一种新型唾液sIgA电流型纳米免疫生物传感器的制备

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基于碳纳米管修饰玻碳电极的唾液sIgA可再生免疫传感器

基于碳纳米管修饰玻碳电极的唾液sIgA可再生免疫传感器王艳;甄生航;朱洋;谢国明【期刊名称】《分析测试学报》【年(卷),期】2011(30)4【摘要】A novel amperometric immunosensor based on multi-wall carbon nanotubes (MWNTs)/layer-by-layer(LBL) assembly of gold nanoparticles and thionine( GNPs- THI)/secretory immunoglobulin A( sIgA)/horseradish peroxidase(HRP) was developed for the detection of salivary secretory immunoglobulin A (sIgA). The layer-by-layer(LBL) assembly of gold nanoparticles and thionine (GNPs-THI) was assembled through electrostatic adsorption, Au- S and Au- N covalent bonds.Then the salivary anti - sIgA antibody was adsorbed by the formative monolayer of GNPs. Eventually,the horseradish peroxidase (HRP) was used to block the nonspecific adsorption sites on the modified glassy carbon electrode (GCE) and amplify the current signal at the same time. The immunosensor showed a high sensitivity to salivary sIgA with a detection limit (S/N = 3 ) of 1.5 μg/L. The linear range was 3.0 -350. 0 μg/L with correlation coefficient(r) of 0. 989 7. The response time achieved 95％ of the steady state was less than 20 s. Also, the immunosensor had an excellent interference immunity to the interferents of immunoglobulin G ( IgG), α-amylase and albumin, and the interference rates were - 2. 13％ , - 2. 85％and - 1.96％ , respectively. The antigen - antibody complexes in themeasurement were decollemented by 0. 1 moL/L of aminoacetic acid. The bioactivities of antigen and antibody were remained well after decollement and the biosensor could be recycled by aminoacetic acid for eight times. Some influence factors on the biosensor were investigated, such as the concentration of substrate and antibody, incubation time, interferents, temperature and pH. It can be used for accurate and fast detection of salivary slgA to judge the impairment of the mucosal inmune system of human owing to its high sensitivity, excellent specificity and convenient detection, and it can be easily regenerated.%将壳聚糖(CHI)分散的羧基化多壁碳纳米管(MWCNT)吸附到玻碳电极(GCE)表面,形成负电荷界面,利用静电吸附和金-氮(Au-N)、金-硫(Au-S)共价键作用将阳离子电子媒介体硫堇(THI)和纳米金颗粒(GNPs)层层自组装到电极表面,通过纳米金单层吸附唾液分泌性免疫球蛋白A(sIgA),最后用辣根过氧化物酶(HRP)封闭电极上的非特异性吸附位点,同时放大电流信号,构建了一种检测唾液sIgA的新型纳米免疫生物传感器.实验结果表明,该传感器具有良好的准确性和稳定性;检测线性范围为3.0～350.0μg/L,r=0.989 7;检出限(S/N=3)为1.5μg/L;电流值达95%稳态时间小于20s;可用0.1 mol/L的甘氨酸再生8次.探讨了底物浓度、抗体浓度、孵育时间、温度、pH值及干扰物质对该传感器的影响.该免疫传感器灵敏度高、特异性好、方便可再生,可用于唾液sIgA的准确、快速检测,从而判断人体局部免疫状况.【总页数】7页(P349-355)【作者】王艳;甄生航;朱洋;谢国明【作者单位】重庆医科大学检验系临床检验诊断学教育部重点实验室,重庆,400016;重庆医科大学检验系临床检验诊断学教育部重点实验室,重庆,400016;重庆医科大学检验系临床检验诊断学教育部重点实验室,重庆,400016;重庆医科大学检验系临床检验诊断学教育部重点实验室,重庆,400016【正文语种】中文【中图分类】O657.1;O629.73【相关文献】1.基于多壁碳纳米管和纳米金修饰的MPO丝网印刷免疫传感器的研究 [J], 莫利明;马霄;虞成;王清波;王克义;逯岭松2.基于纳米金／壳聚糖掺杂碳纳米管修饰金电极非标记免疫传感器的研究 [J], 罗启枚;王辉宪;徐新宇;李彦涛;黄俊;刘登友3.基于Nano-Au／PDDA／PB/PANI/MWCNTs修饰玻碳电极高灵敏电流型甲胎蛋白抗原免疫传感器的研究 [J], 蒋文;袁若;柴雅琴4.一种基于纳米金/石墨烯/普鲁士蓝(PB)修饰玻碳电极非标记免疫传感器 [J], 罗启枚;王辉宪;刘登友;王玲5.基于金-铂纳米颗粒修饰的碳纳米管构建免标记电化学免疫传感器用于CEA检测[J], 郑慧雯; 唐典勇因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

骨唾液蛋白纳米压电免疫传感器阵列的研制

Ｚｏｇｍｉ．ｐｒｎｈｎ－ｎＤｅａｔｔｆＭｅｉｌｅｅｒｈｕｎｚｏｅｅａｓｉｌａｇｈｕＭｉｔｒｏｍａｄｇｍｅｏｄｃｓａｃ，ＧａｇｈｕＧｎｒｌｐｔＧｕｎｚｏ￣ａｙＣｍｎ，ａＲＨｏａｏｆ
ｎｎｐｒｃｅｄｆｅｏｍａｅａｂｏｓｎｉｖｍｂａｅａｏａｔｌｓｍｏｉｄｔｋｉ・ｅｓｔｅｍｅｒｎ，ｗｈｃｏｓｕｔｄｔｅｎｎ－ｉｚｅｅｔｃｉｉｉｉｉｈｃｎｔｃｅｈａｏｐｅｏｌｃｒｍｍｕｔｒｉｎｉｙｃｉｓｈｐ．ＢＳｘｒｓｉｎｆｏｔｅｅｍｆｈａｔｙａｕｔｄｐｔｎｓｗｉｓｅｐｒｓｓｗｅｅｅａｉｅｆｒＰｅｐｅｓｏｒｍｈｓｒｕｏｅｌｄｌａａｉｔｔｏｔｏｏｏｉｈｓｎｅｈｒｘｍｎｄａｅｔｉｍｍｕｏｅｃｉｎＲｅｕｔｈｅｅｔｎｏｅｅｅｃｔｎａｄｓｒｌｔｄｌｔｎｏ：９ｎｒａｔ．ｓｌｓＴｅｄｔｃｉｆｒｆｒｎｅｓａｄｒｅｕｌａｉｉｆ１ｏｏｌｕｏ，１：８，１：７，１：６，１：５，１：４，１：３ａｄ１：２ｓｏｄｔａｏｓｕｔｄＢＳａｏｎｈｗｅｈｔｃｎｔｃｅＰｎｎ — ｒａｒｙｈｄｇｏｉｅｒｒｌｔｎｈｐｗｉｒａａｏｄｌａｅａｉｓｉｔｎｏｈ

用于检测α2,6唾液酸化聚糖的新型电化学生物传感器的制作技术

本技术成功开发了基于新型金纳米棒链霉亲和素(AuNPs SA)复合材料和羧基化单壁碳纳米角硫掺杂铂(c SWCNHs/S PtNC)的特异性超敏夹心电化学免疫传感器，用于检测人血清中的α2,6唾液酸化聚糖(α2，6sial Gs)。

金纳米棒链霉亲和素(AuNPs SA)不仅能增加电极导电性，增强电子间转移，同时通过链霉亲和素和生物素系统为固载生物素标记的黑接骨木素(bio SNA)提供活性位点。

此外，c SWCNHs/S PtNC对H2O2的还原具有优异的催化性能，并且Pt NH2和NH CO可有效捕获三氨基苯硼酸(M APBA)。

本技术的优点在于线性范围宽。

灵敏度高，特异性强，检测迅速，以及良好的可重复使用性，并且该技术可用于测量人血清中α2,6sial Gs含量，有在临床检测中有着巨大潜力。

技术要求1.一种用于检测α2，6唾液酸聚糖的双响应电化学生物传感器制备方法，其特征在于包括以下步骤：(1)金纳米棒-链霉亲和素(AuNPs-SA)纳米复合材料的制备；(2)羧基化单壁碳纳米角-硫掺杂铂-三氨基苯硼酸(c-SWCNHs/S-PtNC/M-APBA)纳米信标的制备；(3)建立电化学免疫传感器，检测α2，6-sial-Gs，绘制标准曲线。

2.根据权利要求1所述羧基化单壁碳纳米角-硫掺杂铂材料的制备过程，其特征包括以下步骤：(1)AuNRs-SA复合材料的制备：首先将2.5mL 0.5mM的氯金酸(HAuCl4)溶液与2.5mL 0.2mM的十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)溶液混合；加入300mL 0.01mM硼氢化钠(NaBH4)并快速混合2分钟，合成金粒种子。

然后，将5mL 0.2mM的HAuCl4溶液加入到5mL 1mM的CTAB溶液中；将4mM 0.15mL 的硝酸银(AgNO3)加入到溶液中并反应5分钟；再加入70μL 0.079mM的抗坏血酸(AA)，使溶液反应2分钟。

然后，将12mL制备的金粒种子加入该溶液中并剧烈搅拌20秒并使其在25℃下反应2小时。

骨唾液蛋白纳米压电免疫传感器阵列的研制

骨唾液蛋白纳米压电免疫传感器阵列的研制陈钰;王捷;刘仲明【摘要】目的以AT切型、10 Hz双面镀金的石英晶体为换能器,结合纳米金颗粒独特的物理化学特性,制作一种用于临床血清骨唾液蛋白(bone sialoprotein,BSP)检测的纳米压电免疫传感器阵列.方法将纳米金颗粒通过1,6-己二硫醇固定在金电极表面,采用巯基化试剂Sulfo-LC-SPDP将鼠抗人BSP单克隆抗体巯基化,并将其固定于修饰有纳米金颗粒的石英晶体金电极表面,通过免疫反应检测正常人和骨质疏松患者血清中BSP的表达.结果 (1)对稀释度分别为1:9,1:8,1:7,1:6,1:5,1:4,1:3,1:2的参考标准血清进行检测,结果显示,在血清稀释度在1:9～1:2的范围内,构建的BSP纳米传感器阵列对血清检测的响应呈较好的线性关系,线性方程为y=872.66x-58.258,相关系数为0.974.(2)初步证明,骨质疏松症患者血清中BSP含量高于正常人血清,差异有统计学意义(t=20.162,P=0.000).结论实验研制的BSP纳米压电免疫传感器阵列具有结构简单、操作容易、稳定性好、灵敏度高、特异性好等优点,可用于BSP的快速定量检测.【期刊名称】《中国骨科临床与基础研究杂志》【年(卷),期】2010(002)003【总页数】5页(P226-230)【关键词】生物传感技术;唾液蛋白类;骨质疏松;纳米金颗粒【作者】陈钰;王捷;刘仲明【作者单位】510010,广州军区广州总医院医学实验科;510010,广州军区广州总医院医学实验科;510010,广州军区广州总医院医学实验科【正文语种】中文【中图分类】TP212.3;R446.6骨唾液蛋白（bone sialoprotein，BSP）是细胞外基质中一种高度磷酸化和糖基化的分泌性蛋白，属于SIBLINGs蛋白家族。

大量研究表明BSP可以反映早期成骨细胞分化水平，是很有潜力的骨更新标志物[1-10]。

唾液诊断传感器、制备方法及其在检测丙型肝炎中的应用[发明专利]

专利名称：唾液诊断传感器、制备方法及其在检测丙型肝炎中的应用
专利类型：发明专利
发明人：刘党培,刘岩磊,陈云生,杨蒙
申请号：CN201711123582.2
申请日：20171114
公开号：CN107703118A
公开日：
20180216
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明涉及丙型肝炎病毒诊断技术领域，公开了一种唾液诊断传感器、制备方法及其在检测丙型肝炎中的应用，该传感器包括基底、金属膜和复合纳米卷，所述金属膜覆盖在所述基底上，所述复合纳米卷分散在所述金属膜上，所述复合纳米卷为在石墨烯材料表面原位生长金属纳米颗粒后发生卷曲并将所述金属纳米颗粒包裹在内形成的纳米卷结构；该传感器的制备方法包括对包含有石墨烯材料、金属离子和乙醇溶液的液相反应体系进行超声反应制得所述复合纳米卷；将所述复合纳米卷的分散液涂覆于溅射有金属膜的基底上，干燥后制得所述唾液诊断传感器。

与现有技术相比，本传感器操作简单、检测速度快，精确度高。

申请人：苏州纳葛诺斯生物科技有限公司
地址：215000 江苏省苏州市相城区黄埭镇安民路6号
国籍：CN
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纳米复合材料、电化学microRNA生物传感器的制备方法及应用[发明专利]

专利名称：纳米复合材料、电化学microRNA生物传感器的制备方法及应用
专利类型：发明专利
发明人：白丽娟,袁拥华,左建丽,赵敏
申请号：CN201911063094.6
申请日：20191031
公开号：CN110749635A
公开日：
20200204
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种以铁基金属有机框架(MOF)和端氨基树枝状大分子(PAMAM)功能化富勒烯(C)新型纳米复合材料C@PAMAM‑MOF。

还公开了一种电化学microRNA生物传感器的制备方法及应用，该生物传感器将纳米金固载在上述材料C@PAMAM‑MOF中，并与巯基标记的信号探针混合搅拌，通过Au‑S键结合制备生物传感器的示踪标记物，还将捕获探针固载在壳聚糖‑乙炔黑和铂金壳核纳米粒组装的传感界面上，并利用核酸杂交构建检测miR‑3675‑3p的生物传感器。

本发明以C@PAMAM‑MOF为纳米探针制备的传感器不仅具有更强的信号放大作用，而且还具有线性范围宽、特异性强和分析时间短等优点，可为特发性肺纤维化的诊断提供一种新方法。

申请人：重庆医科大学
地址：400016 重庆市渝中区医学院路1号
国籍：CN
代理机构：重庆市前沿专利事务所(普通合伙)
代理人：郭丽
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一次性唾液α-淀粉酶生物传感器的研制的开题报告

一次性唾液α-淀粉酶生物传感器的研制的开题报告
标题：一次性唾液α-淀粉酶生物传感器的研制
背景：
随着生活水平的提高和医疗技术的进步，人们对于健康的关注和需求也越来越高。

检测人体液体中的生化指标已成为了现代医学诊断和治疗的重要手段之一。

目前，唾
液作为一种体液样本已经渐渐被广泛应用于临床诊断和生物医学研究中。

同时，淀粉
酶也是人体液体中一个极为重要的指标，其在临床诊断、生物医学、食品检测等方面
有着广泛的应用。

因此，研制一种高灵敏、精度高、经济实用、方便快捷、一次性使
用的唾液淀粉酶生物传感器显得尤为重要和具有实用价值。

目的：
本研究旨在研制一种可实现快速和精确检测唾液α-淀粉酶的生物传感器，探讨其应用在临床诊断和生物医学研究方面的可行性和优越性。

方法：
1. 准备传感器底物：准备硅基衬底，上溅铝电极，并利用电子束光刻技术制备出有序的纳米阵列。

2. 生产α-淀粉酶检测材料：采用生物无机化学方法制备金属氧化物纳米颗粒，接着通过磁性浓缩制备出具有生物分子识别能力的核壳结构纳米材料。

3. 制备传感膜：在硅基衬底上印刷含有α-淀粉酶检测材料的纳米传感膜。

4. 传感器性能测试：运用离子液体和pH响应的纳米传感膜，实现唾液样本中α-淀粉酶的高灵敏检测。

预期结果：
本研究将研制出一种高灵敏、精度高、经济实用、方便快捷、一次性使用的唾液淀粉酶生物传感器，并将其应用于临床诊断和生物医学研究中，进一步探讨其在其他
领域的潜在应用。

新型电流生物传感器的研制

开发与创新化工之友２００７．ＮＯ．０９（３）优化方案三适用场合：要求灵敏度较高的定量检测采用方法：固相微萃取＋反相色谱或离子对色谱＋原子吸收光谱对于有机锡含量较少，对灵敏度要求较高的检测样本。

固相微萃取能比较有效地减少富集过程中的损耗，而反相色谱和离子对色谱的应用也是基于此考虑。

原子吸收光谱的适用考虑同前不再赘述。

（４）优化方案四适用场合：要求对有机锡形态做出具体判断采用方法：固相微萃取＋气相色谱—质谱联用＋其他有机官能团结构检测手段有机锡的有机官能团（Ｒ）可以进行一些有机的常规检测，如红外光谱等。

对Ｒ与Ｓｎ的结合状态，因为Ｒ－Ｓｎ易断裂则需要采用质谱发结合其他谱图的数据进行推断。

考虑色谱—质谱的仪器较为常用。

因此利用色谱质谱联用合并完成分裂和检验步骤是可行的。

通过各有机Ｒ官能团分子量，与分子离子峰ｍ／ｚ的对照解析。

参考文献［１］　胡冠九有机锡化合物的性质、环境污染来源及测定方法．［Ａ］．环境监测管理与技术，２０００（１２）：１４￣１６．［２］　张建梅．有机锡化合物的形态分析方法进展　［Ａ］．通州师范学院学报，２００５（２６）：６５￣６９．［３］　秦晓光等．天然水体中有机锡的富集分离方法　［Ａ］．海洋环境科学，２００１（２０）：６０～６６．［４］　刘俊亭．新一代萃取分离技术———固相微萃取［Ｊ］．色谱，１９９７，１５（３）：１１８－１１９．［５］　袁玲玲．工业　品及环境中的有机锡的分析方法的研究［Ｄ］．青岛：中国海洋大学，２００６．［６］　江桂斌．气相色谱－表面发射火焰光度检测法测定有机锡和有机锗化合物　［Ａ］．环境化学．１９９７（１６）：１０３￣１０７．［７］　杨传孝等．双硫腙分光光度法测定水样中的三苯基锡［Ａ］．华侨大学学报（自然科学版），２００５（２６）：１４１￣１４４．［８］　徐福正等．锡与有机锡的分光光度法研究［Ａ］．光谱实验室，１９９９（１６）：２４７￣２５０．［９］　何滨等．涂锆石墨管石墨炉原子吸收法测定水样中的有机锡和无机锡［Ａ］．光谱学与光谱分析，１９９９（１９）：７１８￣７２０．［１０］　臧树良等．增敏溶出伏安法测定防污漆中的有机锡含量．　［Ａ］．辽宁大学学报（自然科学版），２００４（３）：１９９￣２０５．ＤＮＡ传感器是当今生物传感器中的前沿性研究课题，加强对ＤＮＡ传感器的研究和应用开发具有重要的科学意义和应用价值。

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２１００年第２９卷第８期
传感器与微系统（ｒｓｕｅａｄＭｉｒｙｔｅｈｏｇｓＴａｄｃｒｎｃｏｓｍＴｃｎｌｉ）ｎｓｅｏｅ
１７０
一
种新型唾液ｓｇ电流型纳米免疫生物传感器的制备ＩＡ
王艳，生航，郑军，马霄，刘成桂，朱洋甄
（庆医科大学检验系临床检验诊断学教育部重点实验室，重庆４０１）重００６
摘要：通过层层自组装，硫堇（ｈ）将Ｔｉ和纳米金（Ｎｓ修饰到Ｎｔｎ修饰的玻碳（Ｃ电极表面，ＧＰ）ａｏｉＧＥ）利用纳米金单层吸附唾液分泌性免疫球蛋白Ａ（ＩＡ）最后用辣根过氧化物酶（Ｒ）闭电极上的非特异性ｓｇ，ＨＰ封吸附位点，构建了一种检测唾液ｓＡ的新型电流型纳米免疫生物传感器。该生物传感器灵敏度高，Ｉｇ特异性好，试方便，测线性范围为６５３０ｍ／，出限为３０ｇＬ电流值达到９稳态时间小于２。测检．￣０ｇＬ检．ｍ／；５％０Ｓ
．
ｗｈｃｎｕｅｅｎｔｅｂｉｓｎｓｒｗｅｅｎｅｔｇｔｄ．ｕｈａｈｅｃｎｅｒｔｎｏｎｔｂｄｎｕｂｔａｅ，Ｈｎｉｈｉｆｎｅｏｈｏｅｏｒｉｖｓｉａｅｓｃｓｔｏｃｎｔａｉｆａｉｏｙａｄｓｓｒｔｐａｄｌｏｔｍｐｒｔｒｉｕａｉｎｉｅｅａｕｅ，ｎｃｂｔｏｔｍｅ，ｉｅｆｒｎｓｎｔｒｅｅｔ．Ｔｏｅｅｔａｉａｙａｐｅｄｔｃｓｌｖｒｓｍｌｓ，ｔｍｅｈｏｏｏｅｏｎＥＬＩｈｅｔｄｆｂｉｓｎｓｒａｄＳＡａｅｒ
探讨了抗体和底物浓度，Ｈ值和温度，ｐ孵育时间，干扰物对传感器的影响。该传感器与ＥＩＡ法相关性良ＬＳ
好（Ｒ＝Ｏ９９２，．８３Ｐ＜Ｏ０１，．０）可用于唾液ｓＡ的快速、Ｉｇ准确检测，从而判断人体局部免疫状况。
关键词：唾液ｓＡ；免疫生物传感器；米金；堇ｌｇ纳硫中图分类号：Ｔ１Ｐ２２文献标识码：Ａ文章编号：１０－７７２１）８００－４００－８（０００－１７０９－
ｉｍｎｇｂｌｓＡ）ａｅｎｌｅ—ｙｌｙｒＬＬａｓｍｌｏｏａｏａｉｅ－ｉｉｅＧＰ—ＨＩｏｍｕｏｌｕｉＡ（Ｉｏｎｇｂｓｄｏａｒ — ｅ（Ｂ）ｓｅｂｙｆｇｌｎｎｐｒｃｓｔｏｎ（ＮｓｙｂａｄｔｌｈｎＴ）ｎ
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ｓｎｉｖｔ，ｏｄｓｅｉｃｔｃｎｅｉｎｏｄｔｃＩＡｗｔｅｅｔｎｌｔｏ．ｅｓｔｉｇｏｐｃｆｉｉｙｉｙ，ｏｖｎｅｔｅｅｔｓｇｉａｄｔｃｉｉｆ３０ｍｇ・Ｌ～，ｈｉｅｒｒｎｅｉｔｈｏｍｉｔｅｌａａｇｓｎ
（ｎｓｒｆｄｃｔｎＫｅａｏａｏｙｏａｏａｏｄｃｎ，ｅａｔｎｆＬｂｒｔｒｅｉｉｅＭｉｉｙｏｕａｉｙＬｂｒｔｒｆｂｒｔｒＭｅｉｅＤｐｒｍｅｔａｏａｏａｉｅｓｔＣｈｎｑｎ００６，ｉａ）ｏｇｉｇＭｄｃｌＵｎｖｒｉｙ，ｏｇｉｇ４０１Ｃｈｎ
ＡｂｔａｔＡｏｅｍｐｒｍｅｒｃｍｍｕｏｅｓｒａｂｅｅｅｏｅｆｒｈｅｅｔｎｆｓｌａｙｓｃｅｏｓｒｃ：ｈｖｌａｅｏｔｉｉｎｓｎｏｈｓｅｎｄｖｌｐｄｏｔｅｄｔｃｉｏａｉｒｅｒｔｒｏｖｙ
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