么电子只有在轴对称场中才被聚焦成像？所谓轴对称场，是指在这种场中，电位的分布对系统的主光轴具有旋转对称性。
非旋转对称磁场在不同方向上对电子的汇聚能力不同，因此不能将所有电子汇聚在轴上的同一点，会发生象散。
2.磁透镜的象散是怎样形成的？如何加以矫正？像散是由于透镜磁场的非旋转对称而引起的。
极靴内孔不圆、上下极靴的轴线错位、制作极靴的材料材质不均匀以及极靴孔周围局部污染等原因，都会使电磁透镜的磁场产生椭圆度。
透镜磁场的这种非旋转对称，使它在不同方向上的聚焦能力出现差别，结果使物点P通过透镜后不能在像平面上聚焦成一点。
像散可通过消像散器补偿。
3.什么是透镜畸变？为什么电子显微镜进行低倍率观察时会产生畸变？如何矫正？透镜的畸变是由球差引起的，像的放大倍数将随离轴径向距离的加大而增加或减小。
当透镜作为投影镜时，特别在低放大倍数时更为突出。
因为此时在物面上被照射的面积有相当大的尺寸，球差的存在使透镜对边缘区域的聚焦能力比中心部分大。
反映在像平面上，即像的放大倍数将随离轴径向距离的加大而增加或减小。
可以通过电子线路校正：使用强励磁，使球差系数Cs显著下降；在不破坏真空的情况下，根据放大率选择不同内径的透镜极靴；使用两个投影镜，使其畸变相反，以消除。
4.TEM的主要结构，按从上到下列出主要部件1）电子光学系统——照明系统、图像系统、图像观察和记录系统；2）真空系统；3）电源和控制系统。
电子枪、第一聚光镜、第二聚光镜、聚光镜光阑、样品台、物镜光阑、物镜、选区光阑、中间镜、投影镜、双目光学显微镜、观察窗口、荧光屏、照相室。
5. TEM和光学显微镜有何不同？光学显微镜用光束照明，简单直观，分辨本领低（0.2微米），只能观察表面形貌，不能做微区成分分析；TEM分辨本领高（1A）可把形貌观察，结构分析和成分分析结合起来，可以观察表面和内部结构，但仪器贵，不直观，分析困难，操作复杂，样品制备复杂。
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1、显微技术包括哪些部分内容？
2、选材（取材）的原则是什么？理想固定剂的要求是什么？
3、脂肪性物质的最佳固定剂是什么？
5、卡诺、FAA固定液是如何配制的？
6、固定时应注意哪些事项？固定液的配制原则？
7、常用的染色剂有哪些类型？配制时应注意什么？染色时应注意什么？
8、常用的脱水剂有哪些？脱水时应注意什么？
9、常用的透明剂有哪些？
10、修块的注意事项有哪些？
11、浸蜡时应注意什么？包埋的操作步骤如何？
12、试述徒手切片方法制片的过程。
13、试述滑走切片方法制片的过程。
此方法中有什么特殊步骤？
14、试述压片法制片的过程。
15、试述石蜡制片的过程。
16、石蜡切片中切出的蜡带不直，成弯曲状或切片纵裂，材料破碎，为什么？应怎样防止？
17、石蜡切片法的优点是什么？
18、试述解离法制片的过程。
19、生物制片有哪些类型？
20、常用的切片法有哪些？常用的非切片法有哪些？适用于哪些情况？
21、冰冻切片法适用于什么样的材料？
22、可对细胞壁中的果胶质、纤维素、木质素、角质和栓质进行染色的染料分别是什么？
23、检查淀粉、脂肪、菊糖、蛋白质等后含物的试剂是什么？
用什么试剂鉴别活细胞和死细胞？
24、透射电子显微镜的特点如何？
25、扫描电子显微镜的特点如何？
26、荧光显微镜的原理和特点如何？使用时有何注意事项？
27、体视显微镜的特点如何？
28、暗场显微镜的特点如何？
29、显微镜的常用附件有哪些？
30、倒置显微镜的特点如何？
31、透射电镜中常用哪些方法或技术进行样品处理，以利于观察？
32、怎样的照片才算是好照片？
33、照相机的原理是什么？影响曝光的因素有哪些？
34、快门的作用是什么？快门速度调节盘上的数字和快门速度之间的关系如何？
35、光圈、焦距和景深的关系如何？
36、名词解释：生物显微技术、单纯固定液、混合固定液、固定、复式显微镜、单式显微镜、感光度、互易律、丁达尔现象、分辨率、景深。