显色培养基在微生物检测中的优势
B群链球菌显色培养基性能评价
B群链球菌显色培养基性能评价王晓娜，丛桂敏，曹作伟（沈阳市妇婴医院检验科，辽宁沈阳110011）摘要：目的评价B群链球菌（group B Streptococcus，GBS）显色培养基在孕产妇围产期GBS筛查中的敏感性、特异性和选择性能。
方法选取2019年1月至2019年6月在本院产科门诊就诊的35～37周孕妇阴道拭子标本1500例，已知GBS菌株10例，采用三区划线直接接种于血琼脂培养基（bood agar plate，BAP）和GBS显色培养基（chromogenic medium chromID Strepto B agar，STRB），记录鉴定结果。
比较直接接种血琼脂培养基和显色培养基筛查GBS的敏感性、特异性及选择性能。
结果在BAP和STRB上接种的已知10例GBS菌株全部检出，检出率为100.0%。
孕产妇标本共筛查出125例GBS，阳性率为8.3%（125/1500）。
其中培养24h后，BAP与STRB阳性率分别为6.2%（94/1500）和8.1%（122/1500）；培养48h后，BAP与STRB阳性率均为8.3%（125/1500），高于24h阳性率。
STRB筛查GBS敏感性为97.60%，特异性为99.35%。
STRB与BAP筛查GBS阳性率比较差异有统计学意义（c2=3.911，P＜0.05）。
BAP上接种24h及48h后，分别有32.3%及31.8%的非目标菌群被完全抑制。
STRB上接种24h及48h后，分别有72.6%及70.9%的非目标菌群被完全抑制。
孵育24h后，BAP与STRB非目标菌群生长密度比较差异有统计学意义（c2=32.684，P＜0.05）。
结论B群链球菌显色培养基对于临床GBS筛查有良好的敏感性和特异性，可较好的抑制非目标菌群，选择性能良好，结果易于判断，与直接使用普通血琼脂培养基相比可降低漏检率，值得临床推广运用。
关键词：B群链球菌；显色培养基；性能评价Performance evaluation of colour medium for group BStreptococcusWANG Xiaona,CONG Guimin,CAO Zuowei(Department of Clinical Laboratory,Shenyang Women and Children Hospital,Shenyang,Liaoning,110011,China) Abstract:Objective To evaluate the sensitivity,specificity and selectivity of group B Streptococcus(GBS)colour medium for screening GBS during perinatal period.Methods1500vaginal swab specimens were collected from late pregnant women and10GBS strains were selected.The three zoning lines were directly inoculated into blood agar plate(BAP)and GBS chromogenic medium chromID Strepto B agar(STRB)to record the identification results.To compare the sensitivity,specificity and selectivity of GBS screening by direct inoculation of blood agar medium and chromo-genic medium.Results All the10cases known GBS strains inoculated on BAP and STRB were detected,and the detection rate was100.0%.125 cases of GBS were screened out from maternal specimens,the positive rate was8.3%(125/1500).After24h of culture,the positive rates of BAP and STRB were6.2%(94/1500)and8.1%(122/1500),respectively.The positive rates of BAP and STRB were8.3%(125/1500)after48h of culture, which was higher than that of24h.The sensitivity and specificity of STRB screening for GBS were97.60%and99.35%.There was significant differ-ence in GBS positive rate between STRB and BAP screening(c2=3.911,P＜0.05).After24hours and48hours of inoculation,32.3%and31.8%of non-target bacteria were completely inhibited,respectively.After24hours and48hours of STRB inoculation,72.6%and70.9%of non-target bacte-ria were completely inhibited,respectively.After24hours of incubation,the growth densities of BAP and STRB non-target flora were significantly difference(c2=32.684,P＜0.05).Conclusion The colour medium of group B Streptococcus has good sensitivity and specificity for clinical GBS screening.It can inhibit non-target bacteria better and has good selectivity.The results are easy to pared with the normal blood agar medi-um,it can reduce the rate of missed detection and it is worthly of application and promotion in the work.Key words:Group B Streptococcus;Chromogenic Medium;Performance EvaluationB群链球菌（group B streptococcus，GBS）又称无乳链球菌，可引起新生儿败血症、脑膜炎，甚至导致新生儿死亡[1]。
CHROMager念珠菌显色培养基在深部感染念珠菌检测中的应用
贵 阳 医 学 院 学 报
Ｊ ＯＵＲＮＡＬ ＯＦ ＧＵＩ Ｙ ５ Ｉ３ ． ２ ０． ０ ０１ １
Ｃ Ｒ Ｍａｅ 念 珠 茵 显 色 培 养 基 在 深 部 感 染 念 珠 茵 检 Ｈ Ｏ ｇｒ 测 中 的应 用 出
罗振 华 ， 王 和
（ 贵阳医学院 微生物学教研室 ，贵州 贵阳 ５００） ５ ０４
［ 摘 要 ］目的： 评价 Ｃ Ｒ Ｍ ｇｒ Ｈ Ｏ ａ 念珠菌显色培养基在念珠菌深部感染标本检测中的应用价值。方法： ｅ 用
Ｃ Ｒ Ｍａｅ 念珠菌显色培养基分离和鉴定来源于贵州省内不 同地 区２ ４例深部感染患者的真菌标本 ， Ｈ Ｏ ｇｒ ２ 采用 Ｐ Ｒ Ｃ 扩增和 Ｄ Ａ序列 分析方法检测分离真菌 ｒ Ｎ Ｎ Ｄ Ａ的 ＩＳ Ｔ 序列 。结果 ： ２ ２４例 深部感染患者标本 共分离念珠菌 ２ ３ ４ 株， 显色培养基鉴定 ｌ ６例标本为｝ 昆合念珠菌感染 ， ． ％， 占７ １ 其中 １５株白假丝酵母菌 ６ ．％ ， ５ ３ ８ 居分离率首位 ； 显
ｍｅｈ ｄ ｗｉｈ ｔ ｏ ｅ ｏ ｅ ｅ ａ ａｙ ｉ ｔｏ ｓ９７． ｔ ｏ ｔ ｈ ｓ ｆｇ ｎ ｎ ｌｓｓｍｅｈ ｄ ｗａ ７％ ．Ｃｏ ｌ ｉ ｎ ｎｃｕｓｏ ｓ：Ｃ．ａ ｂｃ ｎ Ｓｃ ｍｅ ｉ ｎ ｄ ｌ ｉａ ｓｉ ｏ ｎ Ｃａ ｄｉ ａ ｃ ｕ ｅ ｅ ｐ ｉ ｆｃｉ ｎ ｉ ｉｈ ｕ．ＣＣＭ ｕ ｔ ｒ Ｓ ａ ｑ ｉｋ ａ ｄ ｃ ｎ ｅ ｉｎ ｔｏ ｏ ｄ ｎ ｉ ｃ ｔｏ ｆ ａ ｓ ｄ ｄ ｅ ｎ ｅ ｔ ｎ Ｇｕ ｚ ｏ ｏ ｃ ｌｕ ｅ ｉ ｕ ｃ ｎ ｏ ｖ ｎ ｅ ｔｍｅｈ ｄ ｆｒ ｉ ｅ ｔｆ ａｉ ｎ ｏ ｉ
ｉｃｕ ｉｇ１ ５ Ｃ ｌｉａ ｓ（ ３ ８ ）ｗ ｒ ｓｌｔｄ ｆｏ ｔｅ２ ４ ｓｍｐｅ ｉ ＣＭ．Ｓｘｅ ｎ ｓｍｐｅ ｎ ｌｄｎ ５ ．ａｂｃ ｎ ６ ． ％ ｅｅ ｉｏａｅ ｍ ｈ ２ ａ ｌｓｗ ｔ Ｃ ｒ ｈ ｉｔｅ ａ ｌｓ （ ． ％ ） ｗ ｒ ｒｖ ｄ ｍｕｔｆ ｎ ｉｉｆｃｉｎ Ｔ ｅ ｃ ｉｃｄ ｎ ｅ ｒ ｔ ｏ ｄ ｎｉ ｃ ｔ ｎ ｒｓ ｌ ｆＣＣ ７ １ ｅｅ ｐｏ ｅ ｌ—ｕ ｇ ｎｅ ｔ ． ｈ ｏｎ ｉｅ ｃ ａｅ ｆ ｉｅ ｔｉａｉ ｅ ｕｔ ｏ Ｍ ｉ ｏ ｆ ｏ ｓ
微生物化验方法
微生物化验方法
微生物化验的方法有很多，以下为您推荐：
１．琼脂平板培养法：因培养基不同，琼脂平板法分为选择性培养基检测法和显色培养基检测法。
选择性培养基是在培养基中加入选择性抑制剂来抑制非目标微生物生长；显色培养基是在培养基中加入细菌特异性酶的显色底物，以菌落颜色区分目的菌落与非目的菌落。
２．显微镜镜检法：将待测样品中的微生物富集后，于油镜下直接计数。
显微镜镜检法通常与琼脂平板培养法结合使用，通过琼脂平板培养法对菌落进行定性分析，再用显微镜进行定量计数。
３．微生物测试片检测技术：一般情况下，微生物测试片由印有网格的聚丙烯薄膜和覆盖有培养基和显色物质的聚乙烯薄膜组成。
待测样品经过处理后可直接接种在微生物测试片上，然后放置在适宜的温度下培养——使固定在测试片上的显色物质与待检微生物生长产生的特异性酶发生显色反应，形成有颜色的菌落，通过对这些菌落进行计数便可实现检测。
《显色培养基》课件
根据颜色变化判断细菌的种类 或特性，如耐药性等。
结果记录
详细记录实验结果，为后续分 析提供数据支持。
结果分析与应用
结合实验结果，对细菌进行鉴 定、药敏试验等后续分析，为
临床诊断和治疗提供依据。
05
显色培养基的发展趋势与展
望
新型显色培养基的研发
新型显色培养基的研发是显色培 养基领域的重要发展方向，旨在 提高培养基的灵敏度、特异性和
显色培养基的种类
根据用途分类
可分为选择性显色培养基和鉴别性显色培养基。选择性显色培养基主要用于分 离和鉴别某一类微生物，而鉴别性显色培养基则可对多种微生物进行鉴别。
根据指示剂种类分类
可分为酚红显色培养基、美蓝显色培养基、结晶紫显色培养基等。不同指示剂 可与不同微生物发生特异性反应，从而呈现不同颜色。
04
显色培养基的使用方法
操作步骤
制备培养基
按照说明书比例混合显色培养 基成分，加热溶解后冷却至室 温。
培养
将培养皿放入恒温培养箱中， 在适宜温度下培养一定时间。
准备工具与材料
显色培养基、接种环、酒精灯 、培养皿、手套等。
接种
使用接种环在菌落边缘取适量 细菌，划线接种于显色培养基 上。
观察结果
观察培养皿上细菌菌落的颜色 变化。
03
常见显色培养基介绍
乳糖发酵管
总结词
用于鉴别乳糖发酵的显色培养基。
详细描述
乳糖发酵管是一种常用的显色培养基，用于鉴别乳糖发酵的细菌。通过观察培养 基上菌落的颜色变化，可以初步判断细菌是否能够发酵乳糖。
伊红美蓝琼脂
总结词
用于鉴别大肠杆菌的显色培养基。
详细描述
伊红美蓝琼脂是一种专门用于鉴别大肠杆菌的显色培养基。大肠杆菌在此培养基上生长时，菌落呈现深紫色，与 其他细菌的菌落颜色有明显区别。
微生物检验在临床上有哪些用途？
微生物检验在临床上有哪些用途？大家都知道，微生物具有分布广泛、生长繁殖能力强、种类繁多、易培养、易变异及代谢能力、适应能力强等特点，在临床疾病监测中也有着广泛的应用：一、常见的检测方法1、重量检测法重量检测法也就是通过称重的方式来进行，利用离心或过滤法测定。
一般情况下，干重是湿重的百分之十五左右，这种方式比较繁琐。
若是微生物为菌体，大部分都会采取这种方式，如活性干酵母这种，以微生物菌体为活性物质的饲料和肥料。
2、体积测量法体积测量法也就是平时所说的测菌丝浓度法，这种检测方法是通过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况，这种类型的检测方式比较简单、快捷、粗放，由于离心沉淀物中会夹杂各种固体营养物，在检测之前需要设定一致的处理条件，不然会导致结果有很大的偏差，该检测方式目前已成为大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。
二、临床应用1、重视显微镜检查对于留取标本进行革兰染色，一方面可以掌握标本质量以确定进行培养或重新留取标本;另一方面通过镜检对某些细菌可以作出初步分类。
对于脓性分泌物或穿刺液进行革兰染色镜检亦可作出大致分类或初步诊断。
对泌尿系男性尿道和女性分泌物涂片革兰染色镜检，查到白细胞内或外有革兰阴性双球菌，是诊断淋病的重要依据。
脑脊液墨汁染色检查新型隐球菌，对于临床诊断隐球菌性脑膜炎有重要价值。
痰、胸水涂片抗酸染色查抗酸杆菌，对于诊断肺结核有重要意义。
粪便球杆菌比例检查，对于肠道菌群失调的诊断有重要帮助。
粪便暗视野检测弧菌的运动情况，对于霍乱的诊断有意义。
2、用显色培养基对微生物快速鉴定在分离培养基中加入检测某些细菌特异性酶的底物（由产色基团和微生物代谢物如糖苷类，氨基酸或肽类两部分组成，通常为无色），在特异性酶作用下游离出产色基团并产生荧光或显示一定颜色，用紫外灯观察菌落产生的荧光或直接观察菌落颜色即可对细菌做出鉴定。
如CHRO真菌培养基:白色念珠菌（绿色），热带念珠菌（蓝色），克柔念珠菌（粉红色）。
显色培养基
4
显色培养基缺点
非目标菌的竞争作用，常会造成目标菌漏检和检测结果假阴 性 ——降低了显色培养基的灵敏性；
非目标菌也存在特异性酶反应造成检测结果的假阳性——降 低了显色培养基的特异性； 某种细菌不同血清型可能存在特异性酶反应的差异，结果在 显色培养基上出现不同颜色的菌落，还需要辅助观察或传统生 化试验才能对菌株作鉴定；
显色培养基是利用微生物具有种属特异性酶的特点，在培养基 中加入相应的显色酶底物，经微生物生长代谢产生酶水解底物 释放色原物质使培养物着色，从而进行目标微生物筛选鉴别。
2
显色酶底物的类型
荧光的显色底物(fluorogenic substrates)， 酶水解相应荧光底物后释放的荧光色原在一定波 长的紫外光照射下，使目标微生物的培养物呈现 荧光；
25
CHROMagar Listeria
单增李斯特菌- 蓝色菌落周围 有白色环 其它菌- 被抑制，或蓝色菌落 周围无白色环，或无色菌落
26
CHROMagar Vibrio
Vibrio parahaemolyticus – Mauve(- Turquoise-Blue （蓝绿色）
Vibrio alginolyticus - Colourless
Other bacterial colonies – inhibited or colourless
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CHROMagar E.coli
E.coli - blue
CHROMagar ECC
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Rambach Agar for the detection of Salmonella
用于大肠杆菌和大肠菌群的同 时快速鉴别和计数，18-24h可 初步判定结果
大肠杆菌 大肠菌群
显色培养基在蜡样芽孢杆菌与志贺氏菌快速检测中的应用
２实 际样 品检测 ．
分别达｝ ８ ％和１０ ） Ｕ７５ Ｏ ％ 克服了传统培养基受非目标菌干扰
大 的缺 点 准确 率 与检 出率 上与 国外产 品无 差 别 。 在
蜡样芽孢杆菌按照Ｇ ４８ 征求意见稿） Ｂ７ ９１ ４（ 中的检验程序
４ 食 安 导 ２ ８ ４ 品 全 刊 ０年月 １ ２
似， 苏云金芽孢杆 菌是主要干扰菌 ， 陆桥蜡样 芽孢杆菌显 在
实验方法
１显色 培养基的特异性试 验 ． 将 一 ０Ｃ 油保 存 的标准菌株 接种至脑 心浸液培养 基 ８ 。甘 中， ６ 。 ３ ±１ Ｃ培养 １ －２ ｈ ８ ４ 复苏 ， 分别挑 取复苏的新鲜 标准菌 菌液 ， 划线接种到制备好的陆桥蜡样芽孢 杆菌 显色平板 陆 桥志贺氏菌显色平板 Ｃ Ｒ Ｍａ ａ蜡样芽孢杆菌显色平板和 Ｈ Ｏ ｇｒ
实验结 果
１显色 培养基的特异性试验 结果 ．
性酶与相应显色底物反应使目标菌显色的新型培养基， 通过观 察平板上的菌落颜色可对菌种做出初步判断。 显色培养基作为
一
２株 标准菌株包括３ 蜡样芽孢杆菌 ｅ志贺氏菌 １ 株 ５ 其
余菌株 为实际检测中常见的干扰菌。 为陆桥显色培养基对 图１
革兰 氏阳性菌基本被抑制。 陆桥显色培养基与国外的产品相
比 对于２株标准菌的检测特 异性一致。 １ ２实 际样 ， 比较４ 种显色培养基对各自
目标 茵 的特 异 性 反 应 。
实际样 品检测结果见表１ 陆桥蜡样芽孢杆菌显色培养基 ，
和 陆桥志贺氏茵显色培养基对 目标茵的特异性较好 （ 准确率
广 其 中一些菌株极 易污染食品 、 空气和水等． 从而引起食物
中毒。 志贺氏菌又称痢疾杆菌， 引起一种以腹泻为主要症状 的
肉制品微生物检测技术综述
065食品检测近年来，随着食品安全问题的频发，人们对于食品的安全问题越来越关注。
所谓“病从口入”，食用有安全问题的食品将可能导致疾病的发生（食源性疾病），影响人们的身体健康。
食源性疾病通常是由于食用了食源性致病菌而引起的出现腹泻、头晕、恶心、神经性头疼等症状的疾病，严重者可导致患者死亡。
肉制品由于其本身营养价值高，富含蛋白质和脂肪，导致肉制品极易成为食源性致病菌生长繁殖的温床。
突发食源性疾病案例中，肉禽类制品引起的疾病大约为23%，其中有10%的肉制品和5%的禽制品会导致人们突发性死亡。
肉制品中的食源性致病菌主要有单核细胞增生性李斯特氏菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、志贺氏菌等，因此加大对肉制品的检测十分必要。
随着科技的不断发展，肉制品的各项检测技术不断改革、创新。
目前，微生物的检测技术主要有荧光定量PCR法、酶联免疫吸附法、显色培养基法、快速检测纸片法等。
本文选取其中重要的检测方法进行研究，以期为肉制品的检测技术提供一定的理论指导。
一、荧光定量PCR 法荧光定量PCR的原理是在PCR反应中加入荧光基团，通过观察累积的荧光信号来监测PCR反应的整个过程，然后通过标准曲线来分析未知模板的技术方法。
此方法具有准确度高、不易被污染、自动化程度高、灵敏度高与特异性好的特点，被广泛应用于检测各类传染性疾病的临床诊断和效果判断，禽流感、口蹄疫以及猪瘟等动物疫病病原菌和抗体，食源微生物、食品过敏源、转基因研究等领域。
南文龙等人利用荧光定量PCR法测量七类消毒剂对非洲猪瘟病毒的影响，为科学防控猪瘟病毒、客观评价分析消毒效果提供了一定的技术指导。
二、酶联免疫吸附法酶联免疫吸附法是在免疫酶技术上兴起的一项新兴检测技术，其原理是抗原或抗体与某种固向载体先结合肉制品微生物检测技术综述（需保持抗原或抗体的活性），然后让抗体或抗原和某种酶结合（保持活性），通过洗涤使抗原或抗体复合物与标本中受检物质形成一定的比例关系，最后再加入酶反应底物后，产生有色产物完成检测。
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微生物检测显色培养基在应用中的优势
显色培养基介绍：
随着微生物学检验技术的不断发展，近年来在新产品开发方面加大了投入，通过与科研单位的广泛合作，国际和国内研发出了显色培养基产品，显色干粉培养基是近年来发展起来的一种新型培养基。
在传统培养基制作基础上，添加了新型组合式特异性发色酶底物，当细菌生长代谢过程中产生的特异性酶分解特异性发色底物后，目标菌形成不同颜色的菌落，从而对目标菌得到快速的分离和鉴别，同时也可以进行计数。
该项技术是将现代化学合成技术、细菌代谢组学与目前尚不可替代的传统方法相结合应用于细菌检验领域的一项新技术。
与传统培养基相比，显色培养基克服了传统培养基在各种细菌分离、鉴别、计数等操作过程中比较复杂（需要有经验的技术人员）、敏感性低和特异性差的缺点。
显色培养基在检测细菌时，培养24小时通过观察菌落颜色即能用肉眼对细菌进行定性或定量分析，既缩短了检测时间，又免除了后续生化鉴定的过程，极大提高了工作效率。
常用的几个显色培养基如下：
1、念珠菌显色培养基
可替代传统的沙保罗培养基；肉眼观察菌落颜色即可鉴定白色、热带、克柔氏及光滑念珠菌；对确定混合感染更为有效；培养基的配置简单，煮沸即可，无须高压灭菌；
操作简便，划线接种，37ºC培养，36-48小时出结果；
是临床上诊断常见念珠菌感染的最好帮手。
2、沙门氏显色培养基
可替代传统的SS培养基；
肉眼观察菌落颜色，能初步鉴定包括伤寒杆菌、副伤寒杆菌在内的沙门氏菌，具有很高的特异性，可摒弃大量假阳性，减少漏检；
对确定混合感染更为有效；
培养基的配置简单，煮沸即可，无须高压灭菌；
操作简便，划线接种，37ºC培养，24小时出结果；
对暴发性沙门氏菌感染引起的食物中毒尤为适用。
3、金黄色葡萄球菌显色培养基
可替代传统的高盐甘露醇及血平板培养基，具有较高的特异性、灵敏度，可消除假阴性及假阳性；肉眼观察菌落颜色即可用于金葡菌的初步鉴定，在此培养基中添加妥布霉素或甲氧西林等抗生素，可筛选耐甲氧西林金葡菌（MRSA）；培养
基的配置简单，煮沸即可，无须高压灭菌；操作简便，划线接种，37ºC培养，24小时出结果；是临床检测、食品工业、化妆品工业的好帮手。
简便：相对于Baird-park培养基繁琐的准备工作添加RPF增补外，CHROMagar ™金黄色葡萄球菌显色培养基，把增补剂都混合到干粉培养基中，不需要添加任何试剂及药品。
快速：CHROMagar™金黄色葡萄球菌显色培养基大大缩减培养时间，只需24h培养即可观察结果，减轻工作强度。
（Baird-park培养基侧需要48h的观察培养）。
4、改良O157显色培养基
用于分离鉴别食品中的大肠杆菌O157
相比传统检测大肠杆菌的方法，利用山梨醇麦康凯琼脂培养基筛查，不仅需要经验丰富的专业技术人员检测，而且要从大量的菌群中挑选并区分出山梨醇阴性菌落，流程复杂繁琐，环境要求苛刻。
CHROMagar™O157显色培养基为您解决这一烦恼，利用先进的菌落显色技术（O157生长紫红色菌落，其他大肠杆菌生长紫红色菌落，其他大肠杆菌生长蓝色菌落），大大简化您的工作量。
CHROMagar™O157显色培养基具有高特异性&高敏感度的优点，24h内快速筛查诊断。
5、弧菌显色培养基
分离鉴别副溶血弧菌、创伤弧菌&霍乱弧菌，以上三种细菌和我们的生活息息相关。
误食腐烂变质的食物或被污染的海鲜、伤口没有及时处理创伤口被污染导致感染、因生活环境恶劣导致感染霍乱，都会严重影响人类健康，一般症状腹痛、呕吐、发热、腹泻、严重者会导致败血症、肌膜炎等，更严重者会导致死亡。
CHROMagar™弧菌显色培养基可以通过明显的颜色对比轻易的区分三种弧菌，结果清晰易读，而不像传统的TCBS培养基难以辨认。
6、尿道细菌显色培养基
将血平板和麦康凯两种培养基的特点合为一体；
肉眼观察菌落颜色可初步鉴定常见泌尿道感染细菌如大肠埃希氏菌、链球菌、肠球菌、克雷伯杆菌属、变形杆菌属、金葡菌、腐生葡萄球菌等，能识别混合感染标本中含有的不同细菌。
可直接用初筛选菌落进行药敏试验而不需传代培养；培养基的配置简单，煮沸即可，无须高压灭菌；
操作简便，划线接种，37ºC培养，24小时出结果；
是临床快速诊断泌尿道感染的好帮手。