PH值法测定甘氨酸合镍配合物逐级稳定常数
甘氨酸检验操作规程
甘氨酸检验操作规程1.目的：建立甘氨酸测定操作规程，便于检验人员规范操作。
2.范围：适用于配制各种氨基酸注射液的甘氨酸测定。
3.责任：质检科检验员对实施本规程负责。
4.程序：4.1性状：白色结晶性粉末，无臭、味甜。
4.2鉴别试验4.2.1本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱（光谱集929图）一致。
4.3 酸度（pH值）测定4.3.1测定范围：5.9～6.44.3.2配制溶液：取本品1.0g，加新沸过的冷水20ml，溶解。
4.3.3操作步骤：在pH计上测定（操作见pH值测定操作规程）4.4溶液的透光度测定4.4.1测定范围：>99.0%4.4.2溶液配制；取本品1.0g，加水20ml溶解。
4.4.3操作步骤：照分光光度法，在430nm波长处测定其透光率（操作见分光光度法测定操作规程）。
4.5氯化物测定4.5.1测定范围：<0.007%4.5.2试剂和试液：6mol/L HCL：取54ml盐酸稀释至100ml，即得。
4.5.3操作步骤：4.5.3.1称取本品1.0g，置50ml纳氏比色管中，加水溶解至25ml，再加稀硝酸10ml，加水使成40ml，摇匀，再加入硝酸银液(0.1mol/L)1.0ml，用水稀释至50ml，在暗处放置5分钟，作样品管。
4.5.3.2以标准氯化钠溶液7ml，作对照液，用4.5.3.1同样方法同时操作，作对照管。
4.5.3.3两管以黑色为背景底，从上方向下观察比较，所产生的浑浊度，样品管应浅于对照管。
4.6硫酸盐测定4.6.1测定范围：<0.006%4.6.2试剂和试液：4.6.2.1稀盐酸溶液：取盐酸23.4ml，加水稀释至100ml，即得。
4.6.2.2 25%氯化钡试液：取氯化钡25g ，加适量的水溶解，并稀释至100ml，即得。
4.6.2.3标准硫酸钾溶液：1ml＝100µg4.6.3操作步骤：4.6.3.1称取本品2.5g，置50ml纳氏比色管中，加水溶解成40ml，加稀盐酸2ml，摇匀；加入25%氯化钡溶液5ml，用水稀释使成50ml，充分振摇，放置10分钟，作为样品管。
2络合物组成和不稳定常数的测定-----等摩尔系列法
韩山师范学院化学系化学专业物化实验课实验报告班级学号姓名同组评分实验日期:室温气压教师实验题目:络合物组成和不稳定常数的测定-----等摩尔系列法实验目的:1.学会用等摩尔系列法测定络合物组成、不稳定常数的基本原理和实验方法。
2.计算络合反应的标准自由能变化。
3.熟练掌握测定溶液pH值和光密度的操作技术。
实验原理：络合物MA n在水溶液中的络合与解离反应式为：M+nA MA n达到平衡时，Ｋ不稳=[M][A]n [MA n]式中，Ｋ不稳为络合物不稳定常数，［Ｍ］、［Ａ］和［ＭＡn］分别为络合平衡时金属离子、配位体和络合物的浓度、n为络合物的配位数。
在络合反应中，常伴有颜色的明显变化，因此研究这些络合物的吸收光谱可以测定它们的组成和不稳定常数。
测定方法较多，本实验采用应用最广的等摩尔系列法测定Ｃu（Ⅱ）－磺基水杨酸络合物的组成和不稳定常数。
1、络合物组成的测定在维持金属离子Ｍ和配位体Ａ总浓度不变的条件下，取相同浓度的Ｍ溶液和Ａ溶液配成一系列ＣM／（ＣM＋ＣA）不同的溶液，这一系列溶液称为等摩尔系列溶液，当所生成的络合物ＭＡn的浓度最大时，络合物的配位数n可按下述简单关系直接由溶液的组成求得n＝C A／ＣM显然，通过测定某一随络合物含发生相应变化的物理量，例如光密度Ｄ的变化，作出组成－性质图，从曲线的极大点便可直接得到络合物的组成。
络合物的浓度和光密度的关系符合朗伯－比尔定律：Ｄ＝lgＩ0／Ｉ＝acl利用分光光度计或光谱仪测定溶液光密度Ｄ与浓度c的关系，即可求得络合物的组成，不同络合物的组成－光密度图具有不同的形式。
2、不稳定常数的测定在络合物明显解离的情形下，用等摩尔系列法得到的曲线，并作切线交于Ｎ点。
设在Ｎ点的光密度为Ｄ0，曲线2的极大的光密度为Ｄ，则络合物的解离度为：α＝解离部分／总浓度＝（总浓度－络合物浓度）／总浓度＝（Ｄ0－Ｄ）／Ｄ0对于ＭＡ型络合物的Ｋ不稳＝cα2／（１－α），故将该络合物浓度c及上面求出的α代入此式即可算出不稳定常数。
实验十四配位化合物的组成和稳定常数的测定
实验十四配位化合物的组成和稳定常数的测定实验十四配位化合物的组成和稳定常数的测定【目的要求】1．学习等摩尔系列法测定配合物组成和稳定常数。
2．熟悉分光光度法的应用。
【基本原理】磺基水杨酸与Fe 3+可以形成稳定的有色的配合物，控制溶液的pH 值不同，所形成的配合物组成和颜色均不相同。
本实验将测定pH ＜2.5时所形成的红褐色磺基水杨酸合铁（Ⅲ）的组成和表观稳定常数'K 稳。
根据朗伯-比尔定律，溶液的吸光度与有色物质的浓度成正比，选择一定波长的单色光，采用等摩尔系列法进行测定，即在保持溶液中金属离子浓度c M与配位体溶液浓度c L 之和不变（总物质的量不变）的条件下，改变c M 与c L 的相对量，配制一系列溶液，测定其吸光度。
当溶液中配位体与金属离子物质的量之比与配合物组成相一致时，配合物的浓度最大。
由于金属离子均无色，对光完全不吸收，所以配合物的浓度最大时，其吸光度值A 也最大。
以吸光度A 为纵坐标，配位体摩尔分数X L 为横坐标绘图，配合物的组成n 就等于最大吸收峰处金属离子与配位体摩尔分之比。
图3-14-1n ＝X L1－X LX L 和(1-X L )分别为最大吸收峰处的配位体摩尔分数和金属离子摩尔分数。
将图中曲线两侧的直线部分延长并相交于B 点，可认为是金属离子M 与配体L 全部生成配合物ML n 时的吸光度，但由于ML n 有部分解离，而实际测得最大吸光度为D 处。
因此，配合物的离解度为：%100121?-=A A A α 若 ML n ＝ M ＋ n L起始浓度 c 0 0平衡浓度 c －c α c α nc α配合物的表观稳定常数计算公式为：1'1]][[][+-==n n n n n c n L M ML K αα稳 c 为最大吸光度处ML n 的起始浓度，也是组成ML n 的金属离子的浓度，当n ＝1时，2'1ααc K -=稳【仪器和药品】吸量管，容量瓶，722型（721型）分光光度计，0.01mol ·L -1HClO 4，0.001mol ·L -1磺基水杨酸，0.0100mol ·L -1Fe 3+。
Excel在化学实验数据处理中的应用
１ ２ 用 Ｅ ｃｌ ． ｘｅ 计算甘氨酸的离解 常数
要 通 过 Ｅ ｃｌ电 子 表 格 完 成 滴 定 过 程 中 ｘｅ
［ 卜一 ￡一 而的计 算 ， 必须 先 进 行甘 氨 酸 离解 常 数 的 计算 。打 开 Ｅ ｃｌ在 工 作 表 一 中 ， 并 Ａ 一 Ｈ１ ｘｅ， 合 １ 单元 格 ， 工作 表 一 命 名 为甘 氨 酸 离解 常 数 的计 把 算 ， Ａ 、２ Ｅ 、 ２ Ｈ 在 ２ Ｃ 、 ２ Ｇ 、 ２中 分 别 输 入 Ｎ Ｏ 浓 ａＨ 度、 甘氨 酸 浓 度 、 度 、 温 日期 和 它 们 的 值 ， ３ Ｈ Ａ一 ３ 单 元 格 分 别 设 置 为 Ｖ（ ａ Ｈ） ｐ ［ ］ ｌ Ｎ Ｏ 、 Ｈ、 Ｈ 、ｇ ［ ］ ［ Ｈ一 、 ． ［ ａ 和 ｐ ａ 在 Ａ Ｈ 、 Ｏ ］ Ｃ． Ｎ ］ 、 Ｋ。 ３列 和 Ｂ ４列对 应 单 元 格 中输 入 实 验 测 得 的 数 据 ，４ Ｃ 一 Ｈ ４单 元 格 中根 据 实 验计 算 公 式 应用 Ｅ ｃｌ 的 ｘｅ 中
发 生变 化 。可利 用 ｐ 计 测 量 该 体 系 中 Ｈ Ｈ 离 子 浓 度 的变 化 来 计 算 配 合 物 的逐 级 稳 定 常 数 Ｋ ， ，
函数编写计算程序 ， 计算出一组 ｐ ａ Ｋ 。拖拽单 元 格填 充柄 ， ｘｅ 可根 据 活 动 单 元 格 的 公式 ， 变 Ｅ ｃｌ 按
维普资讯
第２ ７卷第 ２期 ２０ ０７年 ３月
云南 师范 大学 学报
Ｊ ｕｎ ｌ ｆＹ ｎ ａ ｒ ｌＵｎｖ ｒｉ ｏ ｒａ ｕ ｎ ｎＮｏｍａ ｏ ｉｅｓｔ ｙ
Ｖ０ ． ７ Ｎ ． １２ ０ ２
Ｍａ ．２ ７ ｒ ００
Ｅ ｃｌ 化 学 实验 数 据 处 理 中的应 用 ｘｅ 在
电位-pH法测定稀土配合物稳定常数的原理、方法及热力学函数的计算
物的热力 学函数的过程 ，为讨论稀＿ａ合物热力学行为提供理论依据 。 ＋ｔ －
关键词 ：稀土 配合物；稳定常数 ；热 力学 函数
中图分类号 ：０ ９ ６ 文献标识码 ：Ａ 文章编号 ：１７ — ２ ９（ ０ ２ ４ ０ ６ — ３ ６ ３ ２ １ ２ １ ）０ — ０ ２ ０
稀 土是镧 系元 素及钪 、钇 十七种 元素 的总称 ， 占周期表 中全部元素 的六分之一 。稀土元素具有很特殊 的外层 电子结构 ， 易与 Ｏ、Ｎ 等原子 结合 形成 配合物 ，使其 具有很多不同寻常的光、 电、磁 及化 学特性 ，在材 料化 学和生物化学领域有着广 泛的应 用前景 ，近 年来 已成为许 多化 学家十分感兴 趣的研究领域 。 在溶 液体系的配位化学研究中 ， 确定配合物物种 的组成 ，测定配合物的稳定常数有着 重要的理论及现 实意义 。稀土配合 物形成的热力学函数与稳定常数密切相关 ，而热力学函数对于 了解稀 土配合物 的统计效应 、键 的类型 、键强大小 、配体之 间 的作用能力、几何 因素的作用、螯合效应等具有十分重要的意义。溶液体系稀土配合物 稳定常数 的研究方法较 多 ，电位 一Ｈ ｐ 法是测定配合物稳定常数 的常用方法 ，该法实验简单易行。数据准确可靠 ，至今 被认 为是测定稀 土配合物稳 定常 数的最佳 实
的形成 函数 ｎ ，然 后再 归结为 由ｎ 求稀土配合 物各 级稳定常 数。
收 稿 日期 ：２ １ 一Ｏ — １ Ｏ２ ２ ２
基金项 目：湖南省教 育厅资助项 目 （ 目编号 Ｎ ０ Ｃ ０ ） 项 ｏ７ ７ １。 作者简介 ：王彬 （９ ９ ） １６ － ，甘肃兰州人 ，男，博士 ，副教授 ，研究方 向为药物化学 。
（） ４
把每一滴 定点 的［ 值与［ 代 入，即能计算 出各滴定点 的 ｆ 值 。在 已知一组 （ ，［ ）数据 时， Ａ】 Ｈ】 ｉ － Ａ］ 就可 以由式 （）计 算 ２ 稳定常数届，但是为 了得到 比较可 靠的结果 ，常常不从一组数据进行 单点计算 ，而是把几组数据进行综合数据处理 。早期主
配合物稳定常数的测定
第七章配合物稳定常数的测定配合物稳定常数是判断溶液中配合物稳定性的重要数据。
早期的测定方法是：测得的是配合物的积累稳定常数实验方法上分：传统的方法有：1 电位法1）电动势法2）pH －电位法2 分光光度法3 溶剂萃取法4 离子交换法5 极谱法现代的方法：1 核磁共振法2 顺磁共振法3 折射法4 直接量热法5 测温滴定量热法数据处理方法上的进展：1 提出了测定稳定常数的比较普遍适用的数据处理方法2 计算机的引入，3 数学方法在测定稳定常数时的应用：1）最小二乘法2）加权最小二乘法测定的稳定常数一般为浓度稳定常数：在一定离子强度下的稳定常数，离子强度的支持电解质有：NaClO 4KNO 3NaNO3KClNaCl 对于稳定常数大者，采用较小的离子强度对于稳定常数小者，采用较大的离子强度实验方法上分：A 直接测出参与某一反应的物种的平衡浓度，pH 电位法，电动势法，极谱法，溶剂萃取法，离子交换法。
B 测出体系的物理化学性质来间接求出各物种的浓度，如光密度（分光光度法），量热法等。
本课程主要介绍电动势法和pH －电位法。
第一节用于测定配离子稳定常数时的函数用有关的实验方法测定配离子的稳定常数时，将有关数据，通过适当的函数，与待求的稳定常数联系起来，经过一定的数据处理，有图解或计算可求出稳定常数。
1 Fronaeus 函数Fronaeus函数又称为成配度，和前面的副反应系数a M的形式是一样的，通常用Y o表示:对于形成配合物的体系，因有:M + iL=ML I[MLJ i[M][L]i[ML I ]= 3 I [M][L] 1n而[M] T =1 [ML i ]i 1Y O =[M] [ML] [ML 2] ...n[ML n ][M]n=1+i[L]ii 1Y o 仅仅是游离配体浓度[L]的函数。
2生成函数n （Bjerrum 函数）生成函数n 表示已与中心离子 M 配位的配体数目的平均值。
已配位于中心离子的配体的总浓度中心离子的总浓度对于M 与配体L 形成单核配离子体系来说，已与中心离子配位的配体的总浓度为:[ML]+2[ML 2]+3[ML 3]+….+n[ML n ],中心离子的总浓度为 [M] T ,则有：-[ML] 2[ML 2] ... n[ML n ] n[M ] [ML] .... [ML n ]将有关稳定常数的表达式代入，则有：-1[L]2 2[L]2…n n[L]n 11[L] ...n[L]n小结：生成函数 -只是[L]的函数。
两种体系中甘氨酸合铜配合物稳定常数的测定
两种体系中甘氨酸合铜配合物稳定常数的测定
张有娟;陈静;朱艳玲;郎丽杰
【期刊名称】《安阳工学院学报》
【年(卷),期】2007(000)001
【摘要】采用pH电位滴定法研究了甘氨酸水溶液和甘氨酸钠水溶液两种体系中甘氨酸与铜离子间的配位作用,测定了两种体系中甘氨酸与铜配合物的逐级稳定常数;对影响测定准确度的原因进行了详细的分析,采用Origin 6.0计算机软件包来处理实验数据和作图.
【总页数】4页(P42-45)
【作者】张有娟;陈静;朱艳玲;郎丽杰
【作者单位】安阳师范学院,化学系,河南,安阳,455000;安阳师范学院,化学系,河南,安阳,455000;安阳师范学院,化学系,河南,安阳,455000;安阳师范学院,化学系,河南,安阳,455000
【正文语种】中文
【中图分类】O614.81
【相关文献】
1.磺基水杨酸合铜配合物组成和稳定常数测定实验的改进 [J], 刘绍乾;方正法;杨章鸿;董和大;黄思
2.pH法测定甘氨酸合镍配合物逐级稳定常数——介绍一个开放式实验 [J], 王峥;周立群;刘丽颖
3.pH法测定甘氨酸合镍配合物的稳定常数 [J], 李自弘
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5.“pH法测定甘氨酸合镍配合物的逐级稳定常数”学习指导 [J], 易琼;王石泉;王峥
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配合物的稳定常数的测定
配合物的组成和不稳定常数的测定（物理化学 李俊）一、目的要求1. 掌握用分光光度法测定配合物组成及稳定常数的基本原理和方法。
2. 通过实验，掌握测量原理和分光光度计的使用方法， 二、实验原理1,用等摩尔连续递变法测定配合物的组成“递变法” 实际上是一种物理化学分析方法。
可用来研究当两个组分混合时， 是否发生化 合，配合，缔合等作用，以及测定两者之间的化学比。
其原理是 :在保持总浓度不变的前提 下，依次逐渐改变体系中两个组分的比值，并测定不同摩尔分数时的某一物理化学参量。
在本实验中就是测定不同摩尔分数时溶液的光密度值 D ，作光密度对摩尔分数的曲线 图，如图 3－ 1,所示。
从曲线上光密度的极大值 D 极大所对应的摩尔分数值，即可求出配位数n 值。
为了配制溶浓时方便，通常取相同摩尔浓度的金属离子 M 溶液和配位体 L 溶液。
在维持总体积不变的条件下， 按不同的体积比配成一系列混合溶液。
这样体积比亦就是摩尔 分数之比。
若溶液中只有配合物 MLn 具有颜色，则溶液的 D 与 MLn 的含量成正比。
从 D-X 图上曲线 的极大位置即可直接求出 n ，但当配制成的溶液中除配合物外， 尚有金属离子 M 及配位体 L 与配合物在同一波长 λ最大 下也存在一定程度的吸收时，所观察到的光密度 D 并不完全由配 合物 MLn 的吸收所引起， 必须加以校正。
所以选择适当的波长范围， 仅使配合物设X L 为D极大时L 溶液的体积分数M 溶液的体积分数为 则配合物的配MLn 有吸收，M 和L 都不吸收或极少吸收。
2.配合物平衡常数的测定假定配合物中心离子浓度不变，而渐增加配位体浓度，随着配位体浓度的改变，中心离子被配成MLn ，溶液的光密度值 D 不断升高。
当中心离子被完全配合后，如继续增加配位体的浓度，则溶液的光密度值 D 趋于恒定，如图3-2。
设配合物在稀溶液中有如下解离平衡存在:最初浓度平衡浓度式中，n-配位数，已由实验确定;a-解离度:C-配合物未解离时的浓度（在本实验中亦为M 完全配合时的配合物浓度）。
实验报告甘氨酸的含量测定
甘氨酸的含量测定——电位滴定法生药1011 第四组一、应用范围：本方法采用滴定法测定甘氨酸原料药中甘氨酸的含量。
本方法适用于甘氨酸原料药。
二、方法:供试品无水甲酸溶解后，加冰醋酸，照电位滴定法，用高氯酸滴定液滴定，并将滴定的结果用空白试验校正，根据滴定液使用量，计算甘氨酸的含量。
三、原理：和一COOH，为两性物质，在水溶液中，它的酸式电氨基酸分子中含有一NH2离和碱式电离的趋势都很弱(如氨基乙酸其羧基上的氢Ka=2．5×10-10，氨基作为碱Kb=2．2×10-12)，因此无法准确滴定。
作滴定剂，结晶紫为指示剂准确但在非水介质(如冰乙酸)中，可以用HC104滴定氨基酸，产物为氨基酸的高氯酸盐，呈酸性。
结晶紫在强酸介质中为绿色，pH=2左右为蓝色，pH>3时为紫色，可以指示此反应的滴定终点。
(由紫色到蓝色到蓝绿到绿色到黄色变化)四、实验材料1、试剂：（1）冰醋酸（2）无水甲酸（3）高氯酸滴定液（0.1mol/L）（4）结晶紫指示液（5）基准邻苯二甲酸氢钾2、仪器设备：电位滴定仪、酸度计或电位差计、容量瓶、烧杯、磁力搅拌器、搅拌子等五、操作步骤1.高氯酸滴定液（0.1mol/L）试样制备配制：取无水冰醋酸（按含水量计算，每1g水加醋酐5.22mL）750mL，加入高氯酸（70~72%）8.5mL，摇匀，放冷，加无水冰醋酸适量使成1000mL，摇匀，放置24小时。
若所测供试品易乙酰化，则须用水分测定法测定本液的含水量，再用水和醋酐调节至本液的含水量为0.01%~0.2%。
2.结晶紫指示液取结晶紫0.5g，加冰醋酸100mL使溶解。
3.标定：取在105℃干燥至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾约0.16g，精密称定，加无水冰醋酸20mL使溶解，加结晶紫指示液1滴，用本液缓缓滴定至蓝色，并将滴定结果用空白试验校正。
每1mL高氯酸滴定液（0.1mol/L）相当于20.42mg的邻苯二甲酸氢钾。
齐齐哈尔大学化工学院化学系专业实验无机化学实验报告甘氨酸
齐齐哈尔大学实验报告题目：甘氨酸镍配合物的逐级稳定常数的测定学院：化学与化学工程学院专业班级：＿＿＿化学091＿＿学生姓名：＿＿＿张淑贤＿＿＿同组者姓名：＿＿张玉玲＿＿＿＿＿成绩：＿＿＿＿＿＿＿＿＿2012 年 11 月 10日实验3 甘氨酸镍配合物的逐级稳定常数的测定实验目的1. 掌握用pH 法测定配合物的逐级稳定常数的基本原理。
2. 掌握用pH 法测定配合物的逐级稳定常数的计算方法。
实验原理在测定配合物稳定常数所使用的各种方法中,电位法应用得最广泛,而所得数据也最精确。
pH 法是电位法的一种,它是根据当配位体是弱酸或弱减时,在形成配合物的形成过程中,溶液的pH 值发生变化,从pH 值的变化可以计算出配体的浓度,从而可计算配合物的稳定常数。
由于pH 法的设备简单,操作方便,因此得到了广泛的应用。
配合物随有各种几何构型,但在溶液中第一过渡系列金属离子M2+总是形成[M(H2O)5L]2+形式的八面体配合物,若在这水溶液中加入更强的配体L,则L 将逐步取代水而形成一系列配合物：[M(H2O)5L]2+,[M(H2O)4L2]2+,……[ML6]2+。
由于水溶液中水的浓度基本上是一常数，所以在反应平衡的化学方程式中和平衡常数的表示式中常将H2O 消去而简写成：[ML 2+][M 2+][L]K 1=M2++LML 2+ML 2++LML 22+K 2=[ML 22+][ML 2+][L]……ML 52++L ML 62+K 6=[ML 62+][M 52+][L]式中：K1，K2，…，K6称为逐级稳定常数。
配合物的温带常数有时用积累稳定常数β来表示。
它与逐级稳定常数K 的关系为： β1=K1, β2=K1.K2 …β6=K1.K2.K3…K6必须指出，热力学平衡常数是平衡时各组分活度的函数，而计算复杂体系的活度系数是十分困难的。
溶液中离子强度不同，其组分浓度即使相同，活度系数亦不同。
因此，在实际研究中常固定溶液浓度，用平衡时各组分的浓度代替活度，这样得到的平衡常数称为浓度形成常数；由于离子强度不同，浓度形成常数也不同，所以有时有称条件形成常数。
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PH值法测定甘氨酸合镍配合物逐级稳定常数摘要：测定配合物稳定常数的方法有十几种：PH值法，电动势法，分光光度法，极谱法，离子交换法，溶解度法等。
本实验使用PH法来测定配合物的稳定常数。
以镍为中心离子，甘氨酸为配体，通过测定配合物形成过程PH的变化来计算配体的平衡浓度，再用半n法和Rossetti图解法来计算配合物的稳定常数。
并在实验过程中掌握PH法测定逐级稳定常数的基本原理和方法，熟悉溶液的配置标定及PH计的使用方法。
关键词：PH法，甘氨酸合镍，逐级稳定常数引言PH法是电位法的一种，他是根据当配体是弱酸或弱碱是，在形成配合物的过程中，溶液的PH值发生变化，从PH值的变化可以算出配体的平衡浓度，从而可以算出配合物的稳定常数。
本实验中由于甘氨酸是二齿配体，它可通过O与N和Ni2+配位形成配位数为六的配合物，则体系有下列配位平衡：同时，体系中还存在着甘氨酸的解离平衡：Ka：甘氨酸的离解常数由上述各式可知由于Ni2+与HL形成配合物而使体系中的H+浓度发生变化。
因此，可以利用PH测量该体系中H+ 浓度的变化来计算配合物的逐级稳定常数K1、K2、K3。
为计算K1,K2,K3,利用生成函数n来求，n定义为每个金属离子所配位的配体的平均数。
由此式可知若已知n和L即可求得K1、K2、K3。
由n和L计算稳定常数的方法很多，本实验采用半n法和Rossetti图解法。
1.半n法若体系中仅存在以下一种平衡：由（6-1）式可知由n的定义得，n=0.5若体系中仅存在以下平衡：由（6-2）式可知lgK2=p[L-]由n的定义得n=1.5同理当，n=2.5所以当求出n和l-后，以n为纵坐标，pl-为横坐标作图，图中n=0.5,1.5,2.5所对应的pl-即为lgK1、lgK2、lgK3。
2.Rossetti图解法若以累积稳定常数代替n式β1、β2、β3中的K1、K2、K3，则重排后得：取n在0.2到0.8范围内的实验数据，以作图得一条直线，直线截距为β1，斜率为β2，再以所得的β1，代入（10）式，并用除等式两边，重排得取n=1.1～1.7范围内的实验数据，以作图得一直线，直线截距为β1，斜率为β3，这样可求β1、β2、β3得K1、K2、K3。
本实验中，n可通过甘氨酸的总浓度CL,甘氨酸的平衡常数浓度HL,甘氨酸根的浓度L-,以及Ni2+的总浓度得：由（4）式得：溶液中甘氨酸平衡浓度：将（7）式代入（6）式得：其中CH+为外加HNO3浓度，H+为游离H+浓度，OH-为H2O离解出的H+浓度，因为PH 计测的是H+的活度，所以要转化为浓度当离子强度u=0.10时平均活度系数（Z1,Z2分别为惰性电解质的正负离子电荷绝对值）由以上几式可得：另外，本实验还需测定甘氨酸的离解常数Ka，它是通过已知浓度的NaOH溶液滴定甘氨酸来求得，由于电离平衡：溶液中总的甘氨酸浓度为将上几式整理得：2.实验部分2.1实验试剂与仪器主要实验试剂见表1试剂名称试剂级别生产厂家试剂性质硝酸钾KNO3 AR 北京化工厂甘氨酸BR 北京奥博星生物技术生化试剂有限公司浓硝酸AR 北京化工厂强氧化性，避光保存与棕色瓶中，易挥发氯化镍AR 天津市化学试剂三厂绿色主要实验仪器酸式碱式滴定管PH酸度计2.2实验步骤2.2.1溶液的配置（1）称取5.05g KNO3 固体定容于250ml容量瓶中，使其浓度为0.2M（2）吸取0.67ml 浓HNO3,定容于100ml容量瓶中，使其浓度为0.1M,并用0.1M NaOH 溶液标定，而NaOH不纯不能用作基准物质，还需用0.1M的邻苯二甲酸氢钾标定（3）称取0.75g甘氨酸于25ml容量瓶中，使其浓度为0.4M（4)称取0.95g含结晶水的氯化镍，定于100ml容量瓶中，使其浓度为0.04M（5)称取2g NaOH固体定容于100ml容量瓶中，使其浓度为0.5M,并用（2）中的HNO3标定(6)称取0.75g甘氨酸，移取20ml（5）中的NaOH溶液，得到0.4M 25ml甘氨酸钠溶液2.2.2溶液的标定（1）称取1gNaOH固体溶解稀释至250ml容量瓶中（2）在锥形瓶中加入0.4到0.6g邻苯二甲酸氢钾3份，分别加入40到50ml蒸馏水，完全溶解后，滴2到3滴酚酞，用NaOH标定。
（3）移取20ml 0.1 M HNO3溶液3份于锥形瓶中，加入酚酞2到3滴，用NaOH标液标定至微红色并半分钟不褪色。
2.2.3测定甘氨酸离解常数在400ml烧杯中，加入100ml 0.2M的KNO3溶液，90ml蒸馏水和10ml 0.4M的甘氨酸，在搅拌下用0.5M的NaOH溶液来滴定，每次加入0.5ml。
每次加后，测定溶液的PH，一直滴到甘氨酸全部中和为止，即PH=10左右，记录加入的NaOH溶液的体积和相应的PH值2.2.4测定甘氨酸合镍配合物逐级稳定常数在400ml烧杯中注入100ml 0.2M硝酸钾溶液，10ml 0.1M硝酸溶液，65ml水，25ml 0.04M 氯化镍溶液，在搅拌下，用0.4M甘氨酸钠溶液滴定，每次注入0.2ml,一直滴完10ml甘氨酸钠溶液为止，记录每次加入甘氨酸钠溶液的体积和相应的PH值2.2.5数据记录1.邻苯二甲酸氢钾滴定HNO3溶液邻苯二甲酸氢钾m/g 消耗NaOH体积ml NaOHaq浓度M1 0.5031 25.65 0.09612 0.5140 26.35 0.09563 0.4986 25.25 0.0968得到NaOHaq的平均浓度为0.0962M2.用0.0962 M NaOHaq标定0.1M硝酸消耗NaOH体积ml HNO3的体积/ml HNO3浓度/M1 25.44 25 0.09792 25.65 25 0.09873 25.29 25 0.0973得到HNO3溶液的平均浓度为0.0980M3.用0.0980M HNO3溶液标定步骤（5）中的0.5M NaOH溶液NaOH的体积ml 消耗HNO的体积/ml NaOHaq浓度M1 5.00 25.58 0.50452 5.00 25.60 0.50173 5.00 25.64 0.5026得到NaOHaq的平均浓度为0.5029M4.实际称取的甘氨酸质量为0.7523g,求得甘氨酸溶液的浓度为0.4012M5.实际称取含结晶水的氯化镍的质量为0.9512g,求得氯化镍溶液的浓度为0.0401M6.甘氨酸在0.1M硝酸钾溶液中的离解常数注入NaOH溶液的体积ml PH Lg[H+] [H+]×10-10[OH-]×10-5Cl×10-2[Na+]×10-3pka0.5 8.68 -8.6630 21.7260 0.7434 1.9950 1.2541 9.83921.0 9.06 -9.0364 9.1956 1.7563 1.99002.5020 9.88211.5 9.22 -9.1915 6.43362.5102 1.98513.7437 9.82882.0 9.39 -9.3575 4.38993.6789 1.98014.9792 9.83562.5 9.51 -9.47413.35664.8114 1.9753 6.2086 9.81793.0 9.64 -9.6011 2.5058 6.4451 1.9704 7.4320 9.82493.5 9.74 -9.6983 2.0030 8.0629 1.9656 8.6494 9.81024.0 9.85 -9.8058 1.5638 10.3278 1.9608 9.8608 9.80994.5 9.94 -9.8935 1.2779 12.6382 1.9559 11.0662 9.7900求得pka的平均值为9.82657．甘氨酸合镍逐级稳定常数的计算（1）半n法因数据记录繁琐，故取下列数据PH [H+]M[OH-]M Cl M Ka/[H+] n [L] M p[L-]注入甘氨酸钠溶液的体积ml1.02.85 1.82×10-38.88×10-12 1.99×10-38.19×10-8-0.2142 25.04×10-109.60132.03.63 3.01×10-4 5.35×10-11 3.96×10-34.94×10-7-0.1190 2.25×10-98.64833.0 5.84 1.86×10-68.68×10-9 5.91×10-38.01×10-50.2203 3.87×10-7 6.41254.0 6.415.01×10-7 3.23×10-87.84×10-3 2.98×10-40.6198 1.43×10-6 5.84445.06.81 1.99×10-78.11×10-89.76×10-37.49×10-4 1.0193 3.58×10-6 5.44636.07.178.69×10-8 1.83×10-7 1.16×10-2 1.71×10-3 1.4183 8.16×10-6 5.08827.0 7.59 3.30×10-8 4.89×10-7 1.35×10-2 4.51×10-3 1.8155 2.14×10-5 4.67018.0 8.10 1.02×10-8 1.58×10-6 1.54×10-2 1.46×10-2 2.2053 6.89×10-5 4.16199.0 8.59 3.30×10-9 4.89×10-6 1.72×10-2 4.52×10-2 2.57462.12×10-43.6735 10.08.99 1.31×10-9 1.23×10-5 0.0190.1132.90595.31×10-43.2747以n 为纵坐标，p [L -]为横坐标作图n=0.5，p [L -]=6.0757, lgK1=6.07 n=1.5, p [L -]=4.9325, lgK2=4.93 N=2.5, p [L -]=3.7894, lgK3=3.79(2)Rossetti 图解法取n=0.2～0.8范围内的实验数据，根表数据做图 输入甘氨酸的体积ml 3.0 3.2 3.4 3.6 3.8 4.0 4.2 4.4PH 5.84 5.98 6.09 6.20 6.31 6.41 6.49 6.58n 0.2203 0.3002 0.3801 0.4600 0.5399 0.6198 0.6997 0.7796 [L -]×10-73.875.336.87 8.84 11.38 14.31 17.19 21.13 n/(1-n)[L -]×1057.31 8.04 8.93 9.64 10.32 11.39 13.55 16.74 （2-n)[L -]/(1-n)×10-60.881.292.332.5203.615.197.4411.69以作图如下：由图得截距β1=7.0257× 105斜率β2=8.494×1010 再取n=1.1～1.7范围内的实验数据，输入甘氨酸的体积ml 5.2 5.4 5.65.86.0 6.2 6.4 6.6PH 6.87 6.95 7.03 7.10 7.17 7.26 7.35 7.43n 1.0992 1.1790 1.2588 1.3386 1.4183 1.4979 1.5774 1.6568 [L-]×10-6 4.1051 4.9311 5.9233 6.9531 8.1619 10.0326 12.3319 14.8133 n-(1-n)β1[L-]/(2-n)[L-]2×10109.1258 9.0122 8.982 9.3592 9.8499 9.9348 10.2385 11.3448（3-n)[L-]/(2-n)×10-50.8662 1.0937 1.3914 1.7465 2.2193 3.0013 4.1512 4.4565 以作图如下：由图得截距β2=8.4436×1010 斜率β3=5.442×1014又因为累积稳定常数βn=K1×K2×K3...Kn则K1=7.0257× 105、K2=1.2018×105、K3=6.445×103lgK1=5.86，lgK2=5.08，lgK3=3.813.3结果与讨论通过处理数据得两种方法得到的逐级稳定常数如下：半n法lgK1=6.07， lgK2=4.93 ，lgK3=3.79 Rossetti图解法lgK1=5.86，lgK2=5.08，lgK3=3.81经比较可知两种方法所得结果差别并不大，但半n法所取数据较概括，且取n时都假设体系中只存在一种平衡。