多克隆抗体的制备
多克隆抗体制备
多克隆抗体制备多抗一般制备流程：完全抗原的准备→兔子的免疫→效价检测和终放→抗体亲和纯化→抗体的浓缩和保存。
【晶莱生物】具体实验步骤如下：1.兔子的准备挑选健康的6周大小的新西兰大白兔两只（约2Kg），使其适应新的生活环境，至少稳定几天再进行首次取血.预采血（作阴性参照用）1.1 将兔子小心的放入固定的架中,使兔子平静；1.2小心剃去兔耳上的毛以使血管清晰可见(也可不剃)；1.3如果有必要,可用小棉球沾酒精涂抹血管部位,使血管膨胀；1.4用注射器从耳静脉抽取约10ml血液(约5ml血清)；1.5小心抽出针头,适当按压伤口以免流血,然后用酒精棉球消毒伤口；1.6将收集的血液置于37`C灭活30min,最后置于4`C过夜使其凝结释放血清；1.7将凝结好的血液在10000r／min离心10min； h.收集上清，即为血清。
2. 兔子的免疫2.1注射两只兔子的抗原为1ml,抗原缓冲溶液必须不含对兔子有害的化学试剂.每只兔子初次免疫400ug抗原比较适合,也可适当减少以获得更好的结果，后续免疫每次为100ug即可。
2.2 将1ml的佛氏完全佐剂与准备好的1ml抗原充分混匀,呈乳白色；2.3 小心从笼中取出兔子，每只兔子免疫4个部位(背部和大腿根部均可),每个部位250ul,针头呈45度角插入皮下1-2cm,注射完后停留数秒以防止抗原外流。
2.4 免疫周期为20天,免疫完后7-10天取血(包括中途测试取血和最终放血),总共免疫4-5次。
3.效价检测3.1 2个参照:阴性参照为预取血血清，均以1抗起始浓度稀释(封闭稀释液);阳性参照为以前阳性血清3.2 于96孔板中每孔滴加100ul，1ug/ml抗原，于4℃过夜，也可以37℃孵育2小时。
3.3倒掉抗原溶液，每孔加入200ul的封闭液，4℃过夜或者37℃孵育2小时。
3.4倒去封闭液，在吸水纸上拍打尽量吸干残留液体,用洗涤液洗板三次,每次尽量拍干残留液体,若要放置一段时间, 37℃烘干并用封口袋封好于-20℃存放。
多克隆抗体的制备方法
多克隆抗体的制备方法多克隆抗体是由多个不同的免疫细胞（多克隆）产生的抗体混合物，可以识别并结合到目标生物标志物上。
多克隆抗体在科学研究、临床诊断和治疗中具有重要的应用价值。
制备多克隆抗体需要经过一系列复杂的实验流程，下面将详细介绍多克隆抗体的制备方法。
一、抗原的选择在制备多克隆抗体时，首先需要选择一个合适的抗原。
抗原通常是目标生物标志物的蛋白质或多肽片段。
选择抗原的关键因素包括其表达水平、稳定性和纯度。
抗原的选择直接影响到最终多克隆抗体的亲和力和特异性。
二、免疫小动物免疫小动物通常是用于制备多克隆抗体的主要实验动物，例如小鼠、兔子、大鼠等。
在免疫前需要确保小动物健康，并对其进行相应的预处理，如注射驱虫药物、进行适当的接种。
还需要根据具体实验要求决定预免疫、免疫计划以及免疫方案的制定。
三、免疫过程免疫过程是制备多克隆抗体的核心环节。
首先需将抗原与适当的佐剂混合，增强免疫原性，然后用于免疫小动物。
在免疫过程中需要控制免疫剂量和免疫间隔时间，以及监测动物的免疫应答情况。
免疫后还需要定期采集血清样本，监测抗体滴度的动态变化。
四、细胞融合与筛选经过一段时间的免疫后，需要从免疫动物的脾脏或骨髓中收集免疫细胞，然后与肿瘤细胞进行融合，得到杂交瘤细胞。
随后采用限稀稀释法将杂交瘤细胞进行单克隆化分，筛选出高亲和力的多克隆抗体细胞株。
五、生产与纯化经过筛选的多克隆抗体细胞株需要进行扩大培养，生产足够数量的多克隆抗体。
之后通过蛋白质纯化技术，如亲和层析、离子交换层析等手段，从细胞培养上清液中纯化出多克隆抗体。
六、性质鉴定与应用纯化后的多克隆抗体需进行性质鉴定，包括亲和力、特异性、稳定性等方面的测试。
最后经过滤菌毒处理后，多克隆抗体可应用于科学研究、临床诊断、生物药物研发等领域。
多克隆抗体的制备是一个复杂的过程，需要科学合理地选择抗原、合理设计免疫方案、熟练掌握细胞融合和筛选技术，以及对多克隆抗体进行严格的生产和性质鉴定。
多克隆抗体单克隆抗体的制备流程
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多克隆抗体的制备方法
多克隆抗体的制备方法多克隆抗体的概念：由多个B淋巴细胞克隆所产生的，受到多种抗原决定簇刺激并可与多种抗原表位结合的抗体。
多克隆抗体的制备主要包括以下几个步骤：免疫动物、佐剂、免疫原、免疫、取血等。
多克隆抗体的制备步骤一、器材剪刀(剪兔毛用)一把、弯头眼科手术镊子(游离血管用)一把、直头眼科手术剪(剪血管用)一把，手术刀架，手术刀片，注射器(1ml、10ml，25ml)附针头，兔子固定架，灭菌三角烧瓶(200ml)或平皿(直径18cm)、弯头止血钳四把，直头止血钳两把，手术缝合线，塑料放血管，纱布等。
二、试剂生理盐水(或PBS)弗氏完全佐剂(Freund’s complete adjuvant，FCA)弗氏不完全佐剂(Freund’s incomplete adjuvant，FIA)二甲苯，酒精棉，脱脂棉，2% NaN3三、免疫原：蛋白或KLH偶联的多肽。
每次免疫100-200μg免疫原。
四、兔子的选择兔子的重量应在四斤以上，两耳光滑，明显可见耳静、动脉，健康。
五、免疫用生理盐水稀释免疫原，然后与相应的佐剂进行1:1混合。
抗原和佐剂完全混合形成稳定的乳剂，将该乳剂在兔子双肩周围的皮肤下进行皮下注射和后大腿进行肌肉注射。
每个区域大约用1/4的免疫原。
这样免疫原可以持久存在从而提高免疫应答。
注：抗原注射以前需要收集一些正常血清，已备检测抗体时作为阴性对照。
待兔子在新环境中稳定，大概需要四天左右时间，可以进行耳动脉取血。
取血量约5ml足矣。
免疫用的抗原必须纯化，否则影响抗体的质量。
抗原经FCA或FIA充分乳化后才能注射。
将抗原液与佐剂等比例混合后，置于混合器上使之剧烈振荡使抗原充分乳化，乳化过程比较费时、费力，但若乳化不充分，会影响免疫的效果，振荡后，1000rpm离心一分钟，如水相和油相不分层即可注射。
首次免疫用FCA，以后都用FIA。
免疫方法可采用背部多点注射法。
即于家兔脊柱两旁选4-6点皮下注射，每点注0.1ml，间隔2周后再于上述部位选不同点注射(不要选择临近位点，否则溃疡愈合不好)。
多克隆抗体的制备过程及原理
多克隆抗体的制备过程及原理
多克隆抗体是一种由多个不同的B细胞克隆所产生的抗体，能够识别并结合多个抗原表位。
其制备过程主要包括以下几个步骤：
1. 免疫原的选择：选择目标抗原，可以是蛋白质、多肽、细胞表面蛋白等。
2. 免疫动物的选择：根据抗原的物种来源，选择合适的免疫动物，如小鼠、兔子、山羊等。
3. 免疫动物的免疫：将免疫原注射到免疫动物体内，激发免疫反应。
通常采用多次免疫，间隔一定时间进行。
4. 细胞融合：从免疫动物体内提取免疫细胞，通常采用脾细胞或骨髓细胞。
与骨髓或脾细胞进行融合，得到杂交瘤细胞。
5. 杂交瘤细胞筛选：采用筛选培养基，筛选出杂交瘤细胞，一般是通过对杂交瘤细胞进行限稀稀释培养，进行单克隆细胞的筛选。
6. 克隆抗体的生产：将单克隆细胞进行扩增，并进行细胞培养，使其产生大量的抗体。
多克隆抗体制备的原理是利用免疫动物的免疫系统产生多个克隆的抗体。
当免疫
原进入免疫动物体内时，会激发免疫细胞产生对应的免疫反应，形成多个不同的克隆细胞。
这些克隆细胞会产生具有不同的抗体结构的抗体分子。
通过细胞融合和杂交瘤筛选的步骤，可以筛选出产生目标抗原特异性抗体的单克隆细胞，并进行大规模生产。
这样就获得了能够结合多个抗原表位的多克隆抗体。
9、多克隆抗体的制备
（二）血清的分离
采血时一般不加抗凝剂，全血在室温中自然凝固， 在灭菌容器中使之与空气有较大的接触面。 先置于37℃ 1～2h，然后置于4℃冰箱过夜，次 日离心收集血清。 采血量大时，用自然凝固加压法 无菌的血清，组批分装，保存于之-15℃半成品 库，待抽检合格后交成品库保存。
多克隆抗体 （高免血清）制备技术
一般是指利用微生物及其代谢产物等作为免疫原，
经反复多次注射同一动物体，所生产的一类高效
价抗体，主要包括高度免疫血清、卵黄抗体和牛 奶抗体等
高度免疫血清简称高免血清（hyperimmune serum），又称免疫血清（immune serum）或抗 血清（antiserum） 分为抗病血清和抗毒素
产蛋鸡（鸭和鹅）感染某些病原后，其血清和蛋 黄内均可产生相应的抗体。
蛋黄中提取相应的抗体，并可用于相应疾病的预 防和治疗，称为卵黄抗体（yak antibody）。 卵黄抗体可以在一定程度上克服血清抗体成本较 高、生产周期较长的弱点，并且具有用同批动物 连续生产的优点。 有潜伏野毒的危险，对生产用鸡应严格检疫。
七、血液采集与血清提取
按照免疫程序完成免疫的动物，经采血检验 （试血），血清效价达到合格标准时，即可 采血。
不合格者，再度免疫，多次免疫仍不合格者 淘汰。
（一）采血次数和方法
效价高峰在最后一次免疫后的7～10d。
采血可以全放血或部分采血。
放血前，动物应禁食24h，但需饮水以防止血 脂过高。
多克隆抗体制备课件
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免疫方式
• 注射途径: 免疫注射的途径也很重要。一般 采用多点注射，一只动物注射总数约为8～ 10点，包括足掌及肘窝淋巴结周围，背部 两侧、颌下、耳后等处皮内或皮下，皮内 易引起细胞免疫反应，对提高抗体效价有 利
多克隆抗体制备
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多克隆抗体的制备方法
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动物选择
一、选择制备多克隆抗体(抗血清)的动物种类 应考虑的要点: •需要制备的抗血清的质量; •供给蛋白质抗原的动物与免疫动物之间的种 系关系; •免疫动物产生的抗体特性（针对不同性质的 免疫原选用相应的动物）。 二、动物的年龄、性别和数量对抗体制备的 影响
血液采集
采血量
少量
采血部位
尾静脉，耳静脉，眼 底静脉
中量
耳中央动脉，颈动/静 脉，心脏
大量
股动脉，颈动脉，心 脏，摘眼球
血清的分离：采取4℃静置过夜，3000-4000 转离心10-15min钟。
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多克隆抗体纯化
•蛋白A亲和层析 •蛋白A可与多种哺乳动物的IgG重链的Fc片段 相结合也可与某些IgM和IgA相结合 •抗原亲和纯化 •多抗的亲和层析是基于抗原与抗体结合的一 种层析方式。基本思路是将抗原固定在一种 基质上, 然后与抗血清孵育以捕获相应的抗体, 然后从基质上洗掉非特异性结合的抗体, 最后 再将抗体洗脱下来
.鸡Biblioteka 鸡的种系距哺乳动物较远,用以制备抗哺乳动物蛋白 质的抗体具有独特的优点。
鸡的IgG常称IgY,其特点是不会激活哺乳动物的补体 成分C1,也不会与细菌蛋白A或蛋白质G、哺乳动物的 Fc受体或类风湿因子等发生反应。在极端条件下,鸡 IgY的稳定性不如家兔IgG,不过,鸡的IgY在鸡蛋内可保 持稳定达数月之久,纯品IgY在中性缓冲液和冷藏条件 下则可保存数年之久。用鸡IgY已经制备出Fc和单价 的Fab或Fab′等片段。 鸡可将大量IgY输送入鸡蛋黄中, 从鸡蛋中收获抗体 可避免采用损伤性的收集手段。
多克隆抗体的制备流程及原理
多克隆抗体的制备流程及原理
多克隆抗体的制备流程及原理可以参考以下步骤：
1. 抗原免疫：使用目标抗原免疫动物，例如小鼠，在一定时间间隔内多次免疫。
抗原可以是纯化的蛋白质、多肽片段或者细胞/组织提取物。
2. 细胞融合：将免疫小鼠脾脏与骨髓中的浆细胞混合，然后使用聚乙二醇等方法促使细胞融合，获得杂交瘤细胞。
3. 杂交瘤筛选：将杂交瘤细胞悬浮液分别分装于多个培养皿中，含有杀死未融合细胞的培养基中，通过限制性稀释法或离子交换法，筛选出高产、单克隆抗体的杂交瘤细胞。
4. 单克隆抗体培养与提取：将筛选出的单克隆杂交瘤细胞进行扩增培养，获取大量的细胞。
然后通过细胞培养上清液、腹水或腹水灌洗法获得单克隆抗体。
多克隆抗体制备的原理如下：
多克隆抗体是指由多个不同的抗体产生细胞(即多克隆细胞)产生的一类抗体。
其制备的原理是通过免疫动物多次免疫，激发机体产生大量的抗原特异性抗体。
不同的抗原特异性抗体由不同的抗体产生细胞产生，并经过体内的嫁接与筛选，获
得了多个具有抗原特异性的抗体。
多克隆抗体具有较广泛的抗原特异性，可以识别目标抗原的不同位点，因此可以广泛应用于免疫学、分子生物学、生物医学等领域。
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50%饱和硫酸铵盐溶液可沉淀析出血清球蛋白； 8%～12%PEG6000可沉淀IgG。
超滤法： 利用孔径大小不同的特制薄膜对不同分子大小的抗原 物质进行滤筛。
电泳
层析法： 凝胶过滤层析 离子交换层析 亲和层析 疏水层析 反相层析
精分离
蛋白鉴定
抗体亲合常数测定
亲合常数测定采用非竞争酶免疫试验法：
先确定在某一抗原浓度时抗体可以达到饱和；
以该抗原浓度为实验条件，饱和时的OD值作为OD-100， 找出OD-50时的抗体浓度和相应的抗原浓度；
根据公式Ka= n-1
计算抗体的Ka值。
2(n[Ab’]t-[Ab ]t)
t代表测定时的温度； n=[Ab]t/[Ab’]t； [Ab]t 表示抗原浓度较高的Amax的一半； [Ab’]t表示抗原浓度较低的Amax的一半。
免疫原的制备
免疫原（immunogen）： 指能刺激机体免疫系统产生特异性抗体或致敏淋巴细胞 的抗原最重要的性质是免疫原性（immunogenicity）.
免疫原种类： 天然抗原、人工合成抗原； 蛋白质、多糖、脂类、核酸抗原。
细胞性抗原制备： 绵羊红细胞（SRBC）- 溶血素； 细菌- 抗菌抗体（动物免疫血清）。
白等，其中以牛血清白蛋白最为常用。
（2）多肽类聚合物：是由人工合成的多肽聚合物，也是一类良 好的载体，常用的有多聚赖氨酸。
（3）大分子聚合物：聚乙烯吡咯烷酮（PVP）、羧甲基纤维素 (CMC)等皆可与半抗原结合，加入福氏完全佐剂可诱导动物 产生良好的抗体。
连接方法：
物理法：是用物理吸附法将载体与半抗原连接，其原 理是通过电荷和微孔来吸半抗原，吸附载体主要有 PVP和CMC等；
增强吞噬细胞的吞噬作用（被佐剂吸附的抗原易被吞噬细 胞吞噬），促进对抗原的处理，刺激淋巴细胞增生，从而增 强和扩大免疫应答的效应。
动物免疫
免疫动物的选择：
抗原来源与动物种属的关系：抗原的来源与免疫动物种属 差异越远，其免疫源性越强，免疫效果越好，而同种系或 亲缘关系越近，免疫效果越差。
动物个体的选择：适龄、健康、体重符合要求的正常动物 （以雄性为佳）；抗体需要量少时，选用家兔、豚鼠和鸡 等小动物；抗体需要量大时，可选用绵羊、山羊、马、驴 等大动物。
3、单克隆抗体（monoclonal antibodies, mAb）：由一个 识别一种抗原表位的B细胞克隆产生的同源抗体。高度均 一、特异性强、效价高、少或无交叉反应性。
抗体发展历史
第一代抗体是传统的抗体制备方法即利用抗原免疫动物 后获得抗体，称为多克隆抗体（polyclonal antibody）；
玻片凝集试验
玻片凝集试验为定性试验方法，一般用已知抗体作为诊断 血清、与受检颗粒抗原如菌液或红细胞悬液各加1滴在玻片 上，混匀，数分钟后即可用肉眼观察凝集结果，出现颗粒 凝集的为阳性反应。
此法简便、快速，一般用来鉴定菌种或分型，也用于人类 ABO血型的鉴定。
肥达试验
肥达试验（Widal test）是用已知的伤寒杆菌O、H抗原和 甲、乙型副伤寒杆菌H抗原与病人血清做定量凝集试验， 以测定患者血清中有无相应抗体，根据抗体含量的多少以 及增长情况判断阳性。
后者由弗氏不完全佐剂加卡介苗组成。在免疫动物时， 先将弗氏佐剂与抗原等比混匀，制成“油包水”乳化 液。
佐剂与抗原混合乳化的方法：
研磨法 搅拌混合法
佐剂的免疫生物学作用
增强抗原免疫原性：使无或微弱免疫原性的物质变成 持久或强的免疫原；
增强机体对抗原刺激的反应性，提高初次应答和再次 应答所产生的抗体滴度；
第二代抗体是通过杂交瘤技术制备出针对抗原中某一抗 原决定簇的抗体称为单克隆抗体(monoclonal antibody, McAb)；
第三代抗体是利用基因工程技术制备而来，称为基因工 程抗体(genetic engineering antibody)。
多克隆抗体制备流程
免疫原的制备 免疫动物 免疫血清的收集 免疫血清的鉴定 免疫血清的保存
可溶性抗原制备： 指蛋白质、多糖和脂类等。
反复冻融法
细胞破碎
超声破碎法
自溶法
酶处理法
表面活性剂处理法
粗分离
超速离心分离：
是一种根据分离物质的比重特点，通过差速或梯度密 度离心，将分子大小不同的抗原颗粒分开的方法，只 适宜少数大分子物质的分离。
选择性沉淀：
选择某抗原理化特性，采用相应沉淀剂或溶液环境， 如：
纯度鉴定： 抗体纯度的鉴定可采用SDS-聚丙酰胺凝胶电泳（SDS-PAGE）、 双向扩散试验、免疫电泳等方法。 IgG含有重链和轻链，纯IgG的SDS-PAGE结果应有两条蛋白电泳 带（分子量约53kD和22kD），若出现多条电泳带则表明制备的抗 体混有杂蛋白，需进一步纯化。
结合活性鉴定：测定抗体亲力的方法较多，如平衡透析法、 ELISA或RIA竞争结合试验等。
动物采血
采集免疫血清前，要预先测试抗体效价测定，若效价达到要 求，应在末次免疫后一周及时采血，否则抗体效价会下降。 颈动脉采血法 心脏采血法 静脉采血法
免疫血清的鉴定
表达量的测定：颗粒性抗原可采用凝集试验，可溶性 抗原常用双向免疫扩散试验、ELISA等方法。
玻片凝集试验 肥达试验（微量法）
ELISA
免疫方法
选定动物后，在免疫过程中应考虑免疫剂量、免疫途径、 免疫次数、免疫间隔等因素。
免疫原的剂量：免疫原的接种剂量按免疫原性的强弱、动 物的个体状态和免疫时间来确定。首次免疫时，剂量不宜 过大，以免产生免疫麻痹。 免疫途径通常有皮内、皮下、肌肉、静脉、腹腔、淋巴 结 等，视不同的免疫方案而异。对于不易获取的宝贵抗原可 采用淋巴结免疫法。 免疫间隔时间是影响抗体产生的重要因素，其中首次与第二 次免疫的间隔时间尤为重要，一般以10～20天为佳，二次后 间隔时间一般为7～10天，若间隔时间太长，则刺激减弱， 抗体效价不高。
人工合成佐剂：如双链多聚肌苷酸：胞苷酸（poly I：C）、 双链多聚腺苷酸：尿苷酸（poly A：U）；油剂：如弗氏完全 佐剂、花生油乳剂等；
纳米佐剂
弗氏佐剂（Freund’s adjuvant）
分为弗氏不完全佐剂和完全佐剂两种： 前者是由油剂（矿物油或花生油）和乳化剂（羊毛脂 或吐温-80）按1：1～1：5比例混合而成；
化学法：是利用某些功能基团把半抗原连接到蛋白质 类或多肽类聚合物载体上。不同的半抗原应选用不 同的方法进行连接。
根化学基团不同，连接方法主要有以下几类：
带游离氨基或羧基以及二种基团皆有的半抗原：羧基可用混合酸酐法 和碳二亚胺法与载体氨基形成稳定的肽键，带氨基的半抗原则可与载 体羧基缩合。
带有羟基、酮基、醛基的半抗原：不能直接与载体连接，需要用化学 方法如琥珀酸酐法、O-羧甲基、羟胺法等方法将之转变为带有羧基的 半抗原衍生物后才能与载体连接。
对于单克隆抗体，一般亲合力要求>107L/mol，好的单抗多 大于109 L/mol。
多克隆抗体的保存
4℃保存（6个月） 低温保存（-70 ℃ ～-20 ℃ ，5年） 真空干燥保存（5 ～ 10年）
注意点：保存前需经除菌 保存液含防腐剂 避免反复冻融（分装）
半抗原性免疫原的制备
载体选择： （1）蛋白质类：常用的有人血清白蛋白、牛血清白蛋白、血蛋
改变抗体类型，使产生抗体由IgM型转变为IgG型；
引起或增强迟发性超敏反应。
佐剂的作用机制
佐剂的作用机制归纳起来主要有如下几种：
可增强抗原的表面积和改变抗原活性基团构型，从而增强 抗原的免疫原性。
佐剂与抗原混合一起注入机体，可改变抗原的物理性状， 形成抗原储存库，延长抗原在局部组织的滞留时间，有利于 抗原的缓慢释放。
免疫佐剂
某些物质与抗原一起或先于抗原注入机体，可增 强机体对该抗原的特异性免疫应答或改变免疫应 答类型，此类物质称为免疫佐剂 (immunoadjuvant)，简称佐剂。
佐剂的种类
佐剂一般包括以下几类： 无机佐剂：如氢氧化铝、明钒等；
生物性佐剂：如结核分枝杆菌、卡介苗、小棒状杆菌、百日 咳杆菌、革兰阴性杆菌内毒素、霍乱毒素的B亚单位、胞壁酰 二肽和细胞因子等；
鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及免 疫学活性。
蛋白含量—凯氏定氮（紫外光280nm等），Lowry 分子质量—电泳、质谱 蛋白纯度—电泳、HPLC 免疫原性—免疫印迹 、免疫双扩散、免疫组化 蛋白活性— ELISA、XTT 蛋白结构—红外光谱、氨基酸测序 蛋白等电点—IEF
HAT培养， 稀释
Ab1
Ab4
Ab3
单克隆抗体
盐析法沉淀抗原的机理
凝胶过滤层析( 分子筛)的作用机理
亲和层析的作用机理
颈动脉分离图
ELISA技术路线
此法一般用来帮助诊断伤寒及副伤寒。
ELISA
酶联免疫吸附实验(ELISA) 即将已知的抗原或抗体吸附 在固相载体表面，使酶标记的抗原抗体反应在固相表面 进行的技术。
该技术可用于检测大分子抗原和特异性抗体等，具有快 速、灵敏、简便、载体易于标准化等优点。
特异性鉴定：抗体特异性鉴定常用双向免疫扩散法、免疫电泳法。
多克隆抗体的制备及 抗体活性测定
主要内容
多克隆抗体制备的基本原理 多克隆抗体制备的操作步骤 抗体活性的实验原理、操作流程和结果判断
原理
1、克隆(clone)： 是指无性繁殖细胞系，由单一个祖先细胞 分裂繁殖而形成的一簇细胞系。在这个家族的所有成员中， 如无发生突变其基因是完全相同的。
2、多克隆抗体（polyclonal antibody, pAb）：用一种包含多 种抗原决定簇的抗原免疫动物，可刺激机体多个B细胞克 隆产生针对多种抗原表位的不同抗体。所获得的免疫血清 实际上是含有多种抗体的混合物，即多克隆抗体。