分子生物学-11
生工3：《分子生物学》三基题库
食品科学与工程学院生物工程专业《分子生物学》课程“三基”综合考试试题库一、基本概念1-1 基因与基因组 1-2 内含子与外显子1-3 中心法则 1-4 半保留复制1-5 冈崎片段 1-6 寡聚核苷酸1-7 核小体 1-8 复制叉1-9 操纵子 1-10 增强子1-11 插入序列（IS） 1-12 分子克隆1-13 翻译 1-14 聚合酶链式反应（PCR）1-15 基因重组 1-16 C-文库1-17 转基因生物 1-18 限制性物理图谱1-19 密码子 1-20 有意义链与反意义链1-21 断裂基因 1-22 结构基因1-23 RNA剪接 1-24 核酶1-25 逆转录酶 1-26 单顺反子与多顺反子二、基本理论与基本知识2-1 为什么 DNA双螺旋中维持特定的沟很重要?2-2 为什么只有 DNA适合作为遗传物质?2-3 列出最先证实是 DNA(或RNA)而不是蛋白质是遗传物质的一些证据。
2-6 试述Meselson和Stahl关于DNA半保留复制的证明实验。
2-7 描述大肠杆菌DNA聚合酶I在DNA生物合成过程中的作用。
2-8 原核生物与真核生物基因表达（RNA生物合成）的差异。
2-9 简述蛋白质生物合成过程。
2-10 简述核糖体的活性位点有哪些。
2-11 简述基因工程的基本操作步骤及其应用意义。
2-12 列举原核生物同真核生物转录的差异。
2-13 DNA有哪些修复方式？2-14 正调控和负调控的主要不同是什么?2-15 真核生物中，基因的表达受不同水平的调控，请列举其中3种。
2-16 原核生物基因组与真核生物基因组的特点比较。
2-17 简述大肠杆菌的插入序列，并指出它们对自发突变的重要性。
2-18 真核生物mRNA转录后的加工修饰方式主要包括哪些？各有何意义？2-19 什么是转录起始前复合体?三、基本技能。
分子生物学习题库与参考答案
分子生物学习题库与参考答案一、单选题（共49题，每题1分，共49分）1.可以实现体细胞克隆的技术是:A、基因编辑B、聚合酶链式反应C、诱导多能干细胞D、体细胞核移植正确答案：D2.在PCR反应中,引物与模板的结合温度约为:A、37°CB、55°CC、72°CD、95°C正确答案：B3.大肠杆菌对于基因克隆的主要作用是:A、提供连接酶B、合成引物C、表达目的蛋白D、作为宿主正确答案：D4.将单链DNA合成双链的酶是:A、连接酶B、DNA聚合酶C、裂解酶D、RNA聚合酶正确答案：B5.可以增加靶标DNA拷贝数的技术是:A、PCRB、电泳C、测序D、印迹杂交正确答案：A6.在Southern杂交中起探针作用的是:A、DNAB、RNAC、载体D、引物正确答案：A7.编码氨基酸顺序信息的DNA序列称为:A、启动子B、基因C、外显子D、启动密码子正确答案：B8.可以自我复制的核酸是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、miRNA正确答案：B9.DNA聚合酶在PCR反应过程中不需要的元素是:A、铜离子B、镁离子C、锰离子D、钾离子正确答案：A10.启动子序列通常位于:A、转录起始点上游B、编码区C、基因内含子D、终止子上游正确答案：A11.可以直接导入植物细胞的方法是:A、阳离子脂质体法B、农杆菌法C、微粒射击法D、电穿孔法正确答案：B12.DNA的组成单位是:A、氨基酸B、核苷酸C、核糖D、脱氧核糖正确答案：B13.农杆菌可以将T-DNA转入植物细胞的原因是:A、具有连接酶B、具有限制性内切酶C、具有转座子D、可以与植物细胞膜融合正确答案：C14.DNA测序中的Sanger方法利用了:A、引物延伸终止B、核酸杂交C、蛋白质切割D、荧光标记正确答案：B15.可以用于克隆目的基因的载体是:A、慢病毒B、质粒C、线性DNA分子D、mRNA正确答案：B16.属于真核生物的模型生物是:A、小鼠B、酵母C、果蝇D、以上所有正确答案：D17.可以将质粒DNA转入宿主细胞的是:A、限制性内切酶B、DNA连接酶C、显微注射器D、电穿孔仪正确答案：C18.可以直接将外源基因导入植物细胞的是:A、电穿孔法B、微注射法C、生物炮法D、农杆菌法正确答案：D19.检测蛋白质的方法不是:A、Western印迹B、质谱C、Northern印迹D、免疫印迹正确答案：C20.对DNA进行切割的酶类包括:A、分裂酶B、连接酶C、制限酶D、聚合酶正确答案：C21.可以直接检测蛋白质的方法是:A、PCRB、Northern blotC、Western blotD、Southern blot正确答案：C22.提供能量驱动翻译反应的化学键是:A、糖苷键B、磷酸酯键C、硫磷键D、氢键正确答案：B23.编码线粒体蛋白质的基因主要位于:A、细胞质DNAB、线粒体DNAC、细胞核DNAD、质粒DNA正确答案：B24.下列DNA酶类能切断磷酸二酯键的是:A、连接酶B、DNA聚合酶C、替代酶D、制限酶正确答案：D25.在制备重组DNA时,使用琼脂糖的目的是:A、提供营养B、连接DNA段C、物理分离片段D、催化连接反应正确答案：C26.是mRNA而不是tRNA或rRNA的特征是:A、可翻译成蛋白质B、可与核糖体结合C、含有多肽链D、富含无义密码子正确答案：A27.对蛋白表达的后翻译调控方式是:A、剪接体B、RNA编辑C、蛋白质水解D、磷酸化正确答案：C28.编码tRNA的基因位于:A、线粒体B、核糖体C、细胞核D、细胞质正确答案：C29.单克隆抗体技术利用的真核细胞是:A、诱导的多能干细胞B、杆状病毒感染的淋巴细胞C、转化的肿瘤细胞D、融合瘤细胞正确答案：D30.原核生物基因组中不含有的序列是:A、终止子B、编码区C、启动子D、外显子正确答案：D31.制备cDNA文库常用的反转录酶来源于:A、大肠杆菌B、反刍动物C、艾滋病毒D、枯草杆菌正确答案：C32.编码氨基酸的三联密码所在的核酸是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、盖帽RNA正确答案：C33.参与DNA复制的关键酶是:A、RNA聚合酶B、连接酶C、DNA聚合酶D、选择酶正确答案：C34.编码rRNA的基因通常组织成:A、基因簇B、可变剪接体C、假基因D、反义基因正确答案：A35.编码 rRNA 的基因位于:A、线粒体DNAB、质粒DNAC、细胞核DNAD、细胞质DNA正确答案：C36.将DNA上的遗传信息转录为RNA的过程称为:A、翻译B、转录C、复制D、修复正确答案：B37.PCR技术依赖的关键酶是:A、连接酶B、聚合酶C、裂解酶D、制限酶正确答案：B38.编码氨酰tRNA合成酶的RNA是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、siRNA正确答案：B39.可以实现定点诱变的技术是:A、CRISPR/Cas9B、ZFNsC、TALENsD、以上均可正确答案：D40.利用生物信息学分析推测基因功能的方法是:A、突变分析B、蛋白质互作C、序列比对D、同源建模正确答案：C41.可以改变染色体DNA序列的技术是:A、基因敲除B、基因转染C、基因沉默D、基因编辑正确答案：D42.下列不属于PCR反应体系的组成部分是:A、DNA模板B、聚合酶C、dNTPD、琼脂糖正确答案：D43.检测目的蛋白表达的方法不是:A、Southern blottingB、Western blottingC、Eastern blottingD、Northern blotting正确答案：A44.从cDNA库中可以获得的是:A、所有DNA片段B、编码区序列C、非编码区序列D、全部基因组序列正确答案：B45.可以直接克隆cDNA的是:A、质粒B、YACC、λ噬菌体D、人工染色体正确答案：A46.病毒载体导入宿主细胞的方法是:A、共转化B、显微注射C、电穿孔D、吸附感染正确答案：D47.可以识别启动子序列的转录因子是:A、β因子B、α 因子C、σ 因子D、Rho因子正确答案：C48.可以直接提取基因组DNA的方法是:A、PCRB、Northern blotC、Southern blotD、盐析法正确答案：D49.基因敲除实验中所用对照组应为:A、目的基因缺失组B、野生型组C、质粒载体组D、siRNA处理组正确答案：B二、多选题（共35题，每题1分，共35分）1.PCR反应的原料不包括:A、引物B、载体酶C、聚合酶D、dNTPE、模板DNAF、琼脂糖G、无橡皮管封闭正确答案：BFG2.对DNA序列进行PCR扩增需要以下原料:A、模板DNAB、载体酶C、引物D、连接酶E、脱氧核苷三磷酸F、DNA聚合酶G、以上ACF正确答案：G3.质粒载体应具有下列哪些特征:A、大片段插入区B、可自主复制C、含有筛选位点D、与宿主互作E、含有克隆位点F、编码病毒蛋白G、低拷贝数正确答案：BCE4.在制备cDNA文库时需要用到的关键酶包括:A、连接酶B、PCR酶C、限制性内切酶D、RNA聚合酶E、反转录酶F、RNase HG、链化酶正确答案：EF5.编码氨基酸序列的核酸为:A、rRNAB、mRNAC、tRNAD、mRNA前体E、单链RNAF、双链RNAG、环状RNA正确答案：B6.制备重组质粒的主要步骤是:A、载体线性化B、消化插入片段C、连接反应D、感受态细胞制备E、转化宿主细胞F、克隆鉴定G、所有以上步骤正确答案：G7.对肿瘤基因组的检测可以应用:A、Southern印迹B、Northern印迹C、Western印迹D、Eastern印迹E、基因检测F、测序G、基因芯片正确答案：AEFG8.基因表达调控的机制包括:A、转录水平调控B、RNA水平调控C、翻译水平调控D、蛋白活性调控E、基因增幅F、肽链释放G、以上AD均可正确答案：G9.参与翻译过程的RNA包括:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、siRNAE、snRNAF、反义RNAG、以上ABC均参与正确答案：G10.编码氨基酸序列的核酸为:A、rRNAB、mRNAC、tRNAD、cDNAE、基因F、反义链G、互补链正确答案：B11.PCR反应的原料组成包含:A、模板 DNAB、上游引物C、下游引物D、DNA聚合酶E、脱氧核苷三磷酸F、缓冲液G、以上ABDEF正确答案：G12.基因敲入的方法可以包括:A、siRNAB、基因敲除C、ZFNsD、TALENsE、CRISPR/Cas9F、Cre-Lox重组系统G、反义RNA抑制正确答案：CDEF13.编码脱氧核糖的DNA单链为:A、编码链B、反义链C、互补链D、下游链E、正义链F、上游链G、载体链正确答案：B14.基因编辑技术包括:A、ZFNs技术B、TALENs技术C、CRISPR/Cas技术D、基因敲除E、RNAi技术F、慢病毒介导G、以上所有正确答案：ABC15.制备重组DNA的步骤包括:A、载体选择B、插入DNA获得C、双酶切D、连接反应E、转化F、筛选G、以上全部正确答案：G16.参与制备cDNA文库的关键酶类有:A、连接酶B、限制性内切酶C、聚合酶D、反转录酶E、核酸酶F、RNase HG、以上DE正确答案：G17.制备重组质粒的关键步骤不包括:A、载体的选择B、消化载体及插入片段C、连接反应D、PCR扩增插入片段E、转化感受态细胞F、筛选重组克隆G、测序验证正确答案：D18.启动子序列的特征包括:A、定位于基因转录起始点上游B、通常为AT富集区C、具有内含子D、与编码区互补E、与编码区反向验配F、与编码区部分重叠G、保守性非常低正确答案：AB19.直接参与蛋白质翻译的分子包括:A、DNAB、mRNAC、rRNAD、tRNAE、RNA聚合酶F、释放因子G、所有以上分子正确答案：BCDF20.制备重组质粒需要下列步骤:A、载体选择B、消化载体和插入DNAC、连接反应D、感受态细胞制备E、转化宿主细胞F、克隆筛选G、以上全部正确答案：G21.检测mRNA的方法包括:A、Northern杂交B、Western印迹C、Southern印迹D、荧光in situ杂交E、实时定量PCRF、RNA序列表达谱分析G、以上ABDF正确答案：G22.启动子通常位于:A、翻译起始点上游B、转录终止点下游C、翻译终止点下游D、基因内含子E、编码区F、转录起始点上游G、终止子下游正确答案：F23.编码氨基酸序列信息的核酸为:A、DNAB、RNAC、mRNAD、tRNAE、rRNAF、cDNAG、质粒正确答案：C24.基因敲入的技术可以包括:A、siRNAB、基因敲除C、ZFNsD、TALENsE、CRISPR/Cas9系统F、Cre-Lox重组系统G、反义DNA正确答案：CDEF25.制备重组 DNA 需要以下技术:A、载体准备B、PCR 扩增插入片段C、引物设计D、双酶切连接E、宿主细胞转化F、筛选重组克隆G、以上全部正确答案：G26.编码氨基酸序列的核酸为:A、DNAB、mRNAC、rRNAD、tRNAE、miRNAF、cDNAG、基因正确答案：B27.编码mRNA的DNA单链被称为:A、编码链B、上游链C、下游链D、正义链E、反义链F、互补链G、载体链正确答案：E28.Polymerase Chain Reaction (PCR) 的关键步骤不包括:A、模板变性B、引物与模板杂交C、新链延伸合成D、反向转录E、新链变性F、产物检测G、增幅后转化正确答案：D29.Polymerase Chain Reaction (PCR) 的关键步骤包括:A、模板预变性B、引物与模板退火C、新链延伸合成D、产物检测E、反义链合成F、连接酶反应G、以上全部正确答案：ABCD30.编码氨基酸的三联密码存在于:A、DNA双链上B、mRNA分子上C、tRNA分子上D、rRNA上E、盖帽RNA上F、启动子区域G、终止子区域正确答案：C31.抑制基因在体细胞中的表达方法有:A、siRNAB、基因敲除C、反义RNAD、CRISPR/Cas9E、基因激活F、启动子激活G、剪切反应激活正确答案：ABD32.检测mRNA表达水平的技术是:A、北方印迹B、西方印迹C、南方印迹D、东方印迹E、In situ杂交F、免疫组化G、芯片杂交正确答案：AEG33.编码氨基酸的三联密码存在于:A、DNA双链上B、mRNA分子上C、tRNA分子上D、rRNA 上E、盖帽RNA上F、启动子区域G、终止子区域正确答案：C34.可以提高基因在异源表达载体中的表达水平的方法不包括:A、扩增子克隆B、终止子序列调控C、引入变位信号D、改良启动子序列E、引入选择标记F、优化文库构建方法G、优化编码序列正确答案：F35.可以提取基因组DNA的方法有:A、PCR扩增B、Northern印迹C、Southern印迹D、过滤法E、质谱法F、限制性酶切G、盐析法正确答案：CG三、判断题（共38题，每题1分，共38分）1.基因敲入可以使用双链DNA分子实现。
分子生物学
9. 核蛋白体是蛋白质生物合成的场所10. tRNA是氨基酸的运载工具及蛋白质生物合成的适配器11. 蛋白质生物合成需要酶类、蛋白质因子:重要的酶类:1.氨基酰-tRNA合成酶，催化氨基酸的活化；2.转肽酶，催化核蛋白体P位上的肽酰基转移至A位氨基酰-tRNA的氨基上，使酰基与氨基结合形成肽键;并受释放因子的作用后发生变构，表现出酯酶的水解活性，使P位上的肽链与tRNA分离；3.转位酶,催化核蛋白体向mR NA3’-端移动一个密码子的距离,使下一个密码子定位于A位蛋白质因子:起始因子、延长因子、释放因子12.原核生物的肽链合成过程（一）起始：指mRNA和起始氨基酰-tRNA分别与核蛋白体结合而形成翻译起始复合物的过程。
1. 核蛋白体大小亚基分离；2. mRNA在小亚基定位结合；3. 起始氨基酰-tRNA的结合；4. 核蛋白体大亚基结合。
（二）延长:指在mRNA模板的指导下，氨基酸依次进入核蛋白体并聚合成多肽链的过程。
肽链延长在核蛋白体上连续循环式进行，又称为核蛋白体循环(ribosomal cycle)，包括以下三步：1. 进位(positioning)/注册(registration)是指一个氨基酰-tRNA按照mRNA模板的指令进入并结合到核蛋白体A位的过程。
进位需要延长因子EF-Tu与EF-Ts参与。
2. 成肽(peptide bond formation)是在转肽酶(peptidase)的催化下，核蛋白体P 位上起始氨基酰-tRNA的N-甲酰甲硫氨酰基或肽酰-tRNA的肽酰基转移到A位并与A位上氨基酰-tRNA的α-氨基结合形成肽键的过程。
3. 转位(translocation) 是在转位酶的催化下，核蛋白体向mRNA的3´-端移动一个密码子的距离，使mRNA序列上的下一个密码子进入核蛋白体的A位、而占据A位的肽酰-tRNA移入P位的过程。
转位需要延长因子EF-G参与每轮循环使多肽链增加一个氨基酸残基。
分子生物学 第11章
反式作用因子从功能上分析，其结构可包含不同区 域：DNA结合域、转录激活域、连接区
（一）蛋白质直接和DNA结合
在DNA结合结构域中具有一些特殊结构基序： 1. 螺旋-转角-螺旋结构基序
2. 锌指结构基序
3. 螺旋-突环-螺旋结构基序
4. 亮氨基拉链结构基序
5. 碱性结构域 6. Β折叠
•基元，基序或模序（motifs or modules） •在许多蛋白质中，有两个或三个具有二级结构的肽 段在空间上相互接近，形成一个特殊的空间构象， 称为基序。有的将这种规则的二级结构的聚集体称 为超二级结构，它们可直接作为三级结构的“建筑 块”或域结构的组成单位，是蛋白质发挥特定功能 的基础。 •类型：αα、ββ、αβα、锌指结构、亮氨酸拉链…
第11章 真核生物的基因表达调控
真核生物基因表达与调控与原核生物有很大不同
•原核生物同一群体的每个细胞都和外界环境直接接 触，它们主要通过转录调控，以开启或关闭某些基 因的表达来适应环境条件（主要是营养水平的变 化），故环境因子往往是调控的诱导物。 •而大多数真核生物，基因表达调控最明显的特征时 能在特定时间和特定的细胞中激活特定的基因，从 而实现“预定”的，有序的，不可逆的分化和发育 过程，并使生物的组织和器官在一定的环境条件范 围内保持正常的生理功能。
1. 螺旋-转角-螺旋（Helix-turn-helix, HTH)
•HTH是第一个被确立的DNA结合结构。 很多细菌的调节蛋白是以螺旋-转角-螺旋这种基序 存在，如Lac阻遏蛋白，Trp阻遏蛋白、分解代谢激 活蛋白（CAP），λ噬菌体阻遏蛋白（Cro），噬菌 体434阻遏蛋白。在酵母中涉及交配型的a1和a2蛋 白以及在高等真核生物中的Oct-1和Oct-2也属于此 类型。
分子生物学名词解释
第一章名词解释1.基因gene是贮存遗传信息的核酸DNA或RNA片段,包括编码RNA和蛋白质的结构基因以及转录调控序列两部分;2.结构基因structuralgene指基因中编码RNA和蛋白质的核苷酸序列;它们在原核生物中连续排列,在真核生物中则间断排列;3.断裂基因splitgene真核生物的结构基因中,编码区与非编码区间隔排列;4.外显子exon指在真核生物的断裂基因及其成熟RNA中都存在的核酸序列;5.内含子intron指在真核生物的断裂基因及其初级转录产物中出现,但在成熟RNA中被剪接除去的核酸序列;6.多顺反子RNApolycistronic/multicistronicRNA一个RNA分子上包含几个结构基因的转录产物;原核生物的绝大多数基因和真核生物的个别基因可转录生成多顺反子RNA;7.单顺反子RNAmonocistronicRNA一个RNA分子上只包含一个结构基因的转录产物;真核生物的绝大多数基因和原核生物的个别基因可转录生成单顺反子RNA;8.核不均一RNAheterogeneousnuclearRNA,hnRNA是真核生物细胞核内的转录初始产物,含有外显子和内含子转录的序列,分子量大小不均一,经一系列转录后加工变为成熟mRNA;9.开放阅读框openreadingframe,ORF mRNA分子上从起始密码子到终止密码子之间的核苷酸碱基序列,编码一个特定的多肽链;10.密码子codon mRNA分子的开放读框内从5'到3'方向每3个相邻的核苷酸碱基为一组,编码多肽链中的20种氨基酸残基,或者代表翻译起始以及翻译终止信息;11.反密码子anticodon指tRNA分子反密码环中间3个相邻的核苷酸碱基,它们与mRNA上的三联体密码子互补配对,确保蛋白质合成时氨基酸按照密码子对号入座;13.启动子promoter指结构基因的转录起始位点附近的一段DNA序列,它结合RNA聚合酶真核生物还需要结合其他蛋白质因子后能够开放基因转录;14.增强子enhancer指真核生物的一段DNA序列,不具有方向性,距离结构基因可远可近甚至可以位于内含子;它与某些蛋白质因子结合后,通常能够增强启动子的转录活性,有时也可以抑制转录;15.核酶ribozyme指具有催化活性的RNA,其作用底物是RNA,主要参与RNA的加工成熟;16.核内小分子RNAsmallnuclearRNA,snRNA真核细胞核内富含尿嘧啶的小分子RNA,共有U1~U10十种;常与蛋白质结合形成小分子细胞核内核蛋白颗粒snRNP,参与mRNA的剪接加工;17.信号识别颗粒signalrecognitionparticle,SRP是细胞质内的一种小分子RNA7SLRNA和蛋白质组成的复合体,能够识别并结合信号肽,参与分泌性蛋白的加工;18.上游启动子元件upstreampromoterelement真核生物启动子上游的一些DNA序列,包括CAAT盒、CACA 盒、GC盒等,它们构成启动子的一部分,通过与转录因子结合提高转录效率;19.同义突变samesensemutation遗传密码具有简并性,故某些基因突变不改变编码的氨基酸序列,称为同义突变;20.错义突变missensemutation基因突变使某一密码子编码的氨基酸发生改变,多肽链中的氨基酸序列相应改变;21.无义突变nonsensemutation基因突变使原来编码某种氨基酸的密码子变为终止密码子,导致多肽链合成提前终止;22.移码突变frame-shiftingmutation基因的缺失突变或插入突变引起三联体密码阅读的方式发生改变,编码出具有不同一级结构的多肽链;23.转换transition指嘌呤取代嘌呤、嘧啶取代嘧啶的点突变,有4种转换形式;24.颠换transversion指嘌呤取代嘧啶、嘧啶取代嘌呤的点突变,有8种颠换形式;第二章名词解释1．基因组genome细胞或生物体中,一套完整单倍体的遗传物质的总和;如真核细胞基因组包含细胞核染色体DNA及线粒体DNA,原核细胞基因组包括染色体DNA和质粒DNA;2．质粒plasmid 细菌细胞内的、染色体外的DNA 分子,是共价闭合的环状DNA 分子,能够独立于细胞的染色质DNA 而进行复制;5．断裂基因splitgene 真核生物的结构基因中,编码区与非编码区间隔排列;6．假基因pseudogene 与有功能的基因同源,但不能．．产生有功能的基因产物的基因;9．卫星DNAsatelliteDNA 是基因组中的一种高度重复序列,其重复单位一般由2~10bp 组成,成串排列,具有调节基因的复制和转录等功能;10.单拷贝序列singlecopysequence 在整个基因组只出现一次或很少的几次,绝大多数真核生物蛋白质的编码基因为单拷贝序列;第三章名词解释核酶：具有酶促活性的RNA 称为核酶复制：是指遗传物质的传代,以母链DNA 为模板合成子链DNA 的过程;半保留复制：DNA 生物合成时,母链DNA 解开为两股单链,各自作为模板按碱基配对规律,合成与模板互补的子链;子代细胞的DNA,一股单链从亲代完整地接受过来,另一股单链则完全从新合成;两个子细胞的DNA 都和亲代DNA 碱基序列一致;这种复制方式称为半保留复制;双向复制：原核生物复制时,DNA 从起始点向两个方向解链,形成两个延伸方向相反的复制叉,称为双向复制;引发体：是在DNA 复制起始阶段形成的,含有解螺旋酶、DnaC 蛋白、引物酶和DNA 复制起始区域的复合结构;复制子：独立完成复制的功能单位,是从复制起点到复制终点之间的片段;冈崎片段：DNA 复制时,随从链复制中形成的不连续片段;复制叉：DNA 双链解开分成两段,各自作为模板,子链沿模板延长所形成的Y 字型结构称为复制叉; 半不连续复制：领头链连续复制而随从链不连续复制称为半不连续复制;逆转录：以RNA 为模板在逆转录酶的催化下合成DNA 的过程;端粒：指真核生物染色体线性DNA 分子末端的结构,形态上使染色体末端膨大成粒状;转录起始复合物：原核生物RNA聚合酶全酶、转录出的pppGpN-产物与模板DNA结合形成的复合物;边界序列：真核生物内含子都以GU为5’端起始,AG为3’端;5’-GU…AG-OH3’称为边界序列,也称剪接接口;剪接：将RNA分子中的内含子除掉,使外显子连接在一起的加工过程;启动子：是RNA聚合酶结合的、在转录起始点上游的DNA序列;如不受阻遏,RNA聚合酶与之结合后即可启动转录;中心法则：遗传信息从DNA向RNA再向蛋白质传递的规律;转录空泡：即转录复合物,由RNA聚合酶的核酶以及其模板DNA、转录出的产物构成;沉默子：真核顺式作用元件中的负性调节元件,当其结合特异蛋白因子时,对转录起阻遏作用;断裂基因：真核生物的结构基因,由若干个编码区和非编码区互相间隔开但又连续镶嵌,去除非编码区再连接后,可翻译出连续氨基酸组成的完整蛋白质;这些基因称为断裂基因;第四章名词解释1.碱基类似物baseanalogue是一类与正常碱基结构类似的化合物,在DNA复制时可取代正常碱基掺入并与互补链上碱基配对,从而引起碱基对的置换;2.自由基freeradical指能够独立存在,核外带有未配对电子的原子或分子;3.重组修复recombinationrepairing指依靠重组酶系将另一段未受损伤的DNA移到损伤部位,提供正确的模板,进行修复的过程;4.胸腺嘧啶二聚体thyminedimerTT在紫外线照射下,相邻的两个DNA分子上的胸腺嘧啶之间共价结合而成的;5.DNA交联DNAcross-linking DNA双螺旋上的碱基之间或与蛋白质分子之间共价结合;6.着色性干皮病xerodermapigmentosum DNA损伤修复缺陷而造成的一种遗传性疾病,患者有较高的皮肤癌发病倾向;对该病研究,发现了一些与切除损伤部位有关的蛋白质,称为XP蛋白;7.光复活酶photolyase 可被紫外线激活而结合到嘧啶二聚体部位使之解聚的酶;8.错配修复mismatchrepairing 是碱基切除修复的一种特殊形式,可纠正复制和重组中的碱基配对错误及因碱基损伤所致的碱基配对错误、碱基插入、缺失等损伤;9.活性氧activeoxygenspecies 较O 2的化学性质更为活泼的O 2的代谢产物或由其衍生的含氧物质,包括.O 2-、.OH 、H 2O 2等10.移码突变frame-shiftingmutation 在编码序列中,单个碱基、数个碱基及片段的缺失/插入可以使突变位点之后的三联体密码阅读框发生改变,不能编码原来的蛋白质;11.颠换与转换transversionandtransition DNA 链中一种嘌呤被另一种嘌呤取代,或嘧啶被另一种嘧啶所取代,称为转换;嘌呤被嘧啶取代或反之,称为颠换;第五章名词解释1.基因表达geneexpression 指基因转录及翻译的过程,基因表达的最终产物是蛋白质或者rRNA 、tRNA 等;管家基因是组成性表达,而可调节基因的表达具有时空特异性;2.不对称转录asymmetrictranscription 对于一个基因而言,转录的模板链仅仅是DNA 双螺旋中的一条单链;对于多个基因而言,模板链可以位于DNA 分子的不同单链上,由于模板始终是沿3'至5'方向,故DNA 两股链上的基因转录方向相反;3.翻译translation 由tRNA 运输氨基酸、在核糖体上根据mRNA 的三联体密码顺序合成多肽链的过程;此过程耗能,并且需要多种蛋白质因子参与;4.TATA 盒TATAbox 真核生物转录起始点上游与RNA 聚合酶、基本转录因子相结合的DNA 片段,含有TATA 共有序列,是II 类启动子的重要组成部分,又称为Hogness 盒;5..套索RNAlariatRNA 细胞核中初级转录产物hnRNA 在去除内含子时,剪接体使内含子区段弯曲成套索状,称为套索RNA,由此相邻外显子可相互靠近并发生转酯反应;7.RNA编辑RNAediting指细胞核中初级转录产物hnRNA的序列改变,使C变为U或者A变为G,结果一个基因表达产生不止一种蛋白质,增加了遗传信息容量;8.密码子的简并性degeneracy三联体密码的第1、2位碱基相同而第3位碱基不同时,仍可编码相同氨基酸;通常氨基酸可以有2～6种密码子为之编码例外：Met和Trp只有1种密码子;9.密码子的摆动性wobble mRNA密码子的第3位碱基与tRNA反密码子的第1位碱基不严格遵守碱基配对规律,可使1种tRNA识别mRNA的几种简并性密码子;10.SD序列Shine-Dalgarnosequence即原核生物mRNA的核糖体结合位点,是指起始密码上游富含嘌呤的短序列,能够与30S亚基的16SrRNA3'端富含嘧啶的短序列互补结合,与翻译起始复合物的形成有关;11.多聚核糖体polyribosome1个mRNA分子能够结合多个核糖体,同时进行翻译;原核生物和真核生物都存在这种现象,以提高蛋白质合成效率;12.核糖体循环ribosomecycle狭义含义是指翻译延长阶段,即每加一个氨基酸经过进位、成肽和转位三步骤;广义含义是指翻译起始、延长和终止的全过程,核糖体可以循环使用;13.分子伴侣molecularchaperon帮助新生多肽链折叠成天然空间构象的一类保守蛋白质如热休克蛋白,在原核细胞和真核细胞中广泛存在;14.信号肽signalpeptide是分泌性蛋白N端的特征性氨基酸序列,由碱性氨基酸区、疏水氨基酸区和剪切位点组成,能够与细胞液中的信号肽识别颗粒相结合,使蛋白质进入分泌转运途径;第六章名词解释1.管家基因housekeepinggene在生物体几乎所有的细胞中持续表达的基因,往往编码维持细胞基本结构与功能的蛋白质;2.可调节基因regulatedgene非维持细胞生存所必需,仅在特定条件下特异性表达的基因,表现为基因表达的时间阶段特异性和空间组织特异性;3.顺式作用元件cis-actingelement指调控真核生物结构基因转录的DNA序列,包括启动子、上游启动子元件、增强子、加尾信号和反应元件等;它们通过与反式作用因子相互作用来发挥转录调控作用;4.反式作用因子trans-actingfactors/转录因子transcriptionfactor,TF指真核基因的转录调节蛋白,包含DNA结合结构域和转录激活结构域;它们与顺式作用元件、RNA聚合酶相互作用,以及转录因子之间相互协同或者拮抗,反式调控另一基因的转录;5.基础转录因子basal/generaltranscriptionfactor与RNA聚合酶、启动子直接结合的真核转录调节蛋白,是转录起始复合物的最基本组件,基本不受环境因素影响;6.特异转录因子specialtranscriptionfactor与转录非核心元件、基础转录因子等相结合的真核转录调节蛋白,通过核酸－蛋白质、蛋白质－蛋白质相互作用影响转录效率,发挥转录激活或者转录抑制效应,可以对环境变化迅速作出反应;7.操纵子operon原核生物绝大多数基因按照功能相关性成簇串联排列,与启动子、操纵基因等调控元件共同组成一个转录单位,实现协调表达;8.衰减attenuation是原核生物中由核蛋白体调控转录终止的方式;转录起始后由于翻译偶联,核蛋白体所处的位置影响着转录出的先导mRNA的二级结构,从而控制RNA聚合酶是否继续进行转录;典型的例子是色氨酸操纵子的衰减作用;9.锌指zincfinger结构是真核细胞转录因子的DNA结合结构域的一种结构形式,包含数个相同的指结构,每个指结构含有βα等结构形式,其中4个残基Cys2/His2或者Cys2/Cys2与锌离子形成配位键;锌2指结构的指尖部分能够嵌入DNA双螺旋的大沟;10.亮氨酸拉链leucinezipper结构是真核细胞转录因子的DNA结合结构域的一种结构形式,指周期性地每隔4～7个残基出现1个Leu残基,形成兼性α－螺旋,具有极性氨基酸残基形成的亲水面和Leu残基形成的疏水面;两条具有此结构域的多肽链之间通过Leu的疏水侧链结合成二聚体,形成犬牙交错的拉链状;α－螺旋N端的碱性氨基酸介导该蛋白质与DNA相结合;第十章名词解释2.单基因病monogenicdisease,指由单个基因突变所引起的疾病,而所谓单个基因在这里是指位于一对同源染色体上的单个或一对等位基因;3.多基因病polygenicdisease指由两对或两对以上基因和环境因素共同作用所导致的疾病,也称为复杂性状疾病;多基因病的发病率要较单基因病等其他遗传病高,故常见病和多发病均属此类;4.座位异质性locusheterogeneity由不同基因突变引起相同遗传表型如遗传病的现象,也称遗传异质性;5.早现anticipation即早现遗传,指在世代相传的过程中遗传病的发病年龄越来越早,病情越来越重的现象,是动态突变导致的;6.母系遗传maternalinheritance是一类由位于细胞质中的线粒体基因突变所引起的线粒体遗传病,因其随母亲的卵细胞遗传给下一代,故被称为母系遗传;7.动态突变dynamicmutation指由于DNA中的核苷酸重复序列主要以三核苷酸形式拷贝数发生扩增所引起的突变;8.易感基因susceptibilitygene指那些与复杂性状疾病发生相关的微效基因;9.易患性liability指由遗传和环境因素共同作用所决定的个体发生多基因病的可能性;10.遗传率heritability指遗传因素在多基因遗传病发生中所起作用大小的程度,也称遗传度或遗传力,常用百分率％表示;例如,遗传率为70％－80％,就代表由遗传因素所决定的易患性变异和发病占到整个遗传与环境因素总和的70％－80％;第十一章名词解释1.病毒癌基因virusoncogene,v-onc反转录病毒中一些能在体外转化细胞,在体内使宿主患肿瘤的基因;2.细胞癌基因cellularoncogene,proto-oncogene正常宿主细胞中与病毒癌基因同源的基因,往往编码生长因子或其他信号转导分子,为细胞生长所必需；只有特定条件下被活化后才有致癌性,又称为原癌基因;3.抑癌基因tumorsuppressorgene一类编码产物起抑制细胞增殖信号转导、负性调节细胞周期的作用,从而抑制细胞增殖和抑制肿瘤生成的基因;4.细胞凋亡apoptosis在生理或病理状态下,由细胞内特定基因的程序性表达而介导的细胞死亡;5.显性负突变dominant-negativemutation突变基因编码的异常蛋白质与正常等位基因编码的蛋白质形成杂合寡聚物复合体,从而使整个蛋白复合体的功能失效,这种突变基因的作用方式属于显性负突变;6.DNA错配修复基因DNAmismatchrepairgenes负责修复DNA复制时产生错配的一类抑癌基因;7.点突变pointmutation基因在放射线或化学致癌物的作用下可发生单个碱基的改变;8.染色体易位chromosomaltranslocation不同染色体断裂后重新连接时产生的不正确连接;9.基因扩增geneamplification细胞通过增加基因拷贝数,使表达产物增多的过程;10.血管生成angiogenesis在原有血管基础上以芽生和非芽生方式形成新血管的过程;第十九章名词解释二名词解释1．基因克隆genecloning指把一个生物体中的遗传信息基因片段转入另一个生物体内进行无性繁殖,得到一群完全相同的基因片段,又称为DNA克隆;2．基因组文库genomicDNAlibrary指含有某种生物体全部基因片段的重组DNA克隆群体;即将原核或真核细胞染色体DNA提纯,用机械法或限制性内切酶将染色体DNA切割成大小不等的片段,插入适当的克隆载体中,继而转入受体菌扩增,由此获得含有众多克隆的基因组DNA文库;3．cDNA文库cDNAlibrary指含有某种组织细胞全部mRNA信息的重组DNA克隆群体;以细胞总mRNA 为模板,利用逆转录酶合成与mRNA互补的cDNA第一链,进而形成cDNA双链,与合适载体连接后转入受体菌扩增,由此建立cDNA文库;4．转基因动物transgenicanimal指应用转基因技术培育出的携带外源基因的动物,是通过gainoffunction途径研究基因功能的重要手段;将外源基因导入受精卵细胞或胚胎干细胞核内,使外源基因通过随机重组插入受体细胞的基因组中,并随细胞分裂而将外源基因遗传给后代;5．基因剔除geneknockout指通过基因同源重组定向地从活细胞的基因组中移除特定基因的过程,是通过lossoffunction途径研究基因功能的重要手段;6．RNA干扰RNAinterference,RNAi由短双链RNA诱导同源RNA降解的过程,是一种特异的转录后基因沉默现象,可以认为是生物体在核酸水平的免疫反应;7．Southern印迹Southernblotting是DNA定性及定量分析的方法之一,过程为提取细胞中的总DNA,用限制性内切酶水解后进行电泳,并转移到硝酸纤维素膜上,用DNA探针与结合在膜上的DNA分子退火形成双链,检测靶DNA的含量;8．Northern印迹Northernblotting是RNA定性及定量分析的方法之一,过程为将细胞中的总RNA 分子进行电泳分离,并转移到硝酸纤维素膜上,用DNA探针与结合在膜上的RNA分子退火形成双链,检测靶RNA的含量;9．反转录PCRreverse-transcriptionPCR,RT-PCR提取细胞总RNA作为模板,由逆转录酶催化生成cDNA;再以cDNA为模板,由一对特异性引物引发,在Taq DNA聚合酶作用下,通过变性、复性、延伸三步循环,复制生成大量双链DNA片段的过程;10．核酶ribozyme是具有酶活性的RNA,主要参与RNA的加工与成熟;。
分子生物学---11蛋白质磷酸化和信号转导
蛋白质磷酸化和信号转导一、蛋白质磷酸化过程和功能1、蛋白质磷酸化p r o t e i n p h o s p h o r y l a t i o n（1）过程：P r o t e i n k i n a s e(蛋白激酶)P r o t e i n p h o s p h o r y l a t e d p r o t e i nA T P A D PP h o s p h a t a s e（磷酸酶）P i（2）主要磷酸化位点（对有-O H的氨基酸进行磷酸化）丝氨酸（S e r）/苏氨酸（T h r）:磷酸化之后电荷发生变化使蛋白质活性改变酪氨酸（T y r）:磷酸化之后通常招募其他蛋白因子，使下游蛋白质活性改变（3）蛋白质磷酸化的功能生物热力学；蛋白质降解；酶活性的调控（激活o r抑制）；蛋白质相互作用2、重要的蛋白激酶（1）C D K s：c y c l i n-d e p e n d e n t k i n a s e周期蛋白依赖性蛋白激酶，属于一组调控细胞周期的S e r/T h r蛋白激酶，和周期蛋白c y c l i n协同作用发挥激酶活性，作用于细胞周期的不同阶段（2）R T K s：R e c e p t o r T y r o s i n K i n a s e受体酪氨酸激酶，是具有酪氨酸激酶活性的受体，如E G F R（表皮生长因子受体）（3）C y t o p l a s m i c P r o t e i n-T y r o s i n e K i n a s e s：非受体酪氨酸激酶，存在于细胞质中，大部分结构中存在S H2、S H3结构域，是磷酸化的结合位点。
如S r c、J A K、F A K等二、信号转导1、信号转导的种类E n d o c r i n e（内分泌）：激素P a r a c r i n e（旁分泌）：神经递质A u t o c r i n e（自分泌）：生长因子2、信号转导的步骤（1）信号分子的合成（2）信号分子释放（3）信号分子传导（4）信号分子与受体结合（5）激活细胞内信号通路（6）细胞内信号传导3、信号转导通路的几个重要的酶蛋白激酶；蛋白磷酸酶；G蛋白偶联受体；离子通道；细胞核受体；转录因子4、信号转导通路的种类及途径（1）细胞内受体介导的信号通路：信号分子一般为激素如孕酮（p r o g e s t e r o n e）、甲状腺素（t h y r o x i n）、维甲酸（r e t i n o i c a c i d）过程：血液中的激素分子从血管中游离出来进入细胞，与细胞质中的受体形成复合物，复合物进入细胞核内对基因的转录表达进行调控。
分子生物学练习题+答案
分子生物学练习题+答案一、单选题（共40题，每题1分，共40分）1、在DNA双链中连接碱基对的力是:A、共价键力B、离子键力C、氢键力D、范德瓦尔斯力正确答案：C2、可以切割磷酸二酯键的酶是:A、连接酶B、聚合酶C、DNA酶D、制限性内切酶正确答案：D3、可以识别特异序列的分子是:A、质粒B、酶C、探针D、引物正确答案：C4、识别到停止密码子后,释放肽链和RNA的复合物的是:A、rRNAB、mRNAC、tRNAD、释放因子正确答案：D5、可以识别启动子序列的转录因子是:A、Rho因子B、α 因子C、σ 因子D、β因子正确答案：C6、编码氨酰tRNA合成酶的RNA是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、siRNA正确答案：B7、在转录过程中起模板作用的分子是:A、RNAB、rRNAC、tRNAD、DNA正确答案：D8、DNA聚合酶在PCR反应过程中不需要的元素是:A、铜离子B、镁离子C、锰离子D、钾离子正确答案：A9、原核生物基因组中不含有的序列是:A、启动子B、外显子C、终止子D、编码区正确答案：B10、可以直接将外源基因导入植物细胞的是:A、电穿孔法B、生物炮法C、微注射法D、农杆菌法正确答案：D11、识别启动子启动转录的是:A、Rho因子B、RNA聚合酶C、螺旋酶D、拓扑异构酶正确答案：B12、DNA的组成单位是:A、氨基酸B、核苷酸C、核糖D、脱氧核糖正确答案：B13、将单链DNA合成双链的酶是:A、连接酶B、DNA聚合酶C、裂解酶D、RNA聚合酶正确答案：B14、用于筛选重组克隆的抗性基因常来源于:A、乳酸菌B、大肠杆菌C、枯草杆菌D、链霉菌正确答案：D15、在PCR反应中DNA聚合酶的最适反应温度是:A、37°CB、55°CC、72°CD、95°C正确答案：C16、将DNA上的遗传信息转录为RNA的过程称为:A、翻译B、转录C、复制D、修复正确答案：B17、启动子序列具有下列哪个特征:A、富含GCB、富含ATC、具有内含子D、保守性低正确答案：B18、可以直接导入细胞质的方法是:A、生物枪B、显微注射C、化学转染D、电穿孔正确答案：B19、加入对照组的目的是:A、减少实验误差B、增加结果可重复性C、证明结果可靠性D、以上皆是正确答案：D20、编码tRNA的基因位于:A、线粒体B、核糖体C、细胞核D、细胞质正确答案：C21、可以永久存在于宿主细胞中的载体是:A、人工染色体B、黏粒C、病毒向量D、质粒正确答案：A22、可以直接将外源DNA导入细胞的是:A、琼脂糖凝胶电泳B、质粒载体C、PCRD、生物枪技术正确答案：D23、下列不属于RNA聚合酶的职能的是:A、识别启动子B、解离DNA双链C、催化磷酸二酯键形成D、终止转录正确答案：B24、用于初步筛选重组克隆的方法是:A、PCRB、测序C、杂交D、蓝白斑筛选正确答案：D25、下列不属于核酸杂交的技术是:A、Northern印迹B、In situ杂交C、Southern印迹D、Western印迹正确答案：D26、可以实现定点诱变的技术是:A、CRISPR/Cas9B、ZFNsC、TALENsD、以上均可正确答案：D27、在基因编辑技术中,靶向特定位点的核酸酶是:A、ZFNsB、TALENsC、CRISPR/CasD、Restriction enzymes正确答案：C28、大肠杆菌对于基因克隆的主要作用是:A、表达目的蛋白B、合成引物C、作为宿主D、提供连接酶正确答案：C29、可以自我复制的核酸是:A、mRNAB、rRNAC、tRNAD、miRNA正确答案：B30、在制备重组DNA时,使用琼脂糖的目的是:A、提供营养B、连接DNA段C、物理分离片段D、催化连接反应正确答案：C31、用于分离核酸片段的凝胶包括:A、琼脂糖凝胶B、纤维蛋白凝胶C、丙烯酰胺凝胶D、以上所有正确答案：D32、编码 rRNA 的基因位于:A、线粒体DNAB、质粒DNAC、细胞核DNAD、细胞质DNA正确答案：C33、在PCR反应中,引物与模板的结合温度约为:A、37°CB、55°CC、72°CD、95°C正确答案：B34、在Southern杂交中起探针作用的是:A、DNAB、RNAC、载体D、引物正确答案：A35、下列内切酶与其识别位点不正确匹配的是:A、EcoRI - GAATTCB、BamHI - GGATCCC、HindIII - AAGCTTD、PstI - CTGCAG正确答案：B36、基因敲除实验中所用对照组应为:A、目的基因缺失组B、野生型组C、质粒载体组D、siRNA处理组正确答案：B37、下列不属于PCR反应体系的组成部分是:A、DNA模板B、聚合酶C、dNTPD、琼脂糖正确答案：D38、在PCR反应中起引物作用的分子是:A、脱氧核糖B、Taq酶C、dNTPD、引物正确答案：D39、属于真核生物的模型生物是:A、小鼠B、酵母C、果蝇D、以上所有正确答案：D40、在基因芯片技术中,利用荧光探针可以检测:A、蛋白质表达B、DNA突变C、mRNA表达D、蛋白质结构正确答案：C二、多选题（共30题，每题1分，共30分）1、可以直接转入植物细胞的方法有:A、电穿孔B、农杆菌介导C、生物炮D、微注射E、病毒感染F、质粒转化G、以上ABC均可正确答案：G2、可以改变DNA序列的技术不包括:A、CRISPR/Cas9基因编辑B、ZFNs技术C、TALENs技术D、单链RNA技术E、慢病毒感染转导F、同源重组G、随机诱变正确答案：D3、用于快速扩增特定 DNA 序列的技术是:A、聚合酶链式反应B、印迹杂交C、克隆技术D、基因编辑E、免疫沉淀F、连接酶链式反应G、线性DNA合成正确答案：A4、编码氨基酸的三联密码存在于:A、DNA双链上B、mRNA分子上C、tRNA分子上D、rRNA上E、盖帽RNA上F、启动子区域G、终止子区域正确答案：C5、编码氨基酸序列信息的核酸为:A、DNAB、RNAC、mRNAD、tRNAE、rRNAF、cDNAG、质粒正确答案：C6、下列关于mRNA加工的说法正确的是:A、在细胞核中加帽B、在细胞质中加多聚A尾C、在细胞核中增加内含子D、在细胞质中切除内含子E、在细胞质中加帽F、在细胞核中加尾巴G、在细胞质中进行剪接正确答案：AB7、制备重组DNA的关键步骤包括:A、获取载体质粒B、载体和插入DNA消化C、两DNA段连接D、构建感受态细胞E、转化宿主细胞F、蓝白斑筛选G、所有以上步骤正确答案：G8、可以使细胞产生瘤变的 DNA 片段有:A、激活型原癌基因B、失活型抑癌基因C、缺失型原癌基因D、增强子区域激活E、缺失型抑癌基因F、重复型基因座G、重复型端粒DNA正确答案：ABE9、DNA测序中的Sanger方法基于:A、引物延伸终止B、引物延伸解离C、二代测序D、三代测序技术E、荧光定量PCRF、比较法G、质谱分析正确答案：AB10、参与制备cDNA文库的关键酶类有:A、连接酶B、限制性内切酶C、聚合酶D、反转录酶E、核酸酶F、RNase HG、以上DE正确答案：G11、可以提取基因组DNA的方法有:A、PCR扩增B、Northern印迹C、Southern印迹D、过滤法E、质谱法F、限制性酶切G、盐析法正确答案：CG12、基因表达调控的机制包括:A、转录水平调控B、RNA水平调控C、翻译水平调控D、蛋白活性调控E、基因增幅F、肽链释放G、以上AD均可正确答案：G13、制备重组质粒需要下列步骤:A、载体选择B、消化载体和插入DNAC、连接反应D、感受态细胞制备E、转化宿主细胞F、克隆筛选G、以上全部正确答案：G14、用于快速扩增特定DNA序列的技术是:A、聚合酶链式反应B、基因芯片C、印迹杂交D、连接酶反应E、线性引物延伸F、链置换扩增G、同源重组正确答案：A15、编码mRNA的DNA单链被称为:A、编码链B、上游链C、下游链D、正义链E、反义链F、互补链G、载体链正确答案：E16、启动子通常位于:A、编码区B、翻译终止点下游C、转录终止点下游D、翻译起始点上游E、终止子下游F、转录起始点上游G、基因内含子正确答案：F17、对肿瘤基因组的检测可以应用:A、Southern印迹B、Northern印迹C、Western印迹D、Eastern印迹E、基因检测F、测序G、芯片技术正确答案：AEFG18、制备重组DNA的步骤包括:A、载体选择B、插入DNA获得C、双酶切D、连接反应E、转化F、筛选G、以上全部正确答案：G19、编码氨基酸序列的核酸为:A、rRNAB、mRNAD、mRNA前体E、单链RNAF、双链RNAG、环状RNA正确答案：B20、可以提高基因在异源表达载体中的表达水平的方法不包括:A、引入选择标记B、改良启动子序列C、优化编码序列D、扩增子克隆E、引入变位信号F、优化文库构建方法G、终止子序列调控正确答案：F21、质粒载体应具有下列哪些特征:A、含有克隆位点B、编码病毒蛋白C、大片段插入区D、与宿主互作E、可自主复制F、含有筛选位点G、低拷贝数正确答案：AEF22、制备 cDNA 文库需要哪些关键技术:A、模板 RNA 提取B、反转录C、PCR 扩增D、连接酶反应E、内切酶反应F、克隆载体G、上述 AB正确答案：G23、编码蛋白质的核酸为:B、mRNAC、rRNAD、tRNAE、siRNAF、miRNAG、反转录病毒RNA正确答案：B24、检测mRNA的方法包括:A、Northern杂交B、Western印迹C、Southern印迹D、荧光in situ杂交E、实时定量PCRF、RNA序列表达谱分析G、以上ABDF正确答案：G25、模式生物的研究应用包括:A、遗传学研究B、药物筛选平台C、人类疾病模型D、功能基因组学E、发育生物学F、进化生物学G、所有以上正确答案：G26、基因编辑技术包括:A、ZFNs技术B、TALENs技术C、CRISPR/Cas技术D、基因敲除E、RNAi技术F、慢病毒介导G、以上所有正确答案：ABC27、下列关于DNA的描述错误的是:A、由脱氧核糖组成B、含有腺嘌呤和胞嘧啶C、双链螺旋结构D、含有关键遗传信息E、可以自主复制F、可以直接进行蛋白质转译G、可以经过转录形成RNA正确答案：F28、可以作为核酸探针的分子有:A、单链DNAB、双链DNAC、RNAD、寡核苷酸E、蛋白质F、生物素G、以上除E均可正确答案：ACDF29、基因敲入的技术可以包括:A、siRNAB、基因敲除C、ZFNsD、TALENsE、CRISPR/Cas9F、Cre-Lox重组系统G、反义DNA正确答案：CDEF30、制备重组质粒的主要步骤是:A、载体线性化B、消化插入片段C、连接反应D、感受态细胞制备E、转化宿主细胞F、克隆鉴定G、所有以上步骤正确答案：G三、判断题（共30题，每题1分，共30分）1、启动子与编码区距离越远,转录效率越高。
分子生物学
名词解释1．内含子2．promotor3核小体4．增强子， SNP5．复制子（replicon）6．Polymerase chain reaction(PCR)7．操纵子8．密码子9 后随链冈崎片段10．启动子11．负调控12．基因治疗13．Stop codon14．cDNA文库15．半保留复制填空题1．Oligo(dT)-纤维素可以用来分离纯化真核生物的。
2．大肠杆菌DNA聚合酶Ⅲ的主要活性为方向聚合酶活性和核酸外切酶活性。
3.Avery的肺炎链球菌的转化实验证实转化源为。
4．DNA的复制过程中连续合成的是，不连续合成的是。
3．在核糖体上合成多肽，移位时所需要能量的供给者是。
4．The two DNA chains are held together by hydrogen bonds between pairs of bases; adenine (A)always pairs with and guanine(G)always pairs with 。
5．大肠杆菌RNA聚合酶中提供催化部位的是和。
6．DNA端粒的复制是由酶催化进行的。
7.写出下列简称的中文全称single strand DNA-binding protein（SSB），promotor ，intron 。
8．染色体上的蛋白质包括和。
9．mRNA 3’端通常含有多聚腺苷酸，可以通过用来分离纯化。
10．DNA的复制过程中连续合成的是，不连续合成的是。
11．原核生物的启动子主要包括和。
22．真核生物mRNA的5’端具有结构，3’端具有结构。
13．在蛋白质的合成过程中，分子上的识别mRNA分子上的密码子并与之配对。
9．乳糖操纵子和色氨酸操纵子是两个调控的例子。
cAMP-CAP蛋白通过控制起作用。
7．在真核细胞中，都有一种特别的起始tRNA 识别起始密码子，它携带一种氨基酸，即，作为蛋白质合成的起始氨基酸。
8．蛋白质的生物合成是以_______为模板，以________为原料直接供体，以_______为合成杨所。
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分子生物学-11(总分：100.01，做题时间：90分钟)一、问答题(总题数：20，分数：100.00)1.简述增强子的作用特点。
（分数：5.00）__________________________________________________________________________________________ 正确答案：()解析：①增强子可以发挥远程作用(1～4kb)，增强同一条DNA链上基因转录效率；②增强子作用与其序列的正反方向无关，在基因的上游或下游都能起作用；③增强子对启动子没有严格的专一性，同一增强子可以影响不同类型启动子的转录；④增强子一般具有组织或细胞特异性。
2.什么是沉默子，简述其用特点。
（分数：5.00）__________________________________________________________________________________________ 正确答案：()解析：沉默子是一种抑制基因表达的顺式作用元件。
沉默子可以远程调控基因的转录作用，且无位置和方向依赖性，具有组织特异性。
沉默子可能引起染色质弯曲缠绕，产生异染色质结构，导致基因处于失活状态。
3.真核生物mRNA仅是细胞总RNA的一小部分(质量的3%)左右，解释可能的原因。
（分数：5.00）__________________________________________________________________________________________ 正确答案：()解析：总RNA中还包含大量的rRNA和tRNA，rRNA是核糖体的重要组成部分，一系列的tRNA是翻译必不可少的分子群。
另外，mRNA半衰期只有1～24小时。
因此mRNA的量比其他RNA的量要少。
4.为什么rRNA和tRNA分子比mRNA更稳定?（分数：5.00）__________________________________________________________________________________________ 正确答案：()解析：mRNA以单链形式存在于细胞中，能被特异的单链RNA酶识别并降解。
rRNA和tRNA分子内形成双链，例如tRNA形成三叶草二级结构，并进一步形成L型高级结构，可以保护其免受核酸酶攻击。
另外，rRNA 与核糖体蛋白结合成核糖体，更加稳定。
5.如果突变导致酵母某基因RNA转录物中的5"-AAUAAA-3"顺序变成AACAA，你估计会产生什么影响?（分数：5.00）__________________________________________________________________________________________ 正确答案：()解析：由于AAUAAA是真核mRNA正确切除初始转录3"末端并加接poly(A)的信号序列，它的突变将导致正确的切割和poly(A)的添加受到抑制和阻断。
6.解释RNA聚合酶Ⅰ对放线菌素D尤其敏感的原因。
（分数：5.00）__________________________________________________________________________________________ 正确答案：()解析：放线菌素D(actinomycin D)能够插入到DNA上的GC碱基对之间，导致小沟变宽和扭曲，从而阻止聚合酶的延伸。
由于真核细胞核三种RNA聚合酶催化转录的基因GC含量不同，以rDNA上的GC含量最高，因此，RNA聚合酶Ⅰ对放线菌素D的作用最为敏感。
7.利福平是一种重要的治疗结核病的抗生素。
有些结核杆菌菌株具有抗利福平抗性。
DNA序列分析表明，抗性来源于编码RNA聚合酶β亚基的rpoB基因的点突变，导致β亚基中的一个组氨酸被天冬氨酸所取代。
根据上述现象试分析利福平治疗结核病的可能原因。
（分数：5.00）__________________________________________________________________________________________正确答案：()解析：利福平通过与结核杆菌RNA聚合酶β亚基结合，阻断转录起始，导致菌株死亡，达到治疗效果。
当编码β亚基的基因发生突变，蛋白质产物不再与利福平结合，转录正常，因此产生抗性。
8.放线菌素D能够抑制原核生物的基因转录，却不能用作抗菌药物，试述原因。
（分数：5.00）__________________________________________________________________________________________正确答案：()解析：放线菌素D是一种与DNA双链结合的嵌入试剂，既能抑制DNA复制，又能抑制转录，并且这种抑制作用是无选择性的，对细菌和人的DNA都能结合和抑制，所以不可以用作抗生素。
9.原核基因启动子-10区的一致序列是TATAAT。
已知两个基因A和B具有相似的启动子序列，只是-10区不同，分别为TATAAA和CTATCC。
试比较两个基因的表达水平。
（分数：5.00）__________________________________________________________________________________________正确答案：()解析：基因A的-10区更接近一致序列，表达水平更高；而基因B的-10区含有三个GC配对，难以解链暴露DNA模板，因此转录效率低，表达产物也少。
如图表示两种RNA分子，分子Ⅰ被加工成分子Ⅱ，请回答下面的问题：（分数：5.01）(1).加工过程在什么细胞内什么位置发生?（分数：1.67）__________________________________________________________________________________________正确答案：()解析：细胞核。
(2).分子Ⅰ和Ⅱ分别是什么类型的RNA分子?（分数：1.67）__________________________________________________________________________________________正确答案：()解析：分子Ⅰ为mRNA前体；分子Ⅱ为成熟mRNA。
(3).箭头A～E分别表示什么区域?（分数：1.67）__________________________________________________________________________________________正确答案：()解析：A内含子；B终止子；C帽子结构；D外显子；E poly(A)尾。
10.为什么转录只需要DNA双螺旋链中的一条链?（分数：5.00）__________________________________________________________________________________________正确答案：()解析：DNA双链中只有一条链是模板链，按照碱基互补配对原则指导转录反应，另一条链是编码链，其碱基顺序与转录产物的碱基序列是一致的，只是RNA分子中由U代替DNA分子中的T，不指导转录。
11.含有σ70的大肠杆菌RNA聚合酶识别的某大肠杆菌基因启动子-10区的非模板序列为5"-CATAGT-3"。
回答以下问题并解释原因。
a．若在第一个位置发生的C→T突变是上调突变还是下调突变?b．若在最后位置发生的T→A突变是上调突变还是下调突变?（分数：5.00）__________________________________________________________________________________________正确答案：()解析：该启动子-10区的模板序列为5"-ACTATG-3"a．若发生C→T突变，启动子-10区变为5"-ACTATA-3"，CG配对由2对减少为1对，-10区容易解链，因此是上调突变。
b．若发生T→A突变，启动子-10区变为5"-TCTATG-3"，由于σ70结构域2的2.4亚区的第437位谷氨酸残基和第440位苏氨酸残基均与-10区的5"端T发生特异性接触，促进σ70识别启动子，因此也是上调突变。
12.用大肠杆菌体外转录系统对原核生物的某一基因进行研究时，对其中一份样品加入RNA聚合酶全酶，另一份样品中加入RNA聚合酶核心酶，你预计这两个反应的结果有什么差别，为什么?如何通过实验来鉴定它们?（分数：5.00）__________________________________________________________________________________________正确答案：()解析：不同于RNA聚合酶全酶，核心酶虽然能够催化以DNA为模板合成RNA，但不能在正确的位置起始转录。
所以加入RNA聚合酶核心酶的实验组可能产生多种转录产物。
可以通过DNA酶Ⅰ-足印法鉴定转录起始的序列。
13.为什么在分子生物学中放线菌素D常被用于检测真核生物mRNA的稳定性?（分数：5.00）__________________________________________________________________________________________正确答案：()解析：放线菌素D(actinomycin D)能够插入到DNA上的GC碱基对之间，导致小沟变宽和扭曲，从而阻止RNA聚合酶的延伸。
因此，利用放线菌素D可阻断新的mRNA合成，可被用来研究目的mRNA的稳定性及其降解速率。
14.已知大肠杆菌某一调节基因的DNA全序列，试述如何确定其启动子区?（分数：5.00）__________________________________________________________________________________________正确答案：()解析：取距此基因ATG序列上游100bp，101～200bp等的DNA片段，然后将这些DNA片段分别连接到无lac 启动子的lacZ基因上游，然后通过IPTG诱导，测量半乳糖苷酶的活性来确定启动子区。
15.在原核细胞表达系统大肠杆菌中，满足什么条件的外源基因才可能顺利表达?（分数：5.00）__________________________________________________________________________________________正确答案：()解析：表达的外源片段包含目的基因的开放读码框(ORF)，编码区不能含有内含子，且此片段要位于大肠杆菌启动子的下游，并形成正确的阅读框架；转录出的mRNA必须有与大肠杆菌16S rRNA的3"端相匹配的SD 序列，才能被有效地翻译成蛋白质；蛋白质产物必须稳定，不易被细胞内蛋白酶快速降解，且对宿主无害。