小鼠免疫器官摘取及淋巴细胞分离

“小鼠免疫器官摘取及淋巴细胞分离”实验过程

1.培养皿加入纱布，在纱布上滴2ml淋巴细胞分离液。

2.脱颈处死小鼠，在75%酒精中浸泡30s(示意消毒小鼠)。

3.无菌条件下将腹部剪开，脱皮。(2min)

4.选取小鼠腹部左侧，剪开腹膜，深红色细长组织即脾脏（淋巴细

胞组织）

5.用镊子从下方夹取脾脏，，剔除结缔组织和脂肪后，将组织置于滴

有小鼠淋巴细胞分离液的纱布上。

6.脾脏用弯头镊子在纱布上研磨至无血色组织后，纱布上加入1ml

淋巴细胞分离液，再用移液器吸取研磨的液体，移至1.5ml离心管内。(3min)

7.离心（1500rpm,3min）留上清，移入新的15ml 离心管中，去除红

细胞，此时可以取胸腺。(可以做到这里停止，示意淋巴细胞和免疫器官胸腺)

8.在装有上清的离心管中加入3ml 1640培养基，离心1500rpm，3min，

取沉淀，弃上清，重复清洗2次。（6min）

9.在显微镜下将细胞浓度调为5×106个/ml备用。