福林酚法测定总酚含量-操作流程图-实验图解-李熙灿-Xican Li
福林酚法测定多酚含量原理
福林酚法测定多酚含量原理
福林酚法是一种测定多酚含量的方法。
福林是一种具有还原性的酚类
物质，可以与多酚反应生成具有蓝色，紫色，红色等吸光度较高的络合物。
该方法的原理基于福林与多酚之间的氧化还原反应。
福林酚法的测定步骤如下：
1.加样：取适量待测样品，放入试管中。
2.福林试剂的配制：将适量的福林溶于适量的乙醇中，制成福林试剂。
3.加入福林试剂：将制备好的福林试剂加入试管中，与待测样品充分
混合。
4.氢氧化钠溶液的配制：将适量的氢氧化钠溶解于适量的蒸馏水中，
制成氢氧化钠溶液。
5.加入氢氧化钠溶液：将制备好的氢氧化钠溶液滴加到试管中，与混
合液充分混合。
6.开始反应：将试管加热，使福林与多酚之间的反应加速进行。
7.定时停止反应：经过一段时间后，停止加热反应。
8.冷却：待试管冷却后，测定反应液的吸光度。
9.测定吸光度：使用分光光度计等设备，测定反应液的吸光度。
10.计算：根据反应液的吸光度值，参照标准曲线，计算出待测样品
中多酚的含量。
福林酚法的原理是基于福林与多酚之间的氧化还原反应。
福林具有还原性，在碱性条件下，可以与多酚发生氧化还原反应。
福林通过氧化还原反应，可以将多酚从原来的无色状态转变为有色络合物。
反应过程中福林的还原能力会逐渐消耗，导致吸光度降低。
因此，反应液的吸光度与多酚的含量之间有一定的正比关系。
福林酚法的优点是操作简单，灵敏度高，对于多酚含量的测定具有一定的准确度和可靠性。
因此，福林酚法广泛应用于食品、医药、化妆品等领域中对多酚含量的测定。
福林酚比色法测多酚的原理
福林酚比色法测多酚的原理
福林酚比色法是一种测量多酚含量的常用方法，被广泛应用于食品、药品、环境科学等领域。
测定多酚含量的前提是需要一种可靠的检测方法。
福林酚比色法
就是一种比较准确、简单易操作的测定方法。
下面，我们就来分步骤
介绍一下福林酚比色法测多酚的原理。
第一步是制备样品溶液。
将待测物质粉碎后，精确称取适量溶于
乙醇水溶液中。
一般来说，常用的浓度为1mg/mL。
第二步是加入福林酚溶液。
福林酚是一种典型的显色试剂，可与
多酚类物质在酸性条件下形成复合物，产生显色反应。
福林酚通常是
在乙醇或乙醚中制备，其浓度为2%。
第三步是加入硼酸缓冲液。
硼酸缓冲液能够调节溶液的酸碱度，
将其控制在适宜范围内，从而保障显色反应的进行。
通常使用的硼酸
缓冲液为pH=1.0。
第四步是样品显色反应。
在上述条件下，多酚类物质与福林酚形
成复合物，产生显色反应。
显色的强度与待测物质中多酚含量成正比。
多酚类物质含量越高，显色的强度就越大。
第五步是光度计读数。
用光度计测量显色复合物的光密度。
根据
测量结果，可以计算出样品中多酚含量的浓度。
这个过程有两个注意点，一是在福林酚与多酚类物质反应的过程中必须保持样品溶液的稳
定性，二是读取的光谱值应该符合所选波长。
总的来说，福林酚比色法可以很好地测量多酚含量，具有操作简单、结果准确的优点。
因此，它被广泛应用于检测水果、茶叶、酒类、保健品等多种生物样品的多酚含量。
福林酚比色法测定酸浆宿萼中总多酚含量
（ Ｓ ｃ ｈ ｏ ｏ ｌ ｏ ｆ Ｐ ｕ ｂ ｌ ｉ ｃ Ｈ ｅ ａ ｌ ｔ ｈ ， Ｊ ｉ ｌ ｉ ｎ Ｍ ｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ Ｕ ｎ ｉ ｖ ｅ ｒ ｓ ｉ ｔ ｙ ， Ｊ ｉ ｌ ｉ ｎ １ ３ ２ ０ １ ３ ， Ｊ ｉ ｌ ｉ ｎ ， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ：Ｔ ｈ ｅ ｏ ｐ ｔ ｉ ｍｕ ｍ ｃ ｏ ｎ ｄ ｉ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｎ ｄ ｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ｉ ｎ ｇ ｔ ｏ ｔ ａ ｌ ｐ ｏ ｌ ｙ ｐ ｈ ｅ ｎ ｏ ｌ ｓ ｃ ｏ ｎ ｔ ｅ ｎ ｔ ｉ ｎ ห้องสมุดไป่ตู้ ａ ｌ ｙ ｘ ｐ ｈｙ ｓ ａ ｌ ｉ ｓ ｂ ｙ Ｆｏ ｌ ｉ ｎ － ｃ ｉ ｏ ｃ ａ ｈ ｅ ｕ
Ｄｅ ｔ ｅ ｒ ｍｉ ｎ ａｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ Ｔｏ ｔ ａｌ Ｐｏ ｌ ｙ ｐｈ ｅ ｎ ｏ ｌ ｓ ｉ ｎ Ｃａ ｌ ｙ ｘ Ｐｈ ｙ ｓ ａ ｌ ｉ ｓ ｂ ｙ Ｆｏ ｌ ｉ ｎ －ｃ ｉ ｏ ｃ ａ ｌ ｔ ｅ ｕ Ｍｅ ｔ ｈｏ ｄ
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－ ＝ ＝ ＝１ ３ ８
２ ０ １ ６年 １ ２月 第３ ７卷第 ２ ３期
Ｆ ｏ ｏ ｄ Ｒ ｅ ｓ ｅ ａ ｒ ｃ ｈ Ａ ｎ ｄ Ｄ ｅ ｖ ｅ ｌ ｏ ｐ ｍ ｅ ｎ ｔ
食品研究与并发
检测 分 析
ＤＯＩ ： １ ０ ． ３ ９ ６ ９ ／ ｊ ． ｉ ｓ ｓ ｎ ． １ ０ ０ ５ － ６ ５ ２ １ ． ２ ０ １ ６ ． ２ ３ ． ０ ３ ２
2福林(Folin)-酚试剂法测定
摇匀，在室温下放置30分钟后在500nm下比色 OD500
附：7200型分光光度计的操作程序
连接仪器电源线，确定仪器供电电源有良好的接地性能。 接通电源，使仪器预热20分钟。 用<MODE>键设置测试方式：投射比（T），吸光度（A）， 已知标准样品浓度值方式（C）和已知标准样品斜率（F） 方式。 用波长选择旋钮设置您所需的分析波长。
将参比样品溶液和被测样 品溶液分别倒入比色皿中， 打开样品室盖，将盛有溶 液的比色皿分别插入比色 皿槽中，盖上样品室盖。 一般情况下，参比样品放 在第二个槽位中。
将0％T校具（黑体）置入 光路中，在T方式下按“0 ％T”键，此时显示器显示 “000.0”
按 MODE键选择A模式
将参比样品拉入光路中， 按“0A/100％T”键调 0A/100％T，此时显示器 显示的“BLA”直至显示 “0.000”A为止。
福林(Folin)-酚试剂法测定蛋白质 的浓度
一、原理
蛋白质或多肽分子中有带酚基酪氨酸或色氨
酸，在碱性条件下，可使酚试剂中的磷钼酸 化合物还原成蓝色（生成钼蓝和钨蓝化合 物）。蓝色的深浅与蛋白质的含量成正比， 可用比色法测定。
二、实验仪器 1.卵清蛋白片 2.7220分光光度计 3.试管 4.移液管 三、实验试剂 1.Folin-酚试剂A：碱性铜溶液 甲液：取Na2CO32g溶于100ml0.1mol/l氢氧化钠溶液中 乙液：取CuSO4.5H2O晶体0.5g，溶于1%酒石酸钾100ml中。 临用时按甲：乙=50：1混合使用。 2.Folin-酚试剂B：将100g钨酸钠、25g钼酸钠、700ml蒸馏水、50ml85%磷 酸继100ml浓盐酸置于1500ml的磨口圆底烧瓶中，充分混匀后，接上 磨口冷凝管，回馏10小时，再加入硫酸锂150g，蒸馏水50ml及液溴 数滴，开口煮沸15分钟，在通风橱内驱除过量的溴。冷却，稀释至 1000ml，过滤，滤液成微绿色，贮于棕色瓶中。临用时，用1mol/l的 氢氧化钠溶液滴定，用酚酞作指示剂，根据滴定结果，将试剂稀释至 相当于1mol/L的酸。 3.500ug/mL卵清蛋白液：称取0.5g卵清蛋白片溶于0.9%氯化钠溶液中，并 稀释至 1000ml
FC酚法测定总酚
王华. 葡萄与葡萄酒实验技术操作规范.陕西：西安地图出版社，1999单宁的测定也是参考王华，1999以没食子酸为对照品（FC酚法）总酚的含量测定方法Folin-Ciocalteu 比色法( FC酚法）一、仪器UV- 2401 PC 型紫外分光光度计;超声波清洗仪(昆山市超声仪器有限公司KQ- 2508型)恒温水浴锅二、试剂没食子酸标准品; 钨酸钠,磷钼酸, 85%磷酸, Na2 CO3, 以上试剂均为分析纯; 水为蒸馏水。
1.3 福林试剂的配制在250mL的圆底烧瓶内加入20g 钨酸钠、5g 钼酸钠、140mL 蒸馏水，85%的浓磷酸10mL 及浓盐酸20mL，充分混匀，以小火回流10h，再加入3g 硫酸锂及15mL 双氧水，开口继续煮沸15min，待双氧水完全挥发，呈亮黄色。
冷却后移入250mL 容量瓶中，定容置于棕色试剂瓶中，放入冰箱中备用。
1.4 Na2CO3溶液的配制称取40g Na2CO3，溶于200mL 蒸馏水中, 即为20%（g/L）的Na2CO3溶液。
二、方法与结果1.对照品溶液的制备并绘标准曲线精密称取没食子酸标准品0.0110g，用蒸馏水溶解并定容至100mL，得浓度为0.11mg /mL 的标准液。
准确吸取0、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6mL 置于25mL 的棕色容量瓶中，加蒸馏水至6.0mL，然后分别加入FC 试剂0.5mL，混匀，在0.5～8min内加入1.5mL 20% 的Na2CO3溶液，充分混合后定容，30℃避光放置0.5h，以不加标准液的6.0mL 蒸馏水为空白对照，760nm 下测定吸光值，每个样品平行测定三次。
2、供试品溶液的制备样品溶液总酚含量的测定: 准确量取制备好的乙醇粗提液0.5mL 于50mL 容量瓶中，加入9.5mL 蒸馏水，摇匀，再加入0.5mL 福林试剂，混匀，在0.5 ～8min 内加入1.5mL 20%的Na2CO3溶液，充分混合后定容，30℃避光放置0.5h，以没食子酸标准液为空白对照，760nm 下测定吸光值，每个样品平行测定6 次(A为6次平行测得的吸光度）。
总多糖检测方法-硫酸苯酚法-实验流程图-李熙灿-XicanLi
总多糖检测方法-硫酸苯酚法-实验流程图-李熙灿-XicanLi总多糖含量测定，硫酸-苯酚法，:实验流程图李熙灿(广州中医药大学, 2017.10)【文献】Xican Li, Qiuping Hu, Shuxia Jiang, Fei Li, Jian Lin, Lu Han,Yuling Hong, Wenbiao Lu, Yaoxiang Gao,Dongfeng Chen. Folium Sennae Protects against Hydroxyl Radical-induced DNA Damage via AntioxidantMechanism: An in vitro Study. Botanical studies. 2014; 55:16..【简介】植物(特别是中药中)都含有各种糖类化合物，有单糖(如葡萄糖)、双糖(如蔗糖)、多糖(如黄芪多糖)，此外，还有糖苷。
这些糖类化合物的总含量，便建立了总糖的检测方法。
如果该植物中只存在多糖，则总糖的含量就是总多糖的含量。
总糖的检测方法最常见的是硫酸-苯酚法。
糖类化合物在硫酸作用下脱水，生成共轭的多烯烃。
共轭多烯再与苯酚结合，形成更大的共轭体系，在490nm处有最大吸收，外观多呈黄色。
所以，多使用分光光度法检测，并以某种标准品绘制工作曲线，依该曲线所建立的回归方程，计算其含量。
【溶液配制】1. 5%苯酚:精密称取1.0g苯酚，加入20mL蒸馏水，溶解即得5%的苯酚溶液。
2. 样品液配制:将待检测的样品用水(或甲醇)溶解，配成约1mg/mL的样品液。
3. 葡萄糖标准品溶液配制:精密称取无水葡萄糖1mg，加水定容至5mL，配成0.2mg/mL葡萄糖标准品溶液。
(也可以使用其他糖，如蔗糖。
但必须有足够的纯度)【检测方法与实验流程图】【标准曲线绘制】(葡萄糖)1μL，依“实验流程图/葡萄糖标准品组”的操作测定，测A值。
以葡取上述葡萄糖标准品溶液x 490nm萄糖标准品的最终浓度，为横坐标，A值为纵坐标，绘制标准曲线。
福林(Folin)-酚试剂法测定 PPT
1.Folin-酚试剂A：碱性铜溶液 甲液：取Na2CO32g溶于100ml0.1mol/l氢氧化钠溶液中 乙液：取CuSO4.5H2O晶体0.5g，溶于1%酒石酸钾100ml中。
临用时按甲：乙=50：1混合使用。 2.Folin-酚试剂B：将100g钨酸钠、25g钼酸钠、700ml蒸馏水、50ml85%
四、实验步骤
1.标准曲线的绘制
取7支干燥的试管，编号，按下表加入试剂，比 色后，以光密度为纵坐标，蛋白质浓度为横坐标 作图。
2.样品测定
准确吸取样液0.5ml于干燥的试管中，同样按下 表加入试剂，测出光密度值后，对照标准曲线求
❖ 用波长选择旋钮设置您所需的分析波长。
❖ 将参比样品溶液和被测样 品溶液分别倒入比色皿中， 打开样品室盖，将盛有溶 液的比色皿分别插入比色 皿槽中，盖上样品室盖。 一般情况下，参比样品放 在第二个槽位中。
❖ 将0％T校具（黑体）置入 光路中，在T方式下按“0 ％T”键，此时显示器显示 “000.0”
下次试验：氨基酸纸层析和维生素C 定量测定-2，6，二氯酚靛酚法。
附：7200型分光光度计的操作程序
❖ 连接仪器电源线，确定仪器供电电源有良好的接地性能。
❖ 接通电源，使仪器预热20分钟。
❖ 用<MODE>键设置测试方式：投射比（T），吸光度（A）， 已知标准样品浓度值方式（C）和已知标准样品斜率（F） 方式。
分光光度计的使用注意事项:
比色皿的清洁程度，直接影响实验结果。因此，特 别要将比色皿清洗干净。装样前处理：自来水反复 冲洗→蒸馏水漂洗2次→待装溶液漂洗2次。用完后 用自来水和蒸馏水洗净并用檫镜纸檫干放回比色皿 盒中。
拿放比色皿时，应持其“毛面”，不要接触“光面”。
1 红枣汁中总酚含量的福林法测定
从 表 １可知 ， 随着 放 置时 间 的延长 ， 吸光 值略 其 有降低 ，基本没有 变化 ， Ｓ Ｒ Ｄ为 ０１ ． ７％，由此可知 Ｆ ｃ 法测定 总酚其结果稳定 ， 易于操作 。
２３ 精 密度试 验 ． 精确 移取红枣 汁样 品溶 液 ０５ ． 照上述 测定 ． ｍＬ 按
混匀 ， 水浴 ７ ℃下反应 １ ｉ， ５ ０ｍ ｎ 冷却后 在 ７ ０ａ ６ ｍ处测
Ｆｉ ． Ｓｔ ｎｄ ｒ ｕ ｖ ｏ ｔ ｒ ｎ ｔｏ ｆｔ ｔ ｌｐ ｌ ｐｈ ｎ ｌ ｇ１ ａ ａ ｄ ｃ ｒ ｅ ｆ ｒｄｅ ｅ ｍｉ ａ ｉ ｎ ｏ ａ ｏ ｙ ｅ ｏ ｓ ｏ
结果表明 ， 没食 子 酸 在 浓度 为 １Ｉ ／ Ｌ ６ ｇ ～ ￣ｍ
归方程 为 Ｙ ．１ ＋０ ０ ４（ ． ９ ） ＝０１３ ｘ ． ５ Ｒ ＝０９ 。 ６ ０ ９３
定 其吸光度 。
２ 结果与分析
方法 ， 重复测定 ６次 ， 如表 ２所示 ， 总酚吸光值 的 Ｒ Ｄ Ｓ
为 ０１ ． ％
表 ２ 精密度实验结果
Ｔａ ｅ２ Ｒｅ ｕｌ ｆ ｅ ｉｉ ｎ ｅ ｐ ｒ ｍ ｅ ｂｌ ｓ ｔ ｏ ｃｓ ｏ ｘ ｉ ｓ ｐｒ ｅ ｎｔ
２１ 标准 曲线的建立 ．
小均一 、 成熟度好 、 机械损伤 的原料 。 无 没食 子 酸标 准 品 ： 山海 国药集 团化学 试 剂有 限
作者简介 ： 徐辉艳 （９４ ）女 （ ）硕士研究生 ， １８一 ， 汉 ， 研究方 向： 品生 食
物技术。
硫酸锂（ｉ Ｏ ・ ）５ Ｌ蒸馏水和几滴溴水 。 口继 Ｌ￣ ＨＯ 、０ Ｓ ｍ 开 续煮沸 １ ｉ， ｍ ｎ 使得溴水完全挥 发。 ５ 待溶液冷却并定 容
到 １ ０ Ｌ 过滤并置于棕色瓶中 ． ０ｍ 。 ０ 冰箱 中低温放置 可
总酚含量测定
一、测定方法概述1.依据酚类物质可以被高锰酸钾氧化的性质，高锰酸钾滴定法2.酚类化合物在碱性条件下可以与4-氨基安替比林反应生成红色染料，比色3.酚羟基可与酒石酸铁中的铁离子反应生成蓝色络合物比色4.酚类物质还原福林试剂生成蓝紫色物质，比色二、高锰酸钾滴定法测多酚此方法多应用在茶叶上原理：酚类物质可以被高锰酸钾氧化，烟叶中还有一些酚类衍生物和非酚类物质也可以被高锰酸钾氧化，会使测定结果偏高。
因此滴定须分两步进行：第一步滴定待测液中总还原性物质，第二步用明胶盐溶液将酚类物质沉淀后，测定待测液中其它还原性物质含量，二者之差就是样品中多酚含量。
但是绿原酸不能被沉淀，因此，此法不易用来测定烟草多酚。
0.1%靛红作指示剂。
酚类提取：采用沸水浴方法提取。
三、氨基安替比林比色法此方法用来测样品中挥发性酚类化合物，常常应用在食品，水等挥发酚的测定。
灵敏度最高高。
原理：酚类化合物在碱性溶液中，当有氧化剂铁氰化钾存在时，可以与4-氨基安替比林生成一种红色染料，用分液漏斗将红色染料萃取到氯仿层，在460nm处比色。
用苯酚作标准曲线，计算出样品中挥发性酚类物质含量。
1此方法酚的提取步骤比较麻烦：先在2.5mol/L硫酸溶液中加热回流1小时，将样品中中挥发酚提取出来。
通入水蒸气把酚蒸馏出来，收集并定容。
2苯酚腐蚀性强，为结晶体，不好秤取。
3蒸馏装置不能漏气，且所用的橡皮类物质需要事前用碱水浸泡，并水煮10min。
四、酒石酸比色法原理：酚类物质的羟基与酒石酸铁中的铁离子生成蓝色络合物，根据络合物溶液颜色深浅，在540nm处比色，可测出烟叶中酚类物质含量。
以儿茶酚或没食子酸乙酯作标准溶液。
可以用来测定烟草中的多酚。
此方法酚的提取与福林法测多酚提取步骤一样。
五、福林法测烟叶多酚/总酚1.原理; 在碱性条件下利用多酚的还原性，多酚可以将磷钨钼酸还原成蓝色，蓝色深浅与多酚含量城正相关，可以用分光广度计进行测定。
2.试剂和仪器：试剂：儿茶酚或没食子酸乙酯，钼酸钠，磷钨酸，Na2CO3仪器：水浴锅，721分光光度计，试管，三角瓶，漏斗，滤纸，移液管。
总酚含量测定-多酚含量测定-操作流程图-实验图解-李熙灿-Xican Li
多酚含量测定-总酚含量测定(操作流程图) 2017.10【测定方法与操作流程图】【溶液配制】(1)0.25mol/L Folin酚(福林酚)试剂的配制：取2mol/L Folin-Ciocalteu试剂1mL，加蒸馏水7mL，充分混合，得0.25mol/L的Folin-Ciocalteu试剂,共8mL。
(2)15%Na2CO3溶液的配制：取Na2CO3•10H2O溶3.0g，溶于20mL水中，混匀即得。
(3)连苯三酚1标准液的配制：精确称取连苯三酚标准品10mg．用甲醇溶解并定容到50mL，得0.2mg/mL的连苯三酚标准液。
(4)样品液的的配制：精确称取待测样品10mg．用甲醇2溶解并定容到10mL，得1mg/mL的样品液。
【连苯三酚标准曲线的绘制】1本文使连苯三酚作为标准品.当然,也可以使用咖啡酸、槲皮素、儿茶素、芦丁等作为标准品，绘制标准曲线。
2也可以用无水乙醇、95乙醇、水，视样品的溶解性而度。
1.9276670.15 0.35 1.917图Folin酚法测定多酚含量的标准曲线（以连苯三酚为例,平行测三次）（以连苯三酚为例，A = 32.16733*C + 0.06012, R=0.998，线性范围：连苯三酚0.00-0.06mg/mL，A值在0.039-1.928之间）。
【多酚含量的计算】依上述公式A = 32.16733*C + 0.06012, 由A值即可求得浓度C值。
【说明】(1)不同的分光光度计所测得的A值可能不一样，所以，同一次实验要用同一台分光光度计；(2)Folin-Ciocalteu试剂：可向试剂公司购买，一般其浓度为2 mol/L。
也可以自配方法如下：将100g钨酸钠(Na2WO4 ·2H2O), 25g钼酸钠( Na2MoO4·2H2O) ,700 mL蒸馏水，50 mL 85%磷酸及100 mL浓盐酸装入带回流装置的2000mL圆底烧瓶中，充分混合，文火缓慢回流10h,在加入150g硫酸锂(Li2SO4),50 mL蒸馏水及数滴液溴，然后将烧瓶内溶液开口煮15min，以驱除过量的溴，冷至室温后用容量瓶定容至1000mL，过滤。
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福林酚法测定总酚含量-操作流程图2017.10
【安全事项】本实验所用的福林酚试剂（或称Folin酚试剂、Folin-Ciocalteu试剂）有严重的腐蚀性。
【测定方法与操作流程图】
【文献】Xican Li, Qiuping Hu, Shuxia Jiang, Fei Li, Jian Lin, Lu Han,Yuling Hong, Wenbiao Lu, Yaoxiang Gao, Dongfeng Chen. Fl os Chrysanthemi Indici Protects against Hydroxyl-induced Damages to DNA and MSCs via Antioxidant Mechanism: A Chemistry Study. Journal of Saudi Chemical Society, 2015, 19, 454-460
【溶液配制】
(1)0.25mol/L 福林酚试剂的配制：取原装的福林酚试剂（浓度为2mol/L）2毫升，加蒸馏水14毫升，充分混
合，得0.25mol/L的福林酚试剂,共16 毫升。
(2)15%Na2CO3溶液的配制：取Na2CO3•10 H2O溶3.0 克，溶于20毫升水中，混匀即得。
(3)连苯三酚1标准液的配制：精确称取连苯三酚标准品10毫克．用甲醇溶解并定容到50毫升，得0.2毫克/毫
升的连苯三酚标准液。
(4)样品液的的配制：精确称取待测样品10毫克．用甲醇2溶解并定容到10毫升，得1毫克/毫升的样品液。
【连苯三酚标准曲线的绘制】
0.2毫克/毫升样品液加样量(x毫升) 甲醇
(05-x)
A760值
A760平均
值
SD
0.000 0 0.50 0.030.0386670.017442
1本文使连苯三酚作为标准品.当然,也可以使用咖啡酸、槲皮素、儿茶素、芦丁等作为标准品，绘制标准曲线。
2也可以用无水乙醇、95乙醇、水，视样品的溶解性而度。
0 0.50 0.023
0 0.50 0.063 0.004
0.01 0.49 0.15 0.166667
0.015861
0.01 0.49 0.162 0.01 0.49 0.188 0.008
0.02 0.48 0.29 0.294667
0.003682
0.02 0.48 0.299 0.02 0.48 0.295 0.02
0.05 0.45 0.749 0.729
0.016753
0.05 0.45 0.708 0.05 0.45 0.73 0.032
0.08 0.42 1.088 1.092
0.00432
0.08 0.42 1.09 0.08 0.42 1.098 0.04
0.1 0.4 1.393 1.394333
0.031857
0.1 0.4 1.356 0.1 0.4 1.434 0.048
0.12 0.38 1.747 1.636
0.092307
0.12 0.38 1.521 0.12 0.38 1.64 0.06
0.15 0.35 1.983 1.927667 0.041516
0.15 0.35 1.883 0.15 0.35 1.917
图 Folin 酚法测定多酚含量的标准曲线（以连苯三酚为例,平行测三次）
（以连苯三酚为例，A = 32.16733*C + 0.06012, R=0.998，线性范围：连苯三酚0.00-0.06毫克/毫升，A 值在
0.039-1.928之间）。
【说明】
(1)不同的分光光度计所测得的A 值可能不一样，所以，同一次实验要用同一台分光光度计；
(2)Folin-Ciocalteu 试剂：可向试剂公司购买，一般其浓度为2 mol/L 。
也可以自配方法如下：将100g 钨酸钠(Na 2WO 4 ·2H 2O), 25g 钼酸钠( Na 2MoO 4·2H 2O) ,700 毫升蒸馏水，50 毫升 85%磷酸及100 毫升浓盐酸装入带回流装置的2000毫升圆底烧瓶中，充分混合，文火缓慢回流10h,在加入150g 硫酸锂(Li 2SO 4),50 毫升蒸馏水及数滴液溴，然后将烧瓶内溶液开口煮15min ，以驱除过量的溴，冷至室温后用容量瓶定容至1000毫升，过滤。
滤液呈微绿色。
置于冰箱中长期冷藏备用临用时稀释。
（钨酸钠、钼酸钠、硫酸锂，都比较贵)。