草鱼爆发性出血病病因的研究
草鱼出血病的病因及防治
草鱼出血病的病因及防治1. 简介草鱼出血病是一种常见的草鱼疾病，其特征是鱼体表面出现出血斑点或瘀斑，严重时可导致鱼类死亡。
本文将重点探讨草鱼出血病的病因以及相应的防治方法。
2. 病因草鱼出血病的病因复杂，常见的病因包括以下几个方面：2.1 环境因素草鱼出血病的发生与水质环境密切相关。
以下环境因素可能引发草鱼出血病的发生：•水温过高或过低：水温过高会导致草鱼免疫力下降，易感染病原体；水温过低则破坏了草鱼体内各种酶的正常活性，导致病原体的侵染。
•水质污染：水质中存在的有害物质、重金属离子等对草鱼健康产生负面影响，降低了其免疫力。
•水体富营养化：水体中过多的氮、磷等营养物质，容易导致藻类过度繁殖，进一步消耗水中溶解氧，使草鱼缺氧，加重对病原体的感染。
2.2 饲养管理不当合理的饲养管理对预防草鱼出血病至关重要。
以下是一些常见的饲养管理不当的因素：•过度密养：过多的鱼只会导致水质污染，增加病原体传播的机会。
•饲料不合理：长期喂食营养不均衡的饲料，草鱼的免疫力会受到削弱。
•降温不当：在饲养过程中，如果突然降温或降温速度过快，会对草鱼的健康产生不良影响。
2.3 病原体感染引起草鱼出血病的主要病原体有细菌、寄生虫和病毒等。
常见的病原体包括：•Aeromonas hydrophila：是一种常见的致病菌，能够抑制草鱼免疫力，导致草鱼感染出血病。
•寄生虫：一些寄生虫如海洛兹虫、鳃虫等会在草鱼体内定植和繁殖，导致感染并破坏草鱼组织。
•病毒：禽痘病毒、红鲱病毒等病毒感染也会引起草鱼出血病。
3. 防治措施在防治草鱼出血病方面，可以采取以下策略：3.1 优化水质环境保持良好的水质环境对预防草鱼出血病至关重要。
以下是一些常见的优化水质环境的方法：•定期检测水质参数：包括水温、溶解氧、氨氮、亚硝酸盐等，务必保持水质参数在适宜范围内。
•加强水质管理：适时清除污物、定期换水、控制养殖密度等，以减少环境因素对草鱼健康的影响。
•使用水质修复剂：根据实际情况，合理使用硫酸亚铁、活性炭等水质修复剂，帮助改善水质。
草鱼出血病发病原因？草鱼出血病用什么药--好药？
草鱼出血病发病原因？草鱼出血病用什么药**好药？草鱼出血病发病缘由是什么？草鱼出血病是草鱼种饲养阶段危害**的传染性疾病，通常在水温25-30℃时发病，其症状表现为全身性组织器官充血。
是鱼种哺育阶段一种广泛流行、危害较大的病毒性鱼病，流行时节长、发病率高，简单造成大批草鱼鱼种的死亡。
草鱼出血病怎么治疗？用什么药**好药？草鱼出血病的流行特征1.危害对象从2.5-15厘米大小的草鱼都可发病，有时二足龄以上的大草鱼也患病。
特殊是100-300克一龄草鱼种发病尤为严峻。
本病发病率高，死亡率也高，可达70%-80%以上，往往造成大批或整体草鱼鱼种死亡。
青鱼也可感染。
经过多年的观看与实验，实践证实鲢、鳙、鲤鱼种，无论在鱼池内与草鱼鱼种混养，或在人工感染条件下，都未发觉患出血病的状况。
2.流行时节普通在6月下旬到9月底10月上旬仍有流行，长的可持续于囫囵鱼种哺育阶段，8月份为流行高峰时节。
3.环境条件水温在20-30℃时发生流行，**适流行水温为27-30℃;在浅水塘，高密度草鱼，单养池发病常为急性型，来势猛快，发病后2-3天内即浮现大批死亡，10天左右浮现死亡高峰，2-3周后，池中草鱼有部分死亡。
在稀养的大规格鱼种池或混养的池发病常为慢性型，病情进展缓和，天天死亡数量并不显然，但病程较长，常可持续到10月份。
此病如碰到恶劣天气，大多为急性型。
4.病史人工感染健康的草鱼，从感染到发病死亡，约需4-15天，普通是7-10天。
草鱼出血病的缘由1、草鱼鱼种的投放密度过大。
许多养殖户盲目追求产量和效益，任意加大投放密度。
因为投放密度过大，在养殖中后期，随着池塘鱼类负载量的加大以及饲料投喂量的增强，水质难以控制，简单老化、恶化。
因为水体环境不良，氨态氮、亚硝酸盐、硫化氢等有害物质含量升高，导致草鱼体质变弱，导致出血病的发生。
2、投喂的饲料不符合草鱼鱼种的养分需求。
从整体上看，一龄草鱼鱼种生长过程中对蛋白质、脂肪等的需求较普通其他鱼种低。
草鱼病毒性出血病治疗的方法
04
案例分析
治疗案例一：药物治疗的成功应用
总结词
药物治疗对于草鱼病毒性出血病具有很好 的效果，通过使用针对性强、副作用小的 药物，可以迅速控制病情，减少损失。
VS
详细描述
在进行药物治疗时，首先要对病鱼进行诊 断，确定病因和病情，然后选择针对性强 、副作用小的药物进行治疗。例如，可以 使用一些具有抗病毒、抗炎和抗过敏等作 用的药物，如阿昔洛韦、利巴韦林、地塞 米松等。同时，需要注意药物的用量和使 用方法，避免对病鱼造成过大的负担。
感谢您的观看
THANKS
治疗案例三：免疫治疗的成功应用
总结词
详细描述
免疫治疗是一种高效、持久的治疗方法，通 过使用疫苗、免疫增强剂等免疫制剂，可以 刺激病鱼产生特异性免疫反应，提高其抵抗 力。
在进行免疫治疗时，需要选择适当的疫苗、 免疫增强剂等免疫制剂，如草鱼病毒性出血 病疫苗、免疫球蛋白、干扰素等。通过注射 或口服这些免疫制剂，可以刺激病鱼产生特 异性免疫反应，提高其抵抗力，减少发病率 和死亡率。这种方法虽然成本较高，但具有
疾病症状
病鱼出现充血、出血症状，尤其是鳍部、口腔和腹部。 病鱼还会表现出游动缓慢、食欲减退、鳍条折断等症状。
疾病危害
病毒性出血病对草鱼的危害较大，感染后死亡率较高。
该疾病不仅对草鱼造成直接危害，还可能对整个水生生态系统构成威胁。
02
治疗方法
药物治疗
草鱼病毒性出血病是由病毒感染引起的疾病，因此使用抗病毒药物是治疗的关键 。
治疗案例二：生物治疗的成功应用
总结词
生物治疗是一种安全、环保的治疗方法， 通过使用益生菌、益生元等生物制剂，可 以增强病鱼的免疫力，促进其康复。
详细描述
草鱼出血病
病害学史
早在1953年，倪达书等就注意到具有出血症状的草鱼病鱼。1978年，中国科学院水生生物研究所第三研究室 的科研人员首先报道了草鱼出血病是一种病毒性鱼病。并初步认为其病原是一种疱疹病毒（Herpsvirus）。1983 年，陈燕新等用分离病毒的方法从病鱼组织中得到的滤液感染草鱼，获得典型的出血症状并能在单层细胞中传代 繁殖，才正式确定草鱼出血病是由病毒引起。1984年，中国科学院武汉病毒研究所和中国水产科学研究院长江水 产研究所草鱼出血病研究协作组在对草鱼出血病病毒进行分离和精细结构核酸特性研究之后，首次确定该病原为 草鱼呼肠孤病毒。1995年，病毒分类命名委员会对该病毒正式命名为草鱼呼肠孤病毒（Grass Carp Reovirus， 简称GCRV）。该病毒隶属呼肠孤病毒科、水生呼肠孤病毒属，是中国分离的第1种鱼类病毒。
针对草鱼出血病来讲，应秉承“有效预防，积极治疗”的基本原则，具体需要根据实际情况采取有效的预防 措施，特别是在用药的过程中一定要合理配比鱼药，有利于保障草鱼养殖事业健康发展。
谢谢观看
病原特征
草鱼出血病病原为草鱼呼肠孤病毒（Grass Carp Reovirus，简称GCRV），亦称草鱼出血病病毒，是呼肠孤 病毒科、水生呼肠孤病毒属的成员，是水生呼肠孤病毒属中唯一具有致病性的病毒。病毒粒子为正二十面体，无 囊膜，具有双层外壳，直径68～72纳米。病毒的基因组为双股RNA，分11个节段，并可分为大（L）、中（M）、 小（S）3组。基因组大小约15kb，在聚丙烯酰胺凝胶电泳中图谱分型（3:3:3:2或3:3:5）与水生呼肠孤病毒C群 的金体美鳊鱼病毒只有微小差异。
草鱼出血病主要危害草鱼，2厘米左右的鱼苗即可感染，以5～10厘米的幼鱼最严重，死亡率高达60～80%。 该病仅见于中国，它是中国最重要的鱼类病毒病，遍布中国所有养殖地区，尤以南方各省最为严重。
草鱼出血病及其疫苗研究进展
草鱼出血病及其疫苗研究进展作者：王强汪开毓来源：《南方农业·下旬》2014年第12期摘要草鱼（Grass carp）是我国淡水养殖的四大家鱼之一，养殖范围广，经济价值高。
但在草鱼养殖饲养过程中，易发生各种疾病，给草鱼养殖业带来巨大损失。
其中，草鱼出血病是影响草鱼养殖的重要疾病之一，其病原为草鱼呼肠孤病毒。
对于该病国内目前对其做了大量研究，化学药物难以达到治疗目的而免疫技术在该疾病的防治上取得了一定成就。
基于此，首先总结了近年来关于草鱼出血病的研究，着重阐述草鱼出血病的病原生物学特征以及流行病学相关情况；而后就国内目前草鱼出血病疫苗研究情况做一介绍并提出该病防治的新展望。
关键词草鱼出血病；草鱼呼肠孤病毒；流行病学；疫苗中图分类号：S941.41+1 文献标志码：A 文章编号：1673-890X（2014）12--4草鱼（Grass carp）属鲤形目，鲤科，雅罗鱼亚科，草鱼属。
一般喜居于水的中下层和近岸多水草区域，性活泼，游泳迅速，为典型的草食性鱼类。
因其生长迅速，饲料来源广，是中国淡水养殖的四大家鱼之一。
但是在草鱼饲养过程中易发生各种疾病，其中草鱼出血病是一种最为常见的草鱼疾病，这种疾病严重应先我国草鱼养殖业的发展[1]。
早在20世纪70年代我国就开始研究草鱼出血病，80年代发现草鱼出血病病源——病毒颗粒[2-3]，90年代初国际病毒分类委员会将草鱼出血病病源命名为草鱼呼肠孤病毒（Grass carp reovirus，GCRV）[4]。
草鱼出血病病毒主要侵染草鱼的内脏组织，而化学药物难以达到治疗目的，目前仍然没有找到一种效果良好的特效药。
但是，从免疫系统角度出发研究此病，能够在水产养殖疾病方面取得一些进展[5]。
随着生物制剂技术的发展，免疫接种疫苗能够有效地减少疾病的发生。
故探讨草鱼出血病流行病学特征以及草鱼出血病疫苗的研制情况对于草鱼出血病的预防，减少草鱼养殖业中的经济损失非常重要。
草鱼细菌性与病毒性出血病
•疾病概述•细菌性出血病•病毒性出血病•混合感染与治疗措施•预防与控制措施目•研究进展与展望录定义症状定义与症状流行病学030201临床观察显微镜检查实验室检测血清学检测诊断方法病原菌感染途径病原学水质恶化当水质恶化时，带菌的水源、污染物和饲料等均可成为传播途径，导致草鱼感染细菌性出血病。
鱼体抵抗力下降草鱼感染细菌性出血病的另一个重要因素是鱼体抵抗力下降。
这可能是由于饲料营养不全、养殖密度过高、环境恶化等因素导致的。
当鱼体抵抗力下降时，更容易受到病原菌的侵袭而引发疾病。
传播途径与感染方式防治方法改善水质定期更换水源、保持水质清洁是预防细菌性出血病的重要措施。
通过加强水质监测、及时处理污染物和合理使用消毒剂等手段，可有效控制病原菌的传播。
提高鱼体抵抗力合理调整养殖密度、选用营养全面的饲料、改善环境条件等措施，可提高草鱼的抵抗力，减少感染细菌性出血病的风险。
此外，定期进行鱼体检查和加强病害防治等也是必要的措施。
病原学传播途径与感染方式传播途径感染方式加强鱼塘管理，定期消毒，避免在低溶氧条件下进行高密度养殖，防止应激反应等措施可以预防病毒性出血病的发生。
治疗措施目前尚无特效药物治疗病毒性出血病。
发现病鱼后应及时隔离，避免与其他鱼接触，以防止病毒传播。
同时可使用中草药或免疫多糖等药物增强鱼的免疫力，提高抵抗力。
预防措施防治方法VS混合感染的诊断临床观察采集病鱼样本，进行显微镜检查，观察是否有细菌和病毒的存在。
显微镜检查诊断试剂治疗建议立即将病鱼隔离，以防止疾病传播。
隔离措施消毒措施药物治疗辅助治疗对鱼池和水体进行消毒，可使用漂白粉、二氧化氯等消毒剂。
使用抗菌类药物、抗病毒类药物等进行治疗。
加强饲养管理，提高鱼体抵抗力。
科学用药根据病情选择合适的药物，并按照使用说明进行用药，避免滥用药物。
预防为主定期进行鱼病的预防工作，如消毒、强化饲养管理等。
注意观察在治疗期间要密切关注鱼群的状况，根据病情变化及时调整治疗方案。
草鱼病毒性出血病
草鱼病毒性出血病摘要：草鱼出血病是鱼种培育阶段的一种常见的鱼类疾病，它不仅具有广泛的地域性，而且还具有长期的季节性，同时来势比较凶猛，发病率很高，死亡率也很高，是一种比较典型的大危害性的病毒性鱼病，对于渔业养殖用户来说无疑是一种潜在的隐患危机。
本文就草鱼出血病的综合防治相关措施进行探讨。
关键词：草鱼；出血病；防治；措施引言草鱼呼肠孤病毒是草鱼出血病的罪魁祸首，它引发的草鱼出血病流行范围广，发病季节长，发病率高，死亡率高达50-80%以上。
一旦感染，还会继发其它细菌病，如烂鳃、赤皮和败血等。
从2.5一15厘米大小（即7朝-4寸）的草鱼都可以发病，有些地区，2两--1斤左右的草鱼种发病尤其严重。
在广东省流行季节一般在4-6月，9-10月仍有流行，长的持续于整个鱼种培育阶段。
急性型草鱼出血病，病毒感染5天即出现死亡，10天左右出现死亡高峰，2-3周后池中草鱼大部分死亡；慢性型草鱼出血病，每天死亡数尾至十多尾，死亡高峰不明显，但病程较长，常可持续到10月份。
一、识别特征：病鱼各器官有不同程度的充血、出血。
鱼体暗黑，小的鱼种在阳光或灯光透视下，可见皮下肌肉充血，出血；病鱼的口腔、上下台页、眼眶周围、自鳃盖、鳍条基部充血，有时鳃呈”白鳃”；肠壁充血，但仍具韧性，肠内无食物；肠膜、周围脂肪、鳔、胆囊、肝、脾、肾也有出血点或血丝，个别情况下，鳔及胆囊呈紫红色，当肌肉出血严重时，肝、脾、肾的颜色常变淡。
二、诊断（1）根据症状及流行情况进行初步诊断；体侧肌肉、鳍基部、鳃盖和眼眶充血、鳃丝失血苍白，发病时病情较急，鱼种发病多。
（2）对病鱼进行解剖检查，拨开表皮，轻者肌肉呈点状充血，重者全身肌肉充血，（3）免疫学诊断，用酶联免在吸附试验（ELISA法）。
（4）草鱼出血病在发生时很溶易与赤皮病同时发生，在诊断时要注意区分。
三、流行与危害草鱼出血病是在鱼种培育阶段广泛流行、危害性大的一种疾病，流行季节长，发病率高，往往造成大批鱼种死亡。
草鱼出血病中草药疗法
抗炎、抗氧化
中草药具有抗炎、抗氧化 作用，可以减轻病毒感染 引起的组织损伤。
中草药抗病毒的机理
抑制病毒复制
中草药中的抗病毒成分可 以抑制病毒的复制过程， 从而减少病毒的数量。
调节免疫应答
中草药可以调节免疫应答 ，增强机体的免疫反应， 从而更有效地清除病毒。
阻断病毒传播
中草药可以阻断病毒的传 播途径，防止病毒的扩散 。
结合中草药与西药治疗方法，研究草鱼出血病的中西 结合治疗方案，提高治疗效果，降低耐药性的产生。
探讨中草药与免疫增强剂、微生态制剂等其他治疗方 法联合应用的效果，为草鱼出血病的综合防治提供新 的思路和方法。
中草药在生态养殖中的应用前景
研究中草药在生态养殖环境中的适应性及其对水质、 土壤等环境因子的影响，为生态养殖中草药的应用提 供理论依据。
中草药治疗草鱼出血病的经济效益分析
成本
评估中草药治疗草鱼出血病的 成本，包括中草药的购买、煎
煮、投喂等成本。
收益
评估中草药治疗草鱼出血病的收益 ，包括减少死亡的草鱼数量、提高 存活率等收益。
投入产出比
计算中草药治疗草鱼出血病的投入 产出比，即投入成本与收益的比值 。
05
中草药治疗草鱼出血病的未来研 究方向
挑战
传统治疗方法成本较高，且难以根除疾病，易复发。同时，抗生素的滥用也给水 产养殖带来了巨大的风险。
02
中草药疗法的基本原理
中草药的药理作用
01
02
03
直接杀灭病毒
一些中草药具有抗病毒的 活性成分，可以直接杀灭 病毒，如板蓝根、大青叶 等。
调节免疫
中草药可以调节机体的免 疫功能，增强抗病毒的能 力。
中草药对病毒的抑制作用
草鱼出血性疾病病原体的鉴定、致病性及免疫防治研究
草鱼出血性疾病病原体的鉴定、致病性及免疫防治研究鱼类出血性败血症(Septicemia)是我国水产养殖业中最为常见的流行病,随着集约化模式的发展以及水环境的严重恶化,由气单胞菌属(Aeromonas)感染导致的爆发性出血病症状极为严重,该病发病时间短、致死率高,带来了巨大的经济损失,严重的阻碍了水产养殖业的健康发展。
本研究拟通过病原物的分离、鉴定及致病性的综合分析,推测其致病机理。
在此基础上,将益生菌添加到鱼类饲料中应用到草鱼的养殖生产中,检测益生菌发酵饲料对细菌感染后草鱼的抗病能力,以探讨益生菌作为免疫刺激剂在防御出血性疾病中的作用。
主要研究如下:从新乡市某鱼塘采集具有该病病症的草鱼样本,取患病皮肤、肝、脾和肠等组织,经初筛、复筛后得4株纯化的病原菌,16S rDNA的鉴定后分别为维氏气单胞菌(Aeromonas veronii)、腐败希瓦氏菌(Shewanella sp.)、蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)和杀鲑气单胞菌(Aeromonas salmonicida)。
将四种菌株分别对健康草鱼进行回归感染,通过患病症状得出维氏气单胞菌是致草鱼发病的主要菌株,并将其作为目标菌株进行毒性效应的研究。
以气溶素、肠毒素和外膜蛋白三种毒力基因作为靶向基因,得出维氏气单胞菌较其他三株菌毒力基因表达明显;将目标菌株对健康草鱼进行急性毒性研究得:96 h半致死浓度为3.6×10~4 CFU/mL,安全浓度为9.11×10~3 CFU/mL。
以浓度1.82×10~5、2.81×10~6、1.82×10~8 CFU/mL的菌悬液腹腔注射感染草鱼48 h和以浓度为2.81×10~6 CFU/mL的菌悬液感染24 h、48 h、72 h、96 h,分别提取草鱼各组织器官的总RNA,通过RT-qPCR方法检测IL-8和TNF-α基因表达变化,分析病原菌感染后炎症相关基因与草鱼肠道炎症的关联性,结果表明经病原菌感染后草鱼各组织mRNA水平的IL-8和TNF-α转录水平较对照组均不程度的提高。
草鱼出血病及其防治技术
草鱼出血病及其防治技术摘要介绍了草鱼出血病的起源、流行规律及诊断方法，并阐述了草鱼出血病的防治技术。
关键词草鱼出血病；诊断方法；防治技术草鱼是我国重要的淡水养殖鱼类之一，但是其多病、成活率低的特点严重制约了其发展。
尤其是草鱼出血病，发病快、流行广、死亡率高，是危害草鱼最为严重的病毒性疾病，常给养殖者造成重大的经济损失。
因此，草鱼出血病的防治工作十分重要。
1草鱼出血病及其病原1.1草鱼出血病病毒的起源早在1953年，倪达书等就注意到具有出血症状的草鱼病鱼。
1978 年，中国科学院水生生物研究所第三研究室的科研人员首先报道了草鱼出血病是一种病毒性鱼病，并初步认为其病原是一种疱疹病毒（Herpsvirus）。
1983年，陈燕新等用分离病毒的方法从病鱼组织中得到的滤液感染草鱼，获得典型的出血症状并能在单层细胞中传代繁殖，才正式确定草鱼出血病是由病毒引起。
1984年，中国科学院武汉病毒研究所和中国水产科学研究院长江水产研究所草鱼出血病研究协作组在对草鱼出血病病毒进行分离和精细结构核酸特性研究之后，首次确定该病原为鱼呼肠孤病毒（Fish Reovirus）。
1995年，病毒分类命名委员会对该病毒正式命名为草鱼呼肠孤病毒（Grass Carp Reovirus，GCRV）。
该病毒隶属呼肠孤病毒科（Reoviridae）水生呼肠孤病毒属（Aquare-ovirus），是我国分离的第1种鱼类病毒。
1.2草鱼呼肠孤病毒的生物学特性草鱼呼肠孤病毒为正二十面体，直径为65~72nm，具双层衣壳。
病毒核心具有RNA聚合酶，酶活最适温度28℃。
病毒耐酸（pH3），耐碱（pH10），耐热（56℃）。
病毒在敏感细胞上能产生明显的合胞体状细胞病变效应（CPE）。
1.3草鱼呼肠孤病毒的致病机理草鱼鱼种感染GCRV后，在潜伏期和发展期，鱼体红血球、血浆总蛋白、血和尿素氮明显减少，病鱼乳酸脱氢酶（SLDH）同工酶紊乱。
各脏器小血管内皮广泛受损，引起弥散性血管内凝血并形成微血栓，导致循环血量大为减少，使正常代谢发生障碍，导致脏器组织病变。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
四川畜牧兽医学院学报 2001,15(1)Jo urnal of Sichuan Institute of Animal Husbandry and Veterinary Medicine草鱼爆发性出血病病因的研究何利君(四川畜牧兽医学院水产系 重庆荣昌 402460)摘 要 通过对患病草鱼进行症状分析,从病鱼的实质器官中分离获得S-1菌株。
菌落乳白色,圆形,微凸,表面光滑,湿润,边缘整齐,具运动力,β溶血。
根据细菌形态学鉴定、培养特性及生化试验结果,鉴定为嗜水气单胞菌(A ero monas hydro phila)。
人工感染健康草鱼出现同样症状,证实了该菌株是此病的致病菌。
腹腔注射健康草鱼,半致死浓度(L D 50)为1.054×105个细菌/ml 。
同时,对发病鱼池的水质进行了初步研究,发现有机质和氨氮含量极高,环境条件也是发生该病的重要原因之一。
关键词 草鱼 出血病 病因 细菌 环境中图分类号 S942近十年来,随着养殖规模的不断扩大,养殖环境日益恶化,全国各地纷纷暴发一些传染快、死亡率高、不易控制的疾病,如细菌性败血症。
该病对鱼的种类和年龄无选择性。
现已查明其病原体包括嗜水气单胞菌、温和气单胞菌、产碱假单胞菌、鲁克氏耶尔森氏菌等多种革兰氏阴性菌[1],并发现嗜水气单胞菌致病范围最为广泛[2],而这些细菌均是水体中或健康鱼体内的常在菌,只在条件恶劣情况下才引起发病[3]。
2000年6月以来,荣昌地区草鱼发生暴发性出血病,死亡严重。
我们对某水库发病草鱼作病原体分析,并对水质进行检测,探究其病因,以便对症下药,给草鱼暴发性出血病的预防和治疗提供理论依据。
1 材料和方法患病草鱼从荣昌某水库取得,用鱼苗袋盛原池水充氧运回,同时取水样分别固定后[4]带回实验室作分析研究。
致病性研究的样本为同等规格健康草鱼50尾,试验前饲养观察3d ,无病健壮者供试验用。
1.1 细菌分离培养及鉴定 无菌操作取病灶部位肌肉、肝胰脏、心脏、脾脏,将其接种于普通营养培养基上,经28.5℃培养24h ,取单个菌落作纯培养。
对分离纯化后的细菌,进行菌落形态观察。
再按常规涂片,革兰氏染色,观察细菌形态。
作悬滴标本片,在普通光学显微镜下检查细菌运动性。
将纯培养收稿日期——5何利君(6—)重庆合川人,本科,讲师,主要从事鱼类生态、鱼病防治研究工作。
:2001021192:28四川畜牧兽医学院学报 第15卷细菌接种于5%兔血平板表面,经28.5℃培养24h后,用肉眼观察菌落周围是否有溶血现象,确定细菌溶血性。
生理生化测定按常规方法进行[5](微量发酵管由杭州微生物试剂厂提供)。
1.2 细菌致病性试验 用提纯后菌株(代号S-1)接种于增菌肉汤培养基中,培养28.5℃、18h后,稀释成不同浓度的细菌悬液,经比浊法计数,按4个稀释浓度接种于4组健康草鱼腹腔(接种量0.1ml/尾)。
每组设5个重复,对照组注射增菌肉汤培养基。
连续观察5d,死亡草鱼进行细菌分离回收试验。
按Reed和M uench方法计算半致死量(LD50)[5]。
各试养水族箱皆充氧。
1.3 水质分析 用精密试纸测定pH;用碘量法测D O;用奈氏法测氨氮,用Sechi板测透明度,用肉眼观察有机物性状[3]。
2 结果2.1 感观检察与解剖结果 经体表观察和解剖检查比较,患病草鱼体色变淡,鳍基部及鱼体两侧轻度充血,濒死的鱼体严重充血,甚至出血;眼眶周围明显充血,眼球失去光泽,透出血丝;肛门红肿,有黄色粘液流出;脾脏呈微黑色,脾、肾、肝脏明显肿大;肠壁充血,肠内无食物,但有很多黄色粘液,有的肠腔内充满黄色积水,部分肠段有气,变粗,各器官组织都发生病变,导致病鱼腹腔腥臭难闻。
2.2 细菌分离、提纯及鉴定 经过分离培养获得S-1菌株,菌落乳白色,圆形,微凸,表面光滑,湿润,边缘整齐,β溶血;革兰氏染色阴性,单在或成双排列,两端钝圆,短小,杆状,具运动力(见表1),鉴定为嗜水气单胞菌(A e ro mo nas hy dro phila)。
表1 分离菌株的生化特性试验项目结 果试验项目结 果试验项目结 果动力+MR+鼠李糖-葡萄糖⊕V-P+尿素-甘露醇⊕I+硫化氢-蔗糖+β-半乳糖苷+氧化酶+乳糖-鸟氨酸脱羧酶-水杨素±麦芽糖+赖氨酸脱羧酶+七叶苷+阿拉伯糖±西氏柠檬酸盐±肌醇- 注:“+”表示阳性,“-”表示阴性,“⊕”表示产气,“±”表示弱阳性。
2.3 致病性试验 分离细菌S -1株的4个浓度均有致病性,72h 内死亡率20—100%。
主要症状与池塘发病草鱼症状相似,回收细菌与接种细菌一致,对照组草鱼无病症。
通过Reed 和Mu ench 方法计算出S-1株对草鱼的半致死量为1.054×105个菌/ml ,见表2。
表2 S-1株人工感染试验结果组 别菌液浓度(个/ml )实验鱼数(尾)死亡鱼数(尾)死亡率(%)1 3.0×107551002 3.0×106551003 3.0×10554804 3.0×1045120对照52.4 水质分析 通过连续三天早、晚各测一次p H 、透明度和水温,平均值分别为6.0、10.5cm 和21.5℃;连续三天早、晚各取1m 水层水样一次,分别固定,集中测定溶氧和氨氨含量,平均值分别为3.2mg/L 和1.094mg/L 。
肉眼观察底泥发黑,发臭,多粘液,其中腐烂树叶、有机碎屑等极多,气温升高时水底直往上冒气泡。
3 讨论3.1 经解剖病鱼、镜检观察无足量致病寄生虫可以排除寄生虫病的可能性;根据试验所得菌株的形态、生理生化特性及致病症状,可知嗜水气单胞菌是该病的病原菌,与黄琪炎等的研究结果一致[1]。
由于条件限制,我们未作病毒研究,故不能排除细菌与病毒共同致病的可能。
3.2 水质恶化是诱发暴发性疾病的主要因素。
其中氨氮是水质好坏的一项重要指标。
有关资料报道,当水中氨浓度增加时,会抑制鱼类自身氨的排泄,使组织和血液中氨浓度升高,降低血液载氧能力,血液C O 2浓度升高;此外因非离子态氨不带电荷,具较高脂溶性,很容易透过细胞膜,直接使鱼类中毒,出现呼吸困难,分泌物过多,至衰竭而亡等一系列中毒反应[6]。
在发病期间我们测得池水氨氮浓度达1.094mg/L 。
高于前苏联对渔业用水提出的氨氮浓度允许指标0.05mg /L ,低于草鱼对氨氮的耐受浓度1.184mg/L [7],长期处于这种状况,会降低鱼的抵抗能力,加重病情。
另外,富含有机质的淤泥过多,丰富的有机质蕴育了大量细菌(包括病原菌);有机质在分解过程中会产生有害气体,并消耗大量氧气,使水质更加恶化,恶性循环[8]。
基于本试验结果,我们认为,虽然嗜水气单胞菌是水体中的常在菌,但同时也是一种条件致病菌,尤其是当水质较差时,如:水质偏酸、有机物及氨氮含量高、溶氧低等,使养殖鱼处于亚疾病状态,抵抗力减弱,助长了病菌的致病能力。
因此,我们建议养殖过程中要特别注意加强饲养管理,改良水质,加强对疾病的预防,达到理想的养殖效果。
29第1期 何利君:草鱼爆发性出血病病因的研究30四川畜牧兽医学院学报 第15卷参考文献[1] 黄琪琰.水产动物疾病学.上海:上海科学出版社,1993:103—112[2] 陆承平.致病性嗜水气单胞菌及其所鱼病综述.水产学报,1992,16(3):282—286[3] 殷战,徐伯亥.鱼类细菌性疾病的调查.水生生物学报,1995,19(1):76—83[4] 湛江水产专科学校.淡水养殖水化学.北京:农业出版社,1979:211—238[5] 中国科学院微生物研究所细菌分类组.一般细菌常用鉴定方法.北京:科学出版社,1978:111—193[6] 王国祥.南京玄武湖鱼类暴发性死亡原因分析.湖泊科学,1997,9(1):41—47[7] 周永欣.水生生物毒性试验方法.北京:农业出版社,1986:45—56[8] 钱华鑫.草鱼传染病的环境因素及防治对策.淡水渔业,1994,24(2):14—17CAUSES OF EXPL OSIVE EPIDEMIC HEM ORRHA GE DISEASE OF CT ENOPHA R Y NG ODON IDEL LU SHe LijunA bstract S-1strain was isolated fro m the or gans o f sick Cte no phary ng odo n idellu s.It belon gs to Aero monas hy drop hila according to the appraisal of bacterium morph olog y,cultur e traits and c hemb iolo gi-cal test results.T he same sy mpto m happened wh en artificially inf ectin g the health y Cteno p haryn go don idellus.S-1strain was theref ore pr ov ed to b e the patho g entic bacteria.When injected in abd ominal cav-ity,the L D50o f Cteno p haryn go don id ellus was1.054×105bacterium p er ml.M ean while,a stud y on w a-ter in th e po nd of the sic k Cteno p haryn go don idellus sh o wed that the w ater contained ex cessive org an ic substance and a mmonia&nitr og en.So the env iro nment was prov ed to b e ano th er important cause of the disease.Key words Cteno p haryn go don idellus,Causes,Bacterium,Env iron ment。