5.血小板的基础知识

血小板的基础知识

血小板（blood platelet）是哺乳动物血液中的有形成分之一。形状不规则，比红细胞和白细胞小得多，无细胞核，成年人血液中血小板数量为100~300×1000000000个/L，它有质膜，没有细胞核结构，一般呈圆形，体积小于红细胞和白细胞。血小板在长期内被看作是血液中的无功能的细胞碎片。血小板具有特定的形态结构和生化组成，在正常血液中有较恒定的数量（如人的血小板数为每立方毫米10～30万），在止血、伤口愈合、炎症反应、血栓形成及器官移植排斥等生理和病理过程中有重要作用。血小板只存在于哺乳动物血液中。

1．血小板增多：当血小板计数>400×10^9/L时为血小板增多，原发性血小板增多常见于骨髓增生性疾病，如慢性粒细胞白血病，真性红细胞增多症，原发性血小板增多症等；血小板增多症常见于急慢性炎症，缺铁性贫血及癌症患者，此类增多一般不超过500×10^9/L，经治疗后情况改善，血小板数目会很快下降至正常水平。脾切除术后血小板会有明显升高，常高于

600×10/L，随后会缓慢下降到正常范围。

2．血小板减少：当血小板计数<100×10^9/L即为血小板减少，常见于血小板生成障碍，如再生障碍性贫血，急性白血病，急性放射病等；血小板破坏增多，如原发性血小板减少性紫癜，脾功能亢进，消耗过度如弥漫性血管内凝血，家族性血小板减少如巨大血小板综合征等。

浓缩血小板的汇集滤白及深低温保存

血小板输注是治疗各种因血小板减少或功能障碍引起出血的有效治疗手段。目前国内血小板制备多采用机采制备，由于机采无偿献血者的招募有一定难度并且随着临床血小板用量的逐年增加，很多地方的血小板供应单独靠机采已不能满足临床需求，而现有的血液资源大量被浪费，如何利用现有的血液资源分离手工浓缩血小板供应临床，同时尽量减少手工血小板多人份输注，容易引起同种免疫导致输注无效的弊端是解决目前血小板临床供应的一个有效途径。由于血小板免疫性输注无效主要为HLA抗体引起，其次为HPA 抗体[1，2]，去除手工浓缩血小板中的白细胞就可减少输血反应和最大限度地避免同种免疫的发生。本站采用血小板专用滤白滤器以每10u为一治疗量，制备新鲜汇集滤白血小板用于预防性血小板输注患者，同时制备冰冻汇集滤白血小板，用于急诊和手术止血患者，取得了较好的临床效果。现将方法报告如下。

1 材料与方法

1.1 材料200ml或400ml于6小时内采集22℃±2℃保存的三联袋全血；血小板专用汇集滤除

白细胞输血器（南京双威生物医学科技有限公司提供）；二甲基亚砜（DMSO）上海博光生

物科技有限公司提供。

1.2 仪器设备Cyrofuge 6000i大容量离心机（德国贺利氏）；BC-2800全自动血液细胞分析仪（深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司）；SANYO MDF-U52V -86℃医用冰柜（日本三洋）；KJX-1A冰冻血浆解冻箱（苏州市医用仪器厂）PC-100血小板保存箱（美国HELMER）。

1.3 浓缩血小板的制备，采用富浆法制备。

1.3.1第一次离心，贺利氏6000i离心机，22℃±2℃，加速度为9，减速度为4，200ml 袋离心力465g，离心7min，400ml袋离心力1012g，离心8min。

1.3.2 注意血袋装杯时不能打褶，防止离心后红细胞挂壁。最佳离心效果以离心后上层血浆中无肉眼可见红细胞，血浆与红细胞分层清楚并且无明显白膜层出现为标准，如果分层不清要混匀后适当加大离心机转速重离。分浆开始时可以不用控制流速，血浆分出一半后要逐渐减慢流速，以上层血浆分净且无红细胞混入为标准。

1.3.2 第二次离心贺利氏6000i离心机，22℃±2℃，加速度为9，减速度为4，离心力3000g，离心10min。

1.3.3 血小板解聚浓缩血小板1u留浆20-30ml，2u留浆30-50ml，分离后放置在血小板保存箱中（22℃±2℃）静置1h后，取出轻轻摇动血袋，频率60次/min，振幅5cm使血小板完全解聚后振荡保存（22℃±2℃）。

1.4 新鲜汇集滤白血小板制备

1.4.1汇集前血小板保存24h内挑选检验结果合格，外观无肉眼可见红细胞并且呈云雾状，无细小颗粒，解聚完全的同型血小板，每10u为一个汇集量进行汇集。

1.4.2 汇集滤白在百级净化间或净化台中采用无菌操作技术，将每袋血小板连接到血小板汇集滤器上，导入汇集袋中，然后把汇集袋挂在架上，打开滑轮，调解流速为点线状滤除白细胞。过滤完成把汇集滤白血小板袋热合。如果临床需要新鲜血小板就可直接发放，如需保存按下面方法制备。

1.5 冰冻汇集滤白血小板

1.5.1 低温保护剂准备DMSO原液采用无菌技术加入静脉用生理盐水稀释成75%浓度，于-50℃冰冻柜中保存备用。

1.5.2 DMSO加入制备完成的汇集滤白血小板袋称重，去皮，按7.1%的比例计算需加入的75%DMSO量，在百级净化间或净化台中采用无菌操作技术，用一次性注射器抽取-50℃

75%DMSO快速加入血小板袋中，加入后轻轻摇动血袋，加入后血小板袋的手感温度应无明显变化。

1.5.3 冰冻保存加入DMSO的汇集滤白血小板平放装入纸盒中，纸盒上面要开口，血小板袋的厚度不能超过0.5cm。将装盒后的血小板平放在-80℃的深低温冰箱中冰冻保存，要单层放置，不能叠放，放入后4小时内不能开启冰箱，防止在降温过程中温度回升，冰冻失败。

1.5.4 解冻使用前把冰冻汇集滤白血小板从深低温冰箱中取出，套上塑料袋挂在37℃循环水解冻箱中20-40min解冻。

1.5.5 解冻后外观检查解冻后的血小板外观应为淡黄色均匀混悬的液体，有旋光性，无絮状物和细丝为合格，可发放临床。

2 计数随机抽检30袋（10u/每袋）汇集血小板，滤白前、滤白后和解冻后样品用全自动血液细胞分析仪进行计数结果（表1）

表1 30份样本WBC、RBC、PDW、PLT计数结果平均值、SD（n=30）及回收率计算

3 讨论

3.1 滤白后每袋血小板残留白细胞计数均值为0.2×107个，远低于机采血小板标准[3]，平均去除率为98.3%，多数汇集袋达到100%；血小板计数均值为

4.59×1011个，远高于一个治疗量的机采血小板标准[3]（2.5×1011）。平均回收率为92.9%，。

3.2 汇集袋中残留红细胞平均为9×109个，符合手工浓缩血小板标准，略高于机采标准[3]。

3.3 冰冻汇集血小板解冻后PDW均值为16.1，在正常范围（15-17）内，血小板的计数均值为

4.52×1011，平均回收率为98.3%。

3.4 结果表明每个治疗量（10u/每袋）手工血小板汇集后，采用血小板专用滤白滤器进行滤白效果良好，在提高治疗效果的同时减少了输血反应，最大限度地避免同种免疫的发生，也减轻了患者的经济负担，同时利用了现有的血液资源，缓解了血小板供需矛盾。

4科学合理输注新鲜血小板保存期短，制备不及时，但输后计数提升效果优于冻冰血小板[4]，较适合需长期预防性血小板输注患者；冻冰血小板保存期长且冻冰血小板的临床止血效果优于新鲜血小板[4]，适用于血小板减少或功能障碍引起出血患者的止血，特别是假期、急诊以及创伤和外科手术出血患者的抢救。

机采血小板

使用血细胞分离机在无菌密闭的条件下,从单个供体内分离采集血小

板成分称为机器单采血小板.由于只是一个人献血小板，可以减少输血后传染病及输血反应，提高治疗效果,便于血小板配型，血小板的品质优良,节约献血员。一般人可以反复多次献血小板

血液主要由红细胞、白细胞、血小板、血浆等主要成分组成，每一种成分都有其不同的功能。血小板的主要作用是止血和凝血。出血时，血小板迅速粘附、聚集到出血处，通过一系列反应阻止进一步出血。人体血小板的寿命一般为7-11天，每天约有10%-20%的血小板由于衰老而死亡，同时也有新的血小板不断生成。因此，人体中的血小板处于不断的新陈代谢过程中。在临床上，血小板主要用于救治一些因各种原因造成的血小板减少或功能异常的患者，一般常见于白血病、再生障碍性贫血、淋巴瘤、骨髓移植等血液病患者以及因放化疗而引起骨髓抑制的癌症病人，其中有很多患者需要依靠不间断地输注血小板来维持生命。

无偿献血者在献血车、献血屋通常捐献的是全血，单人份全血中所含的血小板很少，达不到针对治疗目的。但是一次机采血小板的捐献者便可以向病人提供一个治疗量的血小板，相当于全血中血小板量的5-10倍，所以需要用现代方式——以机采的形式捐献血小板，以满足患者的用血需求。

捐献机采血小板与捐献全血基本相同。从一只手臂入针通过一次使用管道，经过血液分离机，分离出所需要的某一种成分（如血小板），同时将其它血液成分输还给献血者。全过程大约需一个半小时左右。

健康人体内血小板数量充裕，捐出的血小板在48-72小时内就可以恢复到采前水平，比捐献全血的恢复时间要短得多。因此捐献者可以每间隔一个月捐献一个治疗量的机采血小板。在捐献成分血的过程中，捐献者的血液都是在经严格消毒的密闭管道套材中循环和分离，每位捐血者每次使用的都是一次性全新套材，绝对不会造成交叉污染。