PCR实验室设计说明分析
PCR实验室设计

PCR实验室设计PCR实验室是进行聚合酶链反应(PCR)的地方,它是生物学研究中非常重要的一个实验室,用于复制和扩增DNA片段。
设计一个高效的PCR实验室,不仅需要考虑实验室的空间大小、设备等基本因素,还需要考虑实验室的安全性、环境条件和实验流程等细节。
下面将详细介绍如何设计一个高效的PCR实验室。
一、实验室布局:1.实验室面积:根据实验人员数量和需要进行PCR实验的频率确定实验室的面积,通常每个实验员需要4-6平方米的工作空间。
2.工作流程:实验室的布局应该考虑实验流程的合理性和高效性,例如将实验室分为样品准备区、PCR反应区和实验结果分析区等不同功能区域,便于实验员分工合作。
3.设备安放:PCR实验室需要安放PCR仪器、振荡器、离心机等设备,要确保设备之间有足够的空间,且易于实验员操作和维护。
4.实验室设施:实验室应该有充足的通风系统和洁净工作台,确保实验环境的清洁和无菌。
二、实验室设备:1.PCR仪器:PCR实验室必备的设备是PCR仪,用于DNA片段的扩增和复制,选择品牌好、性能稳定的PCR仪器。
2.离心机:用于离心PCR反应液,分离DNA片段和其他细胞成分,选择转速稳定、操作简单的离心机。
3.振荡器:用于振荡PCR反应管中的混合液,促使反应液均匀混合,选择振幅可调、操作便捷的振荡器。
4.电泳仪:用于检测PCR反应结果,分析DNA片段的长度和浓度,选择具有高分辨率、高灵敏度的电泳仪。
5.冰箱和冰盒:用于暂存PCR反应物和样品,确保PCR反应的成功进行。
6.光谱仪:用于检测PCR反应结果的准确性和一致性,选择灵敏度高、准确性好的光谱仪。
三、实验室安全:1.实验员培训:所有进入PCR实验室的人员都需要接受PCR实验操作的培训,了解实验室的安全规范和操作流程。
2.实验室标志:实验室内应该有清晰的标志和警示标识,提醒实验员注意实验室的安全规定。
3.废物处理:PCR实验产生的废物需要正确处理,避免对环境和人员造成危害。
pcr实验室设计标准

pcr实验室设计标准
PCR实验室设计的标准通常包括以下几个方面:
1. 空间分配:实验室空间应考虑到PCR反应的敏感性,避免
受到外界环境的干扰。
实验室应划分为不同的区域,如样品处理区、试剂准备区、PCR反应区、电泳分析区等,以避免交
叉污染。
2. 生物安全:PCR实验室需要具备生物安全级别,按照不同
的实验需求,可分为不同的生物安全级别实验室,如BSL-1、BSL-2等。
必要时需要采取措施,如为实验室设置生物安全柜、密封门、气流控制等,以确保实验人员和环境的安全。
3. 温度控制:PCR反应对温度的控制要求较高,因此实验室
应具备稳定的温度控制设备,如恒温干燥箱、恒温水浴等,能够提供所需的温度范围,并能保持温度的稳定性。
4. 洁净度要求:PCR实验中需要避免DNA污染,因此实验室
应具备洁净的条件,并保持无尘、无菌的环境。
实验室内的工作台、仪器、耗材等应经过适当的消毒处理。
5. 通风系统:PCR实验室应具备良好的通风系统,以保持空
气的流动和新鲜,减少实验室内可能存在的污染风险。
6. 实验室设备:PCR实验室应具备必要的设备,如PCR仪、
电泳装置、显微镜、离心机等,并根据实验需求选择合适的设备型号和规格。
7. 安全措施:为了保护实验人员和实验室环境的安全,需要设置相应的安全措施,如个人防护用品、紧急处理设施、紧急灭火装置等。
总之,PCR实验室的设计应考虑实验的特殊要求,如温度控制、生物安全和洁净度要求,并采取相应的措施保障实验质量和人员安全。
同时,根据实验规模和需求,适当选择合适的设备和器材,提高实验效率和可靠性。
PCR实验室设计解释

PCR实验室设计说明PCR实验室分为四个区域,进入各工作区域必须严格按照单一方向进行,不同的工作区域使用不同的工作服(例如不同的颜色)。
工作人员离开各工作区域时,不得将工作服带出,四区域分别为:1.试剂配制区n2.样品处理区n3.核酸扩增区n4.产物分析区n如使用全自动分析仪,区域可适当合并,三四区可合并为扩增产物分析。
各区的功能是:1.1.1 试剂准备区:扩增试剂的配制、分装和保存。
1.1.2 样品处理区:样品登记、分装;核酸提取、保存和加样。
1.1.3 扩增产物分析区:扩增产物的测定、结果分析、登记及报告。
1.2 扩增前区与扩增后区应严格分开,须使用不同的房间,两区之间最好有一定的间隔。
1.3 使用商品化试剂盒可在样品处理区进行少量试剂配制。
1.4 在满足下列操作和清洁处理要求的前提下样品处理区和试剂准备区可设在同一房间内:1.4.1 在生物安全柜内操作。
1.4.2 每个实验人员、实验组分别使用各自的试剂及耗材。
1.4.3 盛放污染材料的器皿密封并一次性使用。
1.4.4 用有效的方法对操作区域和共享器具在实验前后进行清洁及消毒。
设计要求:PCR实验室可以是分散形式,也可以是组合形式,现要主要是以组合形式为主流。
完成一组PCR 实验,通常应经过试剂配制、样品处理、核酸扩增及产物分析四个实验过程,若实验工艺需要,还应增加样品粉碎过程。
一、分散形式PCR实验室所谓分散形式PCR实验室,是指完成上述实验过程的实验用房彼此相距较远,呈分散布置形式。
对于这种布置形式的PCR实验室,由于各个实验之间不易相互干扰,因此无需特殊条件要求。
二、组合形式PCR实验室所谓组合形式PCR实验室, 是指完成PCR四个实验过程的实验用房相邻布置,组成独立实验区域的形式。
对于组合形式PCR实验室,由于各个实验间集中布置,容易造成相互干扰,因此,对总体布局以及屏障系统具有一定的要求。
各室在入口处设缓冲间,以减少室内外空气交换。
PCR实验室设计

PCR实验室设计PCR(聚合酶链式反应)是一种常用的分子生物学技术,用于在体外扩增特定DNA序列。
PCR实验室的设计需要充分考虑实验操作的安全性、便捷性和效率。
以下是一个PCR实验室的设计,以确保实验的高质量和可靠性。
一、实验室的布局与功能分区:1.实验准备区:包括实验布局和设备准备、试剂制备等工作台2.样本处理区:用于样本预处理和DNA/RNA提取,配备组织破碎器、离心机等设备3.反应体制备区:用于PCR反应混合液的制备,包括试剂台和标本分发器4.PCR扩增区:用于PCR反应,包括PCR仪和相应的电源、稳定器等设备5.分析区:用于PCR产物分析,包括凝胶电泳仪和镜下分析设备6.洗涤区:用于实验工具和试剂的清洗,包括洗涤槽和滤水装置7.废物处理区:用于废弃物和污染物的处理,包括污染物容器和化学废液处理设备二、实验室设备和仪器选择:1.PCR仪:根据实验室需要选择合适的PCR仪,可以同时进行多个PCR反应。
2.离心机:用于样本离心和试剂混合液离心。
3.能量稳定器:保证PCR反应的稳定温度。
4.凝胶电泳仪:用于PCR产物的凝胶电泳和分析。
5.UV照射装置:用于观察凝胶电泳结果。
6.温度控制设备:用于样本处理、制备反应液等过程中的温度控制。
7.洗涤设备:包括洗涤槽和滤水装置,用于实验工具和试剂的清洗。
8.试剂和试剂盒:根据实验需要选择合适的PCR试剂和试剂盒。
三、实验室安全防护:1.实验室操作人员必须熟悉PCR实验的操作流程和安全规范,并穿戴符合实验要求的防护服和个人防护装备。
2.实验室内的工作台面和器材应保持清洁,定期进行消毒处理。
3.实验室应设有紫外线灯,用于灭菌PCR仪和操作面的工作区域。
4.实验室内要有火灾报警器、灭火设备和紧急出口标识,以应对紧急情况。
5.明确废弃物的处理方法,遵循实验室废弃物处理规范。
四、实验室标识和操作指导:1.实验室应有明确的标识,包括实验室名称、实验室规章制度和安全提醒等标识。
PCR实验室设计说明(东北农大)

PCR实验室设计说明:1.围护结构:本工程所设计的隔断、吊顶采用50mm系列机制玻美彩钢夹芯板。
洁净门规格:800*2000;固定窗规格:1500*1000(均为实际使用尺寸);板材优点是机械强度高,表面平整光滑,耐腐蚀,易清洁,隔热隔音安装方便;洁净区内部顶棚与墙面以及墙面与地面之间夹角均采用R50mm弧形铝材连接封闭,所有铝材均为优质电泳型材,防止铝材氧化。
2.地面:实验室地面采用PVC塑胶卷材地板,板缝为焊接对接,不藏细菌;具有耐酸碱、防腐蚀、耐磨防滑、回弹性好等优点,比环氧树脂地板使用寿命更长色泽更艳丽,是各种公共场合及医院实验室等首选。
3.照明、照度、消毒:本工程实验室照明均采用专业净化灯具,密封性好,不积尘易清洁,不锈钢边框经久耐用,镜面反光材料,使实验室照度达到300LUX。
实验室各房间灭菌灯为无臭氧石英玻璃灯管,采用不锈钢灯具,杀菌率高耐腐蚀。
4.配电:采用三相四线制配电系统,各电气线路均暗敷设于彩钢板吊顶之上和夹芯层内,穿套阻燃管;室内各用电点位置和高度在施工时可按用户要求调节。
气密式净化灯具吸顶安装,插座安装后用密封胶密实。
5.室内参数1)洁净区概要及要求:本工程为东北农业大学动物疾病与有毒有害物质检验检测中心实验室,净化级别万级(动态);吊顶高度为2.4米,换气次数为30次/h。
2)空调设计:四个实验室的空调分成3个系统采用3台风冷管道空调机组提供冷(热)风再经过中效加压风机送至各洁净室,以保证室内空调温湿度及压力梯度。
温度18℃—26℃湿度:45%—65%6.洁净区设计万级(美国联邦标准209E)洁净室采用了新风初效,混合回风中效及末端高效送风,三级过滤器的净化空调系统,洁净室内气流组织上采用顶部送风,下侧面回风(排风)气流形式,回风量为送风量的80%,排风量≤50%以保证房间的压力梯度。
C 正压:净化区对室外≥10pa高级别对低级别≥5pa负压:净化区对室外≤20pa高级别对低级别≤5paD 室内噪声:≤65db(A )E 洁净区照度:净化区150~300LX,非净化区100~150LX根据技术要求,综合考虑洁净室的等级要求,本设计净化区域为防止人流,物流对洁净室的影响,需对人流,物流采取换鞋,更衣,缓冲,吹淋,传递等有效措施,以免各种微粒子、微生物、致病菌等进入洁净区。
pcr实验室设计标准

pcr实验室设计标准PCR实验室设计标准是保证PCR实验室正常运行和实验结果准确可靠的基础。
PCR(聚合酶链反应)是一种基因分析技术,广泛应用于分子生物学、医学诊断、犯罪侦查等领域。
为了确保PCR实验的可靠性和重复性,合理设计PCR实验室的空间布局、设备配置、环境条件等是至关重要的。
本文将从空间布局、设备配置和环境条件三个方面,详细探讨PCR实验室设计标准。
一、空间布局PCR实验室的空间布局应充分考虑操作流程和安全要求。
首先,应将整个实验流程划分为不同区域,包括样本处理区、试剂配制区、反应体系制备区和扩增反应区等。
各个区域之间要有明确的界限,避免交叉污染。
其次,在样本处理区设置洗手池,并配备充足的洗手液和纸巾供使用者清洁双手。
此外,在试剂配制区设置专用台面,并配备必要的试剂瓶架和称量设备,保证试剂配制过程无误差。
为了确保PCR实验的准确性,反应体系制备区应与样本处理区和试剂配制区隔离开,以避免样本和试剂的交叉污染。
反应体系制备区应配备必要的实验仪器,如电动移液器、离心机等。
同时,为了减少实验误差,反应体系制备区内要保持整洁,并定期清理和消毒。
扩增反应区是PCR实验室的核心区域。
为了保证扩增反应的准确性和可重复性,扩增反应区要与其他实验室设备隔离开,并且在温度、湿度等环境条件上进行严格控制。
在扩增反应区内设置PCR仪器,并配备必要的试剂、耗材等。
二、设备配置PCR实验室的设备配置是保证实验结果准确可靠的重要保障。
首先,PCR仪是PCR实验室不可或缺的核心设备之一。
在选择PCR仪时,需要考虑其温度控制精度、均匀性以及操作便捷性等因素。
其次,在样本处理和试剂配制过程中需要使用电动移液器、离心机等常规分析仪器。
为了避免交叉污染,PCR实验室应配置专用的试剂瓶架、试剂瓶盖、移液枪等。
试剂瓶架应具备防滴漏功能,避免试剂的外泄。
移液枪应具备可调节容量的功能,以满足不同实验需求。
此外,PCR实验室还需要配备必要的消毒设备和生物安全柜。
pcr实验室设计标准及规范

pcr实验室设计标准及规范PCR实验室设计标准及规范。
PCR实验室是进行聚合酶链式反应(PCR)实验的重要场所,其设计标准和规范对实验室工作的顺利进行具有重要意义。
本文将就PCR实验室的设计标准及规范进行详细介绍,以期为相关工作提供参考和指导。
首先,PCR实验室的设计应符合相关的安全规范和实验室设计标准。
实验室内部应设置有足够的通风设施,以确保实验室内空气的流通和清洁。
此外,实验室内应设置紫外线消毒设备,以对实验室进行定期消毒和清洁,保证实验室内部的卫生安全。
其次,PCR实验室的设计应考虑实验室的使用需求和实验流程。
实验室内部应设置有充足的实验台和工作区域,以满足实验操作的需要。
实验室内部的设施和设备应按照实验流程进行合理布局,以提高实验的效率和准确性。
此外,实验室内应设置有充足的储存设施,以存放实验所需的试剂和材料。
另外,PCR实验室的设计应考虑实验室的安全性和实验操作的规范性。
实验室内部应设置有相关的安全警示标识,以提醒实验人员注意实验操作的安全性。
实验室内部应设置有相关的实验操作规范,以规范实验人员的操作行为,确保实验操作的规范性和准确性。
最后,PCR实验室的设计应考虑实验室的管理和维护。
实验室内部应设置有相关的管理制度和管理人员,以确保实验室的管理和维护工作得到有效的开展。
实验室内部的设施和设备应定期进行检查和维护,以确保实验室设施和设备的正常使用和安全性。
综上所述,PCR实验室的设计标准及规范对实验室工作的顺利进行具有重要意义。
实验室的设计应符合相关的安全规范和实验室设计标准,考虑实验室的使用需求和实验流程,确保实验室的安全性和实验操作的规范性,以及管理和维护实验室。
希望本文对PCR实验室的设计提供了一定的参考和指导,为相关工作的开展提供了有益的帮助。
PCR实验室工程设计要点的分析与探讨

PCR实验室工程设计要点的分析与探讨结语:随着国内综合国力与社会经济的高速发展,我国在生态领域、医疗领域、工业领域、建筑领域、经济领域等多个领域都得到了巨大的发展前景与发展空间。
在此背景下,PCR实验室也逐渐受到建筑单位与社会各界的高度重视与关注。
而PCR实验室设计是整个工程的核心环节,同时也是PCR实验室功能的重要保障,因此对设计步骤展开优化势在必行。
基于此,本文深度分析PCR实验室平面布局设计要点以及通风空调系统设计要点,供广大相关从业人员参考。
关键词;工程设计;要点分析;PCR实验室;平面设计引言:PCR实验室是基因扩增技术的重大技术改革,这项技术凭借其灵敏度较高、对样品要求较低、方便快捷以及特异性较强等优势与特点,被广泛应用于临床诊断当中。
PCR实验室建设与PCR实验设计向来受到建筑单位的高度重视,而PCR实验室布局设计与通风空调设计是两大工程设计重点,通过对这两大设计环节的把控,可以有效保证PCR实验室工程功能的有效开发与有效利用。
1平面布局工程设计要点1.1区域功能分析PCR实验室通常由扩增区域、扩增分析区域、标本制备区域、试剂储备区域构成,而区域的设置并非一成不变,通过以下方式可以得到有效说明:首先,如果是样本在扩增前期需要进行粉碎处理,则需要增加样本粉碎区域。
其次,若是使用荧光PCR方法,则分析区域与扩增区域则可以有效合并。
最后,若是采用全自动分析仪器,则分析区域、扩增区域以及标本制备区域可以有效整合为一个区域[1]。
1.2实验设备以及实验功能要点分析储备区域主要功能为试剂储存试剂配置以及试剂封装等相关工作,所有运送到该区域的材料以及试剂不应出现在其他区域,原材料以及相关试剂都应当在本区域内完成制备以及储存。
试剂储备区域内主要以冰箱设备、天平设备、加样器设备、紫外线灯设备、低速离心机设备为主,由于该区域内的试剂种类丰富且数量较多,因此试剂安全应当是整个平面设计的首要考虑因素,在开展平面设计环节,应当保证室内空间畅通无阻,试验台应当布置在房间的两侧,中间过道便于疏散,同时结合人体工程学来进行标准化设定,实验台通道与实验台设计1500mm 左右,中间通道可以满足两边同时过人[2]。
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PCR实验室设计说明PCR实验室分为四个区域,进入各工作区域必须严格按照单一方向进行,不同的工作区域使用不同的工作服(例如不同的颜色)。
工作人员离开各工作区域时,不得将工作服带出,四区域分别为:1.试剂配制区n2.样品处理区n3.核酸扩增区n4.产物分析区n如使用全自动分析仪,区域可适当合并,三四区可合并为扩增产物分析。
各区的功能是:1.1.1 试剂准备区:扩增试剂的配制、分装和保存。
1.1.2 样品处理区:样品登记、分装;核酸提取、保存和加样。
1.1.3 扩增产物分析区:扩增产物的测定、结果分析、登记及报告。
1.2 扩增前区与扩增后区应严格分开,须使用不同的房间,两区之间最好有一定的间隔。
1.3 使用商品化试剂盒可在样品处理区进行少量试剂配制。
1.4 在满足下列操作和清洁处理要求的前提下样品处理区和试剂准备区可设在同一房间内:1.4.1 在生物安全柜内操作。
1.4.2 每个实验人员、实验组分别使用各自的试剂及耗材。
1.4.3 盛放污染材料的器皿密封并一次性使用。
1.4.4 用有效的方法对操作区域和共享器具在实验前后进行清洁及消毒。
设计要求:PCR实验室可以是分散形式,也可以是组合形式,现要主要是以组合形式为主流。
完成一组PCR 实验,通常应经过试剂配制、样品处理、核酸扩增及产物分析四个实验过程,若实验工艺需要,还应增加样品粉碎过程。
一、分散形式PCR实验室所谓分散形式PCR实验室,是指完成上述实验过程的实验用房彼此相距较远,呈分散布置形式。
对于这种布置形式的PCR实验室,由于各个实验之间不易相互干扰,因此无需特殊条件要求。
二、组合形式PCR实验室所谓组合形式PCR实验室, 是指完成PCR四个实验过程的实验用房相邻布置,组成独立实验区域的形式。
对于组合形式PCR实验室,由于各个实验间集中布置,容易造成相互干扰,因此,对总体布局以及屏障系统具有一定的要求。
各室在入口处设缓冲间,以减少室内外空气交换。
试剂配制室及样品处理室宜呈微正压,以防外界含核酸气溶胶的空气进入,造成污染,可以通过控制进风风量大于排风风量达到正压效果。
核酸扩增室及产物分析室应呈微负压,以防含核酸的气溶胶扩散出去污染试剂与样品,可以通过控制排风风量大于进风风量达到负压效果。
在理想情况下,PCR实验室缓冲间内,可设置正压,使室内空气不流向室外,室外空气不流向室内。
PCR实验室进风由原有中央空调控制,要求将中央空调风口安装到指定定点,且高度为地面铺装好后2600mm处。
如果使用荧光PCR仪,扩增室和产物分析室可以合并。
若房间进深允许,可设PCR内部专用走廊。
需要指出的是在减少室内外空气交换方面,缓冲间比专用走廊更有意义。
各个区域之间应具备单向的实验工艺流、物流、人流与气流,形成单向流程的保护屏障,避免实验之间的相互干扰,防止核酸气溶胶对实验过程造成污染产生假性结果。
实验室的墙体,包括顶棚,应结构牢固、气密性好;所有阴角宜采用圆弧形线条过渡;墙体内壁光洁、不吸附、耐腐蚀、易清洗消毒;地面材料应满足无缝隙、无渗漏、光洁、耐腐蚀的要求。
如果使用荧光PCR仪,扩增室和产物分析室可以合并。
若房间进深允许,可设PCR内部专用走廊。
需要指出的是在减少室内外空气交换方面,缓冲间比专用走廊更有意义。
各个区域之间应具备单向的实验工艺流、物流、人流与气流,形成单向流程的保护屏障,避免实验之间的相互干扰,防止核酸气溶胶对实验过程造成污染产生假性结果。
实验室的墙体,包括顶棚,应结构牢固、气密性好;所有阴角宜采用圆弧形线条过渡;墙体内壁光洁、不吸附、耐腐蚀、易清洗消毒;地面材料应满足无缝隙、无渗漏、光洁、耐腐蚀的要求。
主要设备试剂准备区仪器设备主要有冰箱、超净台、加样器、混匀器、天平和离心机等,加样器、天平除了要专用外,还应有定期校准。
试剂分装应在超净台中进行扩增反应混合液应使用分子生物学级的,试剂制备好后应有质检:一是否有污染、二是检测试剂的扩增效果。
标本制备区仪器设备主要有生物安全柜、加样器、离心机、温育仪、混匀器等扩增区扩增区的主要仪器是核酸扩增仪、超净台、微量加样器、离心机、可移动紫外灯。
扩增仪需进行校准。
并配备UPS电源,以防止由于电压的波动,停电对扩增效果的影响。
分析区本区所使用的仪器设备有酶标仪、洗板机、加样器和水浴箱等洁净实验区的缓冲间部分面积不能超过主实验室的八分之一,这是有规定的.1、主体结构:主体为彩钢板、铝合金型材。
室内所有阴角、阳角均采用铝合金50内圆角铝,从而解决容易污染、积尘、不易清扫等问题。
结构牢固,线条简明,美观大方,密封性好。
2、标准的四区分隔和气压调节:将PCR过程分成试剂准备、标本制备和PCR扩增,产物分析四个独立的实验区。
整个区域有一个整体缓冲走廊。
每个独立实验区设置有缓冲区,同时各区通过气压调节,使整个PCR实验过程中试剂和标本免受气溶胶的污染并降低扩增产物对人员和环境的污染。
可打开缓冲区Ⅰ,缓冲区Ⅱ和 PCR 扩增区的排风扇往外排气,在实验区的外墙上和各扇门上都安装有风量可调的回风口,空气通过回风口向室内换气。
3、消毒:在三个实验区和三个缓冲区顶部以及传送窗内部安装有紫外灯,供消毒用。
在试剂准备区和标本制备区还设置移动紫外线灯,对实验桌进行局部消毒。
4、不锈钢传递窗:试剂和标本通过机械连锁不锈钢(不建议使用电子连锁方式)传递窗传递,保证试剂和标本在传递过程中不受污染(人物分流)。
5、地面地面建议使用PVC卷材地面或自流坪地面,整体性好。
便于进行清扫,耐腐蚀。
6、照明灯具要选用净化灯具,能达到便于清洗、不积尘的特点。
在建设的过程中应注意:●规范的安装流程和全面的服务流程。
●严格按照规范科学设计的安装流程。
●安装前需要确定以下安装条件,如:电源电压,电源进线位置,电话网络线进线位置,进水水压,最小安装空间,地面平整度,通风孔、进水管和下水管的位置等,理想状态的空间尺寸样本处理区三、工作区域及设备要求(一)试剂储存和准备区1、2-8C和-15C冰箱2、混匀器3、微量加样器(覆盖1-1000ul)4、移动紫外灯(近工作台面)5、消耗品:一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心管和加样器吸头(带滤心)6、专用工作服和工作鞋7、专用办公用品(二)标本制备区1、2-8C冰箱、-20C或-80C冰箱2、高速台式冷冻离心机3、混允器4、水浴箱或加热模块5、微量加样器(覆盖1-1000ul)6、可移动紫外灯(近工作台面)7、生物安全柜8、消耗品:一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心管和加样器吸头(带滤心)9、专用工作服和工作鞋10、专用办公用品如需处理大分子DNA,应具有超声波水浴仪。
(三)扩增反应混合物配制和扩增区1、核酸扩增仪2、微量加样器(覆盖1-1000ul)3、可移动紫外灯(近工作台面)4、消耗品:一次性手套、一次性吸水纸、耐高压处理的离心管和加样器吸头(带滤心)5、专用工作服和工作鞋6、专用办公用品(四)扩增产物分析区视检验方法不同而定。
基本仪器设备如下:1、微量加样器(覆盖1-1000ul)2、可移动紫外灯(近工作台面)3、消耗品:一次性手套、一次性吸水纸、加样器吸头(带滤心)4、专用工作服和工作鞋5、专用办公用品5.人员和样品的安全是由生物安全柜和定向气流共同来保证。
PCR实验室设计规程中规定人员和样品必须单向流动。
即从“试剂准备区到样品制备区,再从样品制备走向扩增区和产物分析区”,绝对不能反向流动,以辟免交叉污染。
气流方向只规定试剂准备区为微正压或常压,样品制备区为常压或负压,扩增区和产物分析区为负压,压力梯度是从试剂准备到产物分析区,是高到低的。
规程并没有规定要做成全新风系统,但是为降低交叉污染的风险,建议做成全新风系统。
1 概述临床基因扩增实验又称PCR实验,是专门用来检验艾滋病、乙型肝炎、禽疫病等病毒感染性疾病的一种检测手段。
它可以通过将病毒体内所含的基因进行扩增的方法,测出一些病毒含量不高的感染者体内是否含有特定的病毒。
由于该检测方法可以测出普通检验难以检测出的病毒并具有灵敏度高、特异性高、快捷、对样品要求低等优点,因此被临床医生广为认可,已广泛应用于医院的临床诊断和各防疫检测部门的禽疫病诊断。
但是,这种实验需要有能保证绝对安全、配置合理的实验室和非常规范的操作为前提。
近年来对临床基因扩增检验实验室的建设越来越得到重视,因为它对检测结果的可靠性、准确性和安全性起到至关重要的作用。
本文主要从临床基因扩增检验实验室的平面布局,空调通风系统设计、气流控制和污染的防制几个方面对实验室设计中的主要特点进行了阐述。
临床基因扩增检验实验室设计的核心问题是如何避免污染。
因此,实验室的平面布局、空调通风系统设计、气流控制等都是围绕这个核心问题进行的。
下面就对这几个方面分别进说明。
2 PCR实验室平面布局临床基因扩增检验实验室原则上分为四个单独的工作区域:试剂贮存和准备区、标本制备区、扩增反应混合物配制和扩增区、扩增产物分析区。
为避免交叉污染,进入各个工作区域必须严格遵循单一方向进行,即只能从试剂贮存和准备区→标本制备区→扩增反应混合物配制和扩增区→扩增产物分析区。
各实验区之间的试剂及样品传递应通过传递窗进行。
PCR实验室平面布置示意图如图1所示。
图1 PCR实验室平面布置示意图3 实验室空调通风系统设计及压力控制PCR实验室并没有严格的净化要求,但是为避免各个实验区域间交叉污染的可能性,宜采用全送全排的气流组织形式。
同时,要严格控制送、排风的比例以保证各实验区的压力要求。
3.1 试剂贮存和准备区该实验区主要进行的操作为贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备。
试剂和用于标本制作的材料应直接运送至该区,不得经过其他区域。
试剂原材料必须贮存在本区内,并在本区内制备成所需的贮存试剂。
对与气流压力的控制,本区并没有严格的要求。
3.2 标本制备区该区域主要进行的操作为临床标本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定RNA时cDNA的合成。
本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为正压,以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。
另外,由于在加样操作中可能会发生气溶胶所致的污染,所以应避免在本区内不必要的走动。
3.3 扩增反应混合物配制和扩增区该区域主要进行的操作为DNA或cDNA扩增。
此外,已制备的DNA模板和合成的cDNA(来自样本制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂贮存和制备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。
在巢式PCR测定中,通常在第一轮扩增后必须打开反应管,因此巢式扩增有较高的污染危险性,第二次加样必须在本区内进行。
本区的压力梯度要求为:相对于邻近区域为负压,以避免气溶胶从本区漏出。
为避免气溶胶所致的污染,应尽量减少在本区内的不必要的走动。