实验八：叶绿体中色素的提取和分离(整理)
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》实验报告
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》实验报告实验目的：1. 学习叶绿体中色素的提取和分离的方法；2. 观察叶绿体中不同色素的吸收光谱。
实验原理：叶绿体是植物细胞中的特殊细胞器，其中含有多种色素，包括叶绿素 a、叶绿素 b、类胡萝卜素等。
这些色素能够吸收不同波长的光线，并转化为化学能以参与光合作用。
本实验利用溶剂提取和色谱柱分离的方法，将叶绿体中的色素提取出来，并通过紫外-可见光分光光度计测定不同色素的吸收光谱。
实验步骤：1. 取一片鲜叶（最好选择深绿色的叶片）切碎，加入适量的乙醇或醋酸乙酯中浸泡，使叶绿体释放出色素。
注意保持容器密封以避免光照。
2. 将浸泡片刻半小时，使叶绿体彻底释放色素。
3. 将叶绿体悬液过滤，收集含有色素的过滤液。
4. 取一支色谱柱，填充色谱吸附剂（如硅胶），再用无色溶剂（如正己烷）预洗一次。
5. 将收集到的含色素液体加入色谱柱中，用无色溶剂洗脱，收集不同色素的洗脱液。
6. 用紫外-可见光分光光度计测定不同色素的吸收光谱。
实验结果：根据实验数据得到不同色素的吸收光谱曲线，可观察到叶绿素 a 在400-500 nm波长范围内有最大吸收峰，叶绿素 b 在450-550 nm波长范围内有最大吸收峰，类胡萝卜素在500-600 nm波长范围内有最大吸收峰。
根据吸收光谱的不同，可以推测各色素在光合作用中的吸收波长和参与的反应。
实验结论：通过该实验，我们成功地提取和分离了叶绿体中的色素，并观察到不同色素的吸收光谱。
这些实验结果可以帮助我们深入了解植物光合作用的机制，以及不同色素在光合作用中的作用。
同时，该实验也展示了提取和分离生物样品中化学物质的基本实验技巧和原理。
《叶绿体色素的提取和分离》 实验报告
《叶绿体色素的提取和分离》实验报告
叶绿体是植物细胞中的一种细胞质器，主要功能是光合作用。
叶绿体包括一系列色素，其中最重要的是叶绿素。
在本实验中，我们将提取和分离叶绿体色素，以便进一步分析其
结构和功能。
实验步骤：
1. 从新鲜的叶子中剪下片段，用无菌蒸馏水洗涤。
2. 用离心机将叶片离心，离心速度为1000 rpm，时间为5分钟。
3. 将上清液取出并过滤，过滤剂为细孔过滤纸。
5. 将上清液取出，并用1ml无菌蒸馏水洗涤叶绿体色素。
7. 取出上清液，将其光度值调至0.4-0.6。
（400nm处）
8. 将上述上清液转入紫外吸收仪中，观察叶绿素的吸收曲线。
实验结果：
实验得出的叶绿体色素提取液中，吸收最强的波长为680nm和430nm。
这对应着叶绿
体和类胡萝卜素的吸收峰。
实验得到的叶绿体色素移液后，需要经过离心的过程，这样可去除混杂物质，获得更
为纯净的叶绿素。
通过以上实验，我们成功地提取和分离了叶绿体色素。
叶绿素是植物所特有的，它起
到了光合作用的关键作用。
实验中的提取和分离方法，可以为进一步的分析叶绿素的结构
和功能提供帮助。
实验八：叶绿体中色素的提取和分离(整理)
a
21
2、 将滤液放在试管中，为什么 要及时用棉塞将试管塞严？
滤液含有丙酮，丙酮 有毒，防止挥发
a
22
3、 画滤液细线时重复画几次的 目的是什么？
增加色素的含量， 使分离后的色素带更 加清晰
a
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4. 为什么不能让滤液细线触及层 析液？
层析液会溶解色素 使色素无法分离 。
a
24
5.观察实验结果有什么现象？滤纸条 上出现了几条色素带？每条色素带的 颜色和排序如何？
A.橙黄色 B.黄绿色 C.蓝绿色 D.黄色
a
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(2)在做“叶绿体中色素的提取和分离”
实验时，向研钵中加入SiO2的目的
是：
，
加入CaC03的目的是
在盛有层析液的烧杯上盖上培养皿盖的是
在滤纸条上扩散速度最慢的色素带是
叶绿素b
其颜色是
a
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ37
(3)某同学在做“叶绿体中色素的提
取分离”实验时，操作情况如下所述，
④观察实验结果：最后滤纸条上将分离出四 条色素带，颜色从上往下分别是橙黄色、 黄色、蓝绿色和黄绿色，四种色素分别是 胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a和叶绿素b。
a
18
实验结果：
a
19
问题讨论：
a
20
1、加入SiO2、CaCO3的作用是 什么？
二氧化硅的作用是使研 磨更加充分、迅速；碳酸钙 的作用是保护叶绿素不分解
滤纸条上将分离出四条色素带， 颜色从上往下分别是橙黄色、黄 色、蓝绿色和黄绿色，四种色素 分别是胡萝卜素（最快）、叶黄 素、叶绿素a（最多）和叶绿素b （最慢）。
a
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二、实验原理
（一）叶绿体色素：
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》随着社会一步步向前发展，我们都不可避免地要接触到报告，写报告的时候要注意内容的完整。
那么，报告到底怎么写才合适呢？以下是小编整理的生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》，欢迎大家分享。
生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》1一、实验目的1. 学会提取和分离叶绿体中色素的方法。
2. 比较、观察叶绿体中四种色素：理解它们的特点及与光合作用的关系二、实验原理光合色素主要存在于高等植物叶绿体的基粒片层上，而叶绿体中的色素能溶于有机溶剂中。
故要提取色素，要破坏细胞结构，破坏叶绿体膜，使基粒片层结构直接与有机溶剂接触，使色素溶解在有机溶剂中。
叶绿体中的色素有四种，不同色素在层析液(脂溶性强的有机溶剂)中的`溶解度不同，因而随层析液的扩散速度也不同。
三、材料用具取新鲜的绿色叶片、定性滤纸、烧杯、研钵、漏斗、纱布、剪刀、小试管、培养皿、毛细吸管、量筒、有机溶剂、层析液(20份石油醚、2份丙酮、1份苯混合)、二氧化硅、碳酸钙。
四、实验过程（见书Ｐ54）1.提取色素：2.制备滤纸条：3.色素分离，纸层析法。
（不要让滤液细线触及层析液）4.观察：层析后，取出滤纸，在通风处吹干。
观察滤纸条上出现色素带的数目、颜色、位置和宽窄。
结果是：4条色素带从上而下依次是：胡萝卜素(橙黄色)、叶黄素(黄色)、叶绿素a(蓝绿色)、叶绿素b(黄绿色)。
五、讨论1.滤纸条上的滤液细线为什么不能接触到层析液？2．提取和分离叶绿体中色素的关键是什么？生物实验报告《叶绿体中色素的提取和分离》2一、实验目的1、学会提取和分离叶绿体中色素的方法。
2、比较、观察叶绿体中四种色素：理解它们的特点及与光合作用的关系二、实验原理光合色素主要存在于高等植物叶绿体的基粒片层上，而叶绿体中的色素能溶于有机溶剂中。
故要提取色素，要破坏细胞结构，破坏叶绿体膜，使基粒片层结构直接与有机溶剂接触，使色素溶解在有机溶剂中。
叶绿体色素的提取和分离实验步骤
叶绿体色素的提取和分离实验步骤一、实验前的准备首先呢，咱们得把材料都准备好。
新鲜的绿叶是必须的啦，像菠菜叶就很不错哦。
还有要准备好研钵、漏斗、滤纸、层析液、无水乙醇这些东西。
这一步看起来很平常，但可千万别小瞧它，要是少了啥东西，实验过程中再去找就麻烦啦！我就有过一次，忘记准备滤纸了，当时那个手忙脚乱所以大家一定要仔细检查材料是否齐全哦！二、叶绿体色素的提取1. 取几片新鲜的绿叶，把它们剪碎放在研钵里。
这里呢，叶子不用太多，适量就好，大概四五片大菠菜叶就差不多了。
然后加入少许的二氧化硅和碳酸钙。
二氧化硅有助于研磨得更充分，碳酸钙呢，可以防止叶绿素被破坏。
这一步很关键哦！我每次都会多检查一遍有没有加这两样东西，真的很重要呢！2. 接着倒入适量的无水乙醇。
无水乙醇的量啊，大概能把叶子都浸湿就可以了。
然后就开始研磨啦。
研磨的时候要用力均匀，慢慢磨，别太着急。
这一步虽然不难，但也需要点耐心。
我通常会在这个环节花多一些时间，确保研磨得足够细。
你看，如果研磨不充分，可能就会影响后面色素的提取量呢，是不是？3. 研磨好之后，咱们就用漏斗和滤纸进行过滤，把研磨液过滤到一个小试管里。
这时候要注意，滤纸要折叠好放在漏斗里，不要有缝隙，不然过滤的时候就会漏得到处都是，那就糟糕了！三、叶绿体色素的分离1. 准备好一个滤纸，把它剪成一个长条形，并且一端要剪去两角。
为啥要剪去两角呢？嘿嘿，这是个小技巧，可以让色素在滤纸上跑得更整齐哦。
然后用铅笔在距离剪去两角那端大概一厘米的地方画一条细线，这条细线就是用来蘸取我们前面提取出来的色素滤液的。
这一步可不能画得太粗啦，不然色素带就会重叠在一起，那就分不清啦。
2. 用毛细吸管吸取少量的色素滤液，轻轻地沿着铅笔线涂抹。
注意哦，不要涂太多，一点点就好。
如果涂多了，色素就会扩散得乱七八糟的。
这一点真的很重要，我通常会再检查一次，真的，确认无误是关键。
3. 把这个滤纸条放进装有层析液的层析装置里。
叶绿体色素的提取分离实验报告
叶绿体色素的提取分离、理化性质实验报告第一部分提取与分离一实验目的学习应用薄层色谱法分离叶绿体色素的实验方法二实验原理叶绿体是进行光合作用的细胞器。
叶绿体中的叶绿体a(C55H72O5N4Mg)、叶绿素b(C55H72O6N4Mg)、胡萝卜素(C40H56)和叶黄素(C40H56O2)与类囊体膜结合成为色素蛋白复合体。
这些色素都不溶于水，而溶于有机溶剂，故可用乙醇等有机溶剂提取。
提取液可用薄层色谱法加以分离与鉴别。
薄层色谱分析法是将吸附剂均匀的涂在玻璃板上成一薄层，将此吸附剂薄层做固定相，把待分离的样品溶液点在薄层板的下端，然后用一定量的溶剂做流动相，将薄层板的下端浸入到展开剂中。
流动相通过毛细管作用由下而上的逐渐浸润薄层板，并带动样品在板上也向上移动，样品中各组分在吸附剂和展开剂之间发生连续不断的吸附、脱附、再吸附、再脱附……的过程。
由于吸附剂的吸附能力大小不同，吸附力强的物质相对移动慢一些，而吸附力弱的则相对移动快一些，从而使各组分有不同的移动速度而彼此分开。
三实验材料与试剂1 新鲜的菠菜叶片2 体积分数为95%的乙醇，碳酸钙粉末，展开剂(石油醚:丙酮:苯=7:5:1，体积比)3 天平，研钵，漏斗，三角瓶，剪刀，点样毛细管，层析缸，硅胶预制板，滤纸四实验步骤(一)色素提取液的制备1 取新鲜叶片4至5片(2g左右)，洗净，擦干叶表面，去中脉剪碎，放入研钵中。
2 研钵中加入少量碳酸钙粉末，加2至3ml体积分数为95%的乙醇，研磨至糊状，再加10至15ml体积分数为95%的乙醇，上清液用漏斗过滤，残渣再用10ml体积分数为95%的乙醇冲洗一次，一同过滤于三角瓶中，即制成叶绿体色素提取液。
提取液应避光保存。
(二)叶绿体色素的分离1 取硅胶预制板一个，用点样毛细管吸取上述提取液，平行于硅胶板的短边，距下边缘约1cm处用毛细管划线，风干后再划第二次，重复操作3至4次。
2 在干洁的层析缸中加入适量的展开剂，高度约0.5cm，将硅胶预制板带有色素的一端放下，使其浸入展开剂中(但不要使待测样品浸入展开剂中)。
叶绿体色素提取与分离实验
类胡萝卜素 50
叶绿素b 叶绿素a
0
波长
二、捕获光能的色素和结构
（一）捕获光能的色素
色素
叶绿素a （蓝绿色）
叶绿素 叶绿素b
（黄绿色） 含量约占3/4
类胡萝卜素
叶黄素 （黄色） 胡萝卜素 （橙黄色）
含量约占卜素主 要吸收蓝紫光
叶绿素主要吸收 红光和蓝紫光
课堂检测
1、在叶绿体色素的提取和分离实验中在滤纸条上扩散速度 最快的色素是（ ） A、叶绿素a B、叶绿素b C、胡萝卜素 D、叶黄素
4、在圆形滤纸的中央点上，对叶绿体的色素进行色素分析， 会得到近似，同心的四个色素环，排到在最里圈的色素是 （） A、橙黄色 B、蓝绿色 C、黄色 D、黄绿色
练习
1、在植物实验室的暗室内，为了尽可能地降
低植物光合作用的强度，最好安装（ B）
A、红光灯 B、绿光灯 C、白炽灯 D、蓝光灯
2、为提高大棚蔬菜的产量，哪项措施更有效
5、下图是叶绿体色素的提取与分离实验中所用的材料与用具。请回答： 分别在A、B、C三个研钵中加入2克菠菜，经研磨、提取得到三种颜色的溶液： 深绿色、黄绿色（或褐色）、几乎无色。注：“+”表示加，“—”表示不加。
处理 二氧化硅（少量） 碳酸钙（少量） 95%乙醇（10ml） 蒸馏水（10ml）
ABC +++ —+ + + —+ —+ —
（ D）
A、安装红色透光薄膜 B、安装蓝紫色透光薄膜
C、安装绿色透光薄膜 D、安装无色透光薄膜
练习
3．在圆形滤纸的中央点上粘叶绿体的色素滤液， 进行色素分析，会得到近似同心环状的四个色素圈，
排在外圈的色素呈 [ A]
叶绿体色素的提取与分离实验
3、用纸层析法将色素进行分离，在滤纸条上出现最宽旳一 条色素带旳颜色是（ ） A、橙黄色 B、黄色 C、蓝绿色 D、黄绿色
类胡萝卜素 50
叶绿素b 叶绿素a
0
波长
二、捕获光能旳色素和构造
（一）捕获光能旳色素
色素
叶绿素a （蓝绿色）
叶绿素 叶绿素b
（黄绿色） 含量约占3/4
类胡萝卜素
叶黄素 （黄色） 胡萝卜素 （橙黄色）
含量约占1/4
吸收可见 旳太阳光
类胡萝卜素主 要吸收蓝紫光
叶绿素主要吸收 红光和蓝紫光
课堂检测
1、在叶绿体色素旳提取和分离试验中在滤纸条上扩散速度 最快旳色素是（ ） A、叶绿素a B、叶绿素b C、胡萝卜素 D、叶黄素
分别在A、B、C三个研钵中加入2克菠菜，经研磨、提取得到三种颜色旳溶液： 深绿色、黄绿色（或褐色）、几乎无色。注：“+”表达加，“—”表达不加。
处理
二氧化硅（少许） 碳酸钙（少许）
95%乙醇（10ml） 蒸馏水（10ml）
ABC +++ —+ + + —+ —+ —
（1）A处理得到旳溶液颜色是 黄绿色 ，原因是__叶__绿__素_被__破__坏__________
（6）色素分离旳成果：相邻色素带间距最宽旳是 他们旳颜色是 橙黄色 和 黄色 ，主要吸收 蓝紫
胡萝卜素 和 叶黄素 ， 光。
（ D）
A、安装红色透光薄膜 B、安装蓝紫色透光薄膜
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随堂演练 ：
1.通过纸层析分离叶绿体色素，结果在滤纸 条上出现四条色素带，从上到下依次为 （ ） A.胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a、叶绿素b B.胡萝卜素、叶绿素a、叶绿素b、叶黄素 C.叶绿素b、叶绿素a、叶黄素、胡萝卜素 D.叶黄素、叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素
2.下列关于“叶绿体色素提取和分离”的实验 描述中，不属于实验要求的是 （ ）
A.提取高等植物叶绿体中的色素 B.用纸层析法分离色素 C.了解各种色素的吸收光谱 D.验证叶绿体中所含色素的种类
3.用纸层析法将色素进行分离,在滤纸条上出 现的最窄的一条色素带的颜色是 （ ）
A.黄色 B.橙黄色 C.黄绿色 D.蓝绿色
4.提取叶绿体中的色素时要加丙 酮，其原因是 （ ）
A.让色素溶解 B.防止叶绿素被破坏 C.便于将叶片研磨成匀浆 D.促使叶绿体中色素分离
5.在叶绿体色素的提取和分离实验中， 在滤纸条上扩散速度最快的色素是（ ）
A.叶绿素a B.叶绿素b C.胡萝卜素 D.叶黄素
6.绿色植物的光合作用中，叶绿 素是 （ ）
（4）磨：研磨要领是要用力压快速研 磨。 （5）过滤：用纱布（或棉花）、漏斗 和试管，最后提取液置于试管中待用， 及时用棉塞（或塞子）将试管塞严 .
2、分离色素的步骤
①制备滤纸条：将预备在试验桌上的滤 纸条一端剪去两个角作标记，在距离 这一端1cm处用铅笔画一条细的横线。 ②画滤液细线：沿铅笔线轻轻均匀地画 一道线，用提取液反复划好几次，每 次划完尽量吹干，不要弄破纸条。
实验6：叶绿体中色素 的提取和分离
马山县周鹿中学 陆保宗
二、实验原理
（一）叶绿体色素：
叶绿素a
3:1 (阳生) ２:1 (阴生)
1.叶绿素
2.类胡萝卜素
叶绿素b 胡萝卜素
2：1
3：1
叶黄素
叶绿素a、b的结构式
类胡萝卜素的结构式
（二）四种色素的化学性质
均为亲脂性>亲水性， ∴均不溶于水，而溶于有机溶剂，故可用 乙醇、丙酮等有机溶剂提取。 极性大小： 叶绿素b>叶绿素a>叶黄素>胡萝卜素。 ∴根据相似相溶原理，在有机溶液中的溶解 度： 叶绿素b<叶绿素a <叶黄素<胡萝卜素。
4. 为什么不能让滤液细线触及层 析液？
层析液会溶解色素 使色素无法分离 。
5.观察实验结果有什么现象？滤纸条 上出现了几条色素带？每条色素带的 颜色和排序如何？ 滤纸条上将分离出四条色素带， 颜色从上往下分别是橙黄色、黄 色、蓝绿色和黄绿色，四种色素 分别是胡萝卜素（最快）、叶黄 素、叶绿素a（最多）和叶绿素b （最慢）。
(2)在做“叶绿体中色素的提取和分离” 实验时，向研钵中加入SiO2的目的 是： ， 加入CaC03的目的是 在盛有层析液的烧杯上盖上培养皿盖的是
在滤纸条上扩散速度最慢的色素带是
其颜色是
(3)某同学在做“叶绿体中色素的提 取分离”实验时，操作情况如下所述， 结果实验失败，请指出其错误所在:
①将5克新鲜完整的菠菜叶，放在研钵中，加入 丙酮、石英砂、CaCO3以后，迅速研磨。 (原因是没有去除粗叶脉和将叶剪碎，这样降低了 叶绿素的提取率 ） ②用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线处小心均 匀地划出一条滤液细线，并连续迅速地重复划 2～3次。
二、实验原理
（一）叶绿体色素：
叶绿素a
3:1 (阳生) ２:1 (阴生)
1.叶绿素
2.类胡萝卜素
叶绿素b 胡萝卜素
2：1
3：1
叶黄素
胡萝卜素（橙黄色）
绿 叶 中 的 色 素
类胡萝卜素
（含量约1/4）
叶黄素（黄色） 叶绿素a（蓝绿色）
叶绿素
（含量约3/4）
叶绿素b（黄绿色）
实验关键:
1.选材时应注意选择鲜嫩、色浓绿、无浆汁 的叶片.(如菠菜叶) 2.画滤液细线时应以细、齐、直为标准，重复 画线时必须等上次画线干燥后再进行，重复 2-3次。
(原因是上一次滤液细线未干燥，即划下一
次线，使滤液线过粗或线上色素量较低 .
③把划好细线的滤纸条插入层析液中，并不 断摇晃，以求加快色素在滤纸条上的扩散。 （原因是由于摇晃，层析液接触液线，溶解 了色素）
实验材料用具：
1、材料：新鲜的绿色叶片(如菠菜叶片)。 2、仪器：干燥的定性滤纸，烧杯(100mL)， 研钵 玻璃漏斗，尼龙布（或棉花），毛 细吸管，剪刀，小试管，培养皿盖，药勺， 量筒(10mL)，天平，镊子，铅笔，尺子。 3、药品：丙酮，层析液，二氧化硅，碳 酸钙。
实验过程：
1、提取叶绿素的步骤 ： （1）称：用天平称量5g除去叶柄的叶 片 （2）剪：越细越好，尽量去除叶脉等 部分 （3）加药品：加少量二氧化硅，碳酸 钙和丙酮（约5mL）快速充分研磨。
实验结果：
问题讨论：
1、加入SiO2、CaCO3的作用是 什么？
二氧化硅的作用是使研 磨更加充分、迅速；碳酸钙 的作用是保护叶绿素不分解
2、 将滤液放在试管中，为什么 要及时用棉塞将试管塞严？
滤液含有丙酮，丙酮 有毒，防止挥发
3、 画滤液细线时重复画几次的 目的是什么？
增加色素的含量， 使分离后的色素带更 加清晰
（二）叶绿素的光学性质
叶绿素的吸收光谱
类胡萝卜素的吸收光谱
实验原理：
①叶绿体中的色素是有机物，不溶于水， 易溶于丙酮等有机溶剂中，所以用丙 酮、无水乙醇等能提取色素。 ②层析液是一种脂溶性很强的有机溶剂。 叶绿体色素在层析液中的溶解度不同， 分子量小的溶解度高，随层析液在滤 纸上扩散得快，溶解度低的随层析液 在滤纸上扩散得慢。所以用层析液来 分离四种色素。
③层析分离叶绿体中的色素：将3mL层析液 倒入烧杯中，注意将纸条画有滤液细线的 一端置于烧杯中的层析液中，注意千万不 要将滤液细线浸没在层析液中。 ④观察实验结果：最后滤纸条上将分离出四 条色素带，颜色从上往下分别是橙黄色、 黄色、蓝绿色和黄绿色，四种色素分别是 胡萝卜素、叶黄素、叶绿素a和叶绿素b。
A.光合作用的原料 B.光合作用的产物 C.能量转换器 D.氢的接受器
7.下列作用不属于叶绿素的功能 的是 （ ）
A.吸收光能 B.利用光能使水分解 C.利用光能合成ATP D.固定和还原二氧化碳
能力提高练习：
(1)在圆形滤纸的中央，点上叶绿体色素的 提取液进行层析，随着层析液从滤纸的中 央向四周扩散，形成四个色素环带，排在 最里圈的色素是（ ） A.橙黄色 B.黄绿色 C.蓝绿色 D.黄色