植物组织培养专题复习
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1.植物组织培养按培养对象分为______ 、 _______ 、________ 、 ________ 、________ 等几种类型。
2.一个己停止分裂的成熟细胞转变为分生状态，并形成耒分化的愈伤组织的现象称为n tv3.不同的灭菌剂其灭菌的机理一般不一样，次氯酸钙和次氯酸钠都是利用分解产生 _________ 来杀菌的；升汞是靠 ________ 来达到灭菌日的。
4.去除植物病毒的主耍方法是 _____ 和_______ 两种方法，当把二者结合起來脱毒效果最好5.在通过微茎尖培养脱毒时，外植体的大小应以成苗率和脱毒率综合确定，一般以 __________ mm、带 ________ 个叶原基为好。
6.White培养基________ 浓度低，适合生根培养。
7.一个已停止分裂的成熟细胞转变为_________ 状态，并形成_________ 的现象称为“脱分化”。
8.BA/NAA的高低决定了外植体的发育方向，比值低时促进 ________ 的生长，这时_________ 占主导地位；比值高促进_________ 的生长，这时 _________ 占主导地位。
9.进行植物组织培养最基本的前提条件是 _____ 。
1、植物组织培养的理论基础是植物细胞全能性。
2、组织培养实验室必要的设备有超净工作台、高压灭菌器、空调机、夭平、显微镜、蒸饱水发生器等。
3、糖在植物组织培养中是不可缺少的，它不但作为离体组织赖以生长的碳源，而且还能维持培养菇渗透压4、培养基灭菌一般在-108 kPa的压力下,锅内温度达121 °C ,维持20-30 min o5、在离体叶培养中，6・BA和KT利于芽的形成:24D利于愈伤纟FI织的形成6、在离体叶组织脱分化和再分化培养屮，茎和芽的分化主要有4个途径：方•接产生不泄芽、由愈伤组织产工不定芽、胚状体形成、形成球状体或小鳞茎等途径。
7、目前培育无病毒苗最广泛和最重要的一个途径是茎尖培养脱毒。
人教版教学素材植物组织培养技术专题复习
植物组织培养技术专题复习典型例题：下图是植物组织培养的简略表示。
请据此回答：（1）①表示，它能被培养成为④的根本原因是。
（2）②表示，它的特点是。
（3）若想制作人工种子，应该选用（填编号）。
（4）若①是花粉则④是，这项技术可用在上。
（5）若①是胡萝卜根尖细胞，则培养成的④的叶片颜色是，这说明了根尖细胞。
（6）若用此项技术制造治疗烫伤、割伤的药物——紫草素，培养将进行到（填编号）。
【解析】本题考查植物组织培养的一般过程及应用。
植物的组织培养是用离体的植物器官、组织或细胞经脱分化使它们分裂增殖产生愈伤组织，愈伤组织经再分化，成为具有根、芽的幼体。
植物的组织培养所依据的原理是植物细胞具有全能性。
单倍体育种过程中，用花粉产生单倍体的过程是利用植物的组织培养，经秋水仙素处理成为纯合子，成为可育的个体。
紫草素是从大量的紫草的愈伤组织中提取的。
【答案】（1）离体的植物器官、组织或细胞细胞中含有发育成为完整个体所必需的全部基因（全能性）（2）愈伤组织高度液泡化的薄壁细胞组成，排列疏松而无规则（3）③（4）单倍体单倍体育种（5）绿色具有全能性（6）②模拟试题：1.下图表示水稻（体细胞有24条染色体）的花药通过无菌操作，接入试管后，在一定条件下形成试管苗的培养过程，已知水稻的基因型为AaBb.（1）愈伤组织是花粉细胞不断分裂后形成的不规则的细胞团，在愈伤组织形成过程中，必须从培养基中获得、和小分子有机物等营养物质。
（2）要促进花粉细胞分裂和生长，培养基中应有和两类激素。
（3）愈伤组织分化是指愈伤组织形成芽和根，再发育成具有根、茎和叶的植物体。
这一过程必须给予光照，其原因是利用光能制造有机物，供试管苗生长发育。
（4）试管苗的细胞中含有条脱氧核苷酸链。
（5）培育出的试管苗可能出现的基因型有。
（6）这种利用花药离体培养成的试管苗属于体。
要使它繁殖后代必须采取的措施是。
（7）从细胞工程角度看这种育种方法叫。
参考答案：1.（1）水矿质元素（2）生长素细胞分裂素（3）叶绿体（4）24 （5）AB、Ab、aB、ab （6）单倍用秋水仙素处理幼苗（7）植物的组织培养点击高考：1.（09上海36）．回答下列有关植物组织培养的问题。
植物组织培养复习提纲有答案
植物组织培养复习提纲（仅供参考，关键在于全面复习掌握！）一、主要专业术语细胞全能性：在多细胞生物中每个体细胞的细胞核具有个体发育的全部基因，只要条件许可，都可发育成完整的个体。
脱分化：已经分化的植物器官、组织或细胞，当受到创伤或进行离体（也受到创伤）培养时，已停止分裂的细胞，又重新恢复分裂，细胞改变原有的分化状态，失去原有结构和功能，成为具有未分化特性的细胞。
愈伤组织：指切取植物体的一部分，置于含有生长素和细胞分裂素的培养液中培养，诱导产生的无定形的组织团块。
人工种子：指植物离体培养中产生的胚状体（包括体细胞胚和性细胞胚），包裹在含有养分和具有保护功能的物质中，并在适宜条件下能够发芽出苗的颗粒体。
植物快速繁殖：采取培养基配制，材料灭菌，无菌培养，幼苗转移到苗床，成苗转至大田栽种五步走的繁殖培养方式。
单倍体：体细胞中含有本物种配子染色体数(1n)的个体二倍体：体细胞中含有两个染色体组的生物个体胚乳培养：将胚乳从母体上分离出来，放在无菌的人工环境条件下使其进一步生长发育形成幼苗的技术。
连续培养：连续培养又叫开放培养，是相对分批培养或密闭培养而言的。
是采用有效的措施让微生物在某特定的环境中保持旺盛生长状态的培养方法。
胚状体：离体培养条件下，没有经过受精过程，但是经过了胚胎发育过程所形成的胚状类似物看护培养：将亲本愈伤组织或高密度的悬浮细胞同低密度细胞一起培养，以促进低密度细胞生长、分裂的培养方法。
植物种质保存：在适宜环境条件下贮存种质基因载体,使蔬菜种质保持生命力和遗传性的技术。
二、主要知识点1、植物组织培养成功的关键是什么？1.无毒无菌的环境2.生长素或生长素类似物3.通常用固体培养基(琼脂)4.先进行植物组织或器官的脱分化5.长出根来后要保证根呼吸所需氧气2、植物外植体的表面消毒剂种类1、漂白粉（1%~10%的滤液）2、次氯酸钠溶液（0.5%~10%）3、氯化汞（0.1%~1%）4、酒精（70%~75%）5、过氧化氢（3%~10%）6、新洁尔灭等。
植物组织培养复习重点
组培复习材料一、名词解释1、培养基：是离体植物（外植体）赖以生长、分化的基础，是根据植物的需求，人工配制的含有各种营养成分的营养液。
2、液体培养：把细胞或生物体的一部分，置于液体培养基中使其发育，并不断振荡，使之均匀地在悬浊液中进行培养的一种方法。
3、种子培养：是成熟种子和发育不全的未成熟种子的无菌培养。
4、叶培养：从母体植株上将叶组织（包括叶原基在内）切下，放在无菌的人工条件下使其生长发育形成植株的技术。
5、热处理脱毒：在一定范围内，用高温处理可部分或完全钝化植物组织中的某些病毒而不伤害或很少伤害植物本身的脱毒方法。
6、花药培养：是把花粉发育到一定阶段的花药接种到培养基上，来改变花粉的发育程序，使其分裂形成细胞团，进而分化成杯状体，然后再生植株，或形成愈伤组织，由愈伤组织再分化成植株。
7、连续培养：是利用特别的培养容器进行大规模细胞培养的一种培养方式。
（培养过程中，不断注入新鲜培养基，排掉等体积用过的培养基，或者抽取悬浮培养物，使培养物的营养物质得到不断补充，从而保持其恒定体积的培养。
——8、分批培养：指把细胞分散在一定容积的培养基中进行培养，建立单细胞培养物的培养方式。
（细胞生长在固定体积的培养基中，当主要营养物质耗尽时，细胞的分裂和生长即停止。
）二、简答题1、MS培养基特点。
答：MS培养基是Murashige和Skoog于1962年为烟草细胞培养设计的，其特点是无机盐和离子浓度较高，是较稳定的离子平衡溶液，具有高含量的氮、钾，尤其是硝酸盐用量大，还有一定数量的铵盐，其养分的数量和比例合适，不需要添加更多的有机附加物，就能满足植物组织对矿质营养的要求，加速愈伤组织和培养物的生长，当培养物就不转移时仍可维持其生存。
目前应用最广泛。
2、植物组培生产特点。
答：①和传统的生产方式相比，具有不占耕地、生产不受季节限制而且能够整年连续进行、不受灾害性天气和病虫害影响的特点；②具有人为可控性，可采用更适合于植物生长的“培养基”代替土壤提供养分和生长调节物质；③具有很高的生产效率。
植物组织培养复习题答案
植物组织培养复习题答案植物组织培养是一种生物技术，它涉及将植物的一小部分组织（如叶片、茎尖或根尖）在无菌条件下培养在特定的营养培养基上，以诱导其生长和分化成新的植物体。
以下是植物组织培养复习题的答案：一、选择题1. 植物组织培养的基本原理是什么？A. 植物细胞的全能性B. 植物细胞的分裂性C. 植物细胞的分化性D. 植物细胞的再生性答案：A2. 植物组织培养中常用的培养基是什么？A. MS培养基B. LB培养基C. 酵母提取物培养基D. 血浆培养基答案：A3. 在植物组织培养中，以下哪个因素不是影响培养成功的关键因素？A. 无菌操作B. 培养基成分C. 光照条件D. 培养基的pH值答案：C二、填空题1. 植物组织培养技术主要包括_______、_______和_______三个阶段。
答案：外植体的消毒、诱导分化、生根与移栽2. 植物组织培养中常用的生长调节剂包括_______、_______和_______。
答案：生长素、细胞分裂素、赤霉素三、简答题1. 简述植物组织培养的优点。
答案：植物组织培养具有快速繁殖、遗传稳定性、避免病毒传播、节约空间和成本等优点。
2. 描述植物组织培养的基本步骤。
答案：植物组织培养的基本步骤包括：选择适当的外植体，进行严格的消毒处理，将外植体转移到含有适宜营养成分和激素的培养基中，提供适宜的温度和光照条件，观察并记录生长情况，最后进行生根和移栽。
四、论述题1. 论述植物组织培养在现代农业生产中的应用及其重要性。
答案：植物组织培养在现代农业生产中具有重要作用，它不仅能够快速繁殖优良品种，提高生产效率，还能通过基因工程等手段改良植物品种，增强植物的抗病、抗虫和抗逆性。
此外，植物组织培养技术在植物保护、药用植物生产以及植物资源的保护和利用等方面也发挥着重要作用。
五、实验操作题1. 设计一个简单的植物组织培养实验方案。
答案：实验方案应包括实验目的、实验材料、实验设备、实验步骤、预期结果和注意事项。
植物组织培养复习资料
植物组织培养复习资料一、名词解释。
（每个3分，共24分）１、植物组织培养：在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基，对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或发育成完整植株的技术。
又称植物离体培养。
２、细胞的全能性：指植物体的任何一个有完整细胞核的活细胞都具有该植物的全套遗传基因和产生完整植株的潜在能力。
3、脱分化：离体培养条件下生长的器官、组织、细胞，经过细胞分裂或不分裂而恢复分生状态，形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性的细胞过程。
4、外植体：从活体植物上切取下来，用以进行离体培养的那部分组织或器官。
5、单细胞培养：对分离的到的单个细胞进行培养，诱导其分裂增殖，形成细胞团，再通过细胞分化形成芽、根等器官或胚状体，直至长成完整植株的技术。
6、胚状体：亦称体细胞胚。
指在组培过程中，由植物体细胞所形成的类似于合子胚的结构。
它具有根、茎结构，能够一次性形成再生植株。
7、平板培养：是将悬浮培养的细胞接种到未固化的薄层培养基中，使其与培养基充分配合，再倒入培养皿中进行培养的方法。
8、人工种子：指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽，被包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中，从而形成能发芽出苗的颗粒状。
9、次生代谢产物：指植物生长发育正常运行的非必需的小分子有机化合物，其产生和分布通常有种属、器官、组织以及生长发育时期的特异性。
10、再分化：细胞经过脱分化形成的愈伤组织再次分化，进行器官形成，产丛生芽或胚状体，形成完整植株的过程。
11、无病毒苗:指不含该种植物主要危害病毒的苗木。
二、不定项选择1、培养室里的湿度一般保持在____C_____.A 30~40%；B 50~60%；C 70~80%；D 80~90%2. 下列不属于生长素类的植物激素是____A D____。
A Kt；B IAA；C NAA；D ZT3. 影响培养基凝固程度因素有_______A B C D__.A 琼脂的质量好坏；B 高压灭菌的时间；C 高压灭菌的温度；D 培养基的PH4. 活性炭在组织培养中的作用有_______ABC_。
植物组织培养试题库
传播 27、试管微型薯 28、污染
二、 填空
1、按切除的植物体来源和培养对象的不同可分为
、
、
、
、
。
2、植物组织培养也叫
和
培养。
3、植物组织培养属于
繁殖。
4、裸子植物和单子叶植物的脱分化比
植物困难，成熟组织
比
组织困难，单倍体植物比
植物困难。
5、植物组织培养所需的营养成分主要有
、
、
几
种。
6、植物组织培养所需的营养成分都是以
、
、
五种方法。
、
、
、
34、脱毒苗的检测方法有
、
、
、
、
五种方法。
35、植物根段培养采用
的光照条件，其培养基多采用含无机
盐离子浓度
的培养基。
36、植物器官的培养分
、
两类。
37、植物茎段培养的外植体包括
、
、
在内的幼茎切段。
38、叶器官培养的外植体包括
、
、
、
、
、
。
2
39、植物花器官培养的外植体为
、
、
、
40、植物组织培养包括
A、内源激素---生长素由茎尖生长点产生 B、内源激素---生长素由茎尖生长点下面第一对叶原基产生
C、内源激素---生长素由茎尖生长点下面第二对叶原基产生
6
D、以上都是 37、物理脱毒能使植物病毒（ A、全部死亡 B、活性钝化
）。 C、活性增强
38、以下不是植物脱毒方法的为（ ）
A、生物方法
B、物理方法
植物组织培养复习题
一、 名词解释
1、植物组织培养
2、植物细胞的全能性
植物组织培养期末复习题
植物组织培养期末复习题一、填空题每空0.5分1.植物组织培养按培养对象分为__组织培养__、_器官培养_、_胚胎培养_、__细胞培养_、_原生质体培养__等几种类型.2.在分离原生质体的酶溶液内,需要加入一定量的Cacl2·2H2O和葡聚糖硫酸钾_其作用是保持原生质体膜的稳定,避免破裂.3.1902年德国植物生理学家Haberlandt第一次提出植物__细胞具有全能性_____的理论概念；1943年White提出植物细胞“____全能性_____”学说,并出版了植物组织培养手册,从而使植物组织培养成为一门新兴的学科;4.用烘箱迅速干燥洗净后的玻璃器皿时温度可以设在_80_℃的温度范围内,而若用它高温干燥灭菌则需在__150__℃的温度下1-3小时；烘干植物材料的温度是_60_℃.5.细胞全能性是指植物的每个细胞都具有该植物的__全部遗传信息__和___形成完整植株的潜在__的能力;6.1962年,Murashige和Skoog为培养烟草花叶细胞设计了__MS_培养基,其特点是_无机盐_浓度较高,且为较稳定的__________;7. 7.6-BA/NAA的高低决定了外植体的发育方向,比值低时促进_根_的生长,这时_脱分化_占主导地位；比值高促进_芽_的生长,这时_分化占主导地位.9.组织培养的特点是：__无菌_、__人工控制_、_离体_.10.1962年印度Guha等人成功地培养毛叶曼陀罗花药获得__单倍体植株_,这促进了花药和花粉培养的研究;11.在组织培养中,不耐热的物质用__过滤__法灭菌,而培养基常用___湿热灭菌__法灭菌.13.在组织培养中,非洲菊是靠_从生芽的方式进行繁殖的,而蝴蝶兰是以__原球茎_的方式进行快繁的;15.在通过微茎尖培养脱毒时,外植体的大小应以成苗率和脱毒率综合确定,一般以__0.3-0.5__mm、带__1-2__个叶原基为好;16.原生质体的分离有_机械法_和__酶解法_两种方法.17.进行植物组织培养最基本的前提条件是__离体_;18.植物组织培养按培养过程中是否需要光,可分为___适光_培养和___嗜光培养;20.组织培养中有三大不易解决的问题,它们分别是__黄化污染、_褐化__、_玻璃化;21.White培养基_无机盐_浓度低,适合生根培养;22.在无毒苗的组织培养中,外植体的大小与其成活率成__正比_,而与脱毒效果成__反比__;23.一个已停止分裂的成熟细胞转变为分生状态,并形成未分化的愈伤组织的现象称为"__脱分化___";25.茎尖培养根据培养目的和取材大小可分为__普通茎尖__培养和_茎尖分生组织_培养两种类型;27.愈伤组织的形态发生有_器官发生__和__体细胞胚发生__两种情况;28.植物组织培养按培养的方式分为__液体_培养和__固体__培养;29.1960年,英国学者Cocking用__真菌纤维素酶酶解_分离原生质体成功,从而创新原生质体的培养技术;30.大多数植物组织培养的适宜温度范围是_23-25__℃,培养基的PH值是__5.8_.32.在组织培养中,ZT和GA必须用_过滤_法灭菌,而接种室空间采用_紫外线照射__或_甲醛熏蒸_法灭菌.33.不同的灭菌剂其灭菌的机理一般不一样,次氯酸钙和次氯酸钠都是利用分解产生_cl离子ClO-_来杀菌的；升汞是靠_汞离子_来达到灭菌目的;34.幼胚培养时,其发育过程有_早熟萌发___、___胚性发育__、_形成愈伤__三种方式;35.植物的胚胎培养,包括__胚胎__培养、幼胚培养、__胚乳__培养、胚珠_培养以及子房的培养.38.一个已停止分裂的成熟细胞转变为__分生_状态,并形成_愈伤组织_的现象称为"脱分化".39.由胚乳培养可以获得__单__倍体植株,经秋水仙素处理可以获得_二_倍体植株.40.去除植物病毒的主要方法是_理化法_和_组培法__两种方法,当把二者结合起来脱毒效果最好.41.花药培养是_器官__培养,花粉培养属于__细胞__培养,但二者的培养目的一样,都是要诱导花粉细胞发育成单倍体细胞,最后发育成__单倍体植株__.43.原生质体的融合可实现_体细胞_的杂交,其融合的方式分为__自然融合_和__人工诱导_两类.二、不定选择题每小题2分1.培养室里的湿度一般保持在_C_.A30~40%；B50~60%；C70~80%；D80~90%2.下列不属于生长素类的是__AD_;AKt；BIAA；CNAA；DZT3.影响培养基凝固程度因素有_ABD_.A琼脂的质量好坏；B高压灭菌的时间；C高压灭菌的温度；D培养基的PH4..活性炭在组织培养中的作用有_ABC_;A吸附有毒物质；B减少褐变,防止玻璃化；C创造黑暗环境,增加培养基的通透性,利于根的生长；D增加培养基中的养分；5.下列具有细胞全能性的细胞是：_ABCD_;A成熟的老细胞；B幼嫩的组织细胞；C愈伤组织细胞D番茄的受精合子6.第一次提出植物细胞具有全能性的理论概念的科学家是_B_：.A□Morel；BHaberland；C□Schleiden；D□White7.下列培养基中__C_无机盐的浓度最低;AMS培养基；BB5培养基；CWhite培养基；N6培养基8.高温易被破坏分解的植物激素是__AbD_;AIAA；BGA；CNAA；DZt9.从单个细胞或一块外植体形成典型的愈伤组织,大致经历__ACD三个时期;A诱导期；B潜伏期；C分化期；D分裂期10.下列不属于活性炭在组织培养中作用的是___D_.A吸附有毒物质；B减少褐变,防止玻璃化；C创造黑暗环境,增加培养基的通透性,利于根的生长；D增加培养基中的养分；11.下列不属于细胞分裂素的植物激素是_B_;A6-BA；BNAA；CZt；DKt12.植物组织培养的特点是_ABC_;A培养条件可人为控制；B生长周期短,繁殖率高；C管理方便；D产量大14..下列不属于大量元素的盐是_C_;ANH4NO3；BKNO3；CZnSO4.7H2O；DMgSO4.7H2O15.下面属于处于愈伤组织分裂期的特征是__ABCD_;A细胞分裂加快B正在分裂的细胞体积小,内无液泡C细胞的核和核仁增至最大D细胞中的RNA含量减少,16.在原生质体的培养中,渗透稳定剂的作用是：AA稳定原生质体的形态而不使其被破坏B支持作用C提供营养D调节PH值17.能打破种子休眠,促进种子、块茎、鳞茎等提前萌发的激素是：ABAGA；BIAA；CNAA；DZt3.下列实验中可能获得单倍体植株的是_BCD_;A小麦的茎尖培养；B番茄花药培养；C玉米胚乳培养；D玉米花粉培养18.在组培条件下,花粉的发育大致有下列几种途径：cdA营养细胞发育途径B生殖细胞发育途径C营养细胞和生殖细胞同时发育途径D花粉的均等分裂19.同一植株下列_B_部位病毒的含量最低.A叶片细胞；B茎尖生长点细胞；C茎节细胞；D根尖生长点细胞20.第一次提出植物细胞具有全能性的理论概念的科学家是__B_：.AMorel；BHaberland；CSchleiden；DWhite21.脱落酸ABA需要用__C__法灭菌;A灼烧灭菌；B干热灭菌；C过滤灭菌；D高压湿热灭菌；23.下列实验中可能获得三倍体植株的是__C__.A小麦的茎尖培养；B番茄花药培养；C玉米胚乳培养；D玉米花粉培养24.原生质体纯化步骤大致有如下几步：①将收集到的滤液离心,转速以将原生质体沉淀而碎片等仍悬浮在上清液中为准,一般以500r／min离心15min;用吸管谨慎地吸去上清液;②将离心下来的原生质体重新悬浮在洗液中除不含酶外,其他成分和酶液相同,再次离心,去上清液,如此重复三次;③将原生质体混合液经筛孔大小为40~100um的滤网过滤,以除去未消化的细胞团块和筛管、导管等杂质,收集滤液;④用培养基清洗一次,最后用培养基将原生质调到一定密度进行培养;一般原生质体的培养密度为104~106／ml;正确的操作步骤是：③①②④CA①②③④B②③①④C③①②④D③②①④25.下列不属于生长素类的植物激素是_A_D_.AKtBIAACNAADABA26.玉米素ZT需要用_C_法灭菌.A灼烧灭菌B干热灭菌C过滤灭菌D高压湿热灭菌三、判断题对的画“√”；错题画“×”,并改正;每小题2分1.一个已分化的细胞若要表现其全能性,首先要经历脱分化过程;√2.由胚乳培养获得的三倍体植株,也一定要进行染色体倍数的检查.√3.一般来说,光照强度较强,幼苗容易徒长,而光照强度较弱幼苗生长的粗壮;×4.经过花药培养所获得的植株都是单倍体;×5.2,4—D可用0．1mol／L的HCl助溶,再加蒸馏水定容.×6.环境的相对湿度可以影响培养基的水分蒸发,一般要求80％-90％的相对湿度;√7.幼年细胞和组织比成年细胞和组织诱导愈伤组织容易.√8.一般的说,PH值高于6.5时,培养基全变硬；低于5时,琼脂不能很好地凝固;√9.在配制6-BA母液时,要先加少量的1mol的HCl溶解,再加蒸馏水定容;√10.未成熟胚较小、较嫩、颜色浅,不易培养；成熟胚较大、较硬、颜色较深,易培养.√11.花器脱分化比茎叶容易；幼嫩的组织比成熟的老组织脱分化难;×12.通过子房的培养,即可能得到单倍体植株,又可能得到二倍体植株..√13.在配制NAA母液时,要先加少量的1mol的HCl溶解,再加蒸馏水定容;×15.环境的相对湿度过低会使培养基丧失大量水分,湿度过高时,易引起棉塞长霉,造成污染;√16.White培养基无机盐浓度低,适合生根培养;√17.由性细胞发育而成的胚叫做胚状体,而由体细胞发育而成的胚叫做合子胚.×18.2,4-D可用0．1mol／L的NaOH或KOH助溶,而后加无菌水定容;√20.二倍体细胞比单倍体细胞容易诱导愈伤组织.×21.在MS的培养基成分中,MgSO4.7H2O属于微量元素.×22.未成熟胚较小、较嫩、颜色浅,易培养；成熟胚较大、较硬、颜色较深,不易培养.×23.固体培养基可加进活性炭来增加通气度,以利于发根;×24.兰花可以通过芽丛分离的组培途径快繁,非洲菊通过原球茎增殖的途径快繁.×25.用于外植体、手、超净台等的表面消毒酒精浓度越大,消毒效果越好.×四、名词解释1.植物组织培养：是指在无菌和人工控制的环境条件下,利用适当的培养基,对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养,使其再生细胞或完整植株的技术;2.细胞全能性：指每一个植物细胞都携带有该植物的全部遗传信息,在适当条件下可表达出该细胞的所有遗传信息,分化出植物有机体所有不同类型的细胞,形成不同类型的器官甚至胚状体,直至形成完整植株的潜在能力;3.脱分化：是指离体培养条件下生长的细胞、组织或器官经过细胞分裂或不分裂逐渐失去原来的结构和功能而恢复分生状态,形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性的细胞的过程;4.母液：在配制培养基之前,为了使用方便、简化操作、用量准确,减少每次配药称量各种化学成分所花费的时间和误差,常常将配制培养基所需无机大量元素、微量元素、铁盐、有机物、激素成分分别配制成比需要量大若干倍的浓缩母液5.驯化：指通过改变其遗传性状以适应新环境的过程6.外植体：把由活植物体上切取下来以进行培养的那部分组织或器官叫做外植体7.愈伤组织培养：将一个细胞、一块组织或一个器官的细胞,通过去分化形成愈伤组织,并在体外培养使之再分化成植株的技术;8.单细胞培养.:亦称游离细胞培养freecellculfure;是指酵母菌、细菌等单细胞生物的培养,或取多细胞生物体上的一个细胞的无菌培养;9.灭菌：是指用物理或化学的方法杀灭全部微生物,包括致病和非致病微生物以及,使之达到无菌保障水平;10.玻璃化现象：指试管苗的一种生长失调症状,当植物材料进行离体繁殖时,有些培养物的嫩茎、叶片往往会出现半透明状和水渍状,这种现象称为玻璃化;其苗称为玻璃化苗;11.无病毒苗：指不含该种植物主要危害病毒的苗木;12.胚状体：离体培养条件下,没有经过受精过程,但是经过了过程所形成的胚状类似物,此现象无论在培养还是生殖细胞培养中均可以看到,因而统称为胚或胚状体;在离体、组织或过程中,由一个或一些体细胞,经过和发育过程,形成与相类似的结构13.细胞全能性：指植物的每一个细胞都携带有一完整的基因组,并具有发育成完整植株的潜在能力;14.指示植物：指示植物与被指示对象之间在全部分布区内保持联系的称为普遍指示植物；只在分布区的一定地区内保持联系的则称为地方指示植物;15.消毒：消毒是指杀死病原、但不一定能杀死细菌芽孢的方法;通常用化学的方法来达到消毒的作用;16.植物生长物质：是指一些在低浓度下能调节植物生长发育的微量有机物;植物生长物质包括五大类被公认的植物激素和其他内源植物生长调节物质;17.单倍体：只含有配子体染色体组数的植株;18.无菌操作：用于防止进入人体组织或其它无菌范围的操作技术称为无菌操作19.脱分化：离体培养条件下生长的器官、组织、细胞,经过细胞分裂或不分裂而恢复分生状态,形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性的细胞过程;21.花粉胚：花粉胚就是用花粉经过人工的组织培养而形成的幼胚,发育成的植株就只有正常胚一半的染色体组,所以由花粉胚发育成的植株不会产生种子;22.褐变：饲料在加工过程中或长期贮存于湿热环境下,其所含的氨基化合物如、氨基酸及醛、酮等与还原糖相遇,经过一系列反应生成褐色聚合物的现象称为褐变反应,简称褐变;24.指示植物法：25.再分化：离体培养的植物细胞和组织可以脱分化状态重新进行分化,形成另一种或几种类型的细胞、器官、组织、、甚至完整植株;26．平板培养：亦称平面培养;将琼脂或明胶等凝胶状固体培养基制成平面状,然后在此平面上培养微生物或多细胞生物的细胞、组织或器官,这种培养称为平板培养27．次生代谢产物：植物中一大类并排植物生长发育所需的小分子化合物,其产生和分布通常有种属、器官组织和生长发育期的特异性;次生产物在植物中的合成与分解过程称为此生代谢;28．人工种子：又称合成种子,指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽,被包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中,从而形成能发芽出苗的颗粒状;五、简答题1.植物组织培养有哪些特点答：植物组织培养的主要特点是采用微生物学的实验手段来操作植物离体的器官、组织和细胞;特点：①培养条件可人为控制②植物生长周期短,繁殖系数高③管理方便,不受季节环境条件影响,有利于工厂化生产和自动化控制;2.培养基一般包括哪些基本成分其作用是什么如何配制答：培养基的构成要素通常可分为：水分、无机盐类、有机营养成分、植物生长调节物质、天然物质、Ph、凝固剂等;水分是一切生物生命活动的物质基础,是很多生物化学反应的原料和代谢产物;无机盐类是构成植物细胞中核酸、蛋白质以及生物膜系统等必不可少的营养元素;有机营养成分为植物生命活动提供必不可少的碳源、氮源、能源等物质;植物生长调节剂可以促进植物组织的脱分化和形成愈伤组织,还可以诱导不定芽、不定胚的形成;天然有机添加剂通常富含有机营养成分或生理活性物质;pH过高时,培养基会变硬；pH过低时,则影响培养基的凝固;凝固剂是在配制固体培养基时使用,使培养基凝固;其他添加物是有时为了减少外植体的褐变,需要向培养基中加入一些防止褐化的物质;3.简述愈伤组织细胞分化;4.原生质体融合有哪几种主要方法答：植物原生质体最大特性是去掉细胞壁的裸细胞无论来源如何都具有彼此融合的能力1.自发融合2.诱发融合：a,NaNO处理b,高PH值—高浓度钙离子处理c,聚乙二醇PEG处理d,电融合3.化学融合5.组织培养中,pH值起什么作用如果pH值过高或过低会有什么后果6.植物组织培养技术主要包括哪些环节各环节的主要工作内容是什么答：1培养基配置技术：包括培养基的选择、母液配制、培养基配制、培养基灭菌;2培养材料制备灭菌技术：供体植物材料选择、外植体的选择和处理;3无菌接种技术：包括接种室的消毒、工作人员用工作服、口罩等的消毒、超净工作台的清洁与杀菌、操作工具的灭菌;4培养技术：主要是培养条件的控制,包括温度、光照、湿度等各种物理环境条件及培养基组成、PH、渗透压等各种化学环境条件;7.培养基、培养器皿和植物材料通常怎样灭菌答：1培养基一般采用湿热灭菌,如果培养基中的有些成分高温易分解,则可采用过滤灭菌;2培养器皿可采用湿热灭菌或干热灭菌;3植物材料一般采用药剂浸泡灭菌,具体操作如下：A外植体的预处理,对植物组织进行修整,去掉不需要的部分,并将外植体用流水冲洗干净;B用70%的酒精浸润材料30s左右;C用灭菌剂浸泡灭菌,灭菌时不时搅动,使植物材料与灭菌剂有良好的接触,若灭菌过程中加入数滴吐温,则灭菌效果更好;D植物材料用无菌水冲洗3--5次,以除去灭菌剂;8.由胚乳培养获得的植株,是否一定要进行染色体倍数的检查为什么9.花药培养产生的植株染色体倍性如何其产生的原因是什么10.为什么对脱毒处理后产生的植株必须进行病毒鉴定为什么已通过病毒特定病毒鉴定的无病毒苗还须重复鉴定11.使用植物生长物质应注意些什么12.为什么幼胚比成熟胚培养要求的培养基成分复杂13.胚胎培养技术在育种工作中有哪些应用14.试比较花药培养与花粉培养的异同;15.简述酶法分离原生质体的步骤.答：叶片表面消毒→去除表皮,将叶片切成小块→叶碎片放入含有酶和渗透压稳定剂的溶液中→摇床保温培养→原生质体沉到培养皿底部→除去酶溶液→将原生质体移入CPW清洗→离心→清洗基质两次→重悬浮于培养基16.影响马铃薯茎尖培养脱毒的因素有哪些17．简述人工种子生产步骤答：选取目标植物→从适合的外植体上诱导愈伤组织→将愈伤组织转移到液体培养基→愈伤组织在液体培养基中增生扩大→愈伤组织转移至无激素培养基→产生体细胞胚→包裹人工种皮→炼苗→温室大棚播种→获得目标植物18．愈伤组织的形态发生有哪两种情况并比较各自由此形成完整植株的不同;1、答：愈伤组织的形态发生可通过两种途径实现,一种是根芽器官直接分化形成植株,即器官发生途径；另一种是产生具胚芽、胚根的胚状体结构再形成植株,即体细胞胚胎发生途径;在器官发生途径中,芽或芽原基起源于培养组织中比较表层的细胞,即外起源,而根原基则发生于组织较深处,呈现单向极性,所形成植株的维管组织与外植体的维管组织联在一起;而在胚状体发生途径中,绝大多数体细胞胚起源于单细胞,形成的胚状体有双极性,维管组织与外植体没有联系;19．简述幼胚和成熟胚的区别;20．无病毒原种母株的保存及繁殖中最关键的问题是什么怎样解决21．NAA的中文名称是什么有何作用和特点答：NAA的中文名称叫萘乙酸,是一种人工合成的生长素;其在植物体内有促使茎和节间伸长、向性运动、顶端优势、器官脱落和生根的作用;在组织培养中NAA被用于诱导细胞的分裂和根的分化,并能与细胞分裂素互作促进茎芽的增殖;六、论述题1.请你设计一个组培实验室,说明你设计组培实验室各分室的作用及其所需主要仪器设备;2.请论述非洲菊的无菌苗的诱导、继代快繁、生根培养及其驯化移栽过程;3.某地区的一种马铃薯经多年的种植后,植株变的矮小,产量和品质都下降,怀疑是由病毒所至;请你设计一个病毒的鉴定和脱毒的技术方案;4.请阐述原生质体的分离、纯化和活力鉴定的技术过程;5.请分别列出七种仪器设备和七种玻璃器皿的名称,并说明它们的作用;6.请阐述用大蒜脱毒和快繁的程序;为什么试管苗在经过热处理和茎尖培养等方法脱毒后,还需要进行病毒的鉴定7.请论述非洲菊的无菌苗的诱导、继代快繁、生根培养及其驯化移栽过程;8.请论述香石竹的无菌苗的诱导、继代快繁、生根培养及其驯化移栽过程;9.现在需要你配制3升胡萝卜肉质根愈伤组织诱导培养基,其配方为MS＋2.4-D2mg/L＋KT0.2mg/L＋蔗糖3%＋琼脂0.7%,请你阐述培养基的配制和分装直到灭菌的全部技术过程;。
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二、植物组织培养的途径
一般流程
？
脱分化
外植体
？
愈伤组织 再分化
植株
二、植物组织培养的途径
选修1
外植体中 分生组织
丛状苗
生根
植株
二、植物组织培养的途径
选修3
外植体
愈伤组织 丛状苗 生 根
植株
二、植物组织培养的途径
选修3
外植体
愈伤组织
单细胞 细胞团 球形胚 心形胚
胚状体
植株
二、植物组织培养的途径
植物细胞在植株内为什么不能体现全能性？
基因的选择性表达
一、理论基础
拟南芥
烟草
番茄
容易再生出新植株，并能在多个世代中保持细胞全能性的表达
小麦
玉米
水稻
较难再生，在多次继代培养后会丧失细胞全能性的表达能力
1.（2018.4浙江卷）取田间不同品种水稻的幼胚，先进行_消_毒____，然后接种到培养基中培养，幼胚发生 ___脱__分__化__形成愈伤组织，并进行继代培养。影响愈伤组织能否成功再生出植株的因素有：培养条件如光 照、温度、培养基配方如植物激素配比、以及____愈__伤__组__织__继__代__的__次__数__、__水__稻__的__基__因__型__（答出2点即可）
C 错误的是（
）
A.外施赤霉素合成抑制剂,种子萌发会受到抑制
B.抑制与脱落酸合成相关酶的基因表达,会引起胎萌
C.外施脱落酸,可抑制脱落酸受体缺失突变体发生胎萌
D.离体的水稻成熟胚,可在无激素的MS培养基上萌发
四、应用
（四）原生质体培养
植物细胞A
植物细胞B
如何原去生除质细体胞的壁获且得不破坏 细胞的生命活性？
必修1
外植体
愈伤组织
单细胞 细胞团 球形胚 心形胚
胚状体
植株
二、植物组织培养的途径
胚胎发生途径
外植体
愈伤组织
细胞团 球形胚 心形胚 单细胞
胚状体
植株
途
径
器官发生途径
外植体
愈伤组织 丛状苗 生 根
植株
其它途径
外植体中 分生组织
丛状苗
生根
植株
二、植物组织培养的途径
丛状苗 生根
脱分化
外植体
愈伤组织
植株
植物组织培养
01
02
03
理论基础
培养途径
➢ 细胞的全能性
➢ 胚胎发生途径 ➢ 器官发生途径 ➢ 其他途径
应用
➢ 快速获得同质后代 ➢ 规模化生产次生代谢产物 ➢ 获得人工种子 ➢ 原生质体培养 ➢ 培养转基因植物 ➢ 单倍体育种 ➢ 获得脱毒苗
四、应用 （一）快速获得同质后代
组培育苗法繁殖快，一年内，一个分生组织可以获得几万甚至几十万株 幼苗，且不占用地，不受环境的影响，为植物工厂的建立提供了技术保障。
四、应用 （二）规模化生产次生代谢产物
大量培养特定细胞系（愈伤组织），可获得植物的次生代谢产物（如某些中药）
紫草
愈伤组织
紫草素 （活血化瘀）
定义 细胞具有的分化出各种细胞， 形成完整个体的潜能。
细胞的全能性
原因
生物体每个细胞都含有该物种 全套遗传物质。
长期培养的细胞全能性 下降的原因
➢ 遗传物质改变 （且结果不可逆）、
➢ 激素平衡被打破或敏感性发 生改变
➢ 产生了缺乏成胚性的细胞系
细胞的全能性
如何体现 ➢ 脱离母体、无菌 ➢ 给予适宜的营养和外界条件
（答出2点即可）
观察细胞质的流动
(2)原生质体在培养过程中,只有重新形成___细__胞__壁____后,才可进行有丝分裂。多次
分裂形成的小细胞团可通过_____胚__胎__发__生________或器官发生的途径再生植株。
四、应用 （五）培育转基因植物
6.（2017.11浙江卷）利用植物克隆培育新品种,一方面可利用带有目的基因的 ___农__杆__菌__侵染植株，或将目的基因通过__显__微__注__射__方法导入植物细胞、组织、器官 获得转基因植株，另一方面利用异源植株的_原__生__质__体___进行融合产生杂种植株,或利 用异源植物在试管内进行___受__精_____,对其产生的胚进行培养产生杂种植株。
B. MS培养基+适宜浓度NAA C. MS培
养基+适宜浓度BA
D. NAA/BA小于1的MS培养基)上生根，形成完整植株。
四、应用 （三）获得人工种子
人工种皮：人工薄膜
胚状体
人工胚乳 （营养物质、抗生素、植物激素）
人工种子
4.(2020.1浙江卷)胎萌是指种子未脱离母体即发芽。下列关于种子胎萌和萌发的叙述,
单细胞 胚状体
2.(2017·11月浙江卷)回答与植物克隆和动物克隆有关的问题: 利用植物愈伤组织获得再生植株主要有两条途径:一是由愈伤组织的细胞先分化产
生芽和根后再形成一个完整植株的___器_官__发__生_____途径,二是由愈伤组织细胞产生胚状体 后再萌发形成完整植株的胚胎发生途径。另外，也可不通过愈伤组织阶段而直接采用带 腋芽的茎段培养成丛状苗,再诱导生根获得再生植株,其原因是腋芽中存在__分__生__组__织____。
3.(2015.10浙江卷)将消毒后的矮牵牛叶片剪成小片，在含有目的基因的农杆菌溶液中
浸泡后，取出并转移至加有适当配比生长调节剂的MS培养基(含蔗糖、琼脂和抗生素，
下同)上，使叶小片先脱分化形成_愈__伤__组__织___。再将其转移至另一培养基诱导形成芽，
芽切割后转移至_B_______( A. LB培养基
定义
植物组织培养
也叫做植物克隆，从植物体分离出符合需要的组织、器官、细 胞或原生质体等，在无菌条件下，接种在含有各种营养物质及 植物激素的培养基上进行培养，以获得再生植株的技术。
一般流程
脱分化
外植体
愈伤组织 再分化
植株
同一株绿色开花植物不同部位的细胞，经培养获得的植株基因型一定相同？ 不一定
一、理论基础
四、应用 （四）原生质体培养
5.(2020.1月浙江卷)回答与基因工程和植物克隆有关的问题：
(1)为了获取某植物叶片无菌的原生质体,先将叶片经表面消毒并去除下表皮,再将其
置于经___过__滤__灭__菌____处理的较高渗透压的混合酶溶液中。酶解后经多次离心获得原
生质体。然后测定该原生质体的活性，可采用方法有_染__色__法__,_渗__透__吸__水__失__水__、____。
去壁
原生质体A
融合的原理及常用
酶解法
酶的 专一性
去壁 原生质体B
生物膜的
原 生 质 体
的融合聚乙方二法醇？（PEG）、电刺激
融合 流动性
融
融合的原生质体AB
合
杂种细胞的形成 杂种植株的产生
再生细胞壁
杂种细胞AB
植
脱分化
物 组
愈伤组织
织
再分化
培
杂种植株
养
四、应用 （四）原生质体培养
1978年梅尔彻斯(Melchers)等首次获得了马铃薯 和番茄的属间体细胞杂种——“Pomato”