几种三聚氰胺快速检测方法比较
食品三聚氰胺检测方法
食品三聚氰胺检测方法
食品中三聚氰胺的检测方法主要有以下几种：
1. 高效液相色谱-质谱联用法：利用高效液相色谱将样品中的三聚氰胺分离出来，然后使用质谱进行定性和定量分析。
2. 气相色谱-质谱联用法：将样品中的三聚氰胺通过气相色谱分离，再利用质谱进行定性和定量分析。
3. 酶联免疫吸附测定法：利用酶联免疫吸附技术，制备专门的三聚氰胺抗体，将样品与抗体结合，在检测中利用酶的催化作用来定量分析三聚氰胺的含量。
4. 端子法：将含有三聚氰胺的食品样品与二甲腈反应生成蓝色复合物，然后通过分光光度法测定蓝色复合物的吸光度，从而计算出三聚氰胺的含量。
5. 电化学法：利用电化学传感器或电极来检测食品中的三聚氰胺，根据电化学信号的变化来定量分析。
需要注意的是，不同的检测方法在准确度、灵敏度、样品处理等方面可能存在差异，选择合适的方法需要综合考虑实际需求和条件。
而且在实际应用中，常常采用多种方法进行交叉验证，以提高检测的可靠性和准确性。
牛乳中三聚氰胺的快速检测
2007年3月, 美国发生多起因 年 月 食用宠物食品而导致幼儿奶粉导致婴幼儿产生肾 结石病症的严重事件。两起 结石病症的严重事件。 事件的原因都是在食品或饲 料中非法添加大剂量三聚氰 料中非法添加大剂量三聚氰 因此, 胺。因此 如何快速准确的 分析食品和饲料中的三聚氰 胺成为食品企业、食品管理 胺成为食品企业、 机构和广大消费者密切关注 的问题。 的问题。
使用步骤】 【使用步骤】 1、在进行测试前先完整阅读使用说明书，使用前将检测卡和待 、在进行测试前先完整阅读使用说明书， 检样本恢复至室温。 检样本恢复至室温。 2、从原包装袋中取出检测卡，打开后请在一个小时内尽快地使用。 、从原包装袋中取出检测卡，打开后请在一个小时内尽快地使用。 3、将检测卡平放，用移液器或滴管吸取稀释后的待检样品溶液， 、将检测卡平放，用移液器或滴管吸取稀释后的待检样品溶液， 垂直滴加3~4 滴（约80µl）于加样孔中，加样后开始计时。 垂直滴加 ）于加样孔中，加样后开始计时。 4、检测结果应在 分钟读取， 、检测结果应在3~5分钟读取，其他时间判读无效，根据示意 分钟读取 其他时间判读无效， 图判定结果。 图判定结果。
【注意事项】 注意事项】 1、检测卡请在保质期内一次性使用； 、检测卡请在保质期内一次性使用； 2、使用前将检测卡和待检样本恢复至温； 、使用前将检测卡和待检样本恢复至温； 3、如果样品偏酸或偏碱，需要调节 、如果样品偏酸或偏碱，需要调节pH 至 中性后再检测； 中性后再检测； 4、尽量不要触摸检测卡中央的白色膜面； 、尽量不要触摸检测卡中央的白色膜面； 5、样品滴管不可混用，以免交叉污染； 、样品滴管不可混用，以免交叉污染；
【产品组成】 产品组成】 三聚氰胺免疫胶体金快速检测卡 样品稀释离心管（ 管 样品稀释离心管（1管 / 份，内 含样品稀释液） 含样品稀释液） 滴管（2个 / 份） 滴管（ 个 干燥剂（ 片 干燥剂（1片 / 袋）
三聚氰胺
用于奶制品食品中三聚氰胺测定方法的固相萃取柱agela pcxagela 阳离子交换柱(PCX)目前检测三聚氰胺的方法很多，HPLC，液质和气质联用是较常用的方法。
本站收集部分国内相关文章，并整理如下。
方法包括：GC-MS，Spectra-Quad线检测，超高效液相色谱_电喷雾串联质谱法，反相高效液相色谱法，高效液相色谱-二极管阵列法，高效液相色谱法(HPLC)，高效液相色谱-四极杆质谱联用，固相萃取与高效液相色谱联用，液相色谱串联质谱法(LC-MS MS）等。
液质，气质联用检测三聚氰胺1、超高效液相色谱-喷雾串联质谱法测定饲料中残留的三聚氰胺饲料样品经1%三氯乙酸-甲基亚砜提取,Waters Oasis MCX柱净化,超高效液相色谱分离,最终采用电喷雾串联四极杆质谱进行检测。
结果表明,三聚氰胺在饲料中的含量范围为10～5 000μg / kg时,线性关系良好( r >0199) 。
在10～100μg / kg 的添加水平范围内的平均回收率为83%～94%,相对标准偏差为4.%～6.%。
该方法的检出限为10μg / kg。
2、高效液相色谱- 四极杆质谱联用测定饲料中三聚氰胺含量试验采用自动固相萃取装置, 建立合适的过柱程序; 运用Agilent HP1100 高效液相色谱- 四极杆质谱联用仪, 优化质谱条件, 建立饲料中三聚氰胺残留检测方法。
方法的线性范围为0.010～0.500 μg/ml, 相对标准偏差在3.2%～7.7%之间,回收率在72.4%～91.2%之间, 具有较好的准确度和精密度。
3、液相色谱串联质谱法(LC - MS/MS)分析宠物食品中三聚氰胺建立了液相色谱- 串联质谱(LC - MS/MS)用于宠物食品中三聚氰胺检测的方法, 并将其与美国食品药品监督管理局(US FDA)公布的气相色谱- 质谱(GC - MS)和液相色谱(LC)方法进行了对比,结果发现LC - MS/MS的方法, 前处理过程简单, 是一种高灵敏度、高选择性的分析方法。
三聚氰胺检测方法
创新点
• 目前测定三聚氰胺 的方法已有高效液相法和气相-质谱法， 目前也有液相色谱-质谱法的报道。这些方法，存在试验需要衍 生、操 作繁琐、过程冗长、试剂用量较大及灵敏度低等缺 点。 本研究中采用萃取柱净化，离子色谱-电导法 和离子色谱-紫外法 分别检测化肥中阴离子和三聚 氰胺的含量，无需衍生，操作简单， 一次进样即可测 试多种离子，方法实用可靠，可满足化肥生产和 使用 安全检测的需要
流程
• 2.1色谱条件 离子色谱-电导检测器测阴离子 条件：SH-AP-1 阴离子色 谱柱（250 mm×4.0 mm）为 亲水性阴离子色谱柱；淋洗液为淋洗液 发生器产生 的高纯氢氧化钾溶液，梯度洗脱及浓度见表 1，流量 0.8 mL/min，进样量 25 μL，柱温和检测器池温均为 35 ℃，SHY-6型抑制 器，抑制电流 120 mA，系统压力 10.2 MPa。以保留时间定性，峰面 积定量。
特点
• (1）高压。检测中流动相由于是液体，经过色谱柱阻力较大。为了可 以顺利通过色谱柱，对载液要高压处理。
• （2）高效。实施分离过程的高效能。可以采用固定相与流 动相以保 证分离效果处于最佳，分离效能可以提高出许多倍。
• （3）高灵敏度。采用紫外检测器的应用，精度达到了0.01ng, 检测中 进样量可以达到μL数量级的精度。
• 4.2 提取溶液 对于 3 份加入了 1.0μg/g 三聚氰胺的样品依次用高氯酸 0.2mol/L（A 方法）、三氯乙酸 1%+乙腈（B 方法）、三氯乙酸 1% （依据标准 GB/T22388－2008）提取。根据三种试验结果表明， 回收 率依次为 71.5%，64.7% 和 99.3%。实验提取溶液使用 1% 三氯乙酸。
称取 7 g 三氯乙 酸，用超纯水定
三聚氰胺的检测方法
重量法、电位滴定法、高效液相色谱法、气相色谱－质谱联用法、液相色谱－质谱联用法、毛细管电泳法、近红外线吸收法、比色法、免疫学法1.1重量法：苦味酸法和升华法。
苦味酸法的原理是将三聚氰胺样品用水溶解，再向该溶液中加入苦味酸使其与三聚氰胺生成沉淀，根据生成沉淀的量计算出样品中三聚氰胺的含量。
升华法的原理是将样品置于升华装置中，使样品中三聚氰胺受热升华，准确称取剩余固体的质量。
这两种方法用于工业上检测三聚氰胺的含量准确度相对较高，但分析时间都比较长，操作繁琐，不适合高效快速检测。
1.2电位滴定法电位滴定法在工业中检测三聚氰胺较重量法简单，实验时间较短，但准确度不高。
其实验原理：以硫酸标准溶液滴定含有三聚氰胺的溶液，通过公式用等当量点时消耗硫酸标准溶液的体积计算出三聚氰胺的含量。
不用于食品。
1. 3 高效液相色谱法（HPLC）用HPLC 检测三聚氰胺含量，检出限低，准确度相对较高，可用于食品中三聚氰胺的检测。
实验的一般操作步骤是：用沉淀法先将奶粉中的蛋白质沉淀，然后提取奶粉中的三聚氰胺，将提取液用阳离子交换固相萃取柱净化，最后用高效液相色谱进行检测，外标法定量。
1. 4气相色谱法和质谱联用法（GC-MS）与HPLC 法比较，GC-MS 具有准确度高、检出限低（0.05 mg/kg），更适合食品中三聚氰胺的微量检测。
该方法样品经蛋白沉淀离心后过MCX 固相萃取柱净化、氮气吹干、硅烷化衍生, 再由气相色谱－质谱联用仪检测。
由于三聚氰胺为强极性化合物，难汽化，直接对其进行GC-MS 测定不但灵敏度低且峰拖尾严重，为此王征采用N，O- 双三甲基硅基三氟乙酰胺衍生化，极性的减弱使其容易进行汽化，有利于待测物和基质的分离,降低了背景化学噪音的影响。
王立媛等用GC-MS 方法检测奶粉和鲜奶中三聚氰胺的加标回收率在82.3%～110.0%之间，相对标准偏差（RSD）＜10%，方法净化效果好、准确度高、灵敏度好。
但是GC- MS 法需要进行衍生化, 样品处理步骤复杂,不适用于多杂质生物检材中三聚氰胺的快速筛查和定量分析。
三聚氰胺的毒性和检测方法的研究进展
三聚氰胺的毒性和检测方法的研究进展发布时间：2021-10-22T03:05:01.076Z 来源：《科学与技术》2021年7月19期作者：尹梦阳[导读] 美国FDA和我国政府都严禁在饲料或食品中添加该类物质尹梦阳河南能源化工集团中原大化有限责任公司河南省 450000摘要：美国FDA和我国政府都严禁在饲料或食品中添加该类物质。
本文就三聚氰胺的理化性质、生产用途、代谢、毒性以及检测方法的研究进展进行了综述。
关键词：三聚氰胺；毒性；检测方法；前言：三聚氰胺是一种用途比较广泛的有机化工产物。
由于三聚氰胺的含氮量达到66％左右，所以被恶意地添加到牛奶中，用来冒充蛋白质。
我国出台了国家标准，规定采用高效液相色谱法、气相色谱一质谱联用法或液相色谱一质谱／质谱法检测原料乳与乳制品中的三聚氰胺。
通过法规、标准，一定可以有效的监控、抑制人为添加三聚氰胺牟取非法利益的行为。
一、三聚氰胺的理化性质1834 年，德国的化学家Liebig 首次合成了相对分子质量为126.12，分子式为C3N3（NH2）3 的白色单斜晶体物质———三聚氰胺（俗称密胺）其物理性状为白色单斜晶体、无味、低毒、无刺激性，高温下可能分解产生氰化物（有较大毒性），比重1.573（14 ℃），熔点354 ℃，能溶于甲醛、乙酸，微溶于水及醇，不溶于醚、苯和四氯化碳。
盐酸、硫酸、硝酸、乙酸、草酸等均能与三聚氰胺反应形成盐类化合物。
三聚氰胺有良好的光泽度、机械强度、绝缘性能和稳定性，不易燃，对水、热、老化、电弧和化学腐蚀均具有耐受性。
在医药制造、纺织及皮革加工、木材和塑料制造、涂料、造纸、电气和化肥等行业中均有广泛应用。
二、三聚氰胺的毒性机理1.三聚氰胺的毒理机制主要是通过刚断奶的大鼠和成年大鼠的饲喂试验评估。
对比分析刚断奶的大鼠和成年大鼠饲喂含三聚氰胺的日粮后的生理生化现象，发现三聚氰胺对成年大鼠的毒性高于刚断奶的大鼠，并且有明显的慢性毒性。
主要原因是三聚氰胺的结晶体在动物机体内消除缓慢，难溶解而容易蓄积，最终引起慢性毒性。
三聚氰胺检测原理
三聚氰胺检测原理
三聚氰胺是一种有机化合物，其检测原理主要是基于其与蛋白质的相互作用。
在三聚氰胺检测中，常用的方法包括光谱法、色谱法、质谱法等。
其中，光谱法是最常用的一种方法，其原理是利用三聚氰胺与蛋白质形成的复合物在特定波长下吸收光线的特性来进行检测。
在光谱法中，常用的检测方法包括紫外-可见光谱法和荧光光谱法。
紫外-可见光谱法是利用三聚氰胺与蛋白质复合物在特定波长下吸收光线的特性来进行检测，通过测定吸光度的变化来确定三聚氰胺的含量。
而荧光光谱法则是利用三聚氰胺与蛋白质复合物的荧光特性来进行检测，通过测定荧光强度的变化来确定三聚氰胺的含量。
除了光谱法外，色谱法也是一种常用的三聚氰胺检测方法。
色谱法主要包括气相色谱法和液相色谱法两种。
气相色谱法是将样品中的三聚氰胺通过气相色谱柱进行分离，再通过检测器进行检测，从而确定其含量。
而液相色谱法则是将样品中的三聚氰胺通过液相色谱柱进行分离，再通过检测器进行检测，从而确定其含量。
此外，质谱法也是一种高灵敏度的三聚氰胺检测方法。
质谱法是将样品中的三聚氰胺通过质谱仪进行分析，通过测定其分子离子的质荷比来确定其含量。
质谱法具有高灵敏度、高分辨率和高准确性的特点，是目前三聚氰胺检测中较为常用的方法之一。
综上所述，三聚氰胺的检测原理主要是基于其与蛋白质的相互作用。
常用的检测方法包括光谱法、色谱法和质谱法。
不同的方法具有各自的特点和适用范围，可以根据实际情况选择合适的方法进行检测。
希望本文能够对三聚氰胺检测原理有所了解，有助于相关领域的研究和实践工作。
三聚氰胺的快速检测方法
三聚氰胺的快速检测方法
【目视比浊测定法】 1. 适用范围 本方法适用于原料乳、 纯乳、纯乳粉以及饲料中三聚氰胺的现场快速限量检 测。 2. 方法原理 样品中的三聚氰胺经过大约 5min 的快速提取后， 与铵盐沉淀试剂发生反应， 生成相对稳定的混悬液体，在比浊管中与对照液目视比对判定结果。 3. 检验材料 3.1 3.2 3.3 3.4 3.5 3.6 3.7 3.8 3.9 A 试液 20mL×2 瓶； B 试液 20mL×2 瓶； 5mL 离心管 20 只；ห้องสมุดไป่ตู้3mL 一次性吸管 20 支； 注射器 20 只； 密闭式微孔滤膜 20 个； 比浊管 6 只； 米字比浊片 6 片； 100mg/L 的三聚氰胺对照液 8mL×1 瓶。
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几种三聚氰胺快速检测方法比较
2007年3月, 美国发生多起因食用宠物食品而导致宠物中毒死亡事件。
2008 年9月, 中国发生因食用三鹿婴幼儿奶粉导致婴幼儿产生肾结石病症的严重事件。
两起事件的原因都是在食品或饲料中非法添加大剂量三聚氰胺。
因此, 如何快速准确的分析食品和饲料中的三聚氰胺成为食品企业、食品管理机构和广大消费者密切关注的问题。
为科学合理地筛选快速、简便、准确、经济的三聚氰胺检测方法，中国计量院提出搭建快速检测方法测试平台的建议，并承担了科技部应急支撑项目“三聚氰胺快速检测技术测试平台的建设”。
该平台启动以来，以权威检测技术为支撑，以盲样测试结果为依据，开展技术评价，在国内首创“统一现场测试、统一评价方案、统一判别依据、统一专家评审、统一现场公布测试结果”的三聚氰胺检测方法评价模式。
以国际比对互认为基础，建立乳与乳制品中的三聚氰胺气相色谱同位素稀释质谱法和液相色谱同位素稀释质谱法，为评价快速检测方法奠定了重要的技术基础。
为确保三聚氰胺检测结果的有效性，全面提高检测实验室对原料乳及奶粉中三聚氰胺检测能力水平，测试平台先后组织实施了5轮全国三聚氰胺快速检测技术方法的现场统一测试评价活动，共测试评价了56种检测技术或方法，有效推出液相色谱法、拉曼光谱法、胶体金试免疫层析法（胶体金速测卡法）、酶联免疫法(ELISA试剂盒法) 4种三聚氰胺快速检测方法。
本文对常用的三种三聚氰胺快速检测方法：液相色谱法、酶联免疫法和胶体金免疫层析法的原理、特点做简单介绍并对其应用进行比较。
1. 液相色谱法
国家标准GB /T 224002008公布了原料乳中三聚氰胺快速检测的高效液相色谱法（HPLC法）, 采用乙腈作为原料乳中的蛋白质沉淀剂和三聚氰胺提取剂, 0. 2 um微孔滤膜过滤后供HPLC 测定。
采用的色谱柱为强阳离子交换色谱柱, 流动相为乙腈 冲液( 10 mmo l/L 柠檬酸, 10 mmo l/L辛烷磺酸
钠, 调节pH 至3. 0 ),采用紫外/二极管阵列检测器检测, 定量限为
0. 3mg /kg, 定量灵敏度提高, 且分析时间较短。
HPLC法虽然应用普遍, 但存在一定的局限性, 样品前处理过程复杂, 仪器昂贵,对检测人员的要求高，检测成本高。
1.1 原理
用乙腈作为原料乳中的蛋白质沉淀剂和三聚氰胺提取剂，强阳离子交换色谱柱分离，高效液相色谱-紫外检测器/二极管阵列检测器检测，外标法定量。
1.2 主要试剂和材料
1.2.1 乙腈（CH3CN）：色谱纯。
1.2.2 磷酸（H3PO4）。
1.2.3 磷酸二氢钾（KH2PO4）。
1.2.4 三聚氰胺标准物质（C3H6N6）：纯度大于或等于99%。
1.2.5 三聚氰胺标准贮备溶液：1.00×103 mg/L。
1.3. 仪器
1.3.1 液相色谱仪：配有紫外检测器/二极管阵列检测器。
1.3.2 分析天平：感量0.0001 g 和0.01 g。
1.3.3 pH 计：测量精度±0.02
1.4 检验操作：按国标GB /T 224002008要求操作。
2. 酶联免疫吸附法( ELISA)
酶联免疫法(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)是在免疫荧光和组织化学基础上发展起来的新技术。
其主要是利用抗原与抗体的高特异性反应，通过合适的载体，使酶标抗原或抗体与待测样品反应，形成酶标抗原抗体复合物，在相应的酶底物参与下，复合物上的酶催化底物使之水解成有色物质。
一定条件下，呈色物质与待测物的含量直接相关，因此可以根据呈色物质颜色的深浅，对待测样品进行定性定量分析。
近几十年, 国内外已建立了数十种药物残留的ELISA 分析技术, 检测水平可达ng 甚至pg水平。
一些发达国家已经研制成商品化的检测试剂盒用于快速检测。
近十多年来我国也研发出多种商品化的检测试剂盒用于快速检测。
酶联免疫吸附法具有特异性高、灵敏度高、稳定性好、操作简单、成本低，并可同时对大批量样品进行快速检测的特点，目前广泛应用于食品中兽药、毒素检测的初筛中。
08年中国出现“三聚氰胺奶粉事件”时，主要使用的进口三聚氰胺速测试剂盒，现在国内也已研发出商品化的三聚氰胺速测试剂盒，试剂盒灵敏度0.01ppm,最低检测限为0.1ppm,已广泛用于快速检测。
2.1 原理
采用间接竞争ELISA方法，在酶标板微孔条上预包被三聚氰胺抗原，样本残留的三聚氰胺和微孔条上预包被的抗原竞争抗三聚氰胺抗体，加入TMB底物显色，样本吸光值与其残留物三聚氰胺成负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样本中三聚氰胺的含量。
2.2 主要试剂、材料
三聚氰胺ELISA检测试剂盒
2.3 仪器
2.3.1 兽药残留分析仪或酶标仪
2.3.2 分析天平：感量0.01g
2.4 检验操作：按三聚氰胺ELISA检测试剂盒说明书要求操作。
3. 胶体金免疫层析技术
胶体金免疫层析技术（Colloidal Gold Immunochromatographic Assay ，GICA)是以胶体金为标记物的免疫层析技术，免疫层析
( Immunochromatography, IC)技术是20世纪80年代发展起来的一种将免疫技术和色谱层析技术相结合的快速免疫分析方法。
其原理是以条状纤维层析材料为固相,借助毛细作用使样品溶液在层析条上泳动,同时,使样品中的待测物与层析材料上针对待测物的受体(如抗体或抗原)发生高特异、高亲和性的免疫反应,层析过程中免疫复合物被富集或截留在层析材料的一定区域(检测带) ,通过酶促
显色反应或直接使用可目测的着色标记物(如胶体金) ,短时间(5～10min内)便可得到直观的实验结果。
胶体金免疫层析技术不需进行结合标记物与游离标记物的分离,省去了繁琐的加样、洗涤步骤。
因而这种分析技术操作简单快速,分析结果清楚,易于判断,且无须仪器。
胶体金免疫层析技术在医学上应用较多,在食品检测领域的应用在近几年才发展
起来。
国外在此方面起步较早,现在已经有很多成熟的产品问世,国内这几年也发展较快，有多种应用胶体金免疫层析技术的商业化产品面世，三聚氰胺胶体金速测卡就是其中之一。
三聚氰胺胶体金速测卡检测灵敏度高，结果直观，操作方便、快捷，携带、储存方便，成本低，非常适合于基层执法部门对三聚氰胺的快速筛查。
3.1 原理
三聚氰胺胶体金速测卡的检测原理是竞争性免疫层析。
将着色标记物与待测抗原的特异性抗体(Ab1)相偶联,沉积在结合区。
而检测区处固相化的是待测抗原或待测抗原的类似物。
若样品中含有待测抗原,则样品中的抗原和带有标记物的Ab1形成Ag-Ab1复合物。
随后在通过固相化有待测抗原或其类似物的检测区时,由于竞争抑制,不再发生反应,检测线处不显色;样品继续前移, Ag- Ab1 复合物被固相化在质控线处的抗Ab1 抗体(Ab2)所结合,形成Ab1- Ag- Ab2 复合物,使质控线显色。
3.2主要试剂、材料
三聚氰胺胶体金速测卡
3.3检验操作：按三聚氰胺胶体金速测卡说明书要求操作。
4. 三种三聚氰胺快速检测方法的比较。