防晒化妆品中15种紫外线吸收剂的检测
防晒化妆品中15种紫外线吸收剂的检测
防晒化妆品中紫外线吸收剂的检测防晒剂即紫吸收剂。
它能吸收紫外线中可引起人产生急性皮炎（红斑）和皮肤灼伤的波长为280～320nn的中波紫外线(即U.V.B)和（或）可使皮肤变黑的波长32～400nn的长波紫紫外线（即U.V.A）。
化妆品中紫外线吸收剂用量过多对皮肤有不利影响，因此，化妆品卫生标准规定了防晒剂的使用量（见附录1中的表5）－、对甲氧肉桂酸乙氧乙酯高效液相色谱法（HPLC）对甲氧肉桂酸乙氧乙酯：（4-甲氧肉桂酸-2-乙氧乙酯，C14H18O4，分子量250.29)是淡黄色透明的粘稠性液体,266Pa时沸点为184～187℃；在水中溶解度为0.05%,在甘油中为0.5%,在丙二醇中约5%,能经任意比例与其它醇类、植物油相混合；吸收波长280～320nm，常作紫外吸收剂。
我国化妆品卫生标准规定最大允许浓度为10%。
1 应用范围本方法适用于化妆品中对甲氧肉桂酸乙氧乙酯的测定。
2 原理样品中的对甲氧肉桂酸乙氧乙酯溶解于四氢呋喃等有机溶剂，有机溶剂提取后用高效液相色谱定性、定量。
3 试剂3.1 四氦呋喃：色谱纯。
(1)3.2 乙腈。
3.3 对甲氧肉桂酸乙氧乙酯标准溶液:精确称取对甲氧肉桂酸乙氧酯0.5g,用少量四氢呋喃溶解,移入100.0ml容量瓶中并定容至刻度。
移取10.0ml置于50.0ml容量瓶中,用四氢呋喃定容至刻度。
此溶液1.00ml含1000?g对甲氧肉桂酸乙氧乙酯。
4 仪器4.1 高效液相色谱仪：具紫外分光光度检测器4.2超声波仪。
5 分析步骤5.1 样品预处理5.1.l 液体、乳液、膏霜(2)：称取约0.1～2.0g(3)样品于50m1离心管中，加20m1四氢呋喃。
用超声波充分溶解混匀后加四氢呋喃至50.0ml。
溶液中有不溶物时离心分离。
取上清液用。
（4）5.1.2 指甲油：称取约1.0g样品(3)于50ml离心管中，加15ml乙腈，搅拌均匀，加水至25.0ml，3000r/min离心10min，或用聚四氟乙烯滤膜过滤，取上清液备用。
液相色谱法测定化妆品中紫外光吸收剂UV-360的含量
液相色谱法测定化妆品中紫外光吸收剂UV-360的含量
张晓芝
【期刊名称】《四川化工》
【年(卷),期】2022(25)5
【摘要】优化高效色谱法测定防晒化妆品中紫外光吸收剂UV-360含量的方法。
采用甲醇对化妆品进行萃取后进行分析测定,C18色谱柱(250mm×4.6 mm,5μm)、二极管阵列检测器(1.00m L/min)、检测波长为280nm,流动相为90%异丙醇。
结果表明,紫外光吸收剂UV-360在0.001mg/L至0.012mg/L的浓度范围呈良好的线性关系,检出限为0.00106mg/L,回收率在100.8%,相对标准偏差(RSD)3.0%。
该方法准确、可靠,可用于防晒化妆品中紫外光吸收剂UV-360的检测。
【总页数】3页(P44-46)
【作者】张晓芝
【作者单位】水利部珠江水利委员会水文局
【正文语种】中文
【中图分类】R28
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气相色谱-串联质谱法测定防晒化妆品中12种紫外线吸收剂
气相色谱-串联质谱法测定防晒化妆品中12种紫外线吸收剂周宝龙【期刊名称】《《理化检验-化学分册》》【年(卷),期】2019(055)009【总页数】6页(P1013-1018)【关键词】溶剂萃取分离; 气相色谱-串联质谱法; 紫外线吸收剂; 防晒化妆品【作者】周宝龙【作者单位】吉林工业职业技术学院吉林132013【正文语种】中文【中图分类】O652.63紫外线吸收剂（UVA）是一类光稳定剂，其光化学稳定、热稳定、价廉易溶，可吸收各类光源中的紫外线（波长为290～400nm），从而减少紫外线对皮肤造成的晒黑、晒伤，被作为防晒剂广泛应用于具有防晒功效的隔离霜、防晒霜等化妆品中［1－3］，但过量使用UVA易引起皮肤过敏或刺激等危害［4－8］。
世界各国对UVA在化妆品中的使用规定差别较大［9］，如欧盟和我国均批准使用对甲氧基肉桂酸异戊酯，而日本则限定其使用；我国批准使用3－亚苄基樟脑，而欧盟禁止其在化妆品中使用。
我国2015年版《化妆品安全技术规范》中规定了化妆品准用27项UVA及其最大允许量，美国规定化妆品中UVA可使用16种，欧盟则多达26种。
目前关于UVA的测定方法主要有薄层色谱法［10］、液相色谱法（LC）［11－13］、气相色谱法（GC）［9，14］、液相色谱－质谱法（LC－MS）［15－16］、气相色谱－质谱法（GC－MS）［17］和气相色谱－串联质谱法（GC－MS／MS）［18］等。
其中薄层色谱法、LC、GC 的灵敏度和准确性较质谱法的差；LC－MS检测仪器昂贵、检测成本高；GC－MS属于单级质谱，易受基质干扰，选择性较差，而GC－MS／MS通过选择特征母离子和子离子形成定量、定性离子对可有效排除基质干扰，选择性强，定性定量准确。
本工作采用二氯甲烷萃取样品中UVA，经DB－5MS色谱柱分离，采用三重四极杆串联质谱在选择反应监测模式下进行测定，拟建立防晒化妆品中12种常见UVA的快速筛查与定量方法，以期为市场监管防晒化妆品中UVA提供测定方法。
防晒化妆品防晒指数(SPF值)检测实验方法
防晒化妆品防晒指数（SPF值）检测实验方法化妆品防晒指数是化妆品护肤效果的一个重要的指标，在化妆品行业使用非常的广泛，而且是过一个很关键的性能指标，关于护肤品的防晒效果一般用专业的防晒指数分析仪检测，这里标准集团（香港）有限公司工程师为您分析一下实验的具体步骤：一、范围本规范规定了对防晒化妆品SPF值的测定方法。
本规范适用于测定防晒化妆品的SPF值。
二、规范性引用文件美国食品和药品管理局（FDA）对防晒产品防晒指数的测定方法。
（Testing Procedure, Federal Register, 21 CFR. Part352.70-73, 1993）三、定义1、紫外线波长短波紫外线(UVC)：200 nm ~ 290 nm中波紫外线(UVB)：290 nm ~ 320 nm长波紫外线(UVA)：320 nm ~ 400 nm2、最小红斑量(Minimal erythema dose MED)：引起皮肤红斑，其范围达到照射点边缘所需要的紫外线照射最低剂量(J/m2) 或最短时间(秒)。
3、防晒指数(Sun protection factor SPF) ：引起被防晒化妆品防护的皮肤产生红斑所需的MED与未被防护的皮肤产生红斑所需的MED之比，为该防晒化妆品的SPF。
可如下表示：四、SPF测定方法1、光源: 日光模拟器氙弧灯作为光源，必须符合下列条件①、可连续产生波长为290nm~400 nm 的紫外线；②、光源输出经滤光片过滤后，波长小于290 nm 的紫外线应低于1%；③、光源输出经滤光片过滤后，波长大于400 nm 的紫外线应低于5%；④、光源应输出稳定，光线均一，所辐射平面上其波动范围应小于10%；2、受试者的选择①、选18~60岁健康志愿受试者，男女均可。
②、既往无光感性疾病史，近期内未使用影响光感性的药物；③、受试者皮肤类型为I、II、III型，即对日光或紫外线照射反应敏感，照射后易出现晒伤而不易出现色素沉着者；④、受试部位的皮肤应无色素沉着、炎症、瘢痕、色素痣、多毛等；⑤、妊娠、哺乳、口服或外用皮质类固醇激素等抗炎药物、或近一个月内曾接受过类似试验者应排除在受试者之外；⑥、按本方法规定每种防晒化妆品的测试人数应在10例以上。
防晒化妆品中5种紫外吸收剂的超高效液相色谱测定法
环境与健康杂志2010年4月第27卷第4期J Environ Health,April 2010,Vol．27,No．4【论著】文章编号：1001-5914（2010）04-0346-03防晒化妆品中5种紫外吸收剂的超高效液相色谱测定法卢晓蕊1，韩仰学2，霍任锋1，沈虹1摘要：目的建立防晒化妆品中2-羟基-4-甲氧基二苯酮、水杨酸苯酯、对二甲基氨基苯甲酸-2-乙基己酯、2，2，4，4-四羟基二苯甲酮、2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮-5-磺酸5种紫外吸收剂同时测定的超高效液相色谱（UPLC ）法。
方法样品以甲醇为溶剂，经超声提取，以乙腈∶水=70∶30（V /V ）为流动相进行分离，流量为0.3ml/min ，检测波长310nm 。
结果在0～25mg/L 的线性范围内，5种紫外吸收剂所得的回归方程均呈较好的线性关系，相关系数>0.999，检出限为4～6mg/L ，最低检出浓度为0.01%～0.015%。
该方法的平均回收率为98.35%～102.75%，RSD 为0.44%～1.73%。
结论该方法简便、准确、快速，适用于同时测定防晒化妆品中5种紫外吸收剂的含量。
关键词：色谱法，液相；化妆品；紫外吸收剂中图分类号：O657.6文献标识码：ADetermination of Five Kinds of Ultraviolet Absorbents in Cosmetics by Ultra Performance Liquid Chromatography LU Xiao -rui ，HAN Yang -xue ，HUO Ren -feng ，et al .Beijing Products Quality Supervision and Inspection Institute ，Beijing 100026，ChinaCorresponding auther ：SHEN Hong ，Tel ：（010）84628245Abstract ：Objective To establish an ultra performance liquid chromatography （UPLC ）method for simultaneous determination of five kinds of ultraviolet absorbents in cosmetics,benzophenone -4and benzophenone -5,etc.Methods The cosmetic samples were extracted with methanol ，using acetonitrile/water=70∶30（V /V ）as mobile phase at the flow rate of 0.3ml/min and detected at the wavelength of 310nm.Results There was a good linear relationship over the range of 0-25mg/L of five ultraviolet absorbents ，r >0.999，the limits of detection of five ultraviolet absorbents were 4to 6mg/L and the minimum detectable concentration was 0.01%-0.015%.The rates of recovery for this method ranged from 98.35%to 102.75%and the relative standard deviations of this method were 0.44%to 1.73%.Conclusion The method is simple ，rapid ，accurate and applicable to simultaneous determination of the five ultraviolet absorbents in cosmetics.Key words:Chromatography ，liquid ；Cosmetics ；Ultraviolet absorbents 作者单位：1.北京市产品质量监督检验所化工产品检测室（北京100026）；2.上海海洋大学水产与生命学院（上海201306）作者简介：卢晓蕊（1983-），女，硕士研究生，从事化妆品检测等方面的研究。
紫外线吸收剂
Ｑ ／ ２ ３ 一１ ９ Ｂ Ｔ ３ ３ ９ ７
ａ ）检测器 ： 紫外检测器 ，１ ｎ 检测波长 ； ３０ ｍ
ｅ 检侧灵敏度：．５ ． ） 。０ ａｕｆｓ； ． ． ｆ 进样量 ：０ ， ） １ｐ Ｌ
６ 分 析步 蕊
６ １ 试样预处理 ．
称取防晒化妆品。５ 于５ ｍ ． ｇ ０ Ｌ小烧杯中， 精确至 ００１ ． ｇ加人混合溶液（． ５ ， ０ ， ３１） ｍ 将小烧杯 ｅ２ Ｌ 固定在超声波清洗器中超声振荡 １＾２ ｍｎ 样品完全分散后将溶液转移至 １０ ５ － ｉ， ０ ０ｍ Ｌ容量瓶中， 用混合 溶液（． 清洗小烧杯三次以上， ３ｌ） ｅ 洗液并人容量瓶中， 稀释至刻度。 样品溶液为乳浊液时， 将部分溶液离 心分离， 取上层清液用样品过旅器和 ０５ ． ｐ ｍ的脂溶性样品过滤膜过滤， 滤液待用。
Ｑ， ｓａ ｌ５７（Ｓ Ｖ ｎ Ｄ ｋ ， Ｅ ｃｌ ０ ＩＰ ａ ｙ ） ｏ
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２５ ．
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水 杨 酸 高 Ｈ（ ｓｌｔ ） ａａｅ ｍｏ 盖醛 水 杨 酸 辛 酷 ２Ｅ ｈ ｌｅ ｙ ｓｌ ｙ ｔ 一 ｔｙｈ ｘ ｌ ａ ｃｌ ｅ ｌ ａ
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四 经 基二 苯 ｂｎｏ ｈ ｎ ｎ ｃｚｐ ｅｏ ｅ 甲酮
Ｑ ／ ２ ３ 一１ ９ Ｂ Ｔ ３ ３ ９ ７
前
言
化妆品中使用的紫外线吸收剂， 能够减少或完全吸收紫外线， 保护皮肤。但如果过量使用或使用禁 用紫外线吸收剂， 则易对皮肤产生刺激， 引起皮肤过敏。 国际上使用萦外线吸收剂有严格的管理和限制， Ｇ ７１－１８《 Ｂ ６－９７化妆品卫生标准》 ９ 也规定了化妆品中允许使用的紫外线吸收剂的种类和限用量。为贯 彻执行卫生标准并和国际上接轨 ， 特制定 了本标准， 用以测定防晒化妆品中的紫外线吸收剂含量 。 本标准是根据不同紫外线吸收剂对液相色谱的相分配不 同， 而被流动相依次洗脱 ， 并能被紫外检测 器检出的原理制定的。
高效液相色谱法同时测定防晒类化妆品中15种紫外线吸收剂
线 吸收 剂 。针 对 《 规 范》 及 文 献 中采 用 的样 品 处 理
及 检测 方法 ， 归纳 起来 主要 存在 以下 几个 问题 ： ａ ． 在 前处 理 过程 中使 用 的 四氢 呋 喃和 高 氯 酸 ， 在 上 机 测
等
据 国内外文 献 报 道 ， 国外 研 究 者近 年 来 的研究
的选 择方 面 ， 《 规范》 及 国 内报 道 ¨ ’ ” 。 。 中 的 研 究 对 象 主 要 集 中 在 甲 氧 基 肉桂 酸 异 戊 酯 、 胡莫 柳 酯 、 水 杨 酸 乙基 己酯 、 丁 基 甲 氧 基 二 苯 甲 酰 基 甲烷 、 苯 基 苯 并 咪唑磺 酸 、 ４ 一 甲基苄 亚 基 樟 脑及 二 苯 酮一 ３ ， 其 使 用 频度 也较 高 ¨ ， 且《 规 范》 也 对 其 在 化 妆 品 中使 用 的 限量值 做 了规定 （ 见表 １ ） ， 少 数 文 献 也 研 究 了 二 乙 氨 基 羟 苯 甲 酰 基 苯 甲 酸 己 酯 及 二 苯 甲 酮 ’ ” ’ ’ 。 二 苯 酮 类 化 合 物 属 于 市 售 化 妆 品 中 易 添 加 的 紫 外 线 吸 收 剂 品 种 ， 虽然 《 规范》 只 针 对其 中 的二 苯 酮一
酮一 １ ０及 二 苯 酮 一 １ ２作 为 研 究 对 象 ， 总 共 囊 括 了 对 氨 基 苯 甲酸 （ Ｐ — ａ ｍｉ ｎ ｏ ｂ ｅ ｎ ｚ ｏ ｉ ｃ ａ ｃ ｉ ｄ， Ｐ ＡＢ Ａ） 及 其 衍 生 物、 水 杨酸酯 （ ｓ ａ ｌ ｉ ｃ ｙ ｌ ａ ｔ ｅ ｓ ） 及其衍生物 、 肉 桂 酸 酯 类 （ ｃ ｉ ｎ ｎ ａ ｍａ ｔ ｅ ｓ ） 、 二 苯 甲酮 类 化 合 物 （ ｂ ｅ ｎ ｚ ｏ ｐ ｈ ｅ — ｎ ｏ ｎ ｅ ｓ ） 、 邻 氨 基 苯 甲酸 酯 （ ａ ｎ ｔ ｈ ｒ ａ ｎ ｉ ｌ ａ ｔ ｅ ） 及 其 衍 生
高效液相色谱法同时测定防晒类化妆品中15种紫外线吸收剂
高效液相色谱法同时测定防晒类化妆品中15种紫外线吸收剂孟宪双;马强;白桦;张庆;吕庆【摘要】An analytical method for the simultaneous determination of fifteen ultraviolet( UV) filters in sunscreen cosmetics was developed by high performance liquid chromatography ( HPLC ). Various cosmetic samples including lotions, emulsions, creams and waxes were firstly mixed thoroughly by adding tetrahydrofuran containing 2 g/L ammonium hydroxide followed by vortex and oscillation. If the wax samples were still homogenized incompletely,a ultrasonic oscillation protocol with heating to 50 ℃ was adopted. The homogeneous samples were then ultrasonically extracted by 80% aqueous methanol solution. After centrifugation and micropore filtration,the extracted components were separated on an XTerra MS C 18 column with gradient elution by water containing 0.1%( v/v ) formic acid and methanol containing 0. 1%( v/v)formicacid,determined by a diode array detector( DAD)at 280 nm and 311 nm, and quantified using external standard method. Optimization for the pretreatment conditions of different matrices of cosmetics including sample dispersion solvents,extraction solvents and time were carried out. This developed method showed good linearity( r2≥0. 999 1)and the limits of quantification( LOQs)were between 1. 2 and 5. 1 μg/g. T he recoveries of the fifteen compounds ranged from 84. 2% to 100. 7% at three spiked levels with the relative standard devi-ations( RSDs)between 0. 9% and 9. 5%. The analytes were well separated and this analytical method proved tobe sensitive and accurate,so it can be used in the practical determinationof the fifteen UV filters in commercial sunscreen cosmetics.%建立了一种反相高效液相色谱同时测定防晒类化妆品中15种紫外线吸收剂的分析方法。
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防晒化妆品中紫外线吸收剂的检测防晒剂即紫吸收剂。
它能吸收紫外线中可引起人产生急性皮炎（红斑）和皮肤灼伤的波长为280～320nn的中波紫外线(即U.V.B)和（或）可使皮肤变黑的波长32～400nn的长波紫紫外线（即U.V.A）。
化妆品中紫外线吸收剂用量过多对皮肤有不利影响，因此，化妆品卫生标准规定了防晒剂的使用量（见附录1中的表5）－、对甲氧肉桂酸乙氧乙酯高效液相色谱法（HPLC）对甲氧肉桂酸乙氧乙酯：（4-甲氧肉桂酸-2-乙氧乙酯，C14H18O4，分子量250.29)是淡黄色透明的粘稠性液体,266Pa时沸点为184～187℃；在水中溶解度为0.05%,在甘油中为0.5%,在丙二醇中约5%,能经任意比例与其它醇类、植物油相混合；吸收波长280～320nm，常作紫外吸收剂。
我国化妆品卫生标准规定最大允许浓度为10%。
1 应用范围本方法适用于化妆品中对甲氧肉桂酸乙氧乙酯的测定。
2 原理样品中的对甲氧肉桂酸乙氧乙酯溶解于四氢呋喃等有机溶剂，有机溶剂提取后用高效液相色谱定性、定量。
3 试剂3.1 四氦呋喃：色谱纯。
(1)3.2 乙腈。
3.3 对甲氧肉桂酸乙氧乙酯标准溶液:精确称取对甲氧肉桂酸乙氧酯0.5g,用少量四氢呋喃溶解,移入100.0ml容量瓶中并定容至刻度。
移取10.0ml置于50.0ml容量瓶中,用四氢呋喃定容至刻度。
此溶液1.00ml含1000?g对甲氧肉桂酸乙氧乙酯。
4 仪器4.1 高效液相色谱仪：具紫外分光光度检测器4.2超声波仪。
5 分析步骤5.1 样品预处理5.1.l 液体、乳液、膏霜(2)：称取约0.1～2.0g(3)样品于50m1离心管中，加20m1四氢呋喃。
用超声波充分溶解混匀后加四氢呋喃至50.0ml。
溶液中有不溶物时离心分离。
取上清液用。
（4）5.1.2 指甲油：称取约1.0g样品(3)于50ml离心管中，加15ml乙腈，搅拌均匀，加水至25.0ml，3000r/min离心10min，或用聚四氟乙烯滤膜过滤，取上清液备用。
(4)(5)5.2 色谱条件色谱柱：碳十八结合硅胶（4.0mm id×250mm）。
(6)流动相：乙腈+水（6＋4）。
(7)流速：1.0m1／min。
检测器波长：310nm。
5.3测定5.3.1 定性取标准溶液2.0ml，加四氢呋喃稀释至50.0m1，取5µl注入HPLC，求出保留时间，取样品溶液5?l 同样操作，以保留时间进行比较和定性。
（8）5.3.2 定量移取标准溶液用四氢呋喃稀释，配制成1ml相当于0.0、20.0、40.0、60.0、80.0?g的标准系列，依次取5µl注入HPLC，绘制浓度-峰高（或峰面积）标准曲线。
取样品溶液5?l注入HPIC，记录峰高或峰面积，从标准曲线查出对应的对甲氧肉桂酸乙氧乙酯的含量A（µg/m1）。
6 计算c=A×V/m×1/1000式中：c一一对甲氧基肉桂酸乙酸乙酯含量，%；A一－由标准曲线查出的样液中对甲氧基肉桂酸乙氧乙酯含量，µg／ml；V－一样品溶液总体积，m1；m――样品质量，g。
注解：（1）四氢呋喃中常常加入抗氧化剂，必须采用色谱纯试剂。
（2）乳液、膏霜指防晒油、擦手香酯、夜霜等。
（3）称取的样品量根据对甲氧肉桂酸乙氧乙酯含量来决定，应含1～4mg 。
（4）样液中若仍有不溶物，用聚四氟乙烯滤膜（5?m ）过滤。
（5）指甲油的预处理方法除用乙腈外，还可用下法：即取苯或醚10ml ，水20ml 与样品充分混合，离心分离（3000r/min ） 10min ，或静置分层后，取苯或醚层，将有机相挥干，用乙腈稀释至一定体积备用。
（6）常用的色谱柱还有TSK 凝胶柱LS4l0及等效物。
（7）流动相乙腈和水的比例范围在7＋3～l ＋1之间都可得到良好的分离。
（8）用本法测定时，对甲氧肉桂酸乙氧乙酯的保留时间是10min ，能与其同分异构体完全分离。
以对甲氧肉桂酸乙氧乙酯的相对保留时间作为 1.00时，2-乙基己基-对2-甲基胺基苯甲酸酯（ESOALOL 507）是8.47，2-乙基己基对甲氧肉桂酸酯是8.94，同时和其它紫外吸收剂也能完全分离。
二、羟苯甲酮高效液相色谱法（HPLC ）羟苯甲酮即2-羟-4甲氧二苯甲酮。
（oxybenzone ，2-hydroxy-4-methoxybenzo phenone C 14H 12O 3,228.25）是微黄色结晶粉末，熔点66℃（Merek Index ），60～66℃（化妆品原料标准Ⅱ）在100g 不同溶媒中溶解的克数分别为：水0.O ，95％乙醇5.85，正己烷4.36，苯56.2，二甲苯44.3，二硫化碳30.0，四氯化碳34.5。
羟苯甲酮的最大吸收波长（0.001％乙醇溶液）为242±4nm， 288±4nm， 325±14nm,在化妆品中用作紫外线吸收剂。
我国化妆品卫生标准规定的最大允许浓度为10％。
1 应用范围本方法适用于不同类型化妆品中羟苯甲酮的测定。
2 原理用有机溶剂提取化妆品中的羟苯甲酮，用高效液相色谱进行测定，以保留时间定性，以标准峰高（或峰面积）进行定量。
3 试剂3.1 四氢呋喃：色谱纯。
(1)3.2 羟苯甲酮标准溶液：精确称取羟苯甲酮0.25g，加少量四氢呋喃溶解，移置于100ml容量瓶中。
加四氢呋喃定容至刻度。
移取5.0ml置于50.0ml容量瓶中，用四氢呋喃定容至刻度。
此液1.0ml含250?g羟苯甲酮。
4 仪器4.1 高效液相色谱仪：具紫外分光检测器。
4.2 超声波仪。
5 分析步骤5.1 样品预处理5.1.1 液体、乳状样品：准确称取约0.1～2.5g(2)样品于50m1离心管中，加四氢呋喃40. 0ml，用超声波仪分散或溶解，加四氢呋喃至50ml，如样液混浊离心分离，取上清液备用。
5.1.2 指甲油：称取约1. 0g(3)样品，置于离心管中，加四氢呋喃5.0ml经超声波仪超声提取后，加氯仿至20ml，3000r／min离心10min，取上清液备用。
5.2 色谱条件（5?m）。
(4)色谱柱：不锈钢填充柱（4.6mm id×25Onm）填充C8流动相：甲醇+四氢呋喃+水+60％过氯酸（50＋20＋30＋0.15）。
(5)流速，1.0m1／min。
检测器：紫外吸收检测器，波长288nm。
5.3 测定5.3.1 定性吸取6.0ml标准溶液置于50.0ml容量瓶中,加四氢呋喃定容至刻度，取5µl注入HPLC，求出保留时间。
取5µl样品待测溶液注入HPLC，求出保留时间，与标准保留时间,与标准保留时间比较进行定性。
(6,7)5.3.2 定量配制每毫升含羟甲氧基苯酮0.0、10.0、20.0、30.0、40.0、50.0?g的标准系列，分别取5µl注入HPLC。
绘制峰高（或峰面积）-浓度标准曲线，取样品待测溶液5µl注入HPLC，以标准曲线查出样品溶液中的羟苯甲酮含量（?g/ml）。
6 计算c%=A×V/m×1/10000式中：c－一羟苯甲酮含量，%；A――以标准曲线查出的样品溶液中羟苯甲酮含量，µg/m1；V一－样品溶液稀释的总体积，m1；m一一样品质量，g。
注解：（1）一般在四氢呋喃中加入了微量的抗氧化剂，故要使用色谱纯的四氢呋喃。
（2）进行样品预处理时，称取的样品质量应含0.5～2.5mg羟苯甲酮。
（3）称取指甲油时，由于样品中的溶媒易挥发，称取操作应敏捷。
色谱柱（Macherey Nagel （4）可用Lichrosorh RP-18色谱柱（E.Merck公司制品）或Nueleosil C18公司制品）。
（5）如用乙腈+水（7+3）作流动相，不能将ESCA LOL 506紫外吸收剂与羟甲氧基苯酮分离。
（6）本方法选择的仪器条件，羟苯甲酮与其它异构体分离良好，羟苯甲酮的相对保留时间为1.00时，其它异构体的相对保留时间如下：2-羟基-4甲氧基二苯甲酚-5磺酸是0. 48，2-羟基二苯甲酮是0.72，2，2′羟基二苯甲酮是0.75，2，2′，4，4′-四羟基二苯甲酮是0.56，2，2′羟基4，4′甲氧苯酮是0.89。
三、水杨酸高盖酯等14种防晒剂反相高效液相色谱法防晒化妆品的组分含有紫外线吸收剂。
常用的紫外线吸收剂为水杨酸、对氨基苯甲酸、肉桂酸、二苯甲酮等的衍生物。
此外，为了完全防止紫外线，防晒化妆品中还加有能使紫外线散乱起到遮蔽作用的无机覆盖剂，如氧化锌、氧化钛、滑石粉、高岭土等，我国化妆品卫生标准GB 7916一87对紫外线吸收剂的使用量做了限制。
本法使用高效液相色谱，一次进样同时测定2，4-二羟基二苯甲酮等14种紫外吸收剂，分离效果好。
本法简单、快速、灵敏、实用。
1 应用范围本法适用于防晒化妆品中紫外线吸收剂的检测，可检测14种紫外线吸收剂，其最低检测量见表2-3-27。
表2-3-27紫外吸收剂及化妆品卫生标准（GB 9716-87）中规定的化妆品中最大允许浓度此序号为化妆品卫生标准(GB 7916-87)中表5的序号,5-11即表5中的序号11。
2 原理化妆品中各种紫外吸收化合物由于其结构上的差异可被反相高效液相色谱分离。
根据其保留时间及其紫外可见吸收光谱进行定性；峰面积进行定量。
3 试剂3.1 甲醇:色谱级。
3.1 乙腈:色谱级。
3.3 紫外吸收剂贮备液:取表2-3-27紫外线吸收化合物各0.1000g,用甲醇溶解并定容至100.0ml。
浓度为1.00mg/ml。
紫外吸收剂标准溶液：取上述紫外吸收贮备液10.0ml,用甲醇定容至100ml,浓度为0.10mg/ml。
3.4 高氯酸:分析纯。
3.5 高氯酸钠:分析纯。
3.6 硫酸:分析纯。
3.7 水、去离子水及二次重蒸水。
所有溶剂和溶液在进行HPLC分析前都经0.45?m的微孔滤膜过滤及真空脱气。
4 仪器4.1 高效液相色谱仪：Varian 5000型（Z?g，Switzerland）。
4.2 检测器：Varian polychrom 9060型二极管珍列阵检测器。
4.3 积分仪：Varian 4290型。
4.4 微量进样器：10?l。
5 分析步骤（1）5.1 称取1g防晒化妆品于离心管中，加0.25ml 2mol/L硫酸和10ml甲醇,30℃恒温超声水浴30min，然后以900r/min离心10min，提取上清液；残留物按上述方法重新萃取一次，合并二次萃取液，用甲醇定容至25ml。
5.2色谱条件5.2.1色谱柱：Lichrosorb RP-18 柱（250mm×4.6mm id.，10?m，Merck，Darmstadt，F.R.G.）。