现代药理学研究方法组作业
药物化学与药理学研究作业指导书
药物化学与药理学研究作业指导书第1章药物化学基本概念 (3)1.1 药物的定义与分类 (3)1.1.1 化学药物 (3)1.1.2 天然药物 (3)1.1.3 生物药物 (3)1.2 药物化学性质与构效关系 (3)1.2.1 药效 (4)1.2.2 毒性 (4)1.2.3 稳定性 (4)1.3 药物合成方法简介 (4)1.3.1 化学合成 (4)1.3.2 半合成 (4)1.3.3 生物合成 (4)第2章药理学基本原理 (4)2.1 药物作用机制 (4)2.1.1 药物与生物大分子的相互作用 (5)2.1.2 药物靶点的识别 (5)2.1.3 药物作用模式的分类 (5)2.2 药物代谢与排泄 (5)2.2.1 药物代谢 (5)2.2.2 药物排泄 (6)2.2.3 影响药物代谢与排泄的因素 (6)2.3 药物毒理学基础 (6)2.3.1 药物毒作用的特点 (6)2.3.2 药物毒作用的分类 (6)2.3.3 药物毒性的评价方法 (7)第3章药物设计与合成方法 (7)3.1 药物设计原理 (7)3.1.1 药物靶点的选择与确证 (7)3.1.2 药效团和药效团模型 (7)3.1.3 基于结构的药物设计 (7)3.1.4 基于配体的药物设计 (7)3.2 计算机辅助药物设计 (8)3.2.1 分子对接技术 (8)3.2.2 虚拟筛选与药物筛选 (8)3.2.3 分子动力学模拟 (8)3.2.4 药物靶点相互作用网络分析 (8)3.3 生物合成与半合成药物方法 (8)3.3.1 生物合成方法 (8)3.3.2 半合成药物方法 (8)3.3.3 组合化学与库合成 (8)第4章药物分析技术 (9)4.1 药物分析方法概述 (9)4.2 色谱技术在药物分析中的应用 (9)4.2.1 气相色谱（GC） (9)4.2.2 高效液相色谱（HPLC） (9)4.2.3 薄层色谱（TLC） (9)4.3 药物分析中的光谱与质谱技术 (9)4.3.1 光谱技术 (9)4.3.2 质谱技术 (10)第5章生物药剂学 (10)5.1 生物药剂学概述 (10)5.2 药物的溶解性与生物利用度 (10)5.2.1 药物溶解性的测定方法 (10)5.2.2 影响药物溶解度的因素 (10)5.2.3 提高药物溶解度的方法 (10)5.3 药物制剂设计与评价 (11)5.3.1 药物制剂设计的基本原则 (11)5.3.2 药物制剂设计的方法 (11)5.3.3 药物制剂的评价指标 (11)第6章药物代谢动力学 (11)6.1 药物代谢动力学基本概念 (11)6.2 药物代谢酶与转运体 (11)6.2.1 药物代谢酶 (11)6.2.2 转运体 (11)6.3 药物代谢动力学模型与参数 (12)6.3.1 药物代谢动力学模型 (12)6.3.2 药物代谢动力学参数 (12)第7章药物作用靶点 (12)7.1 药物作用靶点概述 (12)7.2 药物作用靶点的发觉与验证 (12)7.2.1 药物作用靶点的发觉 (12)7.2.2 药物作用靶点的验证 (13)7.3 靶向药物设计与应用 (13)第8章药物安全性评价 (13)8.1 药物毒性作用机制 (13)8.1.1 毒性作用的分类 (13)8.1.2 毒性作用机制 (14)8.1.3 毒性作用的评估方法 (14)8.2 药物安全性评价方法 (14)8.2.1 非临床安全性评价 (14)8.2.2 临床安全性评价 (14)8.2.3 药物安全性评价的统计学方法 (14)8.3 药物不良反应监测与风险管理 (14)8.3.2 药物风险管理 (14)8.3.3 药物不良反应因果关系评估 (14)8.3.4 药物安全性信息的传播与交流 (14)第9章药物临床试验 (14)9.1 药物临床试验概述 (15)9.2 药物临床试验设计与方法 (15)9.2.1 临床试验设计原则 (15)9.2.2 临床试验方法 (15)9.3 药物临床试验质量管理 (15)9.3.1 质量管理体系 (15)9.3.2 质量管理措施 (15)第10章药物注册与审批 (15)10.1 药物注册流程与要求 (16)10.1.1 药物注册基本流程 (16)10.1.2 药物注册要求 (16)10.2 药物审批法规与政策 (16)10.2.1 药物审批法规 (16)10.2.2 药物审批政策 (17)10.3 新药研发与上市策略 (17)10.3.1 新药研发策略 (17)10.3.2 新药上市策略 (17)第1章药物化学基本概念1.1 药物的定义与分类药物是一类具有生物活性的化合物，用于预防、诊断和治疗疾病。
中药药理学的现代研究进展
中药药理学的现代研究进展随着现代医学的快速发展和中医药的广泛应用，中药药理学的研究也日益受到关注。
中药药理学是研究中药的化学成分、药理作用及其机制的学科。
在现代研究中，通过采用多种现代科学技术手段，中药药理学的研究已经取得了重要的进展。
本文将对中药药理学的现代研究进展进行探讨。
第一部分：中药药理学的研究方法中药药理学的研究方法主要包括体外实验、动物模型实验和临床试验。
体外实验主要是通过使用离体器官、细胞、酶等来评估中药的药理活性。
动物模型实验则是使用不同动物模型来研究中药的药理作用及其机制。
临床试验则是通过临床观察和统计分析，验证中药的药效和安全性。
第二部分：中药药理学的研究内容中药药理学的研究内容包括中药的化学成分分析、药理活性评价以及机制研究。
化学成分分析是通过利用现代技术手段对中药中的各种化学成分进行分离、鉴定和定量分析，为后续的药理活性评价提供依据。
药理活性评价则是通过对中药在体内外的活性进行评估，探究其具体的药理作用和效果。
机制研究则是深入探究中药的药理作用机制，以及与中药相关的信号通路和靶点。
第三部分：中药药理学的研究进展1. 中药药理学与疾病治疗随着中药药理学研究的深入，越来越多的中药被证实具有对多种疾病的治疗作用。
例如，中药黄连被发现具有抗菌、抗炎、抗肿瘤等多种药理活性，广泛应用于感染性疾病和癌症的治疗中。
2. 中药药理学与药物相互作用中药药理学的研究还揭示了中药与现代药物之间的相互作用。
中药的化学成分与现代药物可能发生相互作用，影响药物的疗效和副作用。
因此，中药药理学的研究对于指导中药与现代药物的联合应用具有重要意义。
3. 中药药理学与药物开发中药药理学的研究成果对于新药的研发和创新有着重要的推动作用。
通过分离、鉴定和评价中药的活性成分，并深入探究其作用机制，可以为新药的开发提供借鉴和指导。
4. 中药药理学与药物安全性评价中药药理学的研究还可以评估中药的安全性和毒性。
通过动物实验和临床观察，可以了解中药的毒副作用及其机制，从而为合理使用中药提供依据。
中药药理学的现代研究方法
中药药理学的现代研究方法中药药理学是研究中药药物在人体内的作用和机制的科学领域。
随着现代科技的进步，中药药理学的研究方法也得到了深入发展。
本文将介绍一些现代研究中药药理学的常用方法，包括体外实验、动物实验和临床研究等。
一、体外实验体外实验是指在离体的细胞或组织水平上进行的实验。
这种方法可以通过观察中药对细胞的影响来研究其药理作用和机制。
常用的体外实验方法包括细胞培养实验、酶活性测定和分子生物学技术等。
细胞培养实验是一种将中药与细胞共同培养的实验方法。
通过观察细胞的形态和功能的变化，可以评估中药对细胞的影响，并进一步研究其作用机制。
酶活性测定则是通过检测中药对特定酶活性的影响来研究其作用机制。
而分子生物学技术则可以用于探究中药对基因表达和蛋白质合成的调控。
二、动物实验动物实验是中药药理学研究中不可或缺的一种方法。
通过在动物体内给予中药，并观察其对动物的生理和行为的影响，可以评估中药的药理作用和毒副作用。
常用的动物实验方法包括小鼠体内试验、大鼠体内试验和动物行为学实验等。
小鼠体内试验是一种常用的动物实验方法。
研究人员可以通过给小鼠灌胃或皮下注射中药来观察其对小鼠的作用。
大鼠体内试验则是类似的方法，只是使用大鼠作为实验动物。
而动物行为学实验可以用来评估中药对动物行为的影响，比如焦虑、抑郁和认知功能等。
三、临床研究临床研究是指在人体内进行的中药药理学研究。
通过招募患者或志愿者，并给予中药治疗，可以评估中药的疗效和安全性。
常用的临床研究方法包括临床观察、随机对照试验和队列研究等。
临床观察是一种观察研究方法，通过观察中药治疗患者的症状和体征的变化，可以评估中药的疗效和不良反应。
随机对照试验是一种更为科学严谨的临床研究方法，将患者随机分为中药治疗组和安慰剂对照组，并比较两组之间的差异。
而队列研究则是通过追踪一组患者的疗效和安全性，来评估中药的长期效应。
综上所述，中药药理学的现代研究方法包括体外实验、动物实验和临床研究等。
中草药的现代研究方法
中草药的现代研究方法中草药作为我国传统医学的重要组成部分，具有悠久的历史和丰富的临床经验。
随着现代科技的发展，人们对中草药的研究也日益深入，为了更好地挖掘中草药的药用价值，现代研究方法被广泛应用。
本文将介绍中草药的现代研究方法，包括药理学研究、化学成分分析、药效评价等方面，以期为中草药的研究和开发提供参考。
一、药理学研究药理学是研究药物在生物体内的作用机制和药效学规律的学科，对于中草药的研究至关重要。
现代药理学研究方法包括体外实验和体内实验两种。
在体外实验中，可以通过细胞培养、酶活性测定等方法，研究中草药对于细胞的影响及其作用机制；在体内实验中，可以通过动物实验，观察中草药在生物体内的药效和毒性，为临床应用提供科学依据。
二、化学成分分析中草药含有复杂的化学成分，其中包括生物碱、黄酮类、多糖类等多种活性成分。
现代化学分析技术为中草药的成分分析提供了强大的支持，包括气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）、液相色谱-质谱联用技术（LC-MS）、核磁共振技术（NMR）等。
通过这些技术手段，可以准确地鉴定中草药中的主要化学成分，为进一步研究中草药的药效和作用机制奠定基础。
三、药效评价药效评价是中草药研究的重要环节，主要包括药效学评价和药物安全性评价。
药效学评价通过临床试验等方法，评估中草药的治疗效果和作用机制，为中草药的临床应用提供科学依据；药物安全性评价则是评估中草药的毒性和不良反应，确保中草药的安全性和可靠性。
四、现代技术在中草药研究中的应用除了上述方法外，现代技术在中草药研究中还有许多应用。
比如基因组学技术可以揭示中草药的基因组信息，帮助理解中草药的遗传特性和药效成分的合成途径；蛋白质组学技术可以研究中草药对蛋白质的调控作用，揭示中草药的作用机制；生物信息学技术可以对中草药的大数据进行分析，挖掘中草药的潜在药效成分等。
总之，中草药的现代研究方法涵盖了药理学研究、化学成分分析、药效评价等多个方面，现代技术的应用为中草药的研究和开发提供了强大支持。
药理学的研究方法
药理学的研究方法药理学是研究药物在生物体内所产生的效应和作用机制的学科。
在药理学的研究中，常常需要使用各种研究方法来评价药物的药效、毒性和代谢动力学等方面的特性。
以下是一些常见的药理学研究方法：1. 组织和细胞培养技术：采用体外的组织和细胞培养技术，可以研究药物对细胞的作用机制和效应。
例如，通过培养癌细胞株，可以研究药物对癌细胞生长和存活的影响。
2. 动物实验：在动物模型中进行实验是药理学研究中常用的方法之一。
通过给动物注射药物，可以观察其对动物行为、生理功能和病理状态的影响，从而评价药物的药效和毒性。
常用的动物模型包括小鼠、大鼠、兔子和猪等。
3. 临床试验：在人体中进行的临床试验是评价药物疗效和安全性的重要手段。
临床试验的设计需要严格的伦理标准和科学要求，通常包括药代动力学、药效学、安全性和剂量反应关系等内容。
临床试验可以分为四个阶段：I期为安全性和耐受性试验，II期为疗效试验，III期为大样本、多中心的疗效试验，IV期为上市后的药物监测。
4. 分子生物学技术：现代药理学研究中，常常使用分子生物学技术来深入研究药物的靶点和作用机制。
例如，可以通过PCR、Western blot、ELISA等实验技术来检测药物对特定蛋白的表达、修饰和相互作用等。
5. 计算机模拟和分子对接：计算机模拟和分子对接是药理学研究中的重要工具。
通过利用分子模型和计算模拟技术，可以预测药物分子与靶点之间的相互作用，优化药物设计和筛选潜在的药物分子。
6. 流行病学研究：流行病学研究是研究人群健康状况、疾病发生和流行规律的科学。
在药理学研究中，流行病学研究可以用于评价药物的效果和不良反应风险等。
常用的流行病学研究方法包括人群调查、队列研究和病例对照研究等。
7. 药物代谢动力学研究：药物代谢动力学研究是评价药物在生物体内代谢和消除的过程。
通过测定药物在体内的浓度变化，可以获得药物的代谢动力学参数，并进而评估药物的临床用药指导。
总结起来，药理学的研究方法多种多样，包括组织和细胞培养技术、动物实验、临床试验、分子生物学技术、计算机模拟和分子对接、流行病学研究以及药物代谢动力学研究等。
药理学实验实验报告
实验名称：不同给药途径对戊巴比妥钠药效影响的研究一、实验目的1. 探究不同给药途径对戊巴比妥钠药效的影响。
2. 理解药物剂量与药效之间的关系。
3. 学习和掌握实验设计、操作和数据分析的方法。
二、实验原理药物剂量的大小决定血药浓度的高低，血药浓度又决定药理效应，因此药物剂量决定药理作用的强弱。
给药途径不同，吸收速度有差别，药物反应的潜伏期和程度亦有差别。
一般而言，腹腔给药大于皮下给药大于灌胃给药的药效。
三、实验材料1. 实验动物：小白鼠18-22g，2只/组。
2. 实验药物：戊巴比妥钠溶液（0.2%、0.4%、0.8%）。
3. 实验器材：苦味酸、1mL注射器、生理盐水、电子天平、计时器、实验记录表等。
四、实验方法1. 将小白鼠随机分为三组，每组2只，分别编号为A、B、C。
2. A组：腹腔注射0.2%戊巴比妥钠溶液0.1mL/10g。
3. B组：皮下注射0.4%戊巴比妥钠溶液0.1mL/10g。
4. C组：灌胃0.8%戊巴比妥钠溶液0.1mL/10g。
5. 给药后，分别观察记录各组小白鼠的睡眠时间、活动情况等。
6. 实验结束后，对各组小白鼠进行麻醉，观察并记录其呼吸、心率等生命体征。
五、实验结果与分析1. 实验结果A组：小白鼠睡眠时间为30分钟，活动减少，呼吸平稳，心率正常。
B组：小白鼠睡眠时间为25分钟，活动减少，呼吸平稳，心率正常。
C组：小白鼠睡眠时间为20分钟，活动减少，呼吸平稳，心率正常。
2. 实验分析本实验结果表明，随着戊巴比妥钠剂量的增加，小白鼠的睡眠时间逐渐缩短，活动逐渐减少，呼吸和心率保持平稳。
这说明药物剂量与药效之间存在一定的关系。
同时，实验结果也表明，腹腔注射、皮下注射和灌胃给药对戊巴比妥钠的药效有一定的影响，其中腹腔注射的药效最强，其次是皮下注射，灌胃给药的药效最弱。
六、实验结论1. 戊巴比妥钠的药效与剂量呈正相关，剂量越大，药效越强。
2. 不同给药途径对戊巴比妥钠的药效有一定的影响，其中腹腔注射的药效最强，其次是皮下注射，灌胃给药的药效最弱。
药物治疗中的新型药理学研究方法
药物治疗中的新型药理学研究方法药物治疗一直是医学领域的重要研究方向之一。
近年来，随着科技的不断发展和进步，新型药理学研究方法应运而生，为药物的研发和治疗提供了更多的可能性。
本文将介绍一些在药物治疗中的新型药理学研究方法，并探讨其在临床应用中的前景。
一、计算机辅助药物设计（Computer-Aided Drug Design, CADD）计算机辅助药物设计是指利用计算机技术和计算化学方法来加速药物研发过程的一种方法。
通过计算机模拟，可以预测药物分子与靶标蛋白的结合方式，并对药物的优化方向进行预测。
这种方法不仅提高了药物研发的效率，还可以降低药物研发的成本。
二、基于大数据的药物发现与筛选随着大数据时代的到来，海量的生物、化学和临床数据被广泛积累。
利用这些数据，可以运用机器学习、深度学习等技术，构建多种模型来预测药物的活性和副作用。
这种基于大数据的药物发现与筛选方法，不仅可以帮助科研人员更好地理解药物作用机制，还能提高药物研发的效率。
三、靶点识别与验证技术药物治疗的关键在于找到合适的靶点，并验证其在疾病进程中的作用。
传统的方法主要依赖于实验室动物模型，但这种方式存在费时、费力和成本高的问题。
如今，通过基因组学、蛋白质组学和代谢组学等技术，可以快速鉴定靶点，并利用基因编辑和基因敲除技术验证其生物学功能。
这些技术的发展大大加快了靶点相关研究的进程，为药物研发提供了更多的选择。
四、个体化药物治疗传统的药物治疗方法是基于人群平均的反应情况来制定治疗方案的，忽视了个体差异的存在。
而个体化药物治疗则是根据患者的个体遗传信息、临床特征和生活习惯等制定个性化的治疗方案。
通过基因检测、药物动力学和药物代谢等技术，可以更好地预测患者对药物的反应情况，并提供更精准的治疗方案。
五、纳米技术在药物输送中的应用纳米技术是指将药物包裹在纳米级的载体中，通过改变药物的性质和释放方式，提高药物的稳定性和传输效果。
纳米药物可以通过血液、淋巴和细胞等传输方式，实现对靶组织或靶细胞的精准治疗。
试述药理学的研究方法有哪些
1.试述药理学的研究方法有哪些？
2.试述药物作用与药理效应的区别。
3.试述药动学参数的概念及药理学意义。
4.试述传出神经系统的受体分型。
5.试述毛果芸香碱的药理作用。
6.试述阿托品对血管和血压的影响。
7.试述去氧肾上腺素扩瞳的机制，并与阿托品对比。
8.试述酚妥拉明的临床应用。
9.试述有些β受体阻断药的内在拟交感活性。
10.试述苯二氮卓类的作用机制。
11.试述抗癫痫药用药原则
12.试述左旋多巴的不良反应。
13.试述氯丙嗪的药理作用。
14.试述吗啡的临床用途。
15.试述阿司匹林主要不良反应。
16试述ACEI的药理作用、作用机制及降压特点。
17.试述心律失常发生的电生理学机制。
18.试述地高辛的药理作用。
19.试述硝酸甘油抗心绞痛作用的机制。
20.试述叶酸(folicacid)及VitB12的药理作用和临床应用。
21.试述氢氯噻嗪的药理作用及临床应用。
22.属H2受体阻断药的药物有哪些，试述他们的药理作用及临床应用。
23.试述抗消化性溃疡药的分类。
24.试述平喘药的分类。
25.试述糖皮质激素的临床应用。
26.试述碘和碘化物的作用与应用。
27.试述磺酰脲类的作用与应用。
28.试述抗菌药作用机制。
29.试述β-内酰胺类抗生素的抗菌作用。
30.试述三代喹诺酮类的特点。
31.试述抗恶性肿瘤药物的分类：。
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现代药理学研究方法作业
3110103759 药学1101班邵鑫
1、简述常用的检测凋亡的药理学研究方法？
（1）双重荧光素染色
细胞发生凋亡时,胞膜的通透性增加,但其程度介于正常细胞和坏死细胞之间。
根据这一特点,可采用荧光素染色、流式细胞仪检测来区分正常细胞、坏死细胞和凋亡细胞。
YOPRO-1(YP)是一种膜不通透型DNA交联荧光染料。
在细胞凋亡的早期,当细胞膜通透性发生微小变化时,YP可进入细胞核而与DNA结合,产生绿色荧光。
碘化丙啶(PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但能够透过凋亡中、晚期的细胞和死细胞的细胞膜而使细胞核染色。
应用YP与PI联合染色可将细胞区分为正常细胞(YP-/PI-)、早期凋亡细胞(YP+/PI-)、中晚期凋亡细胞和坏死细胞(YP/PI)。
（2）DNA断裂
当细胞凋亡或坏死时,核内DNA均发生断裂,高分子量DNA减少,小分子量DNA片段增多并且出现在胞质内。
但凋亡细胞DNA断裂点有规律地发生在核小体之间,出现长度为180~200bp的DNA片段,电泳时呈现阶梯状条带;而坏死细胞的DNA断裂点无规律性,产生的杂乱片段在电泳时呈现模糊的连续性条带。
利用此特征可以确定群体细胞的凋亡,并可与坏死细胞相区别。
（3）原位末端检测技术
此技术是指将细胞(或组织)固定后,应用标记的脱氧尿苷三磷酸(dUTP)在原位检测DNA裂解点的技术。
DNA片段原位末端检测技术又可分为两种:脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)和原位切口平移(,ISNT)技术。
TUNEL法的作用原理是,在细胞凋亡时,染色质DNA双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3c-OH端,在脱氧核糖核苷酸末端转移酶的作用下,将脱氧核糖核苷酸(多为dUTP)与荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3c-OH端,可通过酶联显色或荧光检测定量分析结果。
（4）连接介导的PCR检测DNA梯形片段
当凋亡细胞数量少以及检测样品量小(如活体组织切片)时,无法直接应用琼脂糖电泳观察凋亡细胞核DNA的变化。
Clontech公司的LM-PCRLadderAssayKit 借助特异性接头,通过LM-PCR专一性地扩增核小体的梯形片段,从而可提高凋亡检测的灵敏度。
亦可采用LM-PCR对凋亡细胞进行半定量分析。
（5）膜联蛋白Ⅴ法
磷脂酰丝氨酸(PS)正常位于细胞膜的内侧,但在细胞凋亡的早期,PS可从细胞
膜的内侧翻转到细胞膜表面。
膜联蛋白Õ(AnnexinÕ)是一种相对分子质量为35~36ku的Ca依赖性磷脂结合蛋白,能与PS高亲和力特异性结合。
因此,应用膜联蛋白Õ法可鉴定早期细胞凋亡。
将膜联蛋白Õ用荧光素(FITC,PE)或biotin标记,以标记膜联蛋白Õ的作为荧光探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测凋亡的细胞。
（6）半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶活性检测
继线粒体$7m变化之后,线粒体膜通透性增强,外膜可容许蛋白质通过,而内膜通透性变化不大。
这时,正常位于线粒体双层膜间隙中的可溶性蛋白质会释放至胞浆。
因此SIMPs的检测可为细胞凋亡的发生提供佐证。
其中,细胞色素C作为一种信号物质在细胞凋亡中发挥着重要的作用。
正常情况下,它存在于线粒体内、外膜之间的腔隙中,凋亡信号的刺激使其从线粒体释放至细胞质与凋亡蛋白质激活因子1结合,形成细胞色素C/Apa-f1复合物,从而启动caspase级联反应。
应用原位免疫荧光技术可检测细胞色素C和凋亡诱导因子,还可提供更精确的蛋白质的亚细胞定位信息。
(7)流式细胞术
流式细胞术是检测细胞凋亡的有力工具,具有检测的细胞数量大、可定量分析群体细胞的凋亡以及可同时进行其他相关分析的特点。
DNA含量分析是流式细胞术检测细胞凋亡的常用方法。
细胞凋亡时,细胞膜的通透性增加,使广泛断裂的DNA小片段不能完全封闭于细胞中,检测前对细胞的固定和洗、染处理更加剧细胞膜破裂,促进了DNA片断从细胞内逸出。
因此,凋亡细胞DNA含量减少,与荧光染料的结合减少,故细胞DNA荧光强度降低,在DNA直方图上显示在G0/G1峰前出现凋亡细胞峰。
一般在细胞固定后用任何一种能与DNA结合的染料染色均可,但一般常用PI,因为检测它的荧光波长是目前流式细胞仪所常备的。
DNA含量测定对于检测细胞凋亡具有一定的局限性,其特异性不很高。
主要由于亚G0/G1峰的细胞数目只代表了核碎片的数目,并不代表凋亡细胞的数目,非整倍体细胞、机械损伤的细胞亦可出现亚G0/G1峰。
4、根据SFDA新药报批要求，请设计用于评价阿尔兹海默病新药临床前药理学研究方案？
设计阿尔兹海默症的动物模型：
1）选择性胆碱能神经毒素所致的动物模型
向大鼠脑室注射特异性的胆碱毒1-乙基-1-(2-羟乙基)-氯化氮丙啶(ＡＦ64Ａ),大鼠会出现胆碱能系统和记忆功能损害。
ＡＦ64Ａ,1-乙基-1-(2-羟乙基)-氯化
氮丙啶是一种胆碱能神经元特异性的突触前损伤神经毒素。
其结构与胆碱相似,能选择性地作用于高亲和力胆碱转运(ＨＡＣｈＴ)系统,同时在其体内积聚部位产生毒素作用。
评价:该模型可以模拟大脑皮层、海马等脑区胆碱能神经系统损害和记忆认知行为的改变,但不能形成Ａβ沉积、ＮＦＴｓ等组织病理学改变。
2）以ｔａｕ蛋白过度磷酸化为特征的模型
通过ＡＬＺＥＴ微型渗透泵向大鼠侧脑室灌注ＯＡ(一种磷脂酸酶抑制剂),ＯＡ选择性抑制丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酯酶1Ａ和2Ａ,引起大鼠脑内出现类似老年性痴呆病理改变的双螺旋细丝(ＰＨＦ)样的磷酸化ｔａｕ蛋白和Ａβ淀粉样沉积斑块[15],能造成ＡＤ模型。
评价:由于ＯＡ选择的抑制蛋白磷酸酯酶1Ａ和2Ａ的和提高ＰＫＣ的活性,并能同时表现出ＡＤ标志性的病理改变———老年斑和神经纤维缠结。
该模型主要适用于:①研究ＡＤ发病的病理机制,Ａβ和ｔａｕ在ＡＤ病变中的相互作用;②验证现有ＡＤ治疗方法和药物的疗效。
3）快速老化小鼠(ＳＡＭ)模型竹田俊男通过对ＡＫＲ/Ｔ
自然变异小鼠进行交延代培养得到一种自然快速老化小鼠,该家族诸多品系中的ＳＡＭ-Ｐ/8可作为ＡＤ模型。
ＳＡＭ-Ｐ/8在2月龄就出现学习记忆功能减退,并随着年龄的增加而加重,处于一种低紧张、低恐怖的痴呆状态。
同时ＳＡＭ-Ｐ/8具备ＡＤ的多种特征,诸如皮质萎缩、皮质和海马锥体神经细胞数目下降、ＰＡＳ阳性颗粒和Ａβ样颗粒(β-ＣＩＧＳ)广泛沉着[13]。
评价:该模型是一种比较理想的衰老模型,与自然衰老动物模型相比,其病理特征更加明显,可广泛用于增强学习记忆功能及促智药物的研究。
利用建立好的小鼠模型即采用磁共振影像学分析或者行为学实验来验证、评价新药临床前药理学研究。