分析化学在生产、生活和科研中的应用例子

分析化学在生产、生活和科研中的应用例子1、测定三聚氰胺在乳制品中的含量
方法：高效液相色谱法测定原料乳与乳制品中三聚氰胺含量。

原理：用三氯乙酸溶液 - 乙腈提取试样，经阳离子交换固相萃取柱净化后，用高效液相色
谱测定，外标法定量。

试剂与材料：甲醇、乙腈、 25％～28％的氨水、三氯乙酸、柠檬酸、辛烷磺酸钠、甲醇水
溶液（含 50mL甲醇和 50mL水）、三氯乙酸溶液（ 1％）、氨化甲醇溶液（ 5％）、离子对试剂缓冲液（由柠檬酸和辛烷磺酸钠配制）、三聚氰胺标准（CAS108-78-01，纯度＞99.0%）、三聚氰胺标准储备液（ 1mg/mL）。

所有试剂均为分析纯，水为 GB/T 6682 规定的
一级水。

阳离子交换固相萃取柱、定性滤纸、海砂、微孔滤膜、氮气（纯度≥ 99.999％）
仪器和设备：高效液相色谱（ HPLC）仪、分析天平、离心机、超声波水浴器、固相萃取
装置、氮气吹干仪、涡旋混合器、 50mL具塞塑料离心管、研钵。

、
样品处理
提取：液态奶、奶粉、酸奶、冰淇淋和奶糖等。

称取 2g（精确至 0.01g）试样于 50mL具塞
塑料离心管中，加入 15mL三氯乙酸溶液和 5mL乙腈，超声提取 10min，再振荡提取 10min 后，以不低于 4000r/min
离心 10min。

上清液经三氯乙酸溶液润湿的滤纸过滤后，用三氯乙酸溶液定容至
25mL，移取 5mL滤液，加入 5mL水混匀后做待净化液。

②奶酪、奶油和巧克力等。

称取 2g（精确至 0.01g）试样于研钵中，加入适量海砂（试样质量的 4 倍～ 6 倍）研磨成干
粉状，转移至 50mL具塞塑料离心管中，用 15mL三氯乙酸溶液分数次清洗研钵，清洗液转
入离心管中，再往离心管中加入 5mL乙腈，超声提取10min，再振荡提取 10min 后，以不低
于 4000r/min 离心 10min。

上清液经三氯乙酸溶液润湿的滤纸过滤后，用三氯乙酸溶液定容
至 25mL，移取 5mL滤液，加入 5mL水混匀后做待净化液。

若样品中脂肪含量较高，可以
用三氯乙酸溶液饱和的正己烷液 - 液分配除脂后再用 SPE柱净化。

净化：将待净化液转移至固相萃取柱中。

依次用 3mL水和 3mL甲醇洗涤，抽至近干
后，用6mL氨化甲醇溶液洗脱。

整个固相萃取过程流速不超过 1mL/min。

洗脱液于 50℃下
用氮气吹干，残留物（相当于 0.4g 样品）用1mL流动相定容，涡旋混合1min，过微孔滤膜后，供HPLC测定。

高效液相色谱测定：用流动相将三聚氰胺标准储备液逐级稀释得到的浓度为 0.8 、2、20、40、80μg/mL的标准工作液，浓度由低到高进样检测，以峰面积 -浓度作图，得到标准曲线回归
方程。

定量测定待测样液中三聚氰胺的响应值应在标准曲线线性范围内，超过线性范围则应
稀释后再进样分析。

空白实验除不称取样品外，均按上述测定条件和步骤进行。

本方法的
定量限为 2mg/kg。

在添加浓度 2mg/kg～10mg/kg 浓度范围内，回收率在 80%～110%之间，
相对标准偏差小于 10%。

在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术
平均值的 10%。

2、测定硫化氢在空气中的含量
方法：吸光光度法
原理：硫化氢被碱性锌氨络盐溶液吸收后，在酸性溶液中释放出硫离子，在三氯化铁存
在下，与对氨基二甲基苯胺生成亚甲基蓝。

其颜色深浅与硫离子含量成正比例进行比色定量。

4.2 步骤 4.2.1标准曲线的绘制在 7 支 10mL具塞比色管中分别加入吸收液 10.00 ，9.00，9.80 ，9.60，9.40 ，9.20 ，9.00mL；然后分别吸取5μg/mL硫化钠标准液0.00，0.10，0.20 ，
0.40 ， 0.60 ，0.80 ，1.00mL 于上述比色管中，加 1mL对氨基二甲基苯胺使用液，再加1~2
滴三氯化铁液，加1 滴磷酸二氢铵液，以除三价铁颜色，在波长665nm处，用2cm比色皿，用水作参比，测定吸光度，绘制标准曲线。

采集试样：气体样品收集是在两个串联的多孔吸收瓶中，分别装入 10mL吸收底液，控制气体流速为 0.2~0.4L/min（采集量可根据气体中的 H2S 含量而定）。

分析方法：按绘制标准曲线的操作步骤显色，测定吸光度
计算：a —比色样品液中硫化氢含量（μg); V —比色样品液的体积（mL); SV —样品液总体积；odV —采样体（换算成参比状态 25 ℃，1013510Pa时的体积。

3、测定茶叶中茶多酚的含量
方法：分光光度法
原理：茶叶中的茶多酚与亚铁离子形成蓝紫色络合物。

仪器：分析天平，分光光度仪。

试剂，溶液：所用试剂应为分析纯 (AR) ，水为蒸馏水。

酒石酸亚铁溶液：称取 1g ( 准确至
0.0001g) 硫酸亚铁和 5g ( 准确至 0.0001g) 酒石酸钾钠，用水溶解并定容至 1L( 溶液应避光，
低温保存，有效期一个月 ) 。

pH7.5 磷酸盐缓冲液：磷酸氢钠 : 称取 23.377g 磷酸氢二钠，加
水溶解后定容至 1L。

磷酸二氢钾：称取 9.078g 磷酸二氢钾，加水溶解后定容至 1L。

取上述
磷酸氢二钾溶液 85ml 和磷酸二氢钾溶液 15ml 混合均匀。

实验步骤：取样按《茶取样》的规定取样。

2试样的制备按《茶磨碎试样的制备及其干物质
含量测定》的规定，制备试样。

3 测定步骤 (1) 试液的制备按《茶水浸出物测定》中的规定，制备试液。

(2) 测定准确吸取上述 (1) 试液 1mL，注入 25mL 的容量瓶中，加水 4mL和酒石
酸亚铁溶液 5mL，充分混合，再加 pH7.5 的缓冲液至刻度，用 10mm比色杯，在波长 540nm 处，以试剂空白溶液作参比，测定吸光度 (A) 。

5 、结果计算计算方法和公式茶叶中茶多酚的含量，以干态质量百分率表示，按下式计算 : A ×1.957×2L1 茶多酚 ( ％) ＝─×─× 100 100
L2×M×m 式中 : L1 —试液的总量，mL；L2 —测定时的用液量，mL； M—试样的质量，g；m—试样干物质含量百分率，％； A —试样的吸光度； 1.957 —用 10mm比色杯，当吸光度
等于 0.50 时，每毫升茶汤中含茶多酚相当于1.957mg ，取两次的算术平均值作为最终值。

4、奶制品中 Ca含量测定
方法：配位滴定法
实验原理：测定牛奶中的钙采取配位滴定法，用二乙胺四乙酸二钠盐（EDTA）溶液滴定牛奶中的钙。

用 EDTA测定钙，一般在 pH = 12~13 的碱性溶液中，以钙试剂（络蓝黑 R）为指示剂，计量点前钙与钙试剂形成粉红配合物，当用 EDTA溶液滴定至计量点时，游离出指示剂，溶液呈现蓝色。

滴定时 Fe3+、Al 3+干扰时用三乙醇胺掩蔽。

仪器和药品：仪器：移液管（ 25 mL）、锥形瓶（ 250 mL）、滴定管药品： EDTA标准溶液（ 0.02 mol ·L-1）、NaOH （20 %）、铬蓝黑 R（0.5%）
实验内容：
一.EDTA标准溶液的配置与标定
1.EDTA溶液的配制
称取 4.0g 乙二胺四乙酸二钠与 500ml 烧杯中，加 200ml 水，温热使其完全溶解，转入至
聚乙烯瓶中，用水稀释中 500ml，摇均。

2. 以 CaCO 3 为基准物质标定 EDTA
(1). 配制 0.020mol/L 钙标准溶液
准确称取 0.5 ～0.55g 碳酸钙于 250mL烧杯中，用少量水稀释，盖上表面皿，慢慢滴加 1:1
的 HCl5ml，加少量水稀释，定量转移至 250mL容量瓶中，稀释至刻度，摇匀。

(2).EDTA 溶液的标定
用移液管移取 25.00mL 标准钙溶液于 250mL锥形瓶中，加入约 25 mL水，10mL10%NaOH
溶液及约10mg（米粒大小）钙指示剂，摇匀后，用EDTA溶液滴定至溶液从红色变为蓝色，即为终点。

平行测定三分。

二. 钙含量的测定
准确移取牛奶试样 25.00 mL 三份分别加入 250 mL 锥形瓶中，加入蒸馏水 25 mL，加入2
mL 20% NaOH 溶液，摇匀、再加10~15 滴钙指示剂，用标准 EDTA滴定至溶液由粉红色至
明显纯蓝色，即为终点，平行测定三次，计算牛奶中的含钙量，以每100mL牛奶含钙的毫
克数表示。

重复做三次。

实验数据处理 Ca(mg/100ml)=C EDTA·V EDTA·40·10-3·100/ 25。