薄层色谱TLC(点板)的基本原理
薄层色谱TLC(点板)的基本原理
薄层色谱(点板)的基本原理★★薄层色谱，或称薄层层析(thin—1ayer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作为固定相，以合适的溶剂为流动相，对混合样品进行分离、鉴定和定量的一种层析分离技术。
这是一种快速分离诸如脂肪酸、类固醇、氨基酸、核苷酸、生物碱及其他多种物质的特别有效的层析方法，从50年代发展起来至今，仍被广泛采用。
(一)基本原理薄层层析是把支持物均匀涂布于支持板(常用玻璃板，也可用涤纶布等)上形成薄层，然后用相应的溶剂进行展开。
薄层层析可根据作为固定相的支持物不同，分为薄层吸附层析(吸附剂)、薄层分配层析(纤维素)、薄层离子交换层析(离子交换剂)、薄层凝胶层析(分子筛凝胶)等。
一般实验中应用较多的是以吸附剂为固定相的薄层吸附层析。
吸附是表面的一个重要性质。
任何两个相都可以形成表面，吸附就是其中一个相的物质或溶解于其中的溶质在此表面上的密集现象。
在固体与气体之间、固体与液体之间、吸附液体与气体之间的表面上，都可能发生吸附现象。
物质分子之所以能在固体表面停留，这是因为固体表面的分子(离子或原子)和固体内部分子所受的吸引力不相等。
在固体内部，分子之间相互作用的力是对称的，其力场互相抵消。
而处于固体表面的分子所受的力是不对称的，向内的一面受到固体内部分子的作用力大，而表面层所受的作用力小，因而气体或溶质分子在运动中遇到固体表面时受到这种剩余力的影响，就会被吸引而停留下来。
吸附过程是可逆的，被吸附物在一定条件下可以解吸出来。
在单位时间内被吸附于吸附剂的某一表面积上的分子和同一单位时间内离开此表面的分子之间可以建立动态平衡，称为吸附平衡。
吸附层析过程就是不断地产生平衡与不平衡、吸附与解吸的动态平衡过程。
例如用硅胶和氧化铝作支持剂，其主要原理是吸附力与分配系数的不同，使混合物得以分离。
当溶剂沿着吸附剂移动时，带着样品中的各组分一起移动，同时发生连续吸附与解吸作用以及反复分配作用。
TLC薄层色谱法
2.点样： 点样： 点样
样品为苏丹Ⅲ ，偶氮苯及两者混合样。每块板 各点三个样品一个，两块板相同。 在薄层板一端约1cm处轻轻画一直线，取管口 平整的毛细管，于画线处轻轻点样（毛细管刚接触 薄板即可）。样点间距1cm—1.5cm，斑点一般不 超过2mm（注：因溶液太稀或样点太小，可重复点 样。但应在前次点样的溶剂挥发后，方可重点，以 防样点被溶解掉。样点过大，造成拖尾，扩散等现 象，影响分离效果）
HO N N N N
偶氮苯
苏丹Ⅲ
展开剂选用展开： 展开
展开剂—无水苯27ml，乙酸乙酯3ml 。将展开 剂倒入层析缸，其高度不超过1cm（注：如超过点 样线，则样点将被溶解掉）。 薄层色谱的展开，须在密闭容器中进行。为使 展开剂蒸汽，在缸内迅速达到平衡，在缸内壁放置 一高5cm，环绕周长约4/5的滤纸，或放置两张 11cm滤纸，下面浸入展开剂中。 将点样好的薄层板小心的放到层析缸中，点样 的一端朝下，浸入展开剂中约0.5cm。
实验四
薄层色谱TLC 薄层色谱
（薄层色谱是分离纯化和鉴定有机化合物的 重要方法之一） 重要方法之一）
一、实验目的和要求
目的：了解薄层色谱的原理和方法。 要求：初步掌握薄层板制版，点样，展开等操作。
二、基本原理： 基本原理：
利用混合物各组分在某一物质中的吸附或 溶解性能（分配）的不同；或其亲和性的差异， 使混合物的溶液流经该种物质进行反复的吸附， 或分配作用，从而使各组分分离。
一般情况，先在薄片另一端1cm处画一条直线， 展开剂达到此线时，立即取出。如未画线，观察展 开剂前沿上升到一定高度时取出，并尽快在展开剂 前沿画出标记。（注意：如不注意，展开剂挥发后， 就无法确定展开剂上升的高度。）将薄层板晾干。 观察混合试样斑点出现的位置及与其相应样品斑点 是否相符。
薄层色谱鉴别介绍
薄层色谱鉴别介绍薄层色谱（TLC）是一种常用的分离技术，可用于鉴别化合物的混合物。
它是一种简单易用、经济实惠、快速高效的分析方法，常用于药物分析、天然产物分析、农药残留分析等领域。
下面我将对TLC的原理、操作步骤和应用进行介绍。
一、TLC的原理TLC的原理基于色谱分离原理，利用物质在不同固定相上的亲疏性差异，通过毛细作用和扩散作用，使化合物被分离。
TLC的分析基质是通过固定相涂覆在玻璃、铝或塑料基质上，样品通过毛细作用在固定相上上升，而不同成分在固定相上停留的时间也不同，从而实现分离。
TLC工作原理示意图如下：[示意图]二、TLC的操作步骤1.准备试剂和设备：准备TLC板、玻璃容器、色谱溶剂和样品溶液。
2.准备试样：将待测试物溶解在合适的溶剂中，得到试样溶液。
3.均匀涂布试样：将试样溶液均匀地涂布在TLC板上的出发线上。
4.选择合适的溶剂系统：根据待测试物的性质和分离要求，选择合适的色谱溶剂系统，如正己烷/乙醇（9:1）。
5. 开始分析：将TLC板放入玻璃容器中，添加色谱溶剂至约2cm高度，但不能触及TLC板。
盖上容器盖，让试剂与固定相接触，溶液会开始上升。
6. 结束分析：当溶剂上升到离TLC板顶端1-2cm时，将TLC板取出，迅速标记出相应的上升高度。
然后将TLC板晾干并进行显色。
最后使用UV灯或显色剂对TLC板进行观察和分析。
7.数据分析：根据显色结果，通过测量上升的高度和各样品的Rf值（Rf值=色谱前移距/色谱跑液的前行距离），得到鉴别结果。
三、TLC的应用1.鉴别混合物的成分：通过TLC的分离作用，可以鉴别混合物中的各个成分，可以用于检测药物中的杂质和控制药物的质量。
2.分析天然产品：可以用于从天然草药、植物中提取的混合物中分离和鉴定活性物质。
3.农药残留分析：TLC可以用于农产品中农药残留的快速筛查和定量分析，具有操作简单、快速、灵敏等优点。
4.食品和环境监测：可用于鉴别食品和环境样品中的各种组分，如食品中的添加剂和环境中的有机物。
薄层色谱法原理
薄层色谱法原理薄层色谱法（TLC）是一种常用的色谱分离技术，它广泛应用于化学、生物化学、药学等领域。
薄层色谱法原理简单易懂，操作方便快捷，因此备受青睐。
本文将对薄层色谱法的原理进行详细介绍，以帮助读者更好地理解和应用这一技术。
薄层色谱法的原理基于物质在固定相和流动相之间的分配行为。
在薄层色谱法中，样品被置于薄层色谱板上，然后板上的样品与流动相接触，流动相在板上上升，样品被带上升。
不同成分在流动相和固定相之间的分配系数不同，因此它们在上升的过程中会发生分离。
通过观察分离后的斑点，可以得到样品的成分信息。
薄层色谱法的分离原理可以用化学的分配系数来解释。
分配系数是指在两种相（通常是固定相和流动相）之间分配的物质的比例。
不同物质的分配系数不同，因此它们在两相之间的分配也不同。
在薄层色谱法中，固定相是薄层色谱板上的吸附剂，而流动相则是向上移动的溶剂。
样品在两相之间分配后，就会在薄层色谱板上形成斑点，不同物质的斑点位置不同，从而实现了分离。
薄层色谱法的原理还涉及到色谱板的选择和制备。
色谱板通常由玻璃、铝箔或塑料制成，表面涂有吸附剂。
吸附剂的选择对于分离的效果至关重要，不同的吸附剂适用于不同类型的样品。
制备色谱板时，需要注意涂布均匀、干燥彻底，以确保分离的准确性和重复性。
在实际操作中，薄层色谱法的原理可以通过简单的实验来验证。
首先准备好色谱板和溶剂，然后将样品在色谱板上施加，最后将色谱板放入溶剂中。
通过观察色谱板上斑点的形成和移动，就可以直观地了解薄层色谱法的分离原理。
总之，薄层色谱法的原理是基于物质在固定相和流动相之间的分配行为。
通过合理选择色谱板和溶剂，以及严格控制实验条件，可以实现对样品的有效分离。
薄层色谱法原理简单易懂，但在实际操作中仍需谨慎对待，以确保分离的准确性和重复性。
希望本文对读者对薄层色谱法的原理有所帮助。
薄层色谱
表 1 一些常用的显色剂
显色剂
配制方法
检出对象
浓硫酸
10%H2SO4
大多数有机化合物在加热后可显 出黑色斑点
碘蒸气
将薄层板放入缸内被碘蒸气饱和数 很多有机化合物显黄棕色
分钟
碘的氯仿溶液
0.5%碘的氯仿溶液
同上
5%磷钼酸乙醇溶液，喷后 120℃烘
硝酸铈铵
6%硝酸铈铵的 2mol／L 硝酸溶液 显色剂，多元醇在黄色底色上有
棕黄色斑点
香兰素-硫酸
3g 香兰素溶于 100mL 乙醇中，再加 高级醇及酮呈绿色
入 0.5mL 浓硫酸
茚三酮
0.3g 茚三酮溶于 100mL 乙醇，喷 氨基酸、胺、氨基糖
后,110℃热至斑点出现
东北师范大学化学学院综合化学实验学习资料
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了荧光）。也可将展开完毕的薄 层板烘干后用显色剂喷雾显色。常用的显色剂有碘和三氯化铁水溶液等。许多有机化合物能 与碘生成棕色或黄色的络合物，利用这一性质，在一密闭容器中（一般用展开缸即可）放几 粒碘，将展开并干燥的薄层板放入其中，稍稍加热，让碘升华，当样品与碘蒸气反应后，薄 层板上的样品点处即可显示出黄色或棕色斑点。除饱和烃和卤代烃外，均可采用此方法。
有关，其活性随含水量的增加而下降。活化温度：硅胶板于烘箱中逐渐升温至 105～110℃ 烘 30min；氧化铝板于 150～160℃烘 4h。活化后的薄层板放在干燥器内保存备用。
（3）点样 在距薄层板底端 8~10mm 处，划一条线，作为起点线。用毛细管（内径小于 1mm）吸 取样品溶液（一般以氯仿、丙酮、甲醇、乙醇、苯、乙醚或四氯化碳等作溶剂，配成 1%溶 液），垂直轻轻地接触到薄层的起点线上。如溶液太稀，一次点样不够，第一次点样干后， 再点第二次、第三次，多次点样时，每次点样都应点在同一圆心上。点样次数依样品溶液浓 度而定，一般为 2~5 次。若样品量太少时，有的成分不易显出；若量太多时易造成斑点过大， 互相交叉或拖尾，不能得到很好的分离。点样后的斑点直径以扩散成 1~2mm 圆点为度。若 为多处点样时，则样点间距为 1~1.5cm。 （4）展开 薄层的展开需在密闭的容器中进行。先将选择的展开剂放在层析缸中，使层析缸内的空 气饱和 5~10min，再将点好试样的薄层板放入层析缸中进行展开。样点的位置必须在展开剂 液面之上。当展开剂上升到薄层的前沿（离顶端 5~10mm）或各组分已明显分开时，取出薄 层板，立即用铅笔或小针划出溶剂前沿的位置，晾干或烘干后即可显色。根据标样对照或 Rf 值的不同对各组分进行鉴定。 展开剂的选择主要是根据样品的极性、溶解度和吸附剂的活性等因素来综合考虑。溶剂 的极性越大，则对化合物的洗脱力越大，即 Rf 值也越大。如发现样品各组分的 R f 值 较大， 可考虑换用一种极性较小的溶剂，或在原来的溶剂中加入适量极性较小的溶剂展开，如原用 氯仿为展开剂，则可加入适量的苯。相反，如原用展开剂使样品各组分的 R f 值较小，则可 加入适量极性较大的溶剂，如氯仿中加入适量的乙醇试行展开，以达到分离的目的。 （5）显色 展开完毕，取出薄层板, 划出前沿线，如果化合物本身有颜色, 就可直接观察它的斑点。 如果本身无色，可用显色剂法或紫外光照射法显色。用硅胶 GF254 制成的薄板层，由于加入
薄层色谱法的基本原理
薄层色谱法的基本原理
薄层色谱法（Thin Layer Chromatography，TLC）是一种常用的分析技术，基于物质在固定相上的分配和迁移差异实现物质分离和检测。
薄层色谱法的基本原理如下：
1. 固定相：将一层薄薄的固定相涂覆在玻璃、金属或塑料基质上，形成薄层色谱板。
常用的固定相有硅胶、氧化铝或纤维素等，它们可以吸附和分离不同物质。
2. 样品施加：将待分析的混合物样品沿着色谱板底部施加。
样品可通过滴管或微量注射器等工具点状施加在色谱板上，通常施加位置为距离色谱板底部约1-2 cm处。
3. 迁移：将色谱板置于封闭的容器中，容器内加入有机溶剂或某种移动相，将移动相铺满容器底部。
容器盖上后，移动相沿着色谱板向上上升。
物质分子会与移动相相互作用，并迁移到上方。
迁移距离取决于化学物质与移动相的亲疏性。
4. 分离：在固定相上，不同物质在移动相中的迁移速度不同，导致分离。
物质越亲近固定相的亲疏性越大，它们迁移速度越慢。
分离后的物质会在色谱板上形成不同的斑点。
5. 可视化：将色谱板取出，根据待分析物质的性质选择合适的显色方法，如紫外灯照射、着色剂喷洒、化学反应等，在色谱板上的斑点处产生可见的色谱带。
通过比较样品斑点的运动距离和标准物质的运动距离，可以推断待分析样品中的物质成分。
薄层色谱法具有操作简便、速度快、分离效果好等优点，因此广泛应用于化学、生物等领域的物质分离和分析。
薄层色谱TLC(点板)的基本原理
薄层色谱(点板)的基起源基础理★★薄层色谱,或称薄层层析(thin—1ayer chromatography),是以涂布于支撑板上的支撑物作为固定相,以适合的溶剂为流淌相,对混杂样品进行分别.判定和定量的一种层析分别技巧.这是一种快速分别诸如脂肪酸.类固醇.氨基酸.核苷酸.生物碱及其他多种物资的特殊有用的层析办法,从50年月成长起来至今,仍被普遍采取.(一)基起源基础理薄层层析是把支撑物平均涂布于支撑板(经常运用玻璃板,也可用涤纶布等)上形成薄层,然后用响应的溶剂进行睁开.薄层层析可依据作为固定相的支撑物不合,分为薄层吸附层析(吸附剂).薄层分派层析(纤维素).薄层离子交流层析(离子交流剂).薄层凝胶层析(分子筛凝胶)等.一般试验中运用较多的是以吸附剂为固定相的薄层吸附层析. 吸附是概况的一个重要性质.任何两个相都可以形成概况,吸附就是个中一个相的物资或消融于个中的溶质在此概况上的密集现象.在固体与气体之间.固体与液体之间.吸附液体与气体之间的概况上,都可能产生吸附现象. 物资分子之所以能在固体概况逗留,这是因为固体概况的分子(离子或原子)和固体内部分子所受的吸引力不相等.在固体内部,分子之间互相感化的力是对称的,其力场互相抵消.而处于固体概况的分子所受的力是不合错误称的,向内的一面受到固体内部分子的感化力大,而概况层所受的感化力小,因而气体或溶质分子在活动中碰到固体概况时受到这种残剩力的影响,就会被吸引而逗留下来.吸附进程是可逆的,被吸附物在必定前提下可以解吸出来.在单位时光内被吸附于吸附剂的某一概况积上的分子和统一单位时光内分开此概况的分子之间可以树立动态均衡,称为吸附均衡.吸附层析进程就是不竭地产生均衡与不服衡.吸附与解吸的动态均衡进程. 例如用硅胶和氧化铝作支撑剂,其重要道理是吸附力与分派系数的不合,使混杂物得以分别.当溶剂沿着吸附剂移动时,带着样品中的各组分一路移动,同时产生持续吸附与解吸感化以及重复分派感化.因为各组分在溶剂中的消融度不合,以及吸附剂对它们的吸附才能的差别,最终将混杂物分别成一系列黑点.如作为尺度的化合物在层析薄板上一路睁开,则可以依据这些已知化合物的Rf 值（后面介绍Rf值）对各黑点的组分进行判定,同时也可以进一步采取某些办法加以定量. 薄层层析有很多长处：它保持了操纵便利.装备简略.显色轻易等特色,同时睁开速度快,一般仅需15～20分钟;混杂物易分别,分辩力一般比以往的纸层析高10～100倍,它既实用于只有0．01μg的样品分别,又能分别大于500mg的样品作制备用,并且还可以运用如浓硫酸.浓盐酸之类的腐化性显色剂.薄层层析的缺陷是对生物高分子的分别后果不甚幻想.。
薄层色谱法原理
薄层色谱法原理
薄层色谱法（TLC）是一种分离技术，对物质进行分离和纯化。
其原理基于物质在固定相和流动相之间的不同亲和性来实现分离。
薄层色谱法使用一种薄而均匀涂敷在玻璃、铝箔或塑料片上的液体或固体层，称为薄层层片。
这个层片通常是由无定型的吸附剂，如硅胶或氧化铝组成的。
待分离样品通常是在物理或化学处理后溶解在适当的溶剂中，然后以一小点或线状的方式施加到层片上。
在色谱过程中，层片与溶剂系统保持接触，而溶剂会在吸附剂上升出现浸润，形成一个移动相。
移动相通过表层片，将溶解物质带上升。
移动相的速度取决于吸附剂的性质和选择性，以及溶剂在薄层上的升力和展开行为。
在运行过程中，溶质分子与吸附剂的相互作用力不同，以致有了多项移动的速度。
这导致了溶质分子的分离，从而使它们以不同的速度通过层片。
最终，通过观察分离物质在层片上的位置和形成的斑点，可以确定分离效果并进行定性或定量分析。
这可以通过显色剂或紫外光照射等方法来实现。
总的来说，薄层色谱法原理是基于样品分子与吸附剂的吸附作用和移动相的逐渐上升，利用它们在层片上的差异速度实现分离。
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薄层色谱(点板)的基本原理
★★
薄层色谱，或称薄层层析(thin—1ayer chromatography)，是以涂布于支持板上的支持物作为固定相，以合适的溶剂为流动相，对混合样品进行分离、鉴定和定量的一种层析分离技术。
这是一种快速分离诸如脂肪酸、类固醇、氨基酸、核苷酸、生物碱及其他多种物质的特别有效的层析方法，从50年代发展起来至今，仍被广泛采用。
(一)基本原理
薄层层析是把支持物均匀涂布于支持板(常用玻璃板，也可用涤纶布等)上形成薄层，然后用相应的溶剂进行展开。
薄层层析可根据作为固定相的支持物不同，分为薄层吸附层析(吸附剂)、薄层分配层析(纤维素)、薄层离子交换层析(离子交换剂)、薄层凝胶层析(分子筛凝胶)等。
一般实验中应用较多的是以吸附剂为固定相的薄层吸附层析。
吸附是表面的一个重要性质。
任何两个相都可以形成表面，吸附就是其中一个相的物质或溶解于其中的溶质在此表面上的密集现象。
在固体与气体之间、固体与液体之间、吸附液体与气体之间的表面上，都可能发生吸附现象。
物质分子之所以能在固体表面停留，这是因为固体表面的分子(离子或原子)和固体内部分子所受的吸引力不相等。
在固体内部，分子之间相互作用的力是对称的，其力场互相抵消。
而处于固体表面的分子所受的力是不对称的，向内的一面受到固体内部分子的作用力大，而表面层所受的作用力小，因而气体或溶质分子在运动中遇到固体表面时受到这种剩余力的影响，就会被吸引而停留下来。
吸附过程是可逆的，被吸附物在一定条件下可以解吸出来。
在单位时间内被吸附于吸附剂的某一表面积上的分子和同一单位时间内离开此表面的分子之间可以建立动态平衡，称为吸附平衡。
吸附层析过程就是不断地产生平衡与不平衡、吸附与解吸的动态平衡过程。
例如用硅胶和氧化铝作支持剂，其主要原理是吸附力与分配系数的不同，使混合物得以分离。
当溶剂沿着吸附剂移动时，带着样品中的各组分一起移动，同时发生连续吸附与解吸作用以及反复分配作用。
由于各组分在溶剂中的溶解度不同，以及吸附剂对它们的吸附能力的差异，最终将混合物分离成一系列斑点。
如作为标准的化合物在层析薄板上一起展开，则可以根据这些已知化合物的Rf值（后面介绍Rf值）对各斑点的组分进行鉴定，同时也可以进一步采用某些方法
加以定量。
薄层层析有许多优点：它保持了操作方便、设备简单、显色容易等特点，同时展开速率快，一般仅需15～20分钟；混合物易分离，分辨力一般比以往的纸层析高10～100倍，它既适用于只有0．01μg的样品分离，又能分离大于500mg的样品作制备用，而且还可以使用如浓硫酸、浓盐酸之类的腐蚀性显色剂。
薄层层析的缺点是对生物高分子的分离效果不甚理想。