实验九甘草酸的提取、分离与鉴定
实验九甘草酸的提取、分离与鉴定
仪器、材料与试剂
甘草、硫酸、氢氧化钾、冰醋酸、加热回流 装置、水浴锅、抽滤装置、硅胶G板等。
实验步骤
1. 甘草酸的提取
取甘草粗粉20克，加水150毫升，于水浴上温浸30分钟，
棉花过滤，药渣再用100毫升水温浸30分钟，棉花过滤， 合并滤液，水浴浓缩至40毫升，滤除沉淀物，放冷加入 浓H2SO4并不断搅拌，至不再析出甘草酸沉淀为止，放 置，倾出上清液，下层棕色粘性沉淀用水洗涤四次，室 温放置干燥，磨成细粉，为甘草酸粗品。
实验步骤甘草酸的提取取甘草粗粉20克加水150毫升于水浴上温浸30分钟棉花过滤药渣再用100毫升水温浸30分钟棉花过滤合并滤液水浴浓缩至40毫升滤除沉淀物放冷加入浓h2so4并不断搅拌至不再析出甘草酸沉淀为止放置倾出上清液下层棕色粘性沉淀用水洗涤四次室温放置干燥磨成细粉为甘草酸粗品
甘草酸的提取、 分离与鉴定
3. 性质实验及色谱检查 l）、泡沫实验 取甘草酸单钾盐水溶液2毫升，置试管中用力振摇，放置 10分钟后观察泡沫。 2）、醋酐—浓流酸反应(Liebermann—Barchard反应) 取甘草酸单钾盐少量，置白瓷板上，加醋酐2—3滴使溶解， 再加半滴浓硫酸观察颜色变化。 3）、氯仿—浓硫酸反应 取甘草酸单钾盐少量，加l毫升氯仿，再沿试管壁滴加浓硫 酸1毫升，观察两层的颜色变化及荧光。 4）、薄层色谱 吸附剂：硅胶G板100℃活化半小时。 展开剂：正丁醇—醋酸—水(6：1：3上层) 样品：甘草酸单钾盐标准品，甘草酸单钾盐70％乙醇液。 显色剂：磷钼酸
实验目的
1、掌握甘草酸的提取原理和方法 2、熟悉皂甙的性质和鉴定方法。
实验原理：
甘草酸(G1ycyrrhizic acid)由冰醋酸中结晶出来的为白色柱状 结晶，mpl70℃。易溶于热水、热稀乙醇、丙酮、不溶于乙 醇、乙醚等。在加热、加压及稀酸作用下，可水解为甘草次 酸及二分子葡萄糖醛酸。
设计实验 甘草酸的提取、测定与纯化
生化实验设计实验报告甘草酸的提取、测定与纯化中药甘草，属豆科植物，生长于草原向阳干燥钙质土地以及河岸沙质地土壤中，富含甘草皂苷，又称甘草酸，特点是高甜度、低热能、安全无毒，起泡性和溶血作用很低。
具有增溶、增加药物稳定性、提高生物利用度及降低毒副作用的功效。
甘草酸的许多金属盐，人体可适当吸收，不易造成元素的积蓄中毒。
因此常被用来配制成健脾开胃、止咳化痰、顺气止喘、治疗慢性肝炎、降低血脂的良药。
同时还具有抗癌防癌、干扰素诱生剂及细胞免疫调节剂等功能。
提取的甘草酸溶液中，还含有大量的蛋白质、果胶、鞣质等物质，在提取过程中，这些杂质也转移到了提取液中。
由于这些物质的大量存在，使得产物的含量降低，试验误差加大，同时甘草酸作为药物和保健品等使用时，杂质还会引起一些副作用，因此必须将这些杂质除去，对甘草酸进行纯化。
一、实验目的1.掌握甘草酸的提取原理和方法。
2.熟悉皂甙的性质和测定方法。
3.掌握甘草酸的分离纯化方法。
二、实验原理甘草酸在原料中以钾盐或钙盐形式存在，其盐易溶于水，因此可用极性溶剂提取，提取后滤液再加硫酸，因难溶于酸性溶液而析出游离甘草酸。
提取后滤液再加硫酸，因难溶于酸性溶液而析出游离甘草酸。
三、实验材料和试剂甘草，极性溶剂，硫酸，苯酚，甘草酸浓缩液四、实验内容与步骤甘草酸的提取（稀氨水提取法）1.1用粉碎机将甘草片粉碎，称取20g甘草粉，加0.6%的稀氨水300mL,在沸水浴中加热60min, 过滤，分别收集滤液和滤渣。
1.2将滤渣加300ml稀氨水重复浸提两次，合并滤液，记录滤液体积。
1.3测定提取液中的甘草酸含量：a.制作标准曲线精密称取甘草酸标准品10.00mg，置于10ml容量瓶中，加70%乙醇溶解并定容。
精密吸取0.50ml、0.75ml、1.00ml、1.25ml、1.50ml，分别置于25ml容量瓶中，加70%乙醇摇匀定容，静置20min，在波长254nm处测定吸光值。
b. 测定甘草酸含量将提取液摇匀，准确移取一定量的提取液转移到25ml容量瓶中，用70%乙醇定容，静置20min 后于254nm处测定吸光度。
甘草酸的提取分离及鉴定实验报告
甘草酸的提取分离及鉴定实验报告甘草酸是一种常见的草药成分，具有广泛的药理活性和医疗应用价值。
本实验旨在通过提取和分离的方法获取纯度较高的甘草酸，并通过一系列鉴定实验确定其结构和纯度。
我们采用乙醇作为提取剂，将甘草粉碎成细粉，然后与乙醇进行浸泡提取。
乙醇具有较好的溶剂性能，可以有效提取甘草中的甘草酸成分。
浸泡时间一般为24小时，可在室温下进行。
提取后，将混合溶液过滤，得到乙醇溶液。
接下来，我们使用分离漏斗将乙醇溶液与等体积的正己烷进行液液分离。
甘草酸在正己烷中的溶解度较低，因此可以通过这种分离方法将甘草酸从乙醇溶液中分离出来。
分离后，我们得到了正己烷层和乙醇层。
然后，我们对正己烷层进行蒸馏提纯。
将正己烷层进行蒸馏，得到的蒸馏液中富含甘草酸。
此时，我们可以使用旋转蒸发仪将蒸馏液浓缩，以便于后续的鉴定实验。
蒸发浓缩后，我们得到了甘草酸的样品。
接下来，我们进行甘草酸的鉴定实验。
首先，我们可以通过比色法确定甘草酸的纯度。
将甘草酸溶解于乙醇中，然后使用紫外可见光谱仪测定其吸收峰的强度和波长。
根据甘草酸的吸收特性，可以确定其纯度。
我们还可以使用红外光谱仪对甘草酸进行鉴定。
根据甘草酸的分子结构，预测其可能的红外吸收峰位置，并通过红外光谱仪测定样品的红外吸收谱图，与数据库中的标准谱图进行对比，从而确定甘草酸的结构。
我们可以使用质谱仪对甘草酸进行质谱分析。
将甘草酸样品溶解于适当的溶剂中，然后通过质谱仪进行质谱测定。
根据质谱图谱的分子离子峰和碎裂峰，可以确定甘草酸的分子量和结构。
通过以上一系列的实验步骤，我们成功提取分离并鉴定了甘草酸。
实验结果表明，我们得到的甘草酸样品具有较高的纯度，并且其结构与甘草酸的结构一致。
这为甘草酸的进一步研究和应用提供了基础。
同时，该实验方法也为其他草药成分的提取和分离鉴定提供了参考。
李莹 甘草酸的提取及测定
北方民族大学学生实验报告院（部）生物科学与工程学院姓名李莹学号20113649专业生物科学班级科学111班课程名称生物化学实验实验名称甘草酸的提取及测定同组人员唐桂芬冉湘黔郭爽阿依吐尔逊实验日期2013.12.20批阅日期教师签名成绩实验名称甘草酸的提取及测定实验目的：1.掌握甘草酸的提取原理和方法2.熟悉的皂甙性质和测定方法实验材料：1.仪器：电子天平，恒温箱，恒温水浴锅，722s分光光度计，旋转蒸发器，Sigma高速冷冻离心机2.材料：甘草,70.0%乙醇,浓硫酸,去离子水实验原理：甘草酸在原料中以钾盐或钙盐形式存在，其盐易溶于水，因此可用极性溶剂提取，提取后滤液再加硫酸，因难溶于酸性溶液而析出游离甘草酸。
实验内容及步骤：（一）甘草酸的提取1.将市售甘草干燥后，用粉碎机将其粉碎成粉末状2.用电子天平称取甘草粉末10g，再向盛有甘草粉末的烧杯中加入100ml的去离子水，搅匀，将烧杯放在温度在70℃下的水浴锅中加热1h3.加热后的溶液进行过滤，滤渣再放入烧杯，再加入100ml去离子水加热提取2次，将3次提取的滤液合并4.将滤液取出少量放在烧杯里待用，剩下的液体倒入旋转蒸发器中进行浓缩，浓缩后的溶液倒入另一个烧杯中滴加两滴浓硫酸，测PH为2-3时，静置使溶液完全沉淀5.将上清液倒入离心管里进行离心，转速为10000转，离心5min，取出离心管倒去上清液，用去离子水洗沉淀3次，将所得的沉淀混合液用滤纸进行过滤，再将滤纸片放到60℃恒温箱烘干，即得到甘草酸粗品。
（二）提取液中甘草酸的测定将上述4步骤中待用的少量提取液摇匀，准确移取5ml,10ml,15ml,20ml的提取液于25ml容量瓶中，用70.0%乙醇定容，静置20min后，于254.0nm处测定其吸光度。
绘制标准曲线，根据标准曲线计算提取液中甘草酸的浓度C，再计算甘草酸提取率。
甘草酸提取率的计算公式：甘草酸提取率=nCV/m×100%其中:n一提取液稀释倍数；C一提取液中甘草酸的浓度,mg/mL；V一提取液体积,mL；m一甘草的质量,mg数据处理：编号 1 2 3 4 5 提取液（ml ） 0 5 10 15 20 70.0%乙醇（ml ） 25 20 15 10 5摇匀，静置20min ，以1号管为空白对照，测在254.0nm 处吸光度 A(254.0nm) 0.000 0.017 0.025 0.028 0.032甘草酸测定标准曲线y = 0.0015x + 0.0042R 2 = 0.920900.010.020.030.04510152025甘草酸提取液的体积/ml吸光度值(A )甘草酸的测定标准曲线线性 (甘草酸的测定标准曲线)甘草酸的提取率：n=5，C=10×103mg ／300ml=33.33mg/ml ，V=20ml,m=10g 甘草酸提取率=nCV ／m=(5×33.33mg/ml ×20ml) ／10×103mg ×100%=33.33%实验结论及误差分析：实验结论：1.实验中得到的甘草酸粗品为0.049g ，甘草酸的提取率为33.33%， 2.甘草酸其盐易溶于水，难溶于酸性溶液。
甘草酸的微波提取与含量测定实验报告
甘草酸的微波提取与含量测定实验报告实验目的：
本实验旨在通过微波提取的方法提取甘草酸，并对提取物中甘草酸的含量进行测定。
实验原理：
甘草酸是一种具有丰富药用价值的天然产物，常见于甘草等植物中。
微波提取是一种高效、快速的提取方法，能够在较短的时间内从样品中提取目标成分。
实验步骤：
1.准备样品：将甘草酸含量已知的甘草药材研磨成粉末状。
2.称量样品：称取适量的甘草药材粉末，精确记录其质量。
3.加入提取溶剂：将甘草药材粉末与适量的提取溶剂（如乙醇）混合，待溶解。
4.微波提取：将混合物置于微波提取仪中，设置合适的提取条件（如温度、时间等），进行微波提取。
5.提取液浓缩：将提取液转移至烧杯中，通过蒸发或其他浓缩方法使其浓缩。
6.甘草酸含量测定：采用合适的分析方法（如高效液相色谱法）对提取物中的甘草酸进行测定，记录结果。
实验结果与讨论：
根据实验测定，我们成功提取到了甘草酸，并测定出其含量为X%。
这表明微波提取是一种有效的甘草酸提取方法。
在实验过程中，我们注意到微波提取的优点在于提取速度快、操作简便，同时提取效果也较好。
然而，仍需要进一步的研究来优化提取条件以获得更高的提取效率。
结论：
本实验通过微波提取的方法成功提取到甘草酸，并测定出其含量为X%。
这为进一步研究甘草酸的药用价值提供了基础数据。
微波提取是一种高效、快速的提取方法，值得在其他天然产物的提取中进行深入研究和应用。
甘草中甘草酸的提取实验报告
甘草中甘草酸的提取实验报告甘草中甘草酸的提取实验报告概述：本实验旨在通过提取甘草中的甘草酸，了解其提取方法和纯化过程，以及甘草酸的性质和应用。
实验采用了溶剂提取法和结晶法，最终成功提取出纯度较高的甘草酸。
实验步骤：1. 材料准备：甘草、无水乙醇、石油醚、醋酸乙酯、无水乙醚、浓盐酸、浓氨水。
2. 提取甘草酸：将甘草研磨成粉末状，加入无水乙醇中，搅拌均匀，静置一段时间，过滤得到甘草提取液。
3. 萃取甘草酸：将甘草提取液与石油醚混合，振荡均匀，分液漏斗分离有机相和水相。
4. 纯化甘草酸：将有机相转移至蒸馏烧瓶中，加入醋酸乙酯，加热回流，蒸发醋酸乙酯，得到甘草酸溶液。
5. 结晶甘草酸：将甘草酸溶液冷却至室温，加入无水乙醚，搅拌均匀，静置结晶，过滤得到甘草酸晶体。
6. 纯化甘草酸晶体：将甘草酸晶体溶解于浓盐酸中，加热搅拌，过滤得到甘草酸纯品。
7. 验证甘草酸：将甘草酸溶解于浓氨水中，观察其颜色变化，测定其溶解度。
结果与讨论：通过以上实验步骤，成功提取出了纯度较高的甘草酸。
在提取过程中，溶剂的选择和比例对提取效果有重要影响。
无水乙醇是较好的提取溶剂，能够将甘草中的甘草酸有效溶解出来。
而石油醚和醋酸乙酯则用于萃取和纯化过程，能够去除杂质，提高甘草酸的纯度。
在结晶过程中，温度和溶剂的选择也是关键。
将甘草酸溶液冷却至室温后，加入无水乙醚，可以通过溶剂效应促进结晶的发生，得到较大且纯度较高的甘草酸晶体。
而浓盐酸则用于纯化甘草酸晶体，通过酸解结晶，去除杂质，得到纯净的甘草酸。
甘草酸具有多种药理活性，广泛应用于中药和食品工业中。
它具有抗炎、抗氧化、抗溃疡、降血压等作用，可用于治疗消化系统疾病、心血管疾病等。
此外，甘草酸还可用于食品添加剂，具有增香、保鲜等功能。
结论：本实验成功提取出了纯度较高的甘草酸，并验证了其性质和应用。
通过溶剂提取法和结晶法，可以有效提取和纯化甘草酸。
甘草酸具有多种药理活性和广泛应用前景，对于中药研究和食品工业具有重要意义。
甘草酸及甘草次酸
综合实验甘草中甘草酸的提取、分离及甘草次酸的制备一、实验目的和要求1. 根据目标成分的极性和溶解性能，掌握选择溶剂、提取及分离的方法。
2. 掌握酸水解、有机溶剂提取和精制三萜皂苷苷元的方法。
3. 掌握结晶、重结晶法。
4. 熟悉三萜皂苷及其苷元的性质和检识方法。
二、实验原理甘草酸和甘草次酸均为含有羟基的酸性三萜皂苷，甘草次酸为甘草酸的苷元。
甘草酸酸性较强，在植物中与钾成盐而溶于水。
而甘草酸在冷水中的溶解度较小，可以用水渗漉后再酸化得到甘草总皂苷粗品。
由于甘草酸不易精制，所以一般先将其转变为甘草酸的单钾盐，然后再水解得到甘草次酸。
甘草酸甘草次酸三、实验材料试剂：10%氨水（15 mL），5%硫酸，20% KOH（95%乙醇），丙酮（50 mL），冰醋酸（15 mL），95%乙醇，二氯甲烷（50 mL），浓硫酸-醋酐（1:20），醋酐，5%磷钼酸乙醇液（置喷瓶中），正丁醇-冰醋酸-水（4:1:2）展开剂仪器：渗漉筒，玻璃棒，烧杯（500 mL），抽滤装置，研钵研棒，烘箱，广口三角瓶（150 mL），三角瓶（50 mL），圆底烧瓶（100 mL），冷凝回收有机溶剂装置一套，刮刀，培养皿，分液漏斗（100 mL）。
其它：pH试纸四、实验方法1. 甘草酸粗品提取2. 甘草酸单钾盐制备3. 甘草次酸的制备五、检识1. 醋酐-浓硫酸反应：将样品溶于醋酐中，加入浓硫酸-醋酐（1:20），可产生黄-紫红色2. 薄层色谱检识：于硅胶G-CMC-Na板上点样，用正丁醇-冰醋酸-水（4:1:2）展开。
喷5%磷钼酸乙醇液，110度加热10 min显色。
六、注意事项1. 水渗漉液调酸沉淀后，要充分陈化，否则难以抽滤。
2. 冰醋酸不慎沾到皮肤（特别是脸上）后要立即水清洗。
3. 回收有机溶剂要冷凝回收，不可敞口加热挥发。
甘草中甘草酸提取与分离的研究
内 蒙古 石 油化 工
１
甘 草 中甘 草 酸 提 取 与分 离 的 研 究
李赞 忠 ， 子 荣 ， 乔 乌 云
（ 内蒙古化工职业学院 ， 内蒙 古 呼和 浩特 ００１） １ ０ ０
摘
要 ： 草 是我 国传 统 的 中药 ， 甘 来源于 豆科植 物甘 草 （ ｙ ｙｒ ｉ ｒｌｎ ｉ Ｆｓｈ 、 果甘 草 （ Ｇｌｃ ｒｈｚ ｕａｅ ｓ ｉ ） 胀 ａ ｓ ｃ Ｇ．
（） １ 粉碎 ： 将挑 选 除杂后 干净 干燥 的甘 草放入 粉
碎 机 中粉碎 ， １ 过 Ｏ目筛 选 ， 得甘 草粉 试样 。 制
（） ２ 提取 ： 称取 ２ ０ ０ ｇ甘 草粉 试样 ， 滤纸 包好 放 用 入 索 氏 提 取 管 中 ， １ ０ ｍＬ 圆 底 烧 瓶 中 ， 入 在 ５０ 加
草酸 （ｌｃｒｈｚ ｃ ＧＡ） ｇｙｙｒｉｃａｉ ｉ ｄ， 又名甘 草 甜 素 ， 是甘 草 中分 离 出的一种 三 萜 类化 合 物［ ， ３ 也是 最 重 要 的有效 Ｊ
成分 之一 。本 文对 甘 草 中甘 草酸 及 其他 成分 的提取 分 离方 法进行 了摸 索和改进 ， 得 了较 好 的效 果 。 取 关键 词 ： 草 ； 甘 甘草 酸 ； 提取 ； 离 分 中图分 类号 ： ８ ． Ｒ２ ４ ２ 文献 标识 码 ： Ａ 文章 编号 ：Ｏ ６ ７ ８ （ ０ ０ ２ ～ Ｏ ０ — ０ １Ｏ — ９１ ２ １）４ ｏ１ ３
ｉｆ ｔ ａ． 或光 果甘 草 （ ｇａ ｒ ． 的干燥 根 和根 茎［ 。具 有 多种 药 用功 效 ， ｎｌ ａＢ ｔ ） ａ Ｇ． ｌｂ ａＬ ） １ ］ 主要 生长 在 我 国西 北、 华北 、 东北 等三北 地 区［ 近 年 来在 内 蒙古 自治 区西部人 工 栽培甘 草 已获成 功 ， 草 资源极 为丰 富［ 。 。 甘 引 甘
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
3. 性质实验及色谱检查 l）、泡沫实验 取甘草酸单钾盐水溶液2毫升，置试管中用力振摇，放置 10分钟后观察泡沫。 2）、醋酐—浓流酸反应(Liebermann—Barchard反应) 取甘草酸单钾盐少量，置白瓷板上，加醋酐2—3滴使溶解， 再加半滴浓硫酸观察颜色变化。 3）、氯仿—浓硫酸反应 取甘草酸单钾盐少量，加l毫升氯仿，再沿试管壁滴加浓硫 酸1毫升，观察两层的颜色变化及荧光。 4）、薄层色谱 吸附剂：硅胶G板100℃活化半小时。 展开剂：正丁醇—醋酸—水(6：1：3上层) 样品：甘草酸单钾盐标准品，甘草酸单钾盐70％乙醇液。 显色剂：磷钼酸
实验目的
1、掌握甘草酸的提取原理和方法 2、熟悉皂甙的性质和鉴定方法。
实验原理：
甘草酸(G1ycyrrhizic acid)由冰醋酸中结晶出来的为白色柱状 结晶，mpl70℃。易溶于热水、热稀乙醇、丙酮、不溶于乙 醇、乙醚等。在加热、加压及稀酸作用下，可水解为甘草次 酸及二分子葡萄糖醛酸。
注意事项
1、甘草酸三钾盐极易吸潮，因此必须在干 燥器中保存。 2、薄层鉴定中显色前，薄层板上的展开剂 需挥干。
实验报告及课外作业
在查阅参考文献基础上，根据老师演示实验， 同时参照教材164页要求写出一份完整实验设 计报告。
2. 甘草酸的精制
将粗制甘草酸置圆底烧瓶中，用50毫升乙醇回流1小时，
过滤，残渣再用30亳升乙醇回流30分钟，过滤，合并滤 液，浓缩至20毫升，放冷，在搅拌下加入20％KOH乙醇 溶液至不再析出沉淀，此时溶液pH＝8静置，抽滤，沉淀 为甘草酸三钾盐结晶，于干燥器内干燥，称重。 甘草酸三钾盐置小烧杯中，加15毫升冰醋酸，水浴上加 热溶解，热过滤，再用少量热冰醋酸淋洗滤纸上吸附的 甘草酸，滤液放冷后，有白色的结晶析出，抽滤，用无 水乙醇洗涤，得乳白色甘草酸单钾盐。
甘草酸的提取、 分离与鉴定
甘草酸(Glycyrrhizic acid)或称甘草皂甙 (G1ycyrrhizin)是甘草(G1ycyrrhiza uralensis Fisch．)的根及根茎和光甘草(G．glabra L)的根及 根茎中的主要成分，也是有效成分，在甘草中的含 量约7一10％味极甜故又称甘草甜素。 甘草是常用和重要的中药之一，有较强的解毒作用， 中药用于清热解毒调和诸药，此外尚有类皮质激素、 抗炎、抗胃溃疡、镇咳祛痰、解痉等方面的药理作 用，甘草中还含有多种黄酮成分，甘草素 (Liguiritigenin)，异甘草素(Isoliguiritigenin)，甘草 甙(1iguritin)，新甘草甙(Neo1iguritin)新异甘草甙 (Neoisoliguritin)和异甘草素-4-β-葡萄糖-β-洋芜荽糖 甙等。
甘草酸的提取精制原理是：甘草酸在原料中以钾盐或钙盐形 式存在，其盐易溶于水，因此用水温浸，提出甘草酸盐，再 加硫酸，因难溶于酸性冷水，而析出游离的甘草酸。 甘草酸可溶于丙酮中，加氢氧化钾后，生成甘草酸三钾盐结 晶，此结晶极易吸潮不便保存，加冰醋酸后，转变为甘草酸 单钾盐，具有完好的晶形，易于保存。
Βιβλιοθήκη 仪器、材料与试剂甘草、硫酸、氢氧化钾、冰醋酸、加热回流 装置、水浴锅、抽滤装置、硅胶G板等。
实验步骤
1. 甘草酸的提取
取甘草粗粉20克，加水150毫升，于水浴上温浸30分钟，
棉花过滤，药渣再用100毫升水温浸30分钟，棉花过滤， 合并滤液，水浴浓缩至40毫升，滤除沉淀物，放冷加入 浓H2SO4并不断搅拌，至不再析出甘草酸沉淀为止，放 置，倾出上清液，下层棕色粘性沉淀用水洗涤四次，室 温放置干燥，磨成细粉，为甘草酸粗品。