凯氏定氮实验的原理与方法
凯氏定氮法的原理
凯氏定氮法的原理
凯氏定氮法是一种常用的测定氨量的方法，它的原理基于氨和煮沸的碱性溴水反应生成氮气，进而通过收集氮气的体积得到氨的含量。
具体步骤如下：
1. 取一定量的待测溶液，并将其加入特制的凯氏蒸馏器中。
2. 在蒸馏器的底部加入适量的氢氧化钠溶液，使溶液保持碱性。
3. 在蒸馏器的侧管中加入适量的盐酸，使其与钠氢氧化物发生中和反应，酸性反应消除。
4. 在蒸馏器的顶部加入一定量的悬浊的碱性溴水，然后轻轻摇晃蒸馏器，使其中的氨与碱性溴水中的溴发生反应。
反应生成的氮气以氮气泡的形式逸出到氮气收集瓶中。
5. 定时蒸馏，直到氮气收集瓶中的气泡停止产生为止。
6. 使用水银流量计测量氮气的体积，获取氮气的体积数据。
7. 根据凯氏定氮法的计算公式，计算出溶液中氨的含量。
需要注意的是，该方法只适用于含有游离氨的样品。
在分析前，如有需要，可先将有机物中的游离氨转化为铵盐形式，再进行测定。
此外，在实际操作中，为了提高准确性，还需要进行空白试验和标准曲线法，以便校正和保证结果的准确性。
凯氏定氮仪原理
凯氏定氮仪原理
凯氏定氮仪是一种常用于测定有机物中氮含量的仪器。
其原理基于气相反应原理和体积测定法。
凯氏定氮仪的工作原理如下：
1. 样品预处理：首先，需要将待测样品进行预处理，通常采用酸浸和蒸发等方法，将有机物转化为可溶于硫酸中的氨基根（NH4-）。
2. 气相反应：样品预处理后，将其与水银氯化铵
（NH4Cl·HgCl2）混合，反应生成氯铵盐（NH4Cl）。
这一反应是通过样品中的氨基根与水银氯化铵中的汞离子（Hg2+）发生置换反应而实现的。
NH4- + Hg2+ → NH4+ + Hg
这个反应是快速、可逆的。
3. 体积测定：在发生反应的特定温度和压力条件下，利用水银柱的高度差来测定氮气的体积。
反应生成的氯铵盐会占据一定的体积，并压缩到水银柱内。
由于氮气和水银的密度差异较大，只有氮气的体积变化才对水银柱的高度产生明显的影响。
通过测定水银柱上氢气和氮气两个气泡之间的高度差，即可
确定氮气体积，进而计算出样品中的氮含量。
注意：为了排除空气中的氮气对测定的干扰，实验中通常会先将空气从仪器中排除。
总结起来，凯氏定氮仪的原理是利用样品中的氨基根与水银氯化铵中的水银离子发生置换反应，生成氯铵盐。
通过测定水银柱上氢气和氮气两个气泡之间的高度差来确定氮气体积，从而测定样品中的氮含量。
凯氏定氮仪原理及操作步骤
凯氏定氮仪原理及操作步骤凯氏定氮仪原理：蛋白质是含氮的有机化合物.食品与硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵.然后碱化蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,即为蛋白质含量.1.有机物中的胺根在强热和CuSO4,浓H2SO4作用下,硝化生成NH42SO4反应式为：2NH2+H2S04+2H＝NH42S04其中CuSO4做催化剂2.在凯氏定氮器中与碱作用,通过蒸馏释放出NH3,收集于H3BO3溶液中反应式为:NH42SO4+2NaOH＝2NH3+2H2O+Na2SO42NH3+4H3BO3＝NH42B4O7+5H2O3.用已知浓度的H2SO4或HCI标准溶液滴定,根据HCI消耗的量计算出氮的含量,然后乘以相应的换算因子,既得蛋白质的含量反应式为：NH42B4O7+H2SO4+5H2O＝NH42SO4+4H3BO3NH42B4O7+2HCl+5H2O＝2NH4Cl+4H3BO3凯氏定氮仪操作步骤：一消化1、准备6个凯氏烧瓶,标号.1、2、3号烧瓶中分别加入适当浓度的蛋白溶液1.0mL,样品要加到烧瓶底部,切勿沾在瓶口及瓶颈上.再依次加入硫酸钾-硫酸铜接触剂0.3g,浓硫酸2.0mL,30%过氧化氢1.0mL.4、5、6号烧瓶作为空白对照,用以测定试剂中可能含有的微量含氮物质,对样品测定进行校正.4、5、6号烧瓶中加入蒸馏水1.0mL代替样液,其余所加试剂与1、2、3号烧瓶相同.2、将加好试剂的各烧瓶放置消化架上,接好抽气装置.先用微火加热煮沸,此时烧瓶内物质炭化变黑,并产生大量泡沫,务必注意防止气泡冲出管口.待泡沫消失停止产生后,加大火力,保持瓶内液体微沸,至溶液澄清后,再继续加热使消化液微沸15min.在消化过程中要随时转动烧瓶,以使内壁粘着物质均能流入底部,以保证样品完全消化.消化时放出的气体内含SO2,具有强烈刺激性,因此自始自终应打开抽水泵将气体抽入自来水排出.整个消化过程均应在通风橱中进行.消化完全后,关闭火焰,使烧瓶冷却至室温.二蒸馏和吸收蒸馏和吸收是在微量凯氏定氮仪内进行的.凯氏定氮蒸馏装置种类甚多,大体上都由蒸气发生、氨的蒸馏和氨的吸收三部分组成.1、仪器的洗涤仪器安装前,各部件需经一般方法洗涤干净,所用橡皮管、塞须浸在10%NaOH溶液中,煮约10min,水洗、水煮10min,再水洗数次,然后安装并固定在一只铁架台上.仪器使用前,微量全部管道都须经水蒸气洗涤,以除去管道内可能残留的氨,正在使用的仪器,每次测样前,蒸气洗涤5min即可.较长时间未使用的仪器,重复蒸气洗涤,不得少于三次,并检查仪器是否正常.仔细检查各个连接处,保证不漏气.首先在蒸气发生器中加约2/3体积蒸馏水,加入数滴硫酸使其保持酸性,以避免水中的氨被蒸出而影响结果,并放入少许沸石或毛细管等,以防爆沸.沿小玻杯壁加入蒸馏水约20mL让水经插管流入反应室,但玻杯内的水不要放光,塞上棒状玻塞,保持水封,防止漏气.蒸气发生后,立即关闭废液排放管上的开关,使蒸气只能进入反应室,导致反应室内的水迅速沸腾,蒸出蒸气由反应室上端口通过定氮球进入冷凝管冷却,在冷凝管下端放置一个锥形瓶接收冷凝水.从定氮球发烫开始计时,连续蒸煮5min,然后移开煤气灯.冲洗完毕,夹紧蒸气发生器与收集器之间的连接橡胶管,由于气体冷却压力降低,反应室内废液自动抽到反应室外壳中,打开废液排出口夹子放出废液.如此清洗2～3次,再在冷凝管下换放一个盛有硼酸-指示剂混合液的锥形瓶使冷凝管下口完全浸没在溶液中,蒸馏1～2min,观察锥形瓶内的溶液是否变色.如不变色,表示蒸馏装置内部已洗干净.移去锥形瓶,再蒸馏1～2min,用蒸馏水冲洗冷凝器下口,关闭煤气灯,仪器即可供测样品使用.2、无机氮标准样品的蒸馏吸收由于定氮操作繁琐,为了熟悉蒸馏和滴定的操作技术,初学者宜先用无机氮标准样品进行反复练习,再进行有机氮未知样品的测定.常用巳知浓度的标准硫酸铵测试三次.取洁净的100mL锥形瓶五只,依次加入2%硼酸溶液20mL,次甲基蓝-甲基红混合指示剂呈紫红色3～4滴,盖好瓶口待用.取其中一只锥形瓶承接在冷凝管下端,并使冷凝管的出口浸没在溶液中.注意：在此操作之前必须先打开收集器活塞,以免锥形瓶内液体倒吸.准确吸取2mL硫酸铵标准液加到玻杯中,小心提起棒状玻塞使硫酸铵溶液慢慢流入蒸馏瓶中,用少量蒸馏水冲洗小玻杯3次,一并放人蒸馏瓶中.然后用量筒向小玻杯中加入10mL30％NaOH溶液,使碱液慢慢流入蒸馏瓶中,在碱液尚未完全流入时,将棒状玻塞盖紧.向小玻杯中加约5mL蒸馏水,再慢慢打开玻塞,使一半水流入蒸馏瓶,一半留在小玻杯中作水封.关闭收集器活塞,加热蒸气发生器,进行蒸馏.锥形瓶中的硼酸-指示剂混合液由于吸收了氨,由紫红色变成绿色.自变色时起,再蒸馏3～5min,移动锥形瓶使瓶内液面离开冷凝管下口约lcm,并用少量蒸馏水冲洗冷凝管下口,再继续蒸馏1min,移开锥形瓶,盖好,准备滴定.在一次蒸馏完毕后,移去煤气灯,夹紧蒸气发生器与收集器间的橡胶管,排除反应完毕的废液,用水冲洗小玻杯几次,并将废液排除.如此反复冲洗干净后,即可进行下一个样品的蒸馏.按以上方法用标准硫酸铵再做两次.另取2mL蒸馏水代替标准硫酸铵进行空白测定二次.将各次蒸馏的锥形瓶一起滴定.3、未知样品及空白的蒸馏吸收将消化好的蛋白样品三支,空白对照液三支,依次作蒸馏吸收.加5mL热的蒸馏水至消化好的样品或空白对照液中,通过小玻杯加到反应室中,再用热蒸馏水洗涤小玻杯3次,每次用水量约3mL,洗涤液一并倒入反应室内.其余操作按标准硫酸铵的蒸馏进行.由于消化液内硫酸钾浓度高而呈粘稠状,不易从凯氏烧瓶内倒出,必须加入热蒸馏水5mL稀释之,如果有结晶析出,必须微热溶解,趁热加入玻杯,使其流入反应室.此外,还应当注意趁仪器洗涤尚未完全冷却时立即加入样品或空白对照液,否则消化液通过冷却的管道容易析出结晶,造成堵塞.三凯氏定氮仪滴定样品和空白蒸馏完毕后,一起进行滴定.打开接受瓶盖,用酸式微量滴定管以0.0100mol/L的标准盐酸溶液进行滴定.待滴至瓶内溶液呈暗灰色时,用蒸馏水将锥形瓶内壁四周淋洗一次.若振摇后复现绿色,应再小心滴入标准盐酸溶液半滴,振摇观察瓶内溶液颜色变化,暗灰色在一二分钟内不变,当视为到达滴定终点.若呈粉红色,表明已超越滴定终点,可在已滴定耗用的标准盐酸溶液用量中减去0.02mL,每组样品的定氮终点颜色必须完全一致.空白对照液接受瓶内的溶液颜色不变或略有变化尚未出现绿色,可以不滴定.记录每次滴定耗用标准盐酸溶液毫升数,供计算用.。
凯氏定氮仪原理及方法
凯氏定氮仪原理及方法凯氏定氮仪是一种常用的分析仪器，主要用于测定样品中的氮含量。
它的原理是基于凯氏法，通过化学反应将样品中的氮转化为氨，然后利用氨的比色反应来测定氮含量。
本文将从凯氏定氮仪的原理和方法两个方面进行介绍。
一、凯氏定氮仪的原理。
凯氏定氮仪的原理主要包括两个部分，氮的转化和氨的比色反应。
1. 氮的转化。
在凯氏定氮仪中，样品首先需要经过氮的转化过程。
通常采用硫酸钾和硫酸铁作为氮的转化剂，将样品中的氮转化为氨。
这个过程需要在高温下进行，以保证氮的完全转化。
2. 氨的比色反应。
转化后的氨会与氯化汞形成白色的沉淀，然后用硫化钠将其转化为黄色的硫化汞。
最后通过比色计测定溶液的吸光度，进而计算出样品中的氮含量。
二、凯氏定氮仪的方法。
凯氏定氮仪的方法主要包括样品处理、转化反应、比色测定和计算结果。
1. 样品处理。
首先，需要将待测样品进行预处理，通常是将样品溶解或者研磨成粉末。
然后取适量样品放入凯氏定氮仪的反应瓶中，加入硫酸钾和硫酸铁等转化剂。
2. 转化反应。
将反应瓶放入凯氏定氮仪中进行加热反应，将样品中的氮转化为氨。
反应完成后，需要将溶液冷却至室温。
3. 比色测定。
取适量转化后的溶液，加入氯化汞和硫化钠，使其发生比色反应。
然后使用比色计测定溶液的吸光度。
4. 计算结果。
根据比色测定的结果，结合标准曲线或者计算公式，计算出样品中的氮含量。
总结：凯氏定氮仪是一种常用的分析仪器，通过化学反应将样品中的氮转化为氨，然后利用氨的比色反应来测定氮含量。
在使用凯氏定氮仪时，需要严格按照操作规程进行样品处理、转化反应、比色测定和结果计算，以保证测定结果的准确性和可靠性。
通过本文的介绍，相信大家对凯氏定氮仪的原理和方法有了更深入的了解，希望能够对大家的工作和学习有所帮助。
简述凯氏定氮法的原理和流程
简述凯氏定氮法的原理和流程
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凯氏定氮法原理及流程简述：
凯氏定氮法原理：①样品中有机氮转化；通过与浓硫酸加热消解，样品内的有机化合物分解，其中的氮转化为氨态氮；
②氨态氮捕获；在碱性条件下，氨气被释放并被硼酸或硫酸吸收液吸收；
③氨量滴定；吸收液中的氨通过标准酸滴定测定，计算氮含量；
④蛋白质计算；根据测得氮量乘以转换系数（通常为 6.25），估算蛋白质总量。
凯氏定氮法流程：①样品处理：准确称取一定量样品，加入催化剂和浓硫酸，置凯氏烧瓶中；
②消化加热：在通风橱中小火加热，使样品完全消化；
③蒸馏转移：消化液中加入碱液并蒸馏，氨气被转移至接收液；
④吸收液滴定：接收液用标准酸溶液滴定，直至终点；
⑤计算结果：根据消耗的酸量反推氮含量，进一步计算蛋白质含量。
凯氏定氮仪原理及方法
凯氏定氮仪原理及方法凯氏定氮仪是一种用于测定水体中氨氮和有机氮的仪器。
它是根据凯氏反应原理设计的，通过化学反应将水样中的氨氮和有机氮转化为氨气，再利用吸收液吸收氨气来测定水样中的氮含量。
本文将对凯氏定氮仪的原理及方法进行详细介绍。
凯氏定氮仪的原理是利用凯氏反应将水样中的氨氮和有机氮转化为氨气，然后通过吸收液将氨气吸收，最后通过滴定来测定氨气的含量，从而计算出水样中的氮含量。
在实际操作中，首先将水样与碱性试剂和氧化剂混合，使水样中的氨氮和有机氮转化为氨气；然后将氨气通入吸收液中，使氨气被吸收；最后通过酸碱滴定法测定吸收液中氨气的含量，从而计算出水样中的氮含量。
凯氏定氮仪的操作方法如下，首先，准备好所需的试剂和设备，包括凯氏试剂、吸收瓶、滴定管等；然后，按照标准操作程序将水样与碱性试剂和氧化剂混合；接着，将混合液通入吸收瓶中，使氨气被吸收；最后，通过酸碱滴定法测定吸收液中氨气的含量，计算出水样中的氮含量。
需要注意的是，在操作过程中要严格按照操作规程进行，避免操作失误导致结果不准确。
凯氏定氮仪的优点是操作简便、结果准确、灵敏度高，适用于各种类型的水样。
但是在实际操作中也存在一些注意事项，比如在操作过程中要避免氨气泄漏，避免试剂的误用，避免污染水样等。
另外，对于不同类型的水样，需要根据实际情况选择合适的操作方法和试剂，以确保测定结果的准确性。
总之，凯氏定氮仪是一种用于测定水体中氨氮和有机氮的重要仪器，它的原理简单，操作方便，结果准确，适用范围广泛。
在实际应用中，只有掌握了凯氏定氮仪的原理和操作方法，才能更好地进行水质监测和环境保护工作。
希望本文对凯氏定氮仪的原理及方法有所帮助，谢谢阅读！。
凯氏定氮的原理
凯氏定氮的原理
凯氏定氮法是一种常用的分析化学方法，用于测定有机物中的氮含量。
其原理基于以下几个步骤：
1. 消解：将含有氮的有机物样品与浓硫酸和催化剂（通常是硫酸铜）一起加热，进行消解反应。
这个过程将有机物分解，并将其中的氮转化为氨（NH3）。
2. 氨的蒸馏：消解后的样品经过加热，使氨从消解液中释放出来，并通过蒸馏进入一个接收瓶中。
3. 滴定：用标准酸溶液（通常是盐酸）对接收瓶中的氨进行滴定。
通过酸碱中和反应，测定出消耗的酸溶液的体积。
4. 计算氮含量：根据滴定所消耗的酸溶液的体积，可以计算出样品中氮的含量。
通常使用的计算公式是：氮含量（%）=（V×C×0.014）/m，其中 V 是滴定消耗的酸溶液体积，C 是酸溶液的浓度，m 是样品的质量。
凯氏定氮法的原理基于消解、蒸馏和滴定三个主要步骤，通过测定氨的量来计算出样品中的氮含量。
这种方法广泛应用于食品分析、土壤分析、生化研究等领域，是测定有机物中氮含量的常用方法之一。
需要注意的是，凯氏定氮法只能测定样品中的总氮含量，而无法区分不同形态的氮（如蛋白质氮、核酸氮等）。
在实际应用中，需要根据具体情况进行进一步的分析和解释。
凯氏定氮法测定蛋白质含量
凯氏定氮法测定蛋白质含量简介凯氏定氮法（Kjeldahl method）是一种常用的测定蛋白质含量的方法，它通过将样品中的有机氮转化为氨，然后将氨转化为氨基氮，再由氨基氮计算得出蛋白质的含量。
这个方法的优点是稳定可靠，适用于各种类型的样品。
实验原理凯氏定氮法的实验原理如下：1.样品预处理：将待测样品进行预处理，去除样品中的非氮有机物。
这样可以确保凯氏定氮方法只测定到蛋白质中的氮。
2.消化反应：将预处理后的样品与硫酸相结合，加热至沸腾。
在这个过程中，有机氮将被转化为氨。
3.碱化反应：将消化后的样品中的硫酸中和，加入过量的氢氧化钠溶液，使样品呈碱性。
4.蒸馏捕收：将碱化后的样品进行蒸馏，捕集捕集样品中的氨。
5.滴定：将捕集到的氨溶液与酸反应，使用盐酸或硫酸等强酸进行滴定，直至中和反应结束，测定出反应过程中消耗的酸的体积。
6.计算：根据滴定所消耗的酸的体积，计算出样品中的氨的量，再根据氨和蛋白质含氮的摩尔比例，计算出样品中蛋白质的含量。
实验步骤以下是凯氏定氮法测定蛋白质含量的实验步骤：1.准备样品：根据实验需要，准备待测样品。
样品的选择应根据实验目的和样品的特性进行。
2.样品预处理：将样品经过细碎、研磨等处理，去除样品中的非氮有机物。
3.消化反应：将预处理后的样品与浓硫酸相结合，加热至沸腾。
消化时间一般为2小时。
4.碱化反应：将消化后的样品中的硫酸中和，加入过量的氢氧化钠溶液，使样品呈碱性。
5.蒸馏捕收：将碱化后的样品进行蒸馏，捕集捕集样品中的氨。
6.滴定：将捕集到的氨溶液与酸反应，使用盐酸或硫酸等强酸进行滴定，直至中和反应结束。
7.计算：根据滴定所消耗的酸的体积，计算出样品中的氨的量，再根据氨和蛋白质含氮的摩尔比例，计算出样品中蛋白质的含量。
实验注意事项1.在进行样品消化时，必须控制好加热温度，避免样品的溢出和烧焦。
2.在进行滴定时，应注意控制滴液的速度，避免过量的酸滴入。
3.实验过程中需注意个人安全，避免触及强酸和强碱。
凯氏定氮法测定原理
凯氏定氮法测定原理
Kaiser法，又称为Kjeldahl定氮法，是一种常用的定氮分析方法，它是根据氨和氮的化学反应来测定氮含量。
该方法由Hermann Kaise（1842-1900）于1883年首次提出。
它可以测定含氮的有机物的氮含量，包括氨、胺、蛋白质、核酸、氨基酸等。
实验步骤为：
（1）将待测样品（植物、矿石、油、塑料、煤等）加入硫酸氢钠的溶液中，加热混合。
（2）将混合物用硝酸钠水溶液滤液，将滤液转移到烧杯中，加入氢氧化钠溶液，再通入硫氰酸钠溶液。
（3）收集产生的氨气，经洗涤后，采用酒精灯烧液中氨气，得到硝酸铵溶液。
（4）将硝酸铵溶液加入到酸性氧化液中，当氧化后有过量电子，再加入KMnO4溶液，氧化过量电子，经滤液，可以得到含有氮的酸性液体。
（5）把滤液用碱量计测定酸性液体中的氮含量。
经公式计算可得样品中氮含量。
总结
Kaiser定氮法是一种用于测定有机物中氮含量的常见定氮分析方法，它的基本原理是：使用硝酸钠水溶液滤液得到氨气，将氨气采用酒精灯烧液得到硝酸铵溶液，然后将硝酸铵溶液加入到酸性氧化液中氧化出过量电子，经滤液后，将滤液加入碱量计测定，从而得到样品中氮含量的数值。
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凯氏定氮法测定蛋白质原理及操作
一、概述蛋白质是生命活动中不可或缺的重要物质，其含量的测定在生物化学研究和食品加工领域具有重要意义。
针对蛋白质含量的测定方法有许多种，其中凯氏定氮法是一种经典且常用的测定方法，本文将就凯氏定氮法测定蛋白质的原理及操作进行详细介绍。
二、凯氏定氮法原理1. 基本原理凯氏定氮法是通过测定样品中氨基氮的含量来间接测定蛋白质含量的方法。
蛋白质是由氨基酸构成的，而氨基酸中含有氮元素，故可以通过测定样品中氮元素的含量来推算出样品中蛋白质的含量。
2. 操作步骤（1）样品的预处理：将待测样品进行适当的预处理，通常是将样品中的有机物燃烧成气体，从而将其中的氮元素转化为氮气。
（2）氮气的收集：收集样品燃烧产生的氮气，通常是通过化学吸收剂的吸收来将氮气纯化。
（3）氮气的测定：将纯化后的氮气进行定量测定，得出氮气的含量。
（4）蛋白质含量的计算：根据氮气的含量，通过一定的计算公式来推算出样品中蛋白质的含量。
三、凯氏定氮法操作注意事项1. 样品的选择选择代表性好的样品进行测定，避免样品中含有其他干扰物质，影响测定结果的准确性。
2. 仪器的使用严格按照仪器的操作说明进行操作，保证测定过程的准确性和精确度。
3. 数据的处理对测定得到的数据进行严格的处理，计算过程中不应出现错误，以确保蛋白质含量的测定结果准确可靠。
四、凯氏定氮法测定蛋白质的优缺点1. 优点（1）测定范围广：凯氏定氮法可以适用于各种类型的样品，包括食品、饲料、生物组织等。
（2）测定结果可靠：经过严格的样品预处理和操作步骤，测定结果具有较高的准确性和精确度。
2. 缺点（1）操作繁琐：凯氏定氮法的操作步骤相对繁琐，需要较长的操作时间。
（2）不适用于含氮杂质的样品：如果样品中含有其他氮元素化合物的干扰物质，则可能影响凯氏定氮法的测定结果。
五、结语凯氏定氮法作为一种经典且常用的蛋白质测定方法，其原理和操作步骤相对简单明了，但需要严格遵守操作规范，以确保测定结果的准确性和可靠性。
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凯氏定氮实验的原理与方法
测定原理：待测自然含氮有机物与浓硫酸共热时，被氧化成为二氧化碳和水，而氮转变成氨，氨再与硫酸结合生成硫酸铵。
为了加速有机物质的分解反应，在消化时常加入促进剂，硫酸铜可用作催化剂，硫酸钾或硫酸钠可提高消化液的沸点，氧化剂如过氧化氢也能加速反应。
操作方法：样品处理测定某一固体样品中蛋白质的含量都是按100克物质的干重中所含蛋白质的克数来表示。
因此在定氮前应先将固体样品中的水分除去。
步骤：先将样品磨细，在已称重的称量瓶中称入肯定量样品，然后置105度（100度无法除去非游离水）的烘箱内干燥2小时后称重，以后每1小时再称重，直至2次称重数不变为止。
若样品属于液体物质，可取肯定体积经适当稀释后，取肯定量进行消化。
消化依据样品量的多少选择相宜的凯氏烧瓶4个（此处以50毫升为例），其中2个为对比。
向烧瓶内加入精确称量的样品，留意要把样品加至烧瓶底部，切勿沾在瓶口及瓶颈上。
另外2个作空白对比，好对样品进行校正。
在每个烧瓶中加入约300毫克硫酸钾-硫酸铜混合物（硫酸钾：五
水硫酸铜=3：1、6：1或10：1均可），再用量筒加入3毫升浓硫酸。
将上述4个凯氏烧瓶放在通风良好处（最好在通风橱中进行）
加热消化。
先用小火加热至沸腾。
此时会产生大量泡沫，应特殊留
意不能让黑色物质上升到烧瓶颈部，否则将严峻影响分析结果。
当
混合物停止冒泡，蒸汽与二氧化硫也匀称地放出时，将火焰调整到
保持瓶内液体微微沸腾。
假如发觉瓶颈上有黑色颗粒，应当心地将
烧瓶倾斜振摇，用消化液将其洗下。
在消化过程中要时常转动烧瓶，使全部样品都浸在消化液中。
当消化液呈清亮淡蓝色时即告消化结束。
时间一般在5~6小时！若样品中含赖氨酸或组氨酸较多时，消
化时间需要延长1~2倍。
由于这两种氨基酸中的氮在短时间内不易
消化完全。
蒸馏采纳改良式凯氏定氮仪。
1、洗涤蒸馏仪：用硼酸指示剂（取100毫升2%硼酸溶液，滴加
混合指示剂约1毫升，摇匀后呈紫红色即可；混合指示剂：50毫升0.1%甲烯蓝乙醇+200毫升0.1%甲基红乙醇，存于棕色瓶中）检测是
否清洗洁净。
洁净标准：指示剂不变色。
2、样品和空白的蒸馏：取2毫升稀释消化液至加样口加入反应室，关闭加样口，另取1个装硼酸指示剂的三角瓶接于冷凝管下端。
取30%氢氧化钠（W/W）溶液约10毫升，从加样口缓慢加入，当未加完
时关闭，并加入约3毫升蒸馏水，再连续缓慢加入一半后关闭，让剩下的水作液封。
将加热器重新放在蒸汽发生器下加热（注：在清洗仪器完毕后应拿走加热器），待三角瓶中液体由紫红变成鲜绿色起开头计时，蒸馏5分钟，然后移动三角瓶使液面离开冷凝管口约1厘米，并用少量蒸馏水洗涤冷凝管口外周，连续蒸馏1分钟。
空白同样。
3、清洗仪器：同上，不必用指示剂。
滴定用0.0100mol/L标准盐酸（要标定，费时）滴定三角瓶中收集的氨，直至硼酸指示剂由绿变紫红。
留意：蒸馏时试验室环境中切忌有碱性雾气，否则要影响分析精度。