高效液相色谱仪的管理与维护
浅谈高效液相色谱仪的保养与维护
浅谈高效液相色谱仪的保养与维护高效液相色谱仪（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）是一种高效分离和分析样品成分的仪器，广泛应用于医药、化工、环境监测、食品等领域。
在使用HPLC 的过程中，保养和维护工作非常关键。
良好的保养和维护能够延长设备寿命，保证分析结果的准确性和可靠性。
本文将就HPLC的保养和维护进行较全面的探讨，以期为相关使用者提供帮助和指导。
一、日常保养1. 清洗：定期对HPLC进行清洗是保持设备正常工作的关键。
清洗前，首先应关闭色谱柱开关，拔掉电源，然后用无水乙醇清洗柱及管路，最后用纯水冲洗干净。
在一些需要不断更新样品溶剂的实验中，还需要对溶剂瓶、进样器等部件进行定期清洗。
2. 检查密封性：检查HPLC各接口的密封性，确保各部件之间无漏气、不漏液，避免因为漏气或漏液造成分析数据的误差。
3. 检查压力：在使用HPLC过程中，经常检查色谱柱前后的压力表读数，确保在正常范围内。
如果发现异常，应及时排查原因并进行处理。
4. 校准：定期对HPLC进行校准，保证设备和检测器的准确性。
可以借助标准物质进行定期的校准维护。
5. 检查溶剂余量：定期检查溶剂瓶的余量，确保实验过程中不会因为溶剂用尽而中断。
6. 检查灯管：若HPLC设备配备有紫外-可见检测器，需要定期检查和清洗灯管，以保证检测器的灵敏度和准确度。
二、周期性维护1. 良好的使用环境：保持HPLC设备使用环境的干净整洁，避免灰尘、化学气体等对设备造成影响。
需要注意设备周围的温度和湿度，避免影响设备的正常工作。
2. 正确存放标准溶液：在使用标准溶液时，要注意存放条件，避免因为存放不当导致标准溶液的失效。
3. 定期更换消耗品：HPLC设备的使用需要大量耗材，比如柱、进样器、检测器灯管等，这些耗材的使用寿命有限，需要定期更换，以保证设备的正常工作。
4. 记录维护情况：建立设备的维护记录，记录设备的使用情况、维护情况以及出现的问题及处理情况，为设备的维护提供参考。
高效液相色谱仪的维护和保养
高效液相色谱仪的维护与保养液相色谱仪应该进行适当的维护保养，维护保养按照维护频率分为日常维护、每周维护及每月维护。
每周维护、每月维护活动均应记录在仪器维护记录本上。
1日常维护1.1溶剂配制所有溶剂应为HPLC级，水应为二次超纯水。
溶剂必须经过滤膜过滤，过滤水和有机相时应该选用不同的滤膜。
纤维素膜主要用于水溶液，尼龙滤膜和PTFE膜均是通用型滤膜。
常用0.45μm滤膜，如果使用亚二微米颗粒色谱柱，建议使用0.22μm滤膜。
溶剂使用前必须脱气，常用超声脱气20-30min。
1.2开机准备新鲜的纯水和有机溶剂以及方法所需的溶液。
按顺序打开仪器各组件电源→电脑电源→打开工作站。
确认工作站和仪器连接正常，通过工作站或手动打开排气阀，将需要用到的通道分别100%以流速3ml/min~5ml/min排气。
（所需流量参考日常工作的排气流量）（多个泵同时排气容易对泵造成损耗，不建议！）确认各通道排气完成后，关闭排气阀。
用20倍以上的柱体积的有机溶剂冲洗系统。
（注意：有机溶剂冲洗前需确认之前关机时已经移除系统中的缓冲盐）调用运行方法，使用5~10倍柱体积的方法所需流动相比例平衡系统。
平衡系统前用所需方法的流动相比例在排气阀打开的情况下以3ml/min~5ml/min运行一段时间，让泵中的流动相比例快速达到所需的流动相比例。
更换洗针溶剂、更换密封垫清洗溶剂。
1.3试验中注意1.3.1流动相在选择A、B、C、D泵放置流动相时，将盐溶液连接在一个底部梯度阀端口上，有机溶剂连接在一个上部梯度阀端口上。
最好使有机溶剂通道位于盐溶液通道的正上方。
最好不要将纯水溶液作为流动相的一组，如果使用了水相作为流动相的一组，应注意定期更换、过滤溶剂，不应超过2天，避免阳光直接照射。
如果试验允许，可向水相中加入0.001-0.0001M的叠氮化钠。
1.3.2色谱柱使用流动相前千万注意，流动相与色谱柱内的保存溶剂和系统内存留溶剂的混溶性，避免形成乳化小液滴，从而毁坏柱子。
高效液相色谱仪的操作与维护指南
高效液相色谱仪的操作与维护指南高效液相色谱仪（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）作为一种常用的分析仪器，广泛应用于化学、药学、环境科学等领域。
为了保证仪器的正常运行和获得可靠的分析结果，正确的操作和科学的维护是非常重要的。
本指南将详细介绍高效液相色谱仪的操作和维护方法，以帮助用户正确使用该仪器。
一、高效液相色谱仪的操作方法1. 准备工作在操作前，需要先进行一些准备工作。
首先，检查仪器是否处于稳定的工作环境中，以确保仪器不受外界干扰。
其次，检查所有的连接与密封件是否完好，确保流体不会泄漏。
最后，检查溶剂和样品的储存条件，保证其符合要求。
2. 开机与关闭正确的开机和关闭步骤可以延长仪器的寿命。
开机前，需要检查电源和其他外部连接。
按照仪器的说明书，按顺序打开电源和其他必要的开关。
关闭仪器时，应按照相反的顺序关闭开关，并断开电源。
3. 样品准备与进样在进行进样操作前，需要准备好样品和溶剂。
样品准备时，应遵循相应的样品制备方法，确保样品的准确性和稳定性。
进样时，应根据实验需求设置适当的进样方式，并注意定量准确。
4. 仪器参数设置在进行分析之前，需要设置仪器的参数，以调整流速、温度、检测波长等参数。
仪器的参数设置应根据实验目的和样品特性进行优化调整，确保获得准确的分析结果。
5. 分析运行与数据处理设置好仪器参数后，可以开始进行分析运行。
根据实验要求和样品特性，选择合适的分析方法和梯度程序。
在分析过程中，应定期检查仪器运行状态，注意观察流速、峰面积、保留时间等数据，并记录相关结果。
6. 仪器清洗与维护分析结束后，必须对仪器进行清洗和维护。
首先，关闭流体通道，清除流体残留物和样品残留物。
然后，根据仪器说明书的要求，进行仪器的常规清洗和维护工作。
定期检查和更换液相柱、检测器等易损件，以保证仪器的正常运行。
二、高效液相色谱仪的维护方法1. 液相柱维护液相柱作为HPLC分离的重要组件，需要定期维护和保养。
浅谈高效液相色谱仪的保养与维护
浅谈高效液相色谱仪的保养与维护高效液相色谱仪是一种常见的分离和分析仪器，广泛应用于化学、药学、生物、环境等领域。
为了保证其正常运行和延长使用寿命，对高效液相色谱仪的保养与维护非常重要。
以下是对高效液相色谱仪的保养与维护的一些浅谈。
高效液相色谱仪在使用前需要进行正常的启动和预热操作。
启动时需检查各部件是否完好，液体供应是否正常，仪器连接是否稳固，如有异常及时排除。
预热仪器可以提高分离效果和仪器稳定性。
保持色谱柱的清洁和正常运行。
高效液相色谱柱常需使用一段时间后进行清洗以去除残留物，清洗时可使用适当的溶剂进行反向冲洗，然后再用正向流动相进行平衡。
使用过程中应注意保持色谱柱的恒温，防止出现温差引起的色谱峰形变或漏色。
注意避免出现过大的流量或压力，以免对色谱柱造成损伤。
保持进样器的清洁和稳定。
进样器是色谱仪中的关键部位之一，需要保持干净和通畅。
平时应经常检查进样器中的样品残留物或杂质，必要时进行清洗。
进样器的密封性也需要经常检查，确保进样过程中不发生泄漏。
第四，及时更换和维护检测器。
高效液相色谱仪的检测器常常需要进行定期维护和更换。
紫外检测器中的灯管需要定期更换以保持灯管寿命和信号稳定性。
使用前应经过相应的校准和检验，确保其灵敏度和准确性。
第五，保持色谱仪的稳定电源和恒温条件。
正常使用高效液相色谱仪需要稳定的电源和恒温条件。
要确保仪器的电源质量稳定，并设置适当的温度控制系统，保持恒定的温度条件。
定期进行整机维护和保养。
尽量按照仪器制造商的要求进行整机维护，包括更换液泵、换向阀、微量泵等易损件，进行系统压力和流量的校准等。
定期对主要部件进行保养和清洁，确保仪器的正常运行和使用寿命。
高效液相色谱仪的保养与维护是确保其正常运行和延长使用寿命的重要措施。
定期进行各部件的清洁、修理和更换，保持恒定的电源和温度条件，定期进行整机维护等，都能有效提高仪器的稳定性和分析效果，为科研工作者提供准确可靠的实验数据。
浅谈高效液相色谱仪的保养与维护
浅谈高效液相色谱仪的保养与维护高效液相色谱仪（High Performance Liquid Chromatography, HPLC）是一种分析仪器，广泛应用于化学、生物、医药、环境等领域。
为了保证仪器的正常运行和准确分析结果，对HPLC仪器进行定期的保养和维护是非常重要的。
本文将从以下几个方面进行讨论：清洁、校准、替换零部件、处理故障等。
首先是清洁的问题。
在使用过程中，样品和溶剂的残留会堵塞柱路、检测器等部件，影响分析结果。
应定期对仪器进行清洁。
一般来说，每天使用完毕后要清洗柱路，以去除残留物；每周应当清洗检测器；每月要进行一次全面的清洁，包括仪器表面和连接部件。
还要定期更换管道和密封件，防止漏气和交叉污染。
其次是校准的问题。
HPLC仪器在使用过程中需要进行校准，以保证分析结果的准确性。
校准包括流速的校准、检测器的波长校准、标准品的浓度校准等。
流速的校准一般通过称重法或比色法进行，检测器的波长校准则需要使用标准样品进行。
还需要定期维护和校准柱温控制系统，保证柱温的稳定性和准确性。
接着是零部件的替换。
HPLC仪器中的一些关键部件，如针头、柱塞、承载阀等，需要定期检查和更换。
针头是进样系统中的核心部件，容易受到污染和磨损，应定期更换，以保证准确的进样量；柱塞则需要根据使用情况定期更换，避免柱塞失灵导致的问题；承载阀是控制流动方向的关键部件，需要检查和更换密封圈，以保证系统的密封性。
最后是处理故障的问题。
在使用HPLC仪器过程中，可能会遇到一些故障。
一般的故障有柱塞失灵、进样量不稳定、峰形不对称等。
当遇到故障时，首先要查明故障的原因，有针对性地进行排查和处理。
对于一些常见的故障，可以通过更换零部件、调整操作参数等方式进行解决。
如果遇到复杂的故障，建议联系仪器厂家的售后服务进行维修。
对HPLC仪器进行定期的保养和维护非常重要，可以保证仪器的正常运行和分析结果的准确性。
在进行保养和维护时，要注意清洁、校准、替换零部件、处理故障等方面的工作，以提高仪器的使用寿命和分析效果。
高效液相色谱仪安全操作及保养规程
高效液相色谱仪安全操作及保养规程前言高效液相色谱仪（HPLC）是一种用于化学分析和检测的重要工具。
为了确保高效液相色谱仪的安全运行和最佳性能，需要遵守一系列的安全操作和保养规程。
本文档提供了详细的操作和保养步骤，以协助用户正确地使用和保护高效液相色谱仪。
安全操作规程操作前1.确保操作人员已经接受了高效液相色谱仪的操作培训并掌握了正确的操作方法。
2.在操作前检查仪器的电源是否正常，仪器的机械结构是否稳定，是否有明显损坏或松动的部件。
3.确保试剂和溶剂的选择和准备符合分析要求，并遵守相关安全规程，如使用防护手套和护目镜。
4.加载样品前必须确定样品的性质和浓度，并根据需要适当稀释和过滤。
操作时1.操作人员应当始终注意安全。
在操作过程中避免直接接触样品和溶剂，避免口误和吞咽样品或溶剂。
2.操作过程中，若发现异常状况，如机器停滞或跑偏、压力急剧增高等，应立即停止操作并检查仪器或相关部件。
3.调整某些参数时，如流速、温度、压力等，应尽量保持小幅度调整，避免快速快速调整。
4.操作结束后，必须关闭仪器并注销相关操作，清理工作区域和操作台面，清洗使用的管道、器皿和附件，并将物品归位。
操作恢复1.若长时间未使用高效液相色谱仪，请在使用前仔细检查机器各部位是否存在异常。
2.重新启动仪器时，请按照操作手册上的步骤重新进行仪器的初始化和调试。
废物处理高效液相色谱仪所使用的溶剂和其他化学废物，必须按照当地的环保规定进行处理和处置。
在处理前应该咨询相关专业人员。
保养规程日常检查和保养1.每天开始操作前，检查仪器的所有零部件是否齐全，零部件是否完整，清洁状态如何。
2.操作后，每天对样品室、管路等部位进行清洁，确保无污物堆积和管路没有堵塞现象。
3.每周对色谱柱进行洗涤和清洁，可以使用去离子水和乙醇为主要清洗溶剂，以确保柱子的性能和使用寿命。
4.定期对机械结构和电子部件进行检查和保养，保证设备运行的稳定性。
液路检查和保养1.定期检查操作中常温箱的工作状态和温度。
浅谈高效液相色谱仪的保养与维护
浅谈高效液相色谱仪的保养与维护高效液相色谱仪是一种常用的分析仪器，在科研实验和工业生产中都有广泛的应用。
为了保证仪器的正常运行和数据的准确性，必须对高效液相色谱仪进行定期的保养和维护。
本文将从日常保养、仪器维护和故障排除等方面对高效液相色谱仪的保养与维护进行浅谈。
一、日常保养1. 清洗进样口：进样口是高效液相色谱仪中最容易受到污染的部件之一。
在每次使用完毕后，应用纯水进行适当的清洗，以防止残留物的积累影响仪器的使用寿命。
2. 清洗流动相管路：流动相是高效液相色谱仪的核心组成部分之一，其管路中的积聚物可能导致流动相的流动受阻、流动相质量下降等问题。
定期对流动相管路进行清洗是十分必要的。
一般可以使用甲酸、乙酸或无机酸等进行清洗，然后用纯水反复冲洗，最后用流动相进行冲洗，确保完全清洗干净。
3. 更换柱芯：柱芯是高效液相色谱仪中最易损坏的部件之一，一旦柱芯损坏或堵塞，都会导致分离效果下降、峰形不良等问题。
定期更换柱芯是保证分析结果准确的关键。
一般情况下，柱芯的使用寿命为100～400次，具体情况视样品性质和柱芯类型而定。
二、仪器维护1. 检查液路连接：高效液相色谱仪中的液路连接是保证仪器正常运行的关键。
定期检查液路连接是否紧固，确保没有泄露现象。
若发现泄露，应及时修复或更换相关部件。
2. 校准仪器：高效液相色谱仪的准确性和稳定性是保证分析结果准确的重要因素。
在使用高效液相色谱仪之前，应对仪器进行校准。
一般可以使用标准样品进行校准，并根据校准结果进行相应的调整。
3. 检查电源和供液系统：电源和供液系统是高效液相色谱仪正常运行的基础。
定期检查电源和供液系统是否正常运行，确保电源稳定、供液顺畅。
三、故障排除1. 泵压不稳：高效液相色谱仪中的泵压是保证流动相流动的关键因素，若泵压不稳定，会导致流动相流速波动、峰形不良等问题。
可能的原因包括：流动相泵密封件老化、流动相泵进水等。
解决方法：更换密封件、清洗泵柱、检查进样口阀门等。
保养维护高效液相色谱仪的要点
保养维护高效液相色谱仪的要点高效液相色谱仪（High-performance liquid chromatography，HPLC）是一种常用的分离和定量分析仪器。
为了保证其正常运行和延长使用寿命，需要进行定期的保养和维护。
下面是保养维护高效液相色谱仪的主要要点：1.保持色谱仪周围环境清洁干燥：色谱仪应该放置在无尘、无水、无振动、无干扰的环境下。
养成定期清理仪器外壳和工作台面的习惯，防止灰尘和异物进入仪器内部。
2.定期检查和更换耗材：液相色谱柱是色谱仪的核心部件，需要定期检查柱子的状况，包括柱液的流量、背压、峰形等参数。
当出现异常时，需要及时检查和更换柱子。
此外，溶剂瓶、垫片、接头和密封件等耗材也需要定期检查和更换。
3.保持良好的进样系统：进样系统是色谱仪样品进入柱子的关键部件。
需要注意致样器、进样针和进样管的清洁和灵敏度。
定期检查进样系统的各个部件，保证样品进入柱子的准确性和稳定性。
4.注意溶剂和流速的选择：溶剂和流速的选择对色谱分离的质量和分析结果有很大的影响。
应该选择优质的溶剂，在使用过程中定期更换，并注意保持合理的流速。
在使用有机溶剂时，要避免过高浓度的有机溶剂对仪器造成损害。
5.定期校准和质控：定期校准色谱仪可以保证分析结果的准确性和可靠性。
常见的校准包括柱液流量校准、波长和检测灵敏度的校准等。
此外，在样品分析过程中应该加入合适的质控标准品，并定期检查质控品的回收率和重复性。
6.注意样品的准备和处理：样品的准备和处理对HPLC分析结果有直接影响。
样品准备过程中应注意去除杂质和颗粒，避免对色谱柱和检测器造成污染或损坏。
对有机样品，要避免过高浓度的有机溶剂对进样系统造成损害。
7.定期维护仪器：除了日常保养，还应定期对仪器进行维护和检修。
定期检查和更换仪器中的各种装置、阀门、泵、检测器等关键部件。
根据仪器厂家的推荐，进行润滑和清洗等维护工作，保持仪器的正常运行。
8.进行严格的记录和文档管理：在使用和维护过程中应该做好记录和文档管理。
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高效液相色谱仪的管理与维护1引言高精度的输液泵，应用广泛的色谱分离柱，低噪音、高灵敏度的各种检测器以及功能强大的数据处理软件系统的出现，都推动了液相色谱技术的迅猛发展。
液相色谱仪正以它分辨率高、分析速度快和应用广泛的优点倍受仪器分析工作者的青睐，广泛地应用于生物医药研究、环境监测和食品检测等领域。
我们在应用先进的HPLC技术进行各种科研工作中，为保证分析结果的科学性和准确性，必须重视和加强对液相色谱仪的管理和维护。
只有良好规范的管理(GLp)，才能使仪器处于最佳工作状态，保证各项分析工作顺利完成，得出的实验数据才最真实可靠。
我们希望通过本文的技术交流，能使广大液相色谱工作者不仅掌握液相色谱技术，还能管理和维护好液相色谱仪。
2 液相色谱仪流路泵系统的管理与维护液相色谱仪的流路系统主要是由输液泵和连接管道组成。
输液泵的主要作用是把流动相和样品带人色谱柱中，使样品在色谱柱固定相和流动相之间作用并实现分离。
因此，正确配制流动相，维护好泵体和连接管路，对保证输液泵的流量精度和保留时间(tR)的重复性十分重要。
2.1流动相的配制和准备在高效液相色谱分析中，正相色谱以已烷作为流动相的主体，二氯甲烷、氯仿、乙醚作为改性剂;反相色谱以水作为主体，以甲醇、乙睛、四氢吠喃作为改性剂。
HPLC分析均应使用HPLC级纯度的溶剂，AR级的溶剂可能会由于杂质的存在而出现鬼峰。
正相色谱分析中使用的己烷、二氯甲烷、氯仿、乙醚中经常含有微量的水分，这会改变液固色谱柱的分离性能，使用前应用球形分子筛柱脱去水分。
反相色谱分析中使用的甲醇、乙睛、四氢吠喃，不必脱除微量水，但甲醇、乙睛等使用前最好经硅胶柱净化，去除具有紫外吸收的杂质。
要保证配制流动相用水的纯度足够高。
由于去离子水通常含有一些有机物，所以不适合用于HPLc分析用，最好使用超纯水(电阻率18Mfl.cm)。
如果条件有限，可将去离子水再次蒸馏，现用现蒸，保持新鲜，还能脱去CO:，使用效果也不错。
有些分析需要用到缓冲盐的流动相，配制时盐试剂要用AR级以上、没有污染、过期;现用现配，不要储存时间过长，避免pH值发生变化和成分分解，影响色谱分离的效果。
缓冲盐的流动相最好能在实验室自己配制，商品化的流动相可能会添加有硫代硫酸钠稳定剂，会影响缓冲液的光学和色谱性能。
无论是有机水溶液还是缓冲盐溶液的流动相，配好后都要通过0.45卜m滤膜过滤后再上机使用，这样能够有效防止由于微粒的存在使流路管道堵塞。
过滤后应把溶剂放在密闭容器中，以防止被重新污染。
过滤后的溶液既可用于色谱分析，也可用于清洗诸如泵头、柱塞杆、单向阀和密封圈等仪器部件，保持输液泵的性能良好。
所有的流动相在进人HPLC系统之前都应该首先脱气(即使仪器上有在线脱气)，因为没有脱气的流动相进人到高压系统后·，存在的气泡会导致系统的流速和压力不稳定，出现鬼峰等间题。
从溶液中排除气泡的方法主要有:真空脱气、氦气脱气和超声波脱气实际工作中真空抽滤的方法很有效，它既能脱气又能过滤，但必须在上机前完成。
在线连续脱气可以防止气体随温度的变化重新溶解在溶剂中。
1流动相一般不要使用强酸或强碱溶液。
因为pH值过高或过低会损坏输液泵中的密封圈和柱塞杆，除非流路需要钝化(用Zm心L的硝酸溶液)，也应用后立即用纯水冲净。
在使用含水较高的流动相时，应注意不同色谱柱使用方面的限制，因为传统的烷基键合固定相在有机溶剂含量低于5%的流动相中容易发生碳链断裂一些新型键合固定相可以在纯水为流动相的条件下使用。
2.2系统管路和连接根据承受压力的大小和流动相、样品性质的差异，液相色谱仪需采用不同材质的管路，常有不锈钢管和聚四氟已烯管。
管路材质选择不当将导致谱带展宽，甚至引起样品变性，直接影响到分析结果。
不锈钢管耐腐蚀，一般用于有高压的部分，即连接从泵出口到检测器人口段处，使用前应先经甲醇*水*硝酸溶液处理;塑料聚和物管柔韧性好，化学惰性强，多用于从储液器到泵、检测器出口和泄液阀出口，使用前应先用甲醇冲洗即可。
另外，流路管线应保持通畅，不要存在硬性弯曲部分。
理想的HPLC系统应是死体积最小、密封性好不漏液。
为减少死体积，降低柱外效应(会使色谱峰展宽)，从进样器到柱及柱到检测器之间，应尽可能采用较短且较细内径的连接管。
此外，采用较大内径、较长的色谱柱时，柱内峰展宽较大。
对于其它位置连接管的长度和直径要求不十分严格，只要在换溶剂时达到快速、干净的目的即可。
管路选择的基本原则为有样品通过的管路内径要细，而排放用的管路可以稍粗。
3 色谱分离柱的使用与维护色谱柱是高效液相色谱仪实现分离过程的核心部件，使用和维护好色谱柱是保持柱效、延长柱寿命的重要措施。
色谱分析中具备稳定高效的色谱柱和固定相是建立适合范围广、重现性理想的分析方法的基本保证。
色谱柱在使用过程中常出现的问题主要涉及到:色谱柱的寿命、保留时间与分离度的重现性色谱峰脱尾等方面。
3.1色谱柱的使用寿命色谱柱使用过程中，会由于各种原因导致分离失败或色谱柱失效，主要表现有:色谱柱反压增高、峰脱尾、塔板数下降、保留值降低等。
造成这些问题的原因主要有柱滤板问题、强保留组份影响和化学影响等，下面将分别讨论:3，1.，色谱柱筛板问题及对策色谱柱人口筛板堵塞是色谱柱最常见的问题之一，筛板堵塞会导致柱压升高，色谱峰脱尾、塔板数降低。
注射样品中含有微粒杂质，最有可能堵塞色谱柱人口，降低柱寿命，故要在注样前，将样品过滤或离心;进样器与泵密封垫的磨损也会带来微粒，故可在进样阀与色谱柱之间用在线过滤器，常可避免色谱柱滤板堵塞问题。
当筛板部分堵塞或进口处填料塌陷形成异常峰形时，可用强溶剂反冲色谱柱(低速)。
如不见效，则需更换筛板，或重新填补填料后更换筛板强吸附性的样品组分吸附在柱头填料上，能严重地缩短色谱柱寿命，在分析生物体液时尤为突出。
这时，可在色谱柱加一保护柱，能够有效减少强吸附组分的污染。
保护柱(预柱)是内装填料与分离柱性质相近的短柱，接在分离柱之前，可代替流路过滤器。
保护柱的作用是吸附强保留组分，收集和阻塞化学垃圾进人分离柱，这些垃圾如果直接进人分离柱会逐渐堆积在柱头，最终降低柱效能。
保护柱是消耗品，如分析血浆样品，一般分析50个样品后需更换新柱芯。
另外，每次分析结束后可用强溶剂冲洗分离柱(应卸下保护柱)，以除去可能吸附在分离柱柱头的污物，有效延长色谱柱的使用寿命。
在分离过程中色谱柱固定相的流失会显著降低柱的使用寿命，应避免使用对固定相侵蚀性强的固定/流动相组合。
短链硅烷基基团反相柱稳定性最差在低pH条件下可很快流失有机相，而长链烷基反相柱(C18、CS)较稳定。
我们应合理选择分离柱。
选择色谱分离柱主要根据两点，一是根据待测组分的分子量的大小，二是根据流动相条件，包括pH值、离子强度和溶剂极性等。
完全经化的硅胶基质的键合相柱，其表面的硅经基分布均匀单一，稳定性好，通常要求流动相pH值在3一7之间，极端pH值(<2或>8)的流动相会溶解硅胶，使键合相流失。
而目前利用先进的杂化颗粒技术研制的高纯硅胶颗粒填料(如Waters公司的XTer-ra色谱柱)，集硅胶和多孔聚合物填料的优点为一体使有机硅烷单元取代了相当一部分占据颗粒内部和表面位置的硅经基，使这种新型填料具有分辨率高稳定性强、pH范围宽(1一12)的优势，其性能突破了传统高效液相色谱柱的极限。
所以一定要根据分析的对象、流动相的条件选择合适的分离柱，茫然时可向公司的技术人员咨询。
3.2保留时间与色谱柱选择性的关系由于色谱柱不同硅胶基质的物理化学性质存在差异，如比表面积、孔径、纯度等，以及键合相存在交联与非交联、密度和封尾程度的差异，会使官能团相同(C18、cs)，键合相不同的色谱柱的保留值发生变化。
硅胶基质表面积增加，则有机固定相的量也增加，使保留值提高;非交联型键合固定相色谱柱的重现性好于交联型键合固定相色谱柱;致密键合填料比低硅烷浓度键合相的重现性好，也更稳定;硅烷化条件的不同也会导致不同品牌键合相之间保留行为的不同。
3.3色谱分离条件与保留值的关系在实际分析过程中，除了色谱柱不重复带来的问题外，流动相、流速、进样量、温度等因素均会带来色谱柱分离性能的差异。
如缓冲液的选择和配制不正确，导致保留值重现性不好，流速的变化、基线漂移、柱反压波动大，对色谱柱的性能均有影响。
进样量过大能引起柱超载，使峰的保留时间降低，一般内径约4.6mm色谱柱的进样量为ro一50林9。
当使用自动进样时，应保持环境温度的恒定，避免柱温的波动，引起保留时间的不稳定。
色谱柱在使用过程中，保留时间和分离度会随使用时间的延长而逐渐降低，可通过调整流动相的溶剂强度恢复分离。
3.4谱峰脱尾及处理办法色谱分析中经常见到色谱峰脱尾现象，特别是用过的柱子，其原因主要是:柱效下降、筛板堵塞、床体塌陷、柱头污染、进样超载、流动相不匹配、柱外效应等。
为防止柱头堵塞污染，使用中最好加保护柱，如果柱头被污染，可用强溶剂反冲色谱柱，会恢复一定的柱效。
样品最好用流动相稀释，防止谱峰变形、样品沉淀和大溶剂峰。
与高效液相色谱仪有关的柱外效应，如:流路的管线过长、检测器流通池的体积过大，也会使峰性脱尾，应尽量选择细内径的短连接管、小体积检测池。
另外，流动相中加人三乙胺等改善剂可消除流动相，固定相与样品之间的不匹配，改善峰型。
3.5日常工作中怎样维护好色谱分离柱1)及时冲洗分离柱。
每次分析工作结束时，先用水冲洗缓冲盐，然后后要过度到用强溶剂冲洗柱子，如:可用色谱纯甲醇、乙腊冲洗反相Cl:柱，目的是冲去吸附在柱上的强保留组分。
如果用甲醇/水为流动相也应这样冲洗柱子，在一定程度上可恢复柱效;平时不做分析时也要定期冲洗和再生柱子。
2)做好样品纯化，最大限度减少柱的污染。
我们在多年的分析工作中发现，凡是样品纯化的越干净，分离柱的寿命就越长;反之，只是提取没有纯化的样品，分离柱柱效下降较快。
建立一个理想的色谱分析方法应该有一套有效的样品前处理方法，特别是在分析血浆和尿液样品时，要特别注意样品的提取与纯化，尽量使处理过的样品中杂质(如大分子蛋白、有机物等)降到最低，保护柱头和柱子。
33)提取纯化好的样品最好用流动相来溶解，一方面减少色谱图中的溶剂峰干扰，另一方面也是检查样品在流动相中的溶解性，如果样品进样后在流动相中沉淀，会堵塞进样器和柱头，甚至样品分解，出现怪峰。
如果出现样品与流动相不溶要设法改变溶解条件，如更换样品溶剂，或改进处理样品的方法，或过滤，去除不溶性物质。
4 几种检测器的管理与维护作为液相色谱仪的三大关键部件(输液泵、色谱柱、检测器)之一的检测器，主要用于监测经色谱柱分离后的组分浓度的变化，将样品组成和含量变化转化为可供检测的信号，完成定性、定量分析。
常用的检测器主要有紫外吸收检测器(UVD)、荧光检测器(FLD)和电化学检测器等。