三点测交基因连锁作图计算的新方法
果蝇三点测交试验
14.6
m
36.0
实验步骤
1.选取处女蝇：每组做正、反交各1瓶，正交选野生型
为母本，三隐性雄蝇为父本。反交选三隐性雌蝇为母本， 野生型为父本，将母本旧瓶中的果蝇全部麻醉处死，在 8-12h内收集处女蝇5只，将处女蝇和5只雄蝇转移到新 的杂交瓶中，贴好标签，于25℃培养；
2.7d后，释放杂交亲本；
3.再过4-5天，F1成蝇出现，在处死亲本7d后，集中观 察记录F1表型及性别；
实验原理
•三点测交：是通过一次测交和一次杂交， 同时确定三对等位基因的排列顺序和它们 之间的遗传距离。
什么是测交？
测交：杂合子 F1代和隐性纯合 体亲本交配用以 测定杂种或者杂 种后代的基因型 的方法。
孟德尔测交实验
过程：
三杂合体
测交
F2
分析表现 型及数目
计算三个连锁基 因之间的交换值
只能产生2种配子
m sn3 w
×
+++
m sn3 w
×
+++
m sn3 w
××
+ ++
m sn3 w
m sn3 w
m sn3 w
m++ + sn3 w
m sn + + +w
m+w + sn3 +
+ ++
+ ++
+ ++
根据上图，在连锁的三对基因杂种里，交换可以发生 在m-sn3间（单交换），sn3-w之间（单交换），或者 同时发生在m-sn3间和sn3-w间（双交换）， 从而产生 八种不同配子。
果蝇的三点测交实验
果蝇的三点测交实验果蝇的三点测交实验赵⼦杰 141140054⼀．实验⽬的1、验证连锁互换定律，掌握并进⾏连锁分析，学习绘制遗传学图的原理和⽅法。
2、了解伴性遗传与⾮伴性遗传的区别，了解伴性基因在正、反交中的差异。
⼆．实验原理1、三点测交三点测交把三个基因包括在同⼀次交配中，即⽤三杂合体abc/+++或ab+/++c跟三隐性个体abc/abc测交。
进⾏这种试验，⼀次就等于三次“两点试验”，⽽且带有另外两个优点。
⼀次三点测验得到的三个重组值是在同⼀基因型背景、同⼀环境条件下得到的，⽽三次“两点试验”就不⼀定这样。
重组值既受基因型背景的影响，也受各种环境条件的影响，所以，只有从三点试验所得到的三个重组值才是严格地可以互相⽐较的。
通过三点测交试验，可以得到三次两点试验所不能得到的资料，即双交换的资料。
果蝇的⽩眼、⼩翅、卷刚⽑为X-连锁基因，全部隐性于各⾃的野⽣型基因（红眼、长翅、直刚⽑），把⽩眼、⼩翅、卷刚⽑雌蝇（wmsn/wmsn）与野⽣型雄蝇交配（＋＋＋/Y），F1雌蝇全部为野⽣型，雄蝇则全部表现为三隐性突变型，让F1互交，在F2中，不管雌雄性别，除了出现双亲类型外，还会出现新的表型种类，这是由于F1雌蝇中两个染⾊体之间发⽣了互换的结果，根据基因在染⾊体线性排列的遗传理论，对F2进⾏分析即可知不同基因间的连锁距离。
因为这三个基因位于性染⾊体上，所以这个试验也可⽤来作为伴性遗传试验。
当基因位于X或Y染⾊体上时，⼀般不含相对的等位基因，产⽣伴性遗传，在正交和反交试验中产⽣不同的结果。
2、连锁率和互换率⽣殖细胞形成过程中，位于同⼀染⾊体上的基因是连锁在⼀起，作为⼀个单位进⾏传递，称为连锁律。
在⽣殖细胞形成时，⼀对同源染⾊体上的不同对等位基因之间可以发⽣交换，称为交换律或互换律。
连锁和互换是⽣物界的普遍现象，也是造成⽣物多样性的重要原因之⼀。
⼀般⽽⾔，两对等位基因相距越远，发⽣交换的机会越⼤，即交换率越⾼；反之，相距越近，交换率越低。
三点测验课件.ppt
四、实验数据的分析方法 1. 确定子代表型、基因型及各类型的数量 2. 确定位于中间位置的基因 3. 计算交换率 4. 确定基因的顺序及它们之间的遗传距离
三点测验
一、概念：仅用一次杂交及一次测交实验即可以确定三个基因 之间的顺序及其它们之间遗传距离
二、三点测验理论基础：
理论基础：基因之间的交换率确定基因之间的遗传距离
(黄 正 白)
双
y+
交
(橙
换
y
组
(黄
合计（Total）
ec+ w 正 白)
ec w+ 棘眼 红)
子代数目 百分比 交换（Crossing over） （Number）（Percentage）发于区域
y-ec ec-w y-w
4759 4685
9444 94.44%
80
150
70
1.50%
207
400
y-ec y-w ec-w
其工作量增加了3倍。
有没有更简单的办法来确定这三个基因之间的顺序及遗传距离？
三点测验
• 概念：仅用一次杂交及一次测交实验即可以确定三个基因 之间的顺序及其它们之间遗传距离
三点测验设计及子代类型
P
x
杂交 Cross
F1
x
测交
Testcross
F2 亲本类型 单交换类型 单交换类型 双交换类型
三点测验
一、概念：仅用一次杂交及一次测交实验即可以确定三个基因 之间的顺序及其它们之间遗传距离
二、三点测验理论基础：
理论基础：基因之间的交换率确定基因之间的遗传距离
三、三点测验设计
1.杂交 材料选择：
P
连锁互换三定律讲解
连锁交换定律一．发现：W.Bateson和R.C.Punnett他们所研究的香豌豆F2的4种表型的比率却不符合9∶3∶3∶1，其中紫长和红圆的比率远远超出9/16和1/16，而相应的紫、圆和红、长却大大少于3／16；结果进行x2检验时，x2=3 371.58。
如此可观的x2数值，无疑说明实计频数与预计频数的极其显著的差异不可能由随机原因所造成。
重复实验，其中x2=32.40，证明它仍是显著不符合9∶3∶3∶1的。
(紫、长，红、圆)称为互引相，(紫、圆，红、长)为互斥相。
当两个非等位基因a和b处在一个染色体上，而在其同源染色体上带有野生型A、B时，这些基因被称为处于互引相(AB／ab)；若每个同源染色体上各有一个突变基因和一个野生型基因，则称为互斥相(Ab／aB)。
二．完全连锁与不完全连锁：Morgan用果蝇灰体长翅(BBVV)和黑体残翅(bbvv)的果蝇杂交，F1都是灰体长翅(BbVv)。
用F1的杂合体进行下列两种方式的测交，所得到的结果却完全不同：凡是位于同一对染色体上的基因群，均称为一个连锁群(linkage group)，玉米的染色体也正好是10对(n=10)。
链孢霉n=7，连锁群有7个。
水稻n=12，连锁群就是12。
有些生物目前已发现的连锁群数少于单倍染色体数，如：家兔n=22，连锁群是11；而家蚕n=28，连锁群却是27；牵牛花n=15，连锁群是12等等。
三．重组频率计算：遗传学以测交子代中出现的重组型频率来测定在这样的杂交中所表现出的连锁程度。
求重组频率(recombination frequency,RF)的公式是：用玉米为材料：①很多性状可以在种子上看到，种子虽然长在母本植株的果穗上，但它们已是子代产物；②同一果穗上有几百粒种子，便于计数分析；③雌、雄蕊长在不同花序上，去雄容易，便于杂交；④它是一种经济作物，某些实验结果有经济价值。
玉米籽粒的糊粉层有色(C)对糊粉层无色(c)为显性；饱满种子(Sh)对凹陷种子(sh)为显性。
遗传学实验实验七果蝇的三点测交
三点测交实验的预期结果
在三点测交实验中，预期结果是根据基因之间的相互作用关系和遗传规律 来预测的。
通过观察杂交后代的表型和死亡情况，可以推断出基因之间的互作关系， 例如是否为连锁关系、是否为互补关系等。
预期结果也可以用于验证实验假设和理论模型，为进一步的研究提供指导 。
引入先进技术
随着科技的发展，基因编辑、高通量测序等新技术在遗传学领域的 应用越来越广泛，希望未来能够将这些技术引入到实验中。
加强跨学科合作
遗传学与生物信息学、统计学等多个学科密切相关，希望未来能够加 强跨学科合作，推动遗传学研究的深入发展。
07
CATALOGUE
参考文献
参考文献
发表时间：2018年
遗传学实验实验七 果蝇的三点测交
contents
目录
• 实验目的 • 实验原理 • 实验材料 • 实验步骤 • 实验结果与分析 • 实验总结与展望 • 参考文献
01
CATALOGUE
实验目的
理解三点测交实验原理
验证基因的连锁关系
通过三点测交实验，可以验证两个或多个基 因是否连锁在一起，以及它们在染色体上的 排列顺序。
提高实验技能
实验过程中，我们提高了实验操 作技能，学会了使用显微镜、培 养箱等实验器材，以及如何处理 和记录实验数据。
培养团队合作精神
实验需要小组合作完成，通过与 同学协作，我们培养了团队合作 精神和沟通能力。
对未来遗传学实验的展望
探索更多遗传学实验
希望未来能够开展更多遗传学实验，如基因定位、基因克隆等，以 便更深入地了解基因的结构和功能。
得出结论，验证实验原理
基因连锁及互换频率的计算
基因连锁及互换频率的计算
基因连锁和互换频率是遗传学中常用的概念，用于描述基因在染色体上的位置和基因之间的互换频率。
本文将介绍基因连锁和互换频率的计算方法及其在遗传学研究中的应用。
基因连锁与互换频率的计算通常基于交配型数据，即从个体的后代中确定染色体上两个基因的组合情况。
一个常用的方法是通过建立遗传连锁图谱来确定基因在染色体上的位置以及互换频率。
以下是一些常用的计算方法：
1.交配型分析：通过观察个体的后代中染色体上两个基因的不同组合情况，可以估计基因之间的连锁程度和互换频率。
例如，在果蝇实验中，可以观察到红眼基因与小翅膀基因是否同时出现在后代个体中，从而估计它们在染色体上的位置和互换频率。
3. 构建遗传连锁图谱：通过测量不同基因之间的重组频率，可以将它们在染色体上的位置表示为距离。
距离的单位通常是centimorgans （cM），表示两个基因之间的平均重组频率为1%。
遗传连锁图谱通过将不同基因的位置和互换频率标记在染色体上来提供可视化的信息。
基因连锁和互换频率的计算在遗传学研究中具有重要的应用价值。
它们可以用来确定基因之间的位置和顺序，从而揭示染色体的结构和功能。
此外，基因连锁和互换频率也可以用于遗传连锁分析和基因定位，帮助我们了解疾病的遗传机制和进行基因治疗。
总之，基因连锁和互换频率是基因在染色体上的位置和互换程度的定量描述，通过交配型分析和重组频率计算可以确定它们的数值。
这些计算
方法为遗传学研究提供了重要的工具和指导，为我们理解遗传变异和遗传疾病的发生机制提供了有力的支持。
遗传学11
–当两基因位点间超过五个遗传单位时，两点测 验的准确性就不够高。
（二）三点测验与基因直线排列
黑腹果蝇品系： 野生型果蝇（+++）长翅、直刚毛、红眼。 三隐性果蝇（m sn3 w）小翅、焦刚毛、白眼。
计算基因间的重组值： m—sn3间的重组值
m—w间的重组值
w—sn3间的重组值 画遗传学图：
m—w间重组值小于m—sn3间和sn3－w间重组值之和，这是什么原因？
F1 配子种类 + wx c sh + + + + c sh wx + sh + c + wx + + + + sh wx c
粒数 交换类别 2708 亲本型 2538 626 单交换 601 113 单交换 116 4 双交换 2 6708
5. 确定三对基因在染色体上的排列顺序。 用两种亲本型配子与两种双交换型配子比较： 双交换配子与亲本型配子中不同的基因位点位于中间。
7. 绘制连锁遗传图。 –Sh位于wx与c之间； –wx-sh: 18.4 sh-c: 3.5
*两个思考问题：
wx-c:21.9。
1.三点测验考虑到了wx与c之间的双交换值，应该比两点测验得 到的遗传距离更大。但事实上变小了，为什么？
2.各种方法在各次试验中测定的交换值-遗传距离都不相同，倒 底哪一个最能反映基因间的遗传距离？如何选择？
（一）两点测验：步骤(1/3)
1. 通过三次亲本间两两杂交，杂种F1与双隐性亲本测交，考 察测交子代的类型与比例。 例：玉米第9染色体上三对基因间连锁分析： 子粒颜色： 淀粉粒： 有色(C)对无色(c)为显性； 非糯性(Wx)对糯性(wx)为显性.
第4章——连锁遗传分析
不完全连锁
交换与不完全连锁的形成
• 重组合配子的产生是由于：减数分裂前期 I 同源染色体的 非姊妹染色单体间发生了节段互换。(基因论的核心内容)
1. 同一染色体上的各个非等位基因在染色体上各有一定的位置，呈
线性排列； 2. 染色体在间期进行复制后，每条染色体含两条姊妹染色单体，基 因也随之复制；
的准确性就不够高。
三点测验：步骤
1. 用三对性状差异的两个纯系作亲本进行杂交、测交： 2. 考察测交后代的表现型、进行分类统计。 3. 按各类表现型的个体数，对测交后代进行分组； 4. 进一步确定两种亲本类型和两种双交换类型； 5. 确定三对基因在染色体上的排列顺序。 用两种亲本型配子与两种双交换型配子比较，双交换配子与亲本型配子中 不同的基因位点位于中间。 6. 计算基因间的交换值。 由于双交换实际上在两个区域均发生交换，所以在估算每个区域交换值时， 都应加上双交换值，才能够正确地反映实际发生的交换频率。 7. 绘制连锁遗传图。
3. 同源染色体联会、非姊妹染色单体节段互换，导致基因交换，产生交换型染色单体； 4. 发生交换的性母细胞中四种染色单体分配到四个子细胞中，发育成四种配子(两种亲 本型、两种重组合型/交换型)。 5. 相邻两基因间发生断裂与交换的机会与基因间距离有关：基因间距离越大，断裂和 交换的机会也越大
重组型配子的比例
连锁分析与染色体作图
Part 02
重组值与交换值的概念
• 重组率/重组值：是指重组型配子占总配子的百分率。即：
重组型配子数 重组值(%) 100 ％ 总配子数
亲本型配子+重组型配子
•27
交换值：一般重组值也称交换值。 但是，实际上交换值一般大于重组值，因为有 时非等位基因间的多重交换并不形成重组配子。