穿心莲内酯的提取分离和鉴定
穿心莲中穿心莲内酯的提取
穿心莲中穿心莲内酯的提取摘要：从药用植物穿心莲中提取穿心莲内酯。
150克穿心莲粗粉甲醇回流提取，水沉去杂质，二氯甲烷脱酯,活性碳脱色，结晶得穿心莲内酯精品1.5克，收率为1%，其含量为98.5%。
关键词：穿心莲；穿心莲内酯；提取工艺Abstract：Withdraws the Andrographis Paniculta lactone from themedicinal plant Andrographis Paniculta．Uses the methyl alcoholbackflow to withdraw，the water sinks ，the methylenechloride escapes the ester，the activated carbon decolorizes，thecrystallization results in the Andrographis Paniculta lactonehigh-quality goods 1.5 grams，the returns-ratio is 1%, its content is98.5%．Key word：Common Andrographis Herb ，Andrographolide ，Extract method1．前言穿心莲为爵床科穿心莲属植物，药用叶或全草，秋初茎叶盛时采割，晒干。
在中药里归为凉性药物。
穿心莲在亚洲，几个世纪以前就用于治疗胃肠道和呼吸道感染、发热、疱疹、咽喉痛和各种细菌性感染。
在中医里，穿心莲是一种治疗感冒的重要草药，它用于退热、驱毒[1]。
穿心莲不仅能抑HIV-1，还能抑制HIV-1对细胞的毒性和在细胞间的传播，从多途径抑制HIV-1，因而能防止HIV-1抗药性突变的形成。
穿心莲价格低廉，且经过修饰的穿心莲内酯衍生物具有更强的抗HIV-1活性[2]。
因而穿心莲及其衍生物用于艾滋病的治疗具有广阔的前景。
穿心莲内酯的提取分离与结构鉴定
天然药物化学设计试验题目：穿心莲内酯的提取分离与结构鉴定学生：学号：院（系）：生命科学与工程学院专业：药物制剂指导教师：2011年12月30日天然药物化学课程实验任务书一、题目：穿心莲内酯的提取分离与结构鉴定二、实验任务1.查阅文献资料并写出所选药材化学研究进展的文献综述2.设计实验方案并进行可行性分析（方案应包括目的意义，设计原理、流程、实验方法、时间安排、需要的仪器与试剂）3.对实验材料进行性状、显微和理化鉴定4.完成穿心莲内酯单体化合物的分离及结构鉴定，鉴定数据应包括熔点、旋光度、紫外图谱。
5.对所得数据进行分析6.完成实验报告并提交少量穿心莲内酯样品。
三、实验要求1.实验中要求学生不完全依赖现成条件，能在教师指导下自己创造一些条件完成实验。
2.实验方法力求创新。
3.目的物的纯度要求用薄层层析法和熔点的测定数据说明；4.本题目要求2-3名学生配合完成。
四、实验报告内容1.题目2.实验目的3.基本原理4.实验所用试剂、仪器的型号及生产厂家5.分离方法创新之处6.自制或创造了那些实验条件条件7.实验流程及操作方法8.结果与分析9.结论10.在所完成实验的基础上提出一个新的研究课题11.合理化建议穿心莲内酯的提取分离与结构鉴定一、文献综述1、成分来源：为爵床科植物穿心功Andrographis paniculata (Burm.f.) Nees的地上部分，主产广东、福建。
结构及化学成分：穿心莲内酯的结构式[中文名称] 穿心莲内酯[别名] 穿心莲乙素、熊耳内酯[分子式] C20H30 O5[分子量] Mw＝350.45[ 熔点 ] 229-232℃[物理性质] 斜方棱形或片状结晶（乙醇或甲醇），无臭, 味极苦,穿心莲内酯在水中的溶解度非常小（几乎不容），易溶于丙酮、甲醇、乙醇。
比旋度[A]2 126. 6? 2b( 冰醋酸)[药理作用] 穿心莲内酯为天然植物穿心莲的主要有效成份，具有祛热解毒，消炎止痛之功效，对细菌性与病毒性上呼吸道感染及痢疾有特殊疗效，被誉为天然抗生素药物。
穿心莲如何鉴别？中药材穿心莲的鉴别方法
穿心莲如何鉴别？中药材穿心莲的鉴别
方法
穿心莲如何鉴别？中药材穿心莲的鉴别方法
穿心莲如何鉴别？
1、取本品叶用水润湿1h，撕去表皮加碱性3,5-二硝基苯甲酸的甲醇溶液，立即置显微镜下，可见叶肉组织中出现紫红色。
或取穿心莲叶，置苯液中浸泡24h，可见叶的两面析出空心莲内酯类的板状结晶，柱状结晶，将结晶挑置滤纸上，加碱性3,5-二硝基苯甲酸甲醇试液显紫红色。
2、取本品粉末约1g，加乙醇20ml，置水浴中加热至沸，滤过，滤液加活性炭0.3g，搅拌，滤过。
取滤液1ml，加3,5-二硝基苯甲酸试液与乙醇制氢氧化钾试液等溶的混合液1~2滴，即显紫红色（活泼次甲基的反应），另取滤液1ml，加碱性三硝基苯酚试液1~2滴，显橙色，放置逐渐转为棕色，另取滤液1ml，加碱性三硝基苯酚试液1-2滴，显橙色，放置逐渐转为棕色（活泼次甲基的反应）；再取滤液1ml，加乙醇制氢氧化钾试液数滴，膛渐显红色，放置后变为黄色。
（检查内酯）
3、薄层色谱取本品粉末0.5g，加乙醇5ml，回流提取30min，提取液为供试品深液。
另取穿心莲内酯、新穿心莲内酯、14-去氧穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的乙醇液为对照品深液。
吸取二溶液点同一硅胶G薄层板上。
以氯仿-无水乙醇（19：1）展开，
展距12.5cm，用2%3,5-二硝基苯甲酸的乙醇溶液与0.5mol/L乙醇制氢氧化钾的乙醇溶液等容混合液喷后，105℃加热5min，供试品色谱与对照品色谱相应位置处显相同颜色斑点。
穿心莲内酯的提取分离及鉴定
穿心莲内酯的提取分离及鉴定2011级16班摘要：穿心莲为解毒消炎类临床常用药，穿心莲内酯是中药穿心莲的主要有效成分，分子式C20H30O5，白色方形或长方形结晶，味极苦，难溶于水易溶于乙醇、甲醇等。
利用乙醇提取方法、超声、回流、旋转蒸发浓缩方法对穿心莲内酯进行提取分离以及纯化，使用TLC法对其鉴别，可得到纯度较高的穿心莲内酯。
关键词：穿心莲、穿心莲内酯、超声提取法、乙醇提取法、TLC鉴别Isolation & Identification of AndrographolideABSTRACT:Clinical commonly used medicines, creat for detoxification counter Andrographolide is the main effective component, Traditional Chinese medicine (TCM) andrographis formula C20H30O5, white square or rectangle crystal, taste bitter, soluble in water, soluble in ethanol，methanol, ing the ethanol extract method, ultrasound, reflux, rotary evaporation enrichment method to extraction separation and purification of Andrographolide, using TLC method for the identification, can get high purity Andrographolide.KEY WORDS:Andrographis paniculata；Ultrasonic extraction；Andrographolide；alcohol extraction；Thin layer chromatography (TLC)穿心莲为常用中药，来源于爵床科植物穿心莲Andrographis paniculata（Burm. f.）Nees.的干燥地上部分。
高效液相色谱法脱水穿心莲内酯的含量测定
高效液相色谱法脱水穿心莲内酯的含量测定高效液相色谱法脱水穿心莲内酯的含量测定随着科学技术的进步，人们对于天然药物的认识越来越深入。
穿心莲是一种传统中药材，具有良好的保健功效。
其中的有效成分内酯类物质，被广泛应用于中药的制备中。
在穿心莲内酯的提取、制备过程中，更需要准确地测定样品的内酯含量，以保证产品质量和安全性。
为了达到从样品中高效、准确测定内酯含量的目的，常常使用高效液相色谱法（HPLC）进行分析和检测。
下面将对HPLC法进行详细介绍。
HPLC法的基本原理HPLC法是一种高效、高精密度并且具有高灵敏度的分析方法。
在HPLC分析过程中，采用液相色谱柱对样品进行分离、纯化，再通过检测器对样品进行测定。
其中，可选用的柱和检测器是非常多样化的，不同的柱和检测器可适用于不同的样品和检测目的。
在脱水穿心莲内酯的含量测定中，可以选择烷基或芳香基取代的正相和反相柱，这两种柱分别可用于正相和反相分离，用来分离和检测疏水性或亲水性物质。
而检测器可选择紫外-可见光检测器和荧光检测器等。
这些检测器对于内酯类物质具有比较高的检测灵敏度，因此可用于对内酯含量进行测定。
HPLC法的具体操作步骤下面将介绍HPLC法的具体操作步骤：1. 样品准备：取穿心莲提取物5.0 mL置于100 mL烧结瓶中，加入0.2 mol/L氢氧化钠溶液(5 mL)，加入氢氧化钠溶液数字分别为10、20、40、80、120、160，各5毫升。
标准品的准备，将内酯标准品称取精确的10 mg，用甲醇稀释至100 mL，最后得到内酯标准溶液，将其分别稀释5倍、10倍用于检测。
2. 加热：将上述烧结瓶放入加热水浴中，在90℃恒温条件下反应2 h。
冷却，取出；加入冷离心管中。
3. 萃取：用pH=3.5磷酸缓冲液提取，加入萃取液1 0 mL，振荡1 h，离心10 min，取上清液备用。
4. 柱前处理：取上清液4.0 mL加入1 mol/L HCl调节pH到2.0，然后用微孔过滤膜过滤，取2.5 mL待用。
穿心莲内酯检验操作规程
四川省宜宾五粮液集团宜宾制药有限责任公司穿心莲内酯检验操作规程1 目的：建立穿心莲内酯检验操作规程。
2 范围：适用于穿心莲内酯的检验，使穿心莲内酯的检验规范化、标准化。
3 引用标准：《中国药典》2010年版一部 P387 穿心莲内酯4 责任：检验员对检验过程及数据负责；复核人对检验结果的复核负责。
5 内容：5.1 性状：本品为无色结晶性粉末，无臭，味苦。
5.2 鉴别：5.2.1 试剂和溶液：乙醇、3,5-二硝基苯甲酸乙醇溶液、5%氢氧化钠溶液、乙醇制氢氧化钾试液、无水乙醇。
5.2.2 仪器与设备：紫外分光光度仪、烧杯、量筒、天平。
5.2.3 分析步骤：a) 取本品约10mg，加乙醇2ml溶解后，加2%的3,5-二硝基苯甲酸的乙醇溶液与5%氢氧化钾的乙醇溶液各2滴，混匀，即显紫红色。
b) 取本品约10mg，加乙醇2ml溶解后，加乙醇制氢氧化钾试液2～3滴，渐显红色，放置后变为黄色。
c) 取本品，加无水乙醇制成每1ml中含10ug的溶液，照《紫外-可见分光光度法》测定，在224nm的波长处有最大吸收。
5.3 检查：5.3.1 熔点：a) 仪器与设备：熔点仪。
b) 分析步骤：取本品，照《熔点测定法》DR.SOP/QC.Ⅸ010测定，熔点应为224～230℃，熔融同时分解。
5.3.2 其他内酯：a) 试剂和溶液：无水乙醇、三氯甲烷、甲醇、2%3,5-二硝基苯甲酸的乙醇溶液、5%氢氧化钾的乙醇溶液。
b) 仪器与设备：硅胶G薄层板。
c) 分析步骤：取本品，加无水乙醇制成每1ml含2mg的溶液作为供试品溶液，照《薄层色谱法》DR.SOP/QC.Ⅸ012试验，吸取上述溶液10ul，点于硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇（19：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以2%3，5-二硝基苯甲酸的乙醇溶液与5%氢氧化钾的乙醇溶液的等量混合液（临用配制）。
供试品色谱中，除主斑点外，不得显其他斑点。
5.3.3 干燥失重：a) 仪器与设备：电子天平、鼓风干燥箱、称量瓶。
穿心莲内酯提取工艺
穿心莲内酯提取工艺1 设备与仪器I．I 设备多功能提取罐1．2 仪器：Agilent-1100高效液相色谱仪(美国安捷伦公司)； Hypersil ODS 色谱柱250×4.6mm，5 7 m ；TV-1221型紫外-可见分光光度计，北京普析制造；Sartorius BS210S电子天平(德国塞多利斯股份公司)；ZF-2型三用紫外仪(上海安亭电子仪器厂)；超声波清洗器 (上海科导超声仪器有限公司)2 提取工艺2．1 工艺：① 粉碎：取穿心莲叶，粉碎机上安装孔径为8ram的筛网粉碎成粗粉。
②提取：穿心莲粗粉用4倍量95 乙醇回流提取两次，第 -次2小时，第二次1．5小时。
合并回流液，滤过，回收乙醇浓缩至每 lml含2g药材．冷却10℃-20℃，静止12小时析出结晶，滤取结晶物。
③ 重结晶：结晶物加入lO-15倍量的95%乙醇(以结晶物重量计)，搅拌溶解，加0.5 活性炭(以结晶物重量计)加热回流3O分钟，过滤，滤液回收乙醇，静止l2小时以上，滤取结晶物。
④ 干燥：结晶物在50-70℃ 减压干燥6-8小时。
⑤ 粉碎：干燥物经100目筛粉成细粉。
⑥ 检测水份，含量合格后包装入库。
2．2 工艺研究：根据穿心莲内酯L2]的化学性质，在沸乙醇中溶解，在甲醇、乙醇中略溶，在水或乙醚中不溶。
我们选择用不同浓度的乙醇做溶媒回流提取穿心莲内酯考察对回流提取时间、提取次数对产品收率的影响。
2．2．1 提取次数的考察：穿心莲粗粉(检测含量)。
称取六份，每份 lkg，分成三组，分别加入4倍量(以药材重量计)95 乙醇，第-组回流提取-次，第二组回流提取两次，第三组回流提取三次。
每次提取时间 2小时，分别合并提取液，回收乙醇，浓缩至500ml，测定体积做为储备液。
① 出膏率的测定精密吸取储备液10ml于恒重的蒸发皿中，水浴蒸干，于105℃干燥至恒重，移置干燥器中冷却0.5小时，称重，计算即得。
② 含量测定将上述储备液冷却至l0-20℃ ，静止12小时以上，有结晶析出，滤取结晶物于6O-7O℃ 减压干燥6-8小时，干燥物称重，按照WS-10001-(HD-0971)-2002穿心莲内酯含量测定项下的方法测定含量，并计算药材中穿心莲内酯的转移率。
穿心莲抗病毒的有效成分研究
穿心莲抗病毒的有效成分研究摘要：目的：探讨穿心莲抗病毒的有效成分研究。
方法：根据提取工艺对穿心莲中穿心莲内酯进行提取，采用色谱检测的方法对穿心莲进行分离纯化，并根据理化特性以及波普的数据对穿心莲中的化和成分进行鉴定和分析。
结果：经分析鉴定后在穿心莲叶片中分离出的化和物质，其中最重要的抗病毒成分为：穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯、穿心莲内酯苷元、新穿心莲内酯苷元，以上成分具有抗病毒、抗炎的作用。
结论：在对中药穿心莲进行研究后，得出其主要成分为穿心莲内酯 , 可分离出并供制药使用。
关键词：穿心莲；抗病毒；有效成分穿心莲是一种常见中药材，属于爵床科植物，在不同地区也可称之为四方草、苦草等[1]。
该药材中含有多种化学成分，但其中最重要的成分为穿心莲内酯，并已经分离出来应用于制药，如临床中常见制剂中的喜炎平、穿琥宁、炎琥宁等[2]。
因为现在病毒的种类不断增多，对于穿心莲制剂的应用也逐渐扩大，根据药理研究结果，穿心莲内酯可以占据蛋白质与DNA和病毒的结合位置，对蛋白质与DNA进行包裹和阻隔，起到阻止病毒复制和消灭病毒的作用[3]。
本文通过对中药穿心莲进行化学检验，将其中可以抗病毒的成分分离出来，对其进行研究，现将分析结果报道如下：1.资料与方法1.1.1仪器本实验中所用到的仪器有：高温高压灭菌锅、恒温培养箱、超声提取仪、电子天平、离心机、高效液相色谱仪、倒置生物显微镜、显微镜等。
1.1.2材料①选择3种不同产地的穿心莲药材，分别为云南、海南和辽宁省。
所应用于本实验的均为爵床科植物穿心莲，并选取干燥的地面生长的部分。
穿心莲内酯( 批号:070711,070712)、脱水穿心莲内酯(批号：111598-200807)本产品仅供科学研究使用。
1.2方法1.2.1穿心莲内酯的提取①先将中药穿心莲可用部分进行粉碎，将粗粉与依存回流提取，重复2次，合并两次回流液体，过滤回收浓缩，冷却，静置后将结晶析出，取结晶物。
②再次结晶，将提取出的结晶物中加乙醇搅拌和充分溶解，应用活性炭加热并回流，持续30min,将乙醇过滤，回收结晶物。
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穿心莲内酯的提取分离和鉴定
一、目的要求
学习中药中内酯类成分的提取分离及检识，通过实验要求：
1.掌握从穿心莲中提取、分离穿心莲内酯的操作方法。
2.熟悉穿心莲内酯类成分的性质和检识方法。
3.了解去除叶绿素的方法。
二、实验原理
穿心莲中的内酯类化合物易溶于甲醇、乙醇、丙酮等溶剂，故利用性质选用乙醇提取之；穿心莲中含有大量叶绿素，可用活性炭脱色除去叶绿素类杂质；利用穿心莲内酯与脱氧穿心莲内酯在乙酸乙酯中溶解度不同，初步讲两者分离；利用穿心莲内酯与脱氧穿心莲内酯结构上的差异，用氧化铝柱分离二者。
三、实验仪器与试剂
仪器：圆底烧瓶、旋转蒸发仪、冷凝管、烧杯、天平、胶头滴管、试管、量筒、薄层板等
试剂：穿心莲粗品、穿心莲对照品、乙醇、乙酸乙酯、活性炭、碳酸钠、水等
四、实验过程
（一）提取分离流程图
穿心莲粗粉20克
0.01%、8倍量的碳酸钠煎煮2次，每次2 h
合并提取液
提取液用25%HCl调节PH至6-7
10%活性炭脱色，蒸发(1/4-1/5)
中性氧化铝柱色谱
乙醇洗脱
95%乙醇溶解
精制穿心莲内酯
五、注意事项
1、穿心莲内酯类化合物为二萜类内酯，性质极不稳定，易氧化、聚合而树脂化。
因此所提取的穿心莲应是当年产的新药材，并且要未受潮变质的茎叶部分，否则内酯含量明显下降至极低，难以提取得到。
2、水提取一般可将多糖等多种水溶性杂质提取出来，水提取出膏率较高，但穿心莲内酯水溶性较低，不适合穿心莲的提取。
3、穿心莲内酯的析晶宜在含乙醇量稍高的情况下进行，此时晶形与结晶的纯度都较好。
当溶液的含水量较高，或粘稠度太大时，往往不易析出结晶。
4、加入的活性炭不能过多，否则会吸附穿心莲内酯，使产率降低。
六、思考题
1、为什么要对提取工艺进行实验研究?
答：通过对药材穿心莲提取溶媒、回流提取时间、提取次数及产品收率等方面的实验考察改进了穿心莲内酯的提取工艺，保证了该产品质量．。