酶标分析仪测量不确定度评定

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酶标分析仪吸光度示值误差测量结果的不确定度评定

酶标分析仪吸光度示值误差测量结果的不确定度评定

酶标分析仪吸光度示值误差测量结果的不确定度评定酶标分析仪是一种常用的生化分析仪器,用于检测生物样品中各种蛋白质、核酸等生物大分子的含量。

吸光度测量是酶标分析仪最常用的测量方式之一,精确的吸光度示值误差测量结果对于生化分析的准确性和精度至关重要,因此需要对其不确定度进行评定。

酶标分析仪吸光度测量原理基于琼脂糖凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western blot检测技术,通过检测生物样品中某种蛋白质或其他生物分子与特定抗体之间的反应,进而分析这种分子的含量和分布。

吸光度值是这种反应的一个主要指标,而对于酶标分析仪的吸光度示值误差来说,其主要的不确定因素包括了仪器本身的误差、样品制备的误差、环境因素的影响等。

为了评估酶标分析仪的吸光度示值误差测量结果的不确定度,我们可以利用标准偏差(Standard Deviation,SD)来度量数据的离散程度,并进一步计算出所需的不确定度参数。

这里我们以三个实验数据为例来说明不确定度的评估方法。

样品1:| A492值 ||----------|| 0.234 || 0.235 || 0.234 || 0.236 || 0.235 |首先,我们需要计算每个样品的吸光度值的平均值,以及其与平均值之差的平方和(Sum of Squares,SS)。

样品1的平均值为0.234 + 0.235 + 0.234 + 0.236 + 0.235 = 0.2348,其方差为:((0.234-0.2348)^2 + (0.235-0.2348)^2 + (0.234-0.2348)^2 + (0.236-0.2348)^2 + (0.235-0.2348)^2)/4 = 7.2×10^-7样品2的相应计算结果为:MS = (7.2×10^-7 + 3.6×10^-6 + 1.44×10^-6)/3 = 1.54×10^-6接着,我们计算样品方差与样品数目的比值(F-ratio)。

酶标分析仪检定结果的不确定度分析评定

酶标分析仪检定结果的不确定度分析评定

42 ZHONGGUO YIXUEZHUANGBEIresults and confirm whether the repeatability of the verification results can meet the requirement of practice.[Key words] ELISA analyzer; Uncertainty; Spectrophotometer; Quality control; Evaluation[First-author’s address] Department of Medical Engineering, Xijing Hospital, The Fourth Military Medical University of PLA, Xi’an 710032,China.作者简介崔骊,女,(1975- ),硕士,副主任技师。

西京医院医学工程科,从事质量控制管理和检测方面的研究工作。

*基金项目:陕西省社会发展科技攻关项目(2016SF-062)“器材设备管理信息系统的改进研究”①西京医院医学工程科 陕西 西安 710032*通迅作者:lixiangd@酶标分析仪是一种医用分析仪,应用于临床检验、微生物学、免疫学、兽医及农业科学等领域,检查内容包括血液学检验、免疫学检验、癌胚抗原的测定、基因检验、农药残留检验等项目[1]。

酶标分析仪主要由光源系统、单色器系统或滤光片、样品室以及检测器组成,其工作原理由光源灯发出的光波经过单色器或滤光片变成一束单色光,进入到塑料微孔板中的待测标本,该单色光一部分被标本吸收,另一部分透过标本照射到光电检测器上,光电检测器将强弱不同的光信号转换成相应的电信号,电信号经前置放大、对数放大和模数转换处理后送入微处理器进行数据处理,转换成相应的浓度,然后由显示器和打印机输出结果[2]。

酶标分析仪的主要参数有波长、吸光度和灵敏度,其量值是否准确直接影响检验结果。

酶标分析仪吸光度的测量不确定度评定

酶标分析仪吸光度的测量不确定度评定
0 2 2 8 A、 0 . 2 3 0 A、 0 . 2 3 5 A、 0 . 2 2 8 A 0 . 2 3 1 A
1 . 5 测 量方 法
在 规定 的环 境条 件下 , 仪 器预 热和 调好零 位后 , 依次
选用 4 0 5 n m, 4 5 O h m, 4 9 0 n m, 6 2 0 i r m波长, 将 吸光度标称值
o f ELI S A An a l y t i c a l I n s t r u me n t s
h L u
l 概 述
2 . 1 测量模 型
AA = A — As

酶标 法 自七 十年 代 提 出以来 , 经过 不 断 地 发展 现 已 成为 检验 某 些指标 的主要 方法 , 与此 同 时 , 作 为 专用 于微 孔板 比色 的 酶标分 析 仪 也 获得 了很 大 的发展 , 广泛 应 用 于 临床检 验 、 生物 学研 究 、 农 业 科学 、 食 品和环境 科学 中 ,
关键词 : 酶标分析仪 ; 吸光度 ; 测量结果 ; 不确定度
中图分类号 : T H 8 3 2 文献标识码 : A 国家 标 准 学 科 分 类 代 码 : 4 6 0 . 4 0 2 5
Ev a l u a t i o n o f Me a s u r e me n t Un c e r t a i n t y a b o u t t h e Ab s o r b a n c e
量 l O次 , 共得 到 1 6 组 测量 列 , 每 组测 量 列分别 计 算单 次
实验 标准 差 。
表 1
本计量标准的量值 由中国计量科学院给出, 可溯源 至国家基准 , 可靠性较高 , 估计相对不确定度 1 0 %, 则自

酶标分析仪吸光度示值误差测量结果的不确定度评定

酶标分析仪吸光度示值误差测量结果的不确定度评定

酶标分析仪吸光度示值误差测量结果的不确定度评定酶标分析是生物化学领域中常用的一种定量分析方法,其基本原理是利用酶对底物的特异性作用,通过测定底物的代谢产物的量来间接计量底物的浓度。

在酶标分析过程中,吸光度检测是一种常见的测量方法,而吸光度示值误差的评定则是保证酶标分析结果准确性和可靠性的重要环节。

本文将主要介绍酶标分析仪吸光度示值误差测量结果的不确定度评定过程,旨在为实验人员提供一种准确、可靠的评定方法,以确保酶标分析结果的准确性和可靠性。

一、实验原理在酶标分析的实际操作中,吸光度示值误差是无法避免的。

这种误差主要来源于环境因素、仪器本身的误差、操作人员的技术水平等多种因素。

对于酶标分析仪的吸光度示值误差进行评定和不确定度分析是非常重要的。

二、实验方法为了评定酶标分析仪吸光度示值误差的不确定度,我们可以采用以下步骤:1. 准备标准溶液:需要准备一系列已知浓度的标准溶液,这些标准溶液可以用于模拟样品中酶催化产生的代谢产物的浓度。

2. 测量吸光度值:使用酶标分析仪对每种标准溶液进行吸光度值的测量。

在测量过程中,需要确保仪器的稳定性和准确性,同时要注意避免外界环境因素对测量结果的影响。

3. 重复测量:对于每种标准溶液,需要进行多次吸光度值的重复测量,以获得更加准确的测量结果。

4. 数据处理:将每种标准溶液的吸光度值进行平均处理,并计算其标准偏差和相对标准偏差。

5. 不确定度评定:根据测量结果的标准偏差和相对标准偏差,可以计算出吸光度示值误差的不确定度。

三、实验结果与分析在实际的酶标分析仪吸光度示值误差的不确定度评定过程中,我们选取了若干种已知浓度的标准溶液进行测量,并进行了重复测量,得到了如下的实验结果:| 标准溶液浓度 | 吸光度示值1 | 吸光度示值2 | 吸光度示值3 | ... | 吸光度示值n | 平均吸光度值 | 标准偏差 | 相对标准偏差 || -------------- | ------------ | ------------ | ------------ | --- |------------ | ------------- | --------- | ------------ || 1.0 | 0.200 | 0.198 | 0.202 | ... | 0.200 | 0.200 | 0.002 | 1.00% || 2.0 | 0.400 | 0.402 | 0.398 | ... | 0.400 | 0.400 | 0.002 | 0.50% || 3.0 | 0.600 | 0.598 | 0.602 | ... | 0.600 | 0.600 | 0.002 | 0.33% || ... | ... | ... | ... | ... | ... | ... | ... | ... |通过对吸光度值的测量结果进行处理,我们可以得到不同标准溶液的平均吸光度值、标准偏差和相对标准偏差。

酶标分析仪吸光度示值误差测量结果的不确定度评定

酶标分析仪吸光度示值误差测量结果的不确定度评定

酶标分析仪吸光度示值误差测量结果的不确定度评定【摘要】本文主要针对酶标分析仪吸光度示值误差的测量结果进行不确定度评定。

在介绍了研究背景和研究目的。

正文部分分别介绍了测量方法、不确定度分析、数据处理、结果讨论和影响因素。

通过对数据的详细分析和讨论,得出了有关吸光度示值误差的结论,并探讨了可能的影响因素。

结论部分总结了本研究的重要发现,强调了研究意义,并展望了未来的研究方向。

通过本文的研究,可以更深入地了解酶标分析仪吸光度示值误差的不确定度,并为相关研究提供参考。

【关键词】酶标分析仪、吸光度、示值误差、不确定度评定、测量方法、数据处理、结果讨论、影响因素、结论总结、研究意义、展望未来、研究背景、研究目的1. 引言1.1 研究背景酶标分析是现代生物技术领域中一种常用的实验方法,用于测定生物样本中特定物质的浓度。

在酶标分析中,吸光度是常用的测量指标之一,通过测量样本溶液在特定波长下的吸光度值,来确定样本中目标物质的浓度。

由于各种各样的因素可能会对吸光度示值造成影响,因此需要对吸光度示值误差进行评定,以保证实验结果的准确性和可靠性。

目前,关于酶标分析仪吸光度示值误差的研究仍然比较有限,尤其是在不确定度评定方面还存在许多问题待解决。

本文旨在通过对酶标分析仪吸光度示值误差的测量结果进行不确定度评定,探讨其影响因素及数据处理方法,为酶标分析实验提供更为科学和可靠的数据支持。

通过本研究,我们希望可以更全面地了解酶标分析仪吸光度示值误差的特点,为进一步完善该分析方法提供参考和指导。

1.2 研究目的研究目的是对酶标分析仪吸光度示值误差的不确定度进行评定,为该仪器在实验分析中的准确性提供参考。

通过测量方法、不确定度分析、数据处理和结果讨论,我们希望能够揭示吸光度示值误差的来源,并确定其影响因素。

从而为实验结果的可靠性和准确性提供更为科学的依据。

通过本研究的展望未来,我们也希望能够为酶标分析仪的使用和维护提出更为有效的建议,进一步提高实验结果的可信度和稳定性。

酶标分析仪测量不确定度评定

酶标分析仪测量不确定度评定

酶标分析仪测量不确定度评定一、 概述本方法适用于对新制造,使用中和修理后的酶标分析仪进行计量检定时测量结果的不确定度评定与分析。

检定依据:JJG861-1994《酶标分析仪》计量检定规程环境温度:(5~35)℃; 相对湿度:≤85﹪,周围无影响监护仪正常工作的电磁场和机械震动。

检定用标准装置:酶标分析仪标准测试板检定方法:依据JJG861-1994《酶标分析仪》计量检定规程,将酶标分析仪标准测试板置于酶标分析仪的样品槽内,进行直接测量,对酶标分析仪全光路/通道差进行检定,从而把不确定度限制在一定范围内。

二、 测量的数学模型 1.数学模型: δ=A ——-- A S式子: δ—酶标分析仪吸光度的示值误差(A); A ——— 酶标分析仪吸光度的测量平均值(A) A S —酶标分析仪标准测试板吸光度的标准值(A)2.测量不确定度构成要素 2.1重复测量引入的不确定度 2.2标准器不确定度的影响 2.3稳定性引入的不确定度 2.4温度稳定性引入的不确定度 2.5均匀性及正反向差分量 三、A 类标准不确定度分量评定选一台稳定性好的酶标分析仪作为被检定对象,用0.5A 酶标分析仪标准测试板在450nm 处连续测量十次,测量结果分别如下: (表中单位:A)SA= = =0.0009A重复测量标准不确定度:SA=0.0009 A,实际测量为5次,则平均值的标准不确定度:uA =SA÷ =4.0×10-4A四、B类标准不确定度分量4.1 标准器不确定度的影响酶标分析仪标准测试板的吸光度值扩展不确定度为0.005A,包含因子为k=2(此值为证书给出),则标准不确定度:uB1=0.005/2=0.0025A4.2年稳定性引入的不确定度在一个定值周期内(暂定为一年)定期测量标准的吸光度值,用极差发计算实验标准偏差作为稳定性引入的不确定度为0.0014A,按正态分布考虑,,包含因子为k=3,则标准不确定度:uB2=0.0014A /3=0.00047A4.3温度稳定性引入的不确定度在JJG861-1994检定规程要求的温度范围(5℃~35℃)内不同温度下测量标准的吸光度值,用极差法计算实验标准偏差作为温度稳定性引入的不确定度为0.0006A,按正态分布考虑,,包含因子为k=3,则标准不确定度:=0.0006A /3=0.002AuB34.3均匀性及正反向差分量分别测量标准滤光片不同位置吸光度值,用极差法计算实验标准偏差作为均匀性引入的不确定度为0.0012A,按正态分布考虑,,包含因子为k=3,则标准不确定度:=0.0012A /3=0.0004AuB4五、测量不确定度汇总通过以上分析,将各分量列表如下:六、合成标准不确定度以上各不确定度分量彼此独立,相关系数为0,各分量采用和方根法,则合成不确定度为:=uc=≈3.3×10-3A七、扩展不确定度视合成不确定度为正态分布,取置信概率为99.73%,置信因子k=3,则有=3×3.3×10-3A ≈0.001A扩展不确定度: U=3uc八、测量不确定度的报告与表示酶标分析仪基本误差的扩展不确定度:U=0.001A k=3。

酶标分析仪测量不确定度

酶标分析仪测量不确定度

酶标分析仪吸光度值准确度测量结果的不确定度分析1、概述1. 1 适用范围:本方法使用于酶标分析仪器的检定、校准和检测。

1. 2 环境条件:温度15℃~35℃。

相对湿度(15~85)%RH 。

1. 3 测量依据:JJG861-2007《酶标分析仪检定规程》 1. 4 测量标准:标称值为0.5A 、1.0A 光谱中性滤光片,不确定度为U =0.005A ,k =2。

1. 5 采用方法:酶标仪开机预热20分钟,选用405nm 、492nm 、620nm 波长,以空气参比分别测量0.5A 、1.0A 滤光片的吸光度值,连续测量3次,取其算术平均值作为测量值,测量值与滤光片的标准值之差,即为吸光度的准确度。

1. 6 评定结果的使用:在符合上述条件下的测量结果,一般可直接采用本不确定度的 评定结果。

2、数学模型s A A A -=∆A ∆——吸光度值的准确度 A —— 测量值的平均值s A ——滤光片标准值3、输入量的标准不确定度评定3.1输入量A 的标准不确定度)(A u 的评定A 的不确定度来源主要是测量的不重复性,可以连续测量得到测量列,采用A 类方法评定。

选择一台经检定合格的酶标仪,波长选用492nm ,对1.0A 的滤光片在重复性条件下连续测量10次,得到测量列:0.971,0.976,0.970,0.978,0.974,0.970,0.978,0.974,0.975,0.972)(9738.010/101A AA i i∑===单次测量的标准差为:实际测量情况下,以三次测量的平均值为测量结果,所以3次平均值的标准差为重复性引起的标准不确定度:)(0017.03/0030.0)()(A A s A u ===)(0030.01)(1012A n A A s i i =--=∑=3.2输入量s A 的标准不确定度)(s A u 的评定s A 的不确定度的主要来源于滤光片的定值不确定度,以及时间变化引起的s A 值变化。

酶标分析仪吸光度准确度测量结果的不确定度评定

酶标分析仪吸光度准确度测量结果的不确定度评定
色 的分析 工作 。
对 一 台 酶 标分 析 仪 , 在 6 0 m 波 长 下 , 若 2n 选择 标 称
值 为 0 42 .9 A的 吸光 度 光 谱 中性 玻 璃 滤 光 片 , 续测 量 连
1 0次 , 到测量 列 0 4 8 0 4 6 0 4 6 0 4 7 0 4 7 0 得 . 9 、 . 9 、 . 9 、 . 9 、 .9 、 .
度 。测 量过 程 : 规 定 条 件 下 , 别 测 量 标 称 值 为 0 在 分 .
求得 单 次标准 差
:7. 8 0- A 3 9 xl 4

、 /
一 上
5 A和 10 .A的光谱 中性玻璃 滤光片 , 分别在规定 波长 处, 用空 吸 收池 调整 仪 器 零 点 , 光 谱 中性 玻 璃 滤 光 片 将
437 0 .5 。A x1
6. 6 0 7× 1 4 0- A
— — — — — — _ — — — — — — — — 一
式中: △卜

酶 标分 析仪 吸光度 准确 度 ;
酶标 分析仪 吸光度 示值 的算术平 均值 ;

合 样 标 差 √ 61 1 A 并 本 准 为 : =2 × 1 ・5 0 m
型求偏 导 , 得输 出量估 计 方差 : 可
自由度 为
/ ' / =∑ 3 = 6
u ( =[。( ] △ ) c ) +[: ( s ] u c X ) 灵敏 系数 c、 u 。c :
分别为 :
C 1=O AX/OX = 1; 2= O C AX/O Xs= 一 1
4 6 0 4 7 0 4 7 0 4 8 0 4 7 A) 9 、. 9 、 . 9 、 .9 、.9 (
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酶标分析仪吸光度示值误差测量结果的不确定度评定
评定单位:唐山市计量测试所
评定人:王建新
日期:2009年7月
酶标分析仪吸光度示值误差测量结果的不确定度评定
被校准仪器信息:
型号:Stat Fax 2100 出厂编号:3203-1802 生产厂家:美国倍肯公司 一、概述:
1.测量依据: JJG861-2007 酶标分析仪检定规程; 评定依据:JJF1059—1999 测量不确定度评定与表示;
CX/19/2002 测量不确定度评定与表示实施细则。

2.测量环境条件: 温度22℃,相对湿度35%
3.所用测量标准: 酶标仪透射比标准滤光片: U =0.02A k =2.65 4.测量点:492nm 处1.0A
5.测量方法:在环境条件符合检定规程的情况下,设置仪器各参数为适用,在492nm 处直接扫描透射比标准滤光片(1.0A ),连续扫描10次测得一组吸光度值,其10次测量结果的算术平均值与透射比标准滤光片(1.0A )的标准值之差为仪器该点吸光度示值误差。

二、数学模型 S A A A -=∆-
式中: A ∆—测量点的示值误差;
-A —10次测量值的算术平均值;
S A —透射比标准滤光片标准值。

则方差:)()()(222S A u A u A u +=∆
三、各输入量的标准不确定度分量的评定 测量不确定度的来源:
(1) 标准物质定值的不确定度; (2) 测量方法的不确定度; (3) 环境条件的影响; (4)人员操作的影响; (5)被校准仪器变动性的影响。

由于采用直接比较法进行测量,测量方法的不确定度可以不予考虑。

在规程规定的环境条件下进行校准,温度、湿度等随机变量的影响和被检定仪器的变动性均体现在测量结果的重复性中。

l .输入量-A 的标准不确定度)(-
A u 的评定
输入量-A 的不确定度)(-
A u 来源主要是分光光度计的测量不重复性,可以通过连续测量得到测量列,在492nm 处用酶标分析仪直接扫描透射比标准滤光片(1.0),连续扫描吸光度10次,得到以下测量列:
-
A =∑=n
i i A n 1
1 单次实验标准差:s =1
)(2
--∑n x x
i
标准不确定度(正态分布):)(-
A u =s /n (n =10次)
2. 输入量S A 的标准不确定度)(S A u 的评定:
(1)酶标仪透射比标准滤光片标准物质由检定证书给出定值不确定度为
U =0.02A ,包含因子k =2.65,则
)(S A u =U /k =0.02A /2.65=0.0076A
四、合成标准不确定度及扩展不确定度的评定 1.灵敏系数
因为数学模型 S A A A -=∆-
所以灵敏系数 1c =
A A ∂∆∂)(=1 2c =S
A A ∂∆∂)
(=-1
2.各标准不确定度分量汇总见下表
3.合成标准不确定度)(A u ∆:由于以上分析的不确定度分量互相独立,互不相关,所以合成标准不确定度)(A u ∆可以表示为:
)()()(2
22221S A u c A u c u +=∆λ=0.0080A
五、扩展不确定度的评定: 取置信概率p =95%,k =2
则扩展不确定度U =k ×)(A u ∆=2×0.0080A =0.016A
六、吸光度示值误差测量结果的不确定度报告。

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