黑斑病对甘薯叶酚类物质含量PPO及PAL活性的影响-广西植物
红薯黑斑病防治技术及 牛红薯黑斑病的治疗方法
红薯黑斑病防治技术及牛红薯黑斑病的治疗方法【摘要】红薯黑斑病是影响红薯产量和质量的重要病害之一，其防治技术包括化学、生物和物理方法。
化学防治方法主要使用杀菌剂进行喷洒，生物防治方法则通过利用具有抗性的微生物或生物制剂来控制病害，物理防治方法则包括清除病害部位和灭菌消毒。
牛红薯黑斑病的治疗方法主要是采用化学疗法进行治疗。
结论指出，加强病害监测与防控、综合利用各种防治方法以及科学合理种植红薯是有效防治红薯黑斑病的关键措施。
通过综合运用各种防治技术，可以有效地减少红薯黑斑病的发生，保障红薯产量和质量的稳定提高。
【关键词】红薯黑斑病，牛红薯黑斑病，防治技术，化学防治，生物防治，物理防治，治疗方法，监测与防控，综合利用，科学种植。
1. 引言1.1 红薯黑斑病简介红薯黑斑病是由真菌引起的一种病害，主要侵害红薯叶片和茎部，严重影响红薯的生长和产量。
病害发生初期，叶片上出现小圆形斑点，后期逐渐扩大，变为灰黑色或暗褐色，斑点边缘呈红色。
严重感染的叶片干枯变黄，影响光合作用，导致减产甚至死亡。
病害还可能使红薯质量下降，降低商品价值。
红薯黑斑病主要通过气溜传播，病原菌易在高温高湿的环境下繁殖传播。
及时采取防治措施对红薯黑斑病的防控至关重要。
在日常管理中，定期对红薯进行检查，及时发现病害苗情况，采取相应的防治措施。
合理施肥、保持良好的通风、保持植株间距、清除周围杂草等也是预防红薯黑斑病的有效方法。
通过科学合理的防治措施，可以有效减少病害发生，提高红薯产量和质量。
1.2 牛红薯黑斑病概述牛红薯黑斑病，又称红薯黑斑病，是由赤霉素产生栖生核不变拮抗体所引起的一种病害。
病原菌主要在病叶表面形成座孢子，随风和雨水传播，感染植株后在叶片上形成黑褐色斑点，随后病斑蔓延扩大，使整片叶片枯黄死亡。
牛红薯黑斑病的发病对气候条件和土壤环境要求较严格，多发生在潮湿多雨的环境中。
病害发展快速，给红薯生长和产量造成严重影响。
牛红薯黑斑病防治措施包括化学防治方法、生物防治方法和物理防治方法。
甘薯黑斑病抗性鉴定中黑斑病菌培养方法研究
室 内薯块人工接种鉴定 、 室 内薯苗人工 接种鉴定等 。由于 田 间鉴定费时费工 、 受外界环境影响较大 ， 组织幼嫩 的薯苗接种 会致发病较重 、 不易 区分 品种抗性等级 ， 一般多采用室 内薯块 人工接种鉴定法 。然而 此法在使 用过程 中仍有 不足 ， 尤 其是病原菌 的扩繁效率和纯度。本研究通过利用甘薯液体培 养基培养黑斑病菌 ， 极大程度改善 了传统薯片法的缺陷 ， 可为 甘薯黑斑病 的高效精准鉴定提供新的参考 。
是 防治 黑 斑 病 的 重 要 途 径 之 一 。
取２ ｇ 薯块 （ 薯块颜色 白色为宜） ， 加水煮沸并搅拌 ， 使 薯 块彻底匀浆在溶液 中， 纱布过滤 ， 将滤液 高压灭菌制备甘薯 液
体培养基 。将分离纯化 的黑斑病菌接 入甘薯液体 培养基 中， ２ ８ ｑ Ｃ 摇床 １ ５ ０～ ２ ０ ０ ｒ ／ ａ ｒ ｉ ｎ培养 ２ ０— ２ ４ ｈ 。灭菌纱 布过滤 去 除菌丝后 ， ６ ０ ０ ０ ｒ ／ ｍ ｉ ｎ离心 ５ ａｉ ｒ ｎ ， 之后用无 菌水 悬浮获 得孢 子悬浮液 ， 并将其 Ｄ 调至 １ ． ０ 。
２ 结果 与 分 析
１ ． １ 供 试 材料
用于黑斑病菌活力鉴定的苏薯 ８号和华东 ５ １—９ ３ ， 以及 用于黑斑病抗性鉴定 的苏渝 ３ ０ ３等 ８个甘薯 品种均 由江苏省 农业科学 院粮食作物研究所甘薯研究 室提供 和保存 。
方法科 学高效 ， 操作 简单 ， 不易污染 ， 从 而可为甘薯抗 黑斑病品种选育提供高效精准 的抗性鉴定方法 。
关键词 ： 甘薯 ； 黑斑病 ； 病原 菌培养 ； 抗性鉴定 中图分类号 ： Ｓ ４ ３ ５ ． ３ １ ３ ． １ 文献标志码 ： Ａ 文章编号 ： １ ０ ０ ２—１ ３ ０ ２ （ ２ ０ １ ７ ） ２ ２— ０ １ ２ ０～ ０ ２
甘薯黑斑病的识别及其防治措施
大 田防 病 的关键 是 防止 病苗病 薯 下地 。 可 以从 以下 ３ 个 方 面进行 着 手 ： 一 是高 剪 苗 ， 离 炕面 ３ ｅ ｍ剪 苗 ， 去 除 易感 病 的 白色部 分 。 二 是 药剂 浸苗 ， 把 剪 下 的苗捆好 ， 放人 ５ ０ ％甲基 托 布津 药 液 中浸泡 ５ 分钟 ， 浸 苗 高度 以下部 ６ － ７ ｅ ｍ长 为宜 。三 是还 应避 免 带病 粪肥 下 地 ， 并 加 强地 下害 虫 防治 。
重 要意 义 。
培育 壮 苗 的关 键是 严 格挑 选无 病 种薯 ，防 止病 薯 上床 ， 并对 种薯 进行 消 毒处 理 ， 以杀 死 附在 种薯 表 面 的病 菌 。因此 ， 种薯 出 窖后 ， 要进 行 对种 薯进 行 严格 选 择 ， 剔 除 那些 有 病 、 冻 伤 的薯块 。 种 薯 消毒 主要 采取 温 汤浸种 和 药剂 浸种 。 苗 床要 选新 址 ， 使 用新 土新 粪 ， 种 薯上 床后 ， 前 ３天床 温 为 ３ ５ － ３ ８ ￣ Ｃ， 以后 不 低于 ２ ８ ～ ３ ０ ℃。 出苗 后再 根据 生 长需 要调节 床 温 ， 加强 水肥 管理 ， 苗床 不 宜浇 水过 多过 湿 。
２ ． ４ 安 全 贮 藏
安全储藏也是降低黑斑病危害的主要措施 。 霜前及时收 获， 收 后适 时 入 窖 ， 防止 冻害 。人 窖 前要严 格 剔 除病 薯 ， 人 窖 时 轻拿 轻放 。 重 病 区可用 ｌ ％硼砂 或硼 酸水 浸泡 ５分 钟 ， 晾干 后再 人 窖 。地 下窖 贮 藏前 要进 行 窖 壁处 理 ， 硫 磺 熏蒸 或 铲 除
２ ． ３ 大 田 防 病
１ 甘薯 黑 斑病 危 害及症 状
在已知的 ５ ０ 多 种薯 类 病 害 当 中 ，甘 薯 黑斑 病 对 薯类 的 危害较为严重 ， 从２ ０世 纪 ３ ０ 年 代 由 日本 传入 我 国后 ， 自北 向南 不断 蔓 延 。从 发病 的时 间来 看 ， 甘 薯在 幼 苗期 、 生 长期 、 贮 藏期 等 阶段 都 有 一定 的机 会遭 受黑 斑 病危 害 ， 严 重 时 可使 窖 藏 种薯 的损 失 高达 ６ ０ ％ ～７ ０ ％。根 据 资 料 不完 全 统计 ， 黑 斑 病对 甘 薯 每年 造 成 的产 量 损失 占总产 量 的 ５ ％～ １ ０ ％， 为我 国甘薯 的 生产 带来 了巨大 损 害。甘 薯黑 斑病 的侵 人 途径 多种 多样 ， 病 毒 可 以 直接 进 入 甘 薯 苗 根基 ， 也 可 以从 薯 块伤 口侵 人， 甚至于虫咬 、 裂 口、 根眼等部位 ， 都 成 为 黑 斑 病 的 主要 侵 入 途 径 。甘薯 黑 斑病 除 了会对 薯 类产 量 造成 重 大影 响 之 外 ， 患 病 的甘 薯 可 以产 生 黑疱 霉酮 等 物质 ， 如果 喂 食 家畜 时会 引 起 中毒 或 死 亡 ， 如果 用 患 病 甘 薯 作为 发 酵 原 料 酿 酒 ， 则 对 酵 母 菌或 酶 菌产 生毒 害 ， 不 利 于酒精 的产生 。 甘 薯 黑 斑 病 又被 称 为甘 薯 黑 疤 病 ，主要 危 害薯 苗 和薯 块， 但 对 绿色 部 分不 构成 威胁 。 薯 苗染 病 初期 ， 幼茎 地下 部分 或 茎 基 部 产 生梭 形 或 长 圆形 稍 凹 陷 的黑 斑 ，逐 渐 向地 上 蔓 延， 成 为 纵长 病斑 ， 继续 扩 大使 幼苗 茎基 部 全部 变黑 。 病 苗定 植 不久 ， 叶 片变 黄 ， 植株矮小 ， 最 后病 株 地下 部 腐烂 。薯块 染 病 初 病 部 呈 圆形 或 近 圆形 凹 陷 膏 药状 病 斑 ，坚实 且 轮 廓 清 晰， 中部 生 灰 色 霉层 或 黑 色 毛 状 物 ， 严 重 时 病 斑 融 合成 不 规 则 形 。病菌 深 入薯 肉下 层 ， 使 薯 肉变成 黑 绿色 ， 味苦 。病 部木 质化 、 坚硬、 干腐 。
组织培养过程中PPO活性和总酚含量的研究
第21卷 第1期1999年1月北 京 林 业 大 学 学 报JOURNAL OF BEI J IN G FORESTR Y UN IV ERSIT Y Vol.21,No.1Jan.,1999研究简报组织培养过程中PPO 活性和总酚含量的研究3罗晓芳 田砚亭 姚洪军(北京林业大学生物学院,北京,100083;第一作者女,58岁,教授)摘要 该文研究了阿月浑子、枣树和葡萄组织培养苗生长过程中多酚氧化酶(PPO )活性和总酚含量的变化规律.结果表明:多酚氧化酶活性与组织培养材料的褐变指数相关性不明显,总酚含量与材料褐变指数有一定的相关性,即褐变严重、褐变指数高的材料多酚含量特别高.说明褐变发生的条件是复杂的,不只是多酚和多酚氧化酶直接作用的结果.关键词 组织培养,多酚氧化酶活性,总酚含量,褐变指数中图分类号 Q946.5Polyphenol Oxidase Activities and Phenol Contents in Tissue CultureLuo Xiaofang Tian Yanting Yao Hongjun(College of Plant Sciences ,Beijing For.Univ.,100083,P.R.China )ABSTRACT The regulation of Polyphenol oxidase (PPO )and phenol contents of Ziz yphus j u 2j uba Mill ,V itis vi nif era L.and Pistacia vera L.were studied.The results are as follows :PPO activities have no interrelation with browning index but to some extent phenol contents has.That is to say ,material browning is not the result of directly interaction between PPO and phenol ,there are more reasons to influence it.KE Y WOR DS tissue culture ,Polyphenol oxidase activities ,phenol contents ,browning index1998206209收稿3国家自然科学基金资助项目(39570580)组织培养过程中的褐变现象已经成为影响组培成功的重要因素.褐变现象主要是由多酚氧化酶(PPO )作用于天然底物酚类物质而引起的[1].鞠志国[2～4]研究发现,果实内总酚含量与其褐变密切相关.Maira 和Halevy [6]进行花卉组培时发现酚类物质的含量与其褐变率成正相关,与成活率成负相关.李焕秀等[5]研究梨芽和茎尖多酚氧化酶活性和总酚含量时也发现同样的规律.因此,研究不同种植物组织培养继代过程中的多酚氧化酶活性和总酚含量的变化规律,有助于找到组培材料褐变的机理以及在生产过程中克服褐变的有效方法.1 试验材料与方法1.1 材 料 试验所选用的材料是北京林业大学良种繁育中心组织培养成功的苹果枣(Zizyphus jujuba Mill )、红地球葡萄(V itis vi nif era L.)、阿月浑子(Pistacia vera L.)3个品种.供试材料为同步培养的组织培养苗,接种和培养条件一致.取材方法为随机取样和混合采样,即先在组培室内的培养材料中随机取3瓶,测定时在3瓶中进行混合取样,每5d 取1次样品进行测定,所取测定样为组培苗的叶片,每个品种重复3次.1.2 方 法1.2.1 总酚含量的测定 参考李焕秀[5]的研究方法,进行改进.将所取得的供试材料在分析天平上精确称取,剪碎后进行研磨提取,提取液为50%的乙醇(p H =310),充分提取后过滤在容量瓶中定容,适当稀释后在岛津UV 2120型分光光度计上读取光密度值,检测波长为270nm.以邻苯二酚作标准曲线,计算每克鲜样中总酚的毫克数.1.2.2 多酚氧化酶活性的测定 将混合取得的材料取适量在分析天平上称重,冷冻研磨提取,提取液为0.1mol ・L -1,p H 610的磷酸柠檬酸缓冲液.充分研磨后定容10mL ,0～4℃,3000r ・min -1冷冻离心15min ,上清液即为多酚氧化酶活性待测液,取待测液5mL ,取5mL 反应体系(810mL ,011mol ・L -1磷酸柠檬酸缓冲液,016mL ,1%邻苯二酚,014mL ,011%脯氨酸),充分混合2min 后在30℃的水浴上保温30min ,取出后4min 在UV 2120型分光光度计上读取光密度值,检测波长为460nm.1.2.3 褐变指数 在取样前测定每株材料的高度、褐变级别、株数. 褐变性状分级:0级:茎叶生长正常,分化正常,平均苗高315cm 以上,茎基部无褐色物质;1级:茎叶生长正常,分化后有效苗较少,平均苗高315cm 以上,茎基部有少量褐色物质;2级:茎叶生长缓慢,分化后有效苗较少,平均苗高310cm 以下,茎基部有少量褐色物质;3级:茎叶生长受阻,不分化,平均苗高210cm 以下,茎基部有大量褐色物质;4级:茎叶和茎基部均褐变,材料死亡.褐变指数计算公式:褐变指数=∑(褐变级数×该病级株数)总株数×4×100%2 结果与分析图1 不同种植物组织培养苗继代培养时多酚氧化酶活性变化FIGURE 1 The variety of PPO activity in different speciesmaterial during culturing i n vit ro2.1 不同种植物组培苗继代过程中多酚氧化酶活性的变化 1997年7月5日转接3种材料于分化培养基上,每5d 进行1次测定,其多酚氧化酶活性的变化情况见图113个材料中苹果枣多酚氧化酶活性最高,继代初(0～10d )多酚氧化酶活性有一个下降的趋势,10d 左右后开始回升,并且随着继代时间延长活性不断提高,到下一个继代初达到最高值.红地球葡萄多酚氧化酶活性次之,虽然也有随着继代时间不断提高的趋势,但变化比较平稳.而多酚氧化酶活性最小的阿月浑子在培养初期有1个峰值,继代两周后多酚39第1期罗晓芳等:组织培养过程中PPO 活性和总酚含量的研究 氧化酶活性明显下降,至下一个继代周期开始.2.2 不同种植物组织培养苗继代过程中总酚含量的变化 由图2可以看出:3种材料在组培继代过程中总酚含量都有随继代时间延长逐渐增高的趋势,而且在继代的后期都有所下降.其中,阿月浑子总酚含量最高,并且基本上保持一定含量,但变化幅度较大.其次是苹果枣,在继代过程中呈平稳上升趋势.红地球葡萄的总酚含量最低,随继代时间上升幅度较大.培养初期阿月浑子的总酚含量是红地球的3～4倍,而后期二者的总酚含量已非常接近.图2 不同种植物组织培养苗继代时总酚含量变化FIGURE 2 The phenol content variety of differentspecies material during culturing i n vitro 图3 不同种植物组织培养苗继代培养时褐变指数的变化FIGURE 3 The browning index of different species material during culturing i n vit ro2.3 不同种植物组织培养苗继代过程中的褐变指数 由图3可以看出,阿月浑子的褐变指数随着继代时间的延长有明显增高的趋势,在继代末期可以达到近60%,材料生长严重受抑,部分褐变死亡.苹果枣不发生褐变,红地球葡萄在继代末期有轻微的褐变发生,但是能通过加入一定量的抗坏血酸抑制褐变的发生.而阿月浑子不能通过加入抗坏血酸这一单一措施来抑制.3 结论与讨论(1)多酚氧化酶活性与组织培养材料的褐变不呈正相关.从本研究的结果可以看出,褐变现象较严重的材料阿月浑子的多酚氧化酶活性却是最低的,而不褐变的苹果枣多酚氧化酶活性相当高,说明酶活性的高低不是判断褐变是否严重的充分条件.苹果枣的酶活性在培养初期是下降的,可能是由于继代产生的损伤,使之生活力下降,从而使酶活力也产生一个下降过程.而阿月浑子在培养两周后多酚氧化酶活性就开始下降,这由于随培养过程中褐变的毒害,使材料的生活力下降,从而导致酶活力的下降.因此,对易于褐变的材料及时转接会减轻褐变的毒害作用.(2)3种材料的总酚含量研究表明:褐变与繁殖材料的总酚含量关系很大,对于易褐变的阿月浑子来说,总酚含量在培养过程中一直保持在很高的水平.但相应的是,苹果枣的总酚含量也较高,而且多酚氧化酶活性也很高,而其组培过程中却不发生褐变,原因和鞠志国研究报道的多酚和多酚酶在细胞内存在区域化分布有关.由于区域化分布的存在,总酚含量、多酚氧化酶活性高的苹果枣不易发生褐变,易褐变的阿月浑子是由于材料本身区域化分布的打破而导致.(3)易褐变的材料的褐变指数随着培养时间的延长不断增加,原因是由于褐变产生的氧化49北 京 林 业 大 学 学 报第21卷 产物(醌类物质)对材料的毒害作用使材料生长势变弱,材料的代谢减弱,同时材料的膜透性增加,导致更多的酚类物质渗出液胞,更多的氧化产物进一步毒害材料,直至材料死亡.(4)植物组织培养过程中的褐变是由多种因素综合作用的结果,单一的多酚氧化酶活性和总酚含量并不能说明褐变的机理,二者在外植体褐变过程中也没有明显的相关性.由于多酚氧化酶活性高和总酚含量高的苹果枣并不发生褐变,因此,褐变的发生有其内在的机制,形成酚和酶区域化分布的膜系统是褐变发生的关键因素,这一方面的工作有待于进一步的研究.参考文献1 陈秀芳,王坤范.桃果实发育中褐变因子变化规律的研究.园艺学报,1995,22(3):230～2342 鞠志国,朱广廉,曹宗巽.莱阳茌梨果实褐变与PPO 及酚类物质区域化分布的关系.植物生理学报,1988,14(4):256～2613 鞠志国.酚类物质与梨果实品质的研究进展.莱阳农学院学报,1988,5(3):59～654 鞠志国.PPO 及其底物对梨组织褐变的影响.莱阳农学院学报,1987,4(2):42～475 李焕秀,王乔春,李春秀.梨芽和茎尖多酚氧化酶活性和总酚含量的初步研究.四川农业大学学报,1994,2(2):218～2226 Mager A M ,Harel.Polyphenol oxidases in plants .Phytochemistry ,1979,18:193～215(责任编辑 李文军 胡 涌)59第1期罗晓芳等:组织培养过程中PPO 活性和总酚含量的研究 。
甘薯黑斑病的发病及综合防控技术
甘 薯 黑 斑 病 菌 是真 菌 ， 为子 囊 菌 长 喙 壳菌 侵 染 所 致 。甘 薯 黑斑病菌主要以厚壁 孢子 、 子囊孢子 、 菌丝体等在贮藏病薯和 大 田及 苗 床 土 壤 、 粪 肥 中越 冬 ， 为 翌 年 发 病 的 初 侵 染 来 源 。病 薯、 病苗是病 害近距离及远距离 传播的主要途径 ， 带 菌土壤 、 肥料 、 流水 、 农具及鼠类 、 昆虫 等 都 可传 病 。病 原 菌 主 要 从伤 口 侵入 ， 此外 ， 病原菌 也可从芽眼 、 皮 孔 等 自 然 孔 口及 幼 苗 根 基 部 的 自然 裂 伤等 处 侵 入 。育 苗时 ， 病 薯 或苗 床 中 的 病 菌 直接 从 幼苗基部侵染 ， 形 成 发病 中心 ， 病 苗 上 产 生 的 分 生 孢 子 随 浇 水 而 向四周扩展 ， 使 秧苗发病越来越重 ， 甚至 因种薯 种苗腐烂 造 成 烂 苗床 ， 严 重 影 响 育 苗数 量和 质 量 。栽 植 后 ， 病 苗病 情持 续 发展 ， 病 重 苗 短 期 即可 死亡 ， 轻 病 苗 上 的 病 菌 可 蔓 延 到 新 结 薯 块上侵染 ， 形 成 病 薯 。收 刨 、 运 输 过程 中 易造 成 大 量 伤 口 ， 至 贮
文章 编号 ： １ ６ ７ ４ — ０ ４ ３ ２ （ ２ ０ １ ３ ） 一 ２ ０ — ２ ２ — １
１发 病 症 状
甘薯黑斑病在育苗期 、 大田期和贮藏期均能发生 ， 主 要 为 害 薯 苗 和 薯 块 。用 带 病 种 薯 育 苗 ， 或带有病土 、 病 肥 的 苗 床 上 育苗 ， 都 能 引起 种 薯 及 幼 苗 发 病 。 薯 苗 受 害 多 在 苗 的 基 部 和 其 白色 部 分 开 始 发 病 ， 初形成黑 色圆形小斑点 ， 稍 凹陷 ， 病 斑 逐渐扩 展 ， 以致 包 围 整 个 薯 苗基 部 形 成 黑 根 ， 湿度大 时 ， 根 腐 烂 表 面 生 有 黑 色 刺毛 状 物 。地 上 部 病 苗 衰 弱 ， 叶 片 发黄 ， 发 病 严 重 时 薯 苗 枯 死 。病 苗 栽 到 大 田后 ， 病重的不能扎根 ， 基 部 变 黑腐烂 ， 枯死 ， 造 成 田 间 缺 苗 断 垄 。病 轻 的 在 与 表 土 层 交 接 处 长 出少数侧 根继续 生长 ， 但植 株衰 弱 ， 结 薯少而 小 。薯 块受 害， 多在伤 口（ 虫 口 或 自然 伤 口等 ） 处出现 圆形 、 椭 圆 形 或 不 规 则形病斑 ， 病斑 中间凹陷 ， 病健交 界处轮廓 清楚。病 部组 织 坚硬 ， 薯 肉呈 墨 绿 色 ， 味苦 ， 变 色 组 织 可深 入 薯 皮 下 ２～５ ｍ ｍ， 有时深达 ２ ０～３ ０ ｍｍ。 贮藏期间 ， 病 斑大 ， 扩 展快 ， 常 成 大 片 包 围整 个 薯 块 ， 使薯块腐烂 ， 甚 至 造 成 烂 窖 。潮 湿 时 ， 病 斑 表 面 常 产 生 灰 色 霉 层 和 黑 色 剌 毛 状物 ， 湿度 大时 ， 在 剌 毛 状 物 顶 端 附 有 黄 色 腊 状 小 点 。薯 块 受 害 ， 常变褐色或黑褐色 ， 中 空 或 表皮龟裂 ， 但 薯 块 上 绿 色秧 蔓 一 般 不 发 病 。 ２发 生 特 点
甘薯黑斑病
甘薯黑斑病Sweet Potato Black Rot甘薯黑斑病又称甘薯黑疤病，世界各甘薯产区均有发生。
1890年首先发现于美国，1905年传入日本，1937年由日本鹿儿岛传入我国辽宁省盖县。
随后，该病逐渐由北向南蔓延危害，已成为我国甘薯产区危害普遍而严重的病害之一。
据统计，我国每年由该病造成的产量损失约为5%~10%，此外，病薯中可产生甘薯黑疱霉酮等物质，家畜食用后，可引起中毒，严重者死亡。
用病薯块作发酵原料时，能毒害酵母菌和糖化酶菌，延缓发酵过程，降低酒精产量和质量。
症状苗期、生长期及贮藏期均可发生。
主要危害薯苗、薯块，不危害绿色部分。
苗期症状：受侵染的幼芽基部产生凹陷的圆形或梭形小黑斑，后逐渐纵向扩大至3~5mm，重时则环绕苗基部形成黑脚状。
地上部病苗衰弱，矮小，叶片发黄，重病苗死亡。
湿度大时，病部可产生灰色霉状物（菌丝体和分生孢子），后期病斑丛生黑色刺毛状物及粉状物（子囊壳和厚垣孢子）。
生长期症状：病苗移栽到大田后，病重的不能扎根而枯死，病轻的在接近土面处长出少数侧根，但生长衰弱，叶片发黄脱落，遇干旱易枯死，造成缺苗断垄。
即使成活，结薯也少。
薯蔓上的病斑可蔓延到新结的薯块上，多在伤口处产生黑色斑块，圆形或不规则形，中央稍凹陷，生有黑色刺毛状物及粉状物。
病斑下层组织墨绿色，病薯变苦。
贮藏期症状：贮藏期薯块上的病斑多发生在伤口和根眼上，初为黑色小点，逐渐扩大成圆形、椭圆形或不规则形膏药状病斑，稍凹陷，直径1~5cm 不等，轮廓清晰。
病部组织坚硬，可深入薯肉2~3mm ，薯肉呈黑绿色，味苦。
温湿度适宜时病斑上可产生灰色霉状物或散生黑色刺状物（病菌子囊壳的颈），顶端常附有黄白色蜡状小点（病菌的子囊孢子）。
贮藏后期常与其他真菌、细菌病害并发，引起腐烂。
病原病原为薯长喙壳Ceratocystis fimbriata Ellis et Halsted 属子囊菌亚门长喙壳属真菌，异名有：Ceratostomella fimbriatum (Ell.& Halst.) Elliott 、Ophiostoma fimbriatum （Ell. &Halst.）Nannf.。
甘薯抗黑斑病研究进展
甘薯抗黑斑病研究进展作者：赵琳詹生华葛忠德骆乐谈石江来源：《安徽农学通报》2014年第22期摘要：甘薯黑斑病，又名黑疤病，是严重危害我国甘薯生产的三大病害之一，主要危害甘薯根部及茎部。
因其传播途径多，彻底根除有一定的困难，目前大多是在综合防治的基础上加以控制，其中培育抗病能力强的甘薯品种仍然是最主要、最直接的方法之一。
该文主要对甘薯黑斑病的致病菌、致病机理、抗性遗传方式、分子标记辅助育种的相关研究进行了综述，为今后抗病育种提供参考。
关键词：甘薯；黑斑病；研究进展中图分类号 S632 文献标识码 A 文章编号 1007-7731（2014）22-55-03Research Progress of Disease Resistant of Sweet PotatoZhao Lin et al.（Hangzhou Academy of Agricultural Sciences，Hangzhou 310024，China）Abstract：Sweet potato blight，also known as black rot，is one of the serious harm of sweet potato production in China the three big disease the main harm of the roots and stems of sweet potato. Because of its transmission，so the complete eradication of up to a certain degree of difficulty，most of the current is controlled based on comprehensive prevention，which produce strong disease resistance varieties are still the most direct method of. This research main pathogen of black spot of sweet potato，the cure mechanism，inheritance of resistance，molecular marker assisted breeding and comprehensive description of the system，providing reference for future breeding for disease resistance.Key words：Sweet potato；Black rot；Research progress甘薯Ipomoea batatas（L.）Lam.又称红薯、芋头、地瓜等，为绿色保健食品，有预防癌症、降血压等功能，是世界上重要的粮食、饲料、工业原料及新型能源用块根作物。
甘薯黑斑病的研究现状与展望
文章编号 ：０２—１０ （０ １ ０ — １ — ３ １０ ３ ２ ２ １ ） １ ０ ４ ０ 化 现象 ， 在致病力上可分强致病力株系和弱致病力株系， 病菌
能侵 染 牵 牛 花 、 光 花 等 多种 旋 花 科 植 物 。 月
１ ２ 危 害症 状 ．
甘 薯 （ｐｍ ｅ ａａ ｓ 是 重 要 的 粮 食 、 料 、 业 原 料 及 Ｉ ｏａｂｔｔ ） ｏ ａ 饲 工 新 型能 源 用 块 根 作 物 ， 泛 种 植 于 世 界 上 １０多 个 国 家 。 广 ０ 中 国是 世 界 上 最 大 的甘 薯 生 产 国 ， 年 种 植 面 积 约 ５ ０万 每 ０ ｈ 约 占世 界 的 ５ ． ％ ； 生 产 量 约 １ １ ｔ约 占世 界 的 ｍ， ３５ 年 ．万 ， ８ ． ％ 。甘 薯 黑 斑 病 （ ｌ ｋｒｔ 又 称 黑 疤 病 ， 界 各 地 甘 薯 ２２ ｂａ ｏ） ｃ 世
主要通过种薯 、 种苗 、 土壤 、 粪肥传播 ， 收获贮藏期 ， 在 病 菌可借 人 、 、 畜 昆虫 、 田鼠和农具 等媒介传播 。该病传播来
源较多， 侵染 阶段 较 长 ， 甘 薯 生 产 的各 个 阶 段 都会 造成 新 的 在
侵染 ， 增加病 害的危害程度。病菌 主要 以菌丝体 、 子囊孢子和
（ 江苏省农业科学 院粮食作物研究所 ， 江苏南京 ２０ １ ） １０ ４
摘要 ： 概述了甘薯黑斑病致病菌的生物学特性 、 危害症状 、 致病机理 ， 甘薯对黑斑病的抗性 鉴定 、 抗性 遗传特点和 防治方法 ， 并展望了甘薯黑斑病 的研究前景。 关键词 ：甘薯 ； 黑斑病 ； 病原菌 ； 抗性 ；防治方法 中图分类号 ： ４ ５ ３ ３ １ ￥ ３ ． １ ． 文献标志码 ： Ａ ’
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广西植物Ｇｕｉｈａｉａ ３２（３）：４０６－４０９ ２０１２年５月 ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１０００－３１４２．２０１２．０５．０２４黑斑病对甘薯叶酚类物质含量、ＰＰＯ及ＰＡＬ活性的影响王景景１，刘美艳１，谢逸萍２，孙厚俊２，张 健１＊（１．徐州师范大学生命科学学院，江苏徐州２２１１１６；２．中国农科院甘薯研究中心，江苏徐州２２１１２１）摘 要：选用对甘薯黑斑病抗性不同的品种南京－９２（高抗）和烟台－２５２（高感）的叶片为材料，研究黑斑病对甘薯叶总酚含量、绿原酸含量、类黄酮含量以及苯丙氨酸解氨酶（ＰＡＬ）活性和酚氧化酶（ＰＰＯ）活性的影响。
结果表明：在未受黑斑病侵染时，南京－９２叶片中类黄酮含量、绿原酸含量、ＰＡＬ活性显著或极显著高于烟台－２５２，可以作为选育和鉴定抗黑斑病品种的生理指标，但总酚含量和ＰＰＯ活性差异不显著。
接种后２～８ｄ内，南京－９２叶片内总酚含量和ＰＰＯ活性增加迅速，与烟台－２５２达到显著或极显著差异，总酚含量和ＰＰＯ活性的上升速度快、保持时间长，有利于提高对黑斑病的抵抗能力。
关键词：甘薯；黑斑病；总酚；绿原酸；类黄酮；苯丙氨酸解氨酶；酚氧化酶中图分类号：Ｓ４３５．３１ 文献标识码：Ａ 文章编号：１０００－３１４２（２０１２）０３－０４０６－０４Ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ Ｃｅｒａｔｏｃｙｓｔｉｓ ｆｉｍｂｒｉａｔａ ｏｎ ｐｈｅｎｏｌｉｃｓｃｏｎｔｅｎｔ，ＰＰＯ ａｎｄ ＰＡＬ ａｃｔｉｖｉｔｙｉｎ ｓｗｅｅｔ ｐｏｔａｔｏＷＡＮＧ Ｊｉｎｇ－Ｊｉｎｇ１，ＬＩＵ Ｍｅｉ－Ｙａｎ１，ＸＩＥ Ｙｉ－Ｐｉｎｇ２，ＳＵＮ Ｈｏｕ－Ｊｕｎ２，ＺＨＡＮＧ Ｊｉａｎ１＊（１．Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｘｕｚｈｏｕ Ｎｏｒｍａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｘｕｚｈｏｕ ２１１１１６，Ｃｈｉｎａ；２．Ｓｗｅｅｔ ＰｏｔａｔｏＩｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｘｕｚｈｏｕ ２２１１２１，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｗｏ ｖａｒｉｅｔｉｅｓ ｏｆ ｓｗｅｅｔ ｐｏｔａｔｏ ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ ｈｉｇｈ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ－Ｎａｎｊｉｎｇ－９２ａｎｄ ｈｉｇｈ ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｌｅ－Ｙａｎｔａｉ－２５２ｔｏ Ｃｅｒ－ａｔｏｃｙｓｔｉｓ ｆｉｍｂｒｉａｔａ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ｆｏｒ ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ ｔｈｅ ｃｏｎｔｅｎｔ ｏｆ ｔｏｔａｌ ｐｈｅｎｏｌ，ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ ａｃｉｄ，ｆｌａｖｏｎｏｉｄ ａｎｄ ｔｈｅ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆＰＰＯ ａｎｄ ＰＡＬ ｉｎ ｓｗｅｅｔ ｐｏｔａｔｏ ｌｅａｖｅｓ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｆｌａｖｏｎｏｉｄ ｃｏｎｔｅｎｔ，ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ ａｃｉｄ ｃｏｎｔｅｎｔ ａｎｄ ＰＡＬａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ Ｎａｎｊｉｎｇ－９２ｗｅｒｅ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ Ｙａｎｔａｉ－２５２ａｎｄ ｅｖｅｎ ｒｅａｃｈｅｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｏｒ ｅｘｔｒｅｍｅｌｙ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒ－ｅｎｃｅ ｉｎ ｎｏｒｍａｌ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ，ｗｈｉｃｈ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｒｅｇａｒｄｅｄ ａｓ ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ ｉｎｄｉｃｅｓ ｏｆ ｉｄｅｎｔｉｆｙｉｎｇ ａｎｄ ｓｅｌｅｃｔｉｎｇ ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｖａｒｉｅｔｙ．Ｉｔ ｗａｓ ａｌｓｏ ｆｏｕｎｄ ｔｈａｔ ｔｏｔａｌ ｐｈｅｎｏｌ ｃｏｎｔｅｎｔ ａｎｄ ＰＰＯ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｔｗｏ ｖａｒｉｅｔｉｅｓ ｗｅｒｅ ｎｏｔ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｉｎ ｎｏｒｍａｌｃｏｎｄｉｔｉｏｎ，ｈｏｗｅｖｅｒ，ｗｈｅｎ ｉｎｆｅｃｔｅｄ ｂｙ Ｃ．ｆｉｍｂｒｉａｔａ，ｔｏｔａｌ ｐｈｅｎｏｌ ｃｏｎｔｅｎｔ ａｎｄ ＰＰＯ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ Ｎａｎｊｉｎｇ－９２ｉｎｃｒｅａｓｅｄｓｈａｒｐｌｙ ａｎｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｏｒ ｅｘｔｒｅｍｅｌｙ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈａｎ ｔｈａｔ ｏｆ Ｙａｎｔａｉ－２５２ｗｉｔｈｉｎ ２ｔｈ ｔｏ ８ｔｈ ｄａｙ．Ｔｈｅ ｔｏｔａｌ ｐｈｅｎｏｌｃｏｎｔｅｎｔ ａｎｄ ＰＰＯ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｒａｉｓｅｄ ｓｐｅｅｄｉｌｙ ａｎｄ ｍａｉｎｔａｉｎｅｄ ｌｏｎｇ ｐｅｒｉｏｄ ｗｈｉｃｈ ｃｏｕｌｄ ｉｎｃｒｅａｓｅ ｔｈｅ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ａｂｉｌｉｔｙ ｔｏ Ｃ．ｆｉｍｂｒｉａｔａｏｆ ｓｗｅｅｔ ｐｏｔａｔｏ．Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：ｓｗｅｅｔ ｐｏｔａｔｏ；Ｃａｔａｌｙｓｔｓ ｆｉｍｂｒｉａｔａ；ｔｏｔａｌ ｐｈｅｎｏｌ；ｃｈｌｏｒｏｇｅｎｉｃ ａｃｉｄ；ｆａｌｃｏｎｏｉｄ；ｐｈｅｎｙｌａｌａｎｉｎｅ ａｍｍｏｎｉａｌｙａｓｅ；ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌ ｏｘｉｄａｓｅ＊收稿日期：２０１１－１２－２３ 修回日期：２０１２－０４－０８基金项目：中央公益性行业（农业）科研专项（ｎｙｈｙｚｘ０７－０１２－０１）；国家甘薯产业技术体系协作课题（ＣＡＲＳ－１１－Ｂ－０９－Ａ）［Ｓｕｐｐｏｒｔｅｄ ｂｙ Ｓｐｅｃｉａｌ Ａｇｒｏ－Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｆｕｎｄ ｆｏｒ ｔｈｅ Ｐｕｂｌｉｃ Ｉｎｔｅｒｅｓｔｓ（ｎｙｈｙｚｘ０７－０１２－０１）；ｔｈｅ Ｎａｔｉｏｎａｌ Ｃｏｏｒｄｉｎａｔｉｏｎ Ｔａｓｋ ｏｆ Ｓｗｅｅｔ Ｐａｔａｔｏ Ｉｎｄｕｓｔｒｙ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｓｙｓｔｅｍ（ＣＡＲＳ－１１－Ｂ－０９－Ａ）］作者简介：王景景（１９６７－），女，江苏徐州人，硕士研究生，从事生物化学与分子生物学的研究，（Ｅ－ｍａｉｌ）ｚｚｚｗａｎｇｊｉｎｇ＠１２６．ｃｏｍ。
＊通讯作者（Ａｕｔｈｏｒ ｆｏｒ ｃｏｒｒｅｓｐｏｎｄｅｎｃｅ，Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｈａｎｇｊｉａｎ＠ｘｚｎｕ．ｅｄｕ．ｃｎ） 甘薯（（ｓｗｅｅｔ ｐｏｔａｔｏ，Ｉｐｏｍｏｅａ ｂａｔａｔａｓｌａｍ）是我国重要粮食之一，而甘薯黑斑病（Ｃｅｒａｔｏｃｙｓｔｉｓｆｉｍｂｒｉａｔａ Ｅｌｌｉｓ．ｅｔ Ｈａｌｓｔ）是甘薯栽培和贮藏中的重要病害之一（周茂繁等，１９９２）。
据统计，我国每年由该病造成的产量损失为５％～１０％，危害严重时造成的损失为２０％～５０％，甚至更高。
我国已将该病列为国内检疫对象，筛选、种植抗病品种是最重要的综合防治措施。
近年来对甘薯黑斑病的研究主要集中在抗性资源筛选和品种选育、抗性遗传和抗性鉴定方法研究，抗病基因分子标记、药剂防治等方面，甘薯抗黑斑病生理生化机制研究较少。
甘薯抗黑斑病的生理过程相当复杂，抗病性的高低受植株体内多种抗性生理进程的综合影响。
植物酚类化合物是植物次生代谢物的主要类型之一（Ｂａｌａｓｕｎｄｒａｍ等，２００６），是苯丙烷类代谢的途径的产物，该途径中催化苯丙烷类代谢第一步反应的酶－苯丙氨酸解氨酶（ＰＡＬ），是酚类物质、植保素、黄酮和木质素等抗菌物质合成过程中关键酶和限速酶（Ｄｉｘｏｎ等，２００２）。
酚类物质对于植物抗病性有着重要的作用，而这些物质的含量总是与ＰＡＬ的活性密切相关，因此ＰＡＬ被认为是植物中重要的防御酶。
酚类化合物本身对病原物具有毒害作用（Ｎｄｕｂｉｚｕ，１９７６），而酚类植保素如绿原酸和黄酮类植保素等在阻碍入侵病原菌菌丝的正常发育的同时对植物也起到一定的保护作用。
酚类物质氧化产物较酚类物质的杀菌能力强许多倍，例如，绿原酸酶促氧化产物的杀菌力比本身提高了３０％。
有些酚类物质原来不具备杀菌能力，酚氧化酶氧化后转化成杀菌物质，因此多酚氧化酶（ＰＰＯ）也被认为与植物的抗病性关系密切（陈伟等，１９９７）。
甘薯抗黑斑病的酚类物质代谢研究未见报道。
本试验以甘薯叶为材料，通过人工接种黑斑病菌，研究酚类物质与甘薯黑斑病抗性之间的关系，以期为鉴定和选育抗黑斑病品种提供可靠的抗性指标和理论依据。
１ 材料与方法１．１供试甘薯品种及黑斑病菌悬浮液的制备供试甘薯品种：南京－９２（高抗黑斑病）和烟台－２５２（高感黑斑病）。
甘薯黑斑病病原物由江苏省徐州市农科院中国甘薯研究中心提供。
在ＰＤＡ平板培养基上接种甘薯黑斑病菌，２６℃培养箱倒置培养，当整个平板长满菌丝，孢子呈黑色时，向平板内加入无菌水，用接种环剥离孢子，制成孢子悬液，用血球计数板在显微镜下计数，配成每１ｍＬ为１×１０７孢子的悬浮液备用。
１．２试验方法剪生长一致的甘薯心叶下６个茎节的薯苗，将薯苗茎基部剪口对齐后浸入菌液３～５ｃｍ深，２０ｍｉｎ后取出，以此作为处理组，以浸入清水２０ｍｉｎ为对照组，将处理组和对照组薯苗栽在无病蛭石里，栽后浇水保湿，每２ｄ取长势基本相同的第二、三完全展开的功能叶进行各项指标测定，３次重复取样。
总酚含量的测定参照林植芳等（１９８８）的方法。
绿原酸含量的测定：取待测样品０．２ｇ加入无水乙醇（１∶５Ｗ／Ｖ）室温下提取１ｈ，取上清液，用７５２紫外及可见分光光度计于３２４ｎｍ下测定ＯＤ值，以ＯＤ３２４／ｇ－１ ＦＷ／ｍＬ－１表示甘薯叶片中绿原酸的相对含量。
类黄酮含量的测定参照庄炳昌等（１９９３）的方法。
苯丙氨酸解氨酶（ＰＡＬ）活性的测定参照王敬文等（１９８２）的方法。
酚氧化酶（ＰＰＯ）活性的测定参照李忠光等（２００５）的方法并加以改进，取０．１ｇ样品于研钵中，加５００μＬ ｐＨ５．８柠檬酸—磷酸缓冲液冰浴上研磨，然后转移到离心管中，再加５００μＬ缓冲液定容至１ｍＬ，摇匀。
在冷冻离心机上１０ ０００ｒ／ｍｉｎ－１离心１５ｍｉｎ，取上清液测定酶的活性，反应液为３ｍＬ邻苯二酚和０．１ｍＬ酶提取液，用０．１ｍＬ蒸馏水代替酶提取液作空白对照，于波长４１０ｎｍ下测定反应液光密度值（ＯＤ）的变化，把每１ｍｉｎ光密度值变化０．０１定义为一个酶活性单位（Ｕ）。
试验数据用ＳＰＳＳ１７．０软件进行统计分析，Ｐ＜０．０５为显著性差异，Ｐ＜０．０１为极显著性差异。
２ 结果与分析２．１黑斑病对两种不同抗性薯叶中总酚含量变化的影响 黑斑病对甘薯叶片总酚含量的影响见图１。
未接菌前，高抗品种南京－９２与高感品种烟台－２５２总酚含量３次取样平均值分别为１０．９１ｍｇ／ｇＦＷ和９．０１ｍｇ／ｇＦＷ，差异不显著。
接种病原菌后南京－９２叶片内总酚含量迅速上升，在第６天达到峰值，随后开始逐渐下降。
烟台－２５２总酚含量变化曲线与南京－９２趋势一致，但是增加速度较慢。
分析表明，接种病原菌后２～８ｄ时，南京－９２叶片内总酚含量极显著高于烟台－２５２。
高抗品种在接菌初期总酚７０４３期 王景景等：黑斑病对甘薯叶酚类物质含量、ＰＰＯ及ＰＡＬ活性的影响含量迅速达到较高水平，在较长一段时间内保持高浓度，这对于抵抗病原菌的入侵有着积极的意义。